Yarrowia Lipolytica lipaasi tootmine tahkis-kääritamisel, kasutades substraadina Amazoni puuviljade kõrvalsaadusi ja sojajahu 2. osa
Jun 30, 2023
2.5. Kalaõli hüdrolüüs
Lipaase on kasutatud rasvhapete hüdrolüüsil polüküllastumata rasvhapete (PUFA) kontsentreerimiseks [44,45]. Lipaaside kasutamise peamiseks eeliseks polüküllastumata rasvhapete tootmisel on ensüümi spetsiifilisus ja mõõdukates temperatuuritingimustes toimuvad reaktsioonid, mis soodustab PUFA-de struktuuri säilimist [44]. Lipaaside kasutamine eelistatakse keemilistele meetoditele, kuna need annavad madala saagise ja puhtusega glütseriide [46]. Lipaaside roll küllastunud rasvhapete (SFA) ja monoküllastumata rasvhapete (MUFA) selektiivsel hüdrolüüsil triatsüülglütseroolidest (TAG-idest) on toota PUFA-derikkaid glütseriide. Selle meetodi põhimõte on steeriline takistus, mis on põhjustatud rasvhappeahelate voltimist põhjustavate PUFA-de süsinik-cis kaksiksidemete molekulaarsest konfiguratsioonist. Seega ei pääse ensümaatilised aktiivsed saidid juurde nende rasvhapete estersidemetele nende glütserooli skeletiga [47,48]. Lisaks põletikuvastasele potentsiaalile ja potentsiaalsele hüpertensioonile on rasvhapete lisamisega dieeti palju kasu, nagu lapse areng, südame-veresoonkonna haiguste, vähi ja erinevate vaimsete häirete (depressioon, tähelepanupuudulikkuse häire, hüperaktiivsus) ennetamine. kontroll [49].
Tistanche glükosiid võib samuti suurendada SOD aktiivsust südame- ja maksakudedes ning oluliselt vähendada lipofustsiini ja MDA sisaldust igas koes, eemaldades tõhusalt erinevaid reaktiivseid hapnikuradikaale (OH-, H2O₂ jne) ja kaitstes tekitatud DNA kahjustuste eest. OH-radikaalide poolt. Tsistanche fenüületanoidglükosiididel on tugev vabade radikaalide eemaldamisvõime, suurem redutseerimisvõime kui C-vitamiinil, nad parandavad SOD aktiivsust sperma suspensioonis, vähendavad MDA sisaldust ja omavad teatud kaitset sperma membraani funktsioonile. Tsistanche polüsahhariidid võivad suurendada SOD ja GSH-Px aktiivsust D-galaktoosi poolt põhjustatud eksperimentaalselt vananevate hiirte erütrotsüütides ja kopsukudedes, samuti vähendada MDA ja kollageeni sisaldust kopsudes ja plasmas ning suurendada elastiini sisaldust. hea puhastav toime DPPH-le, pikendab hüpoksia aega vananevatel hiirtel, parandab SOD aktiivsust seerumis ja aeglustab eksperimentaalselt vananevatel hiirtel kopsude füsioloogilist degeneratsiooni Raku morfoloogilise degeneratsiooniga on katsed näidanud, et Cistanche'il on hea antioksüdantne võime ja sellel on potentsiaal olla ravim naha vananemishaiguste ennetamiseks ja raviks. Samal ajal on Cistanche ehhinakosiidil märkimisväärne võime eemaldada DPPH vabu radikaale ja see suudab eemaldada reaktiivseid hapniku liike ja takistada vabade radikaalide poolt indutseeritud kollageeni lagunemist, samuti on sellel hea parandav toime tümiini vabade radikaalide anioonide kahjustustele.
【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
Ensüümiekstraktide tootmine sellistes protsessides nagu hüdrolüüs võib olla kulukas ülesanne. Seega võib tootmiskulusid vähendavate toorainete uurimine pakkuda huvitavat alternatiivi. Tahke biokatalüsaatori kasutamine on soovitav, kuna seda tahket biokatalüsaatorit saab taaskasutada ensümaatilistes reaktsioonides, lisaks on sellel suurepärane säilivusstabiilsus toatemperatuuril, ilma külmutuskuludeta ja lihtne transport [41]. Ei ole teatatud Yarrowia lipolytica tahke biokatalüsaatori kasutamisest PUFAS-i tootmiseks kalaõli ensümaatilise hüdrolüüsi teel. Seega uuriti andirobaõli koogi ja sojajahu (50:50) abil toodetud ensümaatilise toorekstrakti ja tahke biokatalüsaatori kasutamist, et hinnata ensüümide võimalikku kasutamist kalaõli hüdrolüüsil polüküllastumata rasvhapete edasiseks tootmiseks sobivas protsessis. (Joonis 6). Tahket biokatalüsaatorit (63, 70,8, 72,5 ja 74,7 protsenti) kasutades on võimalik jälgida hüdrolüüsi (DH) kõrget taset lühemate reaktsiooniaegadega kui ensümaatilise ekstraktiga (47,5, 61,5, 66,5 ja 74,8 protsenti) pärast 24. vastavalt 48, 72 ja 144 tundi.
