Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

MicroRNA-499a (rs3746444A/G) geenivariant ja vastuvõtlikkus 2. tüüpi diabeediga seotud lõppstaadiumis neeruhaigusele

MANAL S. FAWZY et al

Abstraktne

Diabeetiline nefropaatia (DN) on lõppstaadiumis peamine riskitegurneeru-haigus(ESRD). MikroRNA-d (miRNA-d / miR-id) ja nende variandid võivad olla seotud tervise ja haigustega, sealhulgas DN-iga. Käesoleva uuringu eesmärk oli uurida miRNA-499a geeni (MIR499A) A/G seemnepiirkonna variandi (rs3746444) seost DN-ga seotud ESRD-ga.(lõppstaadiumisneeru-haigus)tundlikkust suhkurtõvega patsientidel ja teha kindlaks, kas erinevate genotüüpide ning patsientide laboratoorsete ja kliiniliste andmete vahel on seos. Juhtumikontrolli pilootuuring viidi läbi 180 täiskasvanud II tüüpi suhkurtõvega patsiendiga. Kokku 90 ESRD-ga patsienti (lõppstaadiumisneeru-haigus)Juhtudeks loeti regulaarset hemodialüüsi saavatel patsientidel ning kontrollrühmaks 90 vanuse, soo ja rahvuse järgi vastavat normoalbuminuuriaga diabeetilist patsienti. MIR499A genotüpiseerimine viidi läbi, kasutades TaqMan Real-Time alleeli eristamise testi. Tulemused näitasid, et variant MIR499A rs3746444*G andis vastuvõtlikkuse ESRD tekkeks kaasdominantse seisundi korral [(tõenäosusuhe (95-protsendiline usaldusvahemik): 2,49 (1,41–3,89) ja 2,41 (1,61–6,68) heterosügootse ja homosügootse võrdluse korral vastavalt], domineerivad [2,30 (1,18-3,90)] ja alleelsed [1,82 (1,17-2,83)] mudelid. Määratletud variandi erinevad genotüübid ei näidanud olulisi seoseid uuritud patsientide kliiniku-labori andmete ega tsirkuleeriva miR- 499a plasmatasemed. Kokkuvõttes näitasid käesoleva uuringu tulemused, et MIR499A rs3746444 võib olla DN-ga seotud ESRD vastuvõtlikkuse variant uuringupopulatsioonis. Siiski on nende leidude kontrollimiseks õigustatud suuremate valimimahuga uuringud erinevate rahvustega.

Cistanche saab ravidaneeru-haigus

Sissejuhatus

Diabeetilise nefropaatiaga (DN) seotud lõppstaadiumneeru-haigus(ESRD) on kogu maailmas kasvav rahvatervise probleem (1). Viimase kolme aastakümne jooksul DN-iga seotud ESRD(lõppstaadiumisneeru-haigus) has been identified as a major cause for dialysis in several countries, including Saudi Arabia, in which type 2 diabetes mellitus (T2DM) accounts for >33 protsenti kõigist ESRD juhtudest (1,2). Mitmed paljutõotavad uuringud on tuvastanud geenid, mis on seotud DN esinemise ja progresseerumisega, sealhulgas geenid, mis on seotud mikroRNA-dega (miRNA-d / miR-id) (3, 4). See mittekodeerivate RNA-de perekond on väga konserveerunud, koespetsiifiline ja lühikese pikkusega (20–24 nukleotiidi). miRNA-d mängivad võtmerolli paljudes inimorganite füsioloogilistes ja patoloogilistes seisundites, sealhulgasneerud. Näiteks miR-192, miR-194, miR-204, miR-215 ja miR-216 ülesreguleerimine ning miR-133a, miR-133b, miR-1d, miR-296, miR-1a, miR allareguleerimine -122 ja miR-124a on inimestel täheldatudneerud(5). Samuti on teatatud, et miR-192 ekspressioon kortikaalses on 20 korda kõrgemneerudkude võrreldes medullaarseganeerudkudedes, kus see on seotud naatriumi transpordi reguleerimisega; lisaks võib miR-155 pärssida 1. tüüpi angiotensiin II retseptori ekspressiooni, mis võib mõjutada vererõhku (5, 6). Seondudes mRNA sihtmärkidega, on miRNA-del võime põhjustada translatsiooni repressioone, mRNA destabiliseerimist ja/või degradatsiooni (7). MiRNA-mRNA sihtmärgi interaktsioonide termodünaamikat võivad mõjutada prekursor-miRNA-s (pre-miRNA-d) esinevad ühe nukleotiidi polümorfismid (SNP-d), mille tulemuseks on sihtgeeni düsregulatsioon ja seejärel fenotüübi variatsioonid või haigustele vastuvõtlikkus (8). MiRNA-499a geen (MIR499A) asub inimese müosiini raske ahela 7B südamelihase geenis 20q11 kromosoomis.{11}}-34990497 ( pluss ) ja koosneb ühest eksonist, mis kodeerib ühte transkripti (MI0003183). See on 122 aluspaari pikkune ja teatati, et see on kardiomüotsüütide vigastuse marker (9). Kuigi uuringute arv, mis keskenduvad miR-499a täpsele rollile DN-st tingitud ESRD patogeneesis ja arengus, on piiratud, on tehtud ettepanek, et miR-499a mõjutab mitmeid bioloogilisi protsesse, nagu rakkude vananemine, põletik, apoptoos ja immuunsüsteem. vastus (10), mis võib mängida rolli ESRD biogeneesis (tabel SI) (11–14). Veelgi enam, varem teatati, et miR-499a ülesreguleerimine võib reguleerida insuliiniresistentsust, glükogeneesi ja moduleerida insuliini signaaliülekannet fosfataasi ja tensiini homoloogi inhibeerimise kaudu (15).

