Lipidoomika: uus ülevaade neeruhaigustest

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Ying-Yong Zhao, Nosratola D. Vaziri, Rui-Chao Lin

Abstraktne

{0}} tüüpi diabeedi ja hüpertensiooni esinemissageduse tõttu kroonilineneerudhaigus (CKD) on muutunud oluliseks rahvatervise probleemiks kogu maailmas. CKD põhjustab enneaegset surma kiirenenud südame-veresoonkonna haiguste ja mitmesuguste muude tüsistuste tõttu. Varajane avastamine, neerufunktsiooni hoolikas jälgimine ja reageerimine ravile on kriitilise tähtsusega kroonilise neeruhaiguse progresseerumise ja selle tüsistuste ärahoidmiseks. Kahjuks on traditsioonilised neerufunktsiooni biomarkerid ebapiisavalt tundlikud või spetsiifilised, et tuvastada haiguse varases staadiumis, kui terapeutiline sekkumine on kõige tõhusam. Seetõttu on tundlikumad biomarkeridneerudhaiguson vajalikud varajaseks diagnoosimiseks, jälgimiseks ja tõhusaks raviks. CKD põhjustab põhjalikke muutusi lipiidide ja lipoproteiinide metabolismis, mis omakorda aitavad kaasa kroonilise neeruhaiguse ja selle kardiovaskulaarsete tüsistuste progresseerumisele. Lipiidid ja lipiididest saadud metaboliidid mängivad rakkude, kudede ja biovedelike struktuuris ja funktsioonis mitmekesist ja kriitiliselt olulist rolli. Lipidoomika on metaboloomika haru, mis hõlmab lipiidide ja nende bioloogiliste funktsioonide ülemaailmset uurimist tervises ja haigustes, sealhulgas biomarkerite tuvastamist erinevate haiguste diagnoosimiseks, prognoosimiseks, ennetamiseks ja ravivastuseks. See ülevaade võtab kokku lipidoomika hiljutised arengud ja selle rakendused erinevateleneerudhaigusedsealhulgas krooniline glomerulonefriit, IgA nefropaatia, krooniline neerupuudulikkus, neerurakuline kartsinoom, diabeetiline nefropaatia ja äge neerupuudulikkus kliinilistes ja eksperimentaalsetes uuringutes. Käsitletakse nii analüütilisi tehnoloogiaid, andmeanalüüsi kui ka praegu teadaolevaid neeruhaiguste metaboolseid biomarkereid. Arutatakse lipidoomika tulevikuperspektiive ja võimalikke piiranguid.

Cistanche deserticola takistabneerudhaigus, näidise vaatamiseks klõpsake siin

1. SISSEJUHATUS

{0}} tüüpi diabeedi ja hüpertensiooni esinemissageduse tõttu kroonilineneerudhaigus(CKD) on muutunud oluliseks rahvatervise probleemiks kogu maailmas. CKD põhjustab puude ja enneaegse surma kiirenenud südame-veresoonkonna haiguste ja sellega kaasnevate tüsistuste tõttu [1]. Paljude patoloogiliste seisundite hulka kuuluvad geneetilised, metaboolsed, toksilised, immunoloogilised, nakkuslikud, hemodünaamilised, mehaanilised ja muud häired, mis viivad haiguse arengu ja progresseerumiseni.neerudhaigus. Kroonilise neeruhaiguse ja selle tüsistuste õigeaegseks diagnoosimiseks ja progresseerumise ennetamiseks on kriitilise tähtsusega varajane avastamine, hoolikas neerufunktsiooni jälgimine ja reageerimine ravile. Kahjuks on traditsioonilised neerufunktsiooni markerid ebapiisavalt tundlikud või spetsiifilised, et tuvastada kroonilist neeruhaigust ja selle kardiovaskulaarseid või muid tüsistusi varajases staadiumis, kui terapeutiline sekkumine on kõige tõhusam. Näiteks kõige sagedamini kasutatavaid biomarkereid, st seerumi kreatiniini ja uureat ning kreatiniini kliirensit mõjutavad tugevalt tegurid, mis ei sõltu neerude sisemisest funktsioonist ja struktuurist. Selles kontekstis mõjutab lihasmass oluliselt kreatiniini, valgu tarbimine ja vedelikutasakaalu moduleerivad uureat ning angiotensiini konverteeriva ensüümi inhibiitorite või angiotensiini retseptori blokaatorite kasutamine, samuti valgu tarbimine toiduga kreatiniini kliirensit. Seetõttu on vaja välja töötada tundlikud ja spetsiifilised biomarkerid neeruhaiguse varaseks avastamiseks ning selle progresseerumise ja ravivastuse jälgimiseks. Ülevaade geneetiliste, valkude ja metaboliitide regulatsiooni, interaktsiooni ja funktsiooni dünaamilistest erinevustest neeruhaiguste korral võib tuvastada uusi diagnostilisi ja prognostilisi biomarkereid ja terapeutilisi sihtmärke [2–4].

CKD põhjustab sügavaid muutusi lipiidide ja lipoproteiinide metabolismis [5–7]. Seotud lipiidide häired omakorda aitavad kaasa kroonilise neeruhaiguse ja selle kardiovaskulaarsete ning muude tüsistuste progresseerumisele [8–10]. Lipidomics, rakkudes, kudedes ja biovedelikes sisalduvate lipiidide ülemaailmne uuring, hõlmab lipiidiliikide ja nende arvukuse analüüsi, et selgitada välja bioloogilist funktsiooni, subtsellulaarset lokaliseerimist ja jaotumist kudedes. Väikese molekulmassiga lipiidid, nagu rasvhapped, glütserolipiidid, glütserofosfolipiidid (GP) ja sfingolipiidid, täidavad tervises ja haigustes mitmesuguseid ja keerulisi funktsioone. Nad mängivad olulist rolli normaalse reguleerimisesneerudfunktsioon ja patogeneesneerudhaigus. Varasemad uuringud on näidanud glomerulaarse tsüklooksügenaasi-1 või -2 märkimisväärselt suurenenud ekspressiooni glomerulonefriidi statsionaarsetes ja loommudelites [11–13] ning glomerulaarse tsüklooksügenaasi-2 ekspressiooni ülesreguleerimist luupuse statsionaarsetes ja loommudelites nefriit [13,14]. On näidatud, et tsüklooksügenaasi inhibeerimine leevendab katseloomadel passiivset Heymanni nefriiti ja luupuse nefriiti [14–16]. Leukotrieenid, mis on seotud põletikulise glomerulaarkahjustusega ja lipoksügenaasi produktiga (12-hüdroksüeikosatetraeenhape), vahendasid angiotensiin II ja transformeerivat kasvufaktorit{10}}indutseerisid diabeetilise nefropaatia (DN) mesangiaalse laienemise [17]. 20-Hüdroksüeikosatetraeen- ja epoksüeikosatrieenhape osalesid mitmes neerukahjustuse vormis, sealhulgas metaboolse sündroomi neerukahjustuses [18–20], ja on näidatud, et tseramiidid mängivad rolli ägeda neerukahjustuse patogeneesis. Kokkuvõttes on üha rohkem tõendeid, mis toetavad lipiidide ja lipiididest pärinevate metaboliitide rolli neeruhaiguste patogeneesis. Seega on peamiste lipiidide vahendajate analüüs kujunenud oluliseks vahendiks neeruhaiguste diagnoosimisel, prognoosimisel ja ravimisel.

