Cistanche Tubulosa koostise analüüs: fenüületanoidglükosiidi ja neolignaanglükosiidi eraldamine ja struktuur

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche Tubulosa (Schrenk) konksu koostisosad. F. II.1) Uue fenüületanoidglükosiidi ja uue neolignaanglükosiidi eraldamine ja struktuurid

Fumio Yoshizawa,* Takeshi Deyama/ Nobuo Takizawa/ Khan UsmanghaniJ ja Mansoor Ahmad6

Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Jaapan ja Karachi ülikooli farmaatsiateaduskonna farmakognoosia osakond? Karachi-32, Pakistan. Saabunud 9.11.1989

Uusfenüületanoidglükosiidnimega tubulosiid E (I) ja uusneoligaan glükosiid, dehüdrodikoniferüülalkohol yO-0-D-glükopüranosiid (II), eraldati kogu taimedest.Cistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. (Orobanchaceae), together with dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-^-D-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-a-L- rhamnopyranoside (IV), isosyringalide S'-a-L-rhamnopyranoside (V), (+ )-syringaresinol O-^-D-glucopyranoside (VI), ( + )-pinoresinol O-^-D-glucopyranoside (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX), 8-epiIoganic acid (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol l-j?-D-glucopyranoside (XII) and syringin (XIII). The structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl O-a-L-rhamnopyranosyl-(l ->3) -2-O-atsetüül-4-opkumaroüül-^-D-glükopüranosiid keemiliste tõendite ja spektriandmete põhjal.

Märksõnad Cistanche tubulosa-, Orobanchaceae;fenüületanoidglükosiid;iridoid; tubulosiid E; dehüdrodikoniferüülalkoholi glükosiid; syringaliid ramnosiid;neoligaan glükosiid; 13C-NMRMOE

fenüületanoidglükosiid tsitanche'is

Eelmises artiklis kirjeldasime uute isoleerimist ja struktuuri määramistfenüületanoidglükosiidid, tubulosiidid A一D kogu taimedestCistanche tubulosa(Schrenk) Konks. f. (Orobanchaceae) Pakistanis.

See artikkel käsitleb uue isoleerimist ja struktuuri selgitamistfenüületanoidglükosiid, nimega tubulosiid E (I) ja uusneoligaan glükosiid, dehüdrodikoniferüülalkohol ■/-QgD-glükopüranosiid (II), samuti 11 teadaoleva ühendi eraldamine, dehüdrodikoniferüülalkohol 4-OgD-glükopüranosiid (III), syringaliid A 3'-aL-ramnopüranosiid (IV), isosüringaliid 3'-aL-ramnopüranosiid (V), (pluss )-süstaresinool OgD-glükopüranosiid (VI), (pluss)-pinoresinool OgD-glükopüranosiid (VII), liriodendron (VIII), 6-deoksükatalpol (IX) , 8- epilogaanhape (X), 20-hüdroksüekdüsoon (XI), 8-hüdroksügeraniool1-gD-glükopüranosiid (XII) ja syringiin (XIII). Ühendid VI, VIII一X, XII ja XIII eraldati varem Cistanche salsast?'

Tubulosiid E (I) eraldati amorfse pulbrina, C31H38O15 -3/2H2O, [a】D -134.0 kraad (MeOH). Infrapunaspekter (IR) viitas hüdroksüülrühmade (3430cm-1), konjugeeritud estri (1734 cm-x), kaksiksideme (1634 cm-1) ja aromaatsete tsüklite ( 1608 ja 1518 cm{15}}). Prootoni tuumamagnetresonantsi 0H-NMR) spekter I näitas signaale, mis on tingitud ramnoosi metüülrühmast 0 1,07 (3H, d, J= 6 Hz)], atsetoksüülrühmast {{22} },98 (3H, s)], bensüülmetüleenprootonid 0 2,72 (2H, t, J—1 Hz)], glükoosomeerne prooton 0 4,54 (1 H, d, J{{ 32}} Hz)], ramnooseanomeerne prooton 0 5.00 (1H, br s)], kaks olefiinset prootonit [<5 6.34,="" 7.66="" (1h="" each,="" d,="" j="16" hz)]="" and="" aromatic="" protons="" 0="" 6.50—7.46="">

