Cistanche mõju ATPaasi muutustele septitseemia rottide maksa mitokondrites

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Kokkuvõte: Eesmärk:Muutuse uurimiseksMaksa mitokondrite ATPaasi aktiivsus sepsise korralja mõjuCistancheselle kallal.Meetodid:40 SD-rotti jagati juhuslikult fiktiivse operatsiooni rühma, 12-tunnise kontrollrühma, 12-tunnise manustamise rühma, 16-tunnise manustamise rühma ja 16-tunnise manustamise rühma. Thesepsismudelit korrati pimesoole ligeerimise ja perforatsiooniga (C LP) ning võrreldi. Rühma ellujäämismäär, keskmine arteriaalne rõhk (MAP), maksmitokondriaalne ATPaasaktiivsus muutub.Tulemused:Pärast seda, kui rotid kordasid sepsise mudelit,ATPaasmaksa aktiivsusmitokondridvähenes ja 24-tunnine ellujäämismäär vähenes oluliselt. TheATPaasmaksa mitokondrite aktiivsus pärast manustamistCistancheoli kontrollrühmaga võrreldes oluliselt paranenud (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">Järeldus:Vähenenud mitokondriaalneATPaasi aktiivsus sepsise korral, rakkude kaltsiumi ülekoormus ning tursed ja nekroos on otsesed surmapõhjusedseptilised rotid. Cistanche suurendab ATPaasi aktiivsuston oluline ravimehhanismsepsis.

Märksõnad: Cistanche, cistanche sepsis mitokondrite ATP ensüüm

Sepsison kliiniliselt kriitiline haigus. Kuigi antibiootikume on viimase 30 aasta jooksul uuendatud, ei ole sepsise suremus oluliselt vähenenud ja on endiselt 50 protsenti [1]. Lääne antibakteriaalne "kurja kõrvaldav" ravi üksi ei paranda haiguse prognoosisepsis.TCM-i patogeneesis kuulub sepsis "puuduse ja kurjuse õigluse" hulka, ravi peab lähtuma põhimõttest "keha tugevdamine" ja "kurja kõrvaldamine". Traditsiooniline hiina meditsiin on näidanud sepsise ravis suurt potentsiaali.SepsisMitme organi puudulikkusega komplitseeritud on kõrge suremuse algpõhjus ja rakustruktuuri kahjustused on hulgiorgani puudulikkuse mikroskoopiline patoloogiline alus [2]. Cistanche on traditsiooniline Hiina ravim toonikuks, seda on näidanud kaasaegsed farmakoloogilised uuringudCistancheomab membraani estri peroksüdatsioonile vastupanu ja raku funktsiooni kaitsvat toimet [3]. Funktsioonmitokondriaalne energiaainevahetus on üks rakkude põhifunktsioone ja nende aktiivsusATPaason oluline näitaja funktsiooni mõõtmiseksmitokondriaalne energiaainevahetus. Selles katses jälgisime muutusiATPaasmaksarakkude aktiivsusseptilised rotidja mõjude vahelist seostCistancheselle ja rottide suremuse kohta ning selle eesmärk oli luua teoreetiline alus ja tõhus uurimine haiguse kliiniliseks "tugevdavaks" raviks.sepsis.

Cistanche

1. Materjalid ja meetodid

1.1 Reaktiivid

Cistancheosteti Xinjiangist (määratletud professor Tan Defu kolme kuru ülikooli meditsiinikoolist). Võeti 200 g kuivatatud Cistanche'i ja keedeti kaks korda destilleeritud vees. Filtraat aurustati ja kontsentreeriti kontsentratsioonini 1 g/ml. Naatriumpentobarbitaal (001104), China National Pharmaceutical Group Shanghai ChemicalReaktiivEttevõte;ATPaasi reaktiiv(20030108), Nanjing Jianchengi bioinseneri uurimisinstituut.

1.2 Katseloomade mudel ja rühmitamine

40 isast SD-rotti (ostetud Huazhongi teadus- ja tehnoloogiaülikooli Tongji meditsiinikolledži katseloomade keskusest) jagati juhuslikult 5 rühma: võltsoperatsiooni rühm (n=8), 12-tunnikontroll. grupp (n=8), 12-tundide haldusgrupp (n=8), 16-tundide kontrollrühm (n=8), 16-tund haldusgrupp (n=8). Näidisoperatsiooni rühmale ja kontrollrühmale manustati sondiga tavalist soolalahust ning manustamisrühmale manustati kaks korda päevas kuni 15 päeva sondiga 1 g/ml Cistanche. Thesepsise mudelreplitseeriti pimesoole ligeerimise ja perforatsiooniga [4]. Enne operatsiooni said loomad vabalt vett juua ja nad paastusid 12 tundi.

