Uriini metaboloomika paljastab naissoost ME/CFS-patsientide anomaalse taastumise pärast maksimaalset pingutust, 2. osa

Miks me oleme väsinud? Kuidas saame väsimusprobleeme lahendada?

【Kontakt】E-post: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

2.4. Raja topoloogia analüüs tõstab esile muutunud süsivesikute ja aminohapete metabolismi treeningu tulemusena

Erinevusi ME/CFS ja kontrollsubjektide vahel metaboolsete radade tasemel hinnati, kasutades Metaboanalyst 5.0 veebitööriista radade analüüsi moodulit (www. metaboanalyst.ca, juurdepääs 14. detsembril 2{{1{{12} }}}22), mis ühendab kvantitatiivse rikastamise analüüsi ja raja topoloogia analüüsi. Kokku kaasati sellesse analüüsi 453 734-st teadaolevast ühendist 1154 analüüsitud ühendist inimese ainevahetuse andmebaasi (HMDB) ID sobitamise piirangute tõttu. See analüüs viidi iga võrdluse jaoks läbi kaks korda, kasutades radade määratlemiseks Kyoto geenide ja genoomide entsüklopeediat (KEGG) ja seejärel väikese molekuli raja andmebaasi (SMPDB) inimese võrdlusmetaboloomid. Kvantitatiivses rikastamise analüüsis kasutatakse kahe rühma võrdlemiseks globaalset testi, mis kasutab logistilise regressiooni meetodit, et testida, kas rajal olevad metaboliidid aitavad parandada proovide klassifitseerimist ME/CFS-iks või kontrolliks, nullhüpoteesiga, et metaboliiti ei ole. rajal on kummaski rühmas erinev kontsentratsioon [31,32]. Selle testi p-väärtusi kohandatakse mitme võrdluse jaoks, kasutades BH protseduuri, kusjuures olulisuse lävi on q < 0.2. See lävi valiti selleks, et võimaldada potentsiaalselt huvitavate leidude ülevaatamist, võttes arvesse valimi väikest suurust, tagades samal ajal, et kõigi oluliste radade p < 0,05. See analüüs erineb ülaltoodud ChemRICH rikastamise analüüsist selle poolest, et see võimaldab kattumist, nii et mitmel rajal võivad olla samad võtmeühendid. Võtmeühendite hindamisel teatame ka nende olulisusest üksikute ühenditena LMM-is, kus kasutasime rangemat piiri (q <0, 1). Topoloogiaanalüüsi tulemuseks on mõjuskoor vahemikus 0 kuni 1. See skoor tuletatakse metaboliitide sõlmede tähtsuse väärtustest, mis on arvutatud suhtelise vahelise tsentraalsuse mõõtmise abil, mis seejärel normaliseeritakse nii, et iga raja maksimaalne tähtsus on 1. Mõju skoor on raja iga sobiva metaboliidi sõlme tähtsuse mõõtmete summa.

Cistanche võib toimida väsimuse ja vastupidavuse suurendajana ning eksperimentaalsed uuringud on näidanud, et Cistanche tubulosa keetmine võib tõhusalt kaitsta kaaluga ujumishiirte kahjustatud maksa hepatotsüüte ja endoteelirakke, reguleerida NOS3 ekspressiooni ja soodustada maksa glükogeeni tootmist. sünteesi, avaldades seega väsimusevastast toimet. Fenüületanoidglükosiidide rikas Cistanche tubulosa ekstrakt võib märkimisväärselt vähendada seerumi kreatiinkinaasi, laktaadi dehüdrogenaasi ja laktaadi taset ning tõsta hemoglobiini (HB) ja glükoosi taset ICR hiirtel ning see võib mängida väsimusevastast rolli, vähendades lihaskahjustusi. ja piimhappega rikastamise edasilükkamine energia salvestamiseks hiirtel. Ühendi Cistanche Tubulosa tabletid pikendasid märkimisväärselt raskust kandvat ujumisaega, suurendasid maksa glükogeenivaru ja vähendasid seerumi uurea taset pärast treeningut hiirtel, näidates selle väsimusevastast toimet. Cistanchise keetmine võib parandada hiirte vastupidavust ja kiirendada väsimuse kaotamist, samuti võib seerumi kreatiinkinaasi taseme tõusu pärast koormust vähendada ja hoida hiirte skeletilihaste ultrastruktuuri pärast treeningut normaalsena, mis näitab, et sellel on mõju. füüsilise jõu suurendamiseks ja väsimuse vastu võitlemiseks. Cistanchis pikendas ka märkimisväärselt nitritiga mürgitatud hiirte elulemusaega ja suurendas tolerantsust hüpoksia ja väsimuse vastu.

