2. osa Cistanche Tubulosa fenüületanooli glükosiidide ennetavad mõjud veiste seerumi albumiini indutseeritud maksafibroosile rottidel
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
NF-κB p65 ja kollageen I ekspressioon pärast ravimi sekkumist HSC-T6 rakkudesse Maksafibroosi signaalide iseloomustamiseks määrati RT-PCR analüüsi abil maksas kaks peamist regulatiivset geeni. Andmed näitasid, et kontrollrühma tHSC-T6 rakkudel oli madalam NF- κB ja kollageeni tüüp I mRNA tase. Seevastu TGF-β1 indutseeris HSC-T6 rakud NF-κB (P) märgatavalt reguleerima< 0.01)="" and="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" with="" levels="" higher="" than="" those="" in="" the="" control="" group.="" in="" the="" presence="" of="" different="" concentrations="" of="">fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist) , tulemused NF-κB p65 [P NF-κB = 0,001 100 ug/ml, P NF-κB = 0,002 puhul 75 ug/ml, P NF-κB = 0,007 puhul 50 ug/ ml ja P NF-κB = 0,012 25 ug/ml kohta] ja Col-I [P Col-I = 0,006, P Col-I = 0,009, P Col-I = 0,009, P Col-I = 0,014, P Col-I = 0,019) näitasid nende mRNA-de vähendatud väljendusi (joonis 7).
Lääne blot analüüs kollageeni I tase pärast ravimi sekkumist HSC-T6 rakud Joonis 8 näitab kollageeni I valgu ekspressiooni taset HSC-T6 rakkudes erinevate katserühmade. Kollageeni I valgu ekspressiooni tase vähenes oluliselt CPHG-de erinevates annusterühmades(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml ja 25 ug/ml) võrreldes rühmaga TGF-β1
Arutelu
CPHG-d(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)on fenüületanoidi glükosiid, mis on isoleeritud ja puhastatud Cistanche risoomist, mida kasutatakse traditsioonilise Hiina taimse ravimina. Viimastel aastatel on näidatud, et CPHG-del on võimas võime vältida maksakahjustusi [20]. Seetõttu püüdsime uurida, kas CPHG-del on BSA-st põhjustatud maksafibroosi pärssiv toime hepatiidi fibroosile rottidel. BJRG-d kasutatakse Hiinas tavaliselt maksafibroosi terapeutilise ravimina. See on valmistatud kilpkonna koorest. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis jne avaldavad Qi ja vere täiendamist, väsimuse leevendamist, sõlmede pehmendamist. Lisaks näitavad varasemad uuringud, et sellel on ilmne funktsioon varajase maksafibroosi blokeerimiseks, rasva säilitavate rakkude vohamise pärssimiseks ja kollageeni sünteesi vähendamiseks [21]. Seetõttu kasutati BJRG-d selles uuringus positiivse ravimina.
BSA süstide põhjustatud maksafibroosi patoloogilised muutused rottidel on sarnased inimese portaali tsirroosiga [22]. CPHG-d(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)annusest sõltuv leevendas maksafibroosi astet ja inhibeeris HSC muundumist müofibroblastilaadseteks rakkudeks, vähendas seerumi ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF-β1 ja maksaindeksi kõrget taset ning pärssis märgatavalt kollageeni I, kollageeni III ja TGF-β1 ekspressiooni maksakoes. Maksafibroosi staadiumid on korrelatsioonis HA, LN ja IV-C seerumi tasemega, mis markeritena võib mängida rolli maksafibroosi astme tuvastamisel [23]. On teatatud, et HA on rakuvälise maatriksi peamine ressurss. IV-C kui keldrimembraani oluline element sünteesitakse rikkalikult ja ladestub tugevalt maksatsirroosi varasemates faasides. LN ja IV-C seerumitasemed on keldrimembraani käibekiiruse indeksid ja näitavad fibroosi astet portaali piirkonnas ja sinusoidsete kapillaarides [24]. PC III on maksafibroosi ja varajase tsirroosi diagnoosimise marker, kuid selle tundlikkus ja spetsiifilisus ei ole kõrged ning paljudes viidetes ei ole olulist erinevust fibroosi erinevate etappide vahel [24, 25].
