Uriini metaboloomika paljastab naissoost ME/CFS-patsientide anomaalse taastumise pärast maksimaalset pingutust, 3. osa

Miks me oleme väsinud? Kuidas saame väsimusprobleeme lahendada?

【Kontakt】E-post: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

3. Arutelu

See on esimene kord, kui ME / CFS-i patsientide uriini metabooli on iseloomustatud enne ja pärast treeningut, kui ME / CFS-i patsientidel esineb PEM. Paljusid neist metaboliitidest ei ole kunagi varem ME/CFS-i patsientidel mõõdetud, kuna varasemad uriini metaboolsed uuringud ME/CFS-i puhul on piirdunud vähem kui 50 metaboliidiga ja praeguses uuringus mõõdeti 1403. Lisaks on istuva eluviisiga tervete kontrollide kasutamine, et võtta arvesse kehalise aktiivsuse tase, mis võib mõjutada algtaseme ja treeningujärgset metaboliitide taset, on praeguse uuringuplaani peamine eelis, mida ei ole varasemates uuringutes kasutatud. Meie tulemused näitasid metaboliitide taseme laialdast tõusu kontrollrühmade uriinis 24 tundi pärast treeningut, mida ME/CFS-iga patsientidel ei täheldatud, kusjuures 110 neist ühenditest omasid olulist koostoimet haigusseisundi vahel (ME/CFS või kontroll). ) ja aeg (alustase vs. treeningujärgne) (täiendav joonis S2). Lisaks arvukatele uriini metaboliitide taseme analüüsidele andis metaboliitide tasemete korrelatsioon uriinis ja plasmas täiendavaid tõendeid metaboolse düsregulatsiooni kohta ME / CFS-i patsientidel pärast treeningut. See analüüs andis täiendavaid tõendeid patofüsioloogiliste muutuste kohta mitmes alamrajas, samuti tõendeid erinevuste kohta täiendavates alamteedes, millel ei olnud palju olulisi erinevusi ME / CFS-i patsientide ja kontrollide vahel, kui vaadelda uriini metaboliitide taset eraldi.

Cistanche võib toimida väsimuse ja vastupidavuse suurendajana ning eksperimentaalsed uuringud on näidanud, et Cistanche tubulosa keetmine võib tõhusalt kaitsta kaaluga ujumishiirte kahjustatud maksa hepatotsüüte ja endoteelirakke, reguleerida NOS3 ekspressiooni ja soodustada maksa glükogeeni tootmist. sünteesi, avaldades seega väsimusevastast toimet. Fenüületanoidglükosiidide rikas Cistanche tubulosa ekstrakt võib märkimisväärselt vähendada seerumi kreatiinkinaasi, laktaadi dehüdrogenaasi ja laktaadi taset ning tõsta hemoglobiini (HB) ja glükoosi taset ICR hiirtel ning see võib mängida väsimusevastast rolli, vähendades lihaskahjustusi. ja piimhappega rikastamise edasilükkamine energia salvestamiseks hiirtel. Ühendi Cistanche Tubulosa tabletid pikendasid märkimisväärselt raskust kandvat ujumisaega, suurendasid maksa glükogeenivaru ja vähendasid seerumi uurea taset pärast treeningut hiirtel, näidates selle väsimusevastast toimet. Cistanchise keetmine võib parandada hiirte vastupidavust ja kiirendada väsimuse kaotamist, samuti võib seerumi kreatiinkinaasi taseme tõusu pärast koormust vähendada ja hoida hiirte skeletilihaste ultrastruktuuri pärast treeningut normaalsena, mis näitab, et sellel on mõju. füüsilise jõu suurendamiseks ja väsimuse vastu võitlemiseks. Cistanchis pikendas ka märkimisväärselt nitritiga mürgitatud hiirte elulemusaega ja suurendas tolerantsust hüpoksia ja väsimuse vastu.

Klõpsake kogu aeg väsimust

3.1. Võrdlus varasemate uriini metabolismi uuringutega ME/CFS-i patsientidel

Üldiselt ei ole meie tulemused kooskõlas mõne varasema uuringuga, milles mõõdeti uriini metaboliite ME / CFS-i patsientidel võrreldes mitte-ME / CFS-i patsientidega. Oma tulemuste paremaks võrdlemiseks varasemate uuringutega, kus mõõdeti vähem metaboliite, võrdlesime LMM-i algtaseme tulemusi p < 0.05 eelmiste uuringutega. Ainus ühend, mis osutus oluliseks ühes teises ja meie uuringus, oli alaniin, kuigi eelmises uuringus leiti, et alaniin oli naispatsientidel madalam kui kontrollrühmas (BH-reguleeritud p-väärtus < 0,05) ja meie uuringus oli keskmine normaliseeritud kontsentratsioon ME/CFS-iga patsientidel kõrgem kui kontrollrühmadel [20]. Siiski leidsid mitmed uuringud algtasemel erinevusi ühendites, mis muutusid ME/CFS-iga patsientidel ja kontrollrühmal treeningu taastumise ajal erinevalt, sealhulgas fenüülalaniin (madalam ME/CFS-i patsientidel [23,24]) ja valiin (madalam ME/CFS patsiendid [20]). Nii fenüülalaniini kui ka valiini tase suurenes märkimisväärselt ka istuvates kontrollides pärast treeningut käesolevas uuringus, seega on võimalik, et teiste uuringute kontrollrühmad olid aktiivsemad ja neil oli juba kõrgem uriini fenüülalaniini tase. Üheski teises uuringus ei värvatud konkreetselt istuvaid mitteME/CFS-i isikuid, kuigi ühes uuringus püüti sobitada "üldise elustiiliga" [23]. Armstrong et al. uuris Pearsoni korrelatsioone uriini ja plasma metaboliitide vahel ME/CFS-i patsientidel ja kontrollrühmadel algtasemel ning leidis erinevusi atsetaadis, laktaadis ja fenüülalaniinis lävega |R| > 0,4 ​​kummaski rühmas [20]. Atsetaat on meie testis tuvastamiseks liiga väike ja me ei tuvastanud erinevusi plasma ja uriini korrelatsioonides laktaadis või fenüülalaniinis.

McGregor ja tema kolleegid uurisid ka muutusi uriinis ja plasma metaboloomides ME / CFS-i patsientidel, kellel oli PEM [19]. Nad kasutasid uuringut ME/CFS-i patsientide eraldamiseks, kellel oli praegu viimase seitsme päeva jooksul PEM, ja avastasid, et kolmekümnest mõõdetud uriini metaboliidist kaheksal oli ME/CFS-i rühmas kontrollrühmaga võrreldes oluliselt madalam kontsentratsioon. Nendest ainult seriinil oli meie analüüsides olulisi erinevusi; see suurenes pärast treeningut kontrollrühmas (täiendav andmefail S2 – LMM tulemused). Kahe uriini metaboliidi, atsetaadi ja metüülhistidiini, tasemed olid samuti oluliselt erinevad PEM-i ja mitte-PEM-i rühmas [19]. Selles uuringus testitud metüülhistidiinide tasemed ei erinenud oluliselt LMM-analüüsis, kuid leidsime erinevusi 1-metüülhistidiini ja N-atsetüül-3-metüülhistidiini plasma ja uriini korrelatsioonides (joonis 9). McGregor jt. Samuti leiti seitsmepäevase PEM-skoori seoseid mitme metaboliidiga plasmas ja uriinis [19].

