Kontakt:jerry.he@wecistanche.com

Ana Merino-Ribas1,2,3,4 · Ricardo Araujo4 · Ioana Bancu1,2 · Fredzzia Graterol1,2 · Andrea Vergara5 · Marc Noguera-Julian5 · Roger Paredes5 · Jordi Bonal2 · Benedita Sampaio-Maia4,6

Saabunud: 23.06.2021 / Vastu võetud: 8.12.2021

© Autor(id) 2021

Cistanche võib parandada neerufunktsiooni

Abstraktne

Eesmärk On tõestatud, et kroonilise haigusega patsientidel on soolestiku mikrobioom muutunudneerudhaigus. See aitab kaasa kroonilisele põletikule ning suurendab kardiovaskulaarset riski ja suremust, eriti hemodialüüsi saavatel. Fosfaadi sidujad võivad potentsiaalselt esile kutsuda muutusi nende mikrobioomis. Selle uuringu eesmärk oli võrrelda muutusi kaltsiumatsetaadiga ravitud hemodialüüsi saavate patsientide soolestiku mikrobioomis ja sahharoferrioksühüdroksiidiga ravitud patsientidega.

Meetodid 12 hemodialüüsi saavatele patsientidele jaotati 5 kuuks kaltsiumatsetaati või sahharoferri oksühüdroksiidi. Vereproovid (biokeemiliseks analüüsiks) ja väljaheiteproovid (mikrobioomi analüüsiks) koguti algtasemel, 4, 12 ja 20 nädalat pärast ravi alustamist. Väljaheite DNA ekstraheeriti ja konstrueeriti 16S rRNA sekveneerimise raamatukogu, mis oli suunatud V3 ja V4 hüpervarieeruvatele piirkondadele.

Tulemused Kliiniliste muutujate ja laboratoorsete parameetrite osas ei täheldatud statistiliselt olulisi erinevusi kaltsiumatsetaadi või sahharafarroksühüdroksiidi rühmade vahel. Väljaheiteproovide analüüsimisel leidsime, et kõik patsiendid olid omavahel erinevad (p=0,001) ja need erinevused säilisid 20 ravinädala jooksul. Mikroobsete profiilide rühmitusanalüüs rühmitas sama patsiendi proovid sõltumata ravist ja ravi staadiumist.

ravi.

Järeldus Need tulemused viitavad sellele, et 5-kuuline ravi kaltsiumatsetaadi või sahharaferrioksühüdroksiidiga ei muutnud hemodialüüsi saavatel patsientidel algtaseme mitmekesisust ega algtaseme bakterite koostist, samuti nende patsientide soolestiku mikrobioomi suure varieeruvuse osas.

Märksõnad Soolestiku mikrobioom · Krooniline neeruhaigus · Hemodialüüs · Fosfaadi sidujad · Sukroferrioksühüdroksiid ·

Kaltsiumatsetaat

Sissejuhatus

Kroonilineneerudhaigus (CKD) on ülemaailmne rahvatervise probleem, mille levimus suureneb, majanduslik koormus on kõrge ning haigestumus ja suremus on suurenenud [1].

Kroonilise neeruhaigusega patsientide puhul mängib olulist rolli kardiovaskulaarne patoloogia. Nendel patsientidel on suurem risk haigestuda südame-veresoonkonna haigustesse (CVD) ja kardiovaskulaarse suremuse määr on 30 korda kõrgem kui üldpopulatsioonil [2]. Lisaks traditsioonilistele kardiovaskulaarsetele riskifaktoritele, mis on kroonilise neeruhaigusega patsientidel enam levinud kui üldpopulatsioonis, võib kroonilise neeruhaiguse ja südame-veresoonkonna haiguste vahelist seost seletada luu- ja mineraalainete häirete, hüdratatsiooniseisundi ja põletikuga. et meie patsiendid arenevad.

Tavalistes tingimustes on põletik kaitsev ja füsioloogiline reaktsioon erinevatele kahjulikele stiimulitele. Kuid mitmete nõrgestavate häirete, näiteks kroonilise neeruhaiguse korral muutub põletik kahjulikuks ja püsivaks [3]. On hästi teada, et kroonilise neeruhaigusega kaasneb püsiv põletikuline seisund [4, 5]. Põletik on tõenäoliselt mitmefaktorilise etioloogia tagajärg ja interakteerub mitmete teguritega, mis ilmnevad ureemiliste toksiinide kogunemisel, ning seda on kirjeldatud kardiovaskulaarse ja kogusuremuse ennustajana [6]. Lisaks on üha rohkem tõendeid, mis toetavad soolebarjääri düsfunktsiooni ja soolestiku mikrobiota koostise muutusi kroonilise neeruhaiguse korral, mida tavaliselt nimetatakse soolestiku düsbioosiks [7–9]. See düsbiootiline seisund tekitab samaaegselt toksilisi kõrvalsaadusi ja aitab kaasa oksüdatiivse stressi ja põletiku kroonilisele seisundile nendel patsientidel [10–12].