Kontsentreeritud polüküllastumata rasvhapete saamiseks rakendatakse pidevalt ensümaatilise hüdrolüüsi protsessi. Gao et al. [50] kasutas lipaasi tursaõli hüdrolüüsil ning EPA ja DHA sisaldus paranes vastavalt 324- ja 1 98- korda. Aarthi et al. [20] kasutas kontsentreeritud lipaasi (1000 U/mL) kalaõlide hüdrolüüsil ja leidis ka hüdrolüüsikiiruse üle 60 protsendi 72 tunni pärast. Selles töös saavutati sama hüdrolüüsiaja võrdlemisel paremad hüdrolüüsi kraadid, kasutades toores lipaasi ensümaatilist ekstrakti (st ilma puhastamiseta). Teised autorid on uurinud Musteleus mustelus'e maksaõli ja hülgelihaõli hüdrolüüsi, teatades vastavalt 75% ja 70% hüdrolüüsist pärast 24- ja 9-tunnist reaktsiooni [25,26].
Martins et al. [51] kasutas kalaõli hüdrolüüsiks Burkholderia cepacia (Amano) kaubanduslikku lipaasi ja pärast 48-tunnist reaktsiooni saadi 55,6 protsenti DHA-st võrreldes maksimaalse arvutatud sisaldusega. Oma töös, eeluuringus, saime 70,8 protsenti hüdrolüüsist pärast 48-tunnist reaktsiooni, kasutades tahket biokatalüsaatorit.
Siiani on sellised leiud viitanud kõrvalsaaduste kasutamise elujõulisusele lipaasi tootmiseks tahkes olekus kääritamisel, et leevendada keskkonnakahjustusi, hinnata kõrvalsaadusi ja kulutasuvust. Lisaks näitavad tulemused lipaasi ensüümi potentsiaalset kasutamist kalaõli hüdrolüüsil polüküllastumata rasvhapete edasiseks tootmiseks sobivas protsessis.
Vaatamata odavate agrotööstuslike kõrvalsaaduste arvukusele on koostise määramine ja standardimine, lisaks ensümaatilise ekstrakti ja tahke biokatalüsaatori odavatest agrotööstuslikest kõrvalsaadustest saamise kulude hindamine endiselt väljakutse, kuid sõltuvad suuresti kõrvalsaaduse tüübist, hooajalisusest ja toodetud kogusest, samuti kasutatavast protsessist ja muude tegurite hulgast geograafilisest asukohast. Seega tuleb üle saada muu hulgas sellistest probleemidest nagu ahela keerukus ja selle logistilised kulud, keeruliste ja kulukate protsesside kasutamine, suur energiatarbimine ning regulatiivsed probleemid. Selles mõttes peab kõrvalsaaduste töötlemine ületama mitmeid tõkkeid, enne kui see muutub majanduslikult elujõuliseks, sealhulgas vajadus töödelda suuri koguseid toorainet, võime töödelda heterogeenseid tooraineid, integreeritud logistika erinevate töötlevate tööstusharudega ja integratsiooni võimalus. protsess töötlemisüksuses, et võimaldada muu hulgas kõrge väärtusega koostisosade genereerimist [52–55].
3. Materjalid ja meetodid
3.1. Materjal
Sojajahu osteti ettevõttest Caramuru Alimentos (Goiás, Brasiilia). Õli ekstraheerimisel toodetud andirobaõlikoogi tarnis Beraca Ingredientes Naturais (Pará, Brasiilia). Mõlemad substraadid olid granulomeetria osas standarditud (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).
3.2. Mikroorganismide ja inokulaadi kasvatamise tingimused
Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682, mis eraldati Brasiilias Rio de Janeiros Guanabara lahe suudmest [56], kultiveeriti 28 ◦C juures YPD-agarisöötmes (mass/maht: pärmiekstrakt 1%, peptoon 2%, glükoos 2%). agar, 3 protsenti). Rakke kasvatati vedelas söötmes, mis sisaldas 1% (mass/maht) pärmiekstrakti, 2% (mass/maht) peptooni ja 2% glükoosi (mass/maht) 72 tundi, 160 pööret minutis temperatuuril 28 °C.
3.3. Agrotööstuslike kõrvalsaaduste iseloomustus
Sojajahu ja andirobaõlikoogi füüsikalis-keemiline koostis määrati niiskuse, valgu, süsivesikute, tuha, eetri ekstrakti, lahustumatute kiudude ja lahustuvate kiudainete sisalduse järgi vastavalt ametlike analüütiliste keemikute ühenduse (AOAC) esitatud metoodikale. ) [57]. Lisaks, kuna Y. lipolytica lipaasi tootmist mõjutab aeratsioon [58], hinnati kihi poorsust SSF-is võrrandi (1) kohaselt, kus ε on poorsus (väljendatuna m3 õhu·m−3 kihis); ρdrysolid on kuiva proovi näivtihedus (kg·m−3 ); ja ρmärja tahke aine on proovi tihedus pärast vee lisamist (kg·m−3 ) [58].
