1. osa: Askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiini-3-rutinosiidi koostoime raua olemasolul ja puudumisel termilisel töötlemisel ning mõju antioksüdantsele aktiivsusele

Mar 15, 2022


Lisateabe saamiseks võtke ühendusttina.xiang@wecistanche.com


Abstraktne: Puu- ja köögiviljade bioaktiivsed ühendid mõjutavad üksteistantioksüdanttegevust. Puhtad standardid ja tavaliste taimsete ühendite segud, nimeltaskorbiinhape, {{0}}kofeoüülkiinhapet ja kvertsetiin-3-rutinosiidi (summa 0,3 mM) analüüsiti raua juuresolekul ja selle puudumisel enne ja pärast termilist töötlemist vesilahuses. Antioksüdantset aktiivsust mõõdeti üldfenoolisisalduse (TPC), 1,1-difenüül-2-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) ja 2,2'-asino-bis (3-etüülbensotiasoliini{{14} järgi). }sulfoonhappe) (TEAC) radikaalide püüdmise testid. Ioonset raudrauda (Fe2 pluss) ja raudrauda (Fe) mõõdeti fotomeetriliselt. Reaktsiooniproduktide kvalifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks kasutati HPLC-d. Tulemused näitasid, et termiline töötlemine ei pruugi viia antioksüdantse aktiivsuse vähenemiseni, isegi kui ühendi kontsentratsioon väheneb, kuna siis on lagunemissaadused ise antioksüdantse toimega. Kõigis kasutatud antioksüdantanalüüsides oli askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe suhtel 2:1 raua juuresolekul tugev sünergistlik toime, samas kui suhtel 1:2 oli tugev antagonistlik toime. Prooksüdantne raud mõjutas positiivselt antioksüdantset aktiivsust kombinatsioonis kasutatud antioksüdantidega, samas kui raudraud ise suhtles üldiste antioksüdantide aktiivsuse üldiste in vitro testidega. Need tulemused näitavad, et ühendite antioksüdantset aktiivsust mõjutavad sellised tegurid nagu interaktsioon teiste molekulidega, temperatuur ja olemasolevad mineraalid.

Märksõnad: ABTS; antagonism;askorbiinhape;bioaktiivsed ühendid;5-kofeoüülkiinhape; kelaativad kompleksid; raudraud; raudraud; HPLC; kvertsetiin-3-rutinosiidi sünergism; TPC

Lisateabe saamiseks klõpsake siin

flavonoids antioxidant

1. Sissejuhatus

Inimese toidus tarbitakse kogu päeva jooksul palju erinevaid taimseid tooteid, isegi sama toidukorra ajal. Puu- ja köögivilju seostatakse mitmesuguste bioaktiivsete ühendite, st vitamiinide, mineraalide ja sekundaarsete taimsete metaboliitide tõttu, tervisele kasulike omadustega |1]. Võrreldes vitamiinide ja mineraalidega ei peeta sekundaarseid taimseid metaboliite, nagu fenoolid, tänapäevaste teadmiste kohaselt inimeste tervise jaoks oluliseks[2]. Paljud sekundaarsed taimede metaboliidid on aga tugevad antioksüdandid, mis aitavad kaitsta bioloogilisi süsteeme reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) ja reaktiivsete lämmastikuliikide (RNS) eest[3]. Need bioaktiivsed ühendid võivad enne tarbimist üksteisega suhelda, mille tulemuseks on arvukalt järgnevaid reaktsiooniprodukte või komplekse. Järelikult võib nende panust tarbijate tervisesse ja nende antioksüdantset aktiivsust (AOA) muuta 4| või kadunud enne söömist. Ühendite erinevad molekulaarstruktuurid ja nende erinevad kombinatsioonid võivad interaktsioonide kaudu kaasa tuua täiendavaid, sünergistlikke või isegi antagonistlikke mõjusid. Taimekomponentide interaktsioonide mõju nende radikaalide eemaldamise võimele ei ole veel täielikult teada, eriti paljude erinevate oksüdatsioonietappide ja nende võime tõttu luua komplekse. Peamine bioaktiivne ühend, mida leidub paljudes taimeliikides, on 5-kofeoüülkiinhape (klorogeenhape), kohvhappe ja kiinhappe hüdroksükaneelhappe ester. See võib moodustada raua komplekse, mis on üldiselt seotud mitteheemse raua imendumise vähenemisega inimestel[5,6]. Raud hemoglobiini komponendina on inimkeha jaoks hädavajalik mineraal, samas kui raua liig võib põhjustada rakkudes oksüdatiivset stressi [7]. Koostoimed teiste toitainetega võivad suurendada või vähendada raua imendumist, näiteks komplekside moodustamise kaudu. Lisaks on raual võime kergesti vastu võtta ja loovutada elektrone.

