Ehhinakosiid soodustab inimese neerutorukeste epiteelirakkude proliferatsiooni, blokeerides HBX/TREM2-vahendatud NF-κB signaaliraja

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

YuFan ZHanG, QinFanG Wu, liMin ZHonG, donGWei GonG

Abstraktne.

B-hepatiidi viiruse X (HBX) valk on vajalik HBV replikatsiooniks ja mängib rolli hepatiidi progresseerumisel inimestel. Siiski ei ole HBX-i põhifunktsioon HBV-indutseeritud kroonilise glomerulonefriidi (HBV-Gn) ajal teada. (ehhinakosiid cistanche'ist)(ecH) on fenüületanoidglükosiid perekonnast Cistanche, millel on tugev antiapoptoos ja neuroprotektiivne toime. Käesolevas uuringus uuriti HBX funktsiooni ning seost HBX ja ecH vahel inimese neerutuubulite epiteelirakkudes (rTecs; HK-2 rakuliin). HBX mRNA ja valgu ekspressioonitasemete kvantifitseerimiseks HK-2 rakkudes kasutati vastavalt pöördtranskriptsiooni-kvantitatiivseid Pcr ja Western blot analüüse. Rakkude proliferatsiooni analüüsimiseks viidi läbi rakkude loenduskomplekti-8 test. Apoptoosi kiiruse määramiseks kasutati voolutsütomeetria analüüsi. HBX-l oli antiproliferatiivne ja proapoptootiline toime HK-2 rakkudes ning see oli positiivselt seotud müeloidraku 2 (TreM2) ekspressioonil ekspresseeritud retseptori käivitamisega. Lisaks häiris ECH HBX funktsiooni HK-2 rakkudes, toimides HBX supressorina. Veelgi enam, spetsiifilist NF-κB inhibiitorit PdTc kasutati HBX ja nF-κB vahelise seose edasiseks uurimiseks. Tulemused näitasid, et nF-κB osales HBX / TreM2 signaaliülekande rajas ja reguleeris negatiivselt TreM2 ekspressiooni RTECS-is. Käesolev uuring andis uudse ülevaate HBX funktsioonist ja näitas ka ECH potentsiaalset väärtust HBV-Gn raviainena.

Sissejuhatus

B-hepatiidi viirus (HBV) on Hepadnaviridae viirus, mis põhjustab inimestel ägedat ja kroonilist hepatiiti (1). HBV ei põhjusta mitte ainult püsivat või mööduvat nakkust maksas, vaid nakatab ka ekstrahepaatilist kudet, sealhulgas kõhunääret, sapijuha, lümfoidsüsteemi ja neere (2). Lisaks on HBV-nakkus tihedalt seotud kroonilise glomerulonefriidiga (HBV-Gn); aga HBV molekulaarseid mehhanisme HBV-Gn ajal ei mõisteta täielikult (3, 4).

HBV replikatsiooniks on vajalik HBV regulatiivne B-hepatiidi viiruse X (HBX) valk (5,6). mitmed uuringud on teatanud, et HBX soodustab rakkude proliferatsiooni HBV infektsiooniga seotud hepatokartsinoomi (7-9) ajal. Inimese neerutuubulaarsed epiteelirakud (rTecs) moodustavad neerutuubulite interstitsiumi põhiosa ja mängivad aktiivset rolli neerupõletikus (10). rTec apoptoos on tihedalt seotud tubulaarse interstitsiumi düsfunktsiooniga, mis viib seejärel HBV-Gn progresseerumiseni (10). HBX ekspresseerub peamiselt rTec rakkudes ja põhjustab HBV-Gn-ga patsientidel rTec apoptoosi ja neerutoru kahjustusi (11, 12). Lisaks on teatatud, et HBX pärsib roti rTecside vohamist (13) ja HBX üleekspressioon kiirendab rakutsükli progresseerumist G1-st S-faasi primaarses rTecs-is, mis viib rakutsükli seiskumiseni S-faasis (14). Seetõttu võib HBX inhibiitori tuvastamine pakkuda uudset ravi HBV-Gn jaoks. Kuid HBX täpset molekulaarset võrgustikku inimese rTecsis ei mõisteta täielikult.(ehhinakosiid cistanche'ist)(ecH) on looduslik ühend, mis on ekstraheeritudCistanchetaimed, millel on antiapoptootiline ja põletikuvastane toime (15, 16). Eelmises uuringus teatati, et ecH kutsub esile sooleepiteelirakkude proliferatsiooni ja takistab nende apoptoosi (17). Lisaks on teatatud, et ecH kiirendab luu taastumist, suurendades osteoblastirakkude proliferatsiooni (18). ecH võib samuti vähendada HBV replikatsiooni, antigeeni ekspressiooni ja põletikku roti sooleepiteelirakkudes (16, 19). Siiski ei ole ecH bioloogilist mõju rTecsile täielikult välja selgitatud.

