SLC37A2, fosforiga seotud molekuli suurenemine silelihasrakkudes lupjunud aordis Ⅱ

Tulemused

Otsige kandidaatmolekulefosfaadist põhjustatud lupjunudAoSMC. Et otsida molekule, mille ekspressioon suureneb kaltsifitseeritud AoSMC-s, viidi läbi umbes 26,000 geeni DNA mikrokiibi analüüs, kasutades kaltsifitseeritud AoSMC ja kaltsifitseerimata AoSMC mRNA-d. Joonisel 1 on näidatud erinevate geenide HeatMap, mida ekspresseeritakse AoSMC vahel, mida ei kasvatatud 2,6 mM P-ga, ja nende geenide vahel, mida kultiveeriti 2,6 mM P-ga 12 päeva. Kokku suurenes 3066 geeni kultiveeritud ja mittekultuuritud AoSMC puhul enam kui kaks korda. Suurenenud ekspressiooniga geenid olid osteoblastide moodustumisega seotud molekulid, nagu osteopontiin, periostiini osteoblastispetsiifiline faktor (POSTN), Wnt3, interleukiin-6 (IL-6) jafibroblastide kasvufaktor23 (FGF23), aga ka mitmed SLC superperekonna molekulid (tabel 1). Nende molekulide hulgas keskendusime SLC37A2-le, mille mRNA suurenes 12 päeva jooksul 2,6 mM P-ga kultiveeritud AoSMC-l umbes 3,1 korda võrreldes 2,6 mM P-ga kultiveeritud AoSMC-ga. SLC37A2 on väidetavalt seotud P-regulatsiooniga, kuid selle üksikasjalik funktsioon on teadmata. põletikust SLC37A2 ekspressioonil.Vaskulaarne lupjumineon teatatud, et seda soodustab põletik, seega uurisime, kas SLC37A2 mRNA-d mõjutab põletikuline reaktsioon. 24 tundi pärast LPS-ravi suurenes IL-6 oluliselt võrreldes AoSMC-ga, mida LPS-iga ei ravitud (joonis 2A). Neid tulemusi nähti ka 72 tundi pärast LPS-ravi. SLC37A2mRNA ekspressioonis ei olnud rühmade vahel olulisi erinevusi (joonis 2B).

25% EHHINAKOSIIDI JA 9% AKTEOSIIDI NEERUTUNGIMISEKS LOODUSLIKU ORGAANILISE TASTANHEKSTRAKTI SAAMISEKS KLIKI SIIA

Wecistanche'i tugiteenus - Hiina suurim tsistanšeksportija:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Lisateabe saamiseks ostke:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

SLC37A2 ekspressioon fosfaadiga indutseeritud lupjunud AoSMC-s. Et teha kindlaks, kas SLC37A2 on seotud kaltsifikatsiooniga, uurisime SLC37A2 mRNA ekspressiooni kaltsineerimata ja kaltsineeritud AoSMC-s (joonis 3). Lupjumist täheldati 6 päeva jooksul 2,6 mM P-ga kultiveeritud AoSMC-s ja 12 päeva jooksul 2,6 mM P-ga kultiveeritud AoSMC-s (joonis 3A) täheldati kaltsifikatsiooni edasijõudmist. Runx2 mRNA suurenes kaltsifitseeritud AoSMC-ga võrreldes kaltsifitseerimata AoSMC-ga oluliselt (joonis 3B). SLC37A2 mRNA hakkas kaltsifitseeritud AoSMC-s 3. päeval märkimisväärselt suurenema ja 9. päeval suurenes kaltsineeritud AoSMC märkimisväärselt umbes kaks korda võrreldes mittelubjastunud AoSMC-ga (Fig). 3C). SLC37A2 valgu ekspressioon suurenes 6. päeval kaltsifitseeritud AoSMC-s märkimisväärselt ligikaudu kaks korda võrreldes kaltsineerimata AoSMC-ga (joonis 3D).

SLC37A2 ekspressioon CKD mudeli rottidel.

