Ⅰ osa: Albumiini töötlemine neerude kaudu – varajastest leidudest praeguste kontseptsioonideni

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Jakub Gburek, Bogusława Konopska ja Krzysztof Goł ˛ab

1. Sissejuhatus

Albumiinon üks varem äratuntavaid valke kehas. Esimest korda kirjeldas seda Denis aastal 1840. Selle nimi tuleneb ladinakeelsest sõnast Albus (valge), kuna happelises keskkonnas moodustub valge sade. See valk on organismis väga levinud ja esineb muu hulgas: plasmas, lümfis, tserebrospinaal- ja rakuvälises vedelikus. See täidab palju olulisi füsioloogilisi funktsioone.Albumiinmoodustab üle 50 protsendi kõigist plasmavalkudest ja selle suhteliselt kõrge kontsentratsioon (45 g/l, 0,6 mM) määrab umbes 80 protsenti vereplasma kolloidsest osmootsest rõhust [1]. See vastutab vee jaotumise eest plasma ja ülejäänud rakuvälise vedeliku vahel, mis tagab normaalse vere hemodünaamika säilimise ja hoiab ära turse. Transpordifunktsioonalbumiinon sama oluline. Suur jaotusruumala, mis on seotud selle suhteliselt kerge tungimisega läbi kapillaarepiteeli, põhjustab selle valgu koguhulgast üle 60 protsendi esinemise ekstravaskulaarses ruumis. Selline suur tungiminealbumiininterstitsiaalsetesse vedelikesse võimaldab sellel kontakti enamiku keharakkudega, muutes selle ideaalseks madala molekulmassiga metaboliitide kandjaks. Endogeensed ained, mida transporditaksealbumiinhõlmavad muu hulgas: pika ahelaga rasvhappeid, aromaatseid karboksüülhappeid, bilirubiini, sapphappeid, porfüriine, lämmastikoksiid ja kahevalentse metalli ioone, sealhulgas Co, Cu, Ni, Zn katioone.Albumiinon ka valk, mis seob vabade radikaalide tekkes osalevate siirdemetallide katioone, nagu Cu või Fe. Seda iseloomustab ka antioksüdatiivne roll ja see võimaldab Cd-, Hg- ja V-ioonide kompleksi moodustamist, mis on oluline võõrutusprotsesside jaoks. Vaba SHCys34 rühma olemasolu tõttualbumiiniseenesest on antioksüdant ja plasma antioksüdatiivse barjääri oluline element [2]. Samuti tasub mainida, et pikaajalise nälgimise ajalalbumiinlaguneb, et saada asendamatuid aminohappeid makromolekulaarseks sünteesiks ja energia tootmiseks. Valgupuuduse seisundis sünteesalbumiinon 2.{1}}kordi kiirendatud ja selle ressursid vähenevad peaaegu 50 protsenti [3,4].

cistanchesaab ravidaneerudhaigusparandadaneerufunktsioon

Võttes arvesse asjaolu, etalbumiinmängib olulist rolli homöostaasis, on oluline, et organism säilitaks normaalse plasmakontsentratsiooni. Vähenemine sissealbumiinkontsentratsiooni täheldatakse paljude erinevate etioloogiate ainevahetushäirete korral. See võib olla tingitud ebaõigest jaotumisest, näiteks pankreatiidi korral, sünteesi vähenemisest maksatsirroosi korral, aminohapete imendumishäiretest või madala valgusisaldusega dieedist; kaotus enteropaatia, põletuste, kirurgiliste protseduuride või nefrootilise sündroomi käigus, samuti põletiku ja vähi kiirenenud katabolism. Eelnimetatud langus väljendub paljudes tõsistes kesknärvisüsteemi, hingamissüsteemi ja kardiovaskulaarsüsteemi häiretes, sealhulgas tursete teke, hüübimisfaktorite aktiveerumine, hüpotransfer rineemia, kõrge tihedusega lipoproteiini (HDL) düslipideemia, oksüdatiivne stress ja paljud selle transpordifunktsiooniga seotud ainevahetushäired. Lisaks suureneb hüpoalbumineemia korral ravimite vaba farmakoloogiliselt aktiivne fraktsioon, mida tuleks optimaalse annuse määramisel arvesse võtta. Hüperalbumineemia on haruldane seisund ja selle põhjuseks võib olla märkimisväärne dehüdratsioon või liigne venoosse vere staas. Samas liigne plasmaalbumiintase ei ole seotud tõsisemate häiretega [5,6].