Selles artiklis antakse ülevaade lipidoomika kasutamise hiljutistest edusammudest patogeneesi ja potentsiaali selgitamiselravineerudhaigus.

2. NEERUHAIGUS

Süsteemibioloogia võimaldab õigeaegselt analüüsida raku metabolismi reguleerivaid ja bioloogilisi võrgustikke [21–23]. Neeruhaiguste põhjalik iseloomustus võib anda olulist ja integreerivat teavet selle patofüsioloogia aluseks olevate molekulaarsete suhete paremaks iseloomustamiseks, et töötada välja usaldusväärsemad ja spetsiifilisemad markerid diagnoosimiseks, prognoosimiseks, ennetamiseks ja ravivastuseks [2,24]. Süsteemibioloogia kasv ning uute eksperimentaalsete ja arvutusvahendite väljatöötamine on võimaldanud ühendada geeni-raku-organi regulatsioonimehhanisme mitmel tasandil, et integreerida molekulaar- ja rakubioloogiat.neerudstruktuur ja funktsioon [25–29]. Lipiidid mängivad bioloogilistes süsteemides mitmekesist ja olulist rolli, sealhulgas membraani kahekihiline struktuur, energia salvestamine, signaaliülekanne ning pakuvad ka funktsionaalset tuge membraanivalkudele ja nende interaktsioonidele [30]. Näiteks arahhidoonhape on eikosanoidide eelkäija, mis toimivad signaalmolekulidena spetsiifiliste retseptorite kaudu, mis põhjustavad põletikulisi protsesse [31]. Triatsüülglütseriidid toimivad raku energia salvestajana ja mängivad olulist rolli ainevahetuses ja haigustes [32]. Mõned lipiidiliigid, nt lüsofosfatidüülkoliinid (LPC), glütserofosfoetanoolamiinid (PE), fosfatidüülkoliinid (PC) ja glütserofosfoinositoolid (PI), näivad olevat potentsiaalsedneerudhaiguse markerid [33]. Siin anname ülevaate lipiidoossest lähenemisviisistneerudhaigus.

cistanche kasulikkus: neeruhaiguste ravi

3.LIPIIDID JA LIPIDOOMIKA

3.1. Lipiidide määratlus, klassifikatsioon ja bioloogiline funktsioon

Lipiidid, bioloogiliste membraanide põhikomponendid, on struktuurselt ja funktsionaalselt mitmekesine molekulide klass. Sõltuvalt biosünteesist ja keemilisest struktuurist määratletakse lipiidid hüdrofoobsete või amfifiilsetena. Amfifiilsed lipiidid esinevad vesiikulites, membraanides või liposoomides vesikeskkonnas. Bioloogilised lipiidid pärinevad kahte erinevat tüüpi biokeemilistest subühikutest: isopreen- ja ketoatsüülrühmad [34]. Selle määratluse põhjal võib lipiidid jagada kaheksasse kategooriasse: rasvhapped, glütserolipiidid, sfingolipiidid, GP-d, sahharolipiidid, steroollipiidid, prenoollipiidid ja polüketiidid (joonis 1) [34]. Rasvhapetel ja glütserolipiididel on suhteliselt lihtne struktuur. Rasvhapped on kõigi lipiidide üks olulisemaid lipiidide klasse ja põhikomponente. Rasvhapetel on küllastunud või küllastumata sirge süsinikuahelad pikkusega 4–24 süsinikuaatomit ja 0–6 kaksiksidet. Rasvhapped on erinevate bioaktiivsete lipiidide eelkäijad. Eikosanoidide hulka kuuluvad leukotrieenid, prostaglandiinid ja tromboksaanid, millel on oluline roll põletikuliste protsesside tekkes [35]. Glütserolipiidid koosnevad mono-, di- ja triasendatud glütseroolidest, mis erinevad rasvhapete sisalduse poolest, mis on esterdatud glütserooli karkassi hüdroksüülrühmadeks [36]. Erinevad uuringud on näidanud, et muutunud triglütseriidide süntees ja katabolism mängivad olulist rolli paljude haiguste esinemises ja arengus [37,38]. Membraanlipiidide olulised komponendid on steroollipiidid, sealhulgas kolesterool ja nende derivaadid, mis koosnevad sulatatud nelja tsükliga tuumastruktuurist. Steroollipiididel on erinevad bioloogilised rollid, näiteks raku signaaliülekande regulatiivne funktsioon ja rakuvedeliku moduleerimine [39].

GP, tuntud ka kui fosfolipiidid, on oma olemuselt üldlevinud, on lipiidide kaksikkihtide olulised komponendid ning on seotud rakkude signaaliülekande ja ainevahetusega. Lähtudes polaarse pearühma olemusest glütserooli selgroo sn-3 positsioonis eukarüootides ja eubakterites või sn-1 asendis arhebakterite puhul [40], võib GP jagada eraldiseisvateks osadeks. klassidesse, sealhulgas glütserofosfokoliinid, glütserofosfatiidhapped, glütserofosfoglütseroolid (PG), glütserofosfoseriinid (PS), PE ja PI. Ajukude sisaldab suhteliselt palju G-d ja nende koostise muutused on seotud neuroloogiliste häiretega [41]. Mõned üldarstid, nagu LPC, PC, PE ja PI, on tuvastatud potentsiaalsete vähi-, neeru- ja südame-veresoonkonnahaiguste biomarkeritena [33,42,43]. Sfingolipiidid koosnevad komplekssest ühendite perekonnast, mis koosnevad 1,3- dihüdroksüüli, 2-aminoalkaani või alkeeni (sfingoidaluse) aluselisest karkassist. Sfingomüeliin (SM) ja sfingosiin on kaks olulist sfingolipiidi, mis koosnevad fosforüülkoliini pearühmast ja rasvhappest, mis on seotud vastavalt sfingoidahela 1-hüdroksüülrühma ja 2-aminorühmaga. Varasemad uuringud on näidanud, et keramiidid, mis kuuluvad sfingosiini N-atsüülderivaatide hulka, on seotud kroonilise neeruhaigusega [44].