Et selgitada, kas SLC37A2 osaleb veresoonte lupjumises in vivo, uurisime SLC37A2 mRNA ekspressiooni adeniinist indutseeritud CKD rottide veresoontel. Adeniiniga indutseeritud CKD rotid loodi vastavalt joonisel 4A näidatud protokollile. Tabelis 2 on toodud kehakaal ja biokeemilised andmed ohverdamise päeval. Kehakaaladeniinist põhjustatud krooniline neeruhaigusrottidel oli oluliselt madalam võrreldes mitte-CKD rottidega. Võrreldes mitte-kroonilise neeruhaiguse rühmaga, oli kroonilise neeruhaigusega rühmades kõrgem plasma P ja Cr tase ning madalam plasma Ca tase ning 24-tunnine P, Ca ja Cr eritumine uriiniga. Lisaks olid need tulemused silmatorkavamad CKD-HP rühmas, nagu on näha varasemates uuringutes.37,39) Seega vähenes neerufunktsioon CKD-HP rühmas, eriti CKD-HP rühmas. Uurisime mRNA ekspressiooni CKD rottide aordi veresoontes (joonis 4). Kuigi vaskulaarse lupjumise mehhanismi varajases staadiumis liikuva transkriptsioonifaktori Runx2 mRNA ekspressioonis olulisi erinevusi ei esinenud, suurenes rühmade vahel (joonis 4B) osteopontiini mRNA ekspressioon oluliselt CKD-HP rühmas võrreldes mittevajalikuga. CKD rühm jaCKD-LP grupp(Joonis 4C). SLC37A2 mRNA ekspressioon suurenes oluliselt ka CK D-HP rühmas võrreldes mitte-CKD rühma ja CKD-LP rühmaga (joonis 4D). Kuna nendel rottidel esines suuri individuaalseid erinevusi, uurisime korrelatsiooni osteopontiini ja SLC37A2 mRNA vahel ning leidsime nende molekulide vahel olulise korrelatsiooni (joonis 4E). Torakoabdominaalse aordi histoloogiline uuring näitas mediaalset lupjumist ainult CKD-HP rühma aordis (joonis 5A). SLC37A2 ekspressioonikoha uurimiseks aordil viisime läbi CKD-HPratsi aordi immunovärvimise. SLC37A2 ekspresseeriti tugevalt piirkonnas, kusveresoonte lupjuminejuhtus (joonis 5B).

Joonis 1. Erinevalt 2,6 mM P-ga kultiveeritud AoSMC ja 2,6 mM P-ga kultiveeritud AoSMC erinevalt ekspresseeritud geenide HeatMap. Punane tähistab kõrge signaalitasemega geene ja roheline madala signaalitasemega geene. AOSMC aordi silelihasrakud. Vaadake joonist võrguversioonis.

Arutelu

Uurisime P-ga seotud kandidaatmolekule, mis on seotud veresoonte lupjumisega. Meie tulemused näitasid, et SLC37A2 on üks molekulidest, mis suurenevadveresoonte lupjuminein vitro ja in vivo.