3.4. Lipaasi tootmine SSF-i poolt
Sojajahu ja andirobaõli kooki sisaldav tahke maatriks valmistati enne inokuleerimist kandiktüüpi reaktoris substraadi erinevate proportsioonidega ja autoklaaviti 121 ◦C juures 20 min. Lipaasi tootmiseks kasutatud protsessi fikseeritud parameetrid olid niiskus 55 protsenti ja inokulaadi kontsentratsioon 0,71 mg kuiva biomassi grammi substraadi kohta [24]. Reaktoreid inkubeeriti biokeemilise hapnikuvajaduse (BOD) kambris temperatuuril 28 ◦C ja kogu fermentatsiooni ajal võeti analüüsimiseks ohverdatud proove (st üks kandik-tüüpi reaktor proovivõtu ajaks).
SSF-i hinnati andirobaõli koogi ja sojajahu erinevate kombinatsioonide abil ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 ja 100:0) erinevatel aegadel (0, 12, 24, 32 ja 48 h). Seejärel hinnati andirobaõli kooki ja sojajahu (50:50) sisaldava tahke maatriksi lisamist 1,5 (massiprotsenti) sojaõli lisamisega aja jooksul (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, ja 72 h), et saavutada lipolüütilise aktiivsuse suurenemine. Lisaks testiti Tween 80 (0,001 massiprotsenti) olemasolu fermentatsioonisöötmes, mis sisaldas 1,5 (massiprotsenti) sojaõli. Fermentatsiooni jälgiti lipaasi ja proteaasi aktiivsuse, samuti niiskuse ja pH määramise teel (kirjeldatud alajaotises "3.6. Analüütilised määramised").
3.5. Ensüümide ekstraheerimine ja tahke biokatalüsaatori tootmine
Ensüümi ekstraheerimiseks lisati bioreaktoritesse 50 ml 50 mM kaaliumfosfaatpuhvrit pH 7,0, millele järgnes inkubeerimine 20 minutit temperatuuril 37 °C, 200 p/min. Seejärel pressiti puhvris suspendeeritud kääritatud materjal, kasutades pilguga purustajat, ja tsentrifuugiti kiirusel 3000 pööret minutis 5 minutit. Tahke biokatalüsaator saadi kogu kääritamisprotsessi lõpus saadud massi külmkuivatamisel 72 tundi ja seda hoiti ensümaatilise stabiilsuse kontrollimiseks 7 kuud toatemperatuuril.
3.6. Analüütilised määramised
3.6.1. Lipaasi aktiivsus
Lipaasi aktiivsus viidi läbi Freire et al. välja pakutud meetodil. [59]. Reaktsioonisegu emulgeeriti Ultra Turrax (IKA) homogenisaatoris, kasutades 5% (mass/maht) oliiviõli ja 5% (mass/maht) kummiaraabikut 100 mM fosfaatpuhvris (pH). 7.{16}}). Ensümaatiline ekstrakt (1 ml) või 0,5 g tahket biokatalüsaatorit lisati 19 ml reaktsioonisegule ja inkubeeriti 20 minutit 200 pööret minutis 37 °C juures. Reaktsioon katkestati 20 ml atsetooni-etanooli lahuse lisamisega ja vabad rasvhapped tiitriti automaatses tiitrimisseadmes (Metrohm 916-Ti-Touch), kasutades 0,04 mol/L NaOH lahust. Üks lipaasi aktiivsuse ühik (U) määratleti kui ensüümi kogus, mis testitingimustes toodab 1 µmol rasvhapet minutis.
3.6.2. Proteaasi aktiivsus
Proteaasi aktiivsus kvantifitseeriti Charney ja Tomarelli metoodika kohaselt [60]. Ensümaatiline ekstrakt (0,5 ml) lisati 0,5 ml 0,5% (mass/maht) asokeiini lahuses, mis oli valmistatud 50 mM atsetaatpuhvriga (pH) ja inkubeeriti. temperatuuril 32 ◦C 40 minutit. Reaktsioon peatati 0,5 ml 15-protsendilise (mass/maht) trikloroäädikhappe lahuse lisamisega ja proove tsentrifuugiti kiirusel 3000 p/min 15 minutit. Supernatant (100 µL) lisati 96-mikrotiiterplaadile, mis sisaldas 100 µL 5 M kaaliumhüdroksiidi, ja neeldumine 428 nm juures mõõdeti mikrotiiterplaadi lugejas (SpectraMax, Molecular Devices). Üks aktiivsusühik määratleti kui ensüümi kogus, mis on võimeline soodustama neeldumise ühtset suurenemist minutis.
