Juuste etüülglükuroniidi kõrgem tase neerufunktsiooni langusega patsientidel

ali.ma@wecistanche.com

Gudrun Høiseth et al

Taust:Juuste taseetüülglükuroniid(EtG) kasutatakse sageli sotsiaalse joomise eristamiseks raskest joomisest. Patsiendid, kellel on vähenenudneerudfunktsioonion hilinenud EtG eritumine ja võib kahtlustada suurenenud juustesse sattumist. Selle uuringu eesmärk oli võrrelda juuste EtG taset vähenenud patsientidelneerudfunktsioonitervete vabatahtlike puhul.

Meetodid:Kaasati 12 neeruhaigusega patsienti. EtG tase juustes kohandati hinnangulisele päevasele etanooli tarbimisele (EDI) ja võrreldi 21 varem avaldatud terve inimesega.

Tulemused:Juuste EtG tase 12 patsiendil jäi vahemikku < avastamispiir="" ja="" 134="" pg/mg="" ning="" edi="" jäi="" vahemikku="" 0,1="" kuni="" 12="" g.="" etg="" tase="" juustes="" oli="" patsientidel="" oluliselt="" kõrgem="" kui="" tervetel="" vabatahtlikel="" (p="">

Järeldused:Need esialgsed tulemused näitavad, et EtG juuste tase vähenenud patsientide populatsioonisneerudfunktsioonituleks tõlgendada ettevaatusega.

Võtmesõnad:alkohol, biomarker,EtüülGlükuroniid.

Cistanche parandamise eestneerudfunktsiooni

Neeruhaiguste korral klõpsake Cistanche tubulosa ja Cistanche deserticola ma

TASEMEDetüülglükuroniid(EtG) juustes kasutatakse pikaajalise alkoholitarbimise markerina ning proksimaalses 3-cm juuksesegmendis on soovitatud piirväärtust 30 pg/mg, et tuvastada kõrget päevast alkoholitarbimist. alkoholi (üle 60 g/päevas; Potgieter, 2000) viimase 3 kuu jooksul (Alt et al., 2000; Morini et al., 2009). Seni on kõik avaldatud artiklid näidanud, et EtG juustes näitab kroonilise raske alkoholitarbimise tuvastamiseks parimat diagnostilist tundlikkust ja spetsiifilisust võrreldes teiste traditsiooniliste etanooli (EtOH) biomarkeritega. Ainult juuste töötlemine, nagu värvimine või pleegitamine, võib EtG määramist negatiivselt mõjutada, samas kui kõik muud hinnatud parameetrid (vanus, sugu, juuksevärv jne) ei paista EtG usaldusväärsust mõjutavat (Morini et al., 2010).

Hiljuti näitasime EtG ja EtS-i uriini tuvastamise pikenemist vähenenud patsientidelneerudfunktsiooni(Hoiseth et al., 2012). Kuna EtG ja etüülsulfaadi (EtS) peamine eliminatsioonitee on eritumine neerude kaudu, tähendab see, et pärast identset alkoholitarbimist võib selles patsientide populatsioonis täheldada suuremat EtG ja EtS kontsentratsiooni veres võrreldes tervete vabatahtlikega. Seda olukorda täheldati ka ühel neeruhaigusega patsiendil eelmises uuringus (Hoiseth et al., 2009). Kõrgem EtG tase veres võib kaasa tuua rohkem juustesse sisenemist ja sellest tulenevalt kõrgemat EtG taset selles maatriksis. Selle uuringu eesmärk oli seega uurida, kas EtGini patsientide juuste tase langesneerud funktsioonierines tervetel vabatahtlikel täheldatust.

MATERJALID JA MEETODID

Uuringuprotokoll

Nondialyzed renal disease patients were recruited from the renal failure clinic at Akershus University Hospital, Lørenskog, Norway. Inclusion criteria were serum creatinine value >90 lmol/L in women and >100 lmol/l meestel (Rustad et al., 2004), hinnanguline glomerulusfiltratsiooni kiirus (GFR)<60 ml/min/1.73="" m2="" (automatically="" calculated="" from="" creatinine="" using="" the="" modification="" of="" diet="" in="" renal="" disease="" formula="" including="" age="" and="" sex;="" rule,="" 2007),="" and="" a="" diagnosis="" of="" decreased="">neerud funktsioonipatsiendi päevikus. Meie uuringusse kaasati ainult mõõdukalt alkoholi tarvitavad patsiendid, mille kiitis heaks Norra riiklik teaduseetika komitee, Norra tervishoiudirektoraat ja Akershusi ülikooli haigla kohalik eetikakomitee. Kõik patsiendid allkirjastasid enne uuringus osalemist teadliku nõusoleku.