Levinud variant (rs3746444), mis asub miR-499a-3p seemnepiirkonnas AC(A/G)UCAC positsioonis 20:34 990 448 (GRCh38), on seotud mitme haigusega, eriti Lähis-Idas. elanikkonnast, nagu südame-veresoonkonna haigused (9), autoimmuunhaigused (16) ja vähk (17). Meie eelmises uuringus tuvastati praeguses DM-iga seotud ESRD-s tsirkuleeriva miR-499a taseme oluline düsregulatsioon.(lõppstaadiumisneeru-haigus)kohort (18). Seetõttu oli käesoleva uuringu eesmärk uurida MIR499A(A/G) seemnepiirkonna variandi (rs3746444) seost DN-ga seotud ESRD tundlikkusega T2DM-ga patsientidel ning teha kindlaks, kas erinevate genotüüpide ja patsientide vahel on seos. kliiniku-labori andmed. Meie teadmiste kohaselt on see esimene uuring, mis uurib nimetatud variandi võimalikku seost ESRD tundlikkusega Lähis-Ida patsientide proovis.

materjalid ja meetodid

Uurimispopulatsioon.

Kokku 90 järjestikust T2DM-ga seotud ESRD-ga patsienti(lõppstaadiumisneeru-haigus)regulaarse hemodialüüsi saavad (kolm korda nädalas) võeti käesolevasse uuringusse patsientide rühma. Patsiendid käisid Mohammed bin Saud Al-Kabeeri nefroloogiakeskuses neerudialüüsi saamiseks Arari keskhaiglas (Arar, Saudi Araabia). ESRD patsiendirühma valiku kaasamise/välistamise kriteeriume on üksikasjalikult kirjeldatud meie eelmises töös sama ESRD kohta(lõppstaadiumisneeru-haigus)patsientide kohort (18). Patsiendid, kellel on mis tahes krooniline haigus, autoimmuunhaigused, vähid janeeru-haigusmuud kui DM-ga seotud nefropaatia (diagnoositud neerubiopsiaga vastavalt kohalikele standardprotokolle, mis on vastu võetud rahvusvahelistest mittediabeetiliste diagnoosimise standarditestneeru-haigus) (19) jäeti välja. Kuna on väga tõenäoline, et lõpuks areneb märkimisväärne osa patsientidest, kellel on varakult diagnoositud diabeet, ESRD(lõppstaadiumisneeru-haigus), T2DM-iga patsiendid, kellel on samaaegne diabeet ja normoalbuminuuria (uriini albumiini/kreatiniini suhe,<30 µg/mg)="" (20,21)="" were="" considered="" as="" the="" control="" group.="" all="" biomedical="" research="" involving="" human="" participants="" conformed="" to="" the="" guidelines="" of="" the="" helsinki="" declaration.="" the="" protocol="" of="" the="" present="" study="" was="" approved="" by="" the="" research="" ethics="" committees="" of="" northern="" border="" university="" (approval="" no.="" 6/340/h),="" and="" written="" informed="" consent="" was="" obtained="" from="" all="">

Cistanche saab ravidaneeru-haigus

Laboratoorsed analüüsid.

Enne ESRD-ga patsientide määratud teist dialüüsi seanssi koguti tühja kõhuga veeniproovid tavalistes ja etüleendiamiintetraäädikhappe vaakumtorudes.(lõppstaadiumisneeru-haigus). Seerum eraldati tsentrifuugimisega 12 minutit kiirusel 1300 xg toatemperatuuril, vahetult endisest katseklaasist biokeemiliseks analüüsiks, kasutades kaubanduslikult saadavaid glükoosikomplekte (kat. nr 44044831190),neerudfunktsioonitestid [kreatiini (kat. nr 4810716190) ja uurea (kat. nr 4460715190)] ja lipiidide profiilide määramine [üldkolesterool (kat. nr 3039773190), triatsüülglütserool (kat. nr 207261), HDL 207267 c (kat. nr 7528566190) ja LDL-c (kat. nr 7005717190)] Cobas Integra Biochemical analüsaatoril (kõik Roche Diagnostics GmbH).

