Cistanche Deserticola koguglükosiidide fütokeemiline sõeluuring ja östrogeenne aktiivsus

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Abstraktne

Aastakümnete jooksul on tehtud pidevaid jõupingutusi inimeste elukvaliteedi tõstmiseks. Postmenopausaalne sündroom on tõsine probleem naiste tervise pärast. Hormoonravi on praegu selle seisundi ravi aluseks. Kuid see ravi võib põhjustada östrogeeni kuritarvitamist, mis võib põhjustada kõrvaltoimeid ja kõrvaltoimeid. Seetõttu ei ole hormoonravi postmenopausaalset sündroomi leevendanud.Cistanche deserticolaon klassikaline toniseeriv ravimtaim traditsioonilises hiina meditsiinis. Sellel on märkimisväärne östrogeenne aktiivsus. Selle ürdi peamised aktiivsed ühendid on glükosiidid. Eelmises katses tuvastati kolm olulist tegurit, mis mõjutasid glükosiidide kogusaagist, akteosiidisaagist ja östrogeenset aktiivsust, nimelt eluendi kontsentratsioon, pH ja eluendi maht. Selles katses määrati optimaalne puhastusprotsess, kasutades tsentraalset komposiitkonstruktsiooni-reaktsiooni pinna metoodikat, et saada sellest ürdist glükosiide. Optimaalseks leiti eluendi (etanooli) kontsentratsioon 85 protsenti ja maht 25 BV pH 11 juures. Kakskümmend üks aktiivset ühendit tuvastati kõrgsurvevedelikkromatograafia/kvadrupool-lennuaja massispektromeetria testiga. See uuring annab väärtuslikku teavet edasiseks põhjalikuks uuringuks, milles hinnatakse kogu glükosiidide östrogeenset aktiivsust.Cistanche deserticola.

Märksõnad: Keskkomposiitdisain; Cistanche deserticola üldglükosiidid; LC/Q-TOF-MS; puhastustehnoloogia; emaka kasvu test.

Sissejuhatus

Cistanche deserticolaon söödav, klassikaline toniseeriv ürt. Esmakordselt mainiti seda Shen Nongi ravimtaimede klassikas ja arvati kõrgeimasse klassi. See on soe ürt ja magus. Sellel on palju raviomadusi, nagu maksa ja neerude toitmine, lihaste ja luude tugevdamine ning immuunregulatsiooni parandamine koos vananemis- ja kasvajavastase toimega [1-4]. Selle ürdi ekstraktidest on eraldatud ja tuvastatud mõned looduslikud ühendid, millest peamised on fenüületanoidglükosiidid, lignanoidid, iridoidid, polüsahhariidid ja alkaloidid [5-8].

Ravimtaimedest saadavad ravimid sisaldavad erinevaid toimeaineid, mis vastutavad eelkõige nende ravitoime eest. Erinevatest taimsetest allikatest saadud sama ravimi efektiivsus võib selles sisalduvate toimeainete tüübi ja koguse erinevuste tõttu varieeruda. Seega on oluline tuvastada ja kvantifitseerida kõik ravimtaimedest saadud ravimites sisalduvad toimeained. Sama kehtib ka C. deserticola kohta. Vastuspinna metoodika on eksperimentaalne meetod erinevate tegurite samaaegse interaktsiooni uurimiseks [9-10]. Seda saab kasutada fütofarmatseutiliste preparaatide ekstraheerimisparameetrite optimeerimiseks ja ravimites sisalduvate toimeainete kvantitatiivseks hindamiseks. Tsentraalne komposiitdisain (CCD) on üks eksperimentaalseid disainilahendusi, mis on kasulikud vastuse pinna metoodikas. Võrreldes ortogonaalsete ja ühtlaste kujundustega on CCD-l suurem täpsus ja parem prognoositavus [11].