3.2. Uriini metaboliitide taseme tõus pärast treeningut istuva elundi kontrollimisel on kooskõlas varasemate uuringutega

Naiste uriini metaboloomi 24 tundi pärast treeningut ei ole hästi iseloomustatud. Meile teadaolevalt ei ole üheski uuringus mõõdetud uriini ainevahetust algtasemel võrreldes naistega 24 tundi pärast treeningut. Ühes uuringus mõõdeti meestel 32 metaboliiti uriinis enne treeningut ja 24 tundi pärast treeningut, võrreldes üheksat võistlevat jalgratturit kaheksa terve, kuid treenimata sama vanuse (50–60-aastased) mehega [48]. Kuigi nende uuring keskendus sportlaste võrdlemisele treenimata katsealustega, täheldati kontrollrühmas laktaadi-, atsetaadi- ja hüpoksantiinisisalduse kõrgeid muutusi pärast treeningut (rohkem kui kaks korda). Atsetaati meie uuringus ei mõõdetud ning meie naiste kontrollrühmas ei erinenud ei laktaadi ega hüpoksantiini tase algtasemest treeningujärgselt. Mukherjee et al. leidis olulisi erinevusi sportlaste ja kontrollrühmade vahel kaheksas mõõdetud metaboliidis, mis olid seotud erinevate biokeemiliste radadega [48]. Seetõttu on praeguse uuringu tugevuseks istuva tervisliku kontrolli valimine, mitte aktiivsemad inimesed, kellel võib regulaarse treeningu tõttu olla muutunud uriini metaboloom.

Kuigi 24 tundi pärast treeningut on uriini metaboloomide kohta avaldatud kirjandust vähe, on mitmeid uuringuid, mis mõõdavad uriini metaboliite nii meestel kui naistel varasematel treeningjärgsetel ajahetkedel (vaadatud artiklis [49]). Üks järeldusi, mis uuringute vahel oli kooskõlas, on see, et enamiku lipiidide kontsentratsioon suureneb pärast treeningut biovedelikes, sealhulgas uriinis. Eelkõige on näidatud, et atsüülkarnitiini kontsentratsioonid suurenevad veres ja uriinis vastuseks treeningule. See on kooskõlas meie uuringu tulemustega, kus mitmete atsüülkarnitiini ühendite sisaldus kontrollrühmade uriinis suurenes pärast treeningut oluliselt (joonis 7A).

Suurimas uuringus, mis hõlmas naisi (kokku 255 katsealust, 107 naist), leiti ka ulatuslikke metaboolseid muutusi uriinis pärast treeningut, kusjuures 37 mõõdetud metaboliiti 47-st muutusid pärast FDR-i korrigeerimist oluliselt ja 33 puhul suurenes pärast treeningut [50] . See on kooskõlas meie järeldusega ulatuslike metaboolsete muutuste kohta pärast treeningut kontrollsubjektide uriinis, kusjuures enamikul muudetud ühenditel on kontsentratsioon suurenenud. See uuring lõpetas ka soopõhise võrdleva analüüsi, kuid leidis ainult kaks metaboliiti, millel oli naistel ja meestel oluliselt erinev treeningjärgne ja algtaseme suhe.

Schranner et al. Ülevaate kohaselt ei ole aminohapete tulemused nii järjekindlad kui lipiidide kohta, mis tavaliselt suurendavad treeningut [49]. Mõned leiud uriinis olid siiski järjepidevad vähemalt kahes uuringus (kuigi kõik treeningjärgsed ajapunktid on kombineeritud), sealhulgas järgmiste ühendite sisalduse suurenemine uriinis pärast treeningut: alaniin, O-atsetüülhomoseriin, 5- hüdroksüindoolpüruvaat, ksanturenaat, L-metanefriin, N-atsetüülvanilalaniin ja N-(karboksüetüül)arginiin. Vähemalt kahes uuringus leiti, et pärast treeningut väheneb uriinis järgmiste ühendite sisaldus: glütsiin, histidiin, trimetüülamiin-n-oksiid. Võrreldes neid tulemusi meie uuringuga, ei erinenud enamik metaboliite enne ja pärast treeningut oluliselt või neid ei mõõdetud meie uuringus. Siiski avastasime ka kontrollide alaniini taseme olulise tõusu, mis on kooskõlas läbivaadatud uuringutega. Meie uuringus tõusis glütsiini tase ka pärast treeningut kontrollrühmades, mitte langes. Kuid Kistner jt. uuring, mis hõlmas paljusid naisi, leidis samuti, et glütsiini tase on pärast treeningut oluliselt suurenenud [50].

3.3. Erinevused istuvate kontrollide ja ME / CFS-i patsientide vahel lipiidide superrajal

Paljud lipiidide alarajad olid selles uuringus patsientide ja kontrollide uriinis oluliselt erinevad, sealhulgas atsüülkarnitiini rasvhapete metabolism. Atsüülkarnitiini metaboliitide sisaldus uriinis suurenes pärast treeningut tervetel kontrollidel ja treeningust põhjustatud muutused olid kontrollrühma ja ME/CFS-patsientide vahel oluliselt erinevad (joonised 3, 7 ja S4). Lisaks, kuigi deoksükarnitiin ei ole atsüülkarnitiin, korreleerus karnitiini metabolismi lipiidide alamraja plasma ja uriini vahel ME/CFS-i patsientidel erinevalt võrreldes kontrollidega (joonis 9). Atsüülkarnitiinid on energia metabolismis väga olulised, kuna need on vajalikud rasvhapete transportimiseks mitokondritesse oksüdatsiooniks. Pika ahelaga rasvhapete oksüdatsioon on peamine energia metabolismi viis aeroobse treeningu ajal. Treeningu ajal häiritud atsüülkarnitiini metabolism võib ME / CFS-i patsientidel põhjustada treeningu talumatust ja PEM-i. Teises uuringus, milles vaadeldi ainult katsealuseid algtasemel ja mis ei kaasanud spetsiaalselt istuvaid kontrolle, leiti, et atsüülkarnitiini alarada on ME/CFS-i patsientidel oluliselt erinev kontrollrühma patsientidest, kusjuures kaheksast ühendist viiel on patsientide kontsentratsioon madalam. [11]. Kui analüüsiti ainult algtaseme subjekte, näitasid spetsiifilised atsüülkarnitiini mõõtmised seerumis, et ühend oli ME/CFS-i patsientidel madalam kui kontrollrühmas ühes aruandes [51], kuid teises uuringus ei täheldatud erinevusi uriini või plasma tasemetes [52]. Suurema kohordi plasmas, mille alamhulga käesoleva uuringu subjektid on, muutus karnitiini keemiline klaster taastumise ajal oluliselt ka istuvatel naistel (määratletud kui erinevus 24 tunni ja 15 minuti vahel pärast treeningut ), kusjuures enamiku ühendite arv suureneb pärast treeningut [25]. Ei leitud, et karnitiini keemiline klaster oleks ME / CFS-i patsientidel treeningu taastumise ajal oluliselt muutunud. Kuigi see klaster sisaldab rohkem kui lihtsalt atsüülkarnitiine, on atsüülkarnitiinid liikmed ja aitavad kaasa selle olulisusele ka praeguses uuringus keemilise sarnasuse rikastamise analüüsis (täiendav joonis S4). Samuti on ex vivo näidatud, et palmitoüülkarnitiin, mida lihastes pärast treeningut mööduvalt suureneb, võib toimida pingutussignaalina lihastest neuronite alamhulgale [53].

