Cistanche Salsa uued glükosiidid

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li Lei^a, Yong Jiang^aet al

Kuus uutglükosiidid, salsa küljed A – F (1–6, vastavalt), eraldati vartest.Cistanche salsa, koos seitsme teadaoleva glükosiidühendiga. Nende struktuure selgitati estri hüdrolüüsi ja keemilise derivatiseerimise, NMR-spektroskoopiliste ja massispektromeetriliste süvaanalüüside ning sugulasühendite kirjanduse andmetega võrdlemise abil. Uusglükosiididpõhinevad bD-glükoosil (Glc) ja aL-ramnoosil (Rha), mis sisaldavad atsetüüli (Ac), bensüüli (Bn), fenetüüli, kumaroüüli (Cou) ja kofeoüüli (Caf) asendajaid.

Cistanche salsal on palju mõjusid

Sissejuhatus

– Cistanche salsa(CA MEY.) G. BECK, üks Herba liikidestCistanche, on Loode-Hiinast pärit lühike parasiitaim Orobanchaceae. Olulise toonikuna traditsioonilises hiina meditsiinis (TCM) on hiinlased ja jaapanlased Herba Cistanche varsi pikka aega kasutanud neerupuudulikkuse, naiste viljatuse, haigusliku leukorröa, neurasteenia ja jämesoole inertsist tingitud seniilse kõhukinnisuse jne vastu. ]. Täpselt nagu teistes Cistanche taimedes, fenetüüli baasilglükosiididon C. salsa peamised aktiivsed koostisosad. Nendel ühenditel on teatatud neuroprotektiivne toime 1-metüül-4-fenüül-1,2,3,6-tetrahüdropüridiini (MPTP) poolt indutseeritud dopamiinergilise toksilisuse vastu C57 hiirtel [{{ 8}}]. C. salsa kohta on olemas vaid mõned fütokeemilised uuringud, millest esimesed pärinevad ca. 20 aastat [5-8]. 1995. aastal Moriya jt. [9] [10] teatas, et taimne materjalCistanche salsaoli Herba allikaid uurides tuvastatud valestiCistancheJaapani meditsiiniturult [9] [10]. Seetõttu on vaja C. salsa keemilisi koostisosi uuesti uurida.

Käesolevas töösCistanche salsa, teatame kuue uue isoleerimise ja struktuuri selgitamise kohtaglükosiidid, salsa küljed AF (1-6), erinevate asendajatega, sealhulgas atsetüüli (Ac), bensüüli (Bn), kofeoüüli (Caf) ja kumaroüüli (Cou) jääkidega. Samast ekstraktist eraldati ka järgmised seitse teadaolevatglükosiidid:tubulosiid B [11], akteosiid [6], isoakteosiid [11], 2'-atsetüüllakteosiid [7], ehhinakosiid [6], tsistanosiid C [7] ja tsistanosiid D [7].

Tulemused ja arutlus

– Ühend 1 eraldati amorfse pulbrina ja selle molekulaarne valem tuletati HR-ESI-MS abil kui C28H34O13 (m/z 596,2348).([M pluss NH4] pluss; arvut. 596,2343). 1 H-NMR andmed (tabel 1) näitasid (E)-konfiguratsiooniga kofeoüülrühma (Caf) iseloomulikke signaale ABX-tüüpi aromaatsete signaalidega d(H) 7.07 (br. s), 6,76 (br. d, J=8.5 Hz) ja 7.03 (d, J=8.5 Hz), kaks olefiinset H-aatomit d juures (H) 7,51 (d, J=16.0) ja 6,34 (d, J=16,0 Hz) ning Bn-osa viie aromaatse resonantsi ja kahe mitteekvivalentse H-aatomiga d(H) 4,59, 4,77 (2d, J=12,0 Hz igaüks), mis viitas sellele, et 1 on Bn-asendatud ühend [12].