Postmenopausaalne sündroom võib oluliselt vähendada naiste elukvaliteeti. Tavaliselt kasutatakse selle seisundi raviks östrogeeni. Östrogeeni pikaajaline kasutamine võib aga põhjustada kuritarvitamist, põhjustades sellega mitmesuguseid kõrvaltoimeid ja kõrvaltoimeid. Seetõttu on postmenopausaalse sündroomi raviks hädavajalik valida alternatiivne ravi, eelistatavalt taimne ravim, mis sisaldab toimeainena östrogeeni [12-13].

Eelkatses tuvastati massispektromeetria (MS) abil erinevate C. deserticolast saadud looduslike ühendite struktuurid [14]. Kinnitati, et glükosiidid on peamised aktiivsed ühendid, millel on märkimisväärne östrogeenne toime [14-15]. Ohutu ja tõhusa östrogeense toimeaine väljatöötamiseks uues ravimis on vaja pärast puhastamist põhjalikult uurida TGCD-d. Selles uuringus kasutati CCD-d esmalt C. deserticola (TGCD) glükosiidide kogusisalduse puhastamise optimeerimiseks. Seejärel kasutati sama glükosiidi östrogeense aktiivsuse hindamiseks emaka kasvu testi. Kõrgfektiivne vedelikkromatograafia/kvadrupoolne lennuaja massispektromeetria (HPLC/Q-TOF-MS) kasutati TGCD ühendite kvalitatiivseks analüüsiks pärast puhastamist. Seda protsessi rakendati erinevate östrogeense toimega aktiivsete ühendite olemasolu selgesõnaliseks demonstreerimiseks TGCD-s. See võib samaaegselt olla aluseks selle kliinilisele kasutamisele menopausijärgse sündroomi korral, mis asendab östrogeeni.

Eksperimentaalne protseduur

Instrumendid

Agilent 1290 HPLC süsteem (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA), Agilent 6530 seeria kvadrupoolne lennuaja LC/MS (Q-TOF) süsteem (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) ja Chemical HPLC{ {5}}Andmetöötluse kromatograafiliste instrumentidena kasutati D-tööjaamu. Kogu uuringus kasutati Milli-Q ülipuhast vett. AR1140 elektrooniline analüütiline kaal (Ohaus International Ltd.); 680 mikroplaadi lugeja (Bio-Rad Corporation); Proovi ettevalmistamiseks kasutati 64R kiiret tsentrifuugi (Beckman Coulter Allegra).

Narkootikumid ja kemikaalid

C. deserticola osteti ravimiturult ja selle tuvastas prof Zhang Delian (Harbini Kaubandusülikool, Hiina). Standardne dietüülstilbestrool (99-protsendiline puhtus, partii nr 60518) osteti Dr. Ehrenstorferilt (Saksamaa). Teised standardid akteosiid (111530-200505) ja ehhinakosiid (111670-200503) saadi Hiinast Pekingi riiklikust farmaatsia- ja bioloogiliste toodete kontrolli instituudist. Iga standardi puhtus oli > 98 protsenti. Atsetonitriil (ACN), metanool ja sipelghape (MS klass) osteti firmast Thermo Scientific Pierce (Rockford, IL, USA). Ülipuhas vesi saadi ettevõttelt Hangzhou Wahaha Group Co., Ltd. (Hangzhou, Hiina). Kõik kaubanduslikult saadavad reaktiivid olid analüütilise puhtusega.

C. deserticola puhastuslahuse summaarsete glükosiidide valmistamine

Pärast 12-tunnist sukeldamist 75% etanooli ekstraheeriti C. deserticola toorpulber (100 g) 800 ml 75% (maht/maht) etanooliga 80 kraadi juures 150 minutit tagasijooksul. Seejärel filtriti see läbi kahekorruselise filtri ja ekstraheeriti 800 ml 75% etanooliga kaks korda veel 150 minutit. Seejärel filtraadid ühendati ja kontsentreeriti vaakumis temperatuuril 45 °C. Ekstrakt saadi lahusti eemaldamisega. Ekstraktile lisati teatud kogus destilleeritud vett, et saada kontsentratsioon 0,5 g/ml, mida kasutati puhastusprotsessi sõelumiseks.

