2. osa Fenüületanoolglükosiidi liposoom pärsib PDGF-i indutseeritud HSC aktiveerimist FAKPI3KAkt signaaliraja reguleerimise kaudu
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materjalid ja meetodid
4.1. Materjalid
CPhG (fenüületanoidglükosiid cistanche'ist)osteti ettevõttelt Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, Hiina). Sisuehhiaatsiaoli üle 35 protsendi ja akteosiidi oma oli üle 16 protsendi. Letsitiin osteti ettevõttelt Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Shanghai, Hiina). 1,2-dipalmitoüül-sn-glütserool-3-fosfokoliini (DPPC) ja kolesterooli tarnis Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, USA). Immortaliseeritud roti maksa tähtraku tarnis Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Shanghai, Hiina). Dulbecco modifitseeritud Eagle'i sööde (DMEM) osteti firmalt Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, USA). Veise loote seerum (FBS) osteti firmalt Gibco Life Technologies (Waltham, MA, USA). Penitsilliin (100 卩g/mL) ja streptomütsiin (100 卩g/ml) olid ettevõtte Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT tooted [3-(4,5-dimetüültiasool-2-üül){ {13}},5-difenüültetrasooliumbromiid] (5 mg/ml) osteti ettevõttelt Sigma (Oakville, ON, Kanada). LDH aktiivsust hinnati ettevõtte Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Peking, Hiina) LDH analüüsikomplekti abil. FITC anneksiin V apoptoosi tuvastamise komplekt I ja propiidiumjodiidi (PI)/RNaasi värvimispuhver osteti ettevõttelt BD Biosciences (San Diego, CA, USA) ja rrPDGF-BB pakkus R&D Systems (Minneapolis, MN, USA). TRIzol reaktiiv osteti firmalt Thermo Fisher Scientific, Inc. RevertAid First Strand cDNA sünteesikomplekt oli Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Leedu) toode. TB Green Premix Ex Taq TM II osteti ettevõttest Takara (Dalian, Hiina). Ripa pürolüüsi lahuse tarnis Thermo Fisher Scientific, Inc. Proteaasi inhibiitori fenüülmetüülsulfonüülfluoriid ja laia spektriga fosfataasi inhibiitori segu osteti ettevõttelt Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, Hiina). Valguribad visualiseeriti Pierce™ ECL Western Blotting Substraadiga, mille tarnis Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Mädarõika ensüümi märgistav kitse küülikuvastane IgG osteti ettevõttelt Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Shanghai, Hiina). Super Signal West Femto proovikomplekti tarnis Thermo Fisher Scientific, Inc. Rabbit anti-p-aktiini, a-SMA, kollageeni-1, FAK, PI3K, fosfo-PI3K, Akt ja fosfo-Akt antikehade kõik need osteti ettevõttelt Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Peking, Hiina). X-3-FAK ja X-3-NC osteti ettevõttelt Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Shanghai, Hiina). Lipofectamine 2000 tarnis Invitrogen.
4.2. CPhG liposoomide valmistamine
Letsitiin, DPPC ja kolesterool (1:2:2, m/m/m) lahustati kloroformi ja metanooli segus (2:1 maht/maht), pöörati, et moodustada kile 49-50 kraadi juures, jaCPhG-d(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist)Seejärel lisati (250 卩g/mL). Reaktiivset lahust pöörati ja hüdreeriti pidevalt ning fosfolipiidmembraan viidi CPG liposoomide moodustamiseks vette. Kapseldatud liposoomi protsessi korrati vastavalt ülaltoodud meetoditele. Ühtlase liposoomi saamiseks ekstrudeeriti kapseldatud liposoom 5 korda 0,45 卩m mikropoorse membraaniga ja filtreeriti 18-20 korda 0,22 卩m membraaniga. CPG liposoome säilitati 4 kraadi juures. Osakeste suuruse jaotust mõõdeti laserosakeste suuruse analüsaatoriga, osakeste kuju vaadeldi transmissioonelektronmikroskoopia abil ning ravimi laadimise ja kapseldamise efektiivsus määrati HPLC abil.