Ühendi 1 täielik happeline hüdrolüüs andis ramnoosi (Rha) ja glükoosi (Glc). 1 NMR andmed olid sarnased tubulosiidi B [11] omadega, välja arvatud see, et 3,4- dihüdroksüfenüületanooli ühiku signaalid asendati Bn rühma signaalidega. HMBC spektris 1 korrelatsioonid kahe mitteekvivalentse H-aatomi vahel d(H) 4,59, 4,77 (aglükooni a-CH2) ja d(C) 101,7 (Glc C(1'), mõlema d(H) ) 4,40 (br. d, J=11,5 Hz, 1 H tulenevalt CH2(6')) ja 4,23 (m, 1 H tulenevalt CH2(6')) koos d(C) 166,6 (C( a') estri ja d(H) 5,04 (br. s, HC(1'')) ja d(C) 80,8 (C(3' )) määrasid seose aglükooni, estri ja suhkru vahel. osad.

Cistanche salsa

Ülaltoodud spektroskoopiliste tõendite põhjal koos 2D-NMR andmetega selgitati ühendi 1 struktuur bensüül-6-O-[(E)-3-(3,4-dihüdroksü) fenüül)-prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid1) ja sai nimeks salsa pool A.

Ühend 2 eraldati amorfse pulbrina ja selle molekulvalem määrati HR-ESI-MS abil C28H34O13 (m/z 596,2345 ([M pluss NH4] pluss )). Ainus erinevus 1 ja 2 vahel oli see, et Caf-osa kinnitati 4'-positsioonis 2-s, mitte 6'-positsioonis. See ilmnes HMBC spektris 2, kus signaal d(H) 4,96 (t, J=9.0 Hz, HC(4' )) oli korrelatsioonis d(C) 167,3 ( Caf C=O) ja seda kinnitab veelgi võrdlus 2'-atsetüülakteosiidi TMR andmetega [4]. Seega tuvastati ühend 2 kui bensüül-4-O-[(E)-3-(3,4-dihüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-Oa-Lramnopüranosüül -bD-glükopüranosiid ja nimega salsa pool B.

Salsasiid C(3) eraldati amorfse pulbrina ja selle molekulvalem selgitati HR-ESI-MS abil kui C28H34O12 (m/z 561,1958 ([MH]; arvut. 561,1972)). 3 NMR andmed olid sarnased 2 omadega, välja arvatud see, et Caf rühma signaalid asendati (E/Z)-kumaroüüli (Cou) fragmendi signaalidega (vt tabel 1). (E/Z)-segu olemasolu, mida näitavad jagatud (2,38:1) NMR-resonantsid, samuti piigi kahekordistumine HPLC kromatogrammis, nähtus, mida on varem kirjeldatud mõnes fenetüülrühmasglükosiidid[13] [14]. HMBC spektris 3 korrelatsioonid kahe mitteekvivalentse aglükooni a-CH2 resonantsi vahel d(H) 4,62, 4,87 (2d, J{{10}},5 Hz) ja d(C) 103,2 ( C(1')), d(H) 4,75/4,71 (t, J=7,5 Hz, HC(4')) ja d(C) 168,3/166,0 (C=O) Cou) ja d(H) 5,02 (br. s, HC(1'')) ja d(C) 80,8 (C(3' )) vahel lõid seosed aglükooni, estri ja suhkru fragmentide vahel. . Seega selgitati ühendi 3 struktuur bensüül-4-O-[(E/Z)-3-(4-hüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3- OaL-ramnopüranosüül-b-Dglükopüranosiid ja nimega salsa pool C.

Salsasiid D (4) saadi amorfse pulbrina ja selle molekulaarvalem määrati HR-ESI-MS abil kui C31H38O15 (m/z 668,2563 ([M pluss NH4] pluss; arvut. 668,2554). 1H-NMR spekter 4 (tabel 2) näitasid (E)-Caf rühmale ja (4-hüdroksüfenüül)etoksürühmale iseloomulikke signaale [d(H) 2,65 (m, 2 H), 3,55 (m, 1 H), 3,9 0 (m, 1 H), 6,64 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 6,97 (d, J=8.{58} } Hz, 2 H)]. Ühendi 4 täielik happeline hüdrolüüs andis Rha ja Glc. Fragmendi iooni piik, mida täheldati FAB negatiivses massispektris m/z 43 juures ja NMR signaalid d(H) juures 1,95 (s, 3 H) ) ning d(C) 169,3 ja 20,7 juures näitasid Ac rühma olemasolu.1H- ja 13C-NMR andmed olid väga sarnased syringalide A 3'-aL-ramnopüranosiidi andmetega, välja arvatud täiendav Ac signaal [ 15]. HMBC-spektris 4 oli signaal d(H) 4,68 (t, J=9,0 Hz, HC(2')) korrelatsioonis d(C) 169,3 (C{{62}). }O of Ac), mis näitas, et Ac fragment oli seotud Glc C(2)-ga. Seega struktuur Ühendi 4 e selgitati välja kui 2-(4-hüdroksüfenüül)etüül-2-O-atsetüül-4-O-[(E)-3-(3,{{ 73}}dihüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-Oa-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid ja nimega salsa pool D.