Teine huvitav bioaktiivne ühend taimedes onkvertsetiin-3-rutinosiid(rutiin), aflavonoidglükosiid, mida peamiselt sünteesivad taimed, et kaitsta end UV-kiirguse eest [8,9]. Sellel on madal lahustuvus vees [10] ja see ei pääse otse inimese vereringesse, mistõttu selle bioaktiivne aktiivsus algab alles kuus kuni üheksa tundi pärast tarbimist, kui see läbib soolestiku mikrobioomi. Toidulisandites kombineeritakse kvertsetiin-3-rutinosiidi sageli askorbiinhappega [11].Askorbiinhapeon inimkehale hädavajalik vitamiin ja seda on vaja paljudes ainevahetusprotsessides. See on ka võimas vees lahustuv antioksüdant, kuid võib toimida ka prooksüdandina, mis on tingitud selle võimest redutseerida raudrauda kelaadikompleksi moodustumise kaudu, millele järgneb raudraud ja askorbiinradikaal[12]. Bioaktiivsete ühendite kvertsetiin-3-rutinosiidi, 5-kofeoüülkiinhappe või raua imendumine inimkehas leiti askorbiinhappe [12] lisamisega, samas kui 5-kofeoüülkiinhape vähendas raua imendumist. kompleksi moodustamise teel [6]. Erinevate toodete tervisele kasulike omaduste ennustamiseks bioaktiivsete ühendite osas kasutatakse tavaliselt in vitro antioksüdantide analüüse. See tervisemõjude prognoosimine on piiratud ühendite muutuva biosaadavuse, metaboliseerumise ja erinevate antioksüdantide mehhanismide tõttu |13]. Need testid on siiski kasulikud bioaktiivsete ühendite, näiteks polüfenoolide testimiseks või, nagu käesolevas uuringus, üksikute ühendite AOA ja nende koostoimete hindamiseks. Puu- ja köögiviljad sisaldavad mitmesuguseid bioaktiivseid ühendeid, mis võivad moodustada komplekse teiste ühendite ja valkudega, mis võivad nendega suhelda. Need interaktsioonid võivad mõjutada ühendite käitumist ja sellest tulenevat AOA-d. Selle töö eesmärk on aga aidata kaasa teadmistele selle kohta, kuidas bioaktiivsed ühendid omavahel suhtlevad ja nende mõju AOA-le. Selle uuringu uudsus seisneb tavaliste fenoolsete ühendite, nimelt askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe, kvertsetiin-3-rutinoidi vastastikuses toimes omavahel ja mineraalse raua eel- ja järeltermiliselt töötlemisega. Enne seda uuringut hinnati neid tegureid eraldi, mitte koos. Keskenduti AOA-le ja selle võimele ehitada komplekse. Hüpoteesid olid järgmised: (1) termiline töötlemine mõjutab AOA-d negatiivselt antioksüdantide lagunemise tõttu, (2) askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi erinevates vahekordades segud tekitavad sünergilise toime. mõju AOA-le ja (3) mineraalse ja prooksüdantse raua lisamine vähendab antioksüdantide antioksüdantide aktiivsust üksi või segudes.