Genotüpiseerimine MIR499A jaoks (rs3746444). Genoomne DNA ekstraheeriti täisverest, kasutades Wizard Genomic DNA puhastuskomplekti (kat. nr A1120; Promega Corporation) vastavalt tootja protokollile, millele järgnes DNA kontsentratsiooni ja puhtuse hindamine spektrofotomeetriga NanoDrop ND-1000 (NanoDrop Technologies; Thermo Fisher). Scientific, Inc.) ja agaroosgeeli (2 protsenti) elektroforeesi, et hinnata DNA terviklikkust. Seejärel säilitati proove -20 °C juures kuni genotüpiseerimise ajani. MIR499A polümorfismi test (rs3746444, testi ID: C_2142612_30) ​​viidi läbi, kasutades TaqMani alleeli eristamise reaalajas PCR-i ja kvaliteedinäitajaid, nagu eelnevalt kirjeldatud (16). Lühidalt öeldes viidi PCR läbi 25 µl reaktsioonimahus, mis sisaldas gDNA-d (20 ng), mis oli lahjendatud 11,25 µl-ni nukleaasivaba veega, 12,5 µl TaqMan Universal PCR Master Mix (2X) ja 1,25 µl 20 x TaqMani SNP analüüsist. sama tarnija. Iga kord kasutati matriitsita ja polümeraasivaba ensüümi proove, kusjuures uuringuproovid olid negatiivsed kontrollid. Genotüpiseerimine viidi läbi viisil, mis oli juhtumi/kontrolli oleku suhtes pime. PCR amplifikatsioon viidi läbi StepOne'i reaalajas PCR-süsteemis (Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.), kasutades järgmisi tingimusi: Kahefaasiline esialgne hoidmine (2 minutit temperatuuril 50 °C ja 10 minutit temperatuuril 95 °C) , millele järgneb 40-tsükliline kaheetapiline PCR (denatureerimine 15 sekundit 95 ˚C juures ja lõõmutamine/pikendamine 1 min 60 ˚C juures). Allelide diskrimineerimine määrati iga jooksu fluorestsentsi andmefailide analüüsimisel, kasutades automaatset alleeli kutsuvat tarkvara (SDS versioon 1.3.1; Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.; joonis S1). Üldine genotüübi kõnede määr oli 100 protsenti.

Statistiline analüüs.

Proovi suuruse ja võimsuse arvutused, kasutades tarkvara G power-3 (http://www.gpower.hhu.de/), näitasid, et määratud uuringuplaani korral on lubatud veamäärad, viga=0.05, keskmine efekt suurus =0.5 ja valimi suurus 90/rühma kohta võivad anda 91 protsenti uuringu võimsusest. Andmete jaotust ja dispersiooni homogeensust hinnati vastavalt Shapiro-Wilki testi ja Levene testiga. Pidevad andmed väljendatakse keskmise ± standardhälbena ja kategoorilised muutujad esitatakse sageduste loendustena. Andmeid võrreldi χ2 testiga, samas kui pidevate muutujate võrdlemiseks kasutati paaritu Studenti t-testi, ühesuunalist ANOVA või Kruskal-Wallis testi. Täheldatud genotüübi jaotuse kõrvalekallet Hardy-Weinbergi tasakaalust analüüsiti χ2 sobivuse abil, kasutades veebientsüklopeediat Genetic Epidemiology (http://www.oege.org/). Erinevate geneetiliste mudelite jaoks arvutati genotüübispetsiifilised kohandatud tõenäosussuhted (OR) ja 95-protsendilised usaldusvahemikud (CI). Korrigeeriti uuringu muutujaid, sealhulgas vanust, sugu, hemodialüüsi seansside arvu, hüpertensiooni esinemist ja haiguse kestust. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="" difference.="" spss="" version="" 23="" (ibm="" corp.)="" was="" used="" for="" the="" statistical="">

MIR499A (rs3746444) variandi in silico analüüs.

MIR499A (rs3746444) variandi in silico analüüs. Geeni struktuurne ja funktsionaalne analüüs viidi läbi Ensembl Genomic andmebaasi (ensembl.org) ja miRBase.org abil; sihtmärgi ennustamine viidi läbi kasutades DIANA-micro T-CDS v5.0 (http://diana.imis.athena innováció.gr/DianaTools/index.php?r=microT_ CDS/index), miRBase (http://www.mirbase.org/) ja DIANA-TarBase v7.{7}} algoritm (http://diana.imis.athena-innovation.gr/DianaTools/index.php ?r=tarbase/index) andmebaasid; ja annotatsioonide rühmitamine ja radade rikastamise analüüs viidi läbi kasutades miRPath v3.{10}} (http://www.microrna.gr/miRPathv3) ja seda kõike kirjeldati põhjalikult meie varasemates uuringutes (8, 12). Prognoositavaid miR-499a sihtmärke võrreldi nii A kui ka G alleelide olemasoluga, kasutades programmi miR2Go (http://compbio.uthsc.edu/miR2GO) keskmisel hierarhilisel filtreerimistasemel (P<>

Tulemused

Uuritava populatsiooni omadused.