4.3. In vitro vabanemine CPG liposoomist ja CPhG-dest(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist)
CPG liposoomide in vitro vabanemisprofiil jaCPhG-d(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist) viidi läbi dialüüsimembraani meetodil. Kokku 5 ml igast proovist kanti dialüüsikotti, mille molekulmass oli 14,000 Da molekulmassiga. Dialüüsikott sukeldati 20{{10 }} ml PBS puhverlahust (pH=6,0) vibreeris 37 kraadi juures. Vabastussööde (3 ml) eemaldati ja asendati isopüknilise PBS-i puhverlahusega (pH=6,0) ettenähtud ajavahemike järel (0,5, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 24 ja 48). h). Ehhinakosiidi kontsentratsioonid CPG liposoomides jaCPhG-dvabanemiskeskkonnas määrati
HPLC. CPG liposoomide kumulatiivne vabanemine ( protsenti ) jaCPhG-d(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist) arvutati järgmise võrrandi (1) abil:
kus Cn on ravimi kontsentratsioon vabanemiskeskkonnas n-ndas proovivõtupunktis, V on vabanenud söötme maht ja W on kogudoos.
Et paremini mõista sellele iseloomulikku vitro vabanemistCPhG(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist) liposoomi jaCPhG-d, rakendati saadud vabastamisandmete sobitamiseks kolme erinevat mudelit: (a) nulljärku kineetikamudel, (b) esimest järku kineetikamudel ja (c) valemites (2)-(4) toodud Higuchi mudel. :
kus Mt/Mo on proovist ajahetkel t vabanenud kurkumiini osa ja k on erinevate mudelite vabanemiskonstant. Korrelatsioonikoefitsient arvutatakse, et illustreerida vabastamismudeli ja andmete vahelist sobivust.
4.4. Tsütotoksilisus
HSC-de jaoks kanti tihedusega 1 x 105 rakku/ml 96-süvendiga plaatidele ja lasti kasvada üleöö 37 kraadi juures 5% CO2 inkubaatoris. Rakkude elujõudu testiti paljudelCPhGliposoomide kontsentratsioonid (117,79, 58,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68, 1,84, 0,92 ja 0,46 卩g/mL), et tuvastada testrakkude elujõudu ja arvutada IC50 väärtused. Seejärel inkubeeriti rakke 37 kraadi juures 4 tundi 20 µl MTT-ga (5 mg/ml PBS lahuses). Lilla MTT-toote produkt lahustati 150 µl DMSO-s ja neeldumise mõõtmiseks lainepikkusel 490 nm kasutati Multiskan Spectrum Absorbance Readerit (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA). Rakkude elujõulisuse protsendi arvutamiseks kasutati järgmist valemit (võrrand (5)):
4.5. CPhG liposoomide rakutoksilisus HSC-del
Rakud külvati 6-süvendiga plaatidele ja HSC-de toksilisust mõõdeti LDH tuvastamise komplekti abil. Rakud plaaditi tihedusega 2 x 105 rakku süvendi kohta 6-süvendiga plaatidele temperatuuril 37 kraadi inkubaatoris 5% CO2-ga. Pärast üleöö kasvatamist töödeldi rakkeCPhGliposoomid (29,45, 14,72 ja 7,36 卩g/ml). Samaaegselt säilitati tühja (DEME söötme) kontroll. 24 tunni pärast koguti rakud trüpsiini ja tsentrifuugimisega. Iga rakurühma manustati rangelt vastavalt komplekti juhistele. Seejärel arvutati rakukultuuri vedeliku LDH lekkekiirus.
