Bioaktiivsed koostisosad Hiina looduslikest ravimitest. XXXVI.1) Neli uut atsüülitud fenüületanoid oligoglükosiidi, Kankanosides J1, J2, K1 ja K2, Cistanche Tubulosa varredest

Yingni PAN, Toshio MORIKAWA, Kiyofumi NINOMIYA, Katsuya IMURA, Dan YUAN, Masayuki YOSHIKAWA ja Osamu MURAOKA

Kinki Ülikooli farmaatsiauuringute ja -tehnoloogia instituut; 3–4–1 Kowakae, Higashi-Osaka, Osaka 577–8502, Jaapan: Traditsioonilise hiina meditsiini kool, Shenyangi farmaatsiaülikool; 103 Wenhua Rd., Shenyang 110016, Hiina Rahvavabariik: ja Kyoto Farmaatsiaülikool; Misasagi, Yamashina-Ku, Kyoto 607–8412, Jaapan. Vastu võetud 28. novembril 2009; vastu võetud 2. veebruaril 2010; avaldatud internetis 4. veebruaril 2010

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Abstraktne

Neli uut atsüüleeritud fenüületanoidi aminoglükosiide, kankanosiidid J1 (1), J2 (2), K1 (3) ja K2 (4), eraldati varredestCistanchetubulosa(Orobanchaceae) koos isokampneosiidiga I (5). Nende struktuurid selgitati keemiliste ja füüsikalis-keemiliste tõendite põhjal. Nende hulgas leiti, et 3–5 inhibeerivad D-galaktosamiinist põhjustatud tsütotoksilisust primaarsetes kultiveeritud hiire hepatotsüütides.

Cistanchetubulosal on palju efekte, klõpsake siin, et rohkem teada saada

Märksõnad:Cistanchetubulosa; Lanka pool; fenüületanoidi glükosiid; Orobanchaceae; hepatoprotektiivne aktiivsus.

Hiina looduslikest ravimitest pärinevate bioaktiivsete koostisosade uuringute käigus 1–3) leidsime, et kuivatatud varre metanoolne ekstraktCistanchetubulosa(SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) näitas vasorelaksanti4) ja hepatotprotektiivset tegevust.1) C kuivatatud varredest.tubulosa, viis iridoidi, kankanosiidid A–D ja kankanol, monoterpene glükosiid, kankanosiid E, kaks fenüületanoidi aminoglükosiide, kankanosiidid F ja G ning atsüüleeritud oligosuhkur kankanoos isoleeriti koos 30 teadaoleva koostisosaga.4,5) Hiljuti isoleerisime täiendavalt 19 fenüületatonoidset aminoglükosiide, sealhulgas kankanosidid H1, H2 ja I 1) ning kaks atsüleeritud oligosugarit C. tubulosa värsketest vartest. 1) Lisaks leiti, et peamised fenüületanoidi glükosiidid, ehhinakosiid, aktiossiid ja isoatsetosiid pärsivad seerumi aspartaadi aminotransferaasi (sAST) ja alaniini aminotransferaasi (sALT) taseme tõusu maksa vigastatud hiirtel, mille indutseerisid D-galaktosiin (D-GalN)/lipopolüsahhariid annustes 25–100 mg/kg os kohta (p.o.) ning fenüületanoidi glükosiidide struktuurinõuded hepatoprotektiivsele aktiivsusele selgitati.1) Jätkuva uuringuna värske värske toimeainete koostisosade kohta C varred.tubulosa, isoleerisime veel neli uut atsüületanoidset fenüületatoidoligoglükosiidi, kankanosides J1 (1), J2 (2), K1 (3) ja K2 (4). Käesolevas dokumendis käsitletakse isolatsiooni ja struktuuri selgitamist 1–4.