Adsorptsiooniks, kasutades makropoorset vaiku AB-8, reguleeriti uuritava proovi lahuse pH väärtusele 11. Esmalt kasutati lisandite mahapesemiseks 2 BV destilleeritud vett. Seejärel eluent kontsentratsiooniga 25 BV 85% etanooli elueeriti ja koguti. Lõpuks liideti kogutud puhastatud eluent. Ekstraktile lisati teatud kogus destilleeritud vett, et saada kontsentratsioon 1,5 g/ml, mida kasutati maosiseseks manustamiseks. Positiivse kontrolli jaoks valmistati dietüülstilbestrooli lahus (20 ug/ml) koos dietüülstilbestrooli pulbriga.

Vastavalt puhastussuhtele ({{0}},6) kanti teatud kogus ekstrakti (vastab 1 g C. deserticolale) 10 ml mõõtekolbi, lahustati 50-protsendilises (maht/maht) metanoolilahuses ultrahelivannis 5 minuti jooksul ja lahjendati 10 ml-ni. Meditsiiniline lahus saadi pärast supernatandi filtreerimist läbi 0,45 μm filtermembraani. Akteosiid ja ehhinakosiid (mõlemad 1 mg) segati ja lahustati täielikult 10 ml 50-protsendilises (maht/maht) metanoolilahuses. Lõpuks filtreeriti standardlahus enne analüüsi läbi 0, 45 μm Millipore filtri.

LC-MS tingimused

Kromatograafia eraldamine viidi läbi HPLC süsteemis (Agilent 129{{10}}), mis oli varustatud kvaternaarse lahusti kohaletoimetamise süsteemi, vaakumdegasaatori ja fotodioodide massiividetektoriga. MS/MS analüüs viidi läbi instrumendis Agilent-1290 HPLC/6530 Q-TOF-MS, mis oli varustatud elektropihustusionisatsiooniallikaga nii positiivsete kui ka negatiivsete ioonide režiimides. Eraldamiseks kasutati Waters Symmetry shield RP C18 kolonni (4,6 × 250 mm, 5 μm) (Waters Corporation, Milford, MA, USA). Liikuv faas sisaldas 0,2% sipelghappe vesilahust (maht/maht) (A) ja ACN-i (B) ning seda pumbati voolukiirusel 0,5 ml/min. Iga proovi süstimismaht oli 10 μL. Gradiendi elueerimisprogramm oli järgmine: 5–23 protsenti B 0–35 minutit, 23–25 protsenti B 35–65 minutit ja 25–5 protsenti B 65–70 minutit. Kolonni temperatuuri hoiti 30 kraadi juures. Kromatogramme jälgiti ja registreeriti lainepikkusel 330 nm. Pihustamisgaasi rõhk seati väärtusele 30 Psi ja kapillaarpinge oli 3,5 kV. Kuiva gaasi voolukiirus oli 8 L/min temperatuuril 30 kraadi. Kattegaasi temperatuur seati 400 kraadile voolukiirusel 12 l/min. Kokkupõrkeenergiaks määrati madala energiatarbega skaneerimisel 10–20 eV ja suure energiatarbega skaneerimisel 30–50 eV. Massispektri andmed registreeriti skaneerimisvahemikus 50–1000 Da positiivsete ja negatiivsete ioonide skaneerimise režiimides. Selles uuringus viidi TGCD ja standardite kiire ja tõhus võrdlus läbi samades LC-MS tingimustes.

Emaka kasvu test

See viidi läbi rangelt kooskõlas riiklike tervishoiuinstituutide laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendi soovitustega. Kõik katseprotseduurid vaatas läbi ja kiitis heaks Hiina Harbini Kaubandusülikooli loomaeetikakomitee.