flavonoids clear free radicals

2. Tulemused

2.1. Termilise töötlemise mõju askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiini-3-rutinosiidi standardite ja mineraalse raua antioksüdantsele toimele

Üheski puhtas askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe võikvertsetiin-3-rutinosiid(Joonis 1) või nende segud (joonised 2 ja 3) mõjutasid küpsetusaegu vahemikus 0 kuni 40 minutit AOA-le, välja arvatud askorbiinhappe ja raua kombinatsioonis. AOA oli TEAC ja DPPH testides madalam pärast 40-minutilist keetmist, võrreldes kuumtöötlemata proovidega (joonis 1). Askorbiinhapet sisaldavate proovide AOA kipub vähenema, samas kui kvertsetiin-3-rutinosiidi sisaldavate proovide AOA suureneb pikema küpsetusaja korral (joonised 1-3).

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red),  quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with  and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked  with a triangle ▲. Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and  are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.  In binary mixtures, detected by the TEAC assay (Figure 2a–c), iron led to a significant  or trending increase in AOA. Among samples without iron, no differences between AOA  of mixtures or ratios were found. In the presence of iron at a cooking time of 0 min, the  ratios 1:1 and 1:2 of ascorbic acid and 5-caffeylquinic acid, and a 2:1 ratio of the 5- caffeylquinic acid and queretin-3-rutinoside mixture, were higher in their AOA than their  iron-free counterparts. In the DPPH assay (Figure 2d–f), the combination of ascorbic acid  with 5-caffeoylquinic acid, as well as with quercetin-3-rutinoside, showed in the presence  of iron in all ratios a higher AOA than the AOA of pure ascorbic acid. However, ascorbic  acid combined with quercetin-3-rutinoside showed a higher AOA in the absence of iron,  being comparable to pure quercetin-3-rutinoside. In the TPC assay (Figure 2g–i), the AOA  of all three binary mixtures showed identical patterns. There was no influence of iron or  cooking time on AOA. These results correspond with previous findings in pure substances (Figure 1): the lowest AOA was detected in ascorbic acid and 5-caffeoylquinic acid  mixtures, followed by ascorbic acid with quercetin-3-rutinoside, and the highest AOA was  found in the combination of 5-caffeoylquinic acid and quercetin-3-rutinoside.  Figure 1. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle N . Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid  (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate  the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences  (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and  without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a  triangle ▲. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times  and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.  In all ternary mixtures, no differences between ratios, regardless of the presence of  iron, in TEAC and DPPH assays were found (Figure 3a–f). Higher AOAs were found in  the TEAC assay (Figure 3a–c) in the presence of iron. At 0 min cooking time the AOAs of  the equimolar mixture and the 1:2:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside were higher in the presence of iron. The DPPH assay revealed higher  Figure 2. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.

2.2. Raua ja askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiini-3-rutinosiidi standardite erinevate kombinatsioonide mõju antioksüdantsele aktiivsusele

Analüüsid TEAC-testiga (joonis la) näitasid, et puhta askorbiinhappe AOA oli madalam kui kvertsetiin{{0}}rutinosiidi AOA. Raua juuresolekul oli askorbiinhappe AOA isegi madalam kui kvertsetiin-3-rutinosiidi ja 5-kofeoüülkiinhappe AOA. Raua lisamine suurendas kvertsetiin-3-rutinosiidi ja 5-kofeoüülkiinhappe AOA-d. Küpsetusajal 0min oli ainult 5-kofeoüülkiinhappe AOA kõrgem nii raua olemasolul kui ka puudumisel. DPPH test (joonis 1b) tuvastas raua puudumisel kvertsetiin-3-rutinosiidi kõrgema AOA kui 5-kofeoüülkiinhappe ja askorbiinhappega. Raua olemasolu tõi kaasa 5-kofeoüülkiinhappe AOA suurenemise ja kvertsetiini-3-rutinosiidi proovide AOA vähenemise. 0-minutise küpsetusaja juures oli ainult kvertsetiin-3-rutinosiid raua puudumisel kõrgem kui raua juuresolekul. Ainult TPC testis (joonis lc) ei mõjutanud raud AOA-d ja kolme aine järjestus jäi samaks.