3.6.3. Niiskusesisaldus ja pH
Niiskusesisaldust jälgiti niiskusanalüsaatori tasakaalu (AND MX-50) abil. PH-d mõõdeti pH-meetriga (TECNAL, mudel TR-107 PT100, Brasiilia).
3.7. SDS-LEHT
Elektroforees viidi läbi vastavalt Laemmli [61] kirjeldatud meetodile polüakrüülamiidgeelis (5% virnastamine, 15% eraldamine, 0,75 mm paksus). Andirobaõlikoogi ja sojaoa (50:50) kombinatsioonist saadud proovid segati vahekorras (1:4) merkaptoetanooli sisaldava proovipuhvriga, kuumutati 95 ◦C juures 5 minutit ja kanti geelile. Elektroforees viidi läbi 150 V juures 30 minutit (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) ja geel paljastati Coomassie Blue R-250 abil. Kasutati standardset valgumarkerit (Bio-rad, Hercules, CA, USA), mille molekulmass oli vahemikus 10 kuni 250 kDa.
3.8. Kalaõli hüdrolüüs: potentsiaalne rakendus
Kalaõli hüdrolüüsiastet (DH) mõõdeti, kaaludes 1 g kalaõli ja lisades 25 ml fosfaatpuhvrit pH 7.0, et kontrollida ensüümi võimalikku kasutamist kalaõli hüdrolüüsil. Seejärel loksutati 5 ml ensümaatilist ekstrakti (37 U) merevaigukollastes kolbides 168 tundi. Reaktsioon peatati 20 ml atsetooniga ja vabad rasvhapped tiitriti automaatses tiitrimisseadmes 0,1 M metanoolse KOH-ga. Reaktsiooni pimekatse saadi ensüümi lisamisega alles reaktsiooni lõpus.
Hüdrolüüsiaste (DH) arvutati valemi (2) kohaselt:
kus As on proovi happesus; Aa on autohüdrolüüsi happesus; Si on seebistumisindeks.
3.9. Statistiline analüüs
Kõiki katseid korrati kolm korda. Igas replikatsioonis viidi analüüsid läbi kolmes eksemplaris. Tulemused vastasid keskmisele ± standardhälbele. Andmeid analüüsiti ühesuunalise dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil, samas kui keskmiste erinevuste testimiseks kasutati Tukey testi (p < 0,05), kasutades Sisvar 5.6.
4. Järeldused
Andirobaõlikoogi ja sojajahu segamisel saadud fermentatsioonikeskkond oli lipaasi tootmisel väga tõhus. Valitud fermentatsioonimaatriksiks oli andirobaõlikoogi ja sojajahu segu vahekorras 50:50, mis annab 63,70 U·g −1 lipolüütilist aktiivsust. Maksimaalne lipolüütiline aktiivsus (82,52 U·g-1) saadi pärast andirobaõli koogi ja sojajahu vahekorras 50:50 kasutamist pärast Tween 80 (0,001 protsenti) ja sojaõli (1,5 protsenti) lisamist. Elektroforeetilises analüüsis tuvastati valkude ribad, mida kirjanduses on juba kirjeldatud kui YL Lip2 (37 ja 40 kDa). Eelmine lipaasi kasutamine õli hüdrolüüsil andis 24 tunni pärast kuni 63 protsenti hüdrolüüsist. See uuring näitas, et on võimalik toota lipaasi kasutades Amazonase piirkonnast pärit kõrvalsaadusi koos sojajahuga ja rakendada seda kalaõli hüdrolüüsil, et polüküllastumata rasvhappeid sobivas protsessis edasi toota.
Autori kaastööd:Kontseptualiseerimine, BDR, ACL ja MAZC; Metodoloogia, ASSC, JCSS, FVdN, CECdS, BDR, ACL ja MAZC; Formaalne analüüs, ASSC, JCSS ja FVdN; Uurimine, ASSC, JCSS ja FVdN; Ressursid, ASSC, JCSS ja FVdN; Andmete kureerimine, ASSC, JCSS ja FVdN; Kirjutamine – esialgse mustandi ettevalmistamine, ASSC, JCSS, FVdN ja CECdS; Kirjutamine – ülevaatamine ja redigeerimine, BDR, CECdS, ACL ja MAZC; Järelevalve, BDR, CECdSACL ja MAZC; Projektihaldus, BDR, ACL ja MAZC; Rahastamise omandamine, BDR, ACL ja MAZC Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooni läbi lugenud ja sellega nõustunud.
Tänuavaldused: autorid tunnustavad Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior – Brasiilia (CAPES – Finantskood 001); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq); ja Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).
