Soole läbilaskvus ja depressioon põletikulise soolehaigusega patsientidelⅠ
Dec 20, 2023
Kokkuvõte: Depressioon on ülemaailmne terviseprobleem, mis nõuab varajast ja täpset diagnoosi, et tagada kiire juurdepääs sobivale ravile. Hiljutine tähelepanu on keskendunud aju-soolestiku-mikrobiota telje analüüsimisele mitme psühhopatoloogilise tee hulgas. Soolebarjäär mängib võtmerolli ja sellel tasemel esinevad düsfunktsioonid mõjutavad vaimset tervist. Käesoleva uuringu eesmärk oli uurida soolestiku läbilaskvuse biomarkerite, st kalprotektiini, zonuliini, lipopolüsahhariidi siduva valgu (LBP) ja soolestiku rasvhappeid siduva valgu (I-FAB) rolli põletikulise soolehaigusega (IBD) patsientide depressioonis. ).
See on esimene selline uuring, mis toimub Rumeenias ja Ida-Euroopas, rõhuasetusega Crohni tõve ja haavandilise koliidiga patsientidel. Depressiooni ja kalprotektiini ning depressiooni ja LBP vahel tuvastatud korrelatsioonid võivad heita valgust depressiooni kiire diagnoosimise protsessile biomarkerite abil. Kuna depressioon on korrelatsioonis IBD-ga statsionaarsete patsientide elukvaliteedi langusega, peab vajadus sobiva ravi järele olema kiireloomuline.
1. Sissejuhatus
Depressioon on individuaalne, tööalane ja sotsiaalne puue, mis on seotud somaatiliste haigustega [1,2] ja kõrge enesetapusurma riskiga [3]. Kuid juurdepääs spetsialistidele, õige diagnoos ja tõhus ravi on piiratud [4]. Haiguse kannatuste ja rahalise koormuse vähendamiseks [3] on vajalik varajane ja täpne diagnoos [5,6] ning personaliseeritud ravi valik [7]. Vastavalt vaimsete häirete diagnostika ja statistilise käsiraamatu diagnostilistele kriteeriumidele (DSM V) [8] on depressioon heterogeense sümptomite rühmaga afektiivne häire. Diagnoosimiseks on vajalik viie sümptomi olemasolu üheksast järgmisest: depressiivne meeleolu, naudingu puudumine, une- ja isutusraskused, madal energiatase, kognitiivsed muutused, süü- ja süütunne ning enesetapumõtted. patofüsioloogilised mehhanismid tõhusast ravist kasu saamiseks ei ole teada. Mitmed mehhanismid on kahtluse alla seatud, kuid teooriad alles arenevad.
Seega on uuritud düsfunktsioone hüpotalamuse-hüpofüüsi teljel, neurotransmitteritel, vaguse närvil, lühikese ahelaga rasvhapete metaboliitidel, trüptofaanil, põletikufaktoritel ja aju-soolestiku-mikrobiota teljel [9-12]. On tõestatud, et mitte ainult stressiga seotud häired ei too kaasa muutusi soolestiku mikrobiota koostises hüpotalamuse-hüpofüüsi-neerupealise telje kaudu, vaid ka soolestik mõjutab
kesknärvisüsteemi vagaalse stimulatsiooni, soolestiku läbilaskvuse ning põletikuliste ja põletikuvastaste ühendite vabanemise ning veres ringlevate ainete muutuste kaudu [13]. Viimase kahe aastakümne jooksul on psüühikahäiretega seotud aju-soolestiku-mikrobiota telje uurimine hoogu juurde saanud [9,14]. Selles kontekstis on rohkem tähelepanu pööratud lekkiva gutsündroomi rollile [15, 16].
Soolebarjääril on peamine roll toitainete seedimisel ja imendumisel; teiseks, see kontrollib rangelt antigeenide transporti luumenist submukoosse ning säilitab tasakaalu taluvuse ja põletikku põhjustava immuunvastuse vahel. Soolebarjääri terviklikkust võivad mõjutada toitumine, soolestiku mikrobiota düsbioos või muud tegurid. Need võivad mikroobsete antigeenide ja metaboliitide translokatsiooni tõttu põhjustada immunoaktivatsiooni. Praegu on soolestiku läbilaskvusena analüüsitud seerumi zonuliini, soolestiku rasvhappeid siduvat valku (IFABP/FABP2) ja LBP-d, aga ka väljaheite albumiini, kalprotektiini ja zonuliini markerid [17]. Kalprotektiin on kaltsiumi ja tsinki siduv valk, mis on algselt eraldatud leukotsüütidest; see on kasulik põletikulise soolehaiguse eristamisel ärritunud soole sündroomist. See mängib olulist rolli põletiku ajal ja seda peetakse ägeda faasi valguks [18 ].