TEAC-testiga tuvastatud kahekomponentsetes segudes (joonis 2a–c) põhjustas raud AOA märkimisväärse või trendi suurenemise. Ilma rauata proovide hulgas ei leitud erinevusi segude või suhete AOA vahel. Raua juuresolekul küpsetusajal 0 min askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe vahekorras 1:1 ja 1:2 ning {{10} }kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiini-3-rutinosiidi segu AOA oli kõrgem kui nende rauavabadel analoogidel. DPPH testis (joonis 2d-f) näitas askorbiinhappe kombinatsioon 5-kofeoüülkiinhappega, aga ka kvertsetiin-3-rutinosiidiga raua juuresolekul kõigis suhetes kõrgemat AOA-d kui puhta askorbiinhappe AOA. Kuid askorbiinhape koos kvertsetiin-3-rutinosiidiga näitas raua puudumisel kõrgemat AOA-d, mis on võrreldav puhta kvertsetiin-3-rutinosiidiga. TPC testis (joonis 2g-i) näitas kõigi kolme binaarse segu AOA identseid mustreid. Raud ega küpsetusaeg AOA-le ei mõjutanud. Need tulemused vastavad varasematele puhaste ainete leidudele (joonis 1): madalaim AOA tuvastati askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe segudes, millele järgnes askorbiinhape kvertsetiin-3-rutinosiidiga ning kõrgeim AOA oli leidub 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi kombinatsioonis.

Kõigis kolmekomponentsetes segudes ei leitud TEAC- ja DPPH-testides erinevusi suhete vahel, olenemata raua olemasolust (joonis 3a–f). Kõrgemad AOA-d leiti TEAC testis (joonis 3a-c) raua juuresolekul. 0Minimal küpsetusajal olid ekvimolaarse segu AOA-d ning askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi 1:2:1 suhe raua juuresolekul kõrgemad . DPPH test näitas rauaga proovides kõrgemat AOA-d suhtega 1:2:1 (joonis 3e). Vastavalt binaarsetele segudele ei mõjutanud TPC testi raud ega küpsetusaeg (joonis 3g-i). Lisaks oli ekvimolaarsel segul raua puudumisel AOA madalam kui suhe 1:2:2. Mitteekvimolaarsetes segudes ühe kahekordse ühendiga oli 1:1:2 suhe AOA-s kõrgem võrreldes 2:1:1 suhtega (joonis 3h) ja mitteekvimolaarsetes kahe kahekordse ühendiga suhe 1:2: 2 suhe oli AOA puhul kõrgem võrreldes 2:1:2 ja 2:2:1 suhtega (joonis 3i) raua juuresolekul ja puudumisel.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ternary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on AOA; standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate different mixing ratios. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different exposure times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 2.