TreM2 üleekspressioon soodustas glioomirakkude proliferatsiooni (22). Seevastu TreM2 knockdown vähendab nF-κB translokatsiooni tuuma degeneratiivsetes inimese nucleus pulposus rakkudes (23). Lisaks on TreM2 tuvastatud kui uudne terapeutiline sihtmärk inimese intervertebraalse ketaste degeneratsiooni korral (23). TreM2 bioloogilist funktsiooni inimese rTecsis ei ole siiski teatatud. Käesolevas uuringus indutseeriti inimese rTecs (HK-2 rakuliin) HBX üleekspressioon (oeHBX) ja seejärel ecH(ehhinakosiid cistanche'ist) uuriti transfekteeritud oeHBX rakkudel. Käesoleva uuringu eesmärk oli uurida HBX funktsioone ja ecH potentsiaalset väärtust HBV-Gn tõhusa raviainena.

Materjalid ja meetodid

Kamber kultuur.Inimese rTec rakuliin HK-2 osteti ettevõttelt Shanghai Yaji Biotechnology co., ltd. HK-2 rakke kultiveeriti DME/F12 söötmes (kat. nr SH30023.01B; Hyclone; cytiva), millele oli lisatud 10 protsenti veise loote seerumit (kat. nr 16000-044; Gibco; Thermo Fisher Scientific, inc. .), 2 mM l-glutamiini ja 1 protsenti penitsilliini/streptomütsiini (kat. nr P1400-100; Beijing Solarbio Science & Technology co., Ltd.) temperatuuril 37 ˚C 5 protsendi CO2-ga.

RNA isolatsioon ja tagurpidi transkriptsioon-kvantitatiivne PCR (RT-qPCR).Kogu RNA ekstraheeriti HK-2 rakkudest, kasutades Trizol®-i (kat. nr 1596 -026; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, inc.) vastavalt tootja protokollile. Kogu RNA pöördtranskribeeriti cDNA-ks, kasutades First-Strand cDNA Synthesis komplekti vastavalt tootja protokollile (kat. nr K1622; Thermo Fisher Scientific, Inc.). qPCR viidi läbi, kasutades SYBr-Green eelsegu vastavalt tootja protokollile (kat. nr K0223; Thermo Fisher Scientific, Inc.) reaalajas ABI-7300 detektoril (Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.). PCR tingimused olid: 95 ˚C 10 min, millele järgnes 40 tsüklit 95 ˚C 15 sekundit, 60 ˚C 45 sekundit. Iga reaktsiooni jaoks oli vaja kolm kordamist. qPCR jaoks kasutati järgmisi praimerite paare: HBX päri, 5'-GGcTGcTaGGTTGTacTG-3' ja tagurpidi, 5'-caGaGGTGaaGcGaaGTG -3'; TreM2 edasi, 5'-TGGcacTcTcaccaTTacG-3' ja tagurpidi, 5'-ccTccc aTcaTcTTccTTcac-3'; ja GaPdH edasi, 5'-AAT cccaTcaccaTcTTc-3' ja tagurpidi, 5'-aGGcTGTTG TcaTacTTc-3'. mRNA tasemed kvantifitseeriti 2-ΔΔCq meetodil ja normaliseeriti sisemise võrdlusgeenigaGAPDH (24).