See uuring sai sarnase tulemuse. Lisaks näitavad H&E ja Masssoni kolmevärvilise värvusega sektsiooni vaatlused normaalseid maksakudesid, millel on erinevad maksapiirkonnad ja maksa sinusoidid. Mudelirühma maksakoe struktuur oli häiritud ning maksakude ja maksa sinusoid asendati suure hulga sidekoega. Siiski täheldati ravirühmades märkimisväärset paranemist võrreldes mudelirühmaga. Oluline on see, et I tüüpi kollageeni ja III tüüpi kollageeni ekspressioon mängivad maksafibroosi arengus olulist rolli, mille blokeerimine võib ennetada ja ravida maksafibroosi. Seetõttu võib I tüüpi kollageeni ja III tüüpi kollageeni tüübi maksakoes teke ja ladestumine olla maksavastase fibroosi efektiivsuse oluline määraja. TGF-β1 on maksakahjustuse korral ka oluline profibrogeenne tsütokiin ja see on bioloogiliselt aktiivne mitme farmakoloogilise toimega [26]. Kudede homöostaasi säilitamiseks on vaja nende toimingute vahelist tasakaalu. TGF-β1 hälbeline ekspressioon on seotud maksahaiguste patogeneesiga [27, 28]. On teada, et TGF-β1 on oluline tsütokiin, mis on seotud maksafibroosi varases staadiumis.
Oksüdatiivne stress käivitab TGF-β1, mille tulemuseks on viimane stimuleerib ECM tootmist ja sadestumine [29]. Seetõttu on üks tõhusaid strateegiaid maksavastase fibroosi ravimi tootmiseks tuvastada anti-TGF-β1 ained. Immunohistokeemiline analüüs näitas, et I tüüpi kollageeni, III ja TGF-β1 ekspressioonid võivad tuvastada maksafibroosi patoloogilise protsessi. Vähenevad I tüüpi kollageeni, III kollageenitüübi ja TGF-β1 ekspressioonid ravirühmades, mis olid suures annuses CPhG-des oluliselt väiksemad(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)ravirühma eelkõige, ja soovitas, et CPhG on tõhus kollageeni tüüp I, kollageeni tüüp III ja TGF-β1 inhibiitor. Eeldatavasti võivad CPHG-d parandada kollageenaasi aktiivsust, säilitades ECM sünteesi ja lagunemise dünaamilise tasakaalu, lükates seega edasi ja takistades maksafibroosi moodustumist. CPHG-d(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)rottidel ei saanud mitte ainult leevendada BSA indutseeritud maksafibroosi, vaid võib olla seotud ka HSC in vitro aktiveerimise pärssimisega. Arvatakse, et HSC aktiveerimine kujutab endast fibrogeneesi olulist sammu. Selles uuringus näitasid tulemused, et CPHG-de manustamine 25 kuni 100 ug / ml vähendas märkimisväärselt NF-κB p65 vähenemist, kollageeni I mRNA ekspressiooni ja kollageeni I valgu ekspressiooni HSC-s. NF-κB mängib olulist rolli immuunvastuse moduleerimisel infektsioonile või stiimulitele [30]. NF-κB kogunemine maksarakkudesse võib põhjustada põletikuliste tsütokiinide/vahendajate värbamist, põhjustades seega fibroosi arengut [31, 32]. Lisaks on kollageen ka tundlik indeks, mis peegeldab fibroosi taset ja moodustab umbes 50 % kiulise maksa koguvalgust [33].
Selle tulemusena oletasime, et molekulaarne mehhanism hepato-fibroosi vastu on seotud CPhG-dega.(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)-NF-κB ekspressiooni vahendatud inaktiveerimine, milles kasu aitab kaasa immunotoksilisuse ja põletiku stressi leevendamise sünergilistele rollidele BSA-kahjustusega maksakoes, korrigeerides veelgi düsmetabolismi maksafunktsioonide leevendamiseks.
