Kuidas mängivad Cistanche Tubulosa aktiivsed koostisosad Alzheimeri tõve puhul rolli?

JIANHUA YANG1*, BOWEI JU1,2*, YAO YAN1, HUANHUAN XU1, SHANSHAN WU1, DANDAN ZHU1, DANDAN CAO1 ja JUNPING HU2

Abstraktne.Käesoleva uuringu eesmärk oli uurida neuroprotektiivset toimetfenüületanoidglükosiidid(PhG-d) H2O2- ja -amüloidpeptiidi (A )1-42- indutseeritud PC12 rakkude kahjustuse kohta in vitro mudelinaAlzheimeri tõbi (AD). Optimaalsed induktsioonitingimused määrati erinevate inkubatsiooniaegade ja kontsentratsioonide skriinimise teel. PC12 rakke töödeldi 0,5 µM A 1-42 ja H2O2-ga PhG-de juuresolekul 24 tundi ning seejärel hinnati rakkude elujõulisust MTT testiga; Samuti mõõdeti laktaatdehüdrogenaasi (LDH) vabanemist ja malondialdehüüdi (MDA) sisaldust. Optimaalsed tingimused loomiseksADmudelid olid PC12 rakkude töötlemine 0,5 µM A 1-42-ga 48 tundi või 25 µM H2O2-ga, mis oli lahustatud DMEM-is koos PBS-iga. PhG-d kontsentratsioonides 5, 25 ja 50 µg/ml suurendasid A 1-42 või H2O2-ga vigastatud PC12 rakkude elujõulisust ja vähendasid LDH ja MDA vabanemist. Kokkuvõtteks võib öelda, et A 1-42- ja H2O2-indutseeritud PC12 rakukahjustuse mudel loodi edukalt. Näidati, et PhG-del on märkimisväärne neuroprotektiivne toime A-1-42- või H2O2--indutseeritud rakukahjustuse vastu.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanche tubulosal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

Sissejuhatus

Alzheimeri tõbi (AD), neurodegeneratiivne haigus, mille kliinilisteks tunnusteks on progresseeruv mälukaotus ja kognitiivsete funktsioonide kahjustus (1), on maailmas kõige levinum dementsuse põhjus (2). Finantskulud on AD levimuse tõttu tohutud (3). Seetõttu on kiiresti vaja välja töötada sobivad vahendid haiguse juhtimiseks ja ennetamiseksAD.

PatogeneesADon tihedalt seotud neurofibrillaarsete puntrate ja seniilsete naastude (SP) kuhjumisega mõjutatud ajupiirkondades (4, 5). -amüloidpeptiidil (A), mis on SP-de peamine komponent, on teatatud, et sellel on põhjuslik roll haiguse progresseerumisel.ADmillel on toksiline toime närvirakkudele (6). A-fragmendid, sealhulgas A 1-40, A 25-35 ja A 1-42, on loodud amüloidi prekursorvalgu (7) lõhustamise teel. Leiti, et A 1-42 neurotoksilisus on oluliselt suurem kui A 25-35 ja A 1-40 ning A 1-42 on võimeline esile kutsumaADmudel (1, 8-10). Oksüdatiivne stress võib olla seotud patogeneesigaADja see on A-indutseeritud neurotoksilisuse (11-13) peamine mehhanism. Mitmed uuringud näitasid, et A 1-42 põhjustas reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) rakusisest akumulatsiooni, mis viis lipiidide ja valkude oksüdeerumiseni, DNA kahjustuseni ja rakutsükli kontrollpunkti signaalide aktiveerimiseni (1, 14, 15). Liigne kogus H2O2 võib põhjustada oksüdatiivseid kahjustusi ja indutseerida PC12 rakkude apoptoosi (16). Seetõttu võib oksüdatiivse stressi sihtimine olla paljutõotav lähenemisviis terapeutiliste strateegiate väljatöötamiseks A-indutseeritud neurotoksilisuse pärssimiseks AD-s.