Üleekspressioon ja jalust maha lööma.HBX ja TreM2 üleekspressiooni esilekutsumiseks sisestati täispikk HBX või TreM2 cDNA järjestused plVX-puro vektorisse (cleantech laboratories, inc.) topeltdigereerimise teel (Hindiii jaEcoRI). Seejärel transfekteeriti rekombineeritud plasmiid (1,5 ug) HK-2 rakkudesse (2 x 105). Näidisplasmiid (tühi vektor, 1 µg) transfekteeriti ajutiselt HK-2 rakkudesse (2x105) negatiivse kontrollina (oenc), kasutades lipofectamine® 2000 (kat. nr 11668-027, Invitrogen, Thermo). Fisher Scientific, inc.). ecH(ehhinakosiid cistanche'ist)(kat. nr 82854-37-3; Biopurify Phytochemicals, ltd.) lahustati DMSO-s (kat. nr d2650; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) kontsentratsiooniga 1, 2,5, 5, 10, 20 ja

vastavalt 50 mg/l; ja lisati transfekteeritud oeHBX või oeTreM2 rakkude kultuurile. Järgnev katsetamine algas 48 tundi hiljem.

TreM2 ekspressiooni mahasurumiseks sünteesiti kolm väikest segavat (si)RNA-d (siTreM2-1, siTreM2-2 ja siTreM2-3; 20 µM), mis olid suunatud TreM2-le (Shanghai Majorbio Bio-Pharm Technology co. .ltd.) ja seejärel transfekteeriti HK-2 rakkudesse (2x105), kasutades lipofectamine® 2000 vastavalt tootja protokollile (Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.). Negatiivse kontrollina kasutati mittespetsiifilist segatud siRNA järjestust (5'uucuccGaacGuGucacGu3, 25 nM) si-negatiivset kontrolli (nc). TreM2 sirnade sihitud lookus ja järjestused on toodud tabelis Si. Järgnev katse viidi läbi 48 tundi hiljem.

Lääne blotimine.Kogu valk ekstraheeriti HK-2 rakkudest

kasutades RIPA lüüsipuhvrit (kat. nr BYl40825; Jrdun Biotech Co., Ltd.). Kogu valk kvantifitseeriti, kasutades Bicinchoninic Acid assay komplekti (kat. nr PICPI23223; Thermo Fisher Scientific, inc.) vastavalt tootja protokollile ja 20 µg valku raja kohta eraldati SDS-PaGe abil 15% geelil. Proovide densitomeetria määrati mikroplaadilugeja abil (dnM{5}}, Pulangxin). Seejärel kanti eraldatud valgud PVDF membraanile. Pärast blokeerimist 5% rasvavaba kuivpiimaga 1 tund toatemperatuuril, inkubeeriti membraani primaarsete antikehadega (tabel SII) öö läbi temperatuuril 4 °C ja inkubeeriti uuesti hiirevastase igG sekundaarse antikehaga (1:1, 000, kat. nr a0216, Beyotime Biotechnology Institute) 1 tund temperatuuril 37 ˚C. Immunoreaktiivsed valguribad visualiseeriti ecl-süsteemi (cytiva) abil. Blotid viidi läbi kolmes eksemplaris.GAPDHja H3 kasutati vastavalt tsütoplasmaatiliste ja tuumavalkude laadimiskontrollina.

Tulemused

ECH (ehhinakosiid cistanche'ist)surub alla funktsiooni kohta HBX sisse HK-2 rakud.Hindama

HBX funktsioon, HK-2 rakkudes indutseeriti HBX üleekspressioon. HBX suhteline mrna ja valgu tase oli oeHBX rakkudes oenc rakkudega võrreldes oluliselt ülesreguleeritud (joonised 1a ja B). Seejärel kultiveeriti oeHBX rakke erinevate ecH kontsentratsioonidega (vastavalt 1, 2,5, 5, 10, 20 ja 50 mg/l; e1, e2,5, e5, e10, e20 ja e50). HBX üleekspressioon vähendas märkimisväärselt HK-2 rakkude proliferatsiooni ja 24. ja 48. tunni möödudes pöördus see langus ecH toimel annusest sõltuval viisil tagasi (joonis 1c).