Normaalväärtused on vahemikus 10 kuni 50 või 60 (ug/g). Väärtused üle 200 (ug/g) võivad viidata põletikulisele haigusele ja väärtused üle 500–600 (ug/g) viitavad kindlasti soolehaiguse olemasolule [19]. Lipopolüsahhariidi siduv valk (LBP) on välismembraani oluline lipiidikomponent. gramnegatiivsed bakterid [20], mis põhjustavad endotokseemiat [21]. Hepatotsüütide, rasvkoe ja soolerakkude poolt toodetud LBP-d toimivad akuutse faasi I valguna ja mängivad olulist rolli immuunvastuses [22]. LBP esineb seerumis kontsentratsioonides 5–15 mg/ml ja suureneb akuutse faasi reaktsiooni ajal 10–50 korda. Barjäärifunktsiooni säilitab zonuliin, mida tuntakse kui ainsa rakusiseste ühenduskohtade (TJ) füsioloogilist modulaatorit [15,23, 24]. Zonulin avab pöörduvalt TJ, toimides proteaasiga aktiveeritud retseptorile 2, mis asub ühenduskompleksi rakusiseses ruumis [25]. Zonuliini mediaanväärtus on 34 ng/ml [26].
Intestinaalne rasvhappeid siduv valk (I-FABP/FABP2) on üks üheksast erinevast FABP-st, mis kuuluvad lipiide siduvate valkude superperekonda. Peamine roll on rakusisene transport ja rasvhapete imendumise reguleerimine [27]. Epiteeli soolebarjääri kahjustuse korral vabaneb I-FABP vereringesse ja selle plasmakontsentratsioon suureneb [28]. I-FAPB läviväärtuseks loetakse 2 ng/mL. Selles kontekstis püüdsime uurida soolestiku läbilaskvuse biomarkersiini depressiooni rolli põletikulise soolehaigusega (IBD) patsientidel, (i) uurides seost kalprotektiini, zonuliini ja LBP vahel. , IFABP/FABP2 ja depressiooni ning (ii) hinnates depressiooni mõju elukvaliteedile.
2. Materjalid ja meetodid
2.1. Õpperühm
Algsesse rühma kuulus 60 patsienti Constanta maakonna kliinilise haigla gastroenteroloogiakliinikust ajavahemikus 2021. aasta aprillist juunini. Kaasamise kriteeriumid olid IBD diagnoos, 18-aastased ja vanemad, lugemis- ja kirjutamisoskus ning nõusolek uuringus osaleda. Välistamiskriteeriumid olid nõusoleku andmisest keeldumine, raske depressioon või muud rasked psüühikahäired, mille puhul nad suunati psühhiaatria eriteenistusse. Pärast teadliku nõusoleku saamist võttis teadlane patsientidega telefoni teel ühendust, et rakendada depressiooni sotsiaaldemograafilist küsimustikku ja küsimustikku depressiooni kvaliteedi kohta. elu.Uuringusse kaasati 30 patsienti, kes läbisid kõik uuringu etapid.
2.2. Kasutatud küsimustikud
Patsiendi terviseküsimustikku-9 (PHQ-9) [29] rakendati osalejatele, et hinnata depressiooni taset, mis neid mõjutas. See standardne küsimustik sisaldab üheksat küsimust, millele tuleb vastata patsiendi sümptomite põhjal viimase 14 päeva jooksul. Hinded liigitatakse järgmiselt: 1–4 minimaalne depressioon, 5–9 kerge depressioon, 10–14 mõõdukas depressioon, 15–19 mõõdukalt raske depressioon ja 20–27 raske depressioon. Sarnaselt kasutasime elukvaliteedi küsimustikku (EQ{{ 14}}D) [30,31] elukvaliteedi andmete kogumiseks. Selles tööriistas sisalduvad elemendid on patsiendi liikuvus, enesehooldus, tavapärastes tegevustes osalemine, valu või ebamugavustunne ning kogetud ärevus või depressioon. Küsimustele vastatakse viieastmelisel skaalal.