EtOH hinnanguline päevane tarbimine (EDI; arvutatud ajaskaala järeltesti põhjal) viimase 3 kuu jooksul saadi, küsitledes patsiendi hoolitsust tavapärasel päeval tarbitava joogi tüübi ja koguse kohta. Infot saadi ka patsientide haiguslugudest. See hõlmas diagnoose, seerumi kreatiniini väärtust ja hinnangulist GFR-i kui individuaalse neerufunktsiooni objektiivseid mõõtmisi. Samuti koguti aspartaataminotransferaasi (AST), alaniinaminotransferaasi (ALT) ja gamma-glutamüültransferaasi (GGT) väärtused kui objektiivsed mõõdud võimaliku alkoholi ületarbimise kohta. Igalt patsiendilt koguti juuksed, lõigates juukseproovi võimalikult naha lähedalt. EtG analüüsiks esitati 3-cm proksimaalne juuksesegment, mis esindab ligikaudu viimast 3 kuud. Nende patsientide tulemusi võrreldi 21 varem avaldatud terve vabatahtlikuga (Politi et al., 2006).

Cistancheparandamiseksneerud funktsiooni

Analüütilised meetodid

EtG juustes määrati varem avaldatud meetodi abil (Morini et al., 2006). Lühidalt, umbes 100 mg juukseid pesti kahe erineva orgaanilise lahustiga (diklorometaan ja metanool), kuivatati lämmastikuvoolu all ja lõigati väikesteks tükkideks (1 kuni 2 mm pikkused segmendid). Seejärel leotati proove 700 l penta-deutereeritud deioniseeritud vees.etüülglükuroniid(D{{0}}EtG) sisestandardina ja inkubeeriti üleöö toatemperatuuril. Järgmisel päeval töödeldi neid ultraheliga 2 tundi ja tsentrifuugiti 10 8009 g juures. Lõpuks süstiti vedelikkromatograafia-tandem-massispektromeetria süsteemi 8 l. Kromatograafiline eraldamine viidi läbi pöördfaasilises isokraatlikus režiimis, kasutades liikuvat faasi, mis sisaldas väga suurt veeprotsenti (0,1% sipelghapet pluss 1% atsetonitriili). Massispektromeetrit kasutati mitmes reaktsiooni jälgimise režiimis ning negatiivset polarisatsiooni ja kahte erinevat üleminekut kasutati EtG ja D5-EtG tuvastamiseks. Kvantifitseerimise eesmärgil kasutati kalibreerimiskõverat vahemikus 3 kuni 200 pg/mg. Avastamispiir (LOD) oli 2 pg/mg ja kvantifitseerimise alumine piir oli 3 pg/mg.

Statistika

Erinevusi EtG juuste taseme vahel patsientidel ja tervetel vabatahtlikel uuriti mitmekordse lineaarse regressioonianalüüsi abil, kasutades kovariaadina EDI-d. Rühmadevahelise erinevuse p-väärtused on antud (annustele kohandatud). P-väärtust alla 0,05 peeti oluliseks. EtG ja GFR või seerumi kreatiniini juuste tasemete vahelist korrelatsiooni hinnati Spearmani mitteparameetrilise astme korrelatsioonitesti abil.

TULEMUSED

Kaasati 12 patsienti (8 meest ja 4 naist). Keskmine vanus oli 64 aastat (vahemik 42 kuni 84) ja keskmine kehamassiindeks 26,2 kg/m2 (vahemik 18,9 kuni 29,4). Kõik 3 vähenemise kriteeriumineerudfunktsiooniesinesid kõigil patsientidel. Seerumi kreatiniinisisalduse keskmine väärtus oli 189 lmol/l (vahemikus 130 kuni 670). Keskmine hinnanguline GFR oli 29,2 ml/min/1,73 m2 (vahemikus 8,0 kuni 54,0) ja kõikidel isikutel oli nende haigusloos diagnoositud neerufunktsiooni langus. Kõigil katsealustel oli ALT, AST ja GGT normi piires (50 U/L ALT ja AST puhul, 60 U/L GGT puhul; Klaukeet al., 1993; Rustad et al., 2004; Szasz, 1974)