4.6. Apoptoosi analüüs
Rakke kultiveeriti 6-süvendiga plaatidel tihedusega 2 x 105 rakku süvendi kohta 37 kraadi juures inkubaatoris 5% CO2-ga. Pärast üleöö kasvatamist töödeldi rakkeCPhGliposoomid (29,45, 14,72 ja 7,36 卩g/ml) ning seejärel mõõdeti HSC-de apoptoosi, kasutades FITC anneksiin V apoptoosi tuvastamise komplekti. Kontsentratsioonid põhinesid tsütotoksilisuse testiga määratud IC50-l. Samaaegselt säilitati tühja (DEME söötme) kontroll. 24 tunni pärast koguti rakud trüpsiini ja tsentrifuugimisega ning pesti PBS-ga ja suspendeeriti 500 µL sidumispuhvris. Seejärel värviti rakud 5 µl anneksiin V-FITC ja 5 µl PE-ga. Rakke inkubeeriti toatemperatuuril 30 minutit pimedas ja apoptootilist kiirust mõõdeti FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) abil.
4.7. Rakutsükli peatamise analüüs
HSC-sid (2 x 105 rakku 2 ml süvendi kohta) töödeldi 24 tundiCPhGliposoomid kontsentratsiooniga 29,45, 14,72 ja 7,36 ^g/ml 6-süvendiga plaatidel. Samaaegselt säilitati tühja (DEME söötme) kontroll. Rakud koguti ja pesti 1 ml PBS-ga ning fikseeriti 75% etanooliga üleöö temperatuuril 4 °C. Seejärel rakke tsentrifuugiti ja resuspendeeriti 500 propiidiumjodiidi (PI)/RNaasi värvimispuhvri lahuses 37 kraadi juures 30 minutit pimedas. Lõpuks mõõdeti rakke FACSCalibur tsütomeetriga (Becton Dickinson). Rakkude proportsioone rakutsükli G0/G1, S ja G2/M faasides analüüsiti FACS Diva tarkvaraga (Becton Dickinson).
4.8. MõjuCPhG(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist) Liposoom PDGF-i vahendatud FAK ja PI3K/Akt signaalirajal
4.8.1. Proliferatsiooni test
HSC liinid (1 x 105 rakku/ml) plaaditi 96-süvendiga plaatidele ja lasti üleöö 37 kraadi juures kasvada 5% CO2 inkubaatoris. Pärast 24-tunnist rakukultuuri jagati rakud juhuslikult järgmisse viide rühma: tühikontroll (kultuuritud DMEM-is, mis sisaldas ainult 10% FBS-i), PDGF-BB (kultuuritud DMEM-is, mis sisaldab 50 µg/l PDGF-BB-d), aCPhGliposoomi sekkumine (stimuleeritud söötmega, mis sisaldab 50 µ/mL PDGF-BB-d 24 tundi). Seejärel töödeldi rakke 29,45, 14,72 ja 7,36 Rg/ml CPhG liposoomidega. Rakke kasvatati pidevalt 24 tundi, 48 tundi ja 72 tundi inkubaatoris 37 kraadi juures 4 tundi 20 rL MTT-ga (5 mg/ml PBS lahuses). Purpurne MTT-formasaani produkt lahustati 150 rL DMSO-s ja hinnati neeldumise mõõtmisega 490 nm juures Multiskan Spectrum Absorbance Readeriga (Thermo Fisher Scientific, Inc.) ja arvutati IC50. Iga kontsentratsiooni jaoks võeti neljas sõltumatus katses neli korda proove. Järgmine valem (võrrand (6)) arvutas rakkude elujõulisuse protsendi:
4.8.2. Kvantitatiivne reaalajas polümeraasi ahelreaktsioon (qRT-PCR)
Rakud külvati {{0}}süvendiga plaatidele tihedusega 1 x 105 rakku/ml. See rühmitusmeetod on sama, mis eelmine. 24 tunni pärast ekstraheeriti kultiveeritud rakkudest kogu RNA TRIzol reagendiga. RNA kontsentratsiooni ja puhtust mõõdeti lainepikkusel 260/280 nm, kasutades ultraviolettkiirguse spektrofotomeetrit standardse OD260/OD280 suhte järgi 1.8-2.0. Pöördtranskriptsiooni reaktsioonid pöördtranskribeeriti RNA-st, kasutades RevertAid First Strand cDNA sünteesikomplekti. Geeniekspressiooni mõõtmiseks kasutati TB Green Premix Ex TaqTM II. qRT-PCR viidi läbi, kasutades ABI QuantStudio™6 Flex Real-Time PCR süsteemi (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Praimeri järjestused sünteesiti ettevõttes Sangon Biotech (Shanghai, Hiina) (tabel 4).