2.3. Proovide kogumine ja laboratoorne analüüs
Zonuliini, IFABP/FABP2, LBP seroloogilised proovid ja kalprotektiini väljaheiteproovid koguti vastavalt potentsiaalselt nakkusohtlike bioloogiliste proovide kogumise ja transportimise protokollile. Seerumiproovid koguti venoosse punktsiooniga, tühja kõhuga ja vakutaineris aktivaatorlapiga. Fekaaliproovid koguti spontaanselt eritunud väljaheitest konteineritesse ilma kandekeskkonnata. Seerumit testiti zonuliini suhtes ettevõttega MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, USA). ja IFABP/FABP2 ja LBP koos Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. komplektiga (Wuhan, Hiina). Proove testiti kalprotektiini suhtes EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG komplektiga. Kõik testid viidi läbi ensüümidega seotud immunosorbenttestiga (ELISA) seadmetega ADALTIS Analyzer GEN-4 ja Victor X4 vastavalt komplekti tootja juhistele.
Komplekti tootja määratles normaalväärtuste vahemiku ainult kalprotektiini jaoks järgmiselt: väiksem või võrdne 50.0 mcg/g nagu tavaliselt, 50,1– 120,0 mcg/g kui piirväärtus ja suurem või võrdne 120,1 mcg/g, mis on soolehaiguse puhul positiivne. Zonuliini puhul ei määranud reaktsioonikomplekti tootja madalamaid tuvastamispiire. IFABP/FABP2 komplekti alumine avastamispiir oli 0,156 ng/ml, LBP puhul 3,125 ng/mL ja kalprotektiini puhul 3,125 ng/ml. Zonuliini, I-FABP/FABP2 ja LBS/LBP puhul ei edastanud komplekti tootja normaalväärtuste vahemikku ning kasutati väärtusi, mida teised autorid oma uuringutes kasutasid. Seerum ekstraheeriti igast vereproovist tsentrifuugimisega 3000 × g juures. 30 minutit, kasutades Thermo Scientific SL16R tsentrifuugi.
Kõiki saadud seerumeid hoiti kuni analüüside tegemiseni külmutatud temperatuuril –200 ◦C. IFABP/FABP2 ja LBP puhul lahjendati proove enne testimist proovi lahjenduspuhvriga 1/2-ni. Väljaheiteproove hoiti kuni testimise päevani temperatuuril –20 ◦C. Väljaheiteproovi ekstraheerimiseks kasutati 980 ui ekstraheerimispuhvrit koos 20 mg väljaheitega, segati 30 sekundit ja seejärel tsentrifuugiti 2000 × g juures 10 minutit, kasutades Thermo Scientific SL16R tsentrifuugi. Seejärel lahjendati proove 980 iu proovipuhvriga ja 20 iu ekstraheerimissupernatandiga.
Nelja markeri jaoks kasutati 96 süvendiga mikroplaate, mis olid kaetud püüdmisantikehadega: anti-kalprotektiini antikehad, anti-IFABP/FABP2 antikehad, anti-LBP antikehad või anti-zonuliini antikehad. Testi põhimõtted olid samad, mis põhinesid ensüümidega seotud immunoloogilise testimise tehnoloogial (ELISA). Hiljem lisati süvenditesse standardproovid, testproovid ja biotiiniga konjugeeritud tuvastamisantikehad. Ensümaatilise reaktsiooni HRP (mädarõika peroksidaas) visualiseerimiseks kasutati TMB substraate (3,30,5,50-tetrametüülbensidiin). HRP katalüüsis TMB-d, et saada sinine toode, mis muutus kollaseks pärast happetõkestamise lahuse lisamist.
Kollase laigu tihedus oli võrdeline plaadile püütud proovi kogusega. Värvi intensiivsust mõõdeti mikroplaadi lugejas lainepikkusel 450 nm ja seejärel arvutati sihtkontsentratsioon.
