Citanche tubulosa ehhinakosiid ravib tõhusalt osteoporoosi
Mar 08, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
Ⅰ osa: ehhinakosiidi tõhusus ja ohutus roti osteopeenia mudelis
Xiaolin Yang, 1 Fei Li, 2 Yanan Yang, 3 Jinyang Shen, 2 Run Zou, 2 Panpan Zhu, 2 Chunfeng Zhang, 2 Zhonglin Yang, 2 ja Ping Li
Selle uuringu eesmärk oli uurida ravimi efektiivsust ja ohutustEhinakosiid(ECH), kasutades osteopeenia roti mudelit. Nelikümmend kaheksa 6-kuust emast Sprague-Dawley rotti jagati juhuslikult ühte võltsoperatsiooniga rühma (SHAM) ja viide OVX (ovariektoomiaga) alarühma: SHAM koos vehiikuliga 0,5 protsenti karboksümetüültselluloosnaatriumi ( 0,5 protsenti CMC-Na) ja OVX koos sõidukiga (OVX), OVX 17 östradiooliga (E2) ja OVX koos sõidukigaECH (ehhinakosiid) jaotatud annustest (ECH (ehhinakosiid)ECH-L, ECH-M ja ECH-H). ECH mõju(ehhinakosiid)ja E2 seerumi biokeemiliste parameetrite, luu mineraaltiheduse (BMD), luu biomehaaniliste omaduste, luu mikroarhitektuuri ja immunohistokeemia kohta ning hinnati ka ohutuse hinnanguid. Tulemused näitasid, et ECH(ehhinakosiid)ravi parandas reieluu kogu BMD-d, luu mikroarhitektuuri ja biomehaanilisi omadusi ning vähendas seerumi markerite taset võrreldes OVX rühmaga. Veelgi enam, ECH (ehhinakosiid)manustamine suurendas oluliselt osteoprotegeriini (OPG) taset ja vähendas tuumafaktori ligandi (RANKL) retseptori aktivaatori taset seerumis, samuti proksimaalses reieluus. Oluline onECH (ehhinakosiid)ravi parandas lipiidide parameetreid ilma emaka ja piimanäärme kõrvaltoimete üldise esinemissageduseta võrreldes OVX ja SHAM rühmadega. See uuring näitas, et manustamineECH (ehhinakosiid) 12 nädala jooksul võib tõhusalt ja ohutult ära hoida OVX-i esilekutsumistosteoporoosrottidel OPG/RANKL suhte suurendamise kaudu.
cistanche ehhinakosiid võib ravida osteoporoosi
1. Sissejuhatus
Osteoporooson üks luustiku ainevahetushäire tüüp, mida iseloomustab luumassi vähenemine ja luukoe mikroarhitektuurne halvenemine, mis võib põhjustada luustiku haprust ja luumurde. Sellest on juba saanud üks peamisi ohte vananeva elanikkonna tervisele [1, 2], mida tõendab hinnanguliselt 200 miljoni inimese levimus kogu maailmas, ja selle haigusega kaasnevad kulud aastas on ületanud ligikaudu 10 miljardit dollarit. 3, 4]. Östrogeeni ammendumine häirib luu homöostaasi, muutes osteoblastide ja osteoklastide diferentseerumist ja aktiivsust ning mängis seetõttu väga olulist rolli luukoe tekkes ja arengus.osteoporoosja see on osutunud menopausijärgse arengu peamiseks riskiteguriksosteoporoosnaistel [5, 6]. Östradiooli estritel ja konjugeeritud östrogeenidel on tugev pärssiv toimeosteoporootilineaktiivsus luus [7]. Praegu on bisfosfonaatide manustamine ja östrogeeniasendusravi (ERT) kaks peamist ravi- ja ennetusviisi.osteoporoosja isegi vähendada luumurdude esinemissagedust postmenopausisosteoporoosnaised [8, 9]. Kuid bisfosfonaadid põhjustavad adünaamilise seisundi tõttu adünaamilist luumurdu, mis on sarnane kroonilise säilitusravi hemodialüüsi saavatel patsientidel [10], ja pikaajalise östrogeenraviga kaasnevad soovimatud kõrvaltoimed, eriti südame isheemiatõve suurem esinemissagedus. haigus, invasiivne rinnavähk, insult, kopsuemboolia, endomeetriumi vähk, kolorektaalne vähk ja puusaluumurd [11]. Seega uued tõhusad ja ohutud ravistrateegiadosteoporooson väga vajalikud.
Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae parasiitaim)on laialt levinud Põhja-Aafrikas ja Aasia riikides ning C. tubulosa varsi kasutatakse tavaliselt neerupuudulikkuse ja neurodegeneratiivsete haiguste raviks soodustava ainena [12].ECH (ehhinakosiid) (Joonis 1) on kuulsa traditsioonilise hiina meditsiini Herba üks peamisi koostisosiCistanches(varredCistanchedeserticola,Cistanchesalsa võiCistanchetubulosa) [13]. Uuringud näitasid sedaECH (ehhinakosiid)looduslikul polüfenoolühendil on mitmesugused farmakoloogilised toimed, nagu antioksüdatiivne, põletikuvastane, neuroprotektiivne, hepatoprotektiivne, lämmastikoksiidi radikaale püüdev [14] ja vasodilatatiivne [15]. Praegu puuduvad aruanded ravimi terapeutilise toime kohtaECH (ehhinakosiid) ja selle päästmineECH (ehhinakosiid) pealosteoporoosOVX roti mudelites.
Joonis 1: Cistanche tubulosa ehhinakosiidi keemiline struktuur
Meie eelmine uuring näitas sedaECH (ehhinakosiid)võib stimuleerida luu regeneratsiooni, suurendades OPG/RANKL suhet MC3T3-E1 rakkudes [16]. See viitab selleleECH (ehhinakosiid)nõuab edasist uurimist. Selle edasiseks uurimiseks viisime läbi katsed OVX rotimudeliga [17], mis on standardmudel morfoloogiliste jaECH (ehhinakosiid)muutused pärast erinevaid ravimeetodeidosteoporoos. Selles aruandes hindasime 12 nädala mõjuECH (ehhinakosiid)seerumi biokeemiliste parameetrite, luu kvaliteedi, luu mikroarhitektuuri ja immunohistokeemia, samuti ohutusnäitajate, sealhulgas lipiidide parameetrite, kartsinoembrüonaalse antigeeni (CEA) ja vähi antigeen 125 (CA-125) taseme ravi seerumis ning emakas ja rinnanäärmes näärmete histoloogia OVX rottidel. Kõige tähtsam on see, et me teatasime kõigepealt selle mõjustECH (ehhinakosiid)OPG/RANKL süsteemis, uurides seerumi ja luu OPG/RANKL taset.
Cistanche tubulosa
2. Materjalid ja meetodid
2.1. Taimsed materjalid ja loomad.
Värsked varredCistanchetubulosa(Schrenk) R. Wight, koristatud 2010. aasta novembris Hiinas Xinjiangis, osteti Hiinas Xinjiangis asuvast Hiina Teaduste Akadeemia Ökoloogia ja Geograafia Instituudist. Materjalid tuvastas Hiina Farmaatsiaülikooli traditsioonilise hiina meditsiini kooli professor Ping Li. Vautšeri näidis (nr.02369433) on deponeeritud meie Hiina Farmaatsiaülikooli laboris.
Kõik materjalid kuivatati toatemperatuuril konstantse kaaluni.ECH (ehhinakosiid)eraldati ja puhastati etanooliekstraktistCistanchetubulosa(Schenk) R. Wighti meie laboratoorium vastavalt eelnevalt kirjeldatud meetodile [18] kergete modifikatsioonidega ja selle struktuur kinnitati UV-, IR-, MS- ja NMR-spektroskoopia abil. Selle puhtus (98,5 protsenti) määrati Agilent 1260 seeria HPLC-ga koos DAD-detektoriga (Agilent Scientific, Co., USA). Positiivse kontrollina kasutati 17-östradiooli (E2, Sigma; puhtus 98 protsenti või suurem).