Ebaküpsed emased Kunmingi hiired (umbes 21 päeva sünnist võõrutatud), kaaluga 12 ± 2 g, osteti Changchuni riiklikust bioloogilise tööstuse baasi laboratoorsest loomakeskusest (Changchun, Hiina). Hiiri hoiti reguleeritud temperatuuriga ruumis (22 ± 2 kraadi) koos toidu ja veega ad libitum. Loomkatsed alustati pärast viiepäevast aklimatiseerumist. Hiired paastusid üleöö veega ad libitum enne uuritava lahuse intragastraalset manustamist.

Hiired jagati juhuslikult 22 rühma, igas rühmas oli 10 looma. Neile manustati nelja päeva jooksul kaks korda päevas (hommikul ja õhtul) sama mahuga eksperimentaalseid ravimeid järgmiselt:

1. rühm: C. deserticola puhastuslahuse (20 ml/kg) intragastrilised üldglükosiidid (lahuse maht/hiire mass),

II rühm: Intragastraalne destilleeritud vesi (negatiivne kontrollrühm) ja

III rühm: Intragastriline dietüülstilbestrool (20 ug/ml) (positiivne kontrollrühm).

Viiendal päeval ohverdati kõik hiired. Emakad eemaldati kohe ja kaaluti ning arvutati välja emakakoefitsiendid.

Statistiline analüüs

Erinevate katserühmade erinevate parameetrite statistiliselt oluliste erinevuste tuvastamiseks kasutati kahepoolset paarisvalimi t-testi. Analüüs viidi läbi SPSS-i statistikatarkvara abil (SPSS for Windows v21.0, SPSS Inc., USA). Erinevusi peeti statistiliselt olulisteks 95-protsendilise usaldustaseme juures (p <>

Tulemused ja arutlus

Akteosiidide ja glükosiidide kogusaagiste lineaarsus ja korrelatsioon

Akteosiidi saagise lineaarse regressiooni võrrand oli y {{0}}x – 14,75 (kus x on akteosiidi kontsentratsioon ja y on sellele vastav piigi pindala) korrelatsioonikoefitsiendiga r=1 kontsentratsioonivahemikus 0,12−{{10}},72 mg/mL. See näitas lineaarset kalibreerimiskõverat. Glükosiidide kogusaagise lineaarse regressiooni võrrand oli y=26.074x pluss 0,0866 (kus x on glükosiidide kogusisaldus ja y on sellele vastav piigi pindala) korrelatsioonikoefitsiendiga r { {12}},9982 kontsentratsioonivahemikus 0,013–0,065 mg/mL. See näitas ka lineaarset kalibreerimiskõverat.

Metoodiline uurimine

Metoodilise uurimise käigus uuriti proovide täpsust, reprodutseeritavust, stabiilsust ja taastumist. Täpsuskatses oli akteosiidide ja glükosiidide üldsisalduse suhteline standardhälve (RSD) vastavalt 1,43 protsenti ja 0.05 protsenti. Reprodutseeritavuse katses oli akteosiidide ja glükosiidide kogusisalduse RSD vastavalt 0,10 protsenti ja 1,44 protsenti. 24-tunnises stabiilsuskatses oli akteosiidide ja glükosiidide kogusisalduse RSD vastavalt 0,14% ja 0,90%. Taaskasutuskatses oli akteosiidi taastumine 100,50 protsenti RSD-ga 2,08 protsenti, samas kui glükosiidide kogusaagis oli 99,12 protsenti, kui RSD oli 1,65 protsenti. Kõik RSD väärtused olid alla 3 protsendi. Need tulemused näitasid head täpsust ja reprodutseeritavust. Lisaks oli proov stabiilne 24 tundi. Taastumise tulemused jäävad samuti lubatud piiridesse (95–105 protsenti). Seetõttu saab seda meetodit kasutada akteosiidide ja glükosiidide kogusaagise määramiseks pärast puhastamist.