Lisaks ei näidanud oeHBX rakkude proliferatsioonikiirus olulist erinevust võrreldes E1-ga töödeldud rakkudega (joonis 1c). Seevastu e10-ravi suurendas oluliselt oeHBX-rakkude proliferatsioonikiirust võrreldes E20- ja E50-raviga, mis ei näidanud olulist erinevust (joonis 1c). Seetõttu uuriti ecH mõju apoptoosile e2.5, e5 ja e10- töödeldud rakkudes. HBX üleekspressioon suurendas oluliselt HK-2 rakkude apoptoosi ja oeHBX rakkude apoptoosi määr vähenes ecH-ravi korral annusest sõltuval viisil (joonis 1d). Üldiselt näitasid tulemused, et ecH inhibeeris HBX funktsiooni HK-2 rakkudes annusest sõltuval viisil.

TREM2 väljendus on inhibeeritud kõrval ECH(ehhinakosiid cistanche'ist) sisse transfekteeritud oeHBX

rakud.TreM2 suhtelise mrna ja valgu ekspressioonitaseme uurimiseks oeHBX rakkudes kasutati rT-qPcr ja Western blot analüüsi. TreM2 mrna ja valgu ekspressioonitasemed olid oeHBX rakkudes oenc rakkudega võrreldes oluliselt ülesreguleeritud (joonised 2a ja B). Siiski vähendas ecH TreM2 ekspressioonitaset transfekteeritud oeHBX rakkudes annusest sõltuval viisil (joonised 2a ja B). Seetõttu näitasid tulemused, et HBX ekspressioon oli positiivselt seotud TreM2 ekspressiooniga, ja näitasid lisaks ecH pärssivat toimet HBX-ile HK-2 rakkudes.

Jalust maha lööma ja üleekspressioon kohta TREM2 sisse HK-2 rakud.TreM2 funktsiooni edasiseks hindamiseks indutseeriti HK-2 rakkudes TreM2 knockdown ja üleekspressioon, kasutades vastavalt RNA interferentsi ja lentiviiruse vektorit. Knock-down testi jaoks kolm siRNA-d, mis on suunatud inimese geenileTREM2(siTreM2-1, siTreM2-2 ja siTreM2-3) transfekteeriti HK-2 rakkudesse ja negatiivse kontrollina (sinc) kasutati mittespetsiifilist siRNA-d. kõik kolm TreM2 sirnat lõid edukalt maha TreM2 endogeense ekspressiooni HK-2 rakkudes (joonis 3a ja B). Siiski täheldati madalaimaid suhtelisi TreM2 mrna ja valgu ekspressioonitasemeid siTreM2-1 ja siTreM2-2-transfekteeritud rakkudes (joonised 3a ja B), seega siTreM2-1 ja siTreM{{13 }}transfekteeritud rakud valiti järgnevateks katseteks. Üleekspressioonikatsete jaoks konstrueeriti inimese täispikka TreM2cdna järjestust sisaldav plasmiid ja seejärel transfekteeriti HK-2 rakkudesse (oeTreM2). a

näidisplasmiid toimis negatiivse kontrollina (oenc). TREM2 ekspressiooni tase oli oeTREM2 rakkudes oenc rakkudega võrreldes oluliselt suurenenud (joonised 3c ja d). Seetõttu kasutati järgnevateks katseteks oeTreM2 rakke.

TREM2 vaigistamine väheneb a apoptoos kohta oeHBX rakud.Hinnati siTREM2 või sinc-ga transfekteeritud oeHBX rakkude apoptoosiprofiili. OeHBX pluss sinc rakkude apoptoosi määr oli avatud rakkudega võrreldes oluliselt kõrgem. Siiski vähenes apoptoosi määr oluliselt oeHBX pluss siTreM2-1 või siTreM2-2 rakkudes võrreldes oeHBX pluss sinc rakkudega (joonis 4a). Tulemused näitasid, et TreM2 knockdown inhibeeris HBX funktsiooni HK-2 raku apoptoosi ajal.