Cistanche tubulosa ehhinakosiid
2.2. Farmatseutiline ravi.
Rotid jagati juhuslikult kuue rühma (igas rühmas 8 rotti): võltsoperatsiooniga (SHAM), kahepoolselt munasarjade eemaldamisega (OVX), OVX- ja E2-raviga ning kolm muud OVX-i ja erinevad annusedECH (ehhinakosiid)ravirühmad. Kõik rotid anesteseeriti intraperitoneaalse (ip) 300 mg/kg kloraalhüdraadi süstiga (Sinopharm, Hiina) ja seejärel eemaldati munasarjad 0. nädalal ning SHAM-rühmale tehti võlts munasarjade eemaldamine. Kirurgiline protseduur viidi läbi aseptilistes tingimustes, järgides Hiina ülikooli farmaatsiaülikooli loomahooldusprotokolli. Rotte jäeti 4 nädalaks ravimata, et võimaldada rottidel taastuda ja areneda osteopeenia. 4 nädala pärast manustati OVX ja E2 rühma rottidele iga päev intragastraalset (ig) E2 (50 g/kg/päevas) 12 nädala jooksul; võlts- ja OVX-rottidele manustati iga päev 0,5% CMC-Na (Sinopharm, Hiina) intragastraalset vehiiklit. E2 jaECH (ehhinakosiid)lahustati 0,5% CMC-Na kanduris ning rotid OVX-is jaECH (ehhinakosiid)rühmadele manustati iga päev ig-dECH (ehhinakosiid)(ECH-L, 30 mg/kg/päevas; ECH-M, 90 mg/kg/päevas; ja ECH-H, 270 mg/kg/päevas) vastavalt 12 nädala jooksul. Kehakaalu mõõdeti kord nädalas jaECH (ehhinakosiid)annust kohandati vastavalt.
2.3. Loomade eutanaasia ja proovide kogumine.
Lahkamisel võeti varahommikul üldnarkoosis unearterist verd. Verel lasti hüübida ja tsentrifuugiti kiirusel 3,000 × g 10 minutit. Seerum koguti ja säilitati temperatuuril –20 °C kuni biokeemilisteks analüüsideks kasutamiseni. Pärast loomade eutanaasiat isoleeriti reieluu BMD, Micro-CT ja ECH jaoks.ehhinakosiid) ja immunohistokeemiline analüüs ning piimanäärmed ja emakas eemaldati, vabastati rasvast ja fikseeriti naatriumfosfaadi (PBS) 10-protsendilises puhverdatud formaldehüüdi lahuses (PH 7,4) ning säilitati seejärel temperatuuril 4 °C kuni kasutamiseni histoloogiliseks ja immunohistokeemiliseks hindamiseks, et hinnata ohutusECH (ehhinakosiid)
2.4. Tõhususe hindamine.
2.4.1. Seerumi biokeemiline analüüs.
Aluseline fosfataas (ALP) on teadaolevalt seotud luu metabolismi ja osteoblastide diferentseerumisega ning selle aktiivsus on üks levinumaid osteoblastide diferentseerumise ja osteogeensete omaduste näitajaid [19]. Seega määrati seerumi ALP tase, kasutades ALP aktiivsuse analüüsi komplekti (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute; Nanjing, Hiina). Osteoklastide poolt sekreteeritud tartraadiresistentne happeline fosfataas 5b (TRACP{3}}b) korreleerub luu resorptsiooni aktiivsusega ebanormaalses luu metabolismis [20]. Luu resorptsiooni markerite jaoks mõõdeti TRACP-5b taset ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) komplektidega (R&D Systems Inc.) seerumis. Seerumi OPG-d ja RANKL-i analüüsiti ka ELISA komplektidega (R&D Systems Inc.). Kõik ELISA komplektide mõõtmised viidi läbi vastavalt tootjate esitatud protokollidele.
