Terapeutilise hüpotermia mõju neerukahjustusele asfüksiaalse südameseiskumise rotimudelis: Α Keskenduge ellujäämismäärale, patofüsioloogiale ja antioksüdantsetele ensüümidele
Mar 25, 2022
NII EUN KIM1*, HA-YOUNG SHIN2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2, ET AL
Abstraktne.
Kuigi mitme organi düsfunktsiooni seostatakse ellujäämismääraga pärast südameseiskust (ca), on enamik seni tehtud uuringuid keskendunud südamele ja ajule ning vähesed uuringud on käsitlenud neerupuudulikkust. Seetõttu oli käesoleva uuringu eesmärk uurida terapeutilise hüpotermia mõju ellujäämismäärale, patofüsioloogiale ja antioksüdantsetele ensüümidele roti neerudes pärast asfüksiaalset CA-d. Rotid ohverdati üks päev pärast CA-d. Elulemus, mida hinnati Kaplan-Meieri analüüsi abil, oli 42,9 protsenti ühel päeval pärast ca. Kuid hüpotermia, mis indutseeriti pärast ca, suurendas oluliselt elulemust (71,4 protsenti). normotermiaga rottidel, kellel oli ca, suurenes seerumi uurea lämmastiku tase ühe päeva jooksul pärast ca. lisaks tõusis seerumi kreatiniini tase märkimisväärselt ühe päeva jooksul pärast CA-d. Kuid hüpotermiaga kokku puutunud CA-rottidel vähenes uurea lämmastiku ja kreatiniini tase oluliselt pärast ca. Histokeemiline värvimine näitas neerukahjustuse märkimisväärset ajalist suurenemist pärast seda, kui normotermia rühma allutati ca. Kuid hüpotermia rühmas vähenes neerukahjustus märkimisväärselt. Neerude immunohistokeemiline analüüs näitas antioksüdantsete ensüümide (vask-tsink-superoksiidi dismutaas, mangaani superoksiidi dismutaas, glutatioonperoksüdaas ja katalaas) olulist vähenemist aja jooksul normotermia rühmas. Kuid hüpotermia rühmas olid need ensüümid märkimisväärselt kõrgenenud pärast ca. Kokkuvõttes näitasid tulemused, et lämbumisele järgnev neerufunktsiooni häire on tugevalt seotud varase ellujäämismääraga ja terapeutiline hüpotermia vähendas neerukahjustusi tõhusate antioksüdantsete mehhanismide kaudu.
Märksõnad: asfüksiaalne südameseiskus, südameseiskuse järgne sündroom, hüpotermia ravi, neerud, histopatoloogia, antioksüdantsed ensüümid
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com
cistanche kaotatud impeeriumi ravimtaimedtakistabneeruhaigus, näidise vaatamiseks klõpsake siin
Sissejuhatus
Südameseiskus (ca), tuntud ka kui kardiopulmonaalne seiskus või vereringeseiskus, hõlmab normaalse vereringe äkilist seiskumist, mis on tingitud südame ebaõnnestumisest verd piisavalt pumbata (1). võib kutsuda esile kogu keha isheemia, mis kahjustab mitmeid organeid, sealhulgas aju, süda, neerud ja maks. Enamik viimase poole sajandi jooksul tehtud uuringuid on keskendunud spontaanse tsirkulatsiooni (roSc) eduka taastumise määra parandamisele, saavutades märkimisväärseid edusamme (2–4). Kuigi kohene elustamine võib roSc-d parandada, on halva prognoosiga ellujäämismäär murettekitav (5–7). Südameseiskuse järgne sündroom (PcaS) viitab roSc patofüsioloogilistele tagajärgedele pärast edukat kardiopulmonaalset elustamist (cPr) pärast ca (8). PcaS on roSc järgse elulemuse vähenemise peamine põhjus (9). Patsientide varase perioodi PcaS-i elulemusmäär on vaid 30 protsenti (5). Pole kahtlust, et süda ja aju on PcaS-is olulised organid. Samal ajal on uuringud harva uurinud neerupuudulikkust pärast ca (1, 10, 11). Ca (12) ellujäänud patsientidel esineb sageli mööduvat neerufunktsiooni häiret. Neerufunktsiooni häirete esinemissagedust ja mõju pärast ca ei ole hästi kirjeldatud (13). lisaks viitas meie eelmine uuring sellele, et eksperimentaalsetes uuringutes (14) roSc-le järgnenud madal varajane elulemus võib olla tugevalt seotud neerupuudulikkusega, näiteks ägeda neerukahjustusega. üks levinumaid ägeda neerukahjustuse põhjuseid on ca (15). äge neerukahjustus on tavaline PcaS, mis areneb ~ 30 protsendil haiglas viibivatest patsientidest, kellel on ca (16).