1.3 Arteriaalse keskmise rõhu määramine

Jugulaarveen sisestati peanaha nõelaga, antikoagulatsiooniks kasutati hepariini, vasakpoolne ühine unearter kanüüliti aordikaare külge ja isevalmistatud kateeter ühendati bioloogilise mitmekanalilise instrumendiga ja keskminearteriaalne rõhk(MAP) salvestati. Katsetage pärast MAP-i stabiliseerumist.

1.4 Mitokondriaalse ATPaasi aktiivsuse määramine

Võtke 6 g roti maksa ja asetage see kiiresti 0-kraadisesse eralduskeskkonda [250 mmol sahharoosi, 2 mmol etoksüetüülpiperasiini 2-etüülsulfoonhapet, 0,1 mmol etüleendiamiintetraäädikhapet, pH 7,4], avage see ja peske mustused ära. Eraldage sööde suspensioon (1:10), homogeniseerige elektrilise teflonhomogenisaatoriga (1200 p/min), tsentrifuugige kiirusel 2000 p/min 10 minutit, säilitage supernatant, tsentrifuugige kiirusel 10 000 p. /min 15 minutit, visake supernatant ära. Võtke sade ja suspendeerige see 2 ml eralduskeskkonnas, et saadamitokondriaalne suspensioon. Kogu protsess viiakse läbi temperatuuril 0 kuni 4 kraadi. Mõõtmiseks kasutati fosfori määramise meetodit [5]ATPaasi aktiivsus(komplekt osteti Nanjing Jianchengi bioloogilise tehnika instituudist).

1.5 Statistiline töötlemine

Kõik katseandmed on väljendatud keskmise ± standardhälbena (X ± S) ja SPSS-tarkvara teostab ühesuunalist dispersioon- ja korrelatsioonianalüüsi.

Cistanche ekstrakt

2. tulemused

2.1 Cistanche mõju keskmisele arteriaalsele rõhule ja 24-tunni rottide suremusele

Kontrollrühma vererõhk langes märkimisväärselt 12 tundi pärast umbsoole ligeerimist ja perforatsiooni ning see muutus ilmsemaks 16 tunni pärast. Võrreldes võltsoperatsiooni rühmaga oli oluline erinevus. VererõhkTistanche ravigruppi täiustati. Kontrollrühma suremus oli oluliselt kõrgem kui näilise operatsiooni grupi oma ja manustamisrühma suremus oli oluliselt madalam kui vastava kontrollrühma oma.

2.2 Cistanche mõju mitokondriaalsele ATPaasi aktiivsusele

Tegevusednaatrium-kaaliumi ATPaas, kaltsiumi ATPaas, magneesiumi ATPaas ja kaltsiummagneesiumi ATPaasmanustamisrühmas olid oluliselt kõrgemad kui vastava kontrollrühma omad, jõudes näidisoperatsiooni rühma tasemele, mis oli oluliselt positiivses korrelatsioonis operatsioonide vähenemisega.rottide suremus (r=0.834) ).

Cistanche

3. Arutelu

Na pluss -K pluss -ATPaas, tuntud ka kui naatrium-kaaliumpump, mängib olulist füsioloogilist rolli raku füsioloogilise aktiivsuse, kehatemperatuuri ja normaalse ainevahetuse säilitamisel ning ioonide tasakaalu reguleerimisel rakus ja väljaspool seda.Sepsises, esineb tõsine naatriumpumba düsfunktsioon sisemises mitokondriaalses membraanis, mis põhjustabmitokondriaalneturse. TheNa pluss -K pluss -ATPensüüm on kahjustatud, tasakaalustamatusmitokondriaalneioonide kontsentratsioon suureneb, energia metabolismi ensüümide aktiivsus inhibeeritakse, rakkude energiavarustus on ammendunud ja tekib tsütotoksiline turse. Samal ajal suureneb membraani läbilaskvus, mis lõpuks viib rakusurma. Katse käigus leidsime, et mitokondriaalneNa pluss -K pluss -ATPaasseptiliste hepatotsüütide aktiivsus vähenes oluliselt (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na pluss -K pluss -ATPaastegevusmaksa mitokondridoli oluliselt suurenenud (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">septilised rotidvähenes oluliselt. Katsetulemused viitavad sellele, et vähenemineNa pluss -K pluss -ATPaasi aktiivsuson oluliselt positiivses korrelatsioonis arengugasepsis rottidel. InhibeerimineNa pluss -K pluss -ATPaasi aktiivsus, rakuturse ja surm, mis põhjustab mitme organi puudulikkust, võivad olla sepsise kiire areng. Üks olulisemaid mehhanisme. Viimastel aastatel on selle kohta palju teateidNa pluss -K pluss -ATPaasja paljud haigused, mis on pälvinud kliiniliste ja põhitöötajate tähelepanu. Väga oluline on uurida tegevuses toimuvate muutuste seadustNa pluss -K pluss -ATPaasja selle määrus [6]. Selle spetsiifilise mehhanismi kohta on vähe teadaNa pluss -K pluss -ATPaasarengus ja tulemustessepsis,ja on vaja täiendavaid uuringuid.