Atsetüülimisel andis ühend I oktaatsetaadi (la), mille 】H-NMR spekter näitas viit alifaatset atsetoksüülrühma 0 1,87, 1,95, 2,02 (igaüks 3H, s), 2,10x2 (6H, s)] ja kolm aromaatset atsetoksüülrühma [<5 2.27,="" 2.28,="" 2.31="" (3h="" each,="" s)].="" as="" shown="" in="" table="" i,="" the="" carbon="" nuclear="" magnetic="" resonance="" (13c-nmr)="" spectrum="" of="" i="" was="" almost="" identical="" with="" that="" of="" 2'-acetylacteoside="" (ib)「)except="" for="" the="" signals="" due="" to="" the="" ^-coumaric="" acid="">

I metanolüüsil atsetüülkloriidiga metanoolis tuvastati metüül-p-kumaraat ja 3, 4-dihüdroksüfenetüülalkohol õhukese kihi kromatograafia (TLC) ja kõrgsurvevedelikkromatograafia (HPLC) abil.

Ühendi I happeline hüdrolüüs 10% väävelhappega andis glükoosi ja ramnoosi vahekorras 1:1.

From the above results, the structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethy 1 O-a-L- rhamnopyranosyl-( 1 -^3)-2-(?-acetyl-4-O-/>-kumaroüül-^-D-glükopüranosiid.

Ühend III eraldati amorfse pulbrina, [a]D - 56,4 kraadi (MeOH). Ühendi III ensümaatiline hüdrolüüs andis amorfse pulbrina aglükooni (Illb), [0]270–11300, [a]D –31,6 kraadi (MeOH) ja glükoosi. Ühendid Illb ja III identifitseeriti kui dehüdrodikoniferüülalkohol3,4) ja selle 4-O-#-D-glükopüranosiid,3,4), võrreldes autentsete proovidega (TR,】H- ja 13C-NMR spektrid). .

Ühend II eraldati amorfse pulbrina, [a]D 一 7,4 kraadi (MeOH), mille IR-spekter viitas hüdroksüülrühma (3430 cm-1) ja aromaatse tsükli (1614, 1522, 1502 cm) olemasolule. T). II 〔H-NMR näitas kahe aromaatse metoksüülrühma 0 3,74, 3,80 (3H, s)], bensüüli prootoni 0 5,45 (1H, d, J{{) signaale. 16}}Hz)], kaks trans-olefiinset prootonit 0 6.17 (1H, dt, J= 16, 7 Hz), d 6,58 (1H, d, J= 16 Hz)] ja viis aromaatset prootonit 0 6,7一7,1 (5H, m)]. Atsetüülimisel andis ühend II heksaatsetaadi (Ila), mille 'H-NMR spekter näitas viit alifaatset atsetüülsignaali 0 2,01, 2,03, 2,09, 2,06 (3H, 3H, 3H, 6H)]. Ühendi II ensümaatiline hüdrolüüs andis aglükooni (lib) ja glükoosi. Ühend lib eraldati amorfse pulbrina, [a]D pluss 34,8 kraadi (MeOH), mille IR, iH- ja 13C-NMR spektrid olid peaaegu identsed ühendi Illb omadega, välja arvatud [a]D väärtused ja ringdikroism (CD). ) spekter.

Lib-i absoluutset konfiguratsiooni selgitati selle CD-spektri võrdlemisel Illb ja III spektriga, mille stereokeemia kinnitati avaldatud andmetes.4) Lib-i CD-spekter näitas A& pluss 14100 (270) ja pluss 15200 (283) positiivsed maksimumid seevastu näitasid A& -11300 (270) ja -10990 (283) negatiivsete maksimumidena. Need faktid viitavad sellele, et lib ja Illb on üksteise enantiomeerid. Lib stereokeemia peab vastama joonisel 1 näidatud skeemile.

Seega leiti, et ühend II on dehüdrodikoniferüülalkoholi monoglükosiid. Glükoosi asukoht

vastavalt. Vastavate süsinikuaatomite nihked lib-st II-le minnes olid -4,4 ja pluss 7,3 ppm, mis näitas, et II glükosüülfragment oli seotud hüdroksüülrühmaga Cy'-aatomi juures.5)

Ülaltoodud tulemuste põhjal määrati ühend II dehüdrodikoniferüülalkoholina y'-O-^-D-glükopüranosiid.