reaktiivsed hapnikuliigid (roS) koosnevad rea hapniku vaheühenditest, sealhulgas vaba radikaali superoksiidi anioon (o2•-), mitteradikaalne vesinikperoksiid (H2o2), kõrge reaktsioonivõimega hüdroksüülvaba radikaal (OH•), peroksünitrit (onoo ) ja singletthapnik (1o2) (17). On näidatud, et roS mängib olulist rolli mitmes eksperimentaalses neeruhaiguses, nagu äge isheemiline neerupuudulikkus, neerutransplantaadi äratõukereaktsioon, äge glomerulonefriit ja toksilised neeruhaigused (18). On olulisi tõendeid, mis toetavad roS sünteesi vahetult pärast ägedat isheemilist insuldi (19) ja ägedat müokardiinfarkti (20). roS on teadaolevalt oluline isheemiliste haiguste, nagu insult ja müokardiinfarkt, puhul. Näiteks Hackenhaar jt (21) teatasid, et PcaS-ga patsientide veres tekivad roS; uuringud on siiski harva uurinud roS moodustumist neerudes pärast ca varases PcaS-i järgses perioodis (22, 23).
Sel põhjusel oletati, et roS on oluline neerukahjustuse korral pärast ca ja aitab kaasa madalale ellujäämismäärale PcaS-i varases staadiumis. Selle hüpoteesi uurimiseks indutseeriti rottidel asfüksiaalset ca ja täheldati PcaS-i varases staadiumis ellujäämise määra. lisaks viidi läbi viivitamatu ja hiline hüpotermia, et suurendada PcaS-ga seotud madalat elulemust pärast roSc-d. Lisaks analüüsiti neerufunktsiooni häireid histopatoloogiliselt ja hinnati roS-i põhjustatud muutusi, nagu vask-tsink-superoksiidi dismutaas (Sod-1), mangaani superoksiidi dismutaas (Sod-2), katalaas (caT) ja glutatioonperoksüdaas (GPX). immunohistokeemilise analüüsi abil pärast roSc.
cistanche pharma eriline
materjalid ja meetodid
Katseloomad ja rühmad.Jeonbuki riikliku ülikooli (iksan, Korea Vabariik) katseloomade keskusest saadi kokku 62 isast Sprague-Dawley (Sd) rotti (kaal, 270–300 g; vanus, 10 nädalat). Neid hoiti 12-tunnise valguse/pimeduse tsükli ajal temperatuuril 23 ± 2 ˚C ja niiskuse juures 60 ± 10 protsenti. Neile võimaldati vaba juurdepääs toidule ja veele. kõik katseprotokollid kiideti eetiliste protseduuride ja teadusliku hoolitsuse alusel heaks Jeonbuki riikliku ülikooli institutsionaalse loomade hooldamise ja kasutamise komitee poolt (kinnitus nr JBnu 2020-084).
Katseloomad jaotati kolme kategooriasse [võltsoperatsiooni rühm, ca normotermia all ning ca ja hüpotermia ravi (HT)] järgmiselt: i) I rühm, võltsrühma (n=5) hoiti normotermia tingimustes. ilma ca; ii) rühm ii, normotermia rühm ilma hüpotermia (33 ˚C) ravita pärast CA-d (n=17); ja iii) rühm iii (n=40), rühm, kes läbis ca normotermia all ja keda raviti HT-ga ca 2 h (n=17), 4 h (n=13) pärast ja 6 tundi (n=10) pärast roSc-d, kus kõiki rotte soojendati normotermiani.
CA induktsioon ja CPR.Ca ja cPr viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud (24, 25) väikeste modifikatsioonidega (joonis 1). Lühidalt, rotid anesteseeriti 2–3-protsendilise isofluraaniga ja ventileeriti mehaaniliselt, et säilitada hingamine, kasutades näriliste ventilaatorit (Harvardi aparaat). Perifeerse hapnikuküllastuse (Spo2) jälgimiseks kinnitati vasaku jala külge pulssoksümeetriline hapnikuküllastuse sond (Nonin Medical, inc.). Ca operatsiooni ajal ja pärast seda hoiti kehatemperatuuri 37±0.5˚C. Elektrokardiogrammi (ecG) muutuste jälgimiseks asetati jäsemetele elektrokardiograafilised sondid (tsütiva), et saada kolme juhtmega andmeid, mida jälgiti pidevalt. Keskmise arteriaalse rõhu (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, Ltd.) ja intravenoosse süstimise jälgimiseks kanüüliti eraldi vasak reiearter ja parem reieveen.