Herba (H.)Cistanche, Hiina taimset ravimit, mida Mandri-Hiinas tavaliselt kasutatakse neerude toitmiseks ning essentsi ja vere täiendamiseks, on kasutatud mälukaotuse ja seniilse kõhukinnisuse raviks (17). Fenüületanoidglükosiid (PhG), mis on üks peamisi koostisosi H.Cistanche, parandab A 25-35 põhjustatud neuronaalse apoptoosi kahjustust oma antioksüdantse toime kaudu (18, 19). Eelmises uuringus tuvastati viis peamist komponenti kõigist PhG-dest, nimeltakteosiid2'-atsetüüllakteosiid,ehhinakosiid, tsistanosiidid ja isoakteosiid (20). Nende komponentide hulgasakteosiidjaehhinakosiidon teatatud, et neil on neuroprotektiivne toime A 25-35- või H2O2-indutseeritud neurotoksilisusele (21-23). Näiteks Wu jt (24) väitsid, et akteosiid jaehhinakosiid

Märksõnad:fenüületanoidglükosiidid, PC12 rakud, H2O2, -amüloidpeptiid1-42, neuroprotektsioon, tsistan

materjalid ja meetodid

PhGde ettevalmistamine. PhG-d ekstraheeriti H-st.Cistanchenagu eelnevalt kirjeldatud (25). Õhukuivatatud vars H.Cistanchepulbristati ja ekstraheeriti perkolatsiooniga 80 protsendilise EtOH-ga. Perkolaat aurustati alandatud rõhul, millele järgnes resuspendeerimine sobivas koguses H2O2-s (1{{20}}0 µmol/l). Segu isoleeriti SP-825 makropoorsel vaigukolonnis (Mitsubishi Chemical, Tokyo, Jaapan) ja elueeriti 0, 30, 50, 70 ja 90% EtOH-ga vees. PhG-rikka fraktsiooni saamiseks kontsentreeriti 30-50% EtOH eluendid ja kuivatati alandatud rõhul. PhGde koguarvu määramiseks viidi läbi ultraviolettkiirguse (UV) spektrofotomeetria. Ehhinakosiidi ja akteosiidi sisaldus määrati kindlaks kõrgsurvevedelikkromatograafia abil vastavalt eelmisele protokollile (26). Kasutati Hypersil ODS{15}} kolonni (4,6 x 250 mm, 5 µm; Dalian Elite Analytical Instruments, Co., Ltd., Dalian, Hiina) ja seda hoiti toatemperatuuril. Liikuvad faasid olid metüültsüaniidid ja vesi, mis sisaldas 0,4% fosforhapet (maht/maht; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Saksamaa). Voolukiirus oli 0,75 ml/min ja lainepikkuseks määrati 333 nm.

Rakukultuur ja ravimite ravi. PC12 roti feokromotsütoomi rakuliini andis dr He Chunhui Xinjiangi meditsiiniülikooli meditsiinikoolist (Urumqi, Hiina). Rakke kasvatati kõrge glükoosisisaldusega Dulbecco modifitseeritud Eagle'i söötmes (DMEM; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA), mis sisaldas 10 protsenti veise loote seerumit (Sangon Biotech Co. Ltd., Shanghai, Hiina). , 100 U/ml penitsilliini ja 100 U/ml streptomütsiine inkubaatoris temperatuuril 37 ˚C, mis sisaldab 5 protsenti CO2 ja 95 protsenti õhku. 80-protsendilise liitumise saavutamisel töödeldi rakke 0,25-protsendilise trüpsiiniga ja passeeriti.