Uuringus osalejate algnäitajad on kokku võetud tabelis I. ESRD-ga patsientide keskmine vanus(lõppstaadiumisneeru-haigus)oli meestel 46,6±12,3 aastat ja naistel 47.{5}}±14,7 aastat. Uuringus osalejate keskmine dialüüsi kestus oli mõlema soo puhul võrreldav. Osalejate kliinilistes ja biokeemilistes omadustes ei olnud soopõhiseid erinevusi, välja arvatud lipiidide profiili parameetritega seotud erinevused, mis olid naispatsientidel halvemad kui meestel (tabel I).

MIR499A variant (rs3746444) uuringupopulatsioonis.

Uuringupopulatsioonis järgisid MIR499A (rs3746444) SNP genotüübi sagedused Hardy-Weinbergi tasakaalu (P=0.149 kontrollrühmadel ja P=0.398 statsionaarsetel patsientidel). Väiksemad alleelide sagedused rs3746444*G puhul olid 0,28 ja 0,42 kontrollrühmadel ja ESRD-ga patsientidel(lõppstaadiumisneeru-haigus), vastavalt. Uuringurühmade vahel täheldati olulist erinevust MIR499A genotüüpides. GG genotüübi esinemissagedus oli kontrollides 11,1 protsenti, võrreldes 20 protsendiga ESRD-ga patsientidel.(lõppstaadiumisneeru-haigus)(P=0.030). rs3746444*G alleeli kandmine suurendas vastuvõtlikkust ESRD arengule peaaegu 2 korda(lõppstaadiumisneeru-haigus), mille OR (95 protsenti CI) on 1,82 (1,17–2,83) alleelse geneetilise assotsiatsiooni mudeli alusel. Järjekindlalt tekkis homosügootsetel/heterosügootsetel isikutel (rs3746444*GG/AG) suurem tõenäosus ESRD tekkeks homosügootse/heterosügootse võrdluse ja domineerivate mudelite korral [GG vs. AA: OR=2.41, 95 protsenti CI: 1,61–6,68 ; AG vs. AA: OR=2.49, 95 protsenti CI: 1,41–3,89; (AG pluss GG) vs. AA: VÕI=2.30, 95 protsenti CI: 1,18–3,90; Tabel II].

MIR499A variant (rs3746444) ja ESRD-ga patsientide kliiniku-laboratoorsed omadused(lõppstaadiumisneeru-haigus). Määratud variandi erinevate genotüüpide ning patsiendirühma kliiniliste ja biokeemiliste omaduste seose uurimisel ei ilmnenud olulisi seoseid, nagu on näidatud tabelis III.

MIR499A (rs3746444) mõju geenistruktuurile ja funktsioonile.

Kuigi miR-499a moodustab sekundaarse juuksenõela silmuse, mille struktuuris on komplementaarsed järjestused (joonis S2), ennustati, et mõlemast käest sünteesitud mõlemad küpsed vormid on suunatud erinevatele geenidele. Prognoositi, et miR-499a mõjutab kokku 1890 geeni (919 geeni 3p, 810 5p ja 161 geeni mõlemat), nagu eelnevalt üksikasjalikult kirjeldatud (8). Kõige olulisemad Kyoto geenide ja genoomide entsüklopeedia (KEGG) rajad, mis on seotud miR-499a sihtmärkidega, mis võivad olla seotud DN-i progresseerumisega ESRD-ks(lõppstaadiumisneeru-haigus)on kokku võetud tabelis IV.

Rs3746444 SNP olemasolu reisija miR-499a ahela seemnepiirkonnas võib viia sihtmärkide katkemiseni ja erineva geenikomplekti loomiseni (8, 16). Samuti võib see lühendada varre-silmuse struktuuri; seega mõjutades kogu miRNA töötlemist.

Meie eelmine uuring teatas miR-499a vereringe taseme düsregulatsioonist samas patsientide rühmas (18); seetõttu keskendus käesolev uuring sellele, et teha kindlaks, kas nendel vereringetasemetel on sama geeni erinevate genotüüpide vahel olulisi erinevusi. Leiud ei näidanud aga olulisi seoseid MIR499A (rs3746444) erinevate genotüüpide ja varem Livaki meetodil tuvastatud tsirkuleeriva miR-499a plasmataseme vahel (22) (P=0.173; joonis 1) .