Viited
1. Serra, JL; Rodrigues, AMdC; Freitas, RA; Meirelles, AJdA; Darnet, SH; Silva, LHMd Alternatiivsed õlide ja rasvade allikad Amazonase taimedest: rasvhapped, metüültööriistad, üldkarotenoidid ja keemiline koostis. Food Res. Int. 2019, 116, 12–19. [CrossRef] [PubMed]
2. Penido, C.; Conte, FP; Chagas, MS; Rodrigues, CA; Pereira, JF; Henriques, MG Carapa guianensis Aublet'ist eraldatud looduslike tetranortriterpenoidide põletikuvastane toime sümosaanist põhjustatud artriidile hiirtel. Põletik. Res. 2006, 55, 457–464. [CrossRef] [PubMed]
3. Penido, C.; Costa, KA; Pennaforte, RJ; Costa, MF; Pereira, JF; Siani, AC; Henriques, MG Carapa guianensis Aublet'st eraldatud looduslike tetranortriterpenoidide allergiavastane toime allergeenist põhjustatud veresoonte läbilaskvusele ja hüperalgeesiale. Põletik. Res. 2005, 54, 295–303. [CrossRef]
4. Santos, KIP; Benjamim, JKF; Costa, KAD; Reis, AS; Souza Pinheiro, WB; Santos, AS Carapa guianensis Aubl agrotööstusliku kõrvalsaaduse fenoolhapete uurimisel rakendatud metaboloomika tehnikad. araablane. J. Chem. 2021, 14, 103421. [CrossRef]
5. Lourenço, JNP; Ferreira, LMM; Martins, GC; Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AM: Brasília, Brasiilia, 2017; lk 36).
6. Organic, S. Óleo de Andiroba.
7. Conab. Boletim da Sociobiodiversidade; Conab: Brasília, Brasiilia, 2017; 1. köide, lk. 67.
8. Souza, CR; Lima, RMB; Azevedo, CP; Rossi, LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: Brasilia, Brasiilia, 2006; 21p.
9. Oliveira, F.; Souza, CE; Peclat, VROL; Salgado, JM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ; Venâncio, A.; Belo, I. Aspergillus ibericuse lipaasi tootmise optimeerimine õlikookidest ja selle rakendamine esterdamisreaktsioonides. Food Bioprod. Protsess. 2017, 102, 268–277. [CrossRef]
10. Pandey, A. Tahkis-käärimine. Biochem. Eng. J. 2003, 13, 81–84. [CrossRef]
11. Martínez, O.; Sánchez, A.; Font, X.; Barrena, R. Lisandväärtusega aroomiühendite bioproduktsiooni suurendamine suhkruroo bagassi ja suhkrupeedimelassi tahkes olekus kääritamise teel: tegevusstrateegiad ja protsessi suurendamine. Bioresour. Technol. 2018, 263, 136–144. [CrossRef] [PubMed]
12. Ano, T.; Jin, GY; Mizumoto, S.; Rahman, MS; Okuno, K.; Shoda, M. Lipopeptiidantibiootikumi ituriini A tahkis kääritamine uudse tahkefaasilise fermentatsioonireaktori süsteemi abil. J. Environ. Sci. 2009, 21 (S1 lisa), S162–S165. [CrossRef]
13. Vandenberghe, LPS; Karp, SG; Oliveira, PZ; Carvalho, JC; Rodrigues, C.; Soccol, CR Peatükk 18 – Tahkes olekus kääritamine orgaaniliste hapete tootmiseks. Biotehnoloogia ja biotehnoloogia praegused arengud; Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, toim.; Elsevier: Amsterdam, Holland, 2018; lk 415–434.
14. Sala, A.; Vittone, S.; Barrena, R.; Sánchez, A.; Artola, A. Agrotööstusjäätmete skaneerimine substraatidena seente biopestitsiidide tootmiseks: Beauveria bassiana ja Trichoderma harzianum kasutamine tahkis-kääritamisel. J. Environ. Manag. 2021, 295, 113113. [CrossRef] [PubMed]
15. Banat, IM; Carboué, Q.; Saucedo-Castañeda, G.; de Jesús Cázares-Marinero, J. Biosurfaktants: erikemikaalide roheline genereerimine ja potentsiaalne tootmine, kasutades tahkefaasilise kääritamise (SSF) tehnoloogiat. Bioresour. Technol. 2021, 320, 124222. [CrossRef] [PubMed]
16. Pereira, AS; Sant'Ana, GCF; Amaral, PFF Mango agrotööstuslikud jäätmed Yarrowia lipolytica lipaasi tootmiseks ja kääritatud tahke aine potentsiaal biokatalüsaatorina. Food Bioprod. Protsess. 2019, 115, 68–77. [CrossRef]
17. Brígida, AIS; Amaral, PFF; Coelho, MAZ; Gonçalves, Yarrowia lipolytica LRB lipaas: tootmine, iseloomustamine ja kasutamine tööstusliku biokatalüsaatorina. J. Mol. Katal. B Ensüüm. 2014, 101, 148–158. [CrossRef]
18. Treichel, H.; Oliveira, D.; Mazutti, MA; Di Luccio, M.; Oliveira, JV Ülevaade mikroobsete lipaaside tootmisest. Food Bioprocess Technol. 2010, 3, 182–196. [CrossRef]
19. Mehta, A.; Guleria, S.; Sharma, R.; Gupta, R. 6 – Lipaasid ja nende rakendused, rõhuasetusega toiduainetööstusel. Mikroobide biotehnoloogia toidus ja tervises; Ray, RC, toim.; Academic Press: Cambridge, MA, USA, 2021; lk 143–164.