Et kõrvaldada ravimi enda sekkumine PC12 rakkude kasvu, viidi läbi toksilisuse katse. Lühidalt öeldes külvati PC12 rakud (3 x 104 rakku/ml) 96-süvendiga plaatidele 100 µl süvendi kohta ja inkubeeriti 37 ˚C juures üleöö. Pärast supernatandi äraviskamist lisati tühja rühma 200 µl täielikku DMEM-i, samal ajal kui sekkumisrühmade rakke töödeldi PhG-dega erinevates annustes (5, 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ja 200 µg/). ml). Pärast rakkude inkubeerimist temperatuuril 37 °C 48 tundi lisati igasse süvendisse 20 µl MTT lahust (Sigma-Aldrich; Merck KGaA). Pärast 4-tunnist inkubeerimist visati supernatant ära ja igasse süvendisse lisati 150 µl dimetüülsulfoksiidi, millele järgnes loksutamine 10 minutit. Optilise tiheduse (OD) väärtused 490 nm juures tuvastati ELISA plaadilugeja abil.

1–42-indutseeritud PC12 raku vigastus. Ettevõttelt Bioss Biotech (Peking, Hiina) ostetud 1-42 peptiid lahustati vees (100 µg/ml). Seejärel inkubeeriti segu 4 päeva temperatuuril 37 ˚C ja säilitati enne kasutamist temperatuuril 4 ˚C.

PC12 rakud külvati 96-süvendiga plaatidele (3xl04 rakku 100 µl süvendi kohta). Pärast 24-tunnist kultiveerimist lisati seerumivabas DMEM-is lahustatud 50 µl A 1-42 erinevates lõppkontsentratsioonides (0, 0,25, 0,5, 1, 1,5 või 2 µM), millele järgnes inkubeerimine 24, 48, 72 või 96 tundi. Rakkude elujõulisust hinnati MTT testiga. Optimaalne A 1-42 kontsentratsioon oli 0,5, mis määrati µM.

PC12 rakke (3xl04 rakku süvendi kohta) töödeldi erinevate PhG-de annustega (0, 0,5, 5, 25 või 50 µg/ml) 0,5 µM A 1-42 24 tunni jooksul. Rakkude elujõulisust hinnati MTT testiga.

H2O2-indutseeritud PC12 rakkude vigastus. PC12 rakud külvati 96-süvendiga plaatidele (3xl04 rakku 100 µl süvendi kohta). Pärast 24-tunnist kultiveerimist kleepumiseks lisati 100 µl H2O2 erinevate lõppkontsentratsioonidega (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 ja 500 µM), mis oli lahustatud DMEM-is koos PBS-iga (0,01 mol/l) või ilma. millele järgneb inkubeerimine 24 tundi. Rakkude elujõulisust hinnati MTT testiga. AD in vitro mudeli loomiseks määrati optimaalne H2O2 kontsentratsioon ja lahusti.

PC12 rakke (3xl04 rakku süvendi kohta) töödeldi erinevate PhG-de annustega (0, 0,5, 5, 25 ja 50 µM). Pärast 24-tunnist kleepumiseks kultiveerimist töödeldi PC12 rakke 24 tundi PhG-de juuresolekul 100 µl H2O2-ga, mis oli lahustatud DMEM-is koos PBS-iga. Rakkude elujõulisust hinnati MTT testiga.

Laktaatdehüdrogenaasi (LDH) vabanemise test. Rakkude vigastusi hinnati LDH aktiivsuse mõõtmisega PC12 rakkude supernatandis, kasutades LDH komplekti vastavalt tootja protokollile (kat. nr 20150604; Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Hiina). Lühidalt, topeltdestilleeritud H2O, 0,2 µmol/ml püroviinamarihape, maatrikspuhver ja koensüüm I puhver lisati järjestikku 48 tundi pärast ravimiga töötlemist. Pärast 15-minutilist inkubeerimist 37 °C juures lisati 2,4-dinitrofenüülhüdrasiin. Seejärel lisati igasse süvendisse 250 µl 0,4 M NaOH lahust. Supernatant koguti pärast 30-minutilist inkubeerimist toatemperatuuril. Seejärel mõõdeti mikroplaadilugejaga neeldumine lainepikkusel 450 nm.