Intravenoosne manustaminealbumiinpreparaadid hüpoalbumineemia korral põhjustavad onkootilise rõhu kiiret ajutist korrigeerimist ja hoiavad ära hüpovoleemia. Seetõttualbumiinpreparaate on kasutatud muu hulgas ulatuslike põletuste, ägeda hingamispuudulikkuse, raske hemolüütilise sündroomi raviks vastsündinutel ja patsientidel pärast südameoperatsiooni [7,8]. Lisaks sellele on selle võime tõttu akumuleeruda kasvajate ja põletikuliste kohtade kudedes uuringud ravimitega, mis põhinevad konjugaatidel, mis sisaldavadalbumiinviidi läbi. Näiteks ravimid koos ekso- või endogeense ainegaalbumiin, ristseotud kujulalbumiinUuriti mikro- ja nanokapsleid, aga ka geneetilisi fusioone polüpeptiidravimite puhul [9].

Seetõttualbumiinkatabolism on patofüsioloogia ja sekkumismeditsiini seisukohalt oluline uurimisprobleem. Üks peamisi selles protsessis osalevaid organeid on neer. Neerude katabolismi häired võivad põhjustada mitte ainult hüpoalbumineemiaga seotud tüsistusi, vaid ka nefrootilise sündroomi tekkimist albuminuuria käigus ja sellest tulenevalt selle organi lõplikku puudulikkust. Seos proteinuuria ja neerupuudulikkuse vahel on keeruline ja hõlmab mitmeid patoloogilisi sündmusi, mida vahendavad kemokiinid interstitsiaalse põletiku, mononukleaarsete rakkude akumulatsiooni ja komplemendi intrarenaalse aktiveerimise korral. Põletikueelsed ja profibrogeensed signaalid põhjustavad lokaalseid vigastusi ja sellega seotud interstitsiaalset neerufibroosi. Selle tulemusena täheldatakse funktsionaalsete nefronite ammendumist [10]. Seetõttu on seda küsimust aastaid põhjalikult uuritud. Viimase kümnendi jooksul läbi viidud uuringud on oluliselt kaasa aidanud selle protsessiga seotud molekulaarsete mehhanismide ja ka nendega seotud vastuolude mõistmisele. Uuringus esitatakse selle valdkonna uusimate uuringute tulemused.

cistanche meessoost eelised

2. Üldine albumiini metabolism

2.1. Süntees

Albumiintoodetakse hepatotsüütide krobelise endoplasmaatilise retikulumi polüsoomidel ja sekreteeritakse preproteiinina. Siledale endoplasmaatilisele retikulumile liikumisel eemaldatakse signaalpeptiid. Edasine töötlemine toimub sekretoorsel rajal ja hõlmab heksapeptiidi eemaldamist, mis asub molekuli N-otsas[11]. määralbumiinsüntees on 10-15g päevas, mis moodustab umbes 10 protsenti maksa koguvalgu sünteesist. Väike kogusalbumiin(umbes 2 g) säilitatakse maksas, suurem osa eritub aga veresoonte ruumi. Selle valgu plasmakogum moodustab 30-40 protsenti selle koguhulgast ja ülejäänud osa leidub peamiselt nahas ja lihastes. Umbes 5 protsentialbumiinlekib rakuvälisesse ruumi, kust naaseb lümfiteede kaudu süsteemsesse vereringesse [4]. Sünteesalbumiinon pidev protsess, mida reguleerivad transkriptsiooni ja translatsiooni initsiatsiooni tasemel erinevad stiimulid. Näiteks süntees intensiivistub pärast söömist ja väheneb söögikordadevahelisel ajal. Seda protsessi mõjutavad ka hormoonid. Sünteesalbumiinsageneb hüpertüreoidism ja väheneb hüpotüreoidism. Kortikosteroidid ja insuliin suurendavad selle tootmistalbumiintervetel inimestel, samas kui selle valgu süntees on ägeda faasi vastuse korral pärsitud. Kaaliumisisalduse vähenemine hepatotsüütides vähendab nende hulkaalbumiinringlusse, kuid ei inhibeeri valgusünteesi ennast. Kuid onkootilise rõhu muutused avaldavad domineerivat mõju intensiivsuselealbumiinsüntees. Õigealbumiinkontsentratsioon säilib ka tänu tasakaalustatud katabolismile, mida leidub kõigis kudedes [12].