2.4.2. Luu mineraalse tiheduse mõõtmine.
Parema kogu reieluu luu mineraalset tihedust (BMD) mõõdeti Discovery W kaheenergialise röntgenikiirguse absorptiomeetria (DEXA, Hologic Inc., Boston MA, USA) abil, mis oli varustatud luutiheduse hindamiseks sobiva tarkvaraga (väljaanne 13.1.2). väikestel laboriloomadel. Pärast skaneerimist saadi statistilise analüüsi jaoks parema reieluu BMD. Mõõtmist teostav uurija ei teadnud rottide ravist.
2.5. Statistika.
Kõik tulemused on esitatud kui keskmine ± standardhälve (SD). Statistilisi erinevusi võltskontrolli, OVX-kontrolli ja erinevate ravirühmade vahel analüüsiti ühesuunalise dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil, millele järgnes mitmekordne post hoc võrdlus, kasutades Fisheri vähima olulise erinevuse (LSD) t-testi. Kõik arvutused viidi läbi, kasutades SPSS-i versiooni 15.0 Windowsile (SPSS, Chicago, IL, USA). Kõigis analüüsides on P-väärtus<0.05 was="" considered="" to="" be="" statistically="">
3. Tulemused
3.1. Tõhususe hindamine
3.1.1. Seerumi biokeemiline analüüs.
Ravi lõpus hinnati seerumi ALP taset ja luude ringluse markereid TRACP{0}}b, OVX tulemuseks oli seerumi ALP ja TRACP-5b tasemete oluline tõus võrreldes võltsoperatsiooniga rühmadega. Pärast ehhinakosiidi või E2 manustamist vähenesid seerumi ALP ja TRACP{4}b tasemed märkimisväärselt kõigis kolmes ehhinakosiidi rühmas või E2 rühmas. Lisaks oli ehhinakosiidi suurel doosil OVX rühmaga võrreldes oluliselt madalaim tase – 25,82 protsenti ja 38,05 protsenti (P< 0.01).="" all="" three="" doses="" of="" echinacoside="" treatments="" had="" a="" similar="" effect="" as="" e2="" in="" changing="" bone="" turnover="" markers="">< 0.05).="" at="" the="" end="" of="" the="" protocol,="" assays="" for="" serum="" opg="" and="" rankl="" levels="" were="" performed.="" all="" doses="" of="" echinacoside="" treatment="" groups="" had="" significantly="" higher="" levels="" of="" opg="" and="" opg/rankl="" ratios,="" as="" well="" as="" significantly="" lower="" rankl="" levels="" than="" e2-treated="" or="" vehicle-treated="" ovx="" groups="" (table="" 1).="" the="" highest="" levels="" of="" opg="" and="" opg/rankl="" ratios="" were="" observed="" in="" the="" ech-h="">(ehhinakosiid) ravirühmas vastavalt 150,14 protsenti ja 197,64 protsenti võrreldes OVX rühmaga (P<0.01). however,="" no="" differences="" in="" rankl="" levels="" and="" the="" opg/rankl="" ratio="" were="" observed="" in="" the="" e2="" group,="" as="" compared="" with="" the="" ovx="">
3.1.2. BMD hindamine.
Reieluu kogu BMD tulemused DXA järgi on esitatud tabelis 2. Nagu oodatud, vähenes reieluu kogu BMD OVX võrra võrreldes SHAM-rühmaga (P< 0.01).="" however,="" all="" the="" treated="" groups="" significantly="" increased="" bmd="" than="" the="" ovx="" group="" after="" 12="" weeks="" of="" treatment="">< 0.01),="" but="" no="" significant="" difference="" was="" found="" between="" treated="" groups.="" the="" three="">(ehhinakosiid)-ravitud rühmad suurendasid reieluu kogu BMD-d vastavalt 109,25 protsendini, 115,27 protsendini ja 124,53 protsendini, võrreldes OVX rühmaga. E2 suurendas reieluu kogu BMD-d 113,82 protsendini võrreldes OVX rühmaga.