Malondialdehüüdi (MDA) mõõtmine. MDA-d mõõdeti PC12 rakkude supernatandis, kasutades kaubanduslikku komplekti (kat. nr 20150604; Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute) vastavalt tootja protokollile. temperatuuril 95 °C 40 minutit. Segu tsentrifuugiti 10 minutit pärast jahutamist 1006 xg ja 25 °C juures. Seejärel kasutati supernatanti MDA sisalduse määramiseks. Seejärel mõõdeti neeldumist mikroplaadilugejaga 532 nm juures.

Ehhinakosiidi ja akteosiidi kaitsva toime hindamine AD vastu in vitro. PC12 rakud külvati tihedusega 3xl04 rakku süvendi kohta 96-süvendiga plaatidele (100 µl süvendi kohta). Rakke inkubeeriti ravimitega, sealhulgas ehhinakosiidiga (kat. nr 111670-200503; Riiklikud Toidu- ja Ravimikontrolli Instituudid, Peking, Hiina) ja atsetoniidiga (kat. nr 111530-200505; Riiklikud Toidu- ja Ravimikontrolli Instituudid ) erinevates kontsentratsioonides (0,5, 25 ja 50 µg/ml). Seejärel töödeldi rakke A 1-42 või H2O2-ga 24 tundi ja rakkude elujõulisust mõõdeti MTT testiga.

Statistiline analüüs. Väärtused on väljendatud keskmise ± standardhälbena. Rühmadevaheliseks võrdluseks kasutati õpilase t-testi. Statistilised analüüsid viidi läbi kasutades SPSS 18.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Tulemused

PhG-de kvantifitseerimine H. Cistanchesist. UV-spektridPhGsekstraheeritud, samuti standardlahusedehhinakosiidjaakteosiidregistreeriti ja tulemused näitasid, et UV-spektrid olid ühtsed (joonis 1). UV-spektrofotomeetria

näitas, et PhG sisaldus oli 87,6 protsenti. HPLC tulemused näitasid, et ehhinakosiidi ja akteosiidi sisaldus oli vastavalt 37,7 ja 17,8 protsenti (joonis 2).

Ideaalse PhG kontsentratsiooni määramine. Võrreldes tühja rühmaga oli PhG-l 75, 100, 125, 150, 175 ja 200 µg/ml PC12 rakkudele märkimisväärne inhibeeriv toime (P<0.05), while="" phg="" at="" 5,="" 25="" and="" 50="" µg/ml="" showed="" low="" toxicity="" on="" pc12="" cells,="" and="" the="" cell="" viability="" was="">80 protsenti (joonis 3). Seega kasutati järgnevates katsetes PC12 rakkude töötlemiseks PhG-sid kontsentratsioonis 5, 25 ja 50 µg/ml, kuna need ei mõjutanud rakkude elujõulisust.

1-42-indutseeritud PC12 raku vigastus. Võrreldes kontrollrühma omaga oli rakkude elujõulisus 0,5 µM A 1-42 vigastuste rühmas 63 protsenti (P<0.05). the="" cell="" viability="" was="" decreased="" by="" aβ1-42="" in="" a="" concentration-dependent="" manner,="" and="" the="" viability="" was=""><50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups="" (fig.="" 4).="" thus,="" treatment="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="" in="" vitro="" ad="">

Samuti määrati nende PC12 rakkude aktiivsus, mida töödeldi 0,5 µM A 1-42-ga PhG-de ohutute annuste (5, 25 ja 50 µg/ml) juuresolekul 24 tunni jooksul. Võrreldes mudelirühmaga (P<0.01), phgs="" showed="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" rescued="" by="" phgs="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (fig.="">

H2O2-indutseeritud PC12 rakkude vigastus. PBS-iga DMEM-is lahustatud 25 uM H2O2-ga töödeldud PC12 rakkude elujõulisus oli 56,43 protsenti. DMEM-is lahustatud 200 uM H2O2-ga ilma PBS-ita töödeldud PC12 rakkude elujõulisus oli 71,64 protsenti (tabel I). Seega valiti AD mudeli loomise optimaalseks tingimuseks PC12 rakud, mida töödeldi 25 uM H2O2-ga, mis oli lahustatud DMEM-is koos PBS-iga.