Ühendid IV ja V eraldati amorfse pulbrina (IV, C29H36O14 • 5/2H2O; V, C29H36O14- 1/2H2O). IR-spektrid viitasid hüdroksüülrühmade (3400 cm7), kaksiksideme (1634 cm-1) ja aromaatsete tsüklite (1606 ja 1518 cm-1) olemasolule. Atsetüülimisel andsid ühendid IV ja V oktaatsetaadid ( IVa, Va), mille 1H-NMR spektrid näitasid vastavalt viit alifaatset atsetoksüüli ja kolme aromaatset atsetoksüüli signaali. Ühendid IVa ja Va identifitseeriti vastavalt süringaliid A 3'-aL-ramnopüranosiidoktaatsetaadiks ja isosüringaliid-3'-aL-ramnopüranosiidoktaatsetaadiks, võrreldes (以 IR ja 】H-NMR) autentsete proovidega.6) 'H- ja IV ja V13C-NMR spekter toetas neid struktuure (vt eksperimentaalne osa). Ühendid VI-XIII identifitseeriti kui (pluss )-süstal-esinool O-少-D-glükopüranosiid (VI),2c) (pluss )-pinoresinool O- jS-D-glükopüranosiid (VII),7) liriodendriin (VIII),2Z,) 6-deoksükatalpol (IX),2c) 8-epilogaanhape (X),2fl) {{50} }hüdroksüekdüsoon (XI),8) 8-hüdroksügeraniool 1-0-D-glükopüranosiid (XII) ja süringiin (XIII),2d) võrreldes autentsete proovidega

Eksperimentaalne

Sulamistemperatuurid määrati Mitamura mikrosulamistemperatuuri aparaadiga ja need on korrigeerimata. Optilisi pöördeid mõõdeti JASCO DIP-140 digitaalse polarimeetriga. IR spektrid registreeriti Hitachi 279-30 IR spektrofotomeetriga ja ultraviolett (UV) spektrid Hitachi 200-20 spektrofotomeetriga. CD spektrid registreeriti JASCO J-20CD spektrofotomeetriga ja massispektrid (MS) JEOL JMS-100 abil. 'H-NMR ja 13C-NMR spektrid registreeriti seadmega JEOL FX-90Q (vastavalt 89,55 ja 22,5 MHz).

Keemilised nihked on antud skaalal d (ppm), kasutades sisestandardina tetrametüülsilaani (TMS). Tuumamagnetresonantsi (NMR) andmete jaoks kasutatud lühendid on järgmised; s, singlett; d, dublett; t, kolmik; q, kvartett; br, lai. Gaasikromatograafia (GC) viidi läbi Shimadzu GC{0}}CM aparaadil koos leekionisatsioonidetektoriga. HPLC viidi läbi Hitachi 655A-11 masinaga. Kolonnkromatograafias kasutati silikageeli (Wako gel C-300). TLC jaoks kasutati silikageeliga 60 F254 (Merck) eelkaetud plaate ja tuvastamine viidi läbi 10% H2SO4 pihustamisega, millele järgnes kuumutamine.

Isolatsioon

Terved taimedcistanche tubulosa(7 kg), koguti 1986. aasta detsembris Karachis, Pakistanis, ekstraheeriti tagasijooksul MeOH-ga (20 1 x 2). Ekstrakt kontsentreeriti alandatud rõhul ja jääk suspendeeriti vees. Seda suspensiooni ekstraheeriti veega küllastatud EtOAc-ga. Veekiht allutati Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) kolonnile ja pesti H2O-ga ning seejärel elueeriti MeOH-ga. MeOH eluaat (140 g) kromatografeeriti polüamiid C-200 (Wako Pure Chemical) kolonnis, kasutades H2O ja seejärel MeOH, et saada kaks fraktsiooni (fraktsioon 1, H2O eluaat; fraktsioon 2, MeOH eluaat). Fraktsioon 1 kontsentreeriti, et saada jääk. Jääk kromatografeeriti silikageelikolonnis, kasutades korduvalt CHCl3-MeOH-H2O-d. Pärast korduvat HPLC kromatograafiat (kolonn, Develosil ODS-10, 20 x 250 mm; lahusti; H2O-CH3CN või H2O-MeOH) eraldati 10 ühendit [II (45 mg), III (40 mg), VI (35 mg) ), VII (43 mg), VIII (12 mg), IX (8 mg), X (10 mg), XI (20 mg), XII (10 mg) ja XIII (3,6 mg)]. Fraktsiooni 2 töödeldi samamoodi nagu fraktsiooni 1 ja saadi ühendid I (150 mg), IV (10 mg) ja V (10 mg).

