Albumiin ja megaliin, mida peate teadma

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ⅱ osa: Albumiini töötlemine neerude kaudu – varajastest leidudest praeguste kontseptsioonideni

Jakub Gburek, Bogusława Konopska ja Krzysztof Goł ˛ab

OSADEKS KLIKI SIIA Ⅰ // OSADEKS KLIKI SIIA Ⅲ

cistanchesaab ravidaneerudhaigusparandadaneerufunktsioon

3.3. Cubilin

Cubilintuvastati kuialbumiinretseptor, Birn et al. aastal 2000 [64]. Autorid isoleerisidkubiliinroti neeru pintsli membraanidelt, kasutades afiinsuskromatograafiat immobiliseeritud albumiiniga. Nad määrasid ka kompleksi dissotsiatsioonikonstandi pinnaplasmonresonantsi abil (Kd=0,63 uM) ja näitasid, et sisearetatud koerad, kellel olikubiliinja inhibeeritud hiiredmegaliinekspressioon eritavad uriiniga märkimisväärses koguses albumiini. Lisaks näitasid nad ka mõlema retseptori vastastikust koostoimet albumiini endotsütoosi korral.

Cubilinon ekstratsellulaarne glükoproteiin, mille molekulmass on umbes 460 kDa. Algselt identifitseeriti see teratogeensete antikehade antigeenina, mis tekkisid küülikutel pärast neeruharja serva süstimist. Algselt tuntud kui glükoproteiin 280 (gp280), paiknes see proksimaalsetes neerutuubulites ja munakollase epiteelis. Selle ekspressiooni leiti ka niudesooles, emakas ja platsentas. Algselt ei omistatud sellele valgule ligande. Hilisemad uuringud näitasid sedakubiliinoli identne peensooles leiduva sisemise faktori-vitamiini B12 (IF-B12) kompleksi retseptoriga. Sellele määrati retseptorvalgu funktsioon [65]. Inimenekubiliingeen asus 10p12.{2}}p13 kromosoomis. See valk koosneb 110 aminohappelisest N-terminaalsest osast, millele järgneb 8 epidermaalse kasvufaktori sarnase (EGF-i sarnase) domeeni ja 27 domeeni, mis on sarnased komplemendi C1r/C1s, epidermise kasvufaktoriga seotud merisiiliku valguga (Uegf). ) ja luu morfogeenne valk1 (CUB).Cubilinei oma transmembraanset domeeni. N-ots vastutab valgu membraani kinnitumise eest. Iga CUB domeen koosneb 110 aminohappejäägist. CUB domeenide struktuur koosneb kahest kihist viiest antiparalleelsest lehest, mis on samuti ühendatud -struktuuridega. Need moodustavad molekuli kõige konservatiivsema piirkonna ja vastutavad ligandi sidumise eest. Lisaksalbumiinja IF-B12, rauda sisaldavad valgud (transferriin, hemoglobiin, müoglobiin), apolipoproteiin Al ja D-vitamiini siduv valk võivad samuti olla seotud 56,59,66,67I. In vitro ekspresseeritud albumiini seondumise analüüskubiliinfragmendid võimaldasid tuvastada sidumissaite CUB domeenides 6-8 [68]. Tõenäoliselt kattuvad need kohad osaliselt hemoglobiini sidumissaitidega, nagu on näidatud konkurentsiuuringus, milles kasutati HK-2 rakke (inimese neeru proksimaalne tuubul, täiskasvanud mees, papilloom on immortaliseeritud) [69].

Cubilinei ole täielikult sõltumatu endotsüütide retseptor. Membraani õigeks lokaliseerimiseks ja stabiilsuseks peab see suhtlema AMN-valguga. Lisaks sellele vastutab see valkkubiliininternaliseerimine. Hiljuti näidati, et FXNPXF järjestus AMN tsütoplasmaatilises domeenis on funktsionaalselt aktiivne ja vahendab kompleksi sekvestreerimist, toimides interakteerudes adaptervalkudega: puudega valk -2 (Dab2) ja autosomaalne retsessiivne kolesteroolivalk (ARH). CUBAM-i sisestamine võib toimuda ka seose kaudumegaliin[55,70]. Megaliintundub, et vastutabkubiliinrakumembraani säilitamine. Samaaegne eralduminekubiliinmembraanist ja selle kadu uriiniga leiti Donnai-Barrow/FOAR sündroomiga (Facio-Oculo-Acustico-Renal Syndrome) patsiendil selle retseptori geeni funktsionaalse mutatsiooni tõttu, mis põhjustab selle tsütoplasmaatilist retentsiooni [71].