Cistanche saab ravidaneeru-haigus

Arutelu

On teatatud, et SNP-d on kõige levinum geneetilise variatsiooni tüüp, mis on seotud populatsiooni mitmekesisuse, haigustele vastuvõtlikkuse ja individuaalsete ravivastustega (23). SNP-d võivad mõjutada miRNA ekspressiooni ja/või küpsemist primaarse transkripti transkriptsiooni tasemel, primaarsete transkriptide või pre-miRNA-de transkriptsioonijärgset töötlemist või mõjutada miRNA-mRNA interaktsioone (24).

Käesolev uuring näitas, et rs3746444*G alleeli kandmine andis vastuvõtlikkuse ESRD suhtes(lõppstaadiumisneeru-haigus)in patients with DM compared with non‑carriers under the allelic, co‑dominant, and dominant genetic association models. Results of our previous study demonstrated that the rs3746444 polymorphism results in an A>G mittevastavus miR-499a prekursori tüvipiirkonnas (asub küpse järjestuse vastas), mis mõjutab küpset miR-499a-3p seemnepiirkonda, mis on seotud õige miRNA-mRNA sidumisega, millele järgneb katkestus ja mitme sihtmärgi loomine (8). Homosügootsete genotüüpide (AA või GG) kandjad annavad kaks küpset vormi, vastavalt miR-499a-5p ja miR-499a-3p*A või *G, millest igaühel on oma spetsiifiline sihtgeenide paneel. Võrdluseks, heterosügootsed (AG) kandjad toodavad kolme küpset vormi, miR-499a-5p, -3p * A ja -3p * G, millel on kolm sihtgeenide alamrühma. Käesoleva uuringu ränianalüüsid näitasid, et nende erinevate alleelide olemasolu võib häirida ja luua vastavalt 667 ja 744 geeni sihtmärki. Uuritud valideeritud geenisihtmärkide hulgas on nukleolaarne valk 4, tuumaretseptoriga interakteeruv valk-1, Bcl-2-taoline valk 14, kemokiini (C-C motiiv) ligand 8 ja sugu määrav piirkond Y-box 4 (20). . Meile teadaolevalt on see esimene uuring, mille käigus uuritakse MIR499A rs3746444 varianti ESRD tundlikkuse suhtes DM-ga patsientidel Lähis-Ida populatsiooni valimis. Kooskõlas käesoleva uuringu tulemustega teatasid Misra jt (25), et MIR-499A rs3746444 heterosügootne ja homosügootne genotüüp põhjustas riski ESRD arenguks, mille põhjustasid peale DN-i ka muud häired ja mis võivad olla seotud peaaegu 3 korda suurenenud risk ägeda allografti äratõukereaktsiooni tekkeks Põhja-India populatsioonis (25).

Arvestades, et pre-miRNA-des olevad SNP-d võivad muuta miRNA töötlemist ja/või ekspressiooni, ei täheldatud MIR499A polümorfismi seost miR-499a tsirkuleeriva plasmatasemega ja patsientide erinevate kliiniliste laboratoorsete omadustega, nagu eelnevalt kirjeldatud, olulisi seoseid ei täheldatud. Oletatakse, et miR-499a variandi olemasolu võib mõjutada RNA-RNA interaktsioonide termodünaamikat ja selle miRNA afiinsust, häirides optimaalset seondumist sihtmärk-mRNA-dega, mille tulemuseks on sihtgeenide regulatsioonihäired, mis vahendavad haiguse vastuvõtlikkust. ESRD(lõppstaadiumisneeru-haigus)ilma suhtelist ekspressiooni ja/või haiguse fenotüüpi mõjutamata (22). Käesoleva uuringu in silico analüüsid näitasid mõningaid olulisimaid KEGG-teid, mis hõlmavad miR-499a sihtmärke, mis võivad olla seotud DN-i progresseerumisega ESRD-ks (26–32). Näiteks (TGF-1) rada oli seotud DN etiopatoloogiaga (26, 28). TGF-1 rada aktiveerib peamised signaaliülekanderajad, sealhulgas PI3K/AKT rada, mis vahendab transkriptsioonilise FOXO fosforüülimist ja inaktiveerimist, põhjustades oksüdeerivat stressi, mesangiaalse raku laienemist ja rakuvälise maatriksi valkude, DN-ga seotud kroonilise põhikomponentide akumulatsiooni.neerudhaigus (26). Epidermaalse kasvufaktori retseptori (ErbB) türosiinkinaasi aktiivsuse ülesreguleerimine on oluline mitmete diabeedi tüsistuste, sealhulgas neerupatoloogiate, südamefibroosi ja veresoonte düsfunktsiooni vahendamisel (29). Veelgi enam, TNF raja roll DN progresseerumisel diabeetilistel hiirtel ja rotimudelitel oli ilmne. Näiteks on teatatud, et lahustuva TNF-retseptor-2 sulandvalgu kasutamine parandab KK-Ay hiire DM-mudelis DN-i varajast staadiumit (30). Samuti leiti, et TNFR-Fc TNF inhibiitor nõrgendab neerude hüpertroofiat, mõjutamata indutseeritud diabeediga rottide metaboolset profiili (31). mTOR on seotud glomerulaarse podotsüütide funktsiooni säilitamisega; suurenenud aktiivsus aitas kaasa progresseeruva DN-ga seotud glomerulaarse hüpertroofia ja hüperfiltratsiooni tekkele (32).