Tubulosiid E (I)

Amorfne pulber, [a]p3 –134.0 kraadi (c= 1.5, MeOH). Anal. arvut. C31H38O15 -3/2H2O jaoks: C, 54,98; H, 6,10. leitud: C, 55,01; H, 5,98. IR cm{18}}: 3430,1732, 1634, 1608,1518. ]H-NMR (MeOH{24}}) 3: 1,07 (3H, d, J=6 Hz, ramnoosi CH3), 1,98 (3H, s, OAc), 2,72 (2H, t, J{ {37}}Hz, Ar-CH2~), 4,54 (1H, d, J=8Hz, glükoosi Hl), 500 (1H, brs, ramnoosi Hl), 6,34 ( 1 H, d, J= 16 Hz, Ar-CH=CH-), 6,5 一6,8 (3H, aromaatne H), 6,80 (2H, d, J-9 Hz, H{ {65}}; H-5'), 7,46 (2H, d, J=9Hz, H-2; H-6Z), 7,66 (1H, d, J= 16 Hz, Ar—CH=CH—). 13C-NMR: tabel L

Dehüdrodikoniferüülalkohol y^-O-^-D-GIukopüranosiid (II)

Amorfne pulber, [a]^5 -7,4 kraadi (c= 1,6, MeOH). IR cm"1: 3430, 1614, 1522, 1502. UV h nm: 227 (sh), 280. H・NMR (DMSO-rf6) J: 3,74, 3,80 (igaüks 3H, s, OCH3), 5,45 (1H, d, 丿=6 Hz, Ha), 6,17 (1H, dt, 丿=16, 7 Hz, H-#), 6,58 (1H, d〃= 16Hz; H-az) 6,7-7,1 (5H, m, aromaatne H).13C-NMR: tabel I.

Dehüdrodikoniferüülalkohol 4-Oj8-D-glükopüranosiid (III)

Amorfne pulber, [a]^5 -56.4.(c= 1.1, MeOH). IR cm-1: 3400, 1604, 1566, 1502. UV 11 nm; 222, 277. XH-NMR (DMSO-(76) 6: 3,76, 3,82 (igaüks 3H, s, OCH3), 5,52 (1 H, d, J-7 Hz, Ha), 6,18 (1 H, dt, J=16, 7 Hz, H-^), 6,49 (1H, d,<7=16 hz,="" h-"),="" 6.7—7.2="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="">

Süringaliid A 3'-(xL-ramnopüranosiid (IV)

Amorfne pulber, anal. arvut. C29H36O14 • 5/2H2O jaoks: C, 56,11; H, 5,94. leitud: C, 56,4{{107}}; H, 6,04. IR cm- protsent 3400, 1606, 1518. 】H・NMR (MeOH-J4) d: 1,15 (3H, d, J-6 Hz, ramnoosi CH3), 2,90 (2H, t, J{{27) }} Hz, Ar-CH2-), 4,46 (1H, d, J=8Hz, glükoosi Hl), 5,27 (1H, brs, ramnoosi Hl), 6,35 (1H, d, J-16Hz, Ar—CH=CH—), 6,6—7,3 (3H, aromaatne H), 7,68 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH {{54) }} CH-). 13C-NMR (CD3OD) 8: 130,6 (Cl), 116,1 (C{65}}), 130,8 (C{68}}, 156,6 (C{71}}), 116,1 (C{74}}). ), 72,1 (Ca, rham-2, 3), 36,2 (C-8), 127,6 (Cr), 114,6 (C2), 149,6 (C・3'), 146,6 (C{{94) }}'), 116,4 (C-5'), 123,1 (C-6'), 168,2 (C・a'), 115,2 (C书), 147.{106}},0 (glu-1), 76,0

(glu-2), 81,5 (glu-3), 70,3 (glu-4), 75,9 (glu-5), 62,3 (glu-6), 102,8 (rham-1), 73,7 (rham-4), 70,5 (rham-5), 18,3 (rham-6).