Surviviin kuulub apoptoosivalgu perekonna inhibiitorite hulka, mis pärsib apoptootilist aktiivsust ja pärsib rakusurma (25). Survivini sihtimine on tuvastatud kui uudne lähenemisviis neerurakulise kartsinoomi ravis (26). nF-κB on ka apoptoosi inhibiitor, mis mängib rolli apoptootilistes kasvajaprotsessides (27). Lisaks on kaspaas3 aktiveerimine tihedalt seotud apoptoosiga (28). Käesolevas uuringus kvantifitseeriti TreM2, Surviviini ja lõhustatud kaspaas3 valgusisaldus HK-2 rakkudes. TREM2 ekspressiooni tase langes oluliselt oeHBX pluss siTreM2-1/2 rakkudes võrreldes oeHBX pluss sinc rakkudega (joonis 4B). Surviviini ekspressiooni tase oli oeHBX pluss siTreM2-1/2 rakkudes oluliselt suurenenud, võrreldes oeHBX rakkudega. lisaks vähenes lõhustatud kaspaas3 ekspressiooni tase oluliselt oeHBX pluss siTreM2-1/2 rakkudes võrreldes oeHBX pluss sinc rakkudega (joonis 4B). Lisaks vähendas oeHBX oluliselt NF-κB translokatsiooni tuuma ja siTREM2-1/2 transfektsioon suurendas oluliselt nF-κB tuuma translokatsiooni (joonis 4B). Kokkuvõttes näitasid tulemused, et TreM2 oli HBX-i allavoolu tegur HK-2 rakkudes, mistõttu võib HBX soodustada apoptoosi, reguleerides TreM2 ekspressiooni inimese rTecs-is.

TREM2 üleekspressioon surub alla a translokatsioon kohtaNF-κB juurde a tuum sisse HK-2 rakud.ECH mõju(ehhinakosiid cistanche'ist)oeTreM{0}}transfekteeritud rakke analüüsiti. TreM2 üleekspressioon soodustas HK-2 rakkude apoptoosi (joonis 5a). ECH-ravi vähendas oluliselt oeTREM2 rakkude apoptoosi (E10; joonis 5A). Lisaks vähendas ECH oluliselt TreM2 ekspressiooni oeTreM2 rakkudes. TREM2 üleekspressioon vähendas märkimisväärselt Survivini ekspressioonitasemeid, kuid ecH muutis selle ekspressiooni vähenemise ümber. lisaks suurenesid lõhustatud kaspaas3 valgu ekspressioonitasemed oeTreM2 rakkudes oenc rakkudega võrreldes oluliselt; mõju, mida ECH-ravi oluliselt vähendas. Lisaks soodustas ecH nF-κB translokatsiooni oeTreM2 rakkudes tuuma (joonis 5B). Kokkuvõttes näitasid tulemused, et ecH pärssis ka TreM2 funktsiooni inimese rTec rakkudes.

HBX funktsioonid on allasurutud kõrval a NF-κB inhibiitor PDTCsisse inimene RTEC-id.Suhet edasiseks hindamiseks

HBX ja nF-κB, HK-2 rakke kultiveeriti spetsiifilise nF-κB inhibiitoriga PdTc (10 µmol/l; P10). OeHBX rakkude raku apoptoosi määr oli oluliselt suurenenud võrreldes oenc rakkudega (joonis 6a). Kuid oeHBX pluss PdTc rakkudel oli oeHBX rakkudega võrreldes oluliselt suurenenud apoptoosi määr. Lisaks on TreM2 suhteline mRNA ja valgu ekspressioonitasemed oeHBX pluss PdTc rakkudes võrreldes oeHBX rakkudega langenud (joonis 6B). Seetõttu tulemused

soovitas, et nF-κB reguleeris negatiivselt TreM2 ekspressiooni oeHBX-ga transfekteeritud rakkudes.

NF-κB inhibiitor PDTC surub alla TREM2 promootor tegevust sisse oeHBX rakud.konstrueeriti lutsiferaasi reporter (pGl3-enhancer-luc2), mis sisaldas TreM2 metsikut tüüpi promootorjärjestust (pGl3-enhancer-luc2-pTreM2), mis seejärel transfekteeriti oenc , oeHBX ja oeHBX pluss P10 kultiveeritud rakud.

Metsiktüüpi TREM2 promootorit sisaldava reportervektori lutsiferaasi aktiivsus suurenes oeHBX rakkudes oluliselt võrreldes oenc rakkudega. Kuid PdTc pärssis oluliselt reporteri lutsiferaasi aktiivsust oeHBX rakkudes (joonis 7). Üldiselt näitasid tulemused, et PdTc inhibeeris TreM2 transkriptsiooni, pärssides TreM2 promootori aktiivsust oeHBX rakkudes.