Atsüülglütsiini rasvhapete metaboliidid on ainsad ühendid, mida leiti uriinist märkimisväärselt erinevatel kontsentratsioonidel ME/CFS-is ja kontrollrühmas ühel ajahetkel (24 tundi pärast treeningut) ja erinevat atsüülglütsiini ühendit, 3-hüdroksübutüroüülglütsiini. , oli ME/CFS-i patsientidel märkimisväärne negatiivne korrelatsioon, kui korreleeriti U3/U1 ja P3/P1 (joonised 5 ja 9). Lisaks muutus cis-3,4-metüleenheptanoüülglütsiin füüsilisest taastumisest ME/CFS-i patsientidel võrreldes kontrollrühmaga erinevalt (LMM, täiendav joonis S2). Kuigi atsüülglütsiini metabolism ei ole üks alamradadest, mis ainuüksi kontrollrühmas pärast treeningut oluliselt suurenes, oli see ME/CFS-i patsientide ja kontrollide puhul oluliselt erinev nii 24 tundi pärast treeningut kui ka erinevust analüüsides. treeningujärgsetes/algtaseme suhetes (joonis 3). Teatud atsüülglütsiinide eritumist uriiniga muudavad ka mitokondrites rasvhapete oksüdatsiooniga seotud häired, sealhulgas keskmise ahelaga atsüülkoensüüm A (CoA) dehüdrogenaasi (MCAD) puudulikkus [54]. Meie töörühm on täheldanud, et rasvhapete oksüdatsioon erineb immuunrakkudes ME/CFS-patsientide ja kontrollide puhul [55].

3.4. Erinevused istuvate kontrollide ja ME / CFS-i patsientide vahel aminohapete superrajal

Samuti leidsime palju erinevusi uriini aminohapetes ME/CFS-iga patsientidel ja treeningjärgsetel kontrollidel. Kaks neist radadest paistsid silma, kuna neil esines olulisi muutusi ME/CFS-patsientide ja kontrollide osas kõigis meie analüüsides, sealhulgas KEGG raja analüüsis, ja neid käsitletakse allpool.

Maksa karbamiiditsükkel on treeningu metabolismi oluline osa, kuna see on vajalik treeningu ajal tekkiva suure ammoniaagitaseme eemaldamiseks [56,57]. Germain ja tema kolleegid leidsid ka, et uurea tsükkel ja ammoniaagi ringlussevõtu SMPDB rajad muutusid oluliselt ME/CFS-i naispatsientide ja kontrollide vahelises plasmas raja analüüsis, kui võrrelda metaboliitide tasemete erinevust 24 tundi pärast CPET-i (P3) ja 15 minutit pärast CPET-d (P2) [25]. Ammoniaagi kogunemist on varem seostatud neurotoksilisuse ja treeningust põhjustatud väsimusega [56,57]. Uurea tsükli düsregulatsioon uriinis ja plasma metaboloomid pärast treeningut ME/CFS patsientidel võib põhjustada ammoniaagi kogunemist, kuid 1403 ühendit, mida Metabolon® mõõdeti uriinis, ei sisaldanud ammoniaaki, kuna see on lenduv ühend ja väiksem kui Metabolon® platvormi avastamispiir.

Tsüsteiin, metioniin, SAM ja tauriin on olulised aminohapped, kuna need on ainsad, mis sisaldavad väävlit, ning tsüsteiinil on ainulaadne võime moodustada disulfiidsidemeid. Tsüsteiini võib muundada ka glutatiooniks ja tauriiniks. Tsüsteiinil ja metioniinil on rakkude metabolismis palju rolle, kuid need on ka valkude peamised ehitusplokid [37]. Tänu oma tioolrühmale osaleb tsüsteiin paljude ensümaatiliste reaktsioonide katalüüsimisel ja redoks-homöostaasi säilitamisel. Muutused tsüsteiini metabolismis esinevad paljude neurodegeneratiivsete häirete, sealhulgas Alzheimeri tõve, Huntingtoni tõve ja Parkinsoni tõve korral [58]. Kui tsüsteiini, metioniini, SAM-i ja tauriini metabolism näitas meie uriini metaboolsete analüüside põhjal palju erinevusi patsientide ja kontrollide vahel, siis uriini ja plasma korrelatsioonid näitasid täiendavaid ühendeid, millel on märkimisväärsed erinevused ME/CFS-i patsientide ja kontrollide vahel, sealhulgas tsüsteiinis, mis on tekib siis, kui kaks tsüsteiini oksüdeeritakse, moodustades disulfiidsideme, ja tsüstationiin, mis on vaheühend tsüsteiini tootmisel metioniinitsüklis [37].

3.5. Piirangud

Meie uuringul on mitmeid olulisi piiranguid. Esiteks ei kontrollitud katsealuste toitumist ja metaboliitide toiduga tarbimine võib mõjutada nende eritumist uriiniga. Teiseks tunnistame, et KMI sobitamise puudumine ei ole ideaalne ja on selle uuringu piirang. Meie suurem ME / CFS-i patsientide ja tervete istuvate kontrollide kohort on BMI-ga sobitatud ja seetõttu ei ole see pilootuuringu laiendamine tulevikus probleemiks. Kolmandaks piirduvad meie tulemused naissoost ME / CFS-i patsientidega. Kuigi on väga oluline uurida mõlemat sugupoolt ME / CFS-is ja avastatakse üha rohkem soolisi erinevusi patofüsioloogias [25, 59, 60], otsustasime oma pilootuuringu keskenduda naistele, kuna ME on suurem haiguskoormus. /CFS naistel (60–65% naisi) [2]. Lisaks, kuna me registreerisime uriini metaboloomi ainult kahel ajahetkel, algtasemel ja 24 tundi pärast treeningut, ei saa me öelda, kas ME/CFS-i patsientidel on mõne sellise metaboliidi eritumise tase muutunud kas varem või hiljem. punkt kui juhtnupud. Patsientidel võib erituvate saaduste sisalduse suurenemine toimuda, kuid suurema viivitusega, sarnaselt sellele, kuidas ME/CFS-i patsientidel ilmneb hilinenud üldine taastumine treeningust. Siiski on ka võimalik, et see muutunud metaboolse eritumise puudumine on osa üldisest tervisliku metaboolse vastuse puudumisest treeningule.

4. Materjalid ja meetodid

4.1. Õppeained

Sellesse uuringusse kaasati kaheksa tervet istuvat kontrolli ja kümme ME / CFS-i patsienti. ME/CFS patsientidel diagnoositi Kanada konsensuskriteeriumid [3]. Sellesse uuringusse kaasatud 18 katsealust kuulusid suuremasse rühma, kuhu kuulus kokku 173 osalejat (ClinicalTrials.gov Identifier: NCT04026425) [61]. Selles pilootuuringus olid kõik katsealused naised. Katsealused värvati järgmiste kriteeriumide alusel. Kõik osalejad peavad olema vanuses 18–70 aastat. Subjektid jäeti kummastki rühmast välja, kui nad olid suitsetajad, rasedad või rinnaga toitvad, diabeetikud, tarbisid liiga palju alkoholi või neil oli ortopeediline piirang, mis ei võimaldanud neil CPET-i teha. Skisofreenia, raske depressiivse häire, bipolaarse häire või ärevushäire diagnoosid olid samuti mõlemas rühmas välistamiskriteeriumid. Lisaks jäeti välja terved istuvad kontrollid, kui neil diagnoositi autoimmuunhaigused. Neerufunktsioon oli kõigil selles uuringus osalejatel normaalne, mida hinnati järgmiste Quest Diagnosticsi standardsete laboratoorsete vereanalüüsidega: seerumi kreatiniin, vere uurea lämmastik ja hinnanguline glomerulaarfiltratsiooni kiirus (eGFR).