Värsked varred C.tubulosa(kasvatatud Urumqis, Xinjiangi provintsis, Hiinas) ekstraheeriti metanooliga refluksi all, et saada metanoolne ekstrakt (8,36% värsketest varredest). Metanooliekstraktist saadi H2O- ja MeOH-eluted fraktsioonid (vastavalt 5,63% ja 2,73%) Diaion HP-20 kolonnikromatograafia (H2O→MeOH) poolt, nagu varem kirjeldatud.1) MeOH-eluted fraktsiooni intensiivsete kromatograafiatega (vastavalt 5,63% ja 2,73%) saadi Diaion HP-20 kolonnikromatograafia (H2O→0002%), nagu seda varem kirjeldati.1) Intensiivsete kromatograafiatega MeOH-eluted fraktsioonil isoleeriti neli uut fenüületanoidi oligoglükosiidi, kankanosiidid J1 (1, 0,0002%), J2 (2, 0,0002%), K1 (3, 0,0002%) ja K2 (4, 0,0005%) koos isoampneosiidiga I6) (5, 0,0006%).

Kankanosides J1 (1) ja J2 (2) Kankanoside J1 (1) struktuurid saadi negatiivse optilise pöörlemisega valge pulbrina ([a]D 25 - 6,5° MeOH-s). IR-spekter 1 näitas neeldumisribasid 3414, 1734, 1719, 1701, 1638, 1508, 1159, 1067 ja 1046 cm- 1, mis on kirjeldatav hüdroksüülidele, ester karbonüülidele, eetri funktsioonidele ja aromaatsetele rõngastele. Positiivse ja negatiivse iooni FAB-MS spektrid 1 näitasid kvaasimolekulaarseid iooni piike m/z 719 (M- Na) ja m/z 695 (M H) juures ning molekulaarvalem määrati C32H40O17-ks kõrgresolutsiooniga positiivse ioonsusega FAB-MS mõõtmisel. 1 H- ja 13C-NMR spektrid 1 (CD3OD, tabelid 1, 2), mis määrati erinevate NMR-eksperimentidega,7) näitasid signaale, mis olid määratud metoksürühmale [d 3.21 (3H, s, 7-OCH3)], metüleen ja hapnikufunktsiooniga metaiin [d 3.58, 4.00 (1H igaüks, mõlemad m, 8-H2), 4.18 (1H, dd-like, J ca 4, 8 Hz, 7-H)], orto- ja meta-seotud ABC-tüüpi aromaatsed prootonid [d 6.63 (1H, dd, J 1.8, 8.2 Hz, 6-H), 6.74 (1H, d, J 1.8 Hz, 2-H), 6.74 (1H, d, J 8.2 Hz, 5- H)], b-D-glükopyranosyl moiety [d 4.54 (1H, d, J 7.8 Hz, Glc-1-H)], ja a-L-rhamnopyranosyl moiety [d 1.07 (3H, d, J 6.4 Hz, Rha-6-H3), 4.80 (1H, br s, Rha-1-H)] koos atsetüülrühmaga [d 2.00 (3H, s)] ja trans-caffeoyl rühmaga {trans-olefifin [d 6.26, 7.59 (1H kumbki, mõlemad d, J- 16.0 Hz, 8-, 7-H)] ja orto- ja meta-seotud ABC-tüüpi aromaatsed prootonid [d 6.77 (1H, d, J 8.2 Hz, 5-H), 6.95 (1H, dd, J- 1.8, 8.2 Hz, 6-H), 7.04 (1H, d, J 1.8 Hz, 2-H)]}. 1 H- ja 13C-NMR spektrid 1 olid kampinguidide I1,8–10, (6) omadele pealiskaudsed, välja arvatud atsetüülrühmast tulenevad signaalid. Aminoglükosiidi ja atsüülmoietide sideaineid 1. aastal kinnitas heteronukleaarne mitme sideme korrelatsiooni (HMBC) eksperiment, mis näitas pikaajalisi korrelatsioone järgmiste prootoni ja süsinikupaaride vahel: 7-OCH3 ja 7-C (dC 83.3); Glc-1-H ja 8-C (dC 74.1); Glc-2-H [d 4,91 (1H, dd, J- 7,8, 9,2 Hz)] ja atsetüülkarbonüülsüsi (dC 171,4); Glc-4-H [d 4.99 (1H, dd, J 9.2, 9.6 Hz)] ja kohvikuülenefeoüülkarbonüülsüsi (dC 168.1); ja Rha-1-H ja Glc-3-C (dC 80.5) (joonis 1). Lõpuks vabastas leeliseline hüdrolüüs 1 koos 5% kaaliumhüdroksiidiga (KOH) trans-kohvikufeehappe, mis tuvastati HPLC analüüsiga