Võrreldes kontrollrühmaga oli rakkude elujõulisus mudelrühmas 48,8 protsenti (P<0.05). compared="" with="" the="" model="" group,="" phgs="" had="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" dose-dependently="" increased="">

PhG-d ja PhG-dega kontsentratsioonides 5, 25 ja 50 µg/ml töödeldud PC12 rakkude elujõulisus olid vastavalt 54, 57 ja 64 protsenti (tabel II).

PhG-d pärsivad vigastusest põhjustatud LDH vabanemist PC12 rakkude poolt. Võrreldes kontrollrühmaga suurenes vigastatud PC12 rakkude supernatandi LDH sisaldus, mida PhG-d inhibeerisid kontsentratsioonist sõltuval viisil. See tulemus näitas, et PhG-del on PC12 rakkudele märkimisväärne neuroprotektiivne toime (joonis 6).

Tabel I. Rakkude elujõulisus (protsent) pärast H2O2-ga töötlemist.

Tabel II. Rakkude elujõulisus pärast ravimi sekkumist.

inhibeerivad PhG-d kontsentratsioonist sõltuval viisil. See tulemus näitas, et PhG-del on PC12 rakkudele märkimisväärne neuroprotektiivne toime (joonis 7).

PhG ja selle komponendid ehhinakosiid ja akteosiid päästavad vigastatud PC12 rakkude elujõulisuse. Võrreldes mudelrühmaga suurendas ravi akteosiidiga oluliselt A 1-42-vigastatud PC12 rakkude elujõulisust annusest sõltuval viisil. PhG-d ja ehhinakosiid suurendasid oluliselt ka A 1-42-vigastatud PC12 rakkude elujõulisust kõigil testitud kontsentratsioonidel (joonis 8A).

**P<0.05, vs.="" model="" group.="" aβ,="" â-amyloid="" peptide;="" phgs,="" phenylethanoid="" glycosides;="" ech,="" echinacoside;="" as,="">

Võrreldes mudelrühmaga suurendas akteosiid oluliselt H2O2-ga töödeldud PC12 rakkude elujõulisust. PhG-d suurendasid ka H2O2-ga töödeldud PC12 rakkude elujõulisust, samas kui toime ei olnud oluline kontsentratsioonidel 5 ja 25 µg/ml (joonis 8B). Lisaks suurendas ehhinakosiid rakkude elujõulisust 25 µg/ml juures.

Kokkuvõtteks võib öelda, et akteosiid, PhG-d ja ehhinakosiid avaldasid A 1-42 või H2O2-ga vigastatud PC12 rakkudele märkimisväärset neuroprotektiivset toimet.

Arutelu

Oksüdatiivne stress on A-vahendatud neurotoksilisuse peamine mehhanism AD-s (11-13). Seetõttu võib oksüdatiivse stressi sihtimine olla lähenemisviis AD raviks. Käesolevas uuringus loodi edukalt AD in vitro mudel, mis sisaldab A 1-42- ja H2O2- indutseeritud PC12 rakukahjustust. MTT-, LDH- ja MDA-testide tulemused näitasid, et PhG-d suurendasid rakkude elujõulisust ja vähendasid LDH ja MDA vabanemist vigastatud PC12 rakkude poolt. Võib järeldada, et PhG-del on PC12 rakkudele märkimisväärne neuroprotektiivne toime.

PhG-de endi mõju vähendamiseks PC12 rakkude kasvule ja ebanormaalse proliferatsiooni vältimiseks määrati sõelumistestis PhG-de ohutu annus. Tulemused näitasid, et PhG-del 75, 100, 125, 150, 175 ja 200 µg/ml oli PC12 rakkudele märkimisväärne inhibeeriv toime (P<0.05,><0.01), while="" cell="" viability="" remained="">80 protsenti kontsentratsioonidel 5, 25 ja 50 µg/ml. Seega olid PhG-d kontsentratsioonis 5, 25 ja 50 µg/ml PC12 rakkude jaoks ohutud.