Seitseteist katsealust sooritasid treeningutesti Ithaca kolledžis Ithacas, New Yorgis ja üks katseisik viis läbi treeningutesti ID Medis Californias Torrance'is. Kõigil osalejatel paluti enne treeningut kaheks nädalaks loobuda toidulisanditest, sealhulgas probiootikumidest. Osalejatel paluti lõpetada valu- ja stimulantravi kaks päeva enne treeningkatset. Kõik patsiendid andsid kirjaliku teadliku nõusoleku ja Ithaca College'i IRB #1017-12Dx2 kiitis kõik protokollid heaks. Kõik osalejad täitsid Belli puude skaala [26], lühivormi{3}} terviseuuringu [62] ja kohandatud küsimustikud. ME / CFS-i patsiendid täitsid lisaks mitmemõõtmelise väsimuse loendi [63].

4.2. Kardiopulmonaarsete harjutuste testimine ja uriiniproovide kogumine

CPET viidi läbi statsionaarsel veloergomeetril järgmise protokolliga: 3 minutit puhkust, millele järgnes pidev rattasõit, mille puhul suureneb töökoormus 15 vatti treeningu minuti kohta kuni tahtliku kurnatuseni (umbes 8–10 min). Hingamisteede vahetussuhet (RER), mis on süsinikdioksiidi tootmise kiirus jagatud hapnikutarbimise kiirusega, mõõdeti tagamaks, et osalejad sooritasid testi piisava pingutusega (RER> 1, 1 näitab maksimaalset pingutust).

Kõik uriiniproovid koguti hommikul: (1) 15–20 minutit enne CPET-i ja (2) 24 tundi hiljem. Uriin koguti keset voolu steriilsesse uriinikogujasse, jagati alikvootidega, tsentrifuugiti 10,000 × g juures 10 minutit, et eemaldada rakujäägid, ja säilitati temperatuuril –80 ◦C. Uriiniproovid läbisid ühe külmutamise/sulatamise tsükli edasiseks alikvoodiks ja alikvoodid saadeti üleöö kuival jääl ettevõttesse Metabolon®.

4.3. Metaboloomiline analüüs

Metaboliitide mõõtmiseks kasutati Precision Metabolomics™ vedelikkromatograafia-tandem-massispektromeetria (LC-MS/MS) globaalset metaboloomika platvormi ettevõttes Metabolon®. Üksikasjalikke meetodeid on eelnevalt kirjeldatud [64]. Lühidalt, proovid ekstraheeriti metanoolis (5:1 metanool: proov) ja seejärel aurustati. Igas proovis tuvastati metaboliidid, kasutades nelja erinevat LC-MS/MS platvormi, mis olid optimeeritud hüdrofiilsete ja hüdrofoobsete ühendite jaoks ning kasutades nii positiivset kui ka negatiivset ionisatsiooni. Kogu kromatograafias kasutati Waters Acquity ülikõrge jõudlusega (UP)LC ja 5 µl süstimismahtu (iga platvormi jaoks sobivates lahustites taastati proovid). Kogu massispektromeetria viidi läbi ThermoScientific Q-Exactive kõrge eraldusvõimega/täpse massispektromeetriga kuumutatud elektropihustusionisatsiooni (HESI-II) allikatega ja Orbitrap massianalüsaatoritega, mis töötasid massiresolutsiooniga 35,{10}} skaneerimisvahemikuga 70–1000 m/ z. Metabolon® patenteeritud tarkvara kasutati katseproovide sobitamiseks 1. astme identifitseerimisstandardite võrdlusraamatukoguga, nagu on määratletud metaboloomika standardite algatuses, ja piigi kvantifitseerimiseks kasutati kõveraalust pindala. Väärtused normaliseeritakse töötlemata alade arvu alusel ja kõiki proove kasutati ühes partiis, nii et partii korrigeerimine polnud vajalik. Tundmatutel ühenditel ei ole standardit ja osaliselt iseloomustatud molekulid on need, mis ei ole standardi alusel ametlikult kinnitatud või mille jaoks standard puudub, kuid Metabolon® on oma identiteedis piisavalt kindel.

4.4. Andmetöötlus

Toorandmed normaliseeriti iga proovi osmolaalsusega ja iga metaboliidi andmed olid mediaankesksed 1-ni (toorandmed, sealhulgas osmolaalsus, on saadaval täiendavas failis S1). Puuduvad väärtused imputeeriti minimaalse väärtusega, välja arvatud ravimid, mis olid imputeeritud kui 0. Andmed transformeeriti log10 dispersiooni stabiliseeriva teisendusega (MetaboanalystR) [65,66]. Algselt mõõdeti kokku 1403 metaboliiti. Metaboliidid filtreeriti vastavalt modifitseeritud 80% reeglile: ühend kaasati, kui see tuvastati vähemalt 80% proovidest kas ME/CFS või kontrollrühmas [27]. Üldiselt vastas kriteeriumidele 1154 metaboliiti ja need kaasati järgmistesse analüüsidesse. Ainus analüüs, mis viidi läbi ilma filtreerimiseta, oli korrelatsioonide kohta plasma metaboliitidega. Iga metaboliidi treeningujärgne/algtaseme suhe arvutati 10-na, kui treeningujärgne väärtus miinus iga katsealuse algväärtus. Vulkaani graafiku joonistamiseks teisendati keskmised logaritmilised muutused (ME/CFS patsiendid vs kontrollrühmad) baasvalemi muutmise abil logaritmiliseks baasiks 2.

4.5. Andmete analüüs ja statistika

Iga metaboliidi ühemõõtmeline statistiline analüüs viidi läbi lineaarse segamudeli abil, millel oli fikseeritud haigusseisundi, ajapunkti, vanuse ja KMI mõju ning katsealuse juhuslik mõju (targemad [67] ja keskmised [68] R-paketid). Benjamini-Hochbergi (BH) meetodit kasutati valede avastamise määra korrigeerimiseks, kusjuures olulisuse lävena kasutati q < 0.1. EnhancedVolcano R paketti kasutati vulkaanialade jaoks [69].

ChemRICH in R kasutati mittekattuvate radade analüüsi läbiviimiseks Metabolon®-i määratletud alamradade ja radade järjestusega [29]. ChemRICHi veebitööriista kasutati keemilise sarnasuse klastrite analüüsi tegemiseks [30]. Selle analüüsi jaoks sai kaasata ainult need ühendid, millel oli teadaolev SMILES-kood, kokku 516 ühendit. Mõlema ChemRICH analüüsi jaoks tehti rikastumisstatistika Kolmogorovi-Smirnovi testi abil, mis ei kasuta p-väärtuse olulisuse piiri, vaid võrdleb tõenäosusjaotust nullhüpoteesi tõenäosusjaotusega [70]. Metabolon® alamradade jaoks valiti olulisuse läveks q < 0.05 ja keemiliste klastrite jaoks q < 0,15 (BH FDR korrektsioon). Mõlema puhul olid kõik q lävedest madalamad klastrid ka p < 0,05.