Kaugelearenenud kroonilise neeruhaigusega patsientidel soodustavad soolestiku mikroobset düsbioosi mitmed tegurid. Karbamiidi kogunemine kehavedelikesse ja selle difusioon seedetraktis põhjustab ureaasi omavate bakterite laienemist. Samuti tekitab uurea hüdrolüüs tooteid, mis lagundavad epiteeli tihedat ühenduskohta, hõlbustades seeläbi endotoksiinide ja mikroobide fragmentide translokatsiooni süsteemsesse vereringesse [7, 8, 10, 13–15]. Toitumissoovitused kroonilise neeruhaiguse korral, sealhulgas piiratud kaaliumi, fosfaadi, naatriumi ja valkude tarbimine, põhjustavad vähesel määral kääritatavate süsivesikute tarbimist ja see võib viia proteolüütiliste liikide laienemiseni ja bakteriaalsete toksiinide suurenenud tekkeni [12, 13, 16]. Lisaks seostatakse kroonilise neeruhaigusega patsiente sageli teiste kaasuvate haigusseisunditega, nagu diabeet, autoimmuunhaigused ja hüpertensioon. Kõik need kaasuvad haigused põhjustavad iseenesest soolestiku mikrobiota muutusi [17, 18].

Väga oluline düsbioosi soodustav tegur on ravimid. On hästi teada, et kaugelearenenud kroonilise neeruhaigusega patsiendid saavad tavaliselt polüravi. On näidatud, et meie patsientidel sageli kasutatavad raualisandid või antibiootikumid muudavad soolestiku mikrobioomi [19–21]. Teiste kroonilise neeruhaigusega patsientidel laialdaselt kasutatavate ravimite mõju soolestiku mikrobioomile on aga teadmata.

Enamikul hemodialüüsi saavatel patsientidel esineb hüperfosfateemia ja nad vajavad selle seisundi parandamiseks suuri annuseid erinevat tüüpi fosfaadi sidujaid. Fosfaadi sidujaid võib liigitada kaltsiumi ja mittekaltsiumipõhisteks fosfaadisideaineteks. On kirjeldatud, et mõlemad fosfaate siduvate ainete rühmad võivad potentsiaalselt põhjustada muutusi mikrobioomi koostises [22–25].

Hiljuti on hemodialüüsi saavatel isikutel hüperfosfateemia raviks heaks kiidetud uued mittekaltsiumipõhised fosfaati siduvad ained. Mõned neist uutest ainetest, nagu sahharaferrioksühüdroksiid (SFO) ja raudtsitraat, hoiavad oma koostises rauda. Arvatakse, et arvestades raua kriitilist rolli mikroobide kasvus ja virulentsuses, võib nende ravimitega manustatud suur rauakoormus muuta soolestiku mikrobioomi koostist [26, 27]. Sellegipoolest on endiselt vähe tõendeid nende uute fosfaadi sidujate mõju kohta soolestiku mikrobioomile [25].

Arvestades muutunud soolestiku mikrobioomi tähtsust kroonilise neeruhaigusega patsientidel ja selle panust nende põletikulisele seisundile ning teabe puudumist nende tänapäeval laialdaselt kasutatavate ravimite mõju kohta soolestiku mikrobioomile, otsustasime jälgida ja võrrelda soolestiku mikrobioomi muutusi. hemodialüüsi saavatel patsientidel, kes saavad SFO-d või kaltsiumipõhist fosfaati siduvat kaltsiumatsetaati (CA).

materjalid ja meetodid

Värbamine

Kaksteist Universitari Germans Trias i Pujoli haiglas hemodialüüsi saavatel patsientidel kutsuti meie uuringus osalema 5-kuulise järelkontrolliga. Kõik katsealused võeti tööle Universitari Germans Trias i Pujoli haigla hemodialüüsi osakonnast Badalonas, Hispaanias. Kõik patsiendid olid üle 18-aastased ja olnud hemodialüüsil vähemalt 1 aasta (4 tundi seanssi, 3 seanssi nädalas). Selle uuringu kiitis heaks Universitari Germans Trias i Pujoli haigla kliiniliste uuringute eetikakomitee (PI-16-169, NCT5551048) ja see vastas Helsingi deklaratsioonis sätestatud põhimõtetele. Kõik osalejad värvati vabatahtlikult pärast üksikasjaliku teabe saamist uuringuprotokolli kohta. Kõigilt patsientidelt saadi kirjalik teadlik nõusolek.