CUBAM-i peamine roll torukujulisesalbumiinomastamist demonstreeriti hiljutistes uuringutes hiirtel, kellel esines neeruspetsiifiline väljatõrjuminekubiliinjamegaliin, mille puhul täheldati mõõdukat tubulaarset albuminuuriat [54,72]. Seda tähelepanekut kinnitas ka mutatsioonist põhjustatud Imerslund-Gräsbecki sündroomiga patsientide geneetiline ja fenotüübiline analüüs.kubiliinvõi AMN geen. Mõlemal juhul albumiin ja teised ligandidkubiliinolid uriiniga kadunud [58].

Huvitaval kombelkubiliinjamegaliinon tuvastatud ka roti ja inimese glomerulites vastavalt mustrile, mis sarnanebmegaliin. Cubilinnäitas podotsüütides nii pinna- kui ka intratsellulaarset ekspressiooni [73]. Enamgi veel,kubiliinmRNA ekspressioon tuvastati mesangiaalsetes rakkudes, kuid amnioni puudumine viitas sellelekubiliinei ole nendes rakkudes täielikult funktsionaalne. Sellegipoolestalbumiinendotsütoos oli indutseeritava all oluliselt kahjustatudmegaliinknockdown tingimused stabiilselt transdutseeritud mesangiaalrakkudes |74]. Need leiud võivad olla olulised glomerulite patoloogiate paremaks mõistmiseks.

cistanche meessoost eelised

3.4. Megaliin

Megaliintuvastati kuialbumiinretseptor Cui et al. aastal 1996 [75]. Uuring viidi läbi in vivo, süstides rottide proksimaalsetesse tuubulitesse kolloidse kulla või 125I joodi isotoobiga märgistatud albumiini lahuseid. Katses määrati paljude ühendite mõju nende valkude tubulaarsele omastamisele. Retseptoriga seotud valgu (RAP), vähendatud tsütokroom C ja gentamütsiini manustamine inhibeeris täielikult märgistatud albumiini tubulaarset reabsorptsiooni. Neid ligande iseloomustab kõrge afiinsusmegaliin, ja nende olemasolu takistab tõhusalt albumiini seondumist selle retseptori kaudu. Sama kehtis EDTA kohta, mis on Ca2 pluss ioonide kelaat, mis samuti pärssis omastamist. See viitas sellelemegaliinaitab kaasa selle valgu tubulaarsele reabsorptsioonile. Neid järeldusi kinnitati afiinsuskromatograafiaga immobiliseeritud kolonnismegaliin.

Megaliinalgselt avastati antigeenina Heymanni tüüpi membraanse nefropaatia korral ja seda nimetati glükoproteiiniks 330 (gp 330). Aastal 1994, pärast edukat kloonimiskatset, oli selle struktuur paremini tuntud ja nimi muudeti praegu kasutatavaks [76. Inimenemegaliingeen asus kromosoomil 2g24-g31.Megaliinon suur transmembraanne valk, mis kuulub madala tihedusega lipoproteiini retseptorite perekonda. Proksimaalsetes tuubulites,megaliinleidub apikaalses membraanis ja klatriiniga kaetud endotsüütilistes vesiikulites. Selle valgu molekulmass on 600 kDa ja see koosneb umbes 4600 aminohappejäägist. ThemegaliinMolekul sisaldab suurt N-terminaalset ekstratsellulaarset domeeni, ühte transmembraanset domeeni ja lühikest C-terminaalset tsütoplasmaatilist fragmenti. Ekstratsellulaarsel domeenil on neli tsüsteiinirikast piirkonda ja see vastutab ligandide sidumise eest. Mitmed epidermaalse kasvufaktoriga (EGF) sarnase järjestuse kordused ja YWTD motiivi sisaldav tsüsteiinivaene fragment eraldavad ligandi siduva piirkonna kinnisosast. Signaaljärjestus vastutab ligandi dissotsiatsiooni eest happelises endosoomikeskkonnas. Tsütoplasmaatiline osa sisaldab kolme NPXY motiivi, mis käivitavad albumiini endotsütoosi protsessi, kontsentreerides retseptorid kaetud süvenditesse puudega valgu-2(Dab2) adaptervalgu kaudu [77]. Selle adapteri värbamine sõltub omakorda fosforüülimisest, mida katalüüsivad proteiinkinaasid B (Aktl ja Akt2) [78, 79].