A {{0}} tekitatud vigastust mõjutasid teatud tegurid, sealhulgas lahusti, inkubatsiooniaeg ja toote kvaliteet. Käesolevas uuringus lahustati A 1-42 peptiid vees (100 µg/ml) ja inkubeeriti enne kasutamist 37 ˚C juures 4 päeva CO2 inkubaatoris. PC12 rakke töödeldi A 1-42-ga kontsentratsioonides 0,5, 1, 1,5 ja 2 uM. Tulemused näitasid, et rakkude elujõulisus vähenes A 1-42 suurenemisega ja elujõulisus vähenes.<50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups.="" thus,="" treatment="" of="" pc12="" cells="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="" ad="" model.="" aβ25-35="" has="" been="" commonly="" used="" to="" establish="" ad="" models="" due="" to="" its="" low="" cost="" and="" simple="" operation="" (27-29).="" the="" neurotoxicity="" of="" aβ1-42="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" aβ25-35,="" and="" aβ1-42="" is,="" therefore,="" the="" optimal="" aβ="" fragment="" for="" establishing="" an="" ad="" model="">

H2O2 on oksüdeerija ja liigne H2O2 võib põhjustada oksüdatiivseid kahjustusi ja indutseerida raku apoptoosi (30). Käesolevas uuringus töödeldi PC12 rakke 25-500 µM H2O2-ga, mis oli lahustatud DMEM-is koos PBS-iga või ilma. Tulemused näitasid, et DMEM-is lahustatud H2O2 ilma PBS-ita põhjustas PC12 rakkude ebanormaalse proliferatsiooni. Seega oli PC12 rakkude töötlemine DMEM-is koos PBS-iga lahustatud 25 uM H2O2-ga optimaalne tingimus AD mudeli loomiseks. 1-42-indutseeritud vigastus oli suurem kui H2O2-indutseeritud vigastus H2O2 halva stabiilsuse ja lahusti mõju tõttu.

Kui rakk on kahjustatud, suureneb oluliselt LDH leke söötmesse. ROS põhjustab teadaolevalt MDA tootmist. Seetõttu peegeldab MDA ja LDH sisaldus oksüdatiivse kahjustuse suurust. Käesolevas uuringus vähenes kahjustusest põhjustatud LDH ja MDA aktiivsus PhG-de suurenevate annustega. Need tulemused näitasid, et PhG-del on PC12 rakkudele märkimisväärne neuroprotektiivne toime. MTT test näitas, et PhG-del oli PC12 rakkudele annusest sõltuv neuroprotektiivne toime.

Kokkuvõttes loodi edukalt AD in vitro mudel, mis sisaldab A 1-42- ja H2O2-indutseeritud PC12 rakukahjustust. PhG-dega töötlemine suurendas rakkude elujõulisust ja vähendas A 1-42 või H2O2-ga töödeldud PC12 rakkude LDH ja MDA vabanemist. PhG-del oli märkimisväärne neuroprotektiivne toime A 1-42- või H2O2-indutseeritud rakukahjustusele.

Viited

1. Qu M, Zhou Z, Xu S, Chen C, Yu Z ja Wang D: Mortaliini üleekspressioon nõrgendab beeta-amüloidist põhjustatud neurotoksilisust SH-SY5Y rakkudes. Brain Res 1368: 336-345, 2011.

2. Uzun S, Kozumplik O ja Folnegović-Small V: Alzheimeri tõve dementsus: praeguste andmete ülevaade. Collegium antropologicum 35: 1333-1337, 2011.

3. Brookmeyer R, Johnson E, Ziegler-Graham K ja Arrighi HM: Alzheimeri tõve ülemaailmse koormuse prognoosimine. Alzheimeri tõbi ja dementsus 3: 186-191, 2007.