Pärast 5-minutilist stabiliseerimisperioodi manustati intravenoosselt vekurooniumbromiidi (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.), anesteesia peatati ja mehaaniline ventilatsioon katkestati. CA (25, 26) määratlemiseks kasutati MaP-d alla 25 mm Hg ja sellele järgnevat impulssideta elektrilist aktiivsust. CA kinnitati 3–4 minutit pärast vekurooniumbromiidi süstimist. 5 minutit pärast umbes alustati cPr, manustades intravenoosselt epinefriini boolussüsti (0,005 mg/kg; Sigma-Aldrich;
Merck KGaa) ja naatriumvesinikkarbonaat (1 mekv/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), millele järgnes mehaaniline ventilatsioon 100% hapnikuga ja käsitsi surumine rindkeresse kiirusega 300/min, kuni MaP saavutas 60 mm-Hg ja täheldati elektrokardiograafilist aktiivsust. . kui loom oli hemodünaamiliselt stabiilne ja hingas spontaanselt (tavaliselt 1 tund pärast roSc-d), eemaldati kateetrid ja loom ekstubeeriti.
Temperatuuri juhtimine rühmade vahel.Normotermia rühma kehatemperatuuri hoiti CA-operatsiooni ajal ja pärast seda 37±0,5˚C ning seda hoiti kuni rottide surmamiseni vastavalt ajakavale. hüpotermia rühmas määrati ca normaalsel temperatuuril; seejärel hoiti kehatemperatuuri jääpakkide ja ventilaatoritega 33±0,5˚C juures vahetult pärast CPR-i 2, 4 ja 6 tundi ning neid soojendati kiiresti soojenduspadjaga soovitud temperatuurini ( 37±0.5˚C). Seejärel viidi rotid tagasi oma puuridesse, kuni nad ühel päeval pärast CPR/roSc-d surmati. Kehatemperatuuri jälgiti rektaalse temperatuurianduri (27) abil.
Seerumi biokeemiline analüüs.Kõigi loomade anesteseerimiseks kasutati 30 mg/kg pentobarbitaalnaatriumi (JW Pharm co., Ltd.) intraperitoneaalset süstimist. Iga rühma iga looma kõhuveenidest koguti verd. Seerum koguti vere tsentrifuugimisega (2774 xg, 15 min, 4 ˚C) ja seda säilitati kuni analüüsimiseni temperatuuril -80 ˚C. Vere uurea lämmastiku (Bun) ja kreatiniini tase seerumis määrati Rahvusvahelise Kliinilise Keemia Föderatsiooni (28) kirjeldatud meetoditega, kasutades automatiseeritud keemiaanalüsaatorit Hitachi 2070 (Hitachi, Ltd.). kõik testid viidi läbi kolmes korduses, kasutades värsket seerumit.
Kudede töötlemine.Rotid anesteseeriti sügavalt kõhukelmesisese süstiga 200 mg/kg pentobarbitaalnaatriumi (JW Pharm co., Ltd.) ja neile perfuseeriti transkardiaalselt 0,1 M. fosfaatpuhverdatud soolalahust (PBS; pH 7,4), millele järgneb 4 protsenti paraformaldehüüdi 0,1 M fosfaatpuhvris (PB; pH 7,4). Neerud eraldati igalt loomalt ja fikseeriti 4% paraformaldehüüdiga 0,1 M PB-s (pH 7,4) toatemperatuuril 1 nädala jooksul, seejärel viilutati sagitaalselt, sisestati parafiini ja lõigati osadeks (6 µm).
Hematoksüliin ja eosiin (H&E), perioodiline hape-Schiff (PAS) ja Massoni trikroomvärvimine.Neerude patoloogiliste muutuste uurimiseks viidi läbi H&e värvimine vastavalt eelnevalt kirjeldatud protseduurile (29). Glomerulite muutuste uurimiseks viidi läbi PaS värvimine vastavalt eelnevalt kirjeldatud protseduuridele (30–32). Massoni trikroomvärvimise meetodit kasutati torukujulise vigastuse defineerimiseks, võttes arvesse torude laienemist, tubulaarset atroofiat, tubulaarset kipsi moodustumist, vakuolisatsiooni, degeneratsiooni, interstitsiaalset fibroosi ja tubulaarsete epiteelirakkude hõrenemist või torukujulise alusmembraani paksenemist (33 vastavalt eelnevalt kirjeldatud protseduuridele). ,34).