Perekond SLC37 kuulub SLC superperekonda ja sisaldab valke: SLC37A 1-440) SLC37 perekond sisaldab endoplasmaatilises retikulumi membraanis transmembraanseid valke ja selle järjestus on homoloogne bakteriaalse fosfaatfosfaat-antiporteriga.(41) SLC37A4 on paremini tuntud kuiglükoosi{0}}fosfaadi transporter.(2-44 Siiski on SLC37A2 kohta vähe teateid ja selle funktsiooni üksikasjad pole täielikult mõistetavad. SLC37A2, tuntud ka kui SPX2, ekspresseerub ohtralt hiire makrofaagides, põrnas, harknääres ja valges rasvkoes (WAT) ). SLC37A2 loomahaigusega. (47-49) SLC37A2 defekt põhjustabkraniomandibulaarne osteopaatia(CMO), iseparanev proliferatiivne luuhaigus, terjeritõugudel. (47) Piimaveistel põhjustab SLC37A2 homosügootne mutatsioon embrüo surma. (8.9) Lisaks. SLC37A2 on peetud D-vitamiini sihtgeenide sihtmärgiks. (nii) Arvesse on võetud ka fosfor-Ser294 progesterooni retseptori sihtgeeni potentsiaali rinnavähi progresseerumisel (1) On teatatud, et põletik võib nii veresoonte lupjumist põhjustada kui ka süvendada. (2s26) Lisaks. SLC37A2 ekspresseeritakse rohkesti makrofaagides ja WAT-is, mida mõjutab makrofaagide infiltratsioon. (s) Seetõttu. arvasime, et SLC37A2 võib olla põletiku ajal ekspresseeritud molekul. Kuid meie leiud ei näidanud SLC37A2 ekspressiooni suurenemist AoSMC-s, mis oli avatud põletikulisele reaktsioonile, põletikuline stimulatsioon ei paista seda molekuli otseselt mõjutavat. SLC37A2 võib olla seotud veresoonte lupjumisega muu mehhanismi kui põletiku kaudu.

On teatatud, et SLC37A2 toimib P-seotunaanti-porter. (41) Lisaks teatati, et SLC37A2 on D-vitamiini sihtgeen ja SLC37A2 geen sisaldab peamist vitamiini D-retseptori sidumissaiti (ss2). Süstemaatiliselt korreleeruvad muutused SLC37A2 geenide ekspressioonis ja D-vitamiini ringlevates vormides. on täheldatud inimese perifeerse vere mononukleaarsetes rakkudes. (50)D-vitamiini retseptorid seonduvad 1a, 25-dihüdroksü-D-vitamiiniga, mis on D-vitamiini metaboliit, ja reguleerivad geeniekspressiooni. lo, 25-dihüdroksüvitamiin D, toimib Ca ja P imendumises soolestikus, Ca mobilisatsioonis luudes ja Caini reabsorptsioonis neerudes. (3) On teatatud, et adeniinist indutseeritud kroonilise neeruhaigusega mudelrottidel oli seerumi la, 25-dihüdroksü-D-vitamiini sisaldus märkimisväärselt kõrgem kõrge p-sisaldusega dieeti saanud rottidel, kellel esines kaugelearenenud veresoonte lupjumine, võrreldes madala tasemega rottidega. -p dieediga tarbimine.39) SLC37A2 võib olla seotud P-regulatsiooniga D-vitamiini kaudu. Vaja on täiendavaid uuringuid, et selgitada, et D-vitamiin mõjutab SLC37A2 ekspressiooni in vitro ja vivo.

On näidatud, et veresoonte lupjumise mehhanism on sarnane luu moodustumise mehhanismiga. CMO-st põhjustatud SLC37A2 puudulikkus on kliiniliselt võrreldav inimese infantiilse kortikaalse hüperostoosiga, mida tuntakse ka Caffey tõvena.7 Lisaks on teateid, et SLC37A2 ekspresseerub luuüdis ja osteoklastides. o Hytone jt (7 oletasid, et SLC37A2 võib põhjustada osteoblastiliste ja osteoklastiliste luude moodustumise funktsiooni tasakaalustamatust ja selle tulemusena hüperostoosi.

Runx2 on veresoonte lupjumise jaoks oluline transkriptsioonifaktor. Samuti on teatatud, et Runx2 on osteoblastide diferentseerumise transkriptsioonifaktor, mida ekspresseeritakse rinna epiteelirakkudes. (s435) Runx2 näib olevat vajalik rinnavähi progresseerumisega seotud fosfor-Ser294 progesterooni sihtgeenide reguleerimiseks. SLC37A2 peetakse fosfor-Ser294 progesterooni retseptori sihtgeeniks. (s1) Seetõttu leitakse, et Runx2 võib reguleerida SLC37A2 Käesolevas uuringus korreleerus SLC37A2 mRNA ekspressioon CkD rottide aordis osteopontiini mRNA-ga, mis on suunatud Runx2 geenile.