3.2.Lipidoomika

Kuigi metaboloomi alamfraktsioon, selle lipiidiliikide keerukus, nende erinevad keemilised omadused ja oluline bioloogiline aktiivsus on muutnud lipidoomi märkimisväärse uurimistöö keskmeks. Metaboloomika on määratletud kui "elussüsteemide dünaamilise mitmeparameetrilise metaboolse reaktsiooni kvantitatiivne mõõtmine patofüsioloogilistele stiimulitele või geneetilistele modifikatsioonidele" [45,46]. Metaboloomika on madala molekulmassiga endogeensete metaboliitide biofluidide ja kudede mittesihipärane kvantitatiivne analüüs. Lipidoomika kui metaboloomika haru võtsid esmakordselt kasutusele Han ja Gross 2003. aastal [47]. Lipidoomikat on määratletud kui "lipiidide molekulaarsete liikide ja nende bioloogiliste rollide täielikku iseloomustamist lipiidide metabolismis ja funktsioonis osalevate valkude ekspressioonis, sealhulgas geeniregulatsioonis" [48]. Lipidoomika kujutab endast üleminekut individuaalselt lipiidide uuringult globaalsete lipiidide metaboliitide uurimisele süsteemiga integreeritud kontekstis, et paremini mõista nende rolli patofüsioloogilistes protsessides. Viimase 10 aasta jooksul on lipidoomika tõusnud süsteemibioloogias uue valdkonnana ning suurendanud huvi haiguste diagnoosimise ja biomarkerite avastamise (rasvumine, diabeet, südame-veresoonkonna haigused, Alzheimeri tõbi, kõhunäärmevähk jne), ravimite avastamise ja arendamise, inimtegevuse vastu. toidu- ja toitumisuuringud [49–55]. See võimas lähenemisviis võib paljastada normaalsete, patoloogiliste või ravispetsiifiliste sündmuste ainulaadsed metaboolsed omadused. Hiljuti on massispektromeetria (MS), tuumamagnetresonantsi (NMR) ja muude spektroskoopiliste meetodite abil avaldatud suurenenud arv lipiidoomseid uuringuid ja ülevaateid [56–61]. Eraldustehnoloogiad, gaaskromatograafia (GC), vedelikkromatograafia (LC), superkriitilise vedeliku kromatograafia ja kapillaarelektroforees on komplekssete proovide lipiidoomsel uurimisel kriitilise tähtsusega [62]. Struktuursete molekulaarsete ioonide teabe saamiseks kasutatakse kõigepealt madala kokkupõrkeenergiaga MS-i, millele järgneb suurema põrkeenergiaga MS2 tingimused, et saada fragmentioonid. Tavaliselt valitakse prekursorioon ja fragmentatsiooni jälgitakse tandem-massispektromeetria (MS/MS) abil. See lähenemine annab suurema struktuurilise teabe ja üksikute lipiidiliikide tuvastamise keerukates bioloogilistes proovides. Lisaks on MS/MS-i järjest enam kasutatud sihipärase lipidoomika kvantitatiivsete meetodite väljatöötamiseks [63]. See lähenemisviis nõuab aga teavet, mis põhineb eelmisel täisskaneerimisel MS-l. 2005. aastal Wrona jt.[64] tutvustas MSE tehnikat, milles andmete kogumiseks on samaaegsed kaks skaneerimisfunktsiooni. MSE pakkus paralleelselt vahelduvaid skaneeringuid madala kokkupõrkeenergiaga prekursoriooniteabe (MS) või suure kokkupõrkeenergiaga koguskaneerimise täpsete massifragmentide, prekursorioonide ja neutraalse kadude teabe (MSE) jaoks. See lähenemisviis andis ühe analüütilise katsega sarnase teabe tavalise MS2-ga (MS/MS) ja struktuuriteavet, mis oli vajalik tundmatute biomarkerite tuvastamiseks sihtotstarbeta analüüsides [65–70]

cistanche kasu tervisele

3.3.Lipidoomika analüüsimeetodid

Traditsioonilised lipiidianalüüsi meetodid hõlmavad tavaliselt bioloogiliste proovide (veri, kude, rakk ja organism) ekstraheerimist lahustiga, millele järgneb lipiidide eraldamine õhukese kihi kromatograafia, tahkefaasi ekstraheerimise või normaalfaasi LC abil ja teatud klasside eraldamine. lipiidide eraldamine üksikuteks molekuliliikideks kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) – ultraviolettdetektori või aurustuva valguse hajumise detektori abil. Neid traditsioonilisi meetodeid kasutades saab analüüsida paljude lipiidide klasside üksikuid molekulaarseid liike [71]. Kuigi GC-d on kasutatud erinevate lipiidide rasvhapete sisalduse määramiseks metüülestrite meetodil, kipub see lähenemine olema aeganõudev ning hõlmab proovide hüdrolüüsi ja derivatiseerimist. Üldiselt nõuab tavaline lipiidianalüüs tavaliselt suurt proovikogust, kuna paljusid bioloogiliselt aktiivseid liike on väga väikestes kogustes. Nende loomupärase keerukuse tõttu võib proovi ettevalmistamine hõlmata mitut ekstraheerimist, mis vähendab veelgi tundlikkust ja eraldusvõimet. Lisaks on need meetodid töömahukad ja nõuavad sageli derivatiseerimist, mis piirab läbilaskevõimet.