20. Aarthy, M.; Saravanan, P.; Ayyadurai, N.; Gowthaman, MK; Kamini, NR Kaheetapiline protsess oomega 3-polüküllastumata rasvhapete kontsentraatide tootmiseks sardiiniõlist, kasutades Cryptococcus sp. MTCC 5455 lipaas. J. Mol. Katal. B Ensüüm. 2016, 125, 25–33. [CrossRef]
21. Nascimento, FV; Castro, AM; Secchi, AR; Coelho, MAZ Ülevaade söötme lisamisest sojakestade tahkiskääritamisel Yarrowia lipolytica poolt: mõju lipaasi tootmisele salves ja isoleeritud pakitud kihiga bioreaktorites. Biochem. Eng. J. 2021, 166, 107866. [CrossRef]
22. Müük, JCS; Castro, AM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Arbuusikoorte täiendamine Yarrowia lipolytica lipaasi ja esteraasi tootmise võimendajana tahkes olekus kääritamisel ja nende potentsiaalne kasutamine biokatalüsaatorina polü(etüleentereftalaadi) (PET) depolümerisatsioonireaktsioonides. Biocatal. Biotransform. 2020, 38, 457–468. [CrossRef]
23. Aguieiras, EKG; de Barros, DSN; Fernandez-Lafuente, R.; Freire, DMG Lipaaside tootmine puuvillaseemnejahus ja fermenteeritud tahke aine kasutamine biokatalüsaatorina esterdamise ja ümberesterdamise reaktsioonides. Uuenda. Energia 2019, 130, 574–581. [CrossRef]
24. Souza, CEC; Farias, MA; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ lisab rapsi- ja sojaõli ekstraheerimisest saadud agrotööstuslikele kaastoodetele väärtust lipaasi tootmise kaudu, kasutades tahkefaasilises fermentatsioonis Yarrowia lipolyticat. Jäätmete biomassi väärtustamine 2017, 8, 1163–1176. [CrossRef]
25. Tema, H.; Li, Y.; Zhang, L.; Ding, Z.; Shi, G. Bacilluse lämmastikuregulatsiooni mõistmine ja rakendamine: sünteetilise bioloogia perspektiiv. J. Adv. Res. 2022; ajakirjanduses. [CrossRef]
26. Almeida, AF; Taulk-Tornisielo, SM; Carmona, EC Süsiniku- ja lämmastikuallikate mõju lipaasi tootmisele äsja isoleeritud Candida Viswanathani tüve poolt. Ann. Microbiol. 2013, 63, 1225–1234. [CrossRef]
27. Salihu, A.; Alam, MZ; AbdulKarim, MI; Salleh, HM Lipaasi tootmine: ülevaade taastuvate põllumajandusjääkide kasutamisest. Ressurss. Konserveerida. Taaskasutusse. 2012, 58, 36–44. [CrossRef]
28. Liu, X.; Yu, X.; Tema, A.; Xia, J.; Tema, J.; Deng, Y.; Xu, N.; Qiu, Z.; Wang, X.; Zhao, P. Ühepoti kääritamine erütritooli tootmiseks destilleerijate teradest Yarrowia lipolytica ja Trichoderma reesei kooskasvatamise teel. Bioresour. Technol. 2022, 351, 127053. [CrossRef] [PubMed]
29. Wang, W.; Wei, H.; Alahuhta, M.; Chen, X.; Hyman, D.; Johnson, DK; Zhang, M.; Himmel, ME Ksülanaasi ensüümide heteroloogiline ekspressioon lipogeenses pärmis Yarrowia lipolytica. PLoS ONE 2014, 9, e111443. [CrossRef] [PubMed]
30. Nascimento, FVd; Lemes, AC; Castro, AMd; Secchi, AR; Zarur Coelho, MA Yarrowia lipolytica lipaasi tootmise ajaline evolutsioon tahkefaasilises fermentatsioonis. Protsessid 2022, 10, 381. [CrossRef]
31. Mandari, V.; Nema, A.; Devarai, SK Lipaasi järjestikune optimeerimine ja suuremahuline tootmine, kasutades Aspergillus niger MTCC 872 tri-substraadi segu tahkis-kääritamise teel. Protsess Biochem. 2020, 89, 46–54. [CrossRef]
32. Mala, JG; Edwinoliver, NG; Kamini, NR; Puvanakrishnan, R. Segasubstraadi tahkes olekus kääritamine lipaasi tootmiseks ja ekstraheerimiseks Aspergillus niger MTCC 2594-st. J. Gen. Appl. Microbiol. 2007, 53, 247–253. [CrossRef]
33. Barth, G.; Gaillardin, C. Yarrowia lipolytica. Mittekonventsionaalsetes pärmides biotehnoloogias; Wolf, K., toim.; Springer: New York, NY, USA, 1996; lk 313–388.