3.1.3. Mikrokompuutertomograafia (mikro-CT).
Mikro-CT skaneerimine on väga täpne meetod lülisamba arhitektuuri mõõtmiseks, kuna see kvantifitseerib trabekulaarse struktuuri kolmes mõõtmes. Reieluu distaalse kasvuplaadi lähedase metafüüsi piirkonna kvantitatiivsed tulemused Micro-CT hindamisel väljendati kui BV/TV, Tb. N, Tb.Sp, Tb.Th ja SMI tabelis 2. Trabekulaarse mikro-CT parameetrid tabelis 2 näitasid, et OVX põhjustas BV/TV, Tb olulise vähenemise. N ja Tb.Th ning suureneb Tb.Sp ja SMI (P< 0.01).="" furthermore,="" the="" indices="" bv/tv,="" tb.="" n,="" and="" tb.="" thin="" ech-h="">(ehhinakosiid)rühmad olid oluliselt kõrgemad kui OVX rühmas (P< 0.01="" for="" bv/tv,="" and="" tb.th,="">< 0.05="" for="" tb.n),="" and="" ech-h="">(ehhinakosiid)ravi suurendas oluliselt BV/TV väärtusi 169,23 protsenti, Tb.N 157,73 protsenti ja Tb. Th 148,23 protsenti võrreldes OVX grupiga. Lisaks hoidis ECH-H ära ka OVX-indutseeritud Tb.Sp ja SMI taseme tõusu (P<0.01 for="" tb.sp,="">< 0.05="" for="" smi).="" the="" preventive="" effects="" of="" echinacoside="" on="" trabecular="" bone="" mass="" and="" microarchitecture="" deterioration="" are="" further="" proved="" by="" the="" 3d="" micro-ct="" images="" (ovx="" group="" presented="" a="" notable="" reduction="" in="" the="" trabecular="" number="" and="" trabecular="" area="" when="" compared="" with="" the="" sham="" group.="" echinacoside="" and="" e2="" partially="" prevented="" ovx="" induced="" bone="" loss="" and="" significantly="" improved="" the="" trabecular="" bone="" mass="" and="">
3.1.4. Reieluu kolmepunktiline painutamine.
Biomehaanilise kolmepunktilise painutuskatse tulemused on toodud tabelis 2. OVX rühmas täheldati SHAM-rühmaga võrreldes olulist lõppkoormuse, jäikuse ja energia neeldumise vähenemist (P< 0.01).="" echinacoside="" treatment="" improved="" bone="" mechinacosideanical="" strength,="" evidenced="" by="" increased="" levels="" of="" ultimate="" load,="" stiffness,="" and="" energy="" absorption=""><0.01 for="" ultimate="" load="" and="" energy="" absorption,="">< 0.05="" for="" stiffness);="" however,="" no="" significant="" difference="" was="" observed="" among="" the="" three="">ECH (ehhinakosiid)-ravitud rühmad. ECH-H mehhinakosideaanilised väärtused(ehhinakosiid)vehiikuliga töödeldud OVX rühmaga võrreldes suurenes ravitud rühmas 55,51 protsenti lõplik koormus, 34,05 protsenti jäikus ja 183,33 protsenti energia neeldumine (P<0.01). e2="" increased="" ultimate="" load="" by="" 49.51%,="" stiffness="" by="" 28.63%,="" and="" energy="" absorption="" by="" 55.56%="" compared="" to="" the="" ovx="" group,="" respectively,="" but="" its="" effect="" on="" mechinacosideanical="" values="" was="" less="" than="" the="">ECH-H (ehhinakosiid)Grupp.