Intratsellulaarse kaltsiumi ja magneesiumi stabiilsus on vajalik materiaalne alus rakusisese vabanemisreaktsiooni ja teabe edastamise säilitamiseks [7]. Katses vähenesCa2 pluss -ATPaasi aktiivsuskontrollrühmas mõjutab otseselt kaltsiumipumba aktiivsust ning kaltsiumipumba aktiivsuse vähenemine nõrgestab selle rollimitokondriaalnekaltsiumipump Ca2 pluss väljutamiseks rakust ja Ca2 pluss ülekoormus sissemitokondrid. Kaltsiumi ülekoormus mitokondrites on oluline põhjusmitokondriaalneoksüdatiivse fosforüülimise häire, struktuurikahjustused ja rakunekroos [8, 9]. Ca2 pluss ülekoormus vähendab mitokondriaalse membraani potentsiaali ja koe ATP sisaldust [10] ning koerakkude energiakasutus on häiritud. Ca2 pluss võib aktiveerida fosfolipaasi mitokondrites ja kahjustadamitokondriaalne membraan, hävitavad mitokondrite normaalse ATP sünteesi funktsiooni ja takistavad mitokondriaalset energia tootmist [11]. Häiredmitokondriaalne kaltsiumi metabolismvõib otseselt mõjutadamitokondriaalne hingamisfunktsioon, põhjustadesmitokondriaalne hapnikomastamise ja prootoni oksüdatsiooni häired elektronide transpordiahelas [12]. Samal ajal võib Ca2 plussi suurenemine süvendada estri peroksüdatsiooni kahjustusi mitokondritele [13]. Need kõik põhjustavad otseselt või kaudselt rakkude energiavarustuse katkemist ning kudede ja elundite surma ning kiirendavad sepsise patoloogiliste muutuste arengut. Eksperimendi käigus leidsime ka, et tegevusedM g2 pluss -ATPaas ja Ca2 pluss -M g2 pluss -ATPaas septilistel rottidelsamuti oluliselt vähenenud.Mg2 pluss -ATPaas ja Ca2 pluss -M g2 pluss -ATPaason olulised ained rakusisese kaltsiumi ja magneesiumi tasakaalu säilitamiseks. Widner teatas, et intratsellulaarsete magneesiumiioonide vähenemine on pöördumatu rakukahjustuse indutseeriv tegur ning Mg 2 pluss /Ca2 pluss on oluline näitaja, mis peegeldab rakkude pöördumatut kahjustust [14]. TheMg2 pluss -ATPaas ja Ca2 pluss -M g2 pluss -ATPaastegevusedCistanche-manustatud rühm olid tõhustatud, A TPaas on sulfhüdrülaas jaCistancheomab membraanivastast estri peroksüdatsiooniefekti, mis võib olla tingitudATPaasCistanche'i keemia ja farmakoloogia alused [15].

Sepsises, mitokondriaalneenergiavahetuse häire, vähenenudATP ensüümi aktiivsus, mitokondriaalne turse, rakusisene kaltsiumi ülekoormus ja kaltsiumi-magneesiumi tasakaalu häired on sepsise rakusurma ja mitme organi puudulikkuse otsesed põhjused.Cistancheantagoniseerib membraani estri peroksüdatsiooni, suurendab ATPaasi aktiivsust, säilitab intratsellulaarse kaltsiumi ja magneesiumi homöostaasi ning kaitseb raku funktsioonide normaalset toimimist.Cistancheon oluline mehhanism suremuse vähendamiselseptilised rotid. See näitab häid väljavaateidCistanche sepsise ravis