1flavonoids antioxidant

2.3. Antioksüdantse aktiivsuse sünergistlikud ja antagonistlikud mõjud

Kõik testid näitasid peamiselt nõrku sünergistlikke ja antagonistlikke toimeid koostoimetega alla 10 protsendi (joonis 4). Tähelepanuväärne on see, et kõigi kasutatud testanalüüside hulgas oli askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe suhtel 2:1 raua juuresolekul tugev sünergistlik toime, samas kui askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe suhtel 1:2 happel oli tugev antagonistlik toime. TPC testis ilmnesid need nähtused ka rauata segudes. DPPH testis tuvastati veel üks tugev antagonistlik toime rauda sisaldava 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidita kahekomponentsete segude kõigis suhetes (joonis 4b). Kolmekomponentsete askorbiinhappe, 5-kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi segude puhul näitas TEAC-test tugevat antagonistlikku toimet rauaga vahekorras 2:2:1 (joonis 4a). Kolmekomponentsetes segudes rauaga näitas DPPH test tugevat antagonistlikku toimet keedetud proovides vahekorras 1:2:1, 1:1:2, 2:1:1 ja 2:2:1, aga ka ilma rauata segudes. vahekorras 1:1:2, 1:2:2 ja 2:1:1 (joonis 4b). TPC-analüüs näitas tugevat sünergistlikku toimet ilma rauata segudes vahekorras 1:2:1 (joonis 4c).

demostraction as the chart

2.4.Totaal- ja loogikaraud

Ioonset rauda lisati ekvimolaarse seguna 50 protsenti raudraudast (Fe3 pluss) ja 50 protsenti raudraudsest rauast (Fe2 pluss) ülalnimetatud puhastele, kahekomponentsetele ja kolmekomponentsetele segudele. Kõigis proovides nihkus raudraua suhe raud raua suunas võrreldes algselt lisatud ekvimolaarse suhtega. Kui proovides oli askorbiinhapet, vähenes seotud raua sisaldus küpsetusajaga ja seejärel kadus või stabiliseerus (tabel 1). Pearsoni korrelatsioon TEAC-testi andmetega näitas tugevat negatiivset korrelatsiooni (-0.641,p või võrdne 2,2*10-16) AOA ja raudraudioonide vahel ning positiivset korrelatsiooni AOA vahel. ja raud (0,377,lk<4.1*10-)over all="" samples.="" furthermore,="" the="" dpph="" assay="" showed="" a="" negative="" correlation="" (-0.429,p≤1.3*10-1l)="" between="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions.="" meanwhile,="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" only="" weakly=""><0.0006).in the="" tpcassay,="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions="" were="" strongly="" negatively="" correlated="" (-0.772,="" p=""><2.2*10-16), and="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" strongly="" positively="" correlated="" (0.685,=""><>

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside, and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%

Puhas askorbiinhappe proovides olid raudraua jäljed tuvastatavad, olenemata nende küpsetusajast. Lisaks suurenes raua kogus pärast keetmist kõigis askorbiinhappe proovides, samas kui seotud raud vähenes. 5-Kofeoüülkiinhappe proovides vähenes raudraud (III) 13,3 protsenti pärast 40-minutilist termilist töötlemist, samal ajal kui raua sisaldus veidi suurenes. Kvertsetiin-3-rutinosiidi proovid rauaga andsid peaaegu stabiilse koguse raudraud. Seotud raua sisaldus suurenes pikema küpsetusajaga, samas kui raudraud vähenes pärast 40-minutilist keetmist 20,49 protsenti (tabel 1).

Askorbiinhappe juuresolekul sisaldasid 0 min keedetud binaarsed proovid 18,9–28,9 protsenti seotud rauda, ​​mis keetmisel eraldati. Seotud rauda leiti kahekomponentsetes segudes pärast 20- ja 40-minutilist keetmist ainult askorbiinhappe puudumisel. Askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe segud sisaldasid suuremas koguses raudrauda kui askorbiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi kombinatsioonid. 5-Kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi kombinatsioon kõigis vahekordades näitas sarnaseid mustreid, raudraud suurenes veidi ja rauasisaldus vähenes pikema küpsetusaja jooksul. Seotud rauda leiti sellest segust alles pärast 20 ja 40 min keetmist (tabel 2).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the double standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%.