TGCD ühefaktoriline uurimine

TGCD puhastamist makropoorse vaigu abil võivad mõjutada paljud tegurid, nagu vaigu tüüp, staatilised adsorptsioonitegurid (adsorptsiooniaeg, lekkekontsentratsioon ja proovilahuse pH) ja elueerimistingimused (voolukiirus, maht ja kontsentratsioon). Kasutades indeksitena TGCD adsorptsioonivõimet ning desorptsiooni ja elueerimise kiirust, määrati katseseisund ühe teguriga katsete tulemuste põhjal. Kasutades AB-8 tüüpi makropoorset adsorptsioonivaiku, määrati järgmised optimaalsed tingimused: 0,5 mg/mL proovilahus, pH 10, staatiline adsorptsiooniaeg 8 tundi, 2 BV destilleeritud vesi lisandite pesemiseks, 20 BV 80% etanool eluendina ja voolukiirus 0,5 BV/min. Konkreetsed tulemused on näidatud joonistel 1-7.

CCD TGCD puhastustehnoloogia optimeerimiseks

Ühefaktorilise uurimise tulemuste põhjal valiti indeksiteks kolm puhastusmeetodit oluliselt mõjutavat tegurit, milleks on proovilahuse pH (x1), eluendi kontsentratsioon (x2) ja eluendi maht (x3). CCD põhimõtte kohaselt on igal teguril viis taset. Nende erinevate tegurite maksimaalne ja minimaalne tase määrati vastavalt eelkatse tulemustele. Tegurite tasemed on näidatud tabelis 1 ja katsetulemused on näidatud tabelis 2.

Glükosiidide ja akteosiidide kogusaagised määrati, et optimeerida TGCD puhastusmeetodit. Esiteks määrati glükosiidide ja akteosiidide kogusaagised numbrilistele soovitavuse kriteeriumidele (d) vahemikus {{0}}–1. Seejärel arvutati üldine soovitavus (OD) [OD=(d1, d2, d3,....,dn)1/n, kus n on indeksi number]. SPSS21.{{10}} tarkvara ja disainieksperdi tarkvara kasutati sõltumatute muutujate ja OD mitmekordseks lineaarseks regressiooniks ja binoomseks sobitamiseks, kusjuures p < 0.05="" võeti="" arvesse="" võrrandi="" statistiliselt="" oluline="" standard.="" suurema="" r-väärtusega="" võrrand="" (mitmekorrelatsioonikordaja)="" valiti="" kõige="" paremini="" sobivaks="" mudeliks.="" mitme="" muutujaga="" lineaarvõrrand="" on="" esitatud="" kujul="" y="–" 1.02="" –="" 0.131x1="" pluss="" 0.034x2="" pluss="" 0,012x3="" (r="" {{="" 25}}.55,="" lk="0.004)." binoomvõrrand="" on="" y="–" 21,92173="" –="" 0,74079x1="" pluss="" 0,62914x2="" pluss="" 0,041161x3="" pluss="" 0,014972x1x2="" pluss="" 2,06050*10-4x1x3="" pluss="" 9}4="" ×="" 2x5}="" 9,2="" ×="" 5,5="" 9,2="" ×="" 5,5.="" {56}}.78730="" ×="" 10-3x22="" -="" 2.89446="" ×="" 10-3x32="" (r="0.91," p="0.012)." ülaltoodud="" võrranditest="" on="" näha,="" et="" mitme="" muutujaga="" lineaarse="" regressiooni="" võrrandi="" korrelatsioonikordaja="" on="" madalam.="" korrelatsioon="" sõltumatute="" ja="" sõltuvate="" muutujate="" vahel="" on="" väga="" madal="" ning="" selle="" kasutamist="" lineaarses="" mudelis="" peeti="">