Raja rikastamine ja topoloogia analüüs viidi läbi, kasutades Metaboanalyst 5.{1}} veebitööriista [65] nii KEGG kui ka SMPDB inimese võrdlusmetaboloomide jaoks järgmiste parameetritega: statistika testi globaalne test ja suhteline vaheline kesksus sõlme tähtsuse mõõt. Ühendid kaasati sellesse analüüsi, kui Metabolon® poolt antud HMDB ID ühtis HMDB ID-ga rakenduses Metaboanalyst. Ühe HMDB ID dubleerivate ühendite puhul kaasati ainult esimene. Selle tulemusena saadi 453 kaasatud ühendit.

Katsealuste rühmitamine, kasutades nelja ühendit, mis olid patsientide ja kontrollide vahel pärast treeningut oluliselt erinevad, viidi läbi hierarhilise klastrite abil, kasutades kauguse mõõdikuna Eukleidilist kaugust, ja meetodit "Ward.D2" (pakend Heatmap R [71) ]).

Pearsoni korrelatsioonid uriini ja plasma vahel mõlemas biofluidis mõõdetud 727 metaboliidi puhul viidi läbi R-s (hmisc pakett). p-väärtused arvutati iga korrelatsiooni jaoks, kasutades t-testi nullhüpoteesiga, et korrelatsioonikoefitsient on võrdne 0, millele järgnes BH FDR korrektsioon, mille olulisuse künnis on q < 0.15. Joonise 8 puhul sõeluti ühendeid, et eemaldada need, millel olid äärmuslikud kõrvalekalded, kasutades modifitseeritud z-skoori meetodit, mis arvutab z-skoori, kasutades mediaani ja mediaani absoluuthälvet (kõrvalväärtuste pakett R, z-lävi=6).

Kui pole teisiti määratud, viidi kõik andmete visualiseerimised läbi paketi ggplot2 R abil. Kõikide analüüside jaoks valiti rangema Benjamini ja Yekutieli FDR-korrektsiooni asemel BH FDR-korrektsioon, kuna äärmiselt väike arv ühendeid leiti olevat kolineaarsed (0.75% sihtmärkidest oli absoluutväärtusega Pearsoni korrelatsioonikordaja > { {3}}.7).

5. Kokkuvõtted

Üldiselt esines uriini metaboolsuses olulisi erinevusi tervetel istuva eluviisiga kontrollidel ja ME/CFS-ga patsientidel vastuseks CPET-probleemile paljudes metaboolsetes super- ja alamteedes, hõlmates aminohappeid, lipiide, süsivesikuid, nukleotiide, ksenobiootikume ja tundmatuid. Need rajad on seotud paljude füsioloogiliste funktsioonidega, sealhulgas, kuid mitte ainult, energia metabolismis. See näitab, et ME/CFS-i patsientidel on üldine metaboolne düsregulatsioon, mis on osa nende treeningutalumatusest ja PEM-ist, mille puhul on soodustavaks teguriks muutunud metaboolne eritumine. Meie andmed viitavad sellele, et ME / CFS-i mitteomavate istuvate inimeste ainevahetuses toimuvad suured muutused, mis võimaldavad neil pingutusest taastuda, samas kui ME / CFS-i patsiendid ei suuda sarnaseid adaptiivseid reaktsioone teha. Tulevane töö hõlmab selle uuringu laiendamist palju suuremale kohortile, mis hõlmab mõlemat sugupoolt, et need tulemused kinnitada, uurida soolisi erinevusi uriini metaboloomides ja uurida, kas ME / CFS-i patsientidel on algtasemel uriini metaboliitide osas peenemaid erinevusi, mis võivad potentsiaalselt potentsiaalselt mõjutada. panustada tulevikus haiguse diagnostilisele testile.

Autori kaastööd:Kontseptualiseerimine, AG, KAG ja MRH; metoodika, AG, KAG, YVH ja MRH; formaalne analüüs, KAG, AG ja YVH; uurimine, KAG, AG ja YVH; kirjutamine – algse eelnõu ettevalmistamine, KAG, AG ja MRH; kirjutamine – arvustus ja toimetamine, kõik autorid; visualiseerimine, KAG ja AG; projektihaldus, MRH; rahastamise omandamine, MRH Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooni läbi lugenud ja sellega nõustunud.

Rahastamine:Seda uurimistööd toetasid riiklik neuroloogiliste häirete ja insuldi instituut (NINDS), NIH (U54NS105541) ja Amar Foundation. NIH-i tõlketeaduste edendamise riiklik keskus rahastas Weill Cornelli meditsiini kliinilise ja translatsiooniteaduse keskust (CTSC), et säilitada REDCapi andmebaasi UL1 TR 002384 kaudu.

Institutsioonilise ülevaatenõukogu avaldus:Uuring viidi läbi vastavalt Helsingi deklaratsiooni juhistele ja selle kiitsid heaks Ithaca kolledži institutsionaalne läbivaatamisnõukogu, Ithaca, New York, USA (protokoll 1017-12Dx2) ja Weill Cornelli meditsiinikolledži institutsionaalne ülevaatenõukogu ( protokoll 1708018518).

Teadliku nõusoleku avaldus:Kõigilt uuringusse kaasatud isikutelt saadi teadlik nõusolek.

Andmete kättesaadavuse avaldus:Kõik metaboliitide andmed iga subjekti kohta on saadaval esitatud täiendavates andmefailides.

Tänuavaldused:Carl Franconi haldas Cornelli ülikoolis andmebaasi ja biopanka. Vereproovid fraktsioneeris David Wang EVMED Researchis Workwell Foundationi toetusel ning Ivan Falsztyn, Carl Franconi, Ludovic Giloteaux, Madeline McCanne, Jineet Patel, Adam O'Neal, Alexandra Mandarano, Jessica Maya, Shannon Appelquist Cornelli ülikoolist. Täname järgmisi isikuid, kes osalesid osalejate sõeluuringus, treeningtestide tegemisel ja/või vere ja uriini kogumisel: Betsy Keller, John Chia, Jared Stevens, Tiffany Ong ja Maria Russell.

Huvide konfliktid:Autorid ei kinnita huvide konflikti. Rahastajatel ei olnud uuringu kavandamisel mingit rolli; andmete kogumisel, analüüsimisel või tõlgendamisel; käsikirja kirjutamisel; või tulemuste avaldamise otsuses.