Eelkõige olid ülalnimetatud rajad suunatud arvukates eksperimentaalsetes uuringutes, et kinnitada nende terapeutilist mõju DN-is (29, 30, 33, 34). Ziyadeh jt (33) teatasid monoklonaalse TGF-vastase antikeha indutseeritud glomerulaarfiltratsiooni kiiruse paranemisest db/db diabeetilistel hiirtel (33). Lisaks teatati, et streptozototsiini indutseeritud diabeetiliste rottide pikaajaline ravi AG825-ga, mis on retseptori türosiin-proteiinkinaasi ErbB-2 spetsiifiline inhibiitor, parandas märkimisväärselt perfuseeritud mesenteriaalse veresoonkonna hüperreaktiivsust norepinefriini suhtes ja nõrgenenud reageerimisvõimet karbakool (29). TNF-i inhibeerimine lahustuva TNF-retseptori (TNFR)2 liitvalgu etanertseptiga parandas KK-A(y)-hiirtel loodud diabeedimudelis DN-i varase staadiumi progresseerumist, peamiselt põletikuvastase toime pärssimise kaudu. neerude TNF-TNFR2 raja toime (30). Lisaks pärsib rapamütsiin, esimene teatatud ühend, mis inhibeerib mTOR-i, p70S6 kinaasi ja selle substraadi, S6 ribosomaalse valgu glükoosist põhjustatud fosforüülimist mesangiaalrakkudes, nõrgendades diabeetikute morfoloogilisi ja funktsionaalseid häireid.neerudT2DM hiiremudelis (34).

Kooskõlas käesoleva uuringu tulemustega näitasid Ciccacci jt (35) miR-499a osalust DN-i tundlikkuses Itaalia T2DM kohordis (35). Eespool nimetatud uuringu tulemused näitasid, et see seos oli tingitud miR-499a mõjust kahele apoptootilisele mängijale, kaltsineuriinile ja dünamiiniga seotud valgule, mille tõttu miR-499a düsregulatsioon põhjustas mitokondriaalse düsfunktsiooni ja raku apoptoosi, mis võis kaasa aidata haiguste vastuvõtlikkusele. (33). Eelkõige on viimased protsessid seotud DN-iga (36, 37), mis võib osaliselt toetada miR-499a variandi seostamist ESRD-ga.(lõppstaadiumisneeru-haigus)vastuvõtlikkus praeguses kohordis. Siiski on käesoleva uuringu tulemuste kinnitamiseks vaja järjest rohkem uuringuid, mis hõlmavad suuremaid sõltumatuid eri rahvustest rühmi.

Kokkuvõtteks võib öelda, et meie teadmiste kohaselt oli käesolev uuring esimene, mis tegi ettepaneku MIR499A A/G seemnepiirkonna variandi (rs3746444) mõju kohta DN-ga seotud ESRD-le.(lõppstaadiumisneeru-haigus)vastuvõtlikkus. See võib sisalduda molekulaarse tundlikkuse geenide loendis, mis võivad toetada patsiendi riskide kihistumist ja varajase ennetava mõõtmise rakendamist. Siiski väärib märkimist, et ei saa lõplikult välistada muude võimalike segajate mõju, nagu kokkupuude erinevate keskkonnateguritega (nt ravi või toitumine) ja täiendavad geneetilised tegurid. Täiendavad suurema valimimahu ja pikaajalise järelkontrolli replikatsiooniuuringud, eriti erineva etnilise päritoluga populatsioonides, on õigustatud. Funktsionaalsed uuringud on vajalikud ka miR-499a rolli kinnitamiseks DN-ga seotud ESRD etiopatoloogias.

Cistanche saab ravidaneeru-haigus

Viited:

1. Sattar A, Argyropoulos C, Weissfeld L, Younas N, Fried L, Kellum JA ja Unruh M: Diabeediga seotud kõigi põhjuste ja põhjustega seotud suremus levinud hemodialüüsi saavatel patsientidel. BMC Nephrol 13: 130, 2012.
2. Al-Sayyari AA ja Shaheen FA: krooniline lõppstaadiumneerudhaigus Saudi Araabias. Kiiresti muutuv stseen. Saudi Med J 32: 339–346, 2011.
3. Mooyaart AL: diabeetilise nefropaatia geneetilised seosed. Clin Exp Nephrol 18: 197–200, 2014.
4. Lu Z, Liu N ja Wang F: Epigeneetilised regulatsioonid diabeetilise nefropaatia korral. J Diabetes Res 2017: 7805058, 2017.
5. Schena FP, Serino G ja Sallustio F: mikroRNA-d seesneerudhaigused: uued paljulubavad biomarkerid diagnoosimiseks ja jälgimiseks. Nephrol Dial Transplant 29: 755–763, 2014.
6. Felekkis K, Touvana E, Stefanou Ch ja Deltas C: MikroRNA-d: äsja kirjeldatud kodeeritud molekulide klass, mis mängivad rolli tervises ja haigustes. Hippokratia 14: 236–240, 2010.
7. Mashayekhi S, Saeidi Saedi H, Salehi Z, Soltanipour S ja Mirzajani E: miR-27a, miR-196a2 ja miR-146a polümorfismide mõju rinnavähi riskile. Br J Biomed Sci 75: 76–81, 2018.