Arutelu

HBX ekspresseerub peamiselt HBV-Gn-ga patsientide rTecs-des ja toimib viiruse patogeneesi määrajana (11, 29). Seetõttu on HBX-i molekulide võrgu funktsioonide teadmiste suurendamine kriitiline samm HBV-Gn-i ravi uudse lähenemisviisi väljatöötamisel. Käesoleva uuringu eesmärk oli täiendavalt uurida HBX funktsiooni ja uurida selle potentsiaalset molekulaarset võrgustikku inimese rTecsis.

HBX pärsib rTecs-i vohamist (11). Käesolevas uuringus tuvastati HBX proliferatsiooni- ja apoptoosivastased funktsioonid inimese RTEC-des, mis viitab sellele, et HBX pärssis inimese rTecs-i arengut. eelmine uuring näitas, et ecH(ehhinakosiid cistanche'ist)pärsib HBV replikatsiooni ja antigeeni ekspressiooni (19). käesolevas uuringus ecH(ehhinakosiid cistanche'ist)ravi katkestas HBX funktsiooni HK-2 rakkudes, seetõttu võib HK-2 rakkude ecH mõjutada HBX-i.

Molekulaarmeditsiini aruanne 22: 1137-1144, 2020 1143

Lisaks näitasid tulemused, et ecH(ehhinakosiid cistanche'ist)võib olla HBV-Gn potentsiaalse raviainena.

TreM2 on kaasasündinud immuunretseptor, mis mängib rolli põletikulises vastuses (30). Käesolevas uuringus oli HBX ekspressioon positiivselt seotud TreM2 ekspressiooniga inimese RTECS-is. Veelgi enam, TREM2 knockdown vähendas oluliselt oeHBX rakkude ja ecH apoptoosi kiirust(ehhinakosiid cistanche'ist)ravi vähendas oeTreM2 mõju raku apoptoosile. Kokkuvõttes näitasid need tulemused, et HBX sihtis TreM2 HK-2 rakkudes. Seetõttu on ecH(ehhinakosiid cistanche'ist)võib pärssida inimese rTecsi apoptoosi, blokeerides HBX/TreM2 signaaliraja aktiivsust.

Eelmine aruanne näitas, et nF-κB ei mängi mitte ainult rolli raku apoptoosis, vaid osaleb ka immuunvastuste ja põletiku reguleerimises (31). Lisaks vahendab TreM2 Alzheimeri tõve ja kollatähni degeneratsiooni ajal nF-κB-tundlik mikroRNA{5}a (32,33). käesolevas uuringus suurenes oeHBX rakkude apoptootiline kiirus PdTc juuresolekul märkimisväärselt. Meie teadmiste kohaselt näitas käesolev uuring esimest korda, et NF-κB inhibiitor PdTc pärssis TreM2 promootori aktiivsust. Lisaks näitasid tulemused, et TreM2 reguleeris negatiivselt nF-κB translokatsiooni HK-2 rakkude tuuma, kuid oli positiivselt seotud lõhustatud kaspaas3 ekspressioonitasemetega. TreM2 mängis HK-2 rakkudes vastupidist rolli inimese degeneratiivsete nucleus pulposuse ja glioomirakkude puhul (22, 23). Seetõttu näitas käesolev uuring, et TreM2-l võib erinevat tüüpi inimrakkudes olla erinevad funktsioonid.

Kokkuvõttes ei näidanud käesolev uuring mitte ainult seda, et nF-κB oli HBX / TreM2 signaaliraja uus komponent, vaid viitas ka sellele, et nF-κB reguleerib negatiivselt TreM2 ekspressiooni inimese rTecsis. Käesoleva uuringu peamised piirangud olid aga selle puuduminesisse vivokatsed ja kliinilised andmed. Seetõttu edasisisse vivoja kliinilised uuringud on vajalikud käesoleva uuringu tulemuste kinnitamiseks.

käesolevas uuringus ecH funktsioon(ehhinakosiid cistanche'ist)uuriti ja tulemused viitasid ecH võimalikele mõjudele(ehhinakosiid cistanche'ist)inimese rTecs signaaliradadel. Lisaks suurendas käesolev uuring olemasolevaid teadmisi ecH bioloogilise funktsiooni kohta inimese rTec rakkudes ja pakkus välja ka selle potentsiaali HBV-Gn uudse raviainena.