34. Moftah, OA; Grbavˇci´c, S.; Zuža, M.; Lukovi´c, N.; Bezbradica, D.; Kneževi´c-Jugovi´c, Z. Õlikoogile kui õlitöötlemistööstuse jäätmetele lisaväärtuse andmine: Candida lipaasi ja proteaasi tootmine tahkes olekus kääritamisel. Rakendus Biochem. Biotehnoloogia. 2012, 166, 348–364. [CrossRef]
35. Contesini, FJ; da Silva, VC; Maciel, RF; de Lima, RJ; Barros, FF; de Oliveira Carvalho, P. Vastuse pinnaanalüüs Aspergillus nigeri enantioselektiivse lipaasi tootmiseks tahkefaasilise fermentatsiooni teel. J. Microbiol. 2009, 47, 563–571. [CrossRef]
36. Rigo, E.; Ninow, JL; Di Luccio, M.; Oliveira, JV; Polloni, AE; Remonatto, D.; Arbter, F.; Vardanega, R.; Oliveira, D.; Treichel, H. Lipaasi tootmine sojajahu tahke kääritamise teel erinevate lisanditega. LWT Food Sci. Technol. 2010, 43, 1132–1137. [CrossRef]
37. Päike, SY; Xu, Y. Tahkefaasiline fermentatsioon Rhizopus chinensis'e sünteetilise koguraku lipaasi tootmiseks ja funktsionaalse ensüümi tuvastamine. Protsess Biochem. 2008, 43, 219–224. [CrossRef]
38. Farias, MA; Valoni, EA; Castro, AM; Coelho, MAZ Lipaasi tootmine Yarrowia Lipolytica poolt tahkes olekus kääritamisel, kasutades erinevaid agrotööstuslikke jääke. Chem. Eng. Trans. 2014, 38, 301–306.
39. Sidhu, P.; Sharma, R.; Soni, SK; Gupta, JK Rakuvälise aluselise lipaasi tootmine uue termofiilse Bacillus sp. Folia Microbiol. 1998, 43, 51–54. [CrossRef]
40. Corzo, G.; Revah, S. Yarrowia lipolytica 681 lipaasi tootmine ja omadused. Bioresour. Technol. 1999, 70, 173–180. [CrossRef]
41. Souza, CEC; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Tahkefaasilise fermentatsiooni teel saadud Yarrowia lipolytica lipaasi iseloomustus ja rakendamine toiduainetööstuses kasutatavate erinevate estrite sünteesil. Rakendus Biochem. Biotehnoloogia. 2019, 189, 933–959. [CrossRef]
42. Fickers, P.; Fudalej, F.; Dall, MTL; Casaregola, S.; Gaillardin, C.; Thonart, P.; Nicaud, JM Pärmis Yarrowia lipolytica kahte ekstratsellulaarset triatsüülglütseroollipaasi kodeerivate LIP7 ja LIP8 geenide identifitseerimine ja iseloomustamine. Seente geenid. Biol. 2005, 42, 264–274. [CrossRef]
43. Cheng, Y.-H.; Hsiao, FS-H.; Wen, C.-M.; Wu, C.-Y.; Dbus, A.; Yu, Y.-H. Sojajahu segakääritamine proteaasi ja probiootikumidega ning selle mõju broilerite kasvuvõimele ja immuunvastusele. J. Appl. Anim. Res. 2019, 47, 339–348. [CrossRef]
44. Chakraborty, K.; Paul Raj, R. N-3 polüküllastumata rasvhapete selektiivne rikastamine C18-C20 atsüülahela pikkusega sardiiniõlist, kasutades Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 lipaasi. Food Chem. 2009, 114, 142–150. [CrossRef]
45. Zarai, Z.; Eddehech, A.; Rigano, F.; Oteri, M.; Micalizzi, G.; Dugo, P.; Mondello, L.; Cacciola, F. Polüküllastumata rasvhapete rikaste monoatsüülglütseroolide ja diatsüülglütseroolide iseloomustus, mis on toodetud Musteleus mustelus maksaõli hüdrolüüsil, mida katalüüsib immobiliseeritud bakteriaalne lipaas. J. Chromatogr. 2020, 1613, 460692. [CrossRef]
46. Yang, J.; Laul, X.; Wang, L.; Cui, Q. Schizochytrium sp. metaboolsete muutuste põhjalik analüüs. erineva DHA sisaldusega tüved. J. Chromatogr. B 2020, 1160, 122193. [CrossRef]
47. Yang, Z.; Jin, W.; Cheng, X.; Dong, Z.; Chang, M.; Wang, X. N-3 polüküllastumata rasvhapete glütseriidide ensümaatiline rikastamine selektiivse hüdrolüüsi teel. Food Chem. 2021, 346, 128743. [CrossRef]