Seevastu MS lipidoomika jaoks võib kasutada otsest proovianalüüsi [72,73]. Otsese infusiooniga MS-tehnoloogiatel on hea reprodutseeritavus, täpsus ja kõrge tundlikkus ning need on vähem aeganõudvad kui traditsioonilised meetodid. Tavaliselt on otseinfusiooniga MS analüüsis kõige laialdasemalt kasutatavad iooniallikad elektropihustus-ionisatsiooni kvadrupool-lennuaeg (ESI-QTOF) ja maatriksi abil laserdesorptsiooni ionisatsioon (MALDI) [74,75]. Otseinfusiooniga MS on lihtne ja kiire. Selle peamine piirang on ioonide supressioon, mis takistab tundlikkust ja kvantitatiivset täpsust. Kahjuks ei suuda see meetod tuvastada isobaarilisi ja isomeerseid lipiide, mille massid on identsed ja tekitavad sageli sarnaseid killustusmustreid. Kuigi otseinfusiooniga MS on lipiidide andmebaasidest uudsete ja tundmatute ühendite otsimisel suhteliselt piiratud, võib tulevikus olla kasulik erinevate haiguste biokeemiliste radade sõelumine. Avaldatud on põhjalikud ülevaated otseinfusiooniga ESI/MS, ESI-QTOF/MS ja MALDI/MS ning nende rakenduste kohta lipidoomikas [74,75].

MS-d kombineeritakse tavaliselt lipidoomika LC-ga ja läbi on vaadatud LC-MS-põhised lipidoomika uuringud [76]. Tavaliselt on LC-MS-meetodi eelisteks hea reprodutseeritavus, täpsus ja kõrge tundlikkus tuntud või uudsete lipiidide tuvastamisel. Viimase kümnendi jooksul on HPLC-MS-i laialdaselt kasutatud nii metaboolika kui ka lipidoomika sihipäraseks ja mittesihipäraseks analüüsiks, kasutades ühe kvadrupooli, hübriid- ja kõrge eraldusvõimega instrumente. Globaalseks profileerimiseks on populaarsed valikud üliefektiivse vedelikkromatograafia (UPLC) kombinatsioonid koos QTOF/MS või tandem-ioonide liikuvuse TOF/MS-ga [77–80]. Need pakuvad kiiret analüüsi kõrge eraldusvõimega MS-ga. UPLC kasutab alla -2 μm suurusi osakesi ja töötab kõrgendatud rõhul (6000–15 000 psi), pakkudes seega kõrget kromatograafilist eraldusvõimet võrreldes tavapärase 5 μm osakestega HPLC-ga [81]. Suurenenud eraldusvõime tuleneb paremast signaali/müra suhtest ja kitsast piigi laiusest võrreldes tavapärase HPLC-ga. See lähenemisviis on kasulik metaboolse profiili koostamisel, kuna füsioloogilistel kontsentratsioonidel võib tuvastada tohutul hulgal metaboliite. Kuigi erinevatest bioloogilistest allikatest pärit lipiide saab UPLC-MS abil eraldada [82], on maatriksiefektidel oluline mõju globaalsetele profiilidele [83]. Kahjuks ei ole tundlikkus tavaliselt nii kõrge kui sihitud lipidoomika. Lisaks ei saa iga eraldatud ühendi katsetingimusi optimeerida. Tavaliselt kasutatakse kolmekordset kvadrupool-MS-i UPLC-MS-i sihtanalüüside jaoks koos selektiivse ioonide jälgimisega. Sihitud lipiidimeetodid võivad hõlmata steroole ja eikosanoide, nagu sapphapped ja steroidid [84,85]. GC-põhised meetodid sobivad lenduvate komponentide jaoks ja neid ei saa kasutada enamiku lipiidide jaoks. Huvitav on see, et GC-MS on vabade rasvhapete, esterdatud rasvhapete ja steroidide analüüsimiseks kõige laialdasemalt kasutatav meetod. Vabad rasvhapped ja steroidid vajavad derivatiseerimist või silüülimist, samas kui esterdatud rasvhappeid analüüsitakse sageli metüülestritena [86]. Ülekriitiline vedelikkromatograafia on veel üks kõrge eraldusvõimega meetod, mida saab kasutada erinevate lipiidide eraldamiseks. Superkriitilist vedelikukromatograafiat MS saab kasutada suure hulga proovide igakülgseks lipiidide profileerimiseks [87].

Ioonide liikuvuse MS (IM-MS) ja mitmemõõtmelisi metoodikaid peetakse uudseteks metoodikateks ja neid on kasutatud lipidoomikas [88, 89]. Isomeere, konformeere ja enantiomeere saab IM-MS abil kiiresti eraldada ning need on osutunud kasulikuks komplekssete bioloogiliste proovide analüüsimisel [78]. Kujutise MS areng on mänginud olulist rolli ka MS-ga lipiidide analüüsiks kasutatava ioonide liikuvusspektromeetria väljatöötamisel. Ioonide liikuvuse spektromeetriat MS-ga koos molekulaardünaamika arvutusliku modelleerimisega saab kasutada lipiididega ühendatud komplekside struktuuri ja stabiilsuse edaspidiseks iseloomustamiseks. Lisaks on kõikehõlmav mitmemõõtmeline LC-MS atraktiivne esilekerkiv lähenemisviis komplekssete bioloogiliste proovide igakülgseks lipiidoosseks iseloomustamiseks [90].

3.4.Lipidoomika andmete analüüs

Lipidomics toodab tohutult andmeid ja selle analüüs mängib võtmerolli, eriti mittesihipärastes uuringutes. Sellisena on tugev bioinformaatika kriitiline. Enne statistilist analüüsi on vaja andmete eeltöötlust, sealhulgas signaalitöötlust, andmete normaliseerimist ja teisendamist, et töötlemata andmed teisendataks statistilise andmeanalüüsiga ühilduvasse vormingusse [91,92]. Arvestades lipiidide suurt varieerumist, on järelevalveta ja järelevalvega statistilise analüüsi esimene samm andmete vähendamine. Seda on võimalik saavutada mitme meetodi abil, sealhulgas ortogonaalne osalise vähimruutude diskrimineerimise analüüs, põhikomponentide analüüs (PCA) ja osalise vähimruutude diskrimineerimise analüüs (PLS-DA). Olenevalt konkreetse analüüsi eesmärgist võib kasutada nii järelevalveta kui ka järelevalvega meetodeid. Järelevalveta andmeanalüüsis kasutab PCA ja hierarhiline klasteranalüüs tundmatut teavet erinevate rühmade kohta. Järelevalvega lähenemise korral seostatakse iga proov või metaboliit teadaolevate ühenditega ja seda eelnevat teavet kasutatakse seejärel analüüsiks põhikomponendi regressiooni ja närvivõrkude kaudu [91,92]. Muud regressioonimeetodid, sealhulgas elastne neto ja vähim absoluutne kokkutõmbumine ja valikuoperaator, on saadaval ka lipiidoomsete andmekogumite analüüsimiseks, et teha kindlaks muutujate vaheline seos [93].

cistanche testosteroon: parandab neerufunktsiooni

4. LIPIDOOMIKA RAKENDUSED NEERUHAIGUSTE KORRAL

Fosfolipiidid esindavad oluliste rakuliste koostisosade klassi, mis osalevad paljudes bioloogilistes protsessides ja radades, mis peegeldavad tervise ja haiguste metaboolset seisundit. Lipidomics on sobiv vahend haiguste biomarkerite avastamiseks süsteemibioloogias [94,95]. Selle rakenduste põhjalik mõistmine on lipidoomika jaoks kriitilise tähtsusega. Paljud uuringud on näidanud, et erinevate lipiidide ainevahetushäired või kõrvalekalded põhjustavad neeruhaigust [96–99]. Kasutades kroonilist neerupuudulikkust (CRF), neerurakulist kartsinoomi (RCC), kroonilist glomerulonefriiti, IgA nefropaatiat ja DN-i, arutame lipidomikat neeruhaiguste korral inimestel ning loomadel ja rakumudeli uuringutes.