SisuCistanche salsa

Ühend 5 eraldati amorfse pulbrina ja selle molekulvalem määrati C32H40O16 HR-ESI-MS abil (m/z 679,2228 ([MH]; arvut. 679,2238). 1H- ja 13C- NMR andmed 5 (tabel 2) olid väga sarnased 4 omadega, välja arvatud fenetüülfragmendi signaalid.1H-NMR spektris 5 oli AMX süsteem [d(H) 6,63 (d, J{ {22}}.0 Hz, 1 H), 6,69 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 6,77 (br. s, 1 H)] ja a MeO signaal d(H) 3,85 (s, 3 H). HMBC spektris oli MeO signaal korrelatsioonis d(C) 148,7 (C(3)), mis omakorda korreleerus d(H) 6,69 ( d, J=8,0 Hz, HC(5)) ja 6,77 (br. s, HC(2)) Seetõttu oli MeO asendaja fenetüülfragmendi C(3), mida kinnitab võrdlus kirjanduse andmetega [7]. Seega selgitati ühendi 5 struktuur kui 2-(4-hüdroksü-3-metoksüfenüül)etüül2-O-atsetüül-4- O-[(E)-3-(3,4-dihüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid ja nimega salsa pool E.

Ühend 6 eraldati amorfse pulbrina ja selle molekulvalem määrati C31H38O15 HR-ESI-MS abil (m/z 668,2543 ([M pluss NH4] pluss; arvutuslik 668,2554)). 1H-NMR spekter 6 näitas. (E)-Cou rühmale iseloomulikud signaalid [d(H)6,35 ja 7,46 (2d, J{{20}.0 Hz kumbki, 1 H), 6,69 (d, J=7,5 Hz, 2 H), 7,45 (d, J{{30}},5 Hz, 2 H)], (3,4-dihüdroksüfenüül) etoksüfragment [d(H) 6,31 (br. d, J=8,0 Hz, 1 H), 6,46 (br. s, 1 H), 6,49 (br. d, J=8. 0 Hz, 1 H), 2,49 (m, CH2), 3,41 ja 3,72 (mõlemad 2m, 1 H)] ja kahe anomeerse resonantsi [d(H) 4,45 (d, J=8,5 Hz, HC) (1')), 4,55 (be.s, HC(1''))]. Nagu punktides 4 ja 5, esines ka punktis 6 AcO rühm [d(H) 1,88 (s, 3 H); d(C) 169,2, 20,6], mis oli HMBC-katsetega määratud Glc-osa C(2'). HMBC spektris täheldati korrelatsioone CH2(6') ja d(C) signaalide vahel 166,6 (C=O of Cou), vahel d(H) 3,41, 3,72 (2m, a-CH2 aglükoonist ) ja d(C) 99,5 (C(1')) ning d(H) 4,55 (br. s, HC(1'')) ja d(C) 68,8 (C(3')) vahel, alates millega kõik seosed loodi. Seega määrati ühendi 6 struktuur 2-(3,4-dihüdroksüfenüül)etüül2-O-atsetüül-6-O-[(E){{105} }(4-hüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid ja nimega salsa pool F.

Ühendites 1–6 tuletati Glc jäägi anomeerse keskpunkti konfiguratsiooniks J väärtustest 7,5–8,5 Hz. Rha jääkide puhul tuletati anomeerne konfiguratsioon asjakohaste 13C-NMR andmete võrdlemisel kirjanduses toodud andmetega [6]. Suhkrute, DGlc ja L-Rha, absoluutsed konfiguratsioonid määrati kiraalsete derivaatide GC analüüsiga (vt Eksperimendi osa) võrreldes standardsete monosahhariididega [16].