Isosüringaliid S^aL-ramnopüranosiid (V)

Amorfne pulber, anal. arvut. C29H36O14-1/2H2O jaoks: C, 56,31; H, 5,96. leitud; C, 56,4{{70}}; H, 6,04. IR 唸cm{13}}: 3420, 1608, 1518. XH-NMR (MeOH-J4) d: 1,09 (3H, d, 丿=6 Hz, ramnoosi CH3), 2,80 (2H, t, J-6 Hz, Ar-CH2-), 4,40 (1H, d, J=8Hz, glükoosi Hl), 5,23 (1H, br s, ramnoosi Hl), 6,37 (1H, d, J-18Hz, AsCH=C旦'一), 6,6-7,2 (3H, aromaatne H), 7,71 (1H, d, 丿=18Hz, Ar -CH=CH-y13C-NMR (CD3OD) S: 131,4 (Cl), 116,3 (C{65}}), 144,5 (C-3X 146,0 (C{71}}) ), 117,0 (C-5), 121,2 (C-6), 72,2 (Ca), 36,5 (C/), 127,1 (Cr), 116,8 (C-2\ 69, 131,2). (C-3\ 5'), 161,2 (C-4'), 168,2 (CH), 114,7 (C-^), 147,5 (Cy), 104,1 (glu-1), 76,1 (glu-2), 81,5 (glu-3),

70,2 (glu-4), 75,9 (glu-5), 62,3 (glu-6), 102,8 (rham-1), 72,1 (rham-2, 3 ), 73,7 (rham-4), 70,6 (rham-5), 18,4 (rham-6).

( pluss )-Syringaresinol Ojα-D-glükopüranosiid (VI)

Amorfne pulber, [a]g5 -14,4.(c=0.1, MeOH). Anal. arvut. C28H36O13 jaoks: C, 57,93; H, 6,25. leitud: C, 58,01; H, 6,26. IRv^cm-1: 3430, 1600, 1518. 】H・NMR (DMSO"6): 3,78 (12H, s2OCH3 x 4), 6,60, 6,66 (igaüks 2H, s, aromaatne H).

( pluss )-pinoresinool O-^-D-glükopüranosiid (VII)

Amorfne pulber, [a]^5 pluss 38,9 kraadi (c=0,6, MeOH). Anal. arvut. C26H32O11T/2H2O jaoks: C, 58,97; H, 6,28. leitud: 58,94; H, 6,29. IR cm{18}}: 3425, 1606, 1516. 】H-NMR (C5D5N) W 3,77, 3,80 (igaüks 3H, s, OCH3), 6,9-7,7 (6H, m, aromaatne H).

Liriodendron (VIII)

Värvusetud nõelad (MeOH), st 255 °C 257 °C, [a]p5 -9,2 kraadi (c=L3, püridiin). IR cm{6}}: 3400, 1598, 1510. XH-NMR (DMSO/6)<5: 3.78="" (12h,="" s,="" och3x4),="" 6.67="" (4h,="" s,="" aromatic="">

6-Deoksükatalpol (IX)

Värvusetud nõelad (MeOH), st 204-206 kraadi, [a]p5 -50,1 kraadi (c=0,7, MeOH). Anal., arvut. C15H22O9 jaoks: C, 52,02; H, 6,40. leitud: C, 52,12; H, 6,41. IR 唸cm{17}}: 3400, 1658. 】H・NMR (D2O) 3:

l. 3-1,9 (1H, m, H-6), 2,1-2,7 (3H, m, H-5, H-6, H-9), 3,65 (1H, s-sarnane, H-7), 3,90, 4,35 (2H, ABsüsteem, J=13Hz, H-10), 4,92 (1H, d, J=7 Hz, aromeerne H), 5,10 (1 H, dd, J=6, 4 Hz, H-4), 5,12 (1 H, d, J-10Hz, Hl), 6,38 (1 H, dd, 1 Hz, H-3).

{{0}}Epilogaanhape (X) värvitud nõelad (MeOH), st 147 °C 149 °C, [a]p5 - 135.0 kraadi (c= 1.0, püridiin). ). Anal. arvut. C16H24O10H2O jaoks: C, 48,73; H, 6,65. leitud: C, 48,60; H, 6,70. IR v;cm{10}}: 3400, 1680, 1640, 1430. 】H・NMR (C5D5N)<5: 1.18="" (3h,="" d,="" j="7Hz," ch3),="" 2.2—2.5="">

m, H-6), 2,60 (1 H, m, H-8), 3,08 (1 H, dt, J=3, 8,5 Hz, H-9), 3,58 ( 1H, m, H{15}}), 5,40 (1H, d, J=7,5 Hz, anomeerne H), 5,91 (1H, d〃=3Hz, Hl), 7,92 (1H) , s, H-3).