kokku 2 kogenud patoloogi hindasid histopatoloogilisi muutusi topeltpimedalt. pildid 10 värvitud lõigudest roti kohta jäädvustati 400-kordse suurendusega, kasutades Leica dM 2500 valgusmikroskoobi (Leica Microsystems GmbH). Igas jaotises analüüsiti kokku 10 välja. Neerukahjustuste histopatoloogiline analüüs viidi läbi vastavalt eelnevalt kirjeldatud protseduuridele (35, 36). Lühidalt öeldes liigitati kahjustused oluliste mikroskoopiliste kahjustuste puudumiseks (nSMl), minimaalseteks, kergeteks, mõõdukateks või märgatavateks kahjustusteks, mida klassifitseeriti pimetesti puhul järgmise skaalaga: normaalne, 0 punkti;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Glomerulaarsed kahjustused määrati rakuliste elementide kadumise, kapillaari valendiku kokkuvarisemise, amorfse hüaliinmaterjaliga, mis on Bowmani kapsli külge või ilma adhesioonideta (30-32) ja hinnati järgmiste numbriskaaladega: kahjustusteta, { {7}} punkti; väga kerge, 1 punkt; kerge, 2 punkti; mõõdukas, 3 punkti; ja raske, 4 punkti. Torukujuline vigastus hinnati järgmise punktisüsteemiga: torukujuline vigastus puudub, 0 punkti; 1–9 protsenti tuubulitest vigastatud, 1 punkt; 10–25 protsenti tuubulitest vigastatud, 2 punkti; 26–50 protsenti tuubulitest vigastatud, 3 punkti; 51–75 protsenti tuubulitest vigastatud, 4 punkti; ja vähemalt 76 protsenti tuubulitest vigastatud, 5 punkti (33,34).
Malondialdehüüd (MDA).Mda kontsentratsiooni neerukoores hinnati vastavalt eelnevalt kirjeldatud protokollile (23, 37, 38). Lühidalt öeldes viidi neerukudede homogeniseerimine ja tsentrifuugimine läbi kiirusel 8832 xg 10 minutit temperatuuril 4 °C ning supernatant koguti ja säilitati -80 °C juures MDA analüüsi jaoks. MDA sisaldus määrati vastavalt TBarS analüüsikomplekti juhistele (kat. nr 10009055; Cayman Chemical Company).
Immunohistokeemia (IHC) antioksüdantsete ensüümide jaoks. iHc viidi läbi Sod-1, Sod-2, caT ja GPX-ga, et uurida muutusi antioksüdantide immunoreaktiivsuses neerudes. iHc viidi läbi vastavalt meie eelnevalt kirjeldatud meetodile (22). Lühidalt, sektsioone (6 µm) inkubeeriti primaarse kitse anti-Sod1-ga (1:500; kat. nr SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), kitse anti-Sod2-ga (1:1). ,000; kat. nr SaB2501676; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), küüliku anti-caT (1:1, 000; kat. nr ab16731; Abcam) ja küüliku anti-GPX ( 1:1, 000; kat. nr ab22604; Abcam) üleöö temperatuuril 4 ˚C, millele järgnes biotinüülitud konjugeeritud küülikuvastane (1:250; kat. nr Ba-1000-1,5; vektorlaborid , inc.) ja biotinüülitud konjugeeritud kitsevastased (1:250; kat. nr Ba-5000-1,5; Vector Laboratories, Inc.) sekundaarsed antikehad 2 tunni jooksul temperatuuril 24 ˚C ja töötati välja kasutades Vectastain aBc (Vector laboratories) , sh). Seejärel visualiseeriti need 3,3'-diaminobensidiini lahusega (0,1 M Tris-HCl puhvris).
Sektsioonide pildistamiseks x400 suurendusega kasutati Leica dM 2500 mikroskoopi. Kokku valiti 10 sektsiooni/rotti ja püüti 10 ala. Suhtelise optilise tiheduse (varraste) protsendi ( protsenti ) mõõtmiseks kasutati pildiläve analüüsi tarkvara versiooni 1.52a (riiklik terviseinstituut).
Statistiline analüüs.Kõiki katseid korrati kolmes eksemplaris. Andmete analüüsimiseks kasutati Graph Pad Prism versiooni 5.0 (GraphPad Software, inc.), mis väljendati kui keskmiste (SeM) väärtuste keskmine ± standardviga. Ellujäämist analüüsiti Kaplan-Meieri statistika ja log-rank testi abil. MaP ja perifeerset hapnikku võrreldi aja mõju hindamiseks ühe- ja kahesuunalise dispersioonanalüüsi korduva mõõtmise abil. Erinevuste olulisuse kindlaksmääramiseks viidi läbi post hoc analüüsid, kasutades Tukey testi kõigi paarikaupa mitme võrdluse jaoks. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Tulemused
Füsioloogilised muutused, ellujäämise määr ja seerumi biokeemilised muutujad. Rühmade vahel ei olnud statistiliselt olulist erinevust algtaseme näitajate, sealhulgas kehakaalu, MaP ja Spo2 osas (tabel i ja joonis 2). Ca indutseerimine toimus 3–4 minutit pärast vekurooniumbromiidi (2 mg/kg) intravenoosset süstimist. CA kinnitati isoelektrilise ecG, Spo2 ja MaP abil ning need muutusid ootuspäraselt vastavalt katseprotokollile (joonis 2a-c). nagu on näidatud joonisel fig 2d, oli kehatemperatuur kõigis roSc järgsetes rühmades erinev, nagu on näidatud joonisel fig 3, iga rühma ellujäämise määra hinnati ühe päeva jooksul pärast ca. II grupi intressimäär oli 42,9 protsenti.