4.1.Lipidoomika kliinilises neeruhaiguses

4.1.1 Kroonilise neeruhaiguse ja glomerulonefriidi mõju

Lipiidide kõrvalekalded on neeruhaiguste korral tavalised [100, 101] ja aitavad kaasa kardiovaskulaarsete häirete suurele esinemissagedusele selles populatsioonis. Plasma ja erütrotsüütide lipiidide profiile uuriti 30 kuu jooksul hemodialüüsi saavatel CRF-ga patsientidel [102]. Plasmas ja erütrotsüütide membraanides täheldati triglütseriidide sisalduse tõusu. CRF-is täheldati ka plasma palmitiinhapete ja monoküllastumata rasvhapete sisalduse suurenemist ning plasma polüküllastumata rasvhapete sisalduse vähenemist. Lipiidide kõrvalekalded ilmnesid 18. kuul ja muutusid sügavamaks 30. kuul. Plasma ja erütrotsüütide membraani lipiidide mustrid dialüüsiperioodi jooksul ei muutunud. Regulaarset hemodialüüsi saavatel CRF-i patsientidel ilmnes triglütseriidide ja rasvhapete profiilide järkjärguline halvenemine. Teises uuringus kasutati HPLC-MS-i plasma fosfolipiidide profiili määramiseks kroonilise glomerulonefriidi ja CRF-iga patsientidel ilma neeruasendusravita [103]. Tulemused näitasid, et primaarse kroonilise glomerulonefriidi ja CRF-i metaboolsete fosfolipiidide profiilid olid ebanormaalsed. Potentsiaalsete biomarkeritena tuvastati hulk fosfolipiide (n ¼ 19). Võimalik mehhanism, mis viis selle kõrvalekaldeni, hõlmas fosfatidüülinositooli (PI) hüdrolüüsi PI-spetsiifilise fosfolipaasi C aktiveerimise kaudu, mille tulemuseks on kahesekundiliste sõnumitoojate, inositool (1,4,5)-trisfosfaadi (IP3) ja diatsüülglütserooli tootmine [104] , mis osalevad signaaliülekandes iseseisvalt. IP3 suurendab tsütoplasmaatilist Ca2 pluss, stimuleerides Ca2 pluss vabanemist sarkoplasmaatilisest retikulumist [105]. Proteiinkinaasi C (PKC) aktiveerivad fosfatidüülseriin, Ca2 plus ja diatsüülglütserool. Intratsellulaarse PKC signaaliülekandesüsteemi aktiveerimine käivitab omakorda rea ​​füsioloogilisi ja füüsikaliskeemilisi reaktsioone.

Morfoloogiliste ja geneetiliste tunnuste põhjal liigitatakse RCC erinevatesse alatüüpidesse. RCC prognoos varieerub ja metastaatiline või korduv RCC on seotud halva prognoosiga ja harvaesineva pikaajalise elulemusega. Desorptsiooni ESI/MS-i kasutati pildistamisrežiimis, et uurida inimese papillaarse RCC õhukese koe lõikude lipiidide profileerimist võrreldes külgneva normaalse koega (11 proovipaari) ja selge raku RCC versus külgneva normaalse koega (9 proovipaari) [106]. Kasvaja piirkonnas täheldati suurenenud GP ja vabade rasvhapete sisaldust. PLS-DA eristas kasvajat papillaarses ja selgerakulises RCC-s ning papillaarses selge raku RCC-s. Vähi korral esineb muutunud GP koe koostis [107] ja see näib olevat lahutamatult seotud pahaloomulise transformatsiooniga [108]. Mikro-LC-QTOF/MS-i kasutati uriini lipiidide uurimiseks RCC-s võrreldes tervete isikutega. Esialgu tuvastati kolmkümmend viis lipiidiliiki, sealhulgas lipiidsed muutused uriini eksosoomides [109]. Kudede GP ja nende ensümaatilised kõrvalsaadused näivad olevat seotud pahaloomulise transformatsiooniga [110, 111] ja transformeeritud rakkudes on täheldatud märkimisväärselt suurenenud PI-d [112].

4.1.2 Keelamise mõju

DN on tõsine probleem kogu maailmas. Fosfolipiidid ja nende metaboliidid on tihedalt seotud DN patogeneesi ja progresseerumisega. DN-patsientidel viidi läbi seerumi fosfolipiidide sihtmärgistamata lipidoomika, kasutades normaalfaasi LC-TOF/MS ja ioonlõksu-MS/MS [113]. Võrdlus tervete isikutega näitas potentsiaalsete DN-i biomarkeritena kaheksa lipiidi seitsmes fosfolipiidide klassis. Kaks uudset biomarkerit, sealhulgas PI (18:0/22:6) ja SM (d18:0/20:2), diskrimineerisid tõhusalt DN-patsiente. Eeldatavalt on samal fosfolipiidide klassil sarnane variatsioonitrend DN progresseerumisega. Märgiti üles reguleeritud LPC, PE, PG, SM, üks arvuti ja üks PI ning allareguleeritud PE, PS ja kaks arvutit. Mitmed uuringud on näidanud lipiidide akumuleerumist diabeetiliste katseloomade ja inimeste neerudes ning et lipiidid mõjutasid DN patogeneesi [114,115]. Teatati, et lipiidfosfataas soodustas podotsüütide apoptoosi, mis viis DN-i, ja lipiidfosfataas suurenes enne histoloogilisi muutusi [116]. Täiendavad tõendid on näidanud, et ebanormaalne lipiidide metabolism ja lipiidide akumuleerumine neerudes mängisid olulist rolli DN patogeneesis [117–119] ja oksüdeerunud PC liigid olid seotud neerufunktsiooni häiretega [120]. Võimalikud mehhanismid hõlmavad lipiidide ladestumist suurenenud seerumikontsentratsiooni tõttu ning proteinuuriaga seotud valkudega seotud lipiidide glomerulaarfiltratsiooni. Kogunenud lipiidid suurendasid veresoonte endoteeli kasvufaktorite ekspressiooni ja transformeerisid kasvufaktorit ning soodustasid proteinuuria ja diabeetilise glomeruloskleroosi teket [121]. Teisest küljest võib ebanormaalsete fosfolipiidide olemasolu soodustada sorbitooli raja aktiveerimist, oksüdatiivset stressi ja PKC aktiveerimist [122–124]. DN-is oli vähenenud PI seotud sorbitooli raja aktiveerimisega, mis viis rakusisese inositooli lagunemiseni, müoinositooli vähenemiseni ja PI sünteesi vähenemiseni.