20-Hüdroksüekdüsoon (XI)

Kristalliline tahke aine, st 241 °C 242 °C, [a]p5 pluss 70.0 kraadi (c= LI, MeOH). Anal. arvut. C27H44O7 jaoks: C, 67,47; H, 9,23. leitud: C, 67,28; H, 9,18. IR cm{17}}: 3440, 1646. XH-NMR (C5D5N) 1,06 (3H, s, H-19), 1,20 (3H, s, H-1), 1,36 (6H, s, H-26, H-27)? 1,58 (3H, s, H{39}}), 6,24 (lH,d, J=2Hz, H{43}}). 13C-NMR (C5D5N): 38,0 (Cl),

68,2 (C-2, C-3), 32,5 (C・4), 51,5 (C-5), 203,7 (C-6), 121,8 (C-7), 166,3 (C-8), 34,6 (C-9), 38,8 (C-10), 21,3 (C-ll), 31,9 (C) {{30}}), 48,2 (C-13), 84,4 (C-14), 32,1 (C-15), 21,6 (C-16 ), 50,2 (C-17), 18,0 (C-18), 24,6 (C-19), 77,0 (C-20), 21,8 (C-21 ), 77,7 (C-22), 27,6 (C-23), 42,7 (C-24), 69,8 (C-25), 30,1 (C-26 , 27).

8-Hüdroksügeraniool 1-^-D-GIukopüranosiid (XII)

Värvusetud nõelad (MeOH), st 58-60 kraadi, [a]^5 -40,1 ​​(c=L2, MeOH). Anal. arvut. C16H28O71/2H2O jaoks: C, 56,29; H, 8,56. leitud: C, 56,40; H, 8,50. IR cm"1: 3350, 1670, 1446. XH-NMR (C5D5N)<5: 1.72,="" 1.59="" (3h="" each,="" s,="" ch3),="" 2.04="" (4h,="" brm,="" h-4,="" h-5),="" 4.80="" (1h,="" d,="" j="7.5Hz," anomeric="" h),="" 5.56="" (2h,="" brt,="" j="7Hz,">

Syringin (XIII)

Värvusetud nõelad (MeOH), st 188 °C 189 °C, [a]^5-15,3 kraadi (c=0,4, MeOH). Anal. arvut. C17H24O9 jaoks: C, 55,13; H, 6,53. leitud: C, 54,83; H, 6,50. IR cm{18}}: 3400, 1592, 1514. 'H-NMR (DMSO/6)W 3,78 (6H, s, OCH3 x 2), 6,3-6,5 (2H, m, -CH=CH-), 6,72 (2H, s, aromaatne H).

Ühendi I atsetüülimine Ühend I (50 mg) lahustati püridiinis (1 ml) ja atseetanhüdriidis (1 ml) ning jäeti ööseks toatemperatuurile seisma. Reaktsioonisegu valati jäävette ja seejärel ekstraheeriti EtOAc-ga. EtOAc ekstrakt kontsentreeriti vaakumis ja jääk kromatografeeriti silikageelikolonnis, kasutades benseen-atsetooni (5:1), et saada oktaatsetaat (la) (35 mg). IR cm"1: 1760, 1638, 1604, 1508. iH-NMR (CDC13) (5: 1,02 (3H, d, J=6 Hz, ramnoosi CH3), 1,87, 1,95, 2,02 (igaüks 3H, s, OAc), 2,10 (6H, s, OAc x 2), 2,27, 2,28, 2,31 (igaüks 3H, s, Ar-OAc), 2,90 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH{ {43}}), 6,38 (1H, d, J=16Hz, AR~CH=CH-), 6,80-7,15 (3H, m, aromaatne H), 7,24 (2H, d, J-9 Hz, H-3\ H・5'), 7,55 (2H, d, 丿=9Hz, H-2, H-6), 7,72 (1 H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-).

II ja III atsetüülimine

Ühendid II ja III (mõlemad 20 mg) atsetüüliti samal viisil, nagu on kirjeldatud ühendi I puhul, ja saadi heksaatsetaadid [Ila (12 mg), Illa (15 mg)]. Ila: IR 唸顋 cm-1: 1754, 1608, 1506. 】H・NMR (CDC13) 5: 2,01, 2,03, 2,09 (igaüks 3H, s, OAc), 2,06 (0Ac, x2, s) ), 2,30 (3H, s, OAc), 3,84 (3,95 (igaüks 3H, s, OCH3), 5,54 (1 H, d, 丿=6Hz, Ha), 6,05 (1 H5 dt, J{38} }, 7 Hz, H-^), 6,53 (1H, d, «/= 16Hz, H-a'), 6,8一7,1 (5H, m, aromaatne H). Illa: IR v^cm1: 1760, 1604, 1516. 】H-NMR (CDC13)<5: 2.05="" (9h,="" s,="" oac="" x="" 3),="" 2.08="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.11="" (3h,="" s,="" oac),="" 3.80,="" 3.92="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 5.51="" (1h,="" d,="" j="7Hz," h-a),="" 6.14="" (1h,="" dt,="" j="16," 7hz,="" h-#),="" 6.62="" (1h,="" d,丿="16Hz,">

(5H, m, aromaatne H).