Seda uuringut toetasid rahaliselt Hiina riiklikud loodusteaduste fondid (nr 30070887). Täname dr Haiming Shi abi käsikirja ettevalmistamisel.

Cistanche salsatooted

Eksperimentaalne osa

Kindral. Silikageel (200–300 silma; Qing Dao Hai Yang Chemical Group, Co.), Sephadex LH-20(Pharmacia), D101 vaik (Tianjin Chemical, Co.) ja ODS (100) – 200 mešši; Fuji Sylisia Chemical, Ltd.) kasutati kolonnkromatograafias (CC). Ettevalmistus HPLC viidi läbi Waters{6}} seadmega, kasutades RP-C18 kolonni (10 M 250 mm id; Alltech) voolukiirusel 2,5 ml/min (UV tuvastamine 330 nm juures). GC analüüs viidi läbi Agilent-6890N gaasikromatograafil, kasutades HP-5 kapillaarkolonni (28 m M 0,32 mm id), FID-detektorit 260 kraadi juures ja kolonni temp. 180 kraadi, N2 kandegaasiga ja voolukiirusega 40 ml/min. UV-spektrid registreeriti Shimadzu spektromeetril; λmax (log e) nm. Optilised pöörded määrati Perkin-Elmer 243B digitaalse polarimeetriga. IR-spektrid registreeriti Nicolet Avatar-360 FT-IR spektromeetril; cm-1. NMR spektrid registreeriti CD3OD-s või (D6)DMSO-s Bruker AM{30}} spektromeetril; d ppm rel. kuni Me4Si, J hertsides. FAB- ja HR-ESI massispektrid registreeriti vastavalt KYKY-ZHP-5 ja Bruker APEX massispektromeetritel.

Taimne materjal. VarredCistanche salsakoguti aprillis Hiinast Ningxia Hui autonoomsest piirkonnast Yanchist. Taime tuvastas Pekingi ülikooli farmaatsiateaduste kooli prof Peng-Fei Tu. Vautšeri näidis anti hoiule Pekingi ülikooli traditsioonilise hiina meditsiini kaasaegse uurimiskeskuse herbaariumi.

Ekstraheerimine ja isoleerimine. Kuivatatud varredCistanche salsa(8.{1}} kg) ekstraheeriti 75% vesilahusega. EtOH (80l) toatemperatuuril perkolatsiooni teel. Lahusti eemaldati, jääk suspendeeriti H2O-s (4 l) ja ekstraheeriti petrooleetriga (PE; 12 l), AcOEt (12 l) ja BuOH-ga (12 l), et saada pärast lahusti eemaldamist 1 {{ 27}}0 g PE-, 99 g AcOEt- ja 1{{60}}0 g BuOH-s lahustuvat ekstrakti, resp. Osa AcOEt lahustuvast ekstraktist (90 g) allutati CC-le (Si02; CHCl3/MeOH 0:1 → 1:2), et saada 75 fraktsiooni (Fr.). Fr. 51–53 (6,0 g) ühendati (=Fr. A) ja kromatografeeriti uuesti (Sephadex LH-20; MeOH/H2O 1:1), et saada üksteist alamfraktsiooni (Fr. A1–A11). Fr. A6 ja Fr. A7 ühendati (2,5 g; Fr. B) ja allutati uuesti CC-le (ODS; MeOH/H2O 1:9–5:5), et saada 35 täiendavat fraktsiooni (Fr. B1–B35). Fr. B16 – B25 ühendati (0,5 g; Fr. C) ja kromatografeeriti uuesti (Sephadex LH-20; seejärel prep. HPLC, MeCN/MeOH/H2O 10 : 18 : 75), et saada tubulosiid B [11] (55 mg) ). Fr. B26-B32 (0,35 g) kombineeriti (0,35 g, Fr. D) ja kromatografeeriti uuesti (Sephadex LH-20; 20 protsenti MeOH vesilahus), saades seitse fraktsiooni (Fr. D1-D7). Fr. D1 (70 mg) puhastati prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 26 : 72), et saada 2 (23 mg), 3 (8 mg) ja tsistanosiidi C [7] (12 mg). Fr. D3 (45 mg) puhastati prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 20 : 70), et saada 6 (22 mg). Fr. D4 (36 mg) puhastati prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 9:18:73), et saada ühend 5 (20 mg). Fr.D5 (55 mg) puhastati prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 24 : 66), et saada 1 (28 mg). Fr. D7 (40 mg) puhastati prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 16 : 74), et saada ühend 4 (18 mg). Originaal Fr.54 ja Fr. 55 ühendati ja puhastati korduva CC-ga (Sephadex LH-20), saades akteosiidi [6] (0,1 g) ja 2'-atsetüüllakteosiidi (8,9 mg) [10]. Fr. 56–58 ühendati ja puhastati korduva CC-ga (Sephadex LH-20 ja ODS), et saada isoakteosiid (25 mg) [11] ja tsistanosiid D (32 mg) [7]. Fr. 59–64 ühendati ja puhastati korduva CC (Sephadex LH-20) ja prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10:15:84), et saada ehhinakosiidi (33 mg) [6].