2.2. Katabolism

Thealbumiinidpoolväärtusaeg plasmas on 19 päeva ja selle igapäevane lagunemine inimkehas ei ületa 14 g. Selle valgu katabolism toimub peamiselt lihastes ja nahas (umbes 40-60 protsenti o) ja täpsemalt nende kudede veresoonte endoteelirakkudes. Hiljutiste uuringute valguses arvatakse, et molekulaarne internaliseerumismehhanism ja transportiminealbumiinNende rakkude lagunemisorganellidele on kaveoliinist sõltuv endotsütoos, mis hõlmab püüduri retseptoreid gp18, gp30 ja gp60 (albondiin)[13-16]. Maks osaleb selles protsessis vähemal määral (ligikaudu 15 protsenti). Lisaks veresoonte endoteelirakkudele osalevad ka hepatotsüüdidalbumiinomaksvõtt. Selle katabolism parenhüümirakkudes toimub ka kaveoliiniga seotud struktuuride kaudu [17,18]. Proteolüütiline laguneminealbumiintoimub pärast koobaste sisestamist ja sulandumist lüsosoomidega. Molekulid lagunevad vabadeks aminohapeteks, mis toidavad süsteemset aminohapete kogumit.

On tõendeid selle kohta, et põletikuga seotud hüpoalbumineemia on pigem põhjustatud suurenenud käibest kui vähenenud sünteesist. Oksüdeerunudalbumiinvõialbumiinmuul viisil modifitseeritud lagundatakse maksas. Põletikuliste seisundite korral on need protsessid ülesreguleeritud ka tänu suurenenud kapillaaride läbilaskvusele ja plasmavalkude intensiivsele voogule interstitsiumi [19].

Albumiinkatabolism toimub ka neerudes (ligikaudu 10 protsenti), kuid neerudes osalevad molekulaarsed mehhanismid.albumiinkäive on sisuliselt erinev. Pärast glomerulaarfiltratsiooni sisestatakse valk proksimaalsetesse tuubulitesse klatriinist sõltuva endotsütoosi kaudu makromolekulaarsete püüduri retseptorite - megaliini ja kubiliin - tandemi osalusel. Siisalbumiinmolekulid läbivad lüsosomaalset lagunemist ja/või transtsütoosi, mida käsitletakse üksikasjalikult järgmistes peatükkides.

cistanche meessoost eelised

3. Neerude albumiini katabolism

Neerudalbumiinkatabolism hõlmab filtreerimist glomerulites, reabsorptsiooni proksimaalsetes tuubulites ja rakusisest lagunemist või osalist transtsütoosi vereringesse. Ainult väike kogusalbumiinst kuni ligikaudu 100 mg päevas eritub uriiniga. Filtreerimisbarjääri kahjustuse või proksimaalsete tuubulite talitlushäirete korral,albumiinilmneb uriinis kontsentratsioonides, mis võivad ületada 3 g päevas [20].