3.2. Ohutuse hindamine
3.2.1. Seerumi analüüs.
Mõjud lipiidide profiilile on kokku võetud. 12. nädalal näitas E2 TC ja TG taseme tõusu võrreldes algtasemega. Kolm annust ECH (ehhinakosiid)(ECH-L,ECH-M jaECH-H) vähendas TC ja TG taset võrreldes OVX ja SHAM rühmadega. Lisaks on ECH-H(ehhinakosiid)rühm vähendas TG taset oluliselt 30,87 protsenti võrreldes OVX-ga (P< 0.05),="" or="" by="" 19.07%="" versus="" the="" sham="" group="">< 0.05).="" moreover,="" the="" effects="" of="">ECH (ehhinakosiid) -L jaECH (ehhinakosiid)-M TG tasemel oli marginaalne. Protokolli lõpus koguti seerumi CEA ja CA-125 tasemete mõõtmised, nagu on näidatud tabelis 3. E2 rühm suurendas CEA ja CA-125 taset oluliselt 54,38 protsenti ja 59,58 protsenti võrreldes OVX-ga ( P< 0.01),="" or="" by="" 49.53%,="" 28.87%="" versus="" sham="" group="">< 0.01).="" all="" doses="" of="" ech="">ehhinakosiid) manustamine põhjustas seerumi CA{0}} taseme märkimisväärse languse (P< 0.05)="" compared="" to="" the="" sham="" group,="" but="" echinacoside="" did="" not="" show="" any="" significant="" effect="" on="" the="" serum="" cea="" concentrations="" versus="" the="" sham="" group="" or="" ovx="" group.="" in="" addition,="" the="" ech-h="">ehhinakosiid)rühmas vähenes CA{0}} tase oluliselt 29,31 protsenti võrreldes OVX rühmaga (P<0.05), or="" by="" 42.91%="" versus="" the="" sham="" group="">< 0.01).="" all="" doses="" of="" echinacoside="" administration="" resulted="" in="" a="" notable="" reduction="" in="" the="" serum="" ca-125="" and="" cea="" levels="">< 0.01)="" compared="" to="" the="" e2="" group.="" moreover,="" the="" ech-h="">ehhinakosiid)rühm langetas CA{0}} ja CEA taset oluliselt, vastavalt 44,30 protsenti ja 64,70 protsenti võrreldes E2 rühmaga.
3.2.2. Emaka ja piimanäärme histoloogia ja immunohistokeemia.
Kõige sagedasemaid emaka- ja piimanäärmete kõrvaltoimeid ei täheldatud kõigis rühmades, kuid mitte E2 rühmas (tabel 3). E2 (50 g/kg/päevas) manustamine 12 nädala jooksul suurendas endomeetriumi paksust ja piimanäärmete proliferatsiooni võrreldes OVX või SHAM rühmaga. Lisaks võis immunohistokeemilise analüüsi abil tuvastada E2 rühmas kolm CEA ekspressiooni piimanäärmet, kuid mitte emakat. Ehhinakosiidiga ravirühmad ei olnud seotud ühegi emaka ja piimanäärme kõrvalekaldega.
Viited
[1]T. Nakamura, T. Matsumoto, T. Sugimoto ja M. Shiraki, "Denosumabi doosi-vastuse uuring luu mineraalse tiheduse ja luude ainevahetuse markerite kohta menopausijärgses eas Jaapani naistelosteoporoos," OsteoporoosInternational, vol. 23, lk 1131–1140, 2012.
[2] XL Wang, LZ Zhen, G. Zhang, MS Wong, L. Qin ja XS Yao, "Flavonoid-aglükoonide osteogeensed mõjud Drynaria in vitro efektiivsusuuringu osteoprotektiivne fraktsioonist", Phytomedicine, vol. 18, nr. 10, lk 868–872, 2011.
[3]JY Reginster ja N. Burlet, "Osteoporoos: endiselt kasvav levimus," Bone, kd 38, nr 2, lisa 1, lk S4–S9, 2006.
[4]A. Katrina ja BE McDonald, The eksperimentaalne ja lõplike elementide uurimineehhinakosiidselgroolülide kompressioonmurdude kohta [Ph.D. väitekiri], Queenslandi Tehnikaülikooli Tehnikaülikool, 2009.
[5]SC Manolagas, "Luurakkude sünd ja surm: põhiline reguleerimineehhinakosiidja mõju patogeneesile ja ravileosteoporoos, "Endocrine Reviews, 21. kd, nr 2, lk 115–137, 2000.
[6]BL Riggs, S. Khosla ja LJ Melton, "Sekssteroidid ja täiskasvanud skeleti ehitus ja säilitamine", Endocrine Reviews, vol. 23, nr. 3, lk 279–302, 2002.