4.1.3 Neeruasendusmeetodite mõju

Peritoneaaldialüüsiga seotud kliinilised tüsistused on muutunud üha ilmsemaks. Peritoneaaldialüüsipatsientide plasma lipiidide profileerimiseks töötati välja veebipõhine kahemõõtmeline LC-QTOF/MS [125]. See põhjalik uuring hõlmas 10 lipiidiklassi ja 190 lipiidiliiki. Tuvastati kolmkümmend biomarkerit, sealhulgas PE ja PC kui alatoitluse, põletiku ja aterosklerootilise sündroomi näitajad. Selles uuringus uuriti ka erinevusi vereplasma lipiidide profiilides inimestel, kellel oli halb vedelikukontroll ja kellel oli hea maht. Halva mahu seisundiga patsientidel täheldati märkimisväärselt suurenenud PC ja PE (ja PC ja PE plasmalogeeni alamklassid). Huvitaval kombel näitas teine ​​sarnane uuring, et alatoitluse esinemissagedus oli seotud plasmalogeenfosfolipiididega [126]. Need leiud toetasid seost peritoneaaldialüüsi mahu ja toiteväärtuse vahel [127]. GC–MS-i kasutati F2-isoprostaanide kvantifitseerimiseks lõppstaadiumis neeruhaigusega hemodialüüsi saavatel patsientidel [128]. F2-isoprostaanide arv suurenes pärast raua/askorbaadi põhjustatud oksüdatiivset stressi ~100- korda ja pärast pentüleentetrasoolist põhjustatud krampe hemodialüüsi saavatel patsientidel 2- kuni 4- korda. Nii inim- kui ka eksperimentaalsed uuringud toetavad seost F2-isoprostaanide ja põletiku vahel.

cistanche annus

4.2. Lipidoomika loommudelites või rakumudelites

4.2.1 IgA nefropaatia mõju

IgA nefropaatia on glomerulonefriidi kõige levinum vorm ja võib areneda lõppstaadiumis neerupuudulikkuseks. Progressioonimarkerite tuvastamiseks kasutati fosfolipiidide metaboolsete profiilide hindamiseks plasmas HPLC-MS koos PCA ja PLS-DA abil eksperimentaalses Balb/c hiiremudelis [129]. Tuvastati PC, LPC, PI, PS, PE ja SM lipiidide klassid, sealhulgas 9 0 lipiidiliiki. PS(18:0/18:0), PS(18:0/22:5) ja PI(18:{{20}}/ 20:4) tuvastati potentsiaalsete biomarkeritena. Samuti uuriti fosfolipiidide ja rakkudevahelise adhesioonimolekuli-1 (ICAM-1) ekspressiooni seost. Viimane on suures korrelatsioonis proteinuuriaga. Teises uuringus tuvastati ICAM-1 ekspressioon haiguse progresseerumise indikaatorina ja soovitas PS(18:0/18:0), PS(18:0/22:5) ja PI(18:0). /20:4) kui IgA nefropaatia võimalikud biomarkerid [130].

MS lipidoomika pildistamine on kasulik erinevate lipiidide lokaliseerimise visualiseerimiseks neerudes ja muudes kudedes [131, 132]. Hiljuti analüüsiti hüper-IgA hiirel lipiidide molekulaarset jaotustneerudkasutades MALDI-kvadrupoolioonilõksu-TOF-põhist kujutise MS-i [133]. Kaks PC-d, PC(18:2/22:6) ja PC(16:0/22:6) leiti peamiselt ajukoores ning kaks triatsüülglütserooli, TAG(18:1/18:2/18: 1) ja TAG(16:0/18:2/18:1), leiti mäest. Siiski täheldati hüper-IgA neerudes, eriti torukujulises piirkonnas, mitmeid teisi lipiide. Kaks hüper-IgA-spetsiifilist lipiidi olid O-PC, sealhulgas PC(O-18:1/22:6) ja PC(O-16:0/22:6). Teatati, et PC(O-18:1/22:6) ja PC(O{{40}}:0/22:6) olid plasmalogeeni ja vereliistakuid aktiveeriva faktori analoogid, vastavalt [134,135]. See uuring näitas ka, et kõik hüper-IgA-spetsiifilised lipiidid pärinevad uriinist ja et ühepoolsest kusejuha obstruktsioonist tingitud stagnatsioon põhjustas lipiidide hüper-IgA-spetsiifilise jaotumise neerutuubulites.

Võimalik mehhanism hõlmas PKC raja aktiveerimist, mis viis ekstratsellulaarse maatriksi laienemiseni ja glomerulaarse basaalmembraani paksenemiseni [136]. Tegelikult on näidatud, et PKC aktiveerimine suurendab endoteeli monokihi läbilaskvust albumiinile [137]. Epiteelirakud ja basaalmembraan glomerulaarkapillaarbarjäärist. On näidatud, et PKC aktiveerimine kahjustab glomerulaarset kapillaarbarjääri, põhjustades proteinuuria [138, 139].