Viited

1. Jason, LA; Mirin, AA Riikliku Meditsiiniakadeemia ME/CFS levimuse ja majandusliku mõju andmete ajakohastamine, et võtta arvesse rahvastiku kasvu ja inflatsiooni. Väsimus Biomed. Tervislik käitumine. 2021, 9, 9–13. [CrossRef]

2. Valdez, AR; Hancock, EE; Adebayo, S.; Kiernicki, DJ; Proskauer, D.; Attewell, JR; Bateman, L.; DeMaria, A., Jr.; Lapp, CW; Rowe, arvuti; et al. ME/CFS levimuse, demograafia ja kulude hindamine, kasutades laiaulatuslikke meditsiiniliste väidete andmeid ja masinõpet. Esiosa. Pediatr. 2018, 6, 412. [CrossRef] [PubMed]

3. Carruthers, BM; Jain, AK; De Meirleir, KL; Peterson, DL; Klimas, NG; Lerner, AM; Bested, AC; Flor-Henry, P.; Joshi, P.; Powles, AP; et al. Müalgiline entsefalomüeliit/kroonilise väsimuse sündroom: kliinilise tööjuhtumi määratlus, diagnostika- ja raviprotokollid. J. Kroonilise väsimuse sündroom. 2003, 11, 7–115. [CrossRef]

4. Chu, L.; Valencia, IJ; Garvert, DW; Montoya, JG Müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi pingejärgse halb enesetunne: patsiendikeskne läbilõikeuuring. PLoS ONE 2018, 13, e0197811. [CrossRef]

5. Stussman, B.; Williams, A.; Snow, J.; Gavin, A.; Scott, R.; Nath, A.; Walitt, B. Müalgilise entsefalomüeliidi/kroonilise väsimuse sündroomiga patsientide pingutusjärgse halva enesetunde iseloomustus. Esiosa. Neurol. 2020, 11, 1025. [CrossRef]

6. Stevens, S.; Snell, C.; Stevens, J.; Keller, B.; VanNess, JM Kardiopulmonaarse treeningu testi metoodika pingutustalumatuse hindamiseks müalgilise entsefalomüeliidi/kroonilise väsimussündroomi korral. Esiosa. Pediatr. 2018, 6, 242. [CrossRef]

7. Vanness, JM; Snell, CR; Stevens, SR Vähenenud kardiopulmonaalne võimsus pingutusjärgse halva enesetunde ajal. J. Kroonilise väsimuse sündroom. 2007, 14, 77–85. [CrossRef]

8. Keller, BA; Pryor, JL; Giloteaux, L. Müalgilise entsefalomüeliidi/kroonilise väsimussündroomiga patsientide võimetus reprodutseerida VO(2) piiki viitab funktsionaalsele kahjustusele. J. Transl. Med. 2014, 12, 104. [CrossRef]

9. Missailidis, D.; Annesley, SJ; Fisher, PR Müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimuse sündroomi aluseks olevad patoloogilised mehhanismid. Diagnostika 2019, 9, 80. [CrossRef]

10. Huth, TK; Eaton-Fitch, N.; Staines, D.; Marshall-Gradisnik, S. Kroonilise väsimussündroomi / müalgilise entsefalomüeliidi / süsteemse pingutustalumatuse haiguse (CFS / ME / SEID) metaboolse düsregulatsiooni süstemaatiline ülevaade. J. Transl. Med. 2020, 18, 198. [CrossRef]

11. Germain, A.; Barupal, DK; Levine, SM; Hanson, MR Metabolism ME/CFS-is paljastab atsüüllipiidide ja steroidide häiritud ainevahetuse. Metaboliidid 2020, 10, 34. [CrossRef]

12. Germain, A.; Ruppert, D.; Levine, SM; Hanson, MR Müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi avastamise kohordi metaboolne profileerimine näitab rasvhapete ja lipiidide metabolismi häireid. Mol. Biosyst. 2017, 13, 371–379. [CrossRef]

13. Germain, A.; Ruppert, D.; Levine, SM; Hanson, MR Müalgilise entsefalomüeliidi/kroonilise väsimussündroomi plasmametaboloomikast pärinevad potentsiaalsed biomarkerid põhjustavad haiguse sümptomatoloogias redoksi tasakaalustamatust. Metaboliidid 2018, 8, 90. [CrossRef]

14. Yamano, E.; Sugimoto, M.; Hirayama, A.; Kume, S.; Yamato, M.; Jin, G.; Tajima, S.; Goda, N.; Iwai, K.; Fukuda, S.; et al. Kroonilise väsimussündroomi indeksi markerid koos TCA ja uurea tsüklite düsfunktsiooniga. Sci. Vabariik 2016, 6, 34990. [CrossRef]

15. Armstrong, CW; McGregor, NR; Sheedy, JR; Buttfield, I.; tagumik, HL; Gooley, seerumi PR NMR metaboolne profileerimine tuvastab aminohapete häired kroonilise väsimussündroomi korral. Clin. Chim. Acta 2012, 413, 1525–1531. [CrossRef]

16. Armstrong, CW; McGregor, NR; Lewis, DP; tagumik, HL; Gooley, PR Fekaalse mikrobiota ja väljaheite, vereseerumi ja uriini metaboliitide seos müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi korral. Metabolomics 2016, 13, 8. [CrossRef]

17. Hoel, F.; Hoel, A.; Pettersen, IK; Rekeland, IG; Risa, K.; Alme, K.; Sorland, K.; Fossa, A.; Lien, K.; Herder, I.; et al. Müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimuse sündroomiga patsientide metaboolsete fenotüüpide kaart. JCI Insight 2021, 6, e149217. [CrossRef]

18. Nagy-Szakal, D.; Barupal, DK; Lee, B.; Che, X.; Williams, BL; Kahn, EJR; Ukaigwe, JE; Bateman, L.; Klimas, NG; Komaroff, AL; et al. Ülevaade müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi fenotüübist tervikliku metaboloomika kaudu. Sci. Vabariik 2018, 8, 10056. [CrossRef]

19. McGregor, NR; Armstrong, CW; Lewis, DP; Gooley, PR Pingutusjärgne halb enesetunne on ME/CFS juhtudel seotud hüpermetabolismi, hüpoatsetüülimise ja puriinide metabolismi dereguleerimisega. Diagnostika 2019, 9, 70. [CrossRef]

20. Armstrong, CW; McGregor, NR; Lewis, DP; tagumik, HL; Gooley, PR Metaboolne profiilide koostamine paljastab kroonilise väsimussündroomiga patsientidel anomaalse energia metabolismi ja oksüdatiivse stressi rada. Ainevahetus 2015, 11, 1626–1639. [CrossRef]

21. Fluge, O.; Mella, O.; Bruland, O.; Risa, K.; Dyrstad, SE; Alme, K.; Rekeland, IG; Sapkota, D.; Rosland, GV; Fossa, A.; et al. Metaboolne profiilide koostamine näitab püruvaadi dehüdrogenaasi funktsiooni halvenemist müalgilise entsefalopaatia / kroonilise väsimussündroomi korral. JCI Insight 2016, 1, e89376. [CrossRef] [PubMed]

22. Naviaux, RK; Naviaux, JC; Li, K.; Hele, AT; Alaynick, WA; Wang, L.; Baxter, A.; Nathan, N.; Anderson, W.; Gordon, E. Kroonilise väsimussündroomi metaboolsed tunnused. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2016, 113, E5472–E5480. [CrossRef] [PubMed]

23. Jones, MG; Cooper, E.; Amjad, S.; Goodwin, CS; Barron, JL; Chalmers, RA Uriini ja plasma orgaanilised happed ja aminohapped kroonilise väsimussündroomi korral. Clin. Chim. Acta 2005, 361, 150–158. [CrossRef] [PubMed]

24. Niblett, SH; Kuningas, KE; Dunstan, RH; Clifton-Bligh, P.; Hoskin, LA; Roberts, TK; Fulcher, GR; McGregor, NR; Dunsmore, JC; tagumik, HL; et al. Hematoloogilised ja uriinierituse anomaaliad kroonilise väsimussündroomiga patsientidel. Exp. Biol. Med. 2007, 232, 1041–1049. [CrossRef] [PubMed]

25. Germain, A.; Giloteaux, L.; Moore, GE; Levine, SM; Chia, JK; Keller, BA; Stevens, J.; Franconi, CJ; Mao, X.; Shungu, DC; et al. Plasma metaboloomika näitab häiritud reaktsiooni ja taastumist pärast maksimaalset treeningut müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi korral. JCI Insight 2022, 7, e157621. [CrossRef]

26. Bell, DS Arsti juhend kroonilise väsimussündroomi kohta. CFIDSi mõistmine, ravi ja elamine; Addison-Wesley kirjastusettevõte: Reading, MA, USA, 1994.