2.4. Statistiline analüüs
Statistiline analüüs viidi läbi, kasutades IBM SPSS statistikatarkvara versiooni 23 (Armonk, NY, USA: IBM Corp.). Andmed on esitatud mediaanidena ja IQR-na (interkvartiilvahemik P75–P25) pidevate muutujate jaoks kallutatud jaotuste korral või protsentides kategooriliste muutujate puhul.
Kuna Shapiro–Wilki normaalsuse test näitas analüüsitud pidevate muutujate puhul testi statistilisi väärtusi, mille tõenäosus (p) oli väiksem kui olulisuse tase {{0}},05, siis tingimus normaalsust ei täidetud, välja arvatud muutujad LBP ja PHQ 9, mille puhul p >=0.05. Arvasime, et kõnealuste muutujate vahelise korrelatsiooni uurimisel on sobivam anonparameetriline lähenemine Spearmani rho korrelatsioonikordaja (ρ) ja sellega seotud tõenäosuse (p) esitamisega. Olulisuse tasemeks määrati 0,05.
Looduslik taimne ravim kõhukinnisuse leevendamiseks-Cistanche
Cistanche on parasiittaimede perekond, mis kuulub sugukonda Orobanchaceae. Need taimed on tuntud oma raviomaduste poolest ja neid on traditsioonilises hiina meditsiinis (TCM) kasutatud sajandeid. Cistanche liike leidub valdavalt Hiina, Mongoolia ja teiste Kesk-Aasia kuivades ja kõrbepiirkondades. Cistanche taimi iseloomustavad nende lihavad kollakad varred ja neid hinnatakse kõrgelt nende võimaliku tervisega seotud eeliste tõttu. TCM-is arvatakse, et Cistanche'il on toonilised omadused ja seda kasutatakse tavaliselt neerude toitmiseks, elujõu suurendamiseks ja seksuaalfunktsiooni toetamiseks. Seda kasutatakse ka vananemise, väsimuse ja üldise heaoluga seotud probleemide lahendamiseks. Kuigi Cistanche on traditsioonilises meditsiinis kasutatud pikka aega, on selle tõhususe ja ohutuse teaduslikud uuringud käimas ja piiratud. Siiski on teada, et see sisaldab mitmesuguseid bioaktiivseid ühendeid, nagu fenüületanoidglükosiidid, iridoidid, lignaanid ja polüsahhariidid, mis võivad kaasa aidata selle ravitoimele.
Wecistanche'i omacistanche pulber, tsitanche tabletid, cistanche kapslidja muud tooted on välja töötatud kasutadeskõrbcistanchetoorainena, mis kõik mõjuvad hästi kõhukinnisust leevendavalt. Spetsiifiline mehhanism on järgmine: Cistanche'il arvatakse olevat potentsiaalne kasu kõhukinnisuse leevendamisel, tuginedes selle traditsioonilisele kasutamisele ja teatud ühenditele, mida see sisaldab. Kuigi teaduslikud uuringud konkreetselt Cistanche mõju kohta kõhukinnisusele on piiratud, arvatakse, et sellel on mitu mehhanismi, mis võivad aidata kaasa selle potentsiaalile kõhukinnisust leevendada. Laksatiivne toime:CistancheTraditsioonilises Hiina meditsiinis on seda juba pikka aega kasutatud kõhukinnisuse ravimina. Arvatakse, et sellel on kerge lahtistav toime, mis võib aidata soodustada soolte liikumist ja põhjustada kõhukinnisust. Selle toime võib seostada mitmesuguste Cistanche'i ühenditega, nagu fenüületanoidglükosiidid ja polüsahhariidid. Soolestiku niisutamine: traditsioonilise kasutuse põhjal arvatakse, et Cistanche on niisutavate omadustega, mis on suunatud just sooltele. Soolestiku niisutamise ja määrimise soodustamine võib aidata tööriistu pehmendada ja hõlbustada läbipääsu, leevendades seeläbi kõhukinnisust. Põletikuvastane toime: kõhukinnisust võib mõnikord seostada seedetrakti põletikuga. Cistanche sisaldab teatud ühendeid, sealhulgas fenüületanoidglükosiide ja lignaane, millel arvatakse olevat põletikuvastased omadused. Vähendades põletikku soolestikus, võib see aidata parandada väljaheite regulaarsust ja leevendada kõhukinnisust.