4.8.3. Western blot analüüs
Erinevates rühmades HSC-dest ekstraheeritud valgud valmistati eelnevalt kirjeldatud viisil. Lühidalt, sarnased valgud eraldati 10% naatriumdodetsüülsulfaat-polüakrüülamiidi geelelektroforeesiga (SDS-PAGE) ja seejärel kanti polüvinülideenfluoriid (PVDF) membraanidele (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Württemberg, Saksamaa). Seejärel blokeeriti PVDF-i membraanid 3-protsendilises BSA-s ja inkubeeriti üleöö temperatuuril 4 ◦C primaarsete antikehadega. Järgmisel päeval lisati HRP-märgistatud kitse küülikuvastast IgG-d (lahjendus 1:25,{10}}; 1 h). Valguribad visualiseeriti Pierce™ ECL Western Blotting Substraadi abil ja pildistati FluorChem E Imaging Systemiga (Protein Simple, San Francisco, CA, USA), mis normaliseeriti sisekontrollina -aktiiniga.
4.8.4. FAK-i üleekspressioonikatsed
Rakud jagati normaalse söötme kontrollrühma, PDGF-BB stimulatsioonirühma, PDGF-BB-stimulatsiooni ja X-3-FAK-rühma, PDGF-BB-stimulatsiooni pluss X-3-NC-rühma, PDGF-i rühma. -BB stimulatsioon pluss X-3-FAK plussCPhGliposoomirühma ja rrPDGF-BB stimulatsiooni pluss X-3-NC plusCPhGliposoomide rühm. HSC liinid (1 × 105 rakku/ml) plaaditi 6-süvendiga plaatidele ja lasti üleöö kasvada temperatuuril 37 ◦C 5% CO2 inkubaatoris. Järgmisel päeval lisati PDGF-BB (kultuuritud DMEM-is, mis sisaldas 50 ug/l PDGF-BB) rakud ja kultiveeriti. Kolmandal päeval lahjendati pEX-3-FAK ja X-3-NC antibiootikumivabas söötmes, segati hästi lipofektamiiniga 2000 ja lasti enne lisamist seista temperatuuril 37 ◦C 20 minutit. rakkude igasse süvendisse temperatuuril 37 ◦C. Pärast 5-tunnist inkubeerimist asendati 10% seerumit sisaldav sööde 48 tunniks ja viiendal päeval asendati sööde 24 tunniks CPhG liposoomi kontsentratsiooniga 29,45 µg/ml. Seejärel koguti iga süvend teisel, kolmandal, viiendal ja kuuendal päeval ning tuvastati FAK, PI3K, Akt, p-PI3K ja p-Akt geenivalkude ekspressioonid.
4.9. Statistiline analüüs
Andmed väljendati keskmistena ± standardhälve (SD). Statistilisteks analüüsideks kasutati tarkvara SPSS 16.{1}} (IBM, New York, NY, USA). Erinevuse olulisus arvutati ühesuunalise ANOVA testiga ja sellele järgnes LSD test. Ravimi lahustumise võrrandi paigaldas Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, USA).
5. Kokkuvõtted
Kokkuvõtteks näitavad meie tulemused sedaCPhG(fenüületanoidglükosiid cistanche'ist) liposoomid inhibeerivad oluliselt HSC-de aktivatsiooni, nõrgendades märkimisväärselt maksafibroosi arengut, suurendades apoptoosi ja reguleerides rakutsüklit HSC-des. FAK/PI3K/Akt signaaliradade aktiveerimise pärssimine võib olla aluseks mehhanismiks, mille abilCPhGliposoomid kaitsevad fibroosiga seotud kroonilise maksahaiguse eest. Need leiud annavad uudse ülevaate selle uue ravimipreparaadi kui antifibrogeense kandidaadi mehhanismidest maksafibroosi tulevaseks raviks. Selle aluseks olevad mehhanismid on aga keerulisemad kui siin kirjeldatud ja meie tulemused ei välista teiste seadmete võimalikku kaasamist, mis on põhjustatudCPhGliposoomid maksafibroosi raviks.