27. Yang, J.; Zhao, X.; Lu, X.; Lin, X.; Xu, G. Andmete eeltöötluse strateegia metaboolika jaoks, et vähendada andmeanalüüsi maskeerimisefekti. Esiosa. Mol. Biosci. 2015, 2, 4. [CrossRef]

28. Benjamini, Y.; Hochberg, Y. Valetuvastussageduse kontrollimine: praktiline ja võimas lähenemisviis mitmekordsele testimisele. JR Stat. Soc. Ser. B 1995, 57, 289–300. [CrossRef]

29. Barupal, DK; Fännid.; Fiehn, O. Bioinformaatika lähenemisviiside integreerimine metaboolika andmekogumite igakülgseks tõlgendamiseks. Curr. Arvamus. Biotehnoloogia. 2018, 54, 1–9. [CrossRef]

30. Barupal, DK; Fiehn, O. Keemilise sarnasuse rikastamise analüüs (ChemRICH) alternatiivina metaboolsete andmekogumite biokeemilisele radade kaardistamisele. Sci. Vabariik 2017, 7, 14567. [CrossRef]

31. Goeman, JJ; van de Geer, SA; de Kort, F.; van Houwelingen, HC Globaalne test geenirühmade jaoks: testimine seose kliinilise tulemusega. Bioinformaatika 2004, 20, 93–99. [CrossRef]

32. Rosato, A.; Tenori, L.; Cascante, M.; De Atauri Carulla, PR; Martins Dos Santos, VAP; Saccenti, E. Korrelatsioonist põhjusliku seoseni: metaboolsete andmete analüüs süsteemibioloogia lähenemisviiside abil. Metabolomics 2018, 14, 37. [CrossRef]

33. Cardounel, AJ; Cui, H.; Samouilov, A.; Johnson, W.; Kearns, P.; Tsai, AL; Berka, V.; Zweier, JL Tõendid endogeensete metüülarginiinide patofüsioloogilise rolli kohta endoteeli NO tootmise ja veresoonte funktsiooni reguleerimisel. J. Biol. Chem. 2007, 282, 879–887. [CrossRef]

34. Chandrasekharan, UM; Wang, Z.; Wu, Y.; Wilson Tang, WH; Hazen, SL; Wang, S.; Elaine Husni, M. Sümmeetrilise dimetüülarginiini taseme tõus plasmas ja suurenenud arginaasi aktiivsus kui võimalikud kardiovaskulaarsete kaasuvate haiguste näitajad reumatoidartriidi korral. Artriit Res. Seal. 2018, 20, 123. [CrossRef]

35. Siroen, parlamendiliige; Teerlink, T.; Nijveldt, RJ; Prins, HA; Richir, MC; van Leeuwen, PA Asümmeetrilise dimetüülarginiini kliiniline tähtsus. Annu. Rev. Nutr. 2006, 26, 203–228. [CrossRef]

36. Bertinat, R.; Villalobos-Labra, R.; Hofmann, L.; Blauensteiner, J.; Sepulveda, N.; Westermeier, F. NO tootmise vähenemine ME/CFS-i patsientide plasmaga kokku puutunud endoteelirakkudes. Vasc. Pharmacol. 2022, 143, 106953. [CrossRef]

37. Brosnan, JT; Brosnan, ME Väävlit sisaldavad aminohapped: ülevaade. J. Nutr. 2006, 136, 1636S–1640S. [CrossRef]

38. Fernández-García, JC; Martínez-Sánchez, MA; Bernal-López, MR; Muñoz-Garach, A.; Martínez-González, MA; Fitó, M.; Salas-Salvadó, J.; Tinahones, FJ; Ramos-Molina, B. Piiratud energiatarbimisega Vahemere dieedi ja treeninguga elustiili sekkumisprogrammi mõju seerumi polüamiini metaboloomile kõrge südame-veresoonkonna haiguste riskiga inimestel: randomiseeritud kliiniline uuring. Olen. J. Clin. Nutr. 2020, 111, 975–982. [CrossRef]

39. Wang, W.; Zhang, H.; Xue, G.; Zhang, L.; Zhang, W.; Wang, L.; Lu, F.; Li, H.; Bai, S.; Lin, Y.; et al. Treening säilitab isheemilise eelkonditsioneerimise vananenud roti südametes, taastades müokardi polüamiinikogumi. oksiid. Med. Kamber. Longev. 2014, 2014, 457429. [CrossRef]

40. Blomstrand, E.; Eliasson, J.; Karlsson, HK; Kohnke, R. Hargnenud ahelaga aminohapped aktiveerivad pärast füüsilist treeningut valkude sünteesi võtmeensüüme. J. Nutr. 2006, 136, 269S–273S. [CrossRef]

41. Newsholme, P.; Stenson, L.; Sulvucci, M.; Sumayao, R.; Krause, M. 1.02-Aminohapete metabolism. In Comprehensive Biotechnology, 2nd ed.; Moo-Young, M., toim.; Academic Press: Burlington, ON, Kanada, 2011; lk 3–14. [CrossRef]

42. Li, S.; Gao, D.; Jiang, Y. Atsüülkarnitiini metabolismi funktsioon, tuvastamine ja muutmine hepatotsellulaarse kartsinoomi korral. Metaboliidid 2019, 9, 36. [CrossRef]

43. Braun, TP; Marks, DL Lihasmassi reguleerimine endogeensete glükokortikoidide poolt. Esiosa. Physiol. 2015, 6, 12. [CrossRef] [PubMed]

44. Furman, BL Mineralokortikoidid. In xPharm: The Comprehensive Pharmacology Reference; Enna, SJ, Bylund, DB, toim.; Elsevier: New York, NY, USA, 2007; lk. 1. [CrossRef]

45. Kavyani, B.; Lidbury, BA; Schloeffel, R.; Fisher, PR; Missailidis, D.; Annesley, SJ; Dehhaghi, M.; Heng, B.; Guillemin, GJ Kas kinureniini rada võib olla müalgilise entsefalomüeliidi/kroonilise väsimussündroomi (ME/CFS) keerulise mõistatuse peamine puuduv tükk? Kamber. Mol. Life Sci. 2022, 79, 412. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Kossman, DA; Williams, NI; Domchek, SM; Kurzer, MS; Stopfer, JE; Schmitz, KH Treening alandab östrogeeni ja progesterooni taset menopausieelses eas naistel, kellel on kõrge rinnavähi risk. J. Appl. Physiol. 2011, 111, 1687–1693. [CrossRef] [PubMed]

47. De Souza, MJ; Van Heest, J.; Demers, LM; Lasley, BL Luteaalfaasi puudulikkus harrastusjooksjatel: tõendid hüpometaboolse seisundi kohta. J. Clin. Endokrinool. Metab. 2003, 88, 337–346. [CrossRef]

48. Mukherjee, K.; Edgett, BA; Burrows, HW; Castro, C.; Griffin, JL; Schwertani, AG; Gurd, BJ; Funk, CD Täisvere transkriptoomika ja uriini metaboloomika, et määratleda 50–60-aastaste meistersportlaste kõrge intensiivsusega treeningute adaptiivsed biokeemilised teed. PLoS ONE 2014, 9, e92031. [CrossRef]