3.1. Albumiini glomerulaarne filtreerimine

Glomerulaarbarjääri läbilaskvus määrab primaarse filtraadi koostise. See moodustub kolmest kihist: sisemisest kinnitunud endoteelirakkude kihist, glomerulaarsest alusmembraanist ja välimisest podotsüütide kihist, mille vahelduvad jalaprotsessid on sillatud pilu diafragmaga. Sõela mitmekihilised omadused põhjustavad pooride suuruse järkjärgulist vähenemist. Viimastel aastatel on tänu geneetiliste loommudelite väljatöötamisele õnnestunud tuvastada selle barjääri terviklikkuse eest vastutavad peamised komponendid. Praegu omistatakse kõige olulisemat rolli glomerulaarse basaalmembraani (GBM) mõnedele struktuurikomponentidele (nt IV tüüpi kollageen ja laminiin 2) ja podotsüütide glükokalüksi valkudele (nt podotsiin ja nefriin) [21,22]. Podotsüütide funktsioon ei piirdu aga sõelumisega. On näidatud, et nii inimese kui ka looma podotsüüdid endotsütoosivadalbumiinin vitro [23,24]. Andmed viitavad ka sellele, et podotsüüdid puhastavad valke GBM-ist transtsütoosi kaudu [25]. Need uuringud näitavad, et podotsüüdid internaliseeruvadalbumiinja teisi plasmavalke (nt IgG) ning takistavad sel viisil glomerulaarfiltratsiooni barjääri (GFB) ummistumist.

Glomerulaarse läbilaskvuse mõõt on glomerulaarsõelustegur (GSC), mis on antud molekuli kontsentratsiooni suhe primaarses filtraadis selle plasmakontsentratsiooni. Astealbumiinläbitungimine on teema, mis tekitab palju vaidlusi ja erinevates eksperimentaalsetes mudelites määratud GSC väärtused erinevad kuni kolme suurusjärgu võrra.

Teoreetilised arvutused näitavad, et selle barjääri pooride läbimõõt on umbes 4 nm ja on suhteliselt kõrge glükoosaminoglükaanide sisalduse tõttu negatiivselt laetud. Seetõttu peaks suurema läbimõõduga ja/või keskmise negatiivse netolaenguga osakeste filtreerimine olema keeruline. Kuju poolest onalbumiinmolekul meenutab ellipsoidi suure ja väikese läbimõõduga vastavalt 14 nm ja 3,8 nm ning selle tulemuseks olev laeng on -15 (pI=4.5). Eelnimetatud omadustega molekuli korral GSC peaks olema suhteliselt madal ja jääma vahemikku (5.10-4-7.10-4)[26,27]. Kontsentratsioonalbumiinplasmas on ligikaudu 45 g/l, seega peaks selle kontsentratsioon primaarses filtraadis kõikuma 22 ja 32 mg/l vahel [28]. Need väärtused on sarnased haruldasi haigusi põdevate patsientide vaatluste tulemustegaalbumiinneerukäitlemine või loomkatsete mudelite kasutamine. Tervetel rottidel (6.10-4) varajaste proksimaalsete tuubulite lõikude mikropunktsioonimeetodil saadud tulemused on suurel määral kooskõlas teoreetilise mudeliga [27,29]. Nõukogu peasekretariaatalbumiinTubulaarse albuminuuriaga patsientide Fanconi sündroomiga patsientide uriinikontsentratsioon arvutatuna on veidi madalam kui teoreetiliste väärtuste alumine vahemik (8.0.10-5)[30]. Seevastu GSC arvutati uriini põhjalalbumiinFarmakoloogiliselt inhibeeritud tubulaarse reabsorptsiooniga rottidel on kontsentratsioon veidi suurem (3,3·10-4)[31]. Veelgi enam, uuringutes isoleeritud neeruga, mida perfuseeriti 8 kraadi juures, kus tubulaarne aktiivsus on rakumembraani voolavuse puudumise tõttu täielikult pärsitud, olid GSC väärtused veelgi kõrgemad (110-3)[32]. Eelnimetatud lahknevused on seletatavad kasutatud mõõtmismeetodite tehniliste piirangutega. Näiteks on mikropunktsioonitehnoloogia kasutamisel oht, et kogutud proov võib saastuda pipeti projektsiooni käigus kahjustatud kapillaaride plasmaga ja seetõttu ei kajasta see tegelikku filtraati, kuna valkude imendumine toimub väga kiiresti. proksimaalse tuubuli esimene osa. Fanconi sündroomiga patsientide andmete puhul ei ole võimalik täpselt hinnata proksimaalsete tuubulite kahjustuse astet ja tuleks eeldada, et valkude reabsorptsioon ei ole täielikult pärsitud. Sama kehtib ka mudelite kohta, millel on farmakoloogiline reabsorptsiooni inhibeerimine. Samuti on isoleeritud elundeid kasutavate katsete andmeid raske tõlgendada, kuna hemodünaamika on täiesti erinev kui in vivo. Vaatamata GSC väärtuste erinevustele, mis on määratud erinevate tehnikatega, oli paljude aastate jooksul üldiselt aktsepteeritud paradigma see, et glomerulaarfiltratsioonalbumiinon suhteliselt väike ja seda iseloomustab GSC indeks alla 1.10-3.