Rühmas iii oli määr pärast 2 h-HT-d 42,9 protsenti, määr pärast 4 tundi-HT-d oli 57,1 protsenti ja määr pärast 6 tundi-HT-d 71,4 protsenti. selles katses ei olnud ii rühma rottide ja iii rühma 2 h-HT-ga rottide vahel erinevusi.
nagu on näidatud joonisel 4B, oli seerumi Bun tase rühmas I 13,8 mg/dl üks päev pärast ca. rühmas ii tõusis kukli tase oluliselt 35,3 mg/dl-ni. rühmas iii oli kukli tase 3{{10}},7 mg/dl pärast 2-tunnist HT-d, 250 mg/dl pärast 4-tunnist HT-d ja 22,7 mg/dl dl pärast 6 h-HT. lisaks, nagu on näidatud joonisel 4c, oli seerumi kreatiniini tase I rühmas {{20}},23 mg/dl. ii rühmas tõusis kreatiniini tase märkimisväärselt kuni 0,43 mg/dl. rühmas iii olid kreatiniini tasemed madalamad kui ii rühmas täheldatud järgmiselt: 0,39 mg/dl pärast 2 h-HT-d, 0,37 mg/dl pärast 4-tunnist HT-d ja 0,36 mg/dl pärast 6-tunnist HT-d.
Histopatoloogilised leiud. I rühmas (võlts) ilmnesid puutumatud histoloogilised struktuurid H&e, PaS ja Massoni trikroomvärvimisega (joonis 5A). Interstitsiaalset fibroosi ei tuvastatud kõigis rühmades, samas kui II rühmas uuriti ca-indutseeritud neeru histopatoloogiat ühel päeval pärast roSc-d, kasutades H&e, PaS ja Massoni trikroomvärvimist. Raske CA-indutseeritud neerukahjustus suurenes märkimisväärselt proksimaalsetes tuubulites ja glomerulites; eelkõige olid neerutorukeste epiteelirakkude harjapiirid tõsiselt erodeeritud (joonised 5a ja B). lisaks olid selles rühmas glomerulaarsed kapillaarid laienenud põletikuliste rakkudega ning interstitsiaalne turse ja äge neerutuubulite nekroos olid tõsised võrreldes I rühmas täheldatutega (joonis 5a).
rühmas iii nõrgenes neerukahjustus ühel päeval pärast roSc-d (joonised 5a ja B). eelkõige vähenes ca-indutseeritud vigastus proksimaalsetes tuubulites oluliselt pärast 6 h-HT-d, võrreldes II rühmas täheldatuga. lisaks vähenes proksimaalsete tuubulite lokaalne laienemine võrreldes II rühmas tuvastatuga (joonis 5A). Glomerulite puhul nõrgendas 6 h-HT oluliselt glomerulaarkahjustust võrreldes II rühmas tuvastatuga (joonis 5a ja B).
MDA tase. nagu on näidatud joonisel fig 4a, tõusis Mda tase neerukoores ühel päeval pärast ca i rühmas ii rühmaga võrreldes oluliselt. Kuid III rühmas langes MDA tase pärast 4 tundi ja 6 tundi HT oluliselt. see vähenes ka 2 h-HT puhul, kuid statistiliselt olulist erinevust ii rühmaga võrreldes ei olnud.
Antioksüdantsete ensüümide immunoreaktiivsuse leiud.
I rühmas hinnati normaalseid Sod-1, Sod-2, GPX ja caT immunoreaktiivsust, mis näitas, et need paiknesid peamiselt tuubulites (joonis 6a). rühmas ii vähenesid Sod-1, Sod-2, GPX ja CAT immunoreaktiivsus märkimisväärselt ühel päeval pärast roSc-d, võrreldes nendega, mis ilmnesid rühmas i (joonised 6a ja B).
iii rühmas ei erinenud Sod-1, Sod-2, GPX ja caT immunoreaktiivsus pärast 2 h-HT-d oluliselt ii rühmas täheldatutest (joonis 6a ja B). 4 h-HT korral olid neli immunoreaktiivsust oluliselt kõrgemad kui need, mis ilmnesid rühmas ii (joonis 6a ja B), mis näitab, et eelkõige oli GPX immunoreaktiivsus oluliselt kõrgem võrreldes teiste immunoreaktiivsustega. 6 h-HT korral olid kõik immunoreaktiivsused kõrgemad kui 4 h-HT saanud rottidel, mis näitas, et iga Sod-1, Sod-2, GPX ja caT immunoreaktiivsuse pulk oli 78,4, 67,4, 86,5 ja 79,5 protsenti vastavalt i rühmaga võrreldes (joonis 6a ja B).