Kuid binoomvõrrandi korrelatsioonikordaja oli kõrge ja selle tulemuseks oli hea sobivus. Seetõttu valiti binoommudel. Pinnafiguuri ja kontuurkaardi põhjaliku analüüsi põhjal koos katseandmetega (OD väärtus {{0}},6 lähedal) saadi puhastusmeetodi optimaalne vahemik. Jooniselt 8 on näha, et maksimaalne OD väärtus tekkis siis, kui proovilahuse (A) pH oli vahemikus 9–10 ja eluendi kontsentratsioon (B) oli vahemikus 79–85 protsenti. . Joonis 9 näitab, et maksimaalne OD väärtus saadi siis, kui proovilahuse (A) pH väärtus oli vahemikus 9–10 ja eluendi maht (C) oli vahemikus 20–25 BV. Joonis 10 näitab, et maksimaalne OD väärtus saadi siis, kui eluendi kontsentratsioon (B) oli vahemikus 80–85 protsenti ja eluendi maht (C) oli vahemikus 20–25 BV. Nende andmete põhjaliku analüüsi põhjal leiti, et proovilahuse pH, eluendi kontsentratsioon ja eluendi maht on vastavalt vahemikus 9–10, 80–85 protsenti ja 20–25 BV. Tuginedes mitmemõõtmelisele binoomvõrrandile muutuvate tuletistulemuste ja optimaalse skeemi jaoks, leiti, et parim TGCD puhastusmeetod on eluendi (etanooli) kontsentratsioon 85 protsenti ja maht 25 BV pH väärtusel 11. Vastav OD väärtus oli 0,8332 ja glükosiidide kogusaagis oli 73,0339 protsenti. Joonistelt 8-10 saadud visuaalne mulje näitab, et parim meetod on see, mille puhul arvestati kahe teguri vahelisi koostoimeid, kuigi valemist tuletatud parim meetod tunnistab seda, millesse on kaasatud kolme teguri vastasmõju. Kaks tulemust erinesid ja optimaalseks puhastusmeetodiks peeti eluendi (etanooli) kontsentratsiooni 85 protsenti ja ruumala 25 BV pH väärtusel 11.

Emaka kasvu mõõtmine

Iga rühma emakakoefitsient on toodud tabelis 3. Võrreldes negatiivse kontrollrühmaga olid teiste rühmade tulemused oluliselt erinevad. Leiti, et 20 erineva puhastusmeetodi abil saadud TGCD avaldas östrogeenset toimet.

Kinnitav katse

CCD ja emaka kasvu testi põhjalikud tulemused näitasid, et optimaalseks puhastusmeetodiks peeti eluendi (etanooli) kontsentratsiooni 85 protsenti ja ruumala 25 BV pH väärtusel 11.

valideerimisprotsessis oli glükosiidide keskmine saagis 70,9150 protsenti . Keskmine hälve prognoositud ja tegelike väärtuste vahel oli 2,1180 protsenti. Seetõttu võib väita, et selle mudeli prognoositavus ja eksperimentaalne usaldusväärsus on head.

TGCD tuvastamine pärast puhastamist

Peetumisaja ja MS andmete põhjal oletati 21 looduslikku koostisainet, sealhulgas kampneosiid 1, 2'-atsetüüllakteosiid, tsistanosiid A, tsistanosiid B, syringaliid A 3'- - L-ramnopüranosiid, tubulosiid A, tubulosiid B, salidrosiid, tsistanosiid G, teniposiidhape, dekofeoüüllakteosiid, 8-epilogaanhape, ehhinakosiid, tsistanosiid F, tsistutubulosiid B1, isoakteosiid, akteosiid, cis-akteosiid, kankanosiid E, osmantusiid B ja tsistanosiid C. MS ja tsistanosiid C. MS ja retentsiooniaeg/, MS teave, valem ja oletatavad ühendid on näidatud tabelis 4.