Klõpsake kroonilise väsimuse sündroomil

Jällegi ei olnud ME/CFS-i ja kontrollrühmades algtasemel uriini metaboliitide vahel olulisi erinevusi. Võrreldes aga ME/CFS-i patsiente ja kontrolle treeningujärgsel ajahetkel ning muutust ajas, kasutades katsealuse treeningjärgset/algtaseme muutust, oli mõlemal mitu oluliselt muutunud metaboolset rada (joonis 4).

24 tundi pärast treeningut oli ME/CFS-patsientidel võrreldes kontrolliga oluliselt muutunud seitse SMPDB-s ja üks KEGG-i rada (joonis 4A, q < 0.2). Viis kaheksast oluliselt muutunud rajast on seotud suhkru metabolismiga, mis on seotud energia tootmisega. Fruktoos on kõigi suhkru metabolismiga seotud radade võtmeühend, mille p < 0.01 LMM-is, kui võrrelda ME/CFS-i patsiente ja kontrolle pärast treeningut; kuid fruktoos ei ole ühemõõtmelises analüüsis pärast mitmekordse võrdluse korrigeerimist oluline. Kõrgeimate mõjuskooridega teed on katehhoolamiini biosüntees, millele järgneb türosiini metabolism. Mõlemal rajal on võtmeühendina dehüdroaskorbaat (p < 0,01), kuid see ühend ei ole pärast FDR-i korrigeerimist LMM-is oluline. Türosiini metabolismi jaoks on askorbaat (C-vitamiin) (p < 0,01) täiendav võtmeühend, kuid see ei ole oluline ka pärast FDR-i korrigeerimist.

Kümnel KEGG andmebaasis oleval rajal oli ME/CFS-patsientidel võrreldes kontrollrühmaga oluliselt erinev treeningjärgne/algtaseme suhe, mis näitab, et need muutuvad aja jooksul erinevalt (joonis 4B, q < 0.2). Neli suurima mõjuga rada on kõik seotud aminohapete metabolismiga: arginiini ja proliini metabolism, tsüsteiini ja metioniini metabolism, lüsiini lagunemine ja aminoatsüül-tRNA biosüntees. Kõik proteinogeensed aminohapped on seotud aminoatsüül-tRNA biosünteesi rajaga, seega on mõistlik, et rada on oluliselt mõjutatud, kuna mitmed neist aminohapetest on selles võrdluses oluliselt erinevad (vt lisajoonis S2). KEGG arginiini ja proliini metabolismi raja puhul on proliin ainus ühend, mis on samuti oluline LMM-is (q < 0.1) ja millel on ka üks kõrgemaid tähtsuse skoore.

Tsüsteiin muutub pärast treeningut ME/CFS-iga patsientidel võrreldes LMM-mudeli kontrollrühmaga erinevalt (q < {0}}.1) ning on KEGG-i tsüsteiini ja metioniini metabolismi ning pantotenaadi ja koensüümi metabolismi võtmeühend. A (CoA) biosüntees. CoA on üldlevinud kofaktor, mis on vajalik rasvhapete metabolismi ja trikarboksüülhappe (TCA) tsükli jaoks. Selle biosüntees nõuab tsüsteiini, mis on ainulaadne aminohape, kuna see on ainus, mis sisaldab tioolrühma. Valiin osaleb ka oluliselt muutunud pantotenaadi ja koensüüm A (CoA) biosünteesi rajas ning selle q < 0,1 LMM-is.

Selle võrdluse kõige olulisem viis oli eetri lipiidide metabolism, kuid sellel oli madal mõjuskoor. Kuigi selle rajaga sobitati ainult kaks meie tuvastatud metaboliiti, on need mõlemad olulised LMM-is, mille q < {0}}.1: glütserofosfoetanoolamiin ja glütserofosforüülkoliin (GPC) (mõlemad liigitas Metabolon® fosfolipiidide metabolismiks , vt lisajoonist S2). Puriini metabolism oli samuti väga oluline, võtmeühendiks oli adenosiin 30, 50 -tsükliline monofosfaat (cAMP) (q < 0,1 LMM-is).