4. Castellani RJ, Rolston RK ja Smith MA: Alzheimeri tõbi. Haigus-kuus 56: 484-546, 2010.

5. Mattson MP: teed Alzheimeri tõve poole ja sellest eemaldumiseks. Nature 430: 631-639, 2004.

6. Gouras GK, Tsai J, Naslund J jt: Intraneuronaalne A 42 akumulatsioon inimese ajus. The American Journal of Patology 156: 15-20, 2000.

7. Shen C, Chen Y, Liu H jt: Vesinikperoksiid soodustab A tootmist JNK-sõltuva sekretaasi aktiveerimise kaudu. Journal of Biological Chemistry 283: 17721-17730, 2008.

8. Shih PH ja Wu CH, Yeh CT ja Yen GC: antotsüaniinide kaitsev toime amüloidpeptiidist põhjustatud kahjustuste eest neuro-2A rakkudes. Journal of Farm and Food Chemistry 59: 1683-1689, 2011.

9. Figueiredo CP, Bicca MA, Latini A, Prediger R, Medeiros R ja Calixto JB: foolhape pluss tokoferool leevendab amüloid- -indutseeritud neurotoksilisust mitokondriaalsete komplekside aktiivsuse moduleerimise kaudu. Alzheimeri tõve ajakiri: JAD 24: 61-75, 2010.

10. Dumont M, Lin MT ja Beal MF: mitokondrid ja antioksüdandid suunatud Alzheimeri tõve ravistrateegiad. Alzheimeri tõve ajakiri: JAD 20: S633, 2010.

11. Sonnen JA, Breitner JC, Lovell MA, Markesbery WR, Quinn JF ja Montine TJ: Vabade radikaalide poolt vahendatud ajukahjustus Alzheimeri tõve ja selle transgeensete hiiremudelite korral. Free Radical Biology and Medicine 45: 219-230, 2008.

12. Lin MT ja Beal MF: mitokondriaalne düsfunktsioon ja oksüdatiivne stress neurodegeneratiivsete haiguste korral. Nature 443: 787-795, 2006.

13. Trushina E ja McMurray C: oksüdatiivne stress ja mitokondriaalne düsfunktsioon neurodegeneratiivsete haiguste korral. Neuroscience 145: 1233-1248, 2007.

14. Huang SH, Lin CM ja Chiang BH: Angelica Sinensise ekstrakti kaitsev toime amüloid-peptiidist põhjustatud neurotoksilisusele. Phytomedicine 15: 710-721, 2008.

15. Burhans WC ja Heintz NH: rakutsükkel on redokstsükkel: faasispetsiifiliste sihtmärkide sidumine raku saatusega. Free Radical Biology and Medicine 47: 1282-1293, 2009.

16. Xue HY, Gao GZ, Lin QY, Jin LJ ja Xu YP: aukubiini kaitsev toime HO-indutseeritud apoptoosile PC12 rakkudes. Fütoteraapia

18. Liu, Fx Wang, Xw Luo L ja Xin H, Na B ja Wang Xf: Tistanche glükosiidide mõju õppimisele ja mälule beeta-amüloidpeptiidist põhjustatud Alzheimeri tõve korral hiirtel ja selle võimalik mehhanism. Hiina farmakoloogiline bülletään 22: 595, 2006.

19. Bao B, Tang X, Tian H, Tong Y, Wu W ja Hong Y: kõrbes elava Cistanche tubulosa (Schrenk) ekstraktide antioksüdantne aktiivsus R. Wright Shanghai J Tradit Chin Med 44: 68-71, 2010 .

20. Jiang Y, Li S, Wang Y, Chen X ja Tu P: Herba Cistanches'ide eristamine sõrmejälgede järgi kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia-dioodide massiivituvastus-massispektromeetriaga. Journal of Chromatography A 1216: 2156-2162, 2009.