Välistamiskriteeriumide hulka kuulusid suutmatus anda teadlikku nõusolekut, seedetrakti haiguslugu, haiglaravi ja antibiootikumide tarbimine viimase 3 kuu jooksul.

Algtasemel koguti iga indiviidi kohta asjakohane kliiniline ja demograafiline teave. Kogutud kliinilised omadused olid: sugu, vanus, kroonilise neeruhaiguse etioloogia, kõrge vererõhu anamnees, suhkurtõbi, düslipideemia, südame-veresoonkonna haigused (perifeersete veresoonte haigus, isheemiline kardiomüopaatia või insult) ja vähk.

Samuti kogusime teavet nende veresoonte juurdepääsu ja nende varasema fosfaadisiduja ravi kohta uuringu alguses (üheksa said kaltsiumatsetaati, üks kaltsiumkarbonaati ja kahte ei ravitud varem hüperfosfateemiaga).

Jagasime patsiendid kahte rühma ja muutsime nende hüperfosfateemia ravi: 5 patsienti paigutati CA-rühma (4 jätkas CA-ravi ja 1 patsient vahetas kaltsiumkarbonaatravilt) ja 7 patsienti vahetati üle SFO-le (5 patsienti CA-ravilt ja 2 patsienti). fosfaate siduva ravi alustamine).

Näidiste kogumine

Väljaheiteproovid koguti 12 hemodialüüsi patsiendilt, kes said fosfaadi sidujaid, 5 CA rühmast ja 7 SFO rühmast. Samuti kogume vereproove meie hemodialüüsi osakonnas tehtud rutiinsetest kontrollidest. Proovid (vere- ja väljaheiteproovid) koguti 5-kuulise järelkontrolli käigus: algtasemel, 4, 12 ja 20 nädalat pärast ravi alustamist.

Vereproovides analüüsisime järgmisi parameetreid: hemoglobiin, ferritiin, transferriini küllastusindeks, kaltsium, fosfaat, paratüreoidhormoon, C-reaktiivne valk, settimise kiirus ja albumiin.

DNA ekstraheerimine, raamatukogu ehitamine ja sekveneerimine

Fekaal-DNA ekstraheeriti Powersoil DNA isolatsioonikomplektiga MoBio ja konstrueeriti 16S rRNA sekveneerimise raamatukogu, mis oli suunatud V3 ja V4 hüpervarieeruvatele piirkondadele.

Sekveneerimine viidi läbi MiSeq platvormil (2 × 300). OTU tabeli koostamine, taksonoomiline määramine ning kirjeldavad ja statistilised analüüsid viidi läbi R versiooni 3.4.2 abil. ja erinevad paketid (DADA 2, vega, ggplot, phyloseq) ja Greengenesi rRNA andmebaas.

Andmed ja statistiline analüüs

Primer v7 (PRIMER-e, Auckland, Uus-Meremaa) kasutati mitmekesisuse indeksite arvutamiseks, sarnasusprotsentide (SIMPER) analüüsiks ja mitme muutujaga analüüsiks, peamiselt sarnasuste analüüsiks (ANOSIM), ühesuunaliseks analüüsiks ja permutatsiooniliseks mitmemõõtmeliseks dispersioonanalüüsiks. PERMANOVA; kasutades ruutjuure teisendatud andmeid, Bray-Curtise sarnasusi ja 4999 jääkide permutatsiooni vähendatud mudeli alusel), mida kasutati beeta-mitmekesisuse olulisuse testimiseks. Nende analüüside jaoks kasutati OTU andmete protsenti proovi kohta, millele järgnesid ruutjuurte teisendatud andmed, sarnasusandmete tüüpide sarnasusmaatriksid, kasutades Bray-Curtise sarnasusi, lisades näiva väärtuse ja testides 4999 permutatsiooni. STAMPi kasutati proovirühmade taksonoomiliste profiilide analüüsimiseks ja statistiliste erinevuste arvutamiseks [28].