49. Schranner, D.; Kastenmuller, G.; Schonfelder, M.; Romisch-Margl, W.; Wackerhage, H. Metaboliitide kontsentratsiooni muutused inimestel pärast treeningut: harjutuste metaboloomia uuringute süstemaatiline ülevaade. Spordimed. Avatud 2020, 6., 11. [CrossRef]

50. Kistner, S.; Rist, MJ; Doring, M.; Dorr, C.; Neumann, R.; Hartel, S.; Bub, A. Tervislike inimeste ägeda füüsilise koormuse ja kardiorespiratoorse vormiga seotud uriini metaboliitide tuvastamise NMR-põhine lähenemisviis – KarMeN-uuringu tulemused. Metaboliidid 2020, 10, 212. [CrossRef]

51. Kuratsune, H.; Yamaguti, K.; Takahashi, M.; Misaki, H.; Tagawa, S.; Kitani, T. Atsüülkarnitiini puudulikkus kroonilise väsimussündroomi korral. Clin. Nakata. Dis. 1994, 18 (lisa 1), S62–S67. [CrossRef]

52. Jones, MG; Goodwin, CS; Amjad, S.; Chalmers, RA Plasma ja uriini karnitiin ja atsüülkarnitiinid kroonilise väsimussündroomi korral. Clin. Chim. Acta 2005, 360, 173–177. [CrossRef]

53. Zhang, J.; valgus, AR; Hoppel, CL; Campbell, C.; Chandler, CJ; Burnett, DJ; Souza, EÜ; Casazza, GA; Hughen, RW; Keim, NL; et al. Atsüülkarnitiinid kui treeninguga seotud kütuse jaotumise, ksenometabolismi ja lihaste aferentsete neuronite potentsiaalsete signaalide markerid. Exp. Physiol. 2017, 102, 48–69. [CrossRef]

54. Costa, CG; Guerand, WS; Struys, EA; Holwerda, U.; kümme Brink, HJ; Tavares de Almeida, I.; Duran, M.; Jakobs, C. Uriini atsüülglütsiinide kvantitatiivne analüüs beeta-oksüdatsiooni defektide diagnoosimiseks GC-NCI-MS abil. J. Pharm. Biomed. Anal. 2000, 21, 1215–1224. [CrossRef]

55. Maya, J.; Leddy, SM; Gottschalk, CG; Peterson, DL; Hanson, MR Muutunud rasvhapete oksüdatsioon müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi lümfotsüütide populatsioonides. Int. J. Mol. Sci. 2023, 24, 2010. [CrossRef]

56. Wilkinson, DJ; Smeeton, NJ; Watt, PW Ammoniaagi metabolism, aju ja väsimus; linki uuesti külastades. Prog. Neurobiol. 2010, 91, 200–219. [CrossRef]

57. Chen, S.; Minegishi, Y.; Hasumura, T.; Shimotoyodome, A.; Ota, N. Ammoniaagi metabolismi kaasamine hiirte teekatehhiinide vastupidavuse parandamisse. Sci. Vabariik 2020, 10, 6065. [CrossRef]

58. Paul, BD; Sbodio, JI; Snyder, SH Tsüsteiini metabolism neuronaalse redoksi homöostaasis. Trends Pharmacol. Sci. 2018, 39, 513–524. [CrossRef]

59. Nkiliza, A.; Parks, M.; Cseresznye, A.; Oberlin, S.; Evans, JE; Darcey, T.; Aenlle, K.; Niedospial, D.; Mullan, M.; Crawford, F.; et al. ME / CFS-i patsientide soospetsiifilised plasma lipiidide profiilid ja nende seos valu, väsimuse ja kognitiivsete sümptomitega. J. Transl. Med. 2021, 19, 370. [CrossRef]

60. O'Neal, AJ; Klaas, KA; Emig, CJ; Vitug, AA; Henry, SJ; Shungu, DC; Mao, X.; Levine, SM; Hanson, patogeenivastaste antikehade tasemete MR uuring müalgilise entsefalomüeliidi / kroonilise väsimussündroomi korral. Proteomes 2022, 10, 21. [CrossRef]

61. Pingutusjärgse halva enesetunde analüüs kahepäevase CPET-i abil inimestel, kellel on ME/CFS.

62. Ware, JE, Jr.; Sherbourne, CD MOS 36-üksus lühivormiline terviseuuring (SF-36). I. Kontseptuaalne raamistik ja esemete valik. Med. Hooldus 1992, 30, 473–483. [CrossRef]

63. Smets, EM; Garssen, B.; Bonke, B.; De Haes, JC Väsimuse hindamise instrumendi mitmemõõtmelise väsimusandmiku (MFI) psühhomeetrilised omadused. J. Psychosom. Res. 1995, 39, 315–325. [CrossRef]

64. Ford, L.; Kennedy, AD; Goodman, KD; Pappan, KL; Evans, AM; Miller, LAD; Wulff, JE; Wiggs, BR; Lennon, JJ; Elsea, S.; et al. Kliinilise ainevahetuse profiilide platvormi täpsus, mida kasutatakse ainevahetuse kaasasündinud vigade tuvastamiseks. J. Appl. Lab. Med. 2020, 5, 342–356. [CrossRef]

65. Pang, Z.; Chong, J.; Zhou, G.; de Lima Morais, DA; Chang, L.; Barrette, M.; Gauthier, C.; Jacques, PE; Li, S.; Xia, J. MetaboAnalyst 5.0: Lõhe vähendamine töötlemata spektrite ja funktsionaalsete arusaamade vahel. Nucleic Acids Res. 2021, 49, W388–W396. [CrossRef] [PubMed]

66. Durbin, BP; Hardin, JS; Hawkins, DM; Rocke, DM Geeniekspressiooni mikrokiibi andmete dispersiooni stabiliseeriv transformatsioon. Bioinformatics 2002, 18 (lisa 1), S105–S110. [CrossRef] [PubMed]

67. Kuznetsova, A.; Brockhoff, PB; Christensen, RHB lmerTesti pakett: testid lineaarsete segaefektidega mudelites. J. Stat. Softw. 2017, 82, 1–26. [CrossRef]

68. Lenth, R. Emmeans: Estimated Marginal Means, ehk Least-Squares Means, 1.8.2; R pakett. 2022. aasta.

69. Blighe, K.; Rana, S.; Lewis, M. EnhancedVolcano: avaldamisvalmis vulkaaniplaanid täiustatud värvimise ja märgistusega, versioon 1.16.0; R pakett. 2022. aasta.

70. Smirnov, NV Kahe sõltumatu valimi empiiriliste jaotuskõverate vahelise lahknevuse hindamine. Bull. matemaatika. Univ. Moscou 1939, 2, 3–14.

71. Kolde, R. Pheatmap: Pretty Heatmaps, 1.0.12; R pakett. 2019.

Lahtiütlus/väljaandja märkus:Kõikides väljaannetes sisalduvad väited, arvamused ja andmed on ainult konkreetse(te) autori(te) ja kaastöölise(te), mitte MDPI ja/või toimetaja(te) avaldused, arvamused ja andmed. MDPI ja/või toimetaja(d) loobuvad vastutusest inimestele või varale tekitatud vigastuste eest, mis tulenevad sisus viidatud ideedest, meetoditest, juhistest või toodetest.

【Kontakt】E-post: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501