In situ kahe fotoni mikroskoopia vähese invasiivse tehnikaga saadud tulemused on viimastel aastatel tekitanud suuri poleemikat. Määratud GSC oli varasemate uuringutega võrreldes oluliselt kõrgem (2-4.10-2). Fluorestsentsmärgisegaalbumiinmanustati intravenoosselt diabeetilistele München-Wistari rottidele, kellel olid pinnaglomerulid ja normaalne buliimia. GSC määrati, võrreldes plasma fluorestsentsi intensiivsust glomerulaarkapillaarides ja primaarset filtraati Bowmani ruumis. Sarnased väärtused saadi sõltumata kontsentratsioonist ja märgistamismeetodistalbumiinmanustamine (boolus/infusioon)33]. Need andmed on kooskõlas varasemate uuringutega rottidel, kus puromütsiinaminonukleosiidi manustamine kutsus esile proteinuuria. See ravimist põhjustatud hüpoalbumineemia näitab seerumi enam kui 60% langustalbumiinkontsentratsioon. Võrreldes tervete katsealustega ei olnudalbumiinpuromütsiiniga kokkupuutunud rottide proksimaalsete tuubulite rakkude harja piiril tagasihaarde, mille tulemusena suurenes neerudealbumiineritumise indeks üle 300 mg päevas [34]. Reabsorptsiooni puudumist seostati megaliini, V-ATPaasi ja klatriini ekspressiooni märgatava vähenemisega tuubuli apikaalses pooluses [35]. Eespool nimetatud uuringute autorid usuvad, et glomerulaarnealbumiinfiltreerimine on väga tõhus protsess, mis põhineb tavaliselt statsionaarsel konvektiivsel voolul, mitte difusioonil, ning et filtri suurusest tulenevad piirangud.albumiinglomerulaarbarjääri molekulid ja struktuurilised omadused ei ole nii suured kui oodatud. Selle tulemusena viitavad nad sellele, et albuminuuriat põhjustab ainult ebanormaalnealbumiinreabsorptsioon ja see ei ole glomerulaarbarjääri kahjustuse tulemus, nagu varem arvati. Alternatiivset mudelit on tutvustatud paaris arvustuses [36-38].

Glomerulaarbarjääri selektiivsust, mis oli seotud laenguga, varasemates uuringutes tegelikult ei täheldatud [39, 40]. Suurenenud filtreerimine võib olla seotud ka tasutaalbumiinläbitungimine läbi suurte pooride läbimõõduga 75-110 A, mille olemasolu glomerulaarbarjääris soovitavad Ohlson jt.[32] uuringus valgu filtreerimise kohta isoleeritud perfuseeritud neerus. Selliste pooride esinemist in vivo kinnitasid uuringud Fanconi sündroomiga patsientidega, kelle uriinis leiti märkimisväärses koguses suuremaid valke, nagu transferriini või IgG [30].