[7]M. Tezval, EK Stuermer, S. Sehmisch et al., "Improvement of trochanteric bone quality in anosteoporoosmudel pärast lühiajalist ravi paratüreoidhormooniga: uus mehhinakosideaniline test roti reieluu trohhanteerse piirkonna jaoks.OsteoporoosInternational, vol. 21, nr. 2, lk 251–261, 2010.
[8]LN Li, Z. Zeng ja GP Cai, "Neo ja naringiini võrdlus MC3T3-E1 proliferatsiooni ja osteogeense diferentseerumise kohta", Phytomedicine, vol. 18, lk 985–989, 2011.
[9]W. Qi, YB Yan, W. Lei, ZX Wu, Y. Zhang ja D. Liu, "Kasutamise ennetamineosteoporoosrottidel Cordyceps Sinensise ekstraktiga.OsteoporoosInternational, vol. 9, lk 2347–2357, 2012.
[10]CV Odvina, JE Zerwekh, DS Rao, N. Maalouf, FA Gottschalk ja CYC Pak, "Tõsiselt allasurutud luuvahetus: alendronaatravi potentsiaalne komplikatsioon", Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, vol. 90, nr. 3, lk 1294–1301, 2005.
[11]Women's Health Initiative Investigators'i kirjutusrühm "Östrogeeni ja progestiini risk ja kasulikkus tervetel postmenopausis naistel", The Journal of the American Medical Association, vol. 288, lk 321–333, 2002.
[12]H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa jt, "UusfenüületanoidglükosiididalatesCistanchetubulosa" Chemical & Pharmaceutical Bulletin, kd 35, lk 3309–3314, 1987.
[13]K. Zhao, J. Gao, W. Li ja D. Cai, "Neurotroofsed ja neurorescue effects of ofehhinakosiidParkinsoni tõve subakuutses MPTP hiiremudelis," Brain Research, kd 1346, lk 224–236, 2010.
[14]CQ Jia, H. Shi, XM Wu, YZ Li, JJ Chen ja PF Tu, "Determination ofehhinakosiidroti seerumis pöördfaasilise kõrgfektiivse vedelikkromatograafia abil ultraviolettdetektoriga ja selle rakendamine farmakokineetikale ja biosaadavusele," Journal of Chromatography B, kd. 844, nr 2, lk 308–313, 2006.
[15]WJ He, TH Fang, X. Ma, K. Zhang, ZZ Ma ja PF Tu, "ehhinakosiidkutsub NO-cGMP raja kaudu esile endoteelist sõltuva lõõgastuse roti aordirõngastes," Planta Medica, 75. kd, nr 13, lk 1400–1404, 2009.
[16]F. Li, YN Yang, PP Zhu jt, "ehhinakosiidsoodustab luude taastumist, suurendades OPG/RANKL suhet MC3T3-E1 rakkudes," Fitoterapia, 8. kd, lk 1443–1450, 2012.
[17]A. Ishihara, T. Sasaki, K. Debari jt, "Effects of ovariectomy on bone morphology in maxillae of mature rots", Journal of Electron Microscopy, vol. 48, nr. 4, lk 465–469, 1999.
[18]L. Lei, ZH Song, PF Tu, LJ Wu ja FK Chen, „Separation ofehhinakosiidpöördfaasilise preparatiivse kõrgsurvevedelikkromatograafia abil," Chinese Journal of Chromatography, kd. 19, nr 3, lk 200–202, 2001.
[19]L. Malaval, D. Modrowski, AK Gupta ja JE Aubin, "Luuga seotud valkude rakuline ekspressioon in vitro osteogeneesi ajal roti luuüdi stroomarakkude kultuurides", Journal of Cellular Physiology, vol. 158, nr. 3, lk 555–572, 1994.
[20]W. Qi, YB Yan, W. Lei, ZX Wu, Y. Zhang, D. Liu jt, "Kasutamise vältimineosteoporoosrottidel Cordyceps Sinensise ekstraktiga.OsteoporoosInternational, vol. 9, lk 2347–2357, 2012.