Kliiniliste andmete statistiliseks töötlemiseks kasutati MAC OS-i jaoks mõeldud statistilise analüüsi tarkvara Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 26.{1}}. Kategoorilisi muutujaid kirjeldati suhteliste sageduste ( protsentides ) kaudu, pidevaid muutujaid aga keskmist ± standardhälvet (SD) kasutades. Kategoorilisi muutujaid puudutavate hüpoteeside ja Studenti t-testi pidevate muutujate analüüsimiseks kasutasime vajaduse korral hii-ruudu sõltumatuse testi. Taset 0,05 peeti oluliseks.

Tulemused

Peamised kliinilised parameetrid ei erinenud algtasemel CA või SFO rühmadesse määratud patsientide vahel (tabel 1). Oleme täheldanud, et CA rühmas esines arteriaalse hüpertensiooni, düslipideemia, perifeersete veresoonte haiguse, insuldi, isheemilise kardiomüopaatia esinemissagedus suurem, kuid mitte statistiliselt oluline kui SFO rühmas. SFO rühma määratud patsientidel esines kateetri sagedamini vaskulaarse juurdepääsuna, kuid see ei olnud ka statistiliselt oluline.

Algtasemel ei ravitud ühtegi patsienti SFO-ga, mõnda raviti mõlemas ravirühmas CA-ga ja kahel SFO-rühma patsiendil ei olnud fosfaate siduvat ravi. Sel ajahetkel ei leidnud me statistiliselt olulisi erinevusi laboratoorsete parameetrite osas, nagu hemoglobiin, ferritiin, transferriini küllastusindeks, kaltsium, fosfaat, paratüreoidhormoon, C-reaktiivne valk, settimiskiirus ja albumiin (tabel 2). Kollektiivselt täheldasime SFO rühmas algtasemel kõrgemaid transferriini küllastumise indekseid ja madalamaid C-reaktiivse valgu väärtusi kui CA rühmas, kuid need erinevused ei olnud statistiliselt olulised. Samuti täheldasime CA rühma patsientidel hüperfosfateemia suurenenud tendentsi algtasemel, kuid see ei olnud samuti statistiliselt oluline.

Tabelis 2 on esitatud laboriparameetrite areng erinevatel ajahetkedel. Leidsime, et CA rühmas oli 20-nädalane kaltsium kõrgem kui SFO rühmas statistilise olulisusega (p=0,02). Sedimentatsiooni kiirus suurenes CA rühmas 12. ravinädalal võrreldes SFO rühmaga.

Tabel 1 Patsientide kliiniline iseloomustus, kellele manustatakse fosfaate siduva ainena kaltsiumatsetaati (CA) või sahhariidi oksühüdroksiidi (SFO)

Väärtused on keskmised ± SD või suhtelised sagedused ( protsenti ). Statistilisi erinevusi CA ja SFO vahel ei leitud

Tabel 2 Laboratoorsed kliinilised andmed patsientide kohta, kellele manustati fosfaate siduva ainena kaltsiumatsetaati (CA) või sahhariidi oksühüdroksiidi (SFO)

Väärtused on keskmised ± SD. * SFO väärtused erinevad oluliselt CA väärtusest

statistiline olulisus (p {0}},04). Samuti täheldati 20-nädalase ravi ajal SFO rühmas statistiliselt olulist madalamat albumiini taset, kui võrrelda seda CA rühmaga (p < 0,01).="" ferritiinitasemed="" mõlemas="" rühmas="" algtasemel="" ja="" pärast="" 20-nädalast="" ravi="" olid="" mõlemas="" rühmas="" kõrged="" ning="" mõlemas="" rühmas="" saavutati="" 20.="" ravinädalal="" normaalne="" fosfaaditase,="" ilma="" statistiliselt="" oluliste="" erinevusteta.="" transferriini="" küllastusindeksite,="" parathormooni,="" c-reaktiivse="" valgu,="" settimiskiiruse="" ja="" albumiini="" tasemed="" 20.="" ravinädalal="" olid="" mõlemas="" rühmas="">

Kõigi ajapunktide (algtaseme, 4. nädala, 12. nädala ja 20. nädala) proovid koguti kaheteistkümnest isikust kaheksalt, kokku 38 väljaheite- ja vereproovist. Esialgsest 12 patsiendi hulgast langes patsient 7 (SFO rühm) välja, kuna ta viidi kliinilistel põhjustel teise haiglasse ja me ei saanud enam jälgida kõiki uuringu jaoks olulisi muutujaid, patsient 3 (SFO rühm) saineerudsiirdamine enne 20-nädala proovide võtmist, patsient 9 (SFO rühm) suri enne 12-nädalaste proovide võtmist ja soolestiku mikrobioomi hea kvaliteediga proove saime alles alates 12. ja 20. nädalast patsiendil 8 (SFO rühm).