SalsasiidA(=bensüül6-O-[(E)-3-(3,4-dihüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül -D-glükopüranosiid; 1). Amorfne pulber. UV (MeOH): 328 (3,50). [a]20D=35,6 (c=0,1, MeOH).IR (KBr): 3421, 1690, 1628, 1605, 1520. 1H- ja 13C-NMR: vt tabel 1. FAB-MS: 577 ([MH]-). HRESI-MS: 596,2348 ([M pluss NH4] pluss, C28H38NO pluss 13; arvut. 596,2343).

SalsasiidB(=bensüül4-O-[(E)-3-(3,4-dihüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül -D-glükopüranosiid; 2). Amorfne pulber. UV (MeOH): 332 (3,20). [a] 20D=35,6 (c=0,1, MeOH).IR (KBr): 3411, 1692, 1630, 1600, 1514. 'H- ja 13C-NMR: vt tabel 1. HR-ESI-MS: 596,2345 ([M pluss NH4] pluss, C28H38NO pluss 13; arvutatud 596,2343).

SalsasiidC(=4-O-[(E/Z)-3-(4-hüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid; 3 ). Amorfne pulber. UV (MeOH): 315 (3,23), 225 (1,80). IR (KBr): 3432, 1689, 1628, 1609, 1519. 1H- ja 13C-NMR: vt tabel 1. HR-ESI-MS: 561,1958 (([MH]-), C28H33O-12; 561.1972).

SalsasiidD(=2-(4-hüdroksüfenüül)etüül2-O-atsetüül-4-O-[(E)-3-(3,4-dihüdroksüfenüül) prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid;4). Amorfne pulber. UV (MeOH): 328 (3,40). [a]20D=58.3 (c=0.1, MeOH). IR (KBr): 3397, 1720, 1692, 1630, 1596, 1512. 'H- ja 13C-NMR: vaata tabelit 2. FAB-MS: 649 ([MH]-), 443 ([MH-Ac-Caf] -). HR-ESI-MS: 668,2563 ([M pluss NH4] pluss, C31H42NOþ 15; arvutatud 668,2554).

SalsasideE(=2-(4-hüdroksü-3-metoksüfenüül)etüül2-O-atsetüül-4-O-[(E)-3-(3,{ {9}}dihüdroksüfenüül)prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid;5).Amorfne pulber. UV (MeOH): 330 (3,21). [a]20D=33,3 (c=0.1, MeOH). IR (KBr): 3370, 1721, 1690, 1630, 1600, 1514. 1H- ja 13CNMR: vt tabel 2. FAB-MS: 679 ([MH]-), 533 [MH-Rha]-). HR-ESI-MS: 679,2228 ([MH]-, C32H39O-16; arvutatud 679,2238).