48. Okada, T.; Morrissey, MT n-3 polüküllastumata rasvhapete kontsentraadi tootmine sardiiniõlist immobiliseeritud Candida rugosa lipaasi abil. J. Food Sci. 2008, 73, C146–C150. [CrossRef]
49. Riediger, ND; Othman, RA; Suh, M.; Moghadasian, MH Süsteemne ülevaade n-3 rasvhapete rollist tervises ja haigustes. J. Am. Dieet. Assoc. 2009, 109, 668–679. [CrossRef] [PubMed]
50. Gao, K.; Chu, W.; Sun, J.; Mao, X. Leeliselise lipaasi tuvastamine, mis suudab rasvhapete selektiivsuse ja regioselektiivsuse tõttu EPA-d paremini rikastada kui DHA-d. Food Chem. 2020, 330, 127225. [CrossRef]
51. Martins, PA; Trobo-Maseda, L.; Lima, FA; de Morais Júnior, töörühm; De Marco, JL; Salum, TFC; Guisán, JM Omega{2}} tootmine kalaõli hüdrolüüsi teel, kasutades Burkholderia gladioli BRM58833 lipaasi, mis on immobiliseeritud ja stabiliseeritud immobiliseerimisjärgsete meetoditega. Biochem. Biophys. Rep. 2022, 29, 101193. [CrossRef] [PubMed]
52. Lemes, AC; Egea, MB; Oliveira Filho, JGd; Gautério, GV; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Bioloogilised lähenemisviisid bioaktiivsete ühendite ekstraheerimiseks agrotööstuslikest kõrvalsaadustest: ülevaade. Esiosa. Bioeng. Biotehnoloogia. 2022, 9, 1–18. [CrossRef] [PubMed]
53. Lemes, AC; Sala, L.; Maagid, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Ülevaade viimastest edusammudest valgurikaste jäätmete krüpteeritud bioaktiivsete peptiidide vallas. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef]
54. Lemes, AC; Coelho, MAZ; Gautério, GV; Paula, LC; Filho, JGdO; Egea, MB Peatükk 11 – Tööstusjäätmed ja kõrvalsaadused: Funktsionaalsete toiduainete, toitainete ja biopolümeeride allikas. Biopolümeerides toitainetes ja funktsionaalsetes toiduainetes; Kuninglik Keemia Selts: London, Ühendkuningriik, 2023; lk 329–360.
55. Pintado, ME; Teixeira, JA Valorização de subprodutos da indústria alimentar: Obtenção de ingredientes de valor acrescentado. Bol. Biotechnol. 2015, 1, 10–12.
56. Hagler, AN; Mendonça-Hagler, LC Brasiilias Rio de Janeiro osariigis erineva saastetasemega mere- ja suudmealade pärmid. Rakendus Keskkond. Microbiol. 1981, 41, 173–178. [CrossRef]
57. AOAC. AOAC Internationali ametlikud analüüsimeetodid; Ametlike analüütiliste keemikute ühendus: Washington, DC, USA, 1995.
58. Castro, AMd; Castilho, LdR; Freire, DMG Käärimisprotsesside toorainena kasutatavate babassu-, rapsi-, riitsinus- ja päevalillejääkkookide iseloomustus. Ind. Crops Prod. 2016, 83, 140–148. [CrossRef]
59. Freire, DM; Teles, EM; Bon, EP; Sant' Anna, GL, Jr. Penicilliumi lipaasi tootmine, mis on piiratud pingipõhises fermenteris: süsiniku ja lämmastiku toitumise, segamise ja õhutamise mõju. Rakendus Biochem. Biotehnoloogia. 1997, 63–65, 409–421. [CrossRef]
60. Charney, J.; Tomarelli, RM Kolorimeetriline meetod kaksteistsõrmiksoolemahla proteolüütilise aktiivsuse määramiseks. J. Biol. Chem. 1947, 171, 501–505. [CrossRef] [PubMed]
61. Laemmli, Ühendkuningriik Struktuursete valkude lõhustamine bakteriofaagi T4 juhi assamblee ajal. Loodus 1970, 227, 680–685. [CrossRef] [PubMed]
Lahtiütlus/väljaandja märkus:Kõikides väljaannetes sisalduvad väited, arvamused ja andmed on ainult konkreetse(te) autori(te) ja kaastöölise(te), mitte MDPI ja/või toimetaja(te) avaldused, arvamused ja andmed. MDPI ja/või toimetaja(d) loobuvad vastutusest inimestele või varale tekitatud vigastuste eest, mis tulenevad sisus viidatud ideedest, meetoditest, juhistest või toodetest.
【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