Q-TOF-MS on eriti sobiv ravimite ja toidu komplekssete molekulaarsete komponentide struktuurseks identifitseerimiseks, kuna see võib täpse molekulmassi ja fragmentioonide struktuuriomaduste kaudu pakkuda võimalikke elementaarseid koostisi. Süstemaatilise struktuurilise iseloomustuse loomiseks kasutati tuvastamiseks ka Q-TOF-MS, MS andmeid, andmebaasi otsimist ja avaldatud teatmekirjandust. Iga sihtkomponendi molekulaarne valem tuletati lähteioonist ja see sobitati tuntud ühenditega. Seda valemit saab täiendavalt määrata sellega seotud fragmendi ioonide põhjal. Näiteks piigis 5 oli domineeriv deprotoneeritud ioon m/z 654 juures (C30H38O16), mis oli identne kampneosiidi 1 elementaarse koostisega. Kofeoüüli kadu tekkis fragmendi ioonist m/z 493 juures ja rha fragment moodustati fragmendi ioonist m/z 347 juures.

Järeldus

LC-Q-TOF-MS tehnoloogiat kasutades on välja töötatud ja täielikult kinnitatud TGCD jaoks lihtne ja tugev kvalitatiivne analüüsimeetod. TGCD-st pärit looduslike ühendite skriinimise ja tuvastamise valideerimisandmed olid rahuldavad. Spekuleeriti 21 TGCD bioaktiivset ühendit järgmiselt: salidrosiid, tsistanosiid G, geniposiidhape, dekofeoüüllakteosiid, kampneosiid 1, 8-epilogaanhape, 2'-atsetüüllakteosiid, tsistanosiid A, tsistanosiid B, süstanosiid A3'{{9' }}L-ramnopüranosiid, ehhinakosiid, tsistanosiid F, tsistutubulosiid B1, isoakteosiid, akteosiid, tubulosiid A, cis-akteosiid, kankanosiid E, osmantusiid B, tsistanosiid C ja tubulosiid B. Nende ühendite struktuuriline iseloomustus võib anda katsealuse aluse. nende kvaliteedikontroll ja edasine kliiniline kasutamine nende östrogeense aktiivsuse tõttu. See võib pakkuda uudset ja täiustatud ravivõimalust postmenopausaalse sündroomi raviks, vältides seeläbi östrogeenravi kõrvaltoimeid ja kõrvaltoimeid.

Lühendid

TGCDCistanche deserticolasummaarsed glükosiidid LC/Q-TOF-MS vedelikkromatograafia/kvadrupoolne lennuaja massispektromeetria

RSM-i vastuse pinna metoodika

CCD keskne komposiit disain

MS massispektromeetria HPLC/Q-TOF-MS kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia/kvadrupoolne lennuaja massispektromeetria

ACN atsetonitriil

BV voodi maht

OD üldine soovitavus

LC-MS vedelikkromatograafia-massispektromeetria

Q-TOF-MS kvadrupoolne lennuaja massispektromeetria

TCM traditsiooniline hiina meditsiin

RSD suhteline standardhälve

Tänuavaldused

Seda projekti toetasid Hiina riiklik loodusteaduste sihtasutus (nr 81073015), Heilongjiangi provintsi loodusteaduslik sihtasutus (ZD2017014), Heilongjiangi provintsi kolledži noorte uuenduslike talentide koolituskava (UNPYSCT- 2017209). Autorid kinnitavad, et käesoleva töö avaldamisega seoses puudub huvide konflikt.

Huvide konflikt

Autorid ei kinnita huvide konflikti.

Viited

[1] Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y., Tu PF, põletikuvastase toimega fenüületanoidglükosiidid Tarimi kõrbes kultiveeritud Cistanche deserticola vartest, Fitoterapia, 2013, 89, {{4} }.

[2] Guo Y., Cao L., Zhao Q., Zhang L., Chen J., Liu B., Zhao B., Cistanche deserticola päritolu polüsahhariidi antioksüdantne ja hepatoprotektiivne toime esialgsed iseloomustused, International Journal of Biological Macromolecules , 2016, 293, 678-685.

[3] Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y., Tu PF, Tarimi kõrbes kasvatatud Cistanche deserticola vartest pärinevad põletikuvastased iridoidid, Chinese Journal of Natural Medicines, 2016, 14, 61-65.