Megaliinon ka võime siduda paljusid teisi valke. Selle ligandide hulka kuuluvad lisaks albumiinile muuhulgas: apolipoproteiinid (B, E, HD), vitamiini transportivad valgud (A, D, B12), hormoonid (angiotensiin I, epiteeli kasvufaktor, leptiin), ensüümid ja nende inhibiitorid (lüsosüüm, plasminogeen). ja teised [80]. Albumiini puhul ei ole retseptori molekuli seondumiskohti veel kaardistatud. Samuti sisestab see CUBAM-i kompleksi ja selle ligandid, sealhulgas albumiini. Moodustunud kompleksid sisestatakse varajaste endosoomide moodustumisega. Pärast endosoomikeskkonna hapestumist kompleks dissotsieerub ja vaba retseptor suunatakse tihedate apikaalsete tuubulite kaudu uuesti rakupinnale [59, 66, 67, 81].

Tasub mainida, et kõrge glükoosisisaldus reguleeribmegaliin-vahendatud albumiini endotsütoos neerude proksimaalsetes tuubulite rakkudes. Kõrgenenud plasma glükoosisisaldus pärssismegaliinekspressiooni ja sellest tulenevalt albumiini endotsütoosi [61].

cistanche meessoost eelised

3.5. Immunoglobuliini fragmendi vastsündinute Fc retseptor

Hiljutised uuringud neerude albumiini imendumise kohta näitavad vastsündinute Fc retseptori (FcRn) olulist rolli albumiini taastumise protsessis filtraadist ja kaitstes seda valku rakusisese lagunemise eest. FcRn on heterodimeerne transmembraanne valk, mis sarnaneb oma struktuurilt peamiste histo-ühilduvuskompleksi (MHC) I klassi molekulidega. See on levinud endoteeli- ja epiteelirakkudes. Selle olemasolu kinnitati glomerulaarsetes podotsüütides ja proksimaalsetes tuubulites. Sellel on happelises keskkonnas (pH 5-6) võime iseseisvalt siduda albumiini ja immunoglobuliinide IgG-d. pH väärtuse tõus üle 7 toob kaasa ligandide vabanemise retseptorist [82]. FcRn podotsüütides esineb happelisse endosomaalsesse sektsiooni kuuluvates vesiikulites ja vastutab glomerulaarse kapillaaride endoteeli kaudu filtreerimisruumi läbinud immunoglobuliinide ja albumiini sidumise eest. Filtreeritud valgud imenduvad podotsüütide poolt läbi endotsütoosi ja/või pinotsütoosi ning seejärel seotakse endosoomide happelise pH juures FcRn-ga. Valkudega koormatud endotsüütilised vesiikulid läbivad transtsütoosi Bowmani kapsli valendiku suunas. Suureneva pH tingimustes valgu-retseptori kompleks dissotsieerub ja puutumatu valk vabaneb rakust primaarsesse filtraati. See protsess peaks kaitsma kitsaid filtreerimispilusid suurte valkudega ummistumise eest [83,84]. Osa albumiinist, mis on filtreeritud ja reabsorbeeritud proksimaalsetes tuubulites, ei lagune tubulaarse epiteeli lüsosoomides ja tõenäoliselt taastub see transtsütoosi protsessis. Selles teoreetilises mudelis seob FcRn albumiini, mis vabaneb selle retseptoritest, arvatavastimegaliin/kubiliinkompleks happelises endosoomikeskkonnas ja seejärel suunatakse transtsütoosi kaudu tubulaarsete epiteelirakkude basaalkohta, kus see vabaneb pH suurenemise tagajärjel interstitsiaalsesse koesse [85]. Kuigi praeguste uurimistulemuste valguses toimub albumiini taastumine transtsütoosi teel, mis hõlmab FcRn-i proksimaalsetes tuubulites, on see normaalse albumiini homöostaasi jaoks organismis marginaalne [56].

cistanche meessoost eelised