Viited

1. Karayiannis P: B-hepatiidi viirus: viroloogia, molekulaarbioloogia, elutsükkel ja intrahepaatiline levik. Hepatology International 11: 1-9, 2017.

2. Seeger c ja Mason WS: B-hepatiidi viiruse bioloogia. Microbiol Mol Biol rev 64: 51-68, 2000.

3. Usama e, ana Maria S, W ray K ja Fervenza Fc: B-hepatiidi viirusega seotud nefropaatia ravi. nephron clin Pract 119: c41-c49, 2011.

4. Zhang Y, li J, Peng W, Yu G, Wang l, chen J ja Zheng F: HBV-ga seotud postinfektsioosne äge glomerulonefriit: aruanne 10 juhtumist. PloS one 11: e0160626, 2016.

5. Slagle Bl ja Bouchard MJ: B-hepatiidi viirus X ja viiruse geeni ekspressiooni reguleerimine. külm Spring Harb Perspect Med 6: a021402, 2016.

6. Guerrieri F, Belloni l, d'andrea d, Pediconi n, le Pera l, Testoni B, Scisciani c, Floriot o, Zoulim F, Tramontano a,et al: HBx otseste genoomsete sihtmärkide genoomi hõlmav tuvastamine. BMc genomics 18: 184, 2017.

7. Shi T, Hua Q, Ma Z ja lv Q: B-hepatiidi viiruse X (HBx) valgu poolt indutseeritud mir-200a-3p alareguleerimine soodustab rakkude proliferatsiooni ja invasiooni HBV-infektsiooniga seotud hepatokartsinoom. Pathol res Pract 213: 1464-1469, 2017.

8. Tian Y, Xiao X, Gong X, Peng F, Xu Y, Jiang Y ja Gong G: HBx soodustab rakkude proliferatsiooni, häirides mir-181a ja PTeni vahelist läbirääkimist. Sci rep 7: 40089, 2017.

9. Idris Me, Hachem H, Koering c, Merle P, Thénoz M, Montreux F ja Wattel e: HBx käivitab sõltuvalt raku fenotüübist kas rakkude vananemise või rakkude proliferatsiooni. J Viral Hepat 23: 130-138, 2016.

10. Wang X, Wang l, Zhu n, Zhou Y, Gu lJ ja Yuan WJ: B-hepatiidi viiruse X valk moduleerib neerutuubulite epiteelirakkude poolt indutseeritud T-rakkude ja makrofaagide vastuseid. Immunol cell Biol 94: 266-273, 2016.

11. He P, Zhang d, li H, Yang X, li d, Zhai Y, Ma l ja Feng G: B-hepatiidi viiruse X valk moduleerib apoptoosi inimese neeru proksimaalsetes tubulaarsetes epiteelirakkudes, aktiveerides JaK2/STAT3 signaaliraja. int J Mol Med 31: 1017-1029, 2013.

12. Yang Y, Wang X, Zhang Y ja Yuan W: B-hepatiidi viiruse X valk ja põletikueelsed tsütokiinid sünergiseerivad, et dr4 ülesreguleerimise teel tõhustada neerutuubulite rakkude jälg-indutseeritud apoptoosi. int J Biochem cell Biol 97: 62-72, 2018.

13. He P, Zhou G, Qu d, Zhang B, Wang Y ja li d: HBx inhibeerib proliferatsiooni ja kutsub esile apoptoosi Fas/Fasl ülesreguleerimise kaudu roti neerutuubulite epiteelirakkudes. J Nephrol 26: 1033, 2013.

14. Han W, luo M, He M, Zhu Y, Zhong Y, ding H, Hu G, liu l, chen Q ja lu Y: HBx geeni transfektsioon mõjutab primaarsete neerutuubulite epiteelirakkude tsüklit tsükliini ekspressiooni reguleerimise kaudu. Mol Med rep 18: 1947-1954, 2018.