8. Toraih EA, Hussein MH, Al Ageeli E, Riad E, Abdallah NB, Helal GM ja Fawzy MS: MIR-499 geeniperekonna seemnepiirkonna variandi struktuur ja funktsionaalne mõju bronhiaalastma korral. Respir Res 18: 169, 2017.

9. Fawzy MS, Toraih EA, Hamed EO, Hussein MH ja Ismail HM: MIR-499a ekspressiooni ja seemnepiirkonna variandi (rs3746444) seos südame-veresoonkonna haigustega Egiptuse patsientidel. Acta Cardiol 73: 131–140, 2018.

10. Wang WJ, Cai GY ja Chen XM: raku vananemine, vananemisega seotud sekretoorne fenotüüp ja kroonilineneerudhaigus. Oncotarget 8: 64520-64533, 2017.
11. Sluijter JP, van Mil A, van Vliet P, Metz CH, Liu J, Doevendans PA ja Goumans MJ: MicroRNA-1 ja -499 reguleerivad diferentseerumist ja proliferatsiooni inimesest pärinevates kardiomüotsüütide eellasrakkudes. Arterioscler Thromb Vasc Biol 30: 859-868, 2010.
12. Ling TY, Wang XL, Chai Q, Lau TW, Koestler CM, Park SJ, Daly RC, Greason KL, Jen J, Wu LQ jt: SK3 kanali reguleerimine mikroRNA-499 potentsiaalse rolliga kodade virvenduses . Südame rütm 10: 1001–1009, 2013.
13. Xu Z, Han Y, Liu J, Jiang F, Hu H, Wang Y, Liu Q, Gong Y ja Li X: MiR-135b-5p ja MiR-499a-3p soodustavad otseselt rakkude proliferatsiooni ja migratsiooni ateroskleroosi korral sihivad MEF2C. Sci Rep 5: 12276, 2015.
14. Geeniontoloogia konsortsium: geeniontoloogia ressurss: kullakaevanduse rikastamine. Nucleic Acids Res 49: D325-D334, 2021.
15. Wang L, Zhang N, Pan HP, Wang Z ja Cao ZY: MiR-499-5p soodustab maksa insuliiniresistentsust, pärssides PTEN-i. Cell Physiol Biochem. 36: 2357-2365, 2015.
16. Toraih EA, Ismail NM, Toraih AA, Hussein MH ja Fawzy MS: eelkäija miR-499a variant, kuid mitte miR-196a2, on seotud reumatoidartriidi tundlikkusega Egiptuse elanikkonnas. Mol Diagn Ther 20: 279–295, 2016.
17. Toraih EA, Fawz MS, Elgazzaz MG, Hussein MH, Shehata RH ja Daoud HG: esialgne uuring prekursorite miRNA196a2 ja 499a variantide kombineeritud genotüübi analüüsidest koos maksa- ja neeruvähi tundlikkusega. Asian Pac J Cancer Eelmine 17: 3369-3375, 2016.

18. Fawzy MS, Abu AlSel BT, Al Ageeli E, Al-Qahtani SA, Abdel-Daim MM ja Toraih EA: pikad mittekodeeriva RNA MALAT1 ja microRNA-499a ekspressiooniprofiilid dialüüsi saavatel diabeediga ESRD patsientidel: esialgne rist- läbilõike analüüs. Arch Physiol Biochem 126: 172–182, 2020.

19. Ghani AA, Al Waheeb S, Al Sahow A ja Hussain N: Neerubiopsia II tüüpi suhkurtõvega patsientidel: kahjustuste näidustused ja olemus. Ann Saudi Med 29: 450–453, 2009.