[4] Peng F., Chen J., Wang X., Xu C., Liu T., Xu R., Cistanche deserticola viilude fenüületanoidglükosiidide taseme, antioksüdantide aktiivsuse ja muude kvaliteediomaduste muutused auruga töötlemise teel, keemiline ja Pharmaceutical Bulletin (Tokyo), 2016, 64, 1024-1030.

[5] Wang T., Zhang X., Xie W., Cistanche deserticola YC Ma, "Desert Ginseng": ülevaade, The American Journal of Chinese Medicine, 2012, 40, 1123-1141.

[6] Song Y., Song Q., Li J., Zhang N., Zhao Y., Liu X., Jiang Y., Tu P., Integreeritud strateegia kummeli kvantitatiivseks eristamiseksCistanche deserticolaja C. tubulosa, kasutades kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia-hübriidkolmikkvadrupoolset lineaarset ioonilõksu massispektromeetriat, Journal of Chromatography A, 2016, 1429, 238-247.

[7] Li Y., Peng Y., Wang M., Zhou G., Zhang Y., Li X., Kiire sõelumine ja metaboliitide vaheliste erinevuste tuvastamineCistanche deserticolaja C. tubulosa veeekstrakt rottidel UPLC-Q-TOF-MS kombineeritud mustrituvastusanalüüsiga, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2016, 131, 364-372.

[8] Li WL, Sun XM, Song H., Ding JX, Bai J., Chen Q., HPLC/Q-TOF-MS-põhine imendunud koostisosade ja nende metaboliitide identifitseerimine roti seerumis ja uriinis pärast Cistanche suukaudset manustamist deserticola ekstrakt, Journal of Food Science, 2015, 80, H2079-2087.

[9] Almasi A., Dargahi A., Mohamadi M., Biglari H., Amirian F., Raei M., Penicillin G eemaldamine sonolüüsi ja fotokatalüütilise (sono-fotokatalüütilise) protsessi kombinatsiooniga vesilahusest: protsessi optimeerimine kasutades RSM-i (Response Surface Methodology), Electron Physician, 2016, 8,

[10] 2878-2887. Hou W., Zhang W., Chen G., Luo Y., Extraction Conditions for Maximal Phenolic, Flavonoid and Antioxidant Activity from Melaleuca brac data Leaves, using the Response Surface Methodology, PloS One, 2016, 11,

[11] e0162139. Pooralhossini J., Ghaedi M., Zanjanchi MA, Asfaram A., Ultraheli abil ekstraheerimise valik koos spektrofotomeetriga gallushappe kiireks määramiseks veeproovides: Keskne komposiitdisain protsessimuutujate optimeerimiseks, Ultrasonics Sonochemistry, 2017, 34 , 692- 699.

[12] Han L., Boakye-Yiadom M., Liu E., Zhang Y., Li W., Song X., Fu F., Gao X., Fenüületanoidglükosiidide struktuurne iseloomustus ja identifitseerimineCistanches deserticola YC MaUHPLC/ESI-QTOF-MS/MS, Phytochemical Analysis, 2012, 23, 668-676.

[13] Lu D., Zhang J., Yang Z., Liu H., Li S., Wu B., Ma Z., Cistanches Herba kvantitatiivne analüüs, kasutades kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat koos dioodimassiivi tuvastamise ja suure eraldusvõimega massispektromeetria kombineerituna kemomeetriliste meetoditega. Journal of Separation Science, 2013, 36, 1945-1952.

[14] Li WL, Chen Q., Yang B., Gao S., Zhang JJ, fütoöstrogeensete tõhusate ekstraktide ja doosi sõelumineCistanche deserticola, Hiina ravimtaimed, 2013, 5, 292-296.

[15] Li YP, Huang FR, Dong J., Xiao C., Xian RY, Ma ZG, Zhao J., Rapid Identification of Cistanche via fluorescence Spectrum Imaging Technology Combined with Principal Components Analysis and Fisher Distinction, Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi, 2015, 35, 689-694.