38 väljaheiteproovist koosnev komplekt näitas üle 2 miljoni lugemise, seejärel klassifitseeriti Greengenesi andmebaasi abil. Testitud proovide hulgast leiti suur arv ASV-sid (33 734), mis liigitati bakterite kuningriiki kuuluvaks. Shannoni mitmekesisust mõõdeti igas proovis ja 38 proovist koosnev rühm näitas Shannoni mitmekesisuse väärtusi vahemikus 6,2 kuni 7,7.

Huvitaval kombel leidsime, et kõik patsiendid olid üksteisest väga erinevad (p=0.001), kui võrrelda ühte patsienti teise patsiendiga algtasemel (joonis 1A). Need erinevused patsientide vahel säilisid 20 ravinädala jooksul; Kui proovid rühmitati ravinädalate järgi (alustase, 4, 12 või 20 nädalat), olulisi erinevusi (p > 0,05) ei esinenud. Oluline on märkida, et soolestiku mikrobioom osutus 20-nädalase uuringu jooksul stabiilseks patsientidel, kes olid enne uuringut CA-l ja säilitasid selle terapeutilise toime uuringuprotokolli raames, ning ka patsientidel, kes muutsid fosfaate siduvaid ravimeid (ravi puudumisel). , CA või kaltsiumkarbonaat CA-ks või SFO-ks).

Kui võrdlesime CA-ga ravitud patsientide ja SFO-ga ravitud patsientide mikroobide profiile, võttes arvesse kõiki ajapunkte, leidsime statistilisi erinevusi (joonis 1B); ja neid erinevusi kinnitasid ANOSIM (p=0.002) ja PERMANOVA (p=0.001). See statistiline analüüs tehti sõltumatult algtasemel täheldatud erinevustest.

Bakterikooslusi uuriti ning väljaheiteproovidest leiti kõige levinumad bakterikooslused, millele järgnesid Proteobakterid, Actinobacteria ja Verrucomicrobia. Otsides täpsemaid koostiserinevusi, võrdlesime nende proovide vahel mitut taksonoomilist taset. Bakterite analüüsimisel

Joonis 1. Mitme patsiendi mikrobioomiprofiilide põhikoordinaatide analüüs (PCO). B Ravimiravi mikrobioomi profiilide põhikoordinaatanalüüs (PCO) (kaltsiumatsetaat versus sahharafarroksühüdroksiid)

perekonna tasemel oli Bacteroides kõige levinum mõlemas patsiendirühmas, sõltumata sellest, kas neid raviti kas CA või SFO-ga (joonis 2). Mikroobide profiilid olid patsientide vahel väga erinevad ja taas rühmitati rühmitusanalüüsis sama patsiendi proovid, sõltumata järgitud ravist ja ravi staadiumist (algtase, 4, 12 või 20 nädalat).

Kui võtta arvesse kõiki ajapunkte (kõik patsiendid ja kõik nädalad), oli võimalik leida statistilisi erinevusi (p < 0,05)="" mikroobide="" kooslustes,="" kui="" võrrelda="" proove="" mitme="" muutuja,="" sealhulgas="" soo="" järgi,="" isheemiline="" kardiomüopaatia,="" kateetri="" kasutamine="" veresoonte="" juurdepääsuna="" või="" vanus="" (patsiendid="" jaotati="" kolme="" rühma:="" alla="" 45-aastased,="" vahemikud="" 61–69,="" üle="" 71-aastased).="" selliseid="" statistilisi="" erinevusi="" ei="" olnud="" võimalik="" täheldada,="" kui="" vaadeldi="" iga="" ravietappi="" (alustase,="" 4,="" 12="" või="" 20="" nädalat)="" eraldi;="" seetõttu="" ei="" täheldatud="" erinevusi="" muutujate="" soo,="" vanuse,="" isheemilise="" kardiomüopaatia,="" kateetri="" kasutamise="" ja="" ravimiravi="" (ca="" versus="" sfo)="">