IV ja V atsetüülimine

Ühendid IV ja V atsetüüliti samal viisil, nagu kirjeldati ühendi I puhul, ja saadi oktaatsetaadid [IVa, Va]. IVa: IR 唸児 cmT: 1754, 1636, 1514. 】H・NMR (CDC,) W 1,03 (3H d, J=6 Hz, ramnoosi CH3), 1,87, 1,94, igaüks 1,99 (3H) s, OAc), 2,09 (6H, s, OAcx2), 2,28 (6H, s, OAcx2), 2,30 (3H, s, OAc), 2.{27}} (2H, t, J=6 0,6 Hz, Ar■-CH2—), 3,67 (2H, t, J=7,2 Hz Ar-CH2~CH2-), 6,35 (1 H, d, J=16 Hz , AsCH=CU—), 6,87—7,35 (3H, m, Ar—7,09 (4H, q, J=8,6 Hz, A2/B2/tüüp), 7,65 (1 H, d, J =16Hz, Ar CH=CH). Va: IR cm-1: 1750, 1636, 1608, 1514. ^-NMR (CDC13) 1,03 (3H, d,<7= 6="" hz,="" ch3="" for="" rhamnose),="" 1.87,="" 1.94,="" 2.02="" (3h="" each,="" s,="" oac),="" 2.09="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.28="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.31="" (3h,="" s,="" oac),="" 2.86="" (2h,="" t,="" j="6.6" hz,="" ar-ch2-),="" 3.73="" (2h,="" t,=""><7=6.6 hz,="" ar="" ch2-ch2-),="" 6.34="" (lh,d,="" j="16" hz,="" ar—ch="" —="" ch—),="" 6.78—7.20="" (3h,="" m,="" ar—h),="" 7.31="" (4h,="" q,=""><7=8.5>

A2zB/tüüp), 7,71 (1H, d, «/=16Hz, Ar-CH=CH ).

I metanolüüs

Ühendit I (umbes 1 mg) keedeti püstjahutiga 5% metanoolilahuses CH3COC1 (2 ml) 3 0 min ja seejärel aurutati reaktiiv vaakumis välja. Metüül-p-kumaraadi ja 3,4-dihüdroksüfenetüülalkoholi olemasolu jäägis tuvastati TLC [CHCl3-MeOH (10:1)] ja HPLC [veerg, Develosil ODS -7 (4,6 x 250 mm); lahusti, 55% MeOH; detektor (UV), 220 nm; voolukiirus, 1,0 ml/min]. metüül-p-kumaraat; Rf 0,82, ;R (min) 8,8, 3,4-dihüdroksüfenetüülalkohol; 0,31, tR (min) 3,2.

IA happeline hüdrolüüs

ühendi I (2 mg) lahust 1 0 protsendilises H2SO4-s (1 ml) kuumutati keeva veevannil 30 minutit. Lahus lasti läbi Amberlite IR-45 kolonni ja kontsentreeriti, et saada jääk, mida redutseeriti naatriumboorhüdriidiga (ca 3 mg) 1 tund. Reaktsioonisegu lasti läbi Amberlite IR-120 kolonni ja kontsentreeriti kuivaks. Boorhape eemaldati destilleerimisega MeOH-ga ja jääk atsetüüliti atseetanhüdriidi (1 tilk) ja püridiiniga (1 tilk) 100 kraadi juures 1 tund. Reaktiivid aurustati vaakumis välja. GC-ga tuvastati ühendist I glütsitoolatsetaat ja ramnitoolatsetaat vahekorras 1:1. Seisund: kolonn, 1,5 protsenti OV-17, 3 mm x 1,5 m; kolonni temp., 180 kraadi ; kandegaas, N2 (30 ml/min). tR (min): 2,0 (ramnitoolatsetaat), 5,5 (glütsitoolatsetaat).

