Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 Hiina Rahvavabastusarmee 98. haigla, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Zhejiangi Traditsioonilise Hiina Meditsiini Ülikool, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Fuyangi traditsioonilise hiina meditsiini ortopeedia haigla, Hangzhou linn, Zhejiangi provints, Hangzhou 311400, Zhejiang, Hiina

Abstraktne

Eesmärk: jälgida mõjuCistanchevee ekstraktparanemise kohtaosteoporootilineluumurrud rottidel ja uurida selle mehhanismi. Meetodid: SPF-klassi SD emased rotid jagati juhuslikult kontrollrühma, mudelrühma ja ravirühma ning modelleeriti vastavalt seotud meetoditele. 24 tundi pärast luumurdude modelleerimist manustati kontrollrühmale ja mudelrühmale tavalist soolalahust sondi ning ravirühmale tehti sondigaCistanchevee ekstrakt üks kord päevas. Pärast 2- ja 6-nädalast sekkumist koguti interleukiinide tuvastamiseks kõhuaordist verd. TP (IL-1 B) ja transformeeriva kasvufaktori B l (TGF-8 1) tasemed, koguge samaaegselt luumurdude proove, tehke pärast fikseerimist mikro-CT skaneerimine, mõõtke R0 I kalluse luu mahufraktsioon (BV/TV) ja muud sellega seotud parameetrid Pärast katlakivi eemaldamist, dehüdratsiooni ja kinnistamist tehti sellest kasutamiseks vahaplokid. Tulemused: 6 nädalat pärast osteoporoosi mudeli loomist oli mudelrühma ja ravirühma rottide luu mineraalne tihedus madalam kui kontrollrühmal (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistanchevõib soodustada paranemistosteoporootilineluumurrud ja selle mehhanism võib olla seotud selle pärssimisegaosteoporootilineluumurrud. Pärast roti seerumit IL-1 B ja soodustab TGF-8 1 sekretsiooni, mis võib parandada osteoporoosi ja soodustada luumurdude paranemist.

Märksõnad: osteoporootiline luumurd, Cistanche, luumurdude paranemine, rott

Osteoporoos on haigus, mille puhul luutihedus väheneb, luukoe peenstruktuur hävib ja luude haprus suureneb. Patsiendid võivad igapäevaelus kerge välisjõu mõjul luumurde põhjustada. See on tavaline kliiniline haigus ja sageli esinev haigus. Veelgi enam, seda tüüpi luumurrud on enamasti eakad patsiendid, sageli seotud muude haigustega ning enamik luumurde on peenestatud, halva stabiilsusega ning mõnikord toimub luumurdude paranemine aeglasemalt või katkematult ning kõrge puude ja suremuse määr. Praegu ravitakse seda peamiselt operatsiooni, käsitsi taastamise ja osteoporoosivastase ravi teel. Puuduvad sihipärased ravimid patsientidele, kellel onosteoporootilineluumurrud. Traditsioonilisel Hiina meditsiinil on osteoporoosi ravis pikk ajalugu ja sellel on positiivne mõju. On tõestatud, et paljud traditsioonilised Hiina ravimid parandavad luid. Vaesus võib soodustada ka luumurdude paranemist. Rongrongi kasutatakse tavaliselt neeru-yangi toitva ravimina ning sellel on maksa ja neerude toitev toime. Traditsiooniline hiina meditsiin usub, et neer juhib luud ning luumurdude ravi on samuti lahutamatu neerust ja olemusest. Kaasaegne farmakoloogia on leidnud, et lihatuhal on ka teatav östrogeenne toime. Selles uuringus kavatsetakse kasutada luutiheduse mõõtmist, mikro-CT-d ja seerumi interleukiini-13 (IL-10), transformeeriva kasvufaktori-P KTGF-P 1) taseme jälgimist ja liha songapasta veeekstrakti. paranemineosteoporootilineluumurrud rottidel

Cistanche

1 Materjalid ja meetodid

1.1 Katseloomad ja reaktiiviseadmed: Zhejiangi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli loomkatsete keskuses kasvatatakse 52 SPF-ga emast SD-rotti, kes kaaluvad 21{13}}~250g. Kompleksjood, Hangzhou Lonzo Medical Desinfectant Co., Ltd., partii number 20160720; Penitsilliin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., partii number F3117217; IL-18 komplekt (partii number: 20160715), TGF-8 1 komplekt (partii number: 20160722); Kahe energiaga röntgeni luutiheduse skanner, 0STE0C0RE2; Micro-CT, Skyscan1176O