herba epimedium sagittatum
Arutelu
Loomkatsetes on süda ja aju kõige enam mõjutatud organid pärast isheemia/reperfusiooni (i/r) vigastust pärast ca (39,40). sellegipoolest on teatud uuringud teatanud, et äge neerukahjustus mõjutab neuroloogilist taastumist (41, 42). Seetõttu on oluline uurida ägedat neerukahjustust pärast ca ja cPr . Käesolevas uuringus kasutati täiskasvanud isaseid Sd-rotte lämbumiseks, süstides vekurooniumbromiidi. CA kinnitati 3–4 minutit pärast lämbumise esilekutsumist ja cPr viidi läbi 5 minutit pärast ca. MaP, ecG ja Spo2 muudeti oodatult umbes roSc ajal ja sellele järgneval ajal. meie praeguses uuringus oli iii rühma ellujäämismäär ühel päeval pärast roSc-d 2 h-HT-ga kokku puutunud rottidel, 57,1 protsenti 4 h-HT-ga ravitud rottidel ja 71,4 protsenti 6 h-HT-ga ravitud rottidel. che jt (26) teatasid, et ellujäämise määr oli kaks päeva pärast roSc-d 40 protsenti rotimudelis, kus oli asfiksia ca. lisaks teatasid Wang jt (43), et rottidel suurendas roSc-le järgnev hüpotermia ja levosimendaani (kaltsiumi sensibilisaator ja kaaliumikanali avaja) kombinatsioon oluliselt elulemust. Nende leidude põhjal võib HT rottidel, kellel on ca, suurendada ellujäämise määra paar päeva pärast roSc-d. Inimestel aga suurendab HT pärast ca vaevalt elulemust pärast roSc-d (44).
neerufunktsiooni häireid teatati 12–28 protsendil ca patsientidest pärast edukat elustamist (13). lisaks tekkis äge neerukahjustus 43 protsendil patsientidest, keda elustati umbes pärast seda, ja enam kui 75 protsenti nendest episoodidest tekkis kolme päeva jooksul pärast ca (45). loommudelites nõrgendas HT märkimisväärselt i/R-ga (st CA-le järgnev ROSC) põhjustatud ägedat neerukahjustust (43, 46, 47). Näiteks Tissier jt (47) teatasid histopatoloogia ja elektronmikroskoopia põhjal HT-ga neerukahjustuste olulisest nõrgenemisest küülikumudelis ca, võrreldes kontrollrühmaga. meie praeguses uuringus paranesid ii rühma neerude histopatoloogilised glomerulaar- ja tubulaarsed kahjustused ühel päeval pärast roSc-d. selles rühmas suurenes seerumi Bun ja kreatiniini tase pärast ROSC-d märkimisväärselt, võrreldes võltsrühmaga (rühm i). Need tulemused olid sarnased varasemate uuringute tulemustega, mis hõlmasid koerte, küüliku ja põrsaste ca mudeleid (47–49). Seega suurenes neerukahjustus tugevalt varases faasis pärast ca katseloomadel. meie praeguses uuringus vähenesid neerude glomerulaar- ja tubulaarsed kahjustused ning histopatoloogilised skoorid rühmas iii märkimisväärselt pärast 4-tunnist ja 6-tunnist HT-d üks päev pärast roSc-d, võrreldes II rühmaga. Ribeiro jt (46) ja Souza jt (50) teatasid, et HT oli efektiivne neerukahjustuse loommudelites. Islam jt (23) ja Jawad jt (22) tegid kindlaks, et HT vähendas neerukahjustuse raskust ja suurendas ellujäämise määra asfiksia ca mudelis. Leiud näitasid, et HT-l on märkimisväärne neerude kaitsev toime, mida seostati elulemuse suurenemisega.
Endogeensete antioksüdantsete ensüümide hulka kuuluvad peamiselt Sods, CAT ja GPX. Need ensüümid pakuvad esimest kaitseliini o2•- ja OH• vastu. SOD-1 ja SOD-2 pakuvad kaitset oksüdatiivse stressi vastu, katalüüsides o2•- dismutatsiooni o2-ks ja H2o2-ks (51). oksüdatiivne stress on elundikahjustuse ja hemodünaamilise düsfunktsiooni oluline tegur PcaS-i ajal ning roS teke i / r vigastuse ajal. Antioksüdantsete ensüümide aktiivsust muudab i/r vigastus pärast ca (21). meie uuring näitas, et Sod-1, Sod-2, GPX ja caT tasemed langesid pärast roSc-d rühmas ii võrreldes i rühmaga. Nende antioksüdantsete ensüümide tase väheneb pärast i/r-i, mis põhjustab rakkude kahjustusi ja surma endogeensete antioksüdantide tarbimise tõttu roS vabanemise tagajärjel (52).