4.2.2 Keelamise mõju

On näidatud, et rapamütsiin takistas DN-i arengut streptozototsiini poolt indutseeritud diabeetilistel rottidel. Neerukoore MALDI-TOF/MS näitas kolme sfingolipiidide klassi, sealhulgas keramiidid, SM ja keramiidmonoheksoosid [140]. Üks keramiidi metaboliit suurenes märkimisväärselt, samas kui kolm kadusid. Ravi rapamütsiiniga muutis oluliselt sfingolipiidi koostist. Suurenenud keramiidi (d18:0/16:0), keramiidi monoheksosiidi (d18:1/15:0), SM (d16:1/18:0) sisaldus ) ja SM(d18:1/18:0) pöörati rapamütsiiniga ümber. Eelmine uuring näitas, et keramiidi tõus diabeetilises neerus ja vähenemine pärast rapamütsiinravi ning keramiidi ja apoptoosi pikaajaline seos toetab tseramiidi kui mõistlikku biomarkeri kandidaati [141]. Streptozototsiin suurendas märkimisväärselt paljude sfingolipiidide sünteesi, mida rapamütsiin inhibeeris. Teised uuringud näitasid, et keramiidi inhibeerimine tseramiidi süntaasi või seriini palmitoüültransferaasi blokeerimise kaudu vähendas tõhusalt hüpoksia-reoksügeenimise, keemilise hüpoksia ja radiokontrastainete põhjustatud rakusurma neerutorukeste epiteelirakkudes [142–144].

4.2.3 Ägeda neerupuudulikkuse mõju

Põletik mängib ägeda neerupuudulikkuse patogeneesis võtmerolli [145,146]. LC-MS lipidoomikat kasutati lühiajaliste toidust saadavate ω-3 või ω-6 polüküllastumata rasvhapete mõju uurimiseks isheemilisele neerukahjustusele ja neerulipiidide autakoidahelatele [147]. Neeruisheemia (30 min) põhjustas ω-6-lisandiga dieediga hiirtel neerufunktsiooni märkimisväärselt vähenenud ja seerumi kreatiniinisisalduse tõusu, kuid ω-3-lisandiga dieediga toitu saanud hiirtel jäi see normaalseks. Veelgi enam, neeruisheemia pikenemine (45 min) põhjustas 100-protsendilise suremuse ω-6-lisandiga hiirtel, kuid mitte surma ω-3-lisandiga rühmas. ω-3 polüküllastumata rasvhapete kaitsvat toimet isheemilise neerukahjustuse vastu seostati vähenenud polümorfonukleaarsete leukotsüütide värbamisega, kemokiinide ja tsütokiinide tootmisega, lipoksügenaasist ja tsüklooksügenaasist pärinevate eikosanoidide moodustumise peatamisega ning suurenenud protektiini D8 ekspressiooniga [148]. . Süsteemne ravi protektiin D1-ga vähendas neerude polümorfonukleaarsete leukotsüütide sissevoolu ja suurendas heemi oksügenaasi-1 valgu ja mRNA ekspressiooni vigastatud ja vigastamata patsientidelneerud. Protectin D1 näis olevat efektiivne ägedate haiguste ennetamiselneerudvigastus, samuti toiduga saadavate ω-3 ja ω-6 polüküllastumata rasvhapete mõju autakoidide moodustumisele neerudes ja isheemilise neerukahjustuse tulemusele [149].

4.2.4Rakuuuringud

ESI/MS lipidomikat kasutati fosfolipiidide muutuste tuvastamiseks inimese embrüonaalses neerus (HEK293) ja inimeseneerudkartsinoomid (Caki{{0}}) rakusurm [150]. Tsisplatiiniga töödeldud HEK293 ja kooki {{) PC(14:0/16:0) ja PC(16:0/16:0) märkimisväärselt vähenenud 12}} lahtrit. Bromofenoollaktoonravi enne tsisplatiiniga kokkupuudet vähendas PC(14:0/16:0), plasmenüülkoliini (16:0/16:1) ja plasmenüülkoliini (16:{{) veelgi 41}}/18:1) HEK293-s ja inhibeeris tsisplatiinist põhjustatud plasmenüülkoliini (16:1/22:6) suurenemist Caki-s-1. Ravi bromofenoollaktooniga enne kokkupuudet tsisplatiiniga suurendas ka mitmeid arahhidooni sisaldavaid fosfolipiide, sealhulgas PC(16:0/20:4), PC(18:1/20:4) ja PC(18). :0/20:4) võrreldes ainult tsisplatiiniga. Need tulemused näitasid, et fosfolipaasi A2 inhibeerimine kaitses kemoteraapiast põhjustatud rakusurma eest mitmes inimese neerurakuliinis ja tuvastas ka fosfolipiidid, mida rakusurma ajal spetsiifiliselt muudeti. Tulemused näitasid veel, et muutused nendes fosfolipiidides korreleerusid kaitsega rakusurma vastu fosfolipaasi A2 inhibiitorite juuresolekul. Masood ja kolleegid kasutasid HEK293 rakkudes mitmete sfingolipiidide klasside kvantifitseerimiseks normaal- ja pöördfaasi LC-MS/MS [151]. Need tulemused näitasid, et enam kui 75 protsenti keramiididest, monohekso-süültseramiididest ja SM-ist eksisteerivad kui d18:1Δ4 c16:0, d18:1Δ4 c24:1 ja d18:1-4 c24:0.

5. LÕPPMÄRKUSED JA PERSPEKTIIVID

Uudne lipidoomika on esilekerkiv metoodika, mis lubab süstemaatiliselt ja kõikehõlmavalt uurida lipiidide ja nende derivaatide kohta tervist ja haigusi. Erinevadneerudhaigusi seostatakse oluliste muutustega lipiidide ja lipoproteiinide, aga ka lipiididega seotud metaboliitide ja metaboolsete radade metabolismis ja plasmakontsentratsioonis. Need muutused mängivad olulist rolli lokaalse ja süsteemse põletiku patogeneesis, energia metabolismi halvenemises ja põletiku progresseerumises.neerudhaigus. Lipiidide profiilide koostamise ja mitme muutujaga statistika kombinatsioon on kasulik potentsiaalsete biomarkerite ja uudsete raviviiside avastamiseks, samuti ravivastuse jälgimiseks.