Arutelu

See on esimene uuring, milles võrreldakse muutusi CA ja SFO-ga hemodialüüsi saavate patsientide soolestiku mikrobioomis. Meie uuringus ei olnud nende erinevate fosfaate siduvate ainete vahel soolestiku mikrobiomi bakteriaalses koostises järjekindlaid erinevusi. Kuigi mõlema ravirühma võrdlemisel leidsime erinevaid mikrobioomiprofiile, oli see erinev profiil olemas juba algtasemel ja pikaajaline ravi ei muutnud seda mitmekesisust üheski kahest rühmast. Seega olulisi muudatusi pole

Joonis 2. Selles uuringus käsitletud proovide rühmitusanalüüs ja mikrobioomiprofiilid (perekonna tasemel)

täheldati erinevatel ajahetkedel (algtase, 4. nädal, 12. nädal, 20. nädal) CA-ga ravitud hemodialüüsi saavatel isikutel soolestiku mikrobioomiga võrreldes SFO-ga ravitud isikutel.

Meie patsientide soolestiku mikrobioom on kooskõlas varasemate aruannetega, kus domineerivad Bacteroidetes ja Firmicutes phyla, mis on Actinobacteria, Proteobacteria ja Verrucomicrobia teises kolonisatsioonireas [29]. Nagu eelnevalt laialdaselt arutatud, on kroonilise neeruhaigusega patsientidel lisaks farmakoloogilistele ravimeetoditele mitmeid sisemisi tegureid, mis soodustavad soolestiku düsbioosi, nimelt vähenenud käärsoole läbiminek, muutunud seedevõime, metaboolne atsidoos, sooleseina turse ja üks olulisemaid, soolestiku kõrge aktiivsus. ureemiliste toksiinide kättesaadavus. Võrreldes tervete kontrollidega on hemodialüüsi saavatel patsientidel suurenenud Bacteroidetes'i arvukus [30], mis kinnitab ka meie uuringu tulemusi.

Fosfaadi sidujate mõju kohta soolestiku mikrobioomile on vähe tõendeid [25]. Puuduvad uuringud, mis hindaksid kaltsiumipõhiste fosfaadi sidujate, sealhulgas CA, mõju kroonilise neeruhaigusega patsientide soolestiku mikrobioomile, analüüsides väljaheite proove [31]. Trautvetter et al. [32] täheldas kaltsiumkarbonaati kasutavatel tervetel inimestel lühikese ahelaga rasvhapete sisalduse suurenemist väljaheites ja perekonna Clostridium XVIII suuremat suhtelist arvukust. Navarro-Gonzalez et al. [22], analüüsis hemodialüüsi saavate patsientide seerumiproove, kellelt võeti kas mittekaltsiumipõhise fosfaadi siduja sevelameeri või kaltsiumipõhise fosfaadi siduja CA, ja jõudis järeldusele, et ravi sevelameeriga oli seotud ülitundliku C-reaktiivse valgu (IL) sisalduse olulise vähenemisega. -6, seerumi endotoksiin ja lahustuva CD14 kontsentratsioonid on sõltumatud hemodialüüsipatsientide suremuse ennustajad.

SFO on rauapõhine fosfaate siduv aine ja andmed viitavad sellele, et ühendis sisalduv raud võib muuta soolestiku mikrobiootat, kuna mõned soolebakterid kasutavad rauda suhtelise arvukuse suurendamiseks [26, 33, 34]. Lisaks on näidatud, et käärsoole jõudva raua koguse suurenemine võib soodustada mõnede patogeensete bakterite virulentsust ja põletikueelset keskkonda [20, 35]. Kuid hoolimata nendest tõenditest näitab meie uuring, et SFO-ravi hemodialüüsi saavatel patsientidel ei näi muutvat soolestiku mikrobioomi ega CA-ravi.

Ling Lau jt. [27] võrreldi väljaheidete mikrobioomi ja ureemilisi toksiine seerumiproovides kroonilise neeruhaigusega rottide (kellele tehti 5/6 nefrektoomia) ja normaalsete rottide vahel, kes määrati 6 nädala jooksul juhuslikult tavapärasele dieedile või dieedile, mis sisaldas 4 protsenti raudtsitraadi. Nad täheldasid, et kroonilise neeruhaigusega rottidel oli mõnede Firmicutes'i ja Lactobacillus'e suhteline arvukus ja väiksem soolestiku mikroobide mitmekesisus võrreldes tavaliste rottidega, kuid nad kirjeldasid ka, et kroonilise neeruhaigusega rottide ravi raudtsitraadiga suurendas bakterite mitmekesisust peaaegu kontrollrottidel täheldatud tasemeni ja et selline ravi ei suurendanud ureemilisi toksiine. Hiljutises uuringus Wu et al. [36] võrdlesid hemodialüüsi saavatel patsientidel soolestiku mikrobioomi, keda raviti kaltsiumkarbonaadi või raudtsitraadiga. Nad täheldasid raudtsitraadiga ravitud rühmas märkimisväärselt suurenenud mikroobide mitmekesisust koos Bacteroidetes'e suurenenud arvukuse ja Firmicutes'i vähenemisega.