Juuste EtG tase 12 patsiendil jäi vahemikkuneerudfunktsiooni. See on näidatud tabelis 1. Varem avaldatud 21 tervel vabatahtlikul, keda kasutati võrdluseks, jäi juuste EtG vahemikku

Patsientidel, kellel on vähenenudneerudfunktsiooni(n {0}}), esines oluline korrelatsioon juuste EtG taseme (korrigeeritud EDI jaoks) ja GFR vahel (Spearmani ρ=0,61, p=0,036 ). Korrelatsioon juuste EtG (korrigeeritud EDI) ja seerumi kreatiniini vahel oli mõnevõrra nõrgem ega olnud statistiliselt oluline (Spearmani ρ=0.53, p=0.076).

ARUTELU

See uuring näitas, et sotsiaalsete jookide hulgas on EtG tase juustes kõrgem vähemalt mõnel vähenenud patsiendil.neerudfunktsioonivõrreldes tervete vabatahtlikega. Seda eeldust vajavad ka juuste EtG taseme ja GFR tugevuse seos.

EtG kõrgema taseme leidmine juustes selles patsientide rühmas eeldati teoreetilistest kaalutlustest lähtuvalt, kuid autorite teadmiste kohaselt ei ole seda varem käsitletud. Terves populatsioonis näitavad varasemad uuringud, et väga vähestel sotsiaalsetel joodikutel on juuste EtG väärtus kõrgem kui alkoholi rohke tarbimise korral soovitatud piirväärtus (30 pg/mg; Alt et al., 2000; Appenzeller et al., 2007a; Politi jt. , 2006; Pragst ja Yegles, 2008; Yegles et al., 2004). Praegusel populatsioonil olid EDI väärtused palju alla alkoholi joomise künnise, kuid 3 patsiendil oli EtG juuste tase endiselt suur, mis viitab suurele alkoholitarbimisele. Lisaks võib ette kujutada, et neeruhaigusega patsiendid, kes tarbivad rohkem, kuid siiski sotsiaalse joomise määratluse piires, võivad sagedamini ületada 30 pg/mg taset ja neid liigitatakse valesti alkoholijoobes. Samuti võib EtG taseme mõõtmine juustes viia vale järelduseni suurema alkoholitarbimise kohta patsientidel, kellel on nõutav väga väike alkoholitarbimine (nt neerusiirdamise korral).

Selle uuringu esimene nõrkus on patsientide väike arv. See oli tingitud patsientide rühma suurusest ja tegelikust kliinilisest seisundist ning selle rühma üldisest soovitusest hoiduda alkoholi tarbimisest. Käesolevat tööd tuleb käsitleda kui eelraportit ja tulemuste kinnitamiseks on vaja suuremaid uuringuid. Teisest küljest võib tõsiasi, et juuste EtG tase nii piiratud arvul patsientidel oli tervete vabatahtlikega võrreldes oluliselt kõrgem, viidata sellele, et erinevused on olulised. Käesoleva uuringu teine ​​nõrkus on see, et patsiendid tarbisid väikeses päevases koguses alkoholi, mille tulemuseks oli juuste EtG väärtus alla LOD 7-l 12-st osalejast. See võis olla tingitud sellest, et patsiendid järgisid kliinilist nõuannet vähendada alkoholitarbimist neeruhaiguse tõttu. Võimalik on ka EDI alaraporteerimine. Teisest küljest kasutati selle veaallika minimeerimiseks valideeritud küsimustikku ja sama küsimustikku kasutati ka eelmises võrdluseks kasutatud uuringus. Samuti näitasid AST, ALT ja GGT väärtused võrdlusväärtuste piires vähemalt seda, et patsientide hulgas ei olnud alkoholi joojaid. Lisaks võrdlesime käesolevas uuringus Norra patsientide tulemusi Itaalia tervete vabatahtlikega. See võib tähendada ebakindlust tõlgendamise osas, kuid varasemad aruanded näitavad, et erinev pigmentatsioon ei mõjuta EtG tulemusi juustes (Appenzeller et al., 2007b). Samuti kasutati sama analüüsimeetodit.

Arvestades juuste EtG-l põhineva alkoholitarbimise valepositiivse diagnoosi võimalikke tagajärgi neeruhaigusega patsientidel, tuleks teha täiendavaid uuringuid, et saada rohkem teavet alkoholitarbimise, neerupuudulikkuse astme ja juuste taseme vahelise seose kohta.