20. Nah EH, Cho S, Kim S ja Cho HI: Uriini albumiini ja kreatiniini suhte (ACR) võrdlus ACR ribatesti ja kvantitatiivse testi vahel prediabeedi ja diabeedi korral. Ann Lab Med 37: 28–33, 2017.
21. Fawzy MS ja Beladi FIA: Tsirkuleeriva D-vitamiini, VDBP ja D-vitamiini retseptori ekspressiooni seos diabeetilise nefropaatia raskusastmega Saudi II tüüpi suhkurtõvega patsientide rühmas. Clin Lab 64: 1623–1633, 2018.
22. Livak KJ ja Schmittgen TD: suhteliste geeniekspressiooniandmete analüüs reaalajas kvantitatiivse PCR ja 2(-Delta Delta C(T)) meetodi abil. Methods 25: 402–408, 2001.
23. Shastry BS: SNP-d: mõju geenifunktsioonile ja fenotüübile. Methods Mol Biol 578: 3–22, 2009.
24. Hoffman AE, Zheng T, Yi C, Leaderer D, Weidhaas J, Slack F, Zhang Y, Paranjape T ja Zhu Y: MicroRNA miR-196a-2 ja rinnavähk: geneetiline ja epigeneetiline seos uuring ja funktsionaalne analüüs. Cancer Res 69: 5970–5977, 2009.
25. Misra MK, Pandey SK, Kapoor R, Sharma RK ja Agrawal S: MikroRNA-ga seotud geenide geneetilised variandid lõppstaadiumis tundlikkuse ja prognoosi osasneeru-haigusja neerusiirdamise tulemus põhja-indialaste seas. Pharmacogenet Genomics 24: 442–450, 2014.
26. Kato M, Yuan H, Xu ZG, Lanting L, Li SL, Wang M, Hu MC, Reddy MA ja Natarajan R: Akt/FoxO3a raja roll TGF-beeta1-vahendatud mesangiaalrakkude düsfunktsioon: uudne seotud mehhanism diabeetikuleneerudhaigus. J Am Soc Nephrol 17: 3325-3335, 2006.
27. Qin G, Zhou Y, Guo F, Ren L, Wu L, Zhang Y, Ma X ja Wang Q: FoxO1 üleekspressioon parandab mesangiaalrakkude düsfunktsiooni isastel diabeetilistel rottidel. Mol Endocrinol 29: 1080-1091, 2015.
28. Chang AS, Hathaway CK, Smithies O ja Kakoki M: transformeeruv kasvufaktor 1 ja diabeetiline nefropaatia. Am J Physiol Renal Physiol 310: F689-F696, 2016.
29. Akhtar S, Yousif MH, Dhaunsi GS, Sarkhouh F, Chandrasekhar B, Attur S ja Benter IF: ErbB2 aktiveerimine ja allavoolu signaalimine Rho kinaaside ja ERK1/2 kaudu aitab kaasa diabeedist põhjustatud veresoonte düsfunktsioonile. PLoS One 8: e67813, 2013.

30. Omote K, Gohda T, Murakoshi M, Sasaki Y, Kazuno S, Fujimura T, Ishizaka M, Sonoda Y ja Tomino Y: TNF raja roll diabeetilise nefropaatia progresseerumisel KK-A(y) hiirtel. Am J Physiol Renal Physiol 306: F1335-F1347, 2014.

31. Al-Lamki RS ja Mayadas TN: TNF-retseptorid: signaalirajad ja panus neerufunktsiooni häiresse.NeerInt 87: 281–296, 2015.
32. Gödel M, Hartleben B, Herbach N, Liu S, Zschiedrich S, Lu S, Debreczeni-Mór A, Lindenmeyer MT, Rastaldi MP, Hartleben G jt: mTOR roll podotsüütide funktsioonis ja diabeetilises nefropaatias inimestel ja hiirtel . J Clin Invest 121: 2197–2209, 2011.

33. Ziyadeh FN, Hoffman BB, Han DC, Iglesias-De La Cruz MC, Hong SW, Isono M, Chen S, McGowan TA ja Sharma K: neerupuudulikkuse, maatriksi liigse ekspressiooni ja glomerulaarse mesangiaalse maatriksi pikaajaline ennetamine laienemine töötlemisel monoklonaalse transformeeriva kasvufaktori beeta antikehaga db/db diabeetilistel hiirtel. Proc Natl Acad Sci USA 97: 8015-8020, 2000.

34. Mori H, Inoki K, Masutani K, Wakabayashi Y, Komai K, Nakagawa R, Guan KL ja Yoshimura A: mTOR rada on diabeetilise nefropaatia korral väga aktiveeritud ja rapamütsiinil on tugev terapeutiline potentsiaal. Biochem Biophys Res Commun 384: 471–475, 2009.
35. Ciccacci C, Latini A, Greco C, Politi C, D'Amato C, Lauro D, Novelli G, Borgiani P ja Spallone V: seos MIR499A polümorfismi ja diabeetilise neuropaatia vahel II tüüpi diabeedi korral. J Diabeedi tüsistused 32: 11-17, 2018.
36. Forbes JM ja Thorburn DR: Mitokondriaalne düsfunktsioon diabeetikutelneerudhaigus. Nat Rev Nephrol 14: 291–312, 2018.
37. Flemming NB, Gallo LA ja Forbes JM: mitokondriaalne düsfunktsioon ja signaalimine diabeetikutelneerudhaigus: oksüdatiivne stress ja muu. Semin Nephrol 38: 101–110, 2018.