Hiljutised edusammud MS-põhistes tehnoloogiates ja kiired täiustused kromatograafias, eriti UPLC-MS koos bioinformaatikaga, on parandanud meie arusaamist lipiididest pärinevate metaboliitide rollist patogeneesis ja progresseerumises.neerudhaigus. Kuigi praegu saadaolevad tööriistad võimaldavad kõrge eraldusvõimega tuvastada lipiididest saadud metaboliitide struktuuri, on andmete tõhusamaks eeltöötlemiseks, andmekaeveks, statistiliseks analüüsiks, biomarkerite tuvastamiseks ja biokeemiliste radade tõlgendamiseks ilmselgelt vaja edasisi edusamme analüüsimeetodites ja andmetöötluses.

cistanche ekstrakt: parem neerufunktsioon

TUNNUSTUS

Seda uuringut toetasid programmi New Century Excellent Talents in University (NCET{0}}) ning Changjiangi teadlaste ja ülikooli uuendusliku uurimisrühma (IRT1174) poolt Hiina haridusministeeriumist, Hiina riiklikust loodusteaduste sihtasutusest (J1210063). , 81202909, 81274025, 81001622), projekt "Uue suure ravimina olulise riikliku teaduse ja tehnoloogia eriartikli loomiseks" (2014ZX09304307- 002), Hiina järeldoktorantuuri sihtasutus (2012M521831, 2014T70948, riikliku koolituse programmeerimine). (201310697004), Shaanxi provintsi rahvusvaheliste teaduse ja tehnoloogia koostööprojektide põhiprogramm (2013KW31-01), Shaanxi provintsi haridusosakonna loodusteaduste sihtasutus (2013JK0811) ja Shaanxi traditsioonilise hiina meditsiini administratsioon ({17} }ZY006).

*Lääne-Hiina ressursibioloogia ja biotehnoloogia võtmelabor, haridusministeerium, loodusteaduste kolledž, Loodeülikool, Xi'an, Shaanxi, PR Hiina

†Nefroloogia ja hüpertensiooni osakond, meditsiinikool, California ülikool, Irvine, California, USA

{Hiina Materia Medica kool, Pekingi Hiina Meditsiini Ülikool, Peking, PR Hiina

VIITED

[1]A. Levin, NR Powe, J. Rosset jt, Krooniline neeruhaigus kui ülemaailmne rahvatervise probleem: lähenemisviisid ja algatused – seisukohavõtt Kidney Disease Improving Global Outcomes, Kidney Int. 72 (2007) 247–259.

[2]K. Makris, N. Kafkas, Neutrophil želatinaasiga seotud lipokaliin ägeda neerukahjustuse korral, Adv. Clin. Chem. 58 (2012) 141–191.

[3] XB Ling, ED Mellins, KG Sylvester, HJ Cohen, uriini peptidoomika kliiniliste biomarkerite avastamiseks, Adv. Clin. Chem. 51 (2010) 181–213.

[4]TK Sigdel, RB Klassen, MM Sarwal, Proteoomi ja peptidoomi tõlgendamine siirdamisel, Adv. Clin. Chem. 47 (2009) 139–169.

[5]ND Vaziri, Kroonilise neerupuudulikkuse düslipideemia: olemus, mehhanismid ja võimalikud tagajärjed, Am. J. Physiol. Neerufüsiool. 290 (2006) 262–272.

[6] ND Vaziri, J. Yuan, Z. Ni, SB Nicholas, KC Norris, Lipoproteiini lipaasi puudulikkusega kroonilise neeruhaiguse korral kaasneb endoteeli GPIHBP1 ekspressiooni vähenemine, Clin. Exp. Nephrol. 16 (2012) 238–243.

[7]ND Vaziri, Nefrootilise sündroomi lipiidide häirete molekulaarsed mehhanismid, Kidney Int. 63 (2003) 1964–1976.

[8]ND Vaziri, Lipotoksilisus ja HDL-vahendatud kolesterooli/lipiidide pöördtransport kroonilise neeruhaiguse korral, J. Ren. Nutr. 20 (2010) S35–S43.

[9]ND Vaziri, K. Norris, Lipiidide häired ja nende olulisus kroonilise neeruhaiguse tagajärgedele, Blood Purif. 31 (2011) 189–196.

[10]ND Vaziri, Düslipideemia roll energia metabolismi, oksüdatiivse stressi, põletiku ja südame-veresoonkonna haiguste kahjustamisel kroonilise neeruhaiguse korral, Clin. Exp. Nephrol. 18 (2014) 265–268.

[11]C. Waldner, G. Heise, K. Schroer, P. Heering, COX-2 inhibeerimine ja prostaglandiini retseptorid eksperimentaalses nefriidis, Eur. J. Clin. Investeeri. 33 (2003) 969–975.

[12]A. Hartner, A. Pahl, K. Brune, M. Goppelt-Strube, Tsüklooksügenaasi-1 ja PGE2 retseptori EP2 ülesreguleerimine roti ja inimese mesangiaalses proliferatiivses glomerulonefriidis, Inflamm. Res. 49 (2000) 345–354.

[13]S. Tomasoni, M. Noris, S. Zappella jt, Upregulation of renal and systemic cyclooxygenase-2 in patients with active lupus nephritis, J. Am. Soc. Nephrol. 9 (1998) 1202–1212.

[14]C. Zoja, A. Benigni, M. Noris jt, Mükofenolaatmofetiil kombineerituna tsüklooksügenaasi-2 inhibiitoriga leevendab hiire luupuse nefriiti, Kidney Int. 60 (2001) 653–663.

[15]T. Takano, AV Cybulsky, WA Cupples jt, Tsüklooksügenaaside inhibeerimine vähendab komplemendi indutseeritud glomerulaarepiteelirakkude kahjustust ja proteinuuriat passiivse Heymanni nefriidi korral, J. Pharmacol. Exp. Seal. 305 (2003) 240–249.

[16]G. Heise, B. Grabensee, K. Schro€r, P. Heering, Tsüklooksügenaas 2 selektiivse inhibiitori flosuliidi erinevad toimed passiivse Heymanni nefriidiga rottidel, Nephron 80 (1998) 220–226.

[17]ZG Xu, SL Li, L. Lanting jt, 12/15-lipoksügenaasi ja COX-2 vaheline seos mesangiaalrakkudes: potentsiaalne roll diabeetilises nefropaatias, Kidney Int. 69 (2006) 512–519.

[18]A. Dey, RS Williams, DM Pollock jt, Muutunud neeru CYP2C ja tsüklooksügenaasi-2 tase on seotud rasvumisega seotud albuminuuriaga, Obes. Res. 12 (2004) 1278–1289.

[19]X. Zhao, JE Quigley, J. Yuan jt, PPAR-alfa aktivaator fenofibraat suurendab neerude CYP-st pärinevat eikosanoidi sünteesi ja parandab endoteeli laiendava funktsiooni rasvunud Zucker rottidel, Am. J. Physiol. 290 (2006) H2187–H2195.

[20]Y. Zhou, S. Lin, HH Chang jt, Soolised erinevused neeru CYP-st saadud eikosanoidide sünteesis rottidel, keda toidetakse kõrge rasvasisaldusega dieediga, Am. J. Hüpertensioon. 18 (2005) 530–537.