SalsasiidF(=2-(3,4-dihüdroksüfenüül)etüül2-O-atsetüül-6-O-[(E)-3-(4-hüdroksüfenüül) prop-2-enoüül]-3-OaL-ramnopüranosüül-bD-glükopüranosiid; 6). Amorfne pulber. UV (MeOH): 315 (3,28). [a]20D=38,5 (c=0.1, MeOH). IR (KBr): 3416, 1725, 1690, 1630, 1600, 1510. 1H- ja 13C-NMR: vaata tabelit 2. FAB-MS: 649 ([MH]-). HR-ESI-MS: 668,2543 ([M pluss NH4] pluss, C31H42NO pluss 15; arvutatud 668,2554).

Happeline hüdrolüüs ja suhkru absoluutse konfiguratsiooni määramine. Ühend (3 mg) pandi suletud torusse ja hüdrolüüsiti 2N vesilahusega. CF3COOH (5 ml), kuumutades veevannil 3 tundi [16]. Pärast jahutamist lahjendati segu H2O-ga (15 ml) ja ekstraheeriti CHCl2-ga (3 M 5 ml). Aq. kiht aurustati korduvalt MeOH-ga kuivaks, kuni muutus neutraalseks. Suhkrud identifitseeriti ko-TLC-ga autentsete proovidega, elueerides BuOH/AcOH/H2O4:2:1-ga, ja tuvastati pihustades aniisaldehüüdi/H2SO4-ga, millele järgnes kuumutamine. Glükoosi (Glc) ja ramnoosi (Rha) Rf väärtused olid 0,54 ja 0,69, vastavalt.

Kõhulihased. suhkru konfiguratsioonid määrati järgmiselt. Solni juurde. Hüdrolüüsil saadud suhkrujäägile püridiinis (60 ml) lisati L-tsüsteiini metüülestri vesinikkloriid ja heksametüüldisilasaan/Me3SiCl 3:1. Segu segati 608 °C juures 30 minutit. Saadud sade eemaldati tsentrifuugimisega, supernatant kontsentreeriti ja jaotati heksaani ja H2O vahel. Org. kihti analüüsiti seejärel GC abil. Võrreldes standardsete monosahhariididega tuvastati D-Glc (tR 12,45 min) ja L-Rha (5,32 min) 1.–6.

Cistanche salsaväljavõte

Alates: "UusGlükosiididalatesCistanche salsaLi Lei^a, Yong Jiang^ajt ---2007 Verlag Helvetica Chimica Acta AG, ZIrich

--- Helvetica Chimica Acta – kd. 90 (2007)

VIITED

[1] Farmakopöa toimetamiskomitee, "Chinese Pharmacopoeia", Chemical Industry Publisher, Peking, 2000, kd. 1, lk. 103.

[2] XC. Geng, LW. Laul, XP. Pu, PF. Tu, Biol. Pharm. Bull. 2004, 27, 797.

[3] XP. Pu, ZH. Laul, YY. Li, PF. Tu, HN. Li, Planta Med. 2003, 69, 65.

[4] GQ. Sheng, XP. Pu, L. Lei, PF. Tu, CL. Li, Planta Med. 2002, 68, 966.

[5] H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull. 1984, 32, 1729.

[6] H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull. 1984, 32, 3009.

[7] H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull. 1984, 32, 3880.

[8] H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase, S. Fukushima, Yakugaku Zasshi 1986, 106, 721.

[9] A. Moriya, PF. Tu, D. Karasawa, H. Arima, T. Deyama, K. Kegasawa, Nat. Med. 1995, 49, 383.

[10] A. Moriya, PF. Tu, D. Karasawa, H. Arima, T. Deyama, K. Hayashi, Nat. Med. 1995, 49, 394.

[11] H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani, M. Ahmad, Chem.

Pharm. Bull. 1987, 35, 3309.

[12] N.-D. Tommasi, L. Rastrelli, J. Cumanda, G. Speranza, C. Pizza, Phytochemistry, 1996, 42, 163.

[13] T. Miyase, R. Yamamoto, A. Ueno, Phytochemistry 1996, 43, 475.

[14] ZJ. Jia, JJ. Gao, ZM. Liu, Indian J. Chem., Sect. B 1994, 33, 460.

[15] F. Yoshizawa, T. Deyama, N. Takizawa, Chem. Pharm. Bull. 1990, 38, 1927.

[16] M. Haddad, T. Miyamoto, V. Laurens, M.-A. Lacaille-Dubois, J. Nat. Prod. 2003, 66, 372.