Meile teadaolevalt on inimestel tehtud ainult üks uuring SFO mõju kohta soolestiku mikrobioomile. Iguchi et al. [37] võrreldi SFO-ga ravitud hemodialüüsipatsientide soolestiku mikrobioomi ja ureemiliste toksiinide muutusi kolme kuu jooksul võrreldes hüperfosfateemia ravi puudumisega. Samuti ei leidnud nad muutusi soolestiku mikrobioomis patsientidel, keda raviti SFO-ga kogu aja jooksul. Niisiis kinnitab meie uuring soolestiku mikrobiomi pikaajalist stabiilsust hemodialüüsi saavatel patsientidel, keda raviti SFO-ga 5 kuud.

Veel üks oluline punkt, mida arutada, on see, et meie uuringus täheldasime hemodialüüsipatsientide soolestiku mikrobioomi erinevusi vanuse või soo järgi, kuid me ei leidnud erinevusi, kui võrdleme neid ravirühmade kaupa (CA versus SFO). Vastavalt sellele on soolestiku mikrobioomis ilmnenud mõned muutused vananemisega [38]. Eakatel patsientidel, eriti neil, kellel on kõrge nõrkuse skoor, on ülekaalus Bacteroidetes'e suhteline osakaal, väiksem mikroobide mitmekesisus ja väheneb Bifdobacteria, Bacteroides/Prevotella, Lactobacillus ja Clostridium IV klastris, võrreldes noorte inimestega, kellel on suurem mikroobide mitmekesisus. ja teiste hulgas Firmicutes'i suurem osakaal [39, 40]. Samuti on üha rohkem tõendeid selle kohta, et soolestiku mikrobioomis on muutusi, kui võrrelda naisi ja mehi [41, 42]. Meie uuringus täheldati soolestiku mikrobioomis mõningaid erinevusi vastavalt soole ja vanusele, kuid iga patsiendi vahel leitud erinevused olid palju selgemad.

Seoses laboratoorsete leidudega, nagu oodatud, oli kaltsiumipõhise fosfaati siduva CA-ga ravitud patsientidel kõrgem kaltsiumisisaldus kui SFO-ga ravitud patsientidel. Me täheldasime, kuigi mitte statistiliselt olulist, põletikuliste parameetrite, nagu settimiskiiruse, C-reaktiivse valgu ja ferritiini taseme tõusu CA rühmas võrreldes SFO rühmaga; sellist pleiotroopset toimet põletiku vähendamisele kirjeldati mõnede muude fosfaadi sidujate puhul peale kaltsiumipõhiste sideainete [43].

Oluline on arvestada, et meie uuringul on mõned piirangud. Ühest küljest on patsientide valimi suurus väike, mistõttu on raske teha kindlaid järeldusi, eriti analüüsitud kliiniliste ja biokeemiliste muutujate mõjude kohta. Meie tulemuste kinnitamiseks on vaja suuremat uuringut suurema patsientide arvuga. Teisest küljest on meie patsientidel erinev taust ja iseloomulikud kaasuvad haigused, mis võivad mõjutada soolestiku mikrobioomi. Seega hoiatab meie uuring fosfaadisidujaid saavate patsientide soolestiku mikrobioomis leitud profiilide suure varieeruvuse kohta. Sellised erinevused piiravad kõiki täiendavaid järeldusi ja erinevusi, mis leiti erinevaid fosfaadi sidujaid saavate patsientide vahel.

Nagu me teatasime, et otsida, kas konkreetne kliiniline muutuja võib seda diferentseeritud mikrobioomi profiili mõjutada, analüüsisime oma patsientide peamisi kliinilisi parameetreid algtasemel ja me ei leidnud statistiliselt olulisi erinevusi mõlema ravirühma vahel. Patsiendid 5 ja 6 olid pisut korrast ära ja võib väita, et patsient 5 sai vankomütsiini ja tobramütsiini 3 nädalat, patsiendil 6 aga krooniline kõhulahtisus koos korduvalt negatiivsete kultuuridega ja sellega seotud võimalik kurnatussündroom.