1.2 EkstraheerimineCistancheveetõmmis: leotage maapindacistanche(Zhejiangi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli farmaatsiatehas) 10 korda ülipuhast vett 0,5 tunniks, panni keetmist 1,5 tundi, ekstraheerimist korrake 2 korda ja segatud meditsiinilise vedeliku pöördauruti kontsentraati kontsentratsioonini 1,5 g /ml ja hoida hilisemaks kasutamiseks külmkapis 4 kraadi juures.

1.3 Modelleerimise ettevalmistamine: Punktid on järgmised.

1.3. 1 Osteoporoosi mudel: rotte kasvatati adaptiivselt 1 nädal enne modelleerimist ja jagati juhuslikult kontrollrühma, mudelrühma ja ravirühma, vastavalt 16 rotti, 18 rotti ja 18 rotti ning iga rühm põhines 2 nädalat ja 6 nädalat. Kumbki jagati kahte rühma. Nii ravirühm kui ka mudelrühm anesteseeriti 1-protsendilise pentobarbitaalnaatriumiga (0,4 ml/100 g), nahk tuimastati, desinfitseeriti, kaeti ja nahk lõigati. Rottidelt eemaldati kahepoolsed munasarjad. Kontrollrühmal oli ainult sisselõige. Ära

Munasarjade eemaldamine

1.3. 2 Luumurdude mudel: 6 nädalat pärast osteoporoosi mudeli koostamist valmistatakse ette luumurru mudel. Pärast iga rühma rottide tuimastamist mõõdetakse keskmise reieluu luu mineraalne tihedus. , Lõikus, teha keskmise reieluu põikmurru mudel, fikseerida 1mm Kirschneri traadiga, steriliseerida ja õmmelda sisselõike nahk

1.4 Ravimisekkumine: pärast modelleerimist tehti reieluu röntgentuvastus, rotid, kelle mudeli ettevalmistamine ebaõnnestus, elimineeriti ja pärast modelleerimist süstiti infektsiooni vältimiseks intramuskulaarselt 80,000 ühikut penitsilliini. 24 tundi pärast operatsiooni manustati ravirühmale lihasongapasta vesiekstrakti (kontsentratsioon 1,5g/ml, lg/kg, üks kord päevas). Kontrollrühmale ja mudelrühmale anti sama kogus tavalist soolalahust.

1.5 Proovide kogumine: rottide proovid koguti 2 ja 6 nädalat pärast sekkumist. Pärast 1-protsendilist pentobarbitaalnaatriumi anesteesiat koguti seerumi valmistamiseks kõhuaordist 5-10ml verd ja hoiti -20B külmkapis. tagavaraks. Seejärel rotid surmati ja reieluumurru proovid koguti ja pandi 72 tunniks 10% neutraalsesse formaldehüüdi.

1.6 Testimisnäitajad: Punktid on järgmised.

1.6. 1 Luu mineraalne tihedus: kõik rotid pärast osteoporoosi mudelit anesteseeriti enne luumurru mudelit ja seejärel mõõdeti keskmise reieluu luu mineraalset tihedust. Kolm rottide rühma said proovid pärast 2- ja 6-nädalast sekkumist ning proove fikseeriti 72 tundi ja seejärel mõõdeti uuesti luutihedust.

1.6. 2 Mikro-CT: mikro-CT skaneerimine tehakse pärast proovi fikseerimist 72 tunni jooksul, 200 pilti luumurru otsast ülal ja all huvipakkuva piirkonnana (R01), skaneerimisnurk 360 kraadi, vool 555uA, pinge 42kV, filter Al 0.2mm, resolutsioon 8.73um, peale kolmemõõtmelise pildi rekonstrueerimise ja kalluse analüüsi valmimist. Tuvastamisparameetrid on järgmised: luumahu fraktsioon BV/TV, luu trabekulaarse mudeli faktor (Tb. Pf); struktuurmudeli indeks (SMI) jne."