Kolmekomponentsetes segudes oli raudraua kogus suurem ja raua raua kogus väiksem kui kummagi algselt tõusnud ekvimolaarne kontsentratsioon. Üldine kõrgeim raua sisaldus oli proovides, kui askorbiinhappe kontsentratsiooni kahekordistati (suhted 2:1:1, 2:1:1, 2:2:1). Keetmisprotsess suurendas veelgi raud- ja raudraua kogust, samas kui seotud raud vähenes (tabel 3).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the ternary standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5 %

2.5. Aine segude kvaliteet ja kvantitatiivne analüüs HPLC abil

HPLC andmed näitasid, et kõigis 0 min keedetud proovides esinesid raua juuresolekul ja puudumisel ainult algselt sisestatud askorbiinhape, 5-kofeoüülkiinhape ja kvertsetiin-3-rutinosiidi (andmeid pole näidatud). Pärast 40-minutilist keetmist saadi askorbiinhappest kaks täiendavat piiki (piigid 3 ja 4), olenemata raua olemasolust (joonis 5). Raua juuresolekul tekkisid kaks uut 5-kofeoüülkiinhappe toodet (piigid). 6 ja 7) ning üks kvertsetiin-3-rutinosiidist (piik 8) tuvastati (joonis 5b).

Raua puudumisel vähenes askorbiinhappe kontsentratsioon kõigis segudes annuse-vastuse vahekorras algkontsentratsioonilt 0,3 mM pärast 40 minutit keetmist 26,79 protsendini algkontsentratsioonist ja algväärtusega 0,2 mM vahemikus 44.08 protsenti kuni 51,67 protsenti, algväärtusega 0,15 mM vahemikus 60,49 protsenti kuni 65,47 protsenti, algväärtusega 0,1 mM 77,84 protsenti ja 86,41 protsenti ning suureneb kuni 90,05 protsendini algväärtusega 0,06 mM (tabel S1).

Raua juuresolekul, ainult puhta askorbiinhappe proovides, leiti kontsentratsiooni langus pärast 40 min keetmist, mis on suurem võrreldes rauata askorbiinhappe prooviga (tabel S1). Vastupidiselt ilma rauata askorbiinhappe proovidele põhjustasid kõrgemad askorbiinhappe kontsentratsioonid kõrgemad lagunemissuhted (tabel S1). Kõigis kahekomponentsetes segudes vähenes 0 minuti jooksul keedetud proovides ainult askorbiinhappe kontsentratsioon. Pärast 40-minutilist keetmist leiti 5-kofeoüülkiinhappe või kvertsetiini-3-rutinosiidi kontsentratsiooni langus, kui seda kombineeriti askorbiinhappega. Mõlemad ained vähendavad askorbiinhappe kontsentratsiooni miinimumini. Kõrgemad 5-kofeoüülkiinhappe kontsentratsioonid vähendasid askorbiinhappe lagunemist. 5-Kofeoüülkiinhappe ja kvertsetiin-3-rutinosiidi binaarsetes segudes vähenes 5-kofeoüülkiinhappe kontsentratsioon, samas kui kvertsetiin-3-rutinosiid püsis stabiilsena pärast 40-minutilist keetmist. Kolmekomponentsetes segudes püsis kvertsetiin-3-rutinosiid pärast 40-minutilist keetmist stabiilsena, samas kui askorbiinhappe ja 5-kofeoüülkiinhappe kontsentratsioonid vähenesid.

HPLC-DAD chromatograms of the 1:1:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside (a) after 40 min cooking in the absence of iron, and (b) after 40 min cooking in the presence of iron. 1: ascorbic acid, 2: insert peak, 3: ascorbic acid derivate, 4: ascorbic acid derivate, 5: 5-caffeoylquinic acid, 6: caffeic acid; 7: 5-caffeoylquinic acid derivate, 8: quercetin-3-rutinoside derivate, 9: quercetin-3-rutinoside, 10: impurity of the quercetin-3-rutinoside standard

Cistanche extract


Lisateabe saamiseks klõpsake 2. osa jaoks allolevat linki:
https://www.xjcistanche.com/news/part2-interactions-of-ascorbic-acid-5-caffeo-54918073.html



Ju gjithashtu mund të pëlqeni