Kuid Russo jt saadud tulemused. [33] olid teadusringkonnad ebausaldusväärsed. Gekle [41] tõi välja, et kui kahefotoni mikroskoopia tehnikat saab edukalt kasutada madala molekulmassiga ühendite filtreerimise hindamiseks, siisalbumiin, võib see kaasa tuua eksitavaid tähelepanekuid. Nii suure erinevusega märgistatud kontsentratsioonisalbumiintuubuli plasmas ja luumenis võis taustmüra tõttu filtraadi fluorestsentssignaali oluliselt suurendada. Lisaks rõhutas autor, et proksimaalsete tuubulite reabsorptsioonisüsteem ei olnud tõenäoliselt piisavalt tõhus, et transportida nii suurt hulkaalbumiin. Veelgi enam, de Borst [42] märkis, et esitatud tulemused ei võimalda teha nii ühemõttelist järeldust ja väitis, et täheldatud mõju võib vallandada suurte koguste mürgine toime.albumiinproksimaalsetel tubulaarsetel epiteelirakkudel. On näidatud, et pikaajalinealbumiinkokkupuude vähendab endotsütoosi proksimaalsetes tuubulite rakkudes [43]. Lisaks teatasid teised uuringud, et kõrgealbumiintasemed indutseerivad apoptoosi proksimaalsetes tuubulite rakkudes megaliini, proteiinkinaasi B ja Bad valgu vähendamise kaudu [44]. Omakorda Remuzzi jt kommentaaris. [45] lisasid autorid Müncheni-Wistari rottide mikropunktsiooni tulemused, mis on kooskõlas eelnevalt määratud GSC väärtustega ja mida pole kunagi varem avaldatud. Eelnimetatud rottide puhul paiknes neeru pinnal glomerulite alamhulk, mis võimaldas ekstraheerida ultrafiltraati otse Bowmani ruumist, välistades seega reabsorptsiooni mõju tuubuli esimeses osas 46]. Kindlasti on vaja täiendavaid uuringuid, et selgelt määratleda GSC tegelikud väärtusedalbumiinfiltreerimine.

cistanche meessoost eelised

3.2. Albumiini reabsorptsioon

Saitalbumiinreabsorptsioon on hästi äratuntav. Alates 1960. aastate algusest läbi viidud uuringud, milles on kasutatud palju mikroskoopilisi tehnikaid, näitavad kahtlemata, et see protsess toimub proksimaalses tuubulis, olles kõige tõhusam selle varases segmendis [26]. In vivo mikropunktsiooni kasutamisega tehti kindlaks, etalbumiinomastamine toimub sarnases koguses proksimaalse keerdtorukese varases ja hilises osas ning osaliselt ka sirge tuubuli laskuvas osas. Pole märkimisväärsetalbumiinnefroni teistes osades täheldati imendumist [27]. Kuid mehhanismalbumiinkasutuselevõtt jäi pikka aega seletamatuks. Proksimaalne tuubul on vooderdatud tiheda kuubikujulise epiteeliga. Seega rakusisene tungiminealbumiinepiteeli kaudu vereringesse tundus algusest peale ebatõenäoline. Seda takistaks ka selle suhteliselt suur suurus ja madal kontsentratsioon filtraadis [46]. Üldised kineetilised omadusedalbumiinImendumisprotsessi tagasid Parki ja Mackini 1984. aasta pioneeruuringud,[47] kasutades isoleeritud perfuseeritud neerutuubuleid. Nad näitasid kahe neeldumissüsteemi olemasolu: esimene, suure võimsusega madala afiinsusega süsteem, mida iseloomustab Michaelise konstant (Km) 1,2 mg/mL ja (Bmax) 3,7 ng/min tuubuli pikkuse mm kohta, ja teine, madala võimsusega süsteem – kõrge afiinsus, Km 0.031 mg/mL ja sidumisvõime Bmax 0,064 ng/min tuubuli pikkuse mm kohta.

Uuringud endotsütoosi protsessi kohta vedelfaasis (pinotsütoos) proksimaalsetes tubulaarsetes epiteelirakkudes näitasid, et see jätkub liiga vähese efektiivsusega, et selgitadaalbumiin. Selle valgu imendumine toimub peaaegu 40-korda kiiremini kui pinotsütoosiprotsessis imenduvate ühendite puhul, nagu dekstraan või inuliin [48].