1.6.3 Seerumi IL-1P ja TGF-P1 määramine: sulatage roti seerum külmikust -20 kraadi juures ja määrake samm-sammult vastavalt IL-13 ja TGF" 1 komplekti juhised.

1.7 Statistilised meetodid: kasutada töötlemiseks statistilise analüüsi tarkvara SPSS.19. Katseandmed on väljendatud keskmise ± standardhälbe (G±s) ja kolme rühma rottide luu mineraalse tihedusena. Mikro-CT parameetrid JL-1 P JGF- P 1 tasemed keskmistatakse ühesuunalise dispersioonanalüüsi abil ja kasutatakse rühmade paaripõhist võrdlust. Kontrollimine, kontrolli tase on P<0.>

2 tulemust

2.1 Kolme rühma luutihedus: vt tabel 1.

Tabel 1 Luu mineraalse tiheduse tulemused iga rotirühma reieluu keskmises osas (x±s, g/cm²)

Märkus. Võrreldes mudelirühmaga on *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Mikro-CT kahemõõtmeline ristlõige: sagitaalne kahemõõtmeline ristlõige valib reieluu pikitelje pildid igas rühmas igal ajahetkel (vt joonis 1) ja horisontaalne kahemõõtmeline ristlõige. lõik valib võrdluseks murrujoone all oleva 100. pildi (Joonis 2) ), jooniselt on näha, et iga rühma kallus aja jooksul järk-järgult suurenes, kuid 6 nädalat pärast luumurdu oli see erineval määral plastiline; samas on näha, et kontrollgrupi kallus oli suur ning kalluse ajukoor oli paks ja roomas üle murrujoone 6 nädala pärast, samas kui kallus mudelrühmas Kalluses oli luud vähem 2 nädalat ja kalluse ajukoor oli 6 nädala pärast lahti. Kuigi kalluse maht ravirühmas ei olnud 2 nädala pärast suur, oli kalluse luumass suurem kui mudelrühmas. Kallus oli 6 nädala pärast paremini vormitud. Ja murdumisjoon pole ilmne.

Kontrollrühm Mudelrühm Ravirühm

Joonis 1 Iga rühma keskmise reieluu sagitaalne ristlõige

Joonis 2 Iga rühma keskmise reieluu horisontaallõige

2.3 Mikro-CT kolmemõõtmeline rekonstrueerimine: kalluse kolmemõõtmeline rekonstrueerimine reieluu murdunud otsas on näidatud joonisel 3. Jooniselt 3 on näha, et kallus tekkis piki luuümbrist murru mõlemas otsas joon 2 nädalat pärast luumurdu igas rühmas olid luumurrud igas rühmas endiselt selged, eriti mudelrühmas ja ravirühmas, samas kui kontrollrühma kallus oli paks ja paks, enamasti plaatidega 6 nädalat pärast luumurdu. . Trabekulaarsed luud olid ülekaalus ja murdumisjoon kadus, samal ajal kui mudelrühmas olid luud lahti ja murdumisjoon oli hägune, kuid ravirühmas oli rohkem kallusluud, korrapärane ja paks trabekulaarne luu ning murdumisjoon ei olnud ilmne.

Joonis 3 R0I kalluse kolmemõõtmeline rekonstrueerimine murtud otsas

2.4 Mikro-CT parameetrid: kasutage tarkvara, et analüüsida kalluse murdunud otsas. Seotud parameetrid leiate tabelist 2.

Tabel 2 Iga rühma mikro-CT parameetrite võrdlus (x±s)

Kontrollrühm Mudelrühm Ravirühm

Märkus. Võrreldes mudelirühmaga on *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Seerumi IL-1 P .TGF-P 1 tase: vt tabel 3.