Meie uuringus ei täheldanud me hemodialüüsipatsientide soolestiku mikrobioomis mingeid muutusi pärast 20-nädalast ravi, sõltumata fosfaadi siduvast ainest. Praegu peaksime fosfaadisiduja valimisel tuginema nende võimele vähendada seerumi fosfaadisisaldust, pillide koormust, seost veresoonte lupjumise edenemisega, kõrvaltoimeid või seedetrakti taluvust [44–47]; kuigi nende fosfaadi sidujate mõju soolestiku mikrobioomile oli ootuspärane ja on endiselt võimalik, ei ole praegu tõendeid selle kohta, et see aspekt peaks mõjutama meie lähenemisviisi hüperfosfateemia ravimisel.

Kokkuvõttes täheldati meie uuringus, et 5-kuine ravi CA või SFO-ga ei muutnud hemodialüüsi saavate patsientide algtaseme mitmekesisust ega algtaseme bakterite koostist, kuid hoiatab kroonilise neeruhaigusega patsientide soolestiku mikrobioomis leitud profiilide suure varieeruvuse kohta.

Tänuavaldused Ei kohaldata.

Autori kaastööd IB, FG ja JB kavandasid ja aitasid kaasa uuringu kavandamisele; AMR, IB ja FG aitasid kaasa patsientide kaasamisele ja kliinilisele juhtimisele; AMR, IB ja FG. aitasid kaasa proovide võtmisele ja andmete kogumisele, AV, MNJ., RP aitasid kaasa fekaalse DNA eraldamisele ja 16S rRNA sekveneerimisele; RA, AV, MNJ, RP ja BSM aitasid kaasa OTU tabeli koostamisele, taksonoomilisele määramisele ning andmete ja statistilisele analüüsile; AMR, RA, IB, FG, BSM aitasid kaasa käsikirja koostamisele ja tegid käsikirja kriitilisi redaktsioone. Autoritel oli täielik juurdepääs andmetele ja vastav autor oli lõplikult vastutav käsikirja avaldamiseks esitamise eest.

Rahastamine Seda uuringut rahastasid FEDER-Fundo Europeu de Desenvolvimento regionaalsed fondid programmi COMPETE 2020 – konkurentsivõime ja rahvusvahelistumise rakenduskava (POCI) kaudu, Portugal 2020 ja Portugali vahendid FCT/MCTES kaudu projekti MicroMOB "POCI" raames. {2}} FEDER-029777 / PTDC/MEC-MCI/29777/2017".

Andmete kättesaadavus Käesoleva uuringu käigus kasutatud ja/või analüüsitud andmekogumid on mõistliku nõudmise korral kättesaadavad vastavalt autorilt.

Koodi saadavus Ei ole kohaldatav.

Deklaratsioonid

Huvide konflikt AMR, RA, IB, FG, AV, MNJ, RP, JB, BSM huvide konflikti deklareerida ei ole.

Eetika heakskiit Selle uuringu kiitis heaks Universitari Germans Trias i Pujoli haigla kliiniliste uuringute eetikakomitee (PI-16–169, NCT5551048) ja see vastas Helsingi deklaratsioonis sätestatud põhimõtetele.

Nõusolek osalemiseks Kõik osalejad värvati vabatahtlikult pärast üksikasjaliku teabe saamist uuringuprotokolli kohta. Kõigilt patsientidelt saadi kirjalik teadlik nõusolek.

Nõusolek avaldamiseks Ei kohaldata.

Avatud juurdepääs See artikkel on litsentsitud Creative Commons Attribution 4.0 rahvusvahelise litsentsi alusel, mis lubab kasutamist, jagamist, kohandamist, levitamist ja reprodutseerimist mis tahes andmekandjal või vormingus, tingimusel et annate algsele autorile asjakohase tunnustuse ( s) ja allikas, lisage link Creative Commonsi litsentsile ja märkige, kas muudatusi on tehtud. Selles artiklis olevad pildid või muu kolmanda osapoole materjal sisaldub artikli Creative Commonsi litsentsis, kui materjali krediidilimiidil ei ole märgitud teisiti. Kui materjal ei sisaldu artikli Creative Commonsi litsentsis ja teie kavandatud kasutamine ei ole seadusega lubatud või ületab lubatud kasutust, peate hankima loa otse autoriõiguse omanikult. Selle litsentsi koopia vaatamiseks külastage aadressi http://creativecommons.org/licenses/by/4.{3}}/.