Xia jt (53) teatasid suurenenud antioksüdantsest aktiivsusest HT-ga kokku puutunud hiirte neerukudedes neerukahjustuse korral. Hackenhaar jt (21) täheldasid inimestel Sod-1, Sod-2, GPX ja caT aktiivsuse olulist suurenemist pärast 6-, 12-, 36- ja 72-tunnist HT-d pärast roSc-d. Varasemates uuringutes, milles kasutati asfüksiaalse ca roti mudelit, teatasid Islam jt (23), et ca-le järgnev HT vähendab neerudes oksüdatiivset stressi ning Jawad jt (22) teatasid, et ca-le järgnev HT kaitseb neerusid ca. mis näitab, et nrf2/Ho-1 suurenes neerudes. meie praeguses uuringus suurenes Sod-1, Sod-2, GPX ja caT immunoreaktiivsus oluliselt pärast 4 h-HT ja 6 h-HT rühmas iii võrreldes II rühmaga, mis viitab sellele, et HT aktiveeris antioksüdantseid ensüüme ja vähendas oksüdatiivne stress.
Selle uuringu ellujäämise, histopatoloogia, biokeemiliste ja immunohistokeemiliste tulemuste põhjal tehti kindlaks, et neerufunktsiooni häired on meie roti asfüksiaalse ca. Kuid 4 h- või 6 h-HT pärast ROSC-d vähendas märkimisväärselt neerukahjustust, mis viitab sellele, et HT indutseerib antioksüdantsete ensüümide, nagu Sod-1, Sod-2, GPX ja caT, aktivatsiooni, mille tulemuseks on oksüdatiivse stressi vähenemine neerudes. Selle tulemusena püstitati hüpotees, et HT vähendab neerukahjustust antioksüdantse mehhanismi kaudu ja suurendab varajast elulemust. Siiski on vaja Western blot analüüsi, et selgitada välja neerukahjustuse ja HT mehhanismi ca pärast roSc-d. See on käesoleva uuringu potentsiaalne piirang ja rõhutab edasiste uuringute vajadust.
müritsetiin
1 erakorralise meditsiini osakond, Jeonbuki riikliku ülikooli kliinilise meditsiini uurimisinstituut, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;
2 Veterinaarmeditsiini ja Bioohutuse uurimisinstituut, Jeonbuki riiklik ülikool, san, Jeollabuk-do 54596;
3 Hallymi ülikooli biomeditsiiniteaduse osakond ning bioteaduste ja biotehnoloogia uurimisinstituut, chuncheon, Gangwon-do 24252;
Kangwoni riikliku ülikooli haigla 4 kirurgiaosakond,
Meditsiinikool, Kangwoni riiklik ülikool, chuncheon, Gangwon-do 24289; 5 Neurobioloogia osakond, Meditsiinikool, Kangwoni Riiklik Ülikool, Chuncheon, Gangwon-do 24341, Korea Vabariik
Tänuavaldused
ei ole kohaldatav.
Rahastamine
Käesolevat uuringut toetas põhiteaduste uurimisprogramm Korea riikliku uurimisfondi kaudu, mida rahastas haridusministeerium (grant nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 ja nrF-2021r1F1a1059992).
Andmete ja materjalide kättesaadavus
Käesoleva uuringu käigus kasutatud ja/või analüüsitud andmestikud on mõistliku taotluse korral kättesaadavad vastavalt autorilt.
Autorite kaastööd
SeK, HYS, MHW ja HJT vastutasid eksperimentaalse kavandamise, andmete kogumise, andmete analüüsi ja käsikirjade kirjutamise eest. eYl, YJY, rHK, JHc ja TKl viisid läbi katsed ja andmete analüüsi. dca, BYP, JcY, SKH ja iSK viisid läbi andmete analüüsi ja esitasid kriitilisi kommentaare kogu uuringu protsessi kohta. kõik autorid on lõpliku käsikirja läbi lugenud ja heaks kiitnud. HYS ja HJT kinnitavad kõigi algandmete autentsust.
Eetiline kinnitus ja nõusolek osaleda
kõik katseprotokollid kiitis heaks eetiliste protseduuride ja teadusliku hoolitsuse alusel Jeonbuki riikliku ülikooli institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee (kinnitus nr JBnu 2020-084; Jeonju, Lõuna-Korea).
Patsiendi nõusolek avaldamiseks
ei ole kohaldatav.
Konkureerivad huvid
Autorid kinnitavad, et neil puuduvad konkureerivad huvid.