Tabel 3 IL-1 P JGF-0 1 tasemete võrdlus igas rühmas G±s, n=8)

Märkus. Võrreldes mudelirühmaga on *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

Viimastel aastatel on kliinilises praktikas tõestatud, et traditsioonilised Hiina ravimid Yinyangdian, Drynaria fortune ja selle ühendid (Qingi pillid, Liuwei Dihuang Pills jne) parandavad oluliselt osteoporoosi. Seda tüüpi hiina meditsiini ja ühendeid kasutatakse enamasti maksa ja neerude toitmiseks. See on kooskõlas neerude toitmise ja lihaste uuendamise põhimõttega murru keskmises ja hilises staadiumis. "Kümme päeva. Lihakas jäsemepasta ilmus esmakordselt ajakirjas "Shen Nong's Materia Medica". , Loomu poolest soe, selle funktsioonid on neerude toitmine ja yangi tugevdamine, essentsi ja luuüdi täiendamine, verd toitev ja kuivust niisutav ning meeldiva värvuse ja eluea pikendamine.

Selles uuringus oli ravirühma luu mineraalne tihedus kõrgem kui mudelrühmal pärast 2- ja 6-nädalast sekkumist (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">osteoporootilineluumurdude paranemine. See peegeldab otseselt kalluse luusisaldust. See näitab, et Rouganrong võib soodustada osteogeneesi. Analüüs võib olla tõhus liha hernia pasta puhul. Koostisosad reguleerivad BMP2 üles ja BMP2 on üks TGF-8 perekonna liikmetest. Ja seda tulemust kinnitavad ka teised Micro-CT skaneeringu parameetrid (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp ja SMI peegeldavad kalluse biomehaanilisi omadusi ning ravirühma väärtused on märkimisväärselt paremad kui mudelrühmal, mis viitab ka sellele, et Roudongrong parandab luude kadu, soodustab osteogeneesi ja kiirendab luumurdude paranemist.

Seerumi IL-1B ja JGF-P 1 tasemete osas leiti pärast 2-nädalast ja 6-nädalast sekkumist, et ravirühma IL-1P tase oli madalam kui kahel teisel. rühmad 2 nädala ja 6 nädala järel. Kuigi ravirühma IL-1 B tase oli kõrgem kui kontrollrühmal, oli siiski oluliselt madalam kui mudelrühmal (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistanchesaabparandada luude hõrenemist, soodustavad osteogeneesi ja kiirendavad luumurdude paranemist. See võib vähendada IL-13 tasetosteoporootilinemurda rotte ja pärssida luumurde. saavutatakse luurakkude aktiivsus; lisaks võib see olla seotud ka sellega, etCistanchevõib tõsta TGF-B 1 taset murtud rottidel, soodustada osteogeenset diferentseerumist ning kalluse küpsemist ja vormimist.

Kokkuvõttes leiti luu mineraalse tiheduse, mikro-CT-skaneerimise parameetrite ja seerumi IL-1 P, TGF"1 taseme analüüsi põhjal, et vesiekstraktCistanchesaabparandada luude hõrenemistjasoodustada osteoporootiliste luumurdude paranemist. Mehhanism võib olla sellega seotud. See võib inhibeerida seerumi ILT 8 sekretsiooni ja soodustada TGF-B 1 sekretsiooni rottidel pärastosteoporootilineluumurde, parandades seeläbi osteoporoosi ja soodustades luumurdude paranemist.

4 Viited

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang jt. Juhised osteoporoosi diagnoosimiseks ja raviks Hiinas (2018) [J], Chinese Journal of Osteoporosis, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang jt. Liha songa alkoholiekstrakti terapeutiline toime ja mehhanism osteoporoosiga munasarjade eemaldatud rottidel [J]. Jilini ülikooli ajakiri (meditsiiniväljaanne), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P jt. Dalbergia sissoost pärit südamepuu ekstrakt soodustab luumurdude paranemist ja selle kasutamist munasarjade eemaldamisest põhjustatud osteoporoosiga rottidel [J]. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]Kevin 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM jt. Hiirte luumurdude paranemise progresseerumise mikrokompuutertomograafia hindamine[j]. Bone, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian jt. Ekspertide konsensus esmase osteoporoosi astmelise diagnoosimise ja ravi kohta traditsioonilise hiina meditsiiniga Zhejiangi provintsis (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. Teadustöö edusammud osteoporoosi ennetamise ja ravi vallas üksikute ja kombineeritud Hiina ravimitega[J]. Hiina meditsiinijuhend, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng jt. Kõrbelihaperekonna püree mõju BMP-2 valgu ekspressioonile kiiresti vananevatel osteoporoosi põdevatel hiirtel[J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116