1990. aastatel tehtud katsed näitasid, et kasutuselevõttalbumiinon suuresti spetsiifiline protsess. Märgistatud siduminealbumiinmärgistamata molekulide liig võib peaaegu täielikult pärssida. Lisaks märgistamataalbumiinsuurendab märgistatud molekulide dissotsiatsiooni proksimaalsest tubulaarsest epiteeli rakumembraanist. Neid iseloomustab dissotsiatsioonikonstant Ka vahemikus 100-300·10-"M (7-20 mg/L). Albumiini sidumise kineetika näitab vähemalt ühe sidumissaidi olemasolu. See omadus viitas sellele, et peamine roll onalbumiinreabsorptsiooni mängib adsorptiivne endotsütoos. Kinnitati, et selle protsessi farmakoloogiline inhibeerimine rottidel endosoomide leelistamisel NHCl või bafilomütsiin A1-ga suurendabalbumiineritumine uriiniga [43,49].

Lisaks näitasid proksimaaltuubulitest pärinevate opossum-neerurakkude (OK-rakkude) uuringud, etalbumiinendotsütoos sõltub tsütoskeleti terviklikkusest. Aktiini polümerisatsiooni inhibeerimine tsütokalasiin D poolt põhjustab peaaegu täieliku peatamisealbumiinimendumine. Ilmselt kiirendavad protsessi ka interaktsioonid mikrotuubulitega. Märkimisväärne imendumise väheneminealbumiintäheldati nokodasooli toimest tingitud mikrotuubulite katkemise tagajärjel, kuid lõpetamine ei olnud täielik. Näib, et vesiikulite liikumine rakumembraanist endosomaalse sektsiooni suunas endotsütoosi algfaasis sõltub aktiini skeleti terviklikkusest ja hilisemas faasis täheldatakse koostoimeid mikrotuubulitega. Teisest küljest näitasid need uuringud, et klatriinisõltuv endotsütoos on molekulide reabsorptsiooni domineeriv mehhanism [50,51]. Kuigi kaveoliini ekspressioon tuvastati proksimaalsete tubulaarsete epiteelirakkude apikaalses membraanis, ei teatatud kunagi kaveoliinist sõltuvast endotsütoosist [52,53].

Alles hiljutised uuringud on selgitanud selle molekulaarset mehhanismialbumiinproksimaalses tuubulis suurel määral. Selgub, et kubiliini interaktsioon amnioni vähem valguga (AMN) on vajalik selle valgu tõhusaks omastamiseks proksimaalses tuubulis. Selle kompleksi tiheda seose ja funktsionaalse sõltuvuse tõttu nimetatakse seda CUBAM-iks. Lisaks sõltub selle kompleksi õige ekspressioon ja tõhus toimimine teisest endotsüütide retseptorist – megaliinist [54-56]. CUBAM-i ja megaliini normaalne neeruekspressioon ja -funktsioon on vajalikud tõhusaks omastamiseksalbumiinproksimaalsetes tubulaarsetes rakkudes, nagu nähtub albuminuuria tõenditest mitme päriliku või omandatud haiguse korral, mis puudutavad neid endotsüütseid retseptoreid (tabel 1).

Retseptorkompleksi üldised struktuurid ja funktsionaalsed seosed on esitatud joonisel 1. Hiljuti näitasid uuringud hepatotsüütide tuumafaktori I knockout hiirtega, et see valk kontrollib mõlema retseptori konstitutiivset ekspressiooni [63]. Megaliin, kubiliin ja amnion esindavad vähem tuntud domeene ja motiive. Megaliin seob oma komplemendi tüüpi korduste kaudu mitmesuguseid filtreeritud valke ja on võimeline tsütoplasmaatilises sabas NPXY motiivide kaudu ligande sisestama. Cubilin sisaldab mitut sidumisdomeeni (CUB-domeeni) ja epidermise kasvufaktori tüüpi (EGF-tüüpi) kordusi perifeerse membraanivalguna, mis sõltub megaliinist ja/või AMN-st. AMN sisaldab NPXY-motiivi ja tõenäoliselt abistab ka kubiliin endotsütoosil. nagu rakusisese transpordi puhul sünteesi ajal.

Tabel 1. Albumiini neerutalitluse kahjustusega seotud häired	Joonis 1. Endotsüütiline megaliin-kubiliini ambitsioonideta kompleks neeru proksimaalse tuubuli apikaalses membraanis.

OSA Ⅱ saamiseks klõpsa SIIA