2.5. Atsüülglütsiinidel on ME/CFS-i patsientide uriinis madalam kontsentratsioon võrreldes kontrollrühmaga 24 tundi pärast treeningut

Ühemõõtmelistes LMM-analüüsides (q < 0.1) olid treeningujärgsel ajahetkel ME/CFS-is võrreldes kontrollsubjektidega oluliselt madalama kontsentratsiooniga metaboliiti 3- hüdroksüoktanoüülglütsiin, heksanoüülglütsiin (C6). ), 2-oktenoüülglütsiin ja tundmatu X-24334. Kõik kolm tuntud ühendit kuuluvad atsüülglütsiini rasvhapete metabolismi Metabolon® alamrajale. Joonisel 5A olev soojuskaart näitab nende metaboliitide osmolaalsusega normaliseeritud kontsentratsiooni pärast treeningut iga katsealuse kohta. Kasutades aglomeratiivset hierarhilist rühmitamist, rühmitati katsealused kolme rühma: (1) kuus kontrollsubjekti, (2) kaks kontrollsubjekti ja üks ME/CFS subjekt ning (3) ülejäänud üheksa ME/CFS subjekti. Kontrollsubjektide klastris on kõigi nelja metaboliidi puhul valdavalt kõrgemad kontsentratsioonid, samas kui ME/CFS-i subjektide klastris on kõigi nelja metaboliidi puhul madalamad kontsentratsioonid. Mõlema rühma subjektidega väike klaster näitab vahepealseid väärtusi. Joonisel fig 5B kujutatud kastdiagrammid näitavad nende metaboliitide minimaalset kattumist ME/CFS ja kontrollrühmade vahel. Nendest neljast metaboliidist muutub ainult X{14}} aja jooksul oluliselt erinevalt ka LMM-i patsientide ja ME/CFS-i patsientide vahel ning kontrollrühmas suureneb pärast treeningut.

2.6. Metaboliidid, mis muutuvad füüsilise taastumise ajal ME/CFS-i patsientidel võrreldes kontrolliga patsientidel erinevalt, on valdavalt aminohapped ja lipiidid

Kõige enam muudetud ühenditega superrajad on aminohapped ja lipiidid, kui võtta arvesse 110 ühendit, millel on märkimisväärne interaktsioon (q < 0,1) haigusseisundi (ME/CFS vs. kontroll) ja aja (alustase vs. pärast treeningut) (täiendav joonis S2). Joonisel 6 on näidatud andmed iga katsealuse kohta mõlemas rühmas nii algtasemel kui ka pärast treeningut oluliselt muutunud ühendite kohta mitmetes aminohapete alamradades (joonis 6A–D). Joonisel 7 on näidatud andmed kõigi katsealuste kohta nii algtasemel kui ka pärast treeningut valitud lipiidide alamradade oluliselt muutunud ühendite kohta (joonis 7A, B). Selle joonise jaoks ühendasime kolm atsüülkarnitiini rasvhapete metabolismis osalevat alarada (dikarboksülaat, hüdroksü ja keskmise ahelaga) ja neli steroidide alamrada (androgeenne, kortiko-, pregnenoloon ja progestiin). Kõik joonistel 6 ja 7 näidatud ühendid suurenevad märkimisväärselt ka uriinis pärast treeningut võrreldes algtasemega istuva eluviisiga kontrollide puhul.

Neli ühendit uurea tsüklis; arginiini ja proliini metabolismi alarada muutub pärast treeningut ME/CFS-i patsientidel ja kontrollidel erinevalt: karboksümetüülarginiin, proliin, sümmeetriline dimetüülarginiin (SDMA) ja dimetüülarginiin (ADMA) (joonis 6A). Proliin on kollageeni ehitusplokk ja seetõttu sidekoe põhikomponent. SDMA ja ADMA on mõlemad lämmastikoksiidi (NO) tootmise regulaatorid ja konkureerivad inhibiitorid. NO aitab tervetel inimestel säilitada veresooni [33] ja vähenenud NO tootmist seostatakse endoteeli düsfunktsiooni ja südame-veresoonkonna haigustega [34]. ADMA-d saab eemaldada uriiniga eritumisel või see võib maksas laguneda [35]. SDMA ja ADMA suurenenud eritumine kontrollrühmades, kuid mitte patsientidel pärast treeningut, viitab sellele, et kontrollrühmad võivad eemaldada liigseid NO süntaasi inhibiitoreid, et säilitada veresoonte homöostaasi ja et see kasulik kohanemine pingutusega patsientidel ei pruugi toimuda. NO ja ME/CFS vaheline seos on ebaselge; Leiti, et ME/CFS-i subjektide plasma indutseerib in vitro endoteelirakkudes vähem NO tootmist [36], kuid pole teada, kas see oli tingitud ADMA või SDMA kõrgematest tasemetest ME/CFS-i plasmas, kuna need olid. selles uuringus ei mõõdetud ja NO regulatsioon on keeruline.

Kolm ühendit metioniini, tsüsteiini, S-adenosüülmetioniini (SAM) ja tauriini alamrajas on oluliselt muutunud: metioniinsulfoon, tsüsteiin ja s-metüültsüsteiinsulfoksiid (joonis 6B). Tsüsteiin on ainulaadne aminohape, kuna see sisaldab tioolrühma ja võib osaleda redoksreaktsioonides [37]. Tsüsteiini saab muundada ka püruvaadiks, mis on TCA tsükli alguspunkt.

Polüamiini metabolismi alarajal on viis oluliselt erinevat metaboliiti: asicoga, (N(1)+N(8))-atsetüülspermidiin, diatsetüülspermidiin, N1, N12-diatsetüülspermiin ja N-atsetüülisoputreaniin (joonis 6C). Polüamiinidel on palju erinevaid bioloogilisi funktsioone ja nad osalevad rakkude proliferatsioonis, diferentseerumises ja apoptoosis [38]. Polüamiinide sisalduse suurenemine on osa normaalsest reaktsioonist stressoritele, sealhulgas treeningule [39].

Leutsiini, isoleutsiini ja valiini metabolismi alarajal on ka viis oluliselt muutunud metaboliiti: 3-metüülglutarüülkarnitiin, tiglüülkarnitiin, valiin, beeta-hüdroksüisovaleraat ja beeta-hüdroksüisovalerüülkarnitiin (joonis 6D). Leutsiin, isoleutsiin ja valiin on hargahela aminohapped (BCAA). Need asendamatud aminohapped soodustavad valgu anabolismi inimese lihastes, mis aitab pärast treeningut lihaseid üles ehitada [40]. Kolme BCAA katabolism viib energia metabolismi radadeni ja valiin on glükogeenne, mis tähendab, et see muundatakse glükoosi prekursoriteks, mis võivad siseneda TCA tsüklisse. Kui enamik aminohappeid kataboliseeritakse maksas, siis BCAA-d kataboliseeritakse enamasti teistes kudedes, sealhulgas skeletilihastes, ajus, neerudes ja rasvkoes [41]. Isoleutsiin on nii glükogeenne kui ka ketogeenne ning leutsiin on ketogeenne. Need oluliselt erinevad metaboliidid tekivad kõigi kolme BCAA katabolismi käigus. 3-metüülglutarüülkarnitiini, samuti 3-hüdroksüheksanoüülkarnitiini (mille Metabolon® liigitab atsüülkarnitiiniks, vt joonis 7A), toodetakse leutsiini muundamisel atsetüül-CoA-ks ja atsetoatsetaadiks. Isoleutsiini lagunemisel atsetüül-CoA-ks või propionüül-CoA-ks toodetakse tiglüülkarnitiini kahes erinevas etapis. Beeta-hüdroksüisovaleraati toodetakse valiini lagunemisraja kolmes erinevas etapis.

Viis oluliselt muutunud ühendit ME/CFS-i patsientide ja kontrollide vahel on seotud atsüülkarnitiini rasvhapete metabolismiga: pimeloüülkarnitiin/3-metüüladipoüülkarnitiin, 3- hüdroksüheksanoüülkarnitiin, heksanoüülkarnitiin, suberoüülkarnitiin ja 3-hüdroksütoksitaan Joonis 7A). Atsüülkarnitiinid mängivad võtmerolli pika ahelaga rasvhapete oksüdatsioonis, mis on aeroobse treeningu ajal energia metabolismi peamine viis [42].

Viis oluliselt muudetud ühendit on klassifitseeritud steroidideks (joonis 7B). 11- ketoetiokolanoloonglükuroniid on androgeenne steroid. 3alfa, 21-dihüdroksü-5betapregnaan-11, 20-dioon-21-glükuroniid ja kortoloonglükuroniid on kortikosteroidid. 17-alfahüdroksüpregnanoloonglükuroniid on pregnenolooni steroid. pregnanediool-3-glükuroniid on progestiini steroid. Glükuroniidid toodetakse maksas, et aidata kaasa ainete eritumisele, muutes need vees paremini lahustuvaks. Kortikosteroidid toimivad signaalmolekulidena mitmesugustes protsessides, sealhulgas valkude katabolismi soodustamine treeningu või muude stressitekitajate [43] ajal, põletikuvastaste reaktsioonide vahendamine [43] ning tervisliku soola- ja vedelikutaseme säilitamine [44]. Muutunud kortikosteroidide metabolism võib kaasa aidata ortostaatilise talumatuse tekkele, mis on teine ​​ME / CFS-i sümptom. Progestiini steroide, androgeenseid steroide ja kortikosteroide leiti naissoost ME/CFS patsientide plasmas ka madalamates kontsentratsioonides kui teises uuringus, kuigi selles uuringus uuriti ainult algtasemeid [11].

2.7. Samad metaboliidid uriinis ja plasmas on tihedalt seotud

Meie rühm avaldas varem nende samade subjektide plasma metaboloomika andmed [25]. Need katsealused läbisid täieliku kahepäevase CPET-protokolli ja koos uriini kogumisega võeti igalt katsealuselt verd neljal ajahetkel: algtase (P1), 15–3{{40}} min pärast CPET-i. (P2), 24 tundi pärast CPET-i (P3) ja 15–30 min pärast teist CPET-i (P4), mis viidi läbi 24 tundi pärast esimest CPET-i (joonis 1A punktis [25]). Metabolon® platvormide abil tuvastatud 1403 uriini metaboliidist ja 1157 plasma metaboliidist mõõdeti 727 ühendit nii uriinis kui plasmas. Uriini ja plasma metaboloomide vahelist seost ning treeningu mõju sellele suhtele hinnati, arvutades Pearsoni korrelatsioonikoefitsiendid®) iga metaboliidi uriini ja plasma andmekogumite vahel kõigis võimalikes ajapunktide ja ajapunktide suhte kombinatsioonides (täiendav fail). S3). Ajapunktide puhul otsustasime keskenduda sama päeva uriini ja plasma kombinatsioonidele (algtaseme uriin (U1) P1 ja P2-ga ning treeningujärgne uriin (U3) P3 ja P4-ga). Samuti uurisime korrelatsioone treeningujärgse ja algtaseme suhte vahel uriinis (U3/U1) ja kolme erineva treeningjärgse suhte vahel plasmas (P4/P1, P3/P2, P3/P1), et uurida, kuidas metaboliitide tase muutus 24 h taastumisperiood uriinis vs plasma. P-väärtused arvutati iga korrelatsiooni jaoks, kasutades t-testi nullhüpoteesiga R=0 (BH FDR korrektsioon, q < 0,15). Tugevate korrelatsioonide arv, mille me määratlesime kui R > 0, 7 või R < -0, 7, moodustab ajapunktide korrelatsioone vaadates ligikaudu 40% 727 metaboliidist (joonis 8). Eelkõige on kõigi ajapunktide paaride puhul uriini ja plasma vahel väga vähe tugevat negatiivset korrelatsiooni. Suhtekorrelatsioonide korral suureneb tugevate negatiivsete korrelatsioonide arv tervetes kontrollides. Kõigi korrelatsioonide korral on tugevate positiivsete korrelatsioonide arv ME / CFS-i patsientidel suurem kui kontrollidel.

2.8. Erinevate uriini ja plasma vaheliste korrelatsioonide uurimine ME/CFS-i patsientidel ja kontrollidel

Uurisime ühendeid, millel on kõige olulisemad erinevused kontrollide ja patsientide vahel, kasutades järgmisi rangeid kriteeriume: (1) |R| > 0.7, p < 0.05 ja q < 0.15 kas ME/CFS patsientidel või kontrollrühmadel; (2) R < 0,3 sama märgiga või R-väärtus vastupidise märgiga (st negatiivne, kui oluline korrelatsioon oli positiivne) teises kohordis (kontrollid või patsiendid); (3) eemaldati ühendid, millel olid äärmuslikud kõrvalekalded, mis tavaliselt mõjutasid lineaarset seost (kõrvalväärtuste tuvastamise modifitseeritud z-skoori meetod, läviväärtus z > 6). Kui kõrvalekalle leiti ainult ajapunktiandmetes, eemaldati see ühend kõigi, välja arvatud ainult ajapunktide võrdluste puhul. Kui suhteandmetes leiti kõrvalekalle, eemaldati see ühend kõigist, välja arvatud ainult suhtarvude võrdlustest. Ülaltoodud kriteeriumidele vastavate ühendite kokkuvõte on näidatud joonisel 9 R väärtuste soojuskaardina.

Soojuskaart sisaldab metaboliite, mis hõlmavad 35 alamrada, millest 11-st 15-st on üleesindatud aminohapete superrada. Aminohapete alamradade sees olid trüptofaani metabolismil, samuti leutsiini, isoleutsiini ja valiini metabolismil enim mõjutatud ühendid (9 /21 (43%) ja 8/27 (30%)

Künurenaat on osa trüptofaani rajast ja on üks metaboliite, mille korrelatsioonikoefitsiendid ME/CFS ja kontrollrühmade vahel on kõige drastilisemad (joonis 9, P4/P1 koos U3/U1-ga). Kõikide joonise 9 soojuskaardi võrdluste kinurenaadi korrelatsioonigraafikud on näidatud joonisel 10A. Pööratud korrelatsioone näeme graafikul "P4/P1 koos U3/U1-ga", kus R=0.74 (ME/CFS) ja R=−0.77 (kontroll). Tugev positiivne korrelatsioon ME / CFS-i patsientidel on järjekindel kogu suhte korrelatsioonis, samas kui negatiivne korrelatsioon kontrollides ei ole nii ühtlane. Ajapunktide korrelatsioonid näitavad sarnast mustrit, tugeva positiivse korrelatsiooniga ME / CFS rühma jaoks. Kuigi kinurenaat on ainus trüptofaaniühend, millel on korrelatsioonid nii ajapunkti kui ka soojuskaardi suhte külgede vahel, näitavad erinevused plasma ja uriini korrelatsioonides ülejäänud kaheksas ühendis, mis esinevad trüptofaani raja erinevates kohtades. selle raja düsregulatsioon ME / CFS-i patsientidel võrreldes kontrollidega. Lisaks on veel üks soojuskaardil olev ühend, kinolinaat, see metaboliit, mis seob trüptofaani metabolismi nikotinaadi ja nikotiinamiidi metabolismiga, mis on NAD+ ja NADP+ moodustumise oluline rada. Eeldatakse, et ME / CFS-i patofüsioloogia algpõhjus on kinurenaadi raja düsregulatsioon, kuna see on keskne roll raku energia tootmises ja osalemine immuunvastuse vahendamises, nagu on läbi vaadanud Kavyani et al. [45].

Kaheksa leutsiini, isoleutsiini ja valiini alamraja ühendit omasid erinevusi ME/CFS-i patsientide ja kontrollide vahelises korrelatsioonis valitud ajapunktide ja suhte võrdlemisel (joonis 9). Nendest viie ühendi puhul olid erinevused treeningujärgsetes suhetes, kusjuures viiest ühendist neljal oli erinevus U3/U1 (24 tundi pärast treeningut / algtaseme uriin) korrelatsioonis P3/P2-ga (24 tundi pärast treeningut). /15 min pärast treeningut plasma). Beeta-hüdroksüisovaleraat on üks selline ühend, millel on tugev ja oluline positiivne korrelatsioon ME/CFS patsientidel U3/U1 ja P3/P2 vahel ning nõrk, mitteoluline negatiivne korrelatsioon kontrollrühmades (joonis 10B). Beeta-hüdroksüisovaleraat muutub aja jooksul oluliselt ka ME/CFS-i patsientide uriinis võrreldes LMM-i kontrollidega (joonis 6D). Need kaheksa ühendit hõlmavad BCAA katabolismi raja kõiki kolme haru. Isovalerüülglütsiin ja isovalerüülkarntiin tekivad leutsiini katabolismi (ketogeense) käigus. 2-metüülbutrüülkarnitiin ja 3-metüül-2-isovaleraat tekivad isoleutsiini (ketogeense ja glükogeense) katabolismi käigus. Beetahüdroksüisovaleraat, nagu eespool mainitud, on valiini katabolismist allavoolu (glükogeenne). See on veel üks tõend selle kohta, et ME/CFS-i patsientidel on BCAA katabolismiga seotud düsfunktsionaalne metaboolne taastumine treeningust, mis mõjutab kõiki kolme BCAA-d. Kolmel BCAA-l on ühine ensüüm, mis osaleb raja esimeses etapis, BCAA aminotransferaas. Arvestades aga, et nii paljudes aminohapete alaradades esineb düsregulatsioon, on tõenäoline, et see on tõend globaalsemast ainevahetusprobleemist.

Lipiidide superraja piires pälvisid meie tähelepanu ka neli steroidide alamrada. Tõepoolest, kaheksal neljast alamrajast pärit steroidiühendil oli ME/CFS-i patsientidel ja kontrollrühmadel plasma ja uriini vahel erinev korrelatsioon, sealhulgas androgeensed steroidid, kortikosteroidid, pregnenoloonsteroidid ja progestiinsteroidid (joonis 9). Pregnanediool-3-glükuroniidil, mis on progestiini steroid ja progesterooni katabolismi produkt, on tugev ja oluline positiivne korrelatsioon (R=0.78) U3/U1 ja P3/P1 vahel ME/CFS-is. patsientidel ning tervetel kontrollidel tugev ja oluline negatiivne korrelatsioon (R=−0.8) (joonis 10C). Kui ME/CFS-ga patsientidel suureneb pregnanediool- 3-glükuroniidi sisaldus plasmas 24 tundi pärast treeningut, suureneb see ka uriinis ja vastupidi. Kui tervetel kontrollis osalejatel, kelle pregnanediool-3-glükuroniidi kontsentratsioon uriinis on 24 tundi pärast treeningut kõige suurem, väheneb plasmatase. Sama suundumust on näha ka uriini ja plasma korrelatsioonis teiste suhtarvude võrdluste puhul. See ühend muutub ka oluliselt erinevalt LMM-is ME/CFS-i patsientide ja kontrollide vahel, kus kontrollidel on järjepidev treeningjärgne uriinikontsentratsiooni tõus, mida ME/CFS-i patsientidel ei täheldata (joonis 7B). Kõigi nelja ajapunkti võrdluste puhul on pregnanediool-3-glükuroniidi tase plasmas ja uriinis mõlemas katseisikute rühmas tugevas korrelatsioonis, mida on näidatud ka varem [46]. Alles pärast treeningut aja jooksul toimunud muutuste uurimisel ilmnevad erinevused ME / CFS-i patsientide ja tervete kontrollide vahel. Kuigi akuutsete treeningute uuringutes ei ole teatatud pregnanediool-3-glükuroniidi tasemest, on seda mõõdetud kogu menstruaaltsükli jooksul treenivatel ja istuvatel naistel ning treenivatel naistel on üldiselt madalam uriinisisaldus kui istuvatel naistel [46,47] . Arvestades meie tulemusi, on võimalik, et äge treening põhjustab algselt tervetel istuvatel naistel pregnanediool-3-glükuroniidi taseme tõusu uriinis, kuna nad eritavad seda, mitte ei asenda seda. Seda tervislikku vastust treeningule ME/CFS-i patsientidel ei esine, mis on veel üks tõend nende üldisest muutunud metaboolsest reaktsioonist treeningule.

Lõime veel ühe soojuskaardi, mis sisaldab tundmatuid, osaliselt iseloomustatud molekule ja toidukomponente, mis vastavad samadele kriteeriumidele, mida kasutati joonise 9 genereerimiseks (täiendav joonis S5). See on esitatud täiendava teabena, et illustreerida mõnede veel tuvastamata metaboliitide potentsiaali. Näitena näitab X-25524 järjekindlalt tugevat positiivset korrelatsiooni ME / CFS-i rühmas, kuid kontrollrühma puhul korrelatsiooni puudub, olenemata treeningust. Sellise ühendi tuvastamine võib potentsiaalselt aidata välja töötada ME / CFS-i diagnostilise markeri, mõõtes vere ja uriini kontsentratsiooni.

【Kontakt】E-post: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501