Autori kaastööd:TL, JZ, S.-PY, LM ja S.-LZ kavandasid ja kavandasid katsed. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM ja X.-YY analüüsisid andmeid. S.-LZ ja JZ kirjutasid käsikirja. TL, LM ja JZ vaatasid käsikirja üle. Kõik autorid lugesid lõpliku käsikirja läbi ja kiitsid selle heaks.
Rahastamine:Seda uurimistööd rahastas Hiina Riiklik Loodusteaduste Fond, grandi number 81560628.
Tänuavaldused:Seda tööd toetas rahaliselt Hiina riiklik loodusteaduste fond (nr 8156140127). Autorid soovivad avaldada siirast tänu Jun Zhaole ja Xin Wangile selle töö kirjutamise täiustamise eest.
Huvide konfliktid:Autorid ei ole teatanud huvide deklaratsioonist.
Viited
1. Zhang, H.; Sun, D.; Wang, G.; Cui, S.; Väli, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptiin leevendab maksafibroosi aktiveeritud maksa tähtrakkude pärssimise kaudu. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2019 511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Maksafibroos: patofüsioloogia, patogeneetilised sihtmärgid ja kliinilised probleemid. Mol. Aspektid Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Reparative Effects of Astaxanthin-Hyaluronan Nanoagregates against Retrorsine-CCl(4)-Induced Liver Fibroosi and Necrosis. Molecules 2018, 23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Sun, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla soodustab kõrge glükoosisisalduse ja PDGF-i indutseeritud maksa tähtrakkude aktivatsiooni, indutseerides CaMKKp/ERK signaaliraja kaudu autofagiat. Toksikool. Lett. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Maksa tähtrakkudest (HSC) pärinevate tsütokiinide roll maksapõletikus ja immuunsuses. Cytokine 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosafenüületanoidglükosiidid kutsuvad esile apoptoosi Eca-109 rakkudes mitokondritest sõltuva raja kaudu. Oncol. Lett. 2019, 17, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Sina, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Phenylethanol Glycosides fromCistanche tubulosaSupresseerige maksa tähtrakkude aktiveerimist ja blokeerige signaaliradade juhtimine TGF-beeta1/smad-is kui potentsiaalsed maksafibroosivastased ained. Molekulid 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Sina, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Fenüületanoidglükosiidide ennetav toimeCistanche tubulosaveiste seerumi albumiinist põhjustatud maksafibroosi kohta rottidel. DARU J. Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Lõksu tõhusus ja nelja tüüpi proliposoomide imendumine. J. Xin Jiang Med. Univ. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Bioadhesiivne ravimite manustamissüsteem ja selle rakendamine traditsioonilises hiina meditsiinis. Lõug. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Long, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Nitroimidasooli derivaat sisaldas liposoome hüpoksiast põhjustatud ravimite kohaletoimetamiseks ja suurendas terapeutilist efektiivsust patsiendilt saadud kasvaja ksenograftides. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Maksale suunatud liposoomide ravimite kohaletoimetamise süsteem ja selle uurimistöö edusammud maksahaiguste korral. Maailma lõug. J. Digest. 2016, 24 4238. [CrossRef]
13. Zhou, BH; Tan, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, HW PI3K / AKT signaaliraja osalemine fluoriidist põhjustatud apoptoosis C2C12 rakkudes. Chemosphere 2018, 199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Ehhinakosiid stimuleerib rakkude proliferatsiooni ja takistab rakkude apoptoosi sooleepiteliaalsetes MODE-K rakkudes transformeeriva kasvufaktori p1 ekspressiooni ülesreguleerimise teel. J. Pharm. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Antinotsitseptiivne ja põletikuvastane toime, mis on põhjustatudCistanche deserticolanärilistel. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaekstrakt suurendab luu moodustumist osteoblastides. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. MõjuCistanches HerbaVesiekstrakt luuhõrenemiseks rottidel, kellel on eemaldatud munasarjad. Int. J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Uuringud sedatiivse toime kohtaCistanche deserticola.J. Ethnopharmacol. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Fenüületanoidirikka ekstrakti väsimusvastane toimeCistanche deserticola. Fütoter. Res. 2010, 24, 313-315. [CrossRef]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Ehhinakosiidi neuroprotektiivne toime Parkinsoni tõve hiire MPTP mudelis. Eur. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Hepatoprotektiivse toimega atsüülitud fenüületanoidaminoglükosiidid kõrbetaimest Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Cistanche salsa ekstrakti ennetamine süsiniktetrakloriidi poolt põhjustatud maksafibroosi korral rottidel. Lõug. Herbal Med. 2013, 5 199–204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Cistanche phenylethanoid glycosides liquid prolipo somes: Optimized formulation, characterization and prolipo some dripping pills in vitro and in vivo assessment. Eur. J. Pharm. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Storm, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Maksafibroos mõjutab ravimi manustamissüsteemide sihtimisomadusi makrofaagide alamrühmadesse in vivo. Biomaterjalid 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Sun, H.; Li, S.; Jep.; Gallons, H. Liposoomide koostise kujundamine ja meditsiiniline kasutamine. Eur. J. Med. Chem. 2019, 164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofeeniga koormatud etanoolsed liposoomiosakesed biomeditsiinilisteks rakendusteks. J. Microbiol. Meetodid 2019, 161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Pinnalaengu mõju liposoomide suurusest sõltuvale rakusisesele sisestamisele. Chem. Phys. Lipiidid 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Sun, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Galangiiniga koormatud maksale suunatud liposoomid: optimeerimine ja hepatoprotektiivne efektiivsus. J. Drug Deliv. Sci. Technol. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Maksafibroos: on aeg hakata kasutama maksa tähtrakkude spetsiifilisi terapeutilisi sihtmärke. Maksa ja sapiteede pankrease dis. Int. 2018,17,192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Brown, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, DR; Abdollahi, A. Tüvirakkude spetsiifilised mehhanismid tagavad genoomse täpsuse HSC-des ja HSC-de vananemisel. Cell Rep. 2015,13, 2412-2424. [CrossRef]
31. Brea, R.; Motion, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 kutsub esile maksa tähtrakkude apoptoosi ja nõrgendab hiirtel maksafibroosi, vähendades miR-23a-5p ja miR-28a-5p-d. Biochim. Biophys. Acta Biophys. Sealhulgas Photosynth. 2018, 1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paul, F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; et al. Rakutsükli oleku erinevused on HSC sektsiooni transkriptsiooni heterogeensuse aluseks. Cell Rep. 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohamed, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, S. Rosmariinhape nõrgendab maksa fibrogeneesi maksa tähtrakkude aktivatsiooni/proliferatsiooni pärssimise ja apoptoosi indutseerimise kaudu. Aasia Pac. J. Trop. Med. 2017, 10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Endoteeli eellasrakkude mõju maksa tähtrakkude proliferatsioonile ja bioloogilisele funktsioonile nihkepinge all. Lõug. J. Appl. Physiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Aktiveeritud maksa tähtrakud soodustavad kuumajärgse hepatotsellulaarse kartsinoomi progresseerumist autofaagilisest ellujäämisest proliferatsioonini. Int. J. Hüpertermia 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Sung, KY; Choi, DH; Cho, EH suktsinaat kutsub esile maksa fibrogeneesi, soodustades aktivatsiooni, proliferatsiooni ja migratsiooni ning pärssides maksa tähtrakkude apoptoosi. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Maksafibroosi mehhanismid. Clin. Chim. Acta 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16. Maksafibroosi mehhanismid. In Comprehensive Toxicology, 3. väljaanne; McQueen, CA, toim.; Elsevier: Oxford, Suurbritannia, 2018; lk 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, CV; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM PDGF-A, -B, -C ja -D ning PDGF-retseptorite a ja |3 ekspressioonimustrid aktiveeritud roti maksa tähtrakkudes (HSC). Cytokine 2005, 31, 349-357. [CrossRef]