Järeldused
Kokkuvõtteks võib öelda, et meie uuringud näitavad, et CPHG-d(fenüületanoidi glükosiid cistanche'ist)vähendab oluliselt BSA poolt rottidel indutseeritud maksafibroosi ulatust. Selle mehhanism võib vähemalt osaliselt olla tingitud CPHG-de inhibeerivast toimest EKM-i koostisele ja ECM-i lagunemise stimuleerimisest ning/ või I tüüpi kollageeni, III tüüpi kollageeni sünteesi otsesest pärssimisest ja TGF-β1 ekspressioonist. Seetõttu eeldasime, et CPHG-sid saab kasutada tervishoiutoodetes või kliinilistes ravimites inimese maksafibroosi ennetamiseks. Tulevased uuringud on vajalikud, et teha kindlaks CPHG-de efektiivsus tugeva maksavastase fibroosi ravimina.
Lühendid
CPHG-d:Fenüületanooli glükosiidid cistanche'ist; BSA: Veiste seerumi albumiin; HSC-T6: maksa stellate rakud; Hyp: Hüdroksüproliin; BJRG: Biejiarangani liittabletid; TGF-β1: Kasvufaktori β1 ümberkujundamine; ALT: Alaniini aminotransferaas; AST: Aspartaadi aminotransferaas; HA: Hüaluroonhape; LN: Laminin; PC III: III tüüpi prokollan; IV-C: IV tüüpi kollageen; NF-κB: aktiveeritud B-rakkude tuumafaktor kappa-valgusahela tugevdaja; RT-PCR: pöördtranskriptaasi-polümeraasi ahelreaktsioon; SDS-PAGE: Naatriumdüülsulfaat-polüakrülamiidi geelelektroforees.
Konkureerivad huvid Autorid kinnitavad, et neil ei ole konkureerivaid huve. Autorite panused TL, JZ, SPY, LM, MT ja SLZ kavandasid ja kavandasid eksperimente. SPY, TL ja JZ analüüsisid andmeid. SPY ja JZ kirjutasid käsikirja. TL, LM ja JZ vaatasid käsikirja üle. Kõik autorid lugesid ja kiitsid lõpliku käsikirja heaks. Seda uuringut toetas Hiina Riiklik Loodusteaduste Sihtasutus (81260624). Autorid soovivad väljendada oma siirast tänu professor Tao Liu'le selle raamatu kirjutamise soovitatud paranduste eest. Autori üksikasjad 1 toksikoloogia osakond, rahvatervise kool, Xinjiangi meditsiiniülikool, nr 393 Xinyi tee, Urumqi 830011Xinjiang Uiguuri autonoomne
Piirkond, Hiina. 2 Uiguuri meditsiini võtmelaboratoorium, Xinjiangi Materia Medica Instituut, Urumqi 830004, Hiina. 3 nr 140 Xinhua South Road, Tianshani piirkond, Urumqi 830000Xinjiangi Uiguuri autonoomne piirkond, Hiina. Saadud: 6. august 2015 Aktsepteeritud: 24. november 2015
Viited
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Kroonilise maksahaigusega patsientidel uudsete antifibrootiliste ravimeetodite praegune staatus. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Maksa stellate rakud ja maksafibroos. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Maksafibroosi patogenees. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Review artikkel: tsirroosi pöörduvus. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Hiina Teaduste Akadeemia. 23. toim Hiina: Hiina taimestiku toimetus; 2013. lk 1–16.
Hiina Rahvavabariigi sanitaarministeeriumi Hiina farmakopöa komisjon. Hiina farmakopöa, 1. osa. Hiina: keemiatööstuse kirjastus; 2010. lk 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Cistanche tubulosa fenüületanoidi glükosiidide uurimistulemused. Kesk-Lõuna Pharm. 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, Ta L. Rou CongRongi mõju(Herba Cistanches Deserticola) leigongtengi (Radix et Rhizoma Tripterygii) glükosiidist põhjustatud hiirte reproduktiivtoksilisuse kohta hiirtel. J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H jt ACE ja trombotsüütide agregatsiooni inhibiitorid Tamarix Hojnacki Bunge'ist (Herba Cistanches'i peremeestaim), mis kasvavad Xinjiangis. Farmakogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P jt. Dekstraansulfaadi naatriumi indutseeritud koliidi amelioratsioon hiirtel Tsistanche tubulosa echinacoside'iga rikastatud ekstraktiga. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.