II ja III ühendi II ensümaatiline hüdrolüüs

(13 mg) või III (40 mg) hüdrolüüsiti tsellulaasiga (40 mg) vees (1 ml) 2 tundi temperatuuril 37 kraadi. Reaktsioonisegu ekstraheeriti EtOAc-ga. EtOAc ekstrakt kontsentreeriti vaakumis, et saada jääk, mis kromatografeeriti HPLC-ga [kolonn, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); lahusti. II: H2O-CH3CN (77,5:22,5); III: H20-CH3CN (80:20); detektor (UV), 205 nm; voolukiirus, 6,0 ml/min], et saada lib (3,3 mg), Illb (5,7 mg). lib: [a]^5 pluss 34,8 kraadi (c=0.3, MeOH). CD (c=3.3mg/10ml, MeOH) [0]25 (nm): 1740 (330), 15200 (283), 14100 (270), 0 (247), - 16700 (232) ). IR 唸E; cm"1: 3380, 1606, 1520, 1500. UV nm: 276. MS m/z (protsenti): 358 (M pluss, 53), 340 (M pluss -H2O, 100), 338 (58), 325 ( 47), 310 (23), 162 (41), 151 (36), 137 (59). XH-TMR (atsetoon-J6)<5: 3.55="" (1h,="" brt,=""><7=6hz, h-g),="" 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 4.19="" (2h,="" brd,="" j-5hz,="" h-yz),="" 5.56="" (1h,="" d,="" j="6," 5="" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,=""><7=16, 5="" hz,="" h-#),="" 6.56="" (1h,="" brd,="" j="16Hz," hh),="" 6.7—7.1="" (5h,="" m,="" aromatich).="" 13c-nmr:="" tablel.iiib:="" [a]-31.6°="" (c="0.6," meoh).="" cd="" (c="2.28mg/lOml," meoh)="" [0]25="" (nm):="" 2200="" (330),="" 0="" (310),="" -10990="" (283),="" -11300="" (270),="" 0="" (242),="" 5650="" (232).="" 0-nmr="" (acetone-j6)=""><5: 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3="" x="" 2),="" 4.19="" (2h;="" brd,="" j="5Hz," h"'),5.56="" (1h,="" d,丿="6.5" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,丿="16," 5="" hz,="" h・#),="" 6.52="" (1h,="" d,="" j="16" hz,="" h-az),="" 6.7一7.1="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="" i.="" the="" ir="" and="" uv="" spectra="" were="" similar="" with="" that="" of="">

TunnustusOleme tänulikud prof A. Uenole ja dr T. Miyasele Shizuoka ülikoolist NMR ja CD spektrite mõõtmise ning nende väärtuslike soovituste eest ning dr M. Kikuchile Tohoku farmaatsiakolledžist. autentsed proovid.

Viited ja märkmed

1) H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani ja M. Ahmad, Chem. Pharm. Bull., 35, 3309 (1987).

2) a) H. Kobayashi ja J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase ja S. Fukushima, Chem. Pharm, Bull., 33, 1452 (1985); c) Idem, ibid., 33, 3645 (1985); d) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase ja S. Fukushima, Yakugaku Zasshi. 106, 721 (1986).

3) HD Ludemann ja H. Nimz, Die Makromolekulare Chemie., 175, 2393 (1974).

4) a) H. Achenbach, J. Grob, XA Dominguez, G. Cano, JV Star, LC Brussolo, G. Munoz, F. Salgado ja L. Lopez, Phytochemistry. 26, 1159 (1987); b) AN Binns, RN Chen, HN Wood ja DG Lynn, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 980 (1987); c) DG Lynn, RH Chen, KS Manning ja HN Wood, ibid., 84, 615 (1987).

5) T. Deyama, T. Ikawa, S. Kitagawa ja S. Nishibe, Chem. Pharm. Bull., 35, 1803 (1987).

6) M. Kikuchi, Y. Yamauchi ja F. Tanabe, Yakugaku Zasshi, 107, 350 (1987).

7) M. Chiba, S. Hisada, S. Nishibe ja H. Thieme, Phytochemistry, 19, 335 (1980).

8) a) H. Hikino, Y. Hikino, Fortschritted. Chem. Org. Naturst., 28, 256 (1970); b) RW Miller, J. Clardy, J. Kozlowski, KL Mikolajczak, RD Plattner, RG Powell, CR Smith, D. Weisleder ja Q.-T. Zheng, Planta Medica, 1985, 40.