TUNNUSTUS

Autorid on tänulikud dr Eirik Pettersenile Akershusi ülikooli haiglast patsientide värbamisel abi eest.

Cistancheparandamiseksneerudfunktsiooni

VIITED

Alt A, Janda I, Seidl S, Wurst FM (2000) Määramineetüülglükuroniidjuukseproovides. Alkohol 35:313–314.
Appenzeller BM, Agirman R, Neuberg P, Yegles M, Wennig R (2007a) Segmental determination of ofetüülglükuroniidjuustes: pilootuuring. Forensic Sci Int 173:87–92.
Appenzeller BM, Schuman M, Yegles M, Wennig R (2007b)Etüülglükuroniidkontsentratsiooni juustes ei mõjuta pigmentatsioon. Alkohol 42:326–327.
Hoiseth G, Morini L, Polettini A, Christophersen A, Morland J (2009) Blood kinetics ofetüülglükuroniidja etüülsulfaat alkoholist võõrutusravi ajal rohketel joodikutel. Forensic Sci Int 188:52–56.
Høiseth G, Nordal K, Pettersen E, Mørland J (2012) EtG ja EtS pikenenud uriini tuvastamise ajad vähenenud neerufunktsiooniga patsientidel. Alcohol Clin Exp Res [Epub enne trükist].
Klauke R, Schmidt E, Lorentz K (1993) Soovitused standardsete ECCLS protseduuride läbiviimiseks (1988) kreatiinkinaasi, aspartaataminotransferaasi, alaniinaminotransferaasi ja gamma-glutamüültransferaasi katalüütiliste kontsentratsioonide jaoks temperatuuril 37 kraadi C. Saksa Ühingu standardimiskomitee. kliinilise keemia jaoks, Saksamaa Kliinilise Keemia Seltsi ensüümide töörühm. Eur J Clin Chem. Clin Biochem 31:901–909.
Morini L, Politi L, Groppi A, Stramesi C, Polettini A (2006) Determination ofetüülglükuroniidjuukseproovides vedelikkromatograafia/elektropihustus-tandem-massispektromeetria abil. J Mass Spectrom 41:34–42.

Morini L, Politi L, Polettini A (2009)Etüül glükuroniidjuustes. Tundlik ja spetsiifiline kroonilise rohke joomise marker. Sõltuvus 104:915–920.

Morini L, Zucchella A, Polettini A, Politi L, Groppi A (2010) Valgendamise mõjuetüülglükuroniidjuustes: in vitro katse. Forensic Sci Int 198:23–27.

Politi L, Morini L, Leone F, Polettini A (2006)Etüülglükuroniidjuustes: kas see on kroonilise kõrge alkoholitarbimise usaldusväärne marker? Sõltuvus 101:1408–1412.

Potgieter A (2000) Teadus, praktika ja patsient vajavad Plinius Maiori Seltsi tööd. Alkohol 35:16–24.

Pragst F, Yegles M (2008) Rasvhapete etüülestrite (FAEE) määramine jaetüülglükuroniid(EtG) juustes: paljutõotav viis alkoholi kuritarvitamise retrospektiivseks tuvastamiseks raseduse ajal? Ther Drug Monit 30:255–263.

Reegel AD (2007) Hinnangulise glomerulaarfiltratsiooni kiiruse mõistmine: mõju kroonilise neeruhaiguse tuvastamisele. Curr Opin Nephrol Hypertens 16:242–249.
Rustad P, Felding P, Franzson L, Kairisto V, Lahti A, Martensson A, Hyltoft PP, Simonsson P, Steensland H, Uldall A (2004) The Nordic Reference Interval Project 2000: soovitatav võrdlusvahemikud 25 ühise biokeemilise omaduse jaoks. Scand J Clin Lab Invest 64:271–284.
Szasz G (1974) Uued substraadid gamma-glutamüültranspeptidaasi aktiivsuse mõõtmiseks. Z Klin Chem Klin Biochem 12:228.
Yegles M, Labarthe A, Auwarter V, Hartwig S, Vater H, Wennig R, Pragst F (2004) Võrdlusetüülglükuroniidja rasvhapete etüülestri kontsentratsioon alkohoolikute, sotsiaalsete jookide ja alkoholitarbijate juustes. Forensic Sci Int 145:167–173.