Viited
1. Girotra S, chan PS ja Bradley SM: elustamisjärgne hooldus pärast haiglavälist ja haiglasisest südameseiskust. Süda 101: 1943–1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS ja Cha KC: lühem defibrillatsiooniintervall soodustab edukat defibrillatsiooni ja elustamist. elustamine 143: 100-105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a ja Papadimitriou l: isheemiaga modifitseeritud albumiin ennustab kardiopulmonaalse elustamise tulemusi: eksperimentaalne uuring. elustamine 81: 591–595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se ja Angelos MG: hapnikuvajadus kardiopulmonaalse elustamise (cPr) ajal spontaanse vereringe taastamiseks. elustamine 80: 951–955, 2009.
5. lópez-Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez-calvo a, cecchetti c, rodríguez-núnez a ja carrillo Á; iberoamerican Pediaatriline südameseiskus Uuringuvõrgustik riBePci: laste haiglasisese südameseiskumise suremusega seotud spontaansete vereringefaktorite taastumine: tulevane mitmekeskuseline rahvusvaheline vaatlusuuring. crit care 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, saa S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F ja cariou a: Südame seiskumise sündroom: kohesest elustamisest pikaajalise tulemuseni. ann intensiivravi 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC jt: Südameseiskuse järgne sündroom: epidemioloogia, patofüsioloogia, ravi ja prognoosimine. rahvusvahelise elustamise kontaktkomitee (American Heart Association, Austraalia ja Uus-Meremaa elustamisnõukogu, Euroopa elustamisnõukogu, Kanada Heart and Stroke Foundation, Interamerican Heart Foundation, Aasia elustamisnõukogu ja Lõuna-Aafrika elustamisnõukogu) konsensusavaldus ); Ameerika südameassotsiatsiooni erakorralise kardiovaskulaarse ravi komitee; kardiovaskulaarse kirurgia ja anesteesia nõukogu; kardiopulmonaalse, perioperatiivse ja intensiivravi nõukogu; kliinilise kardioloogia nõukogu; ja Insuldinõukogu. tiraaž 118: 2452–2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG jt: Südameseiskuse järgne sündroom: epidemioloogia, patofüsioloogia, ravi ja prognoosimine. Rahvusvahelise elustamist käsitleva kontaktkomitee teaduslik avaldus; Ameerika südameassotsiatsiooni erakorralise kardiovaskulaarse ravi komitee; kardiovaskulaarse kirurgia ja anesteesia nõukogu; kardiopulmonaalse, perioperatiivse ja intensiivravi nõukogu; kliinilise kardioloogia nõukogu; volikogu insuldi teemal. elustamine 79: 350–79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, muutus Md ja dezfulian c: Müokardi düsfunktsioon ja šokk pärast südameseiskust. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c ja Holzer M: ajufunktsioon pärast südameseiskusjärgset elustamist. curropin crit care 10: 213-217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je ja Trzeciak S: Mitme organi düsfunktsioon pärast spontaanse vereringe taastumist südame seiskumise sündroomi korral. crit care Med 41: 1492-1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, luuserid H, laggier an ja Müllner M: kerge terapeutilise hüpotermia mõju neerufunktsioonile pärast kardiopulmonaalset elustamist meestel. elustamine 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW ja Rittenberg Jc; Südameseiskusjärgne teenus: neerufunktsiooni häireid esineb sageli pärast haiglavälist südameseiskust taaselustamist. elustamine 84: 1371–1374, 2013.
14. Lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB jt: muutused histopatoloogias ja kasvaja nekroosifaktori tasemetes rottide südametes pärast asfüksiaalne südameseiskus. Clin Exp Emerg Med 4: 160–167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e jt; Neeru toetava ravi algus ja lõpp (BeST Kidney) uurijad: äge neerupuudulikkus kriitilises seisundis patsientidel: rahvusvaheline, mitmekeskuseline uuring. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J ja Singhal Pc: ägeda neerupuudulikkuse levimus ja määravad tegurid pärast kardiopulmonaalset elustamist. arch intern Med 153: 235-239, 1993.
17. Sachse a ja Wolf G: angiotensiin ii poolt indutseeritud reaktiivsed hapniku liigid ja neer. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.
18. Baud l ja ardaillou r: reaktiivsed hapniku liigid: tootmine ja roll neerudes. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.
19. rodrigo r, Fernández-Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda-Merchak a ja Feuerhake W: oksüdatiivne stress ja isheemilise insuldi patofüsioloogia: uudsed ravivõimalused. CNS Neurol Disord Drug Targets 12: 698–714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n ja Moin S: kõrgenenud DNA kahjustus, oksüdatiivne stress ja müokardiinfarkti põdevate patsientide kaitsesüsteemi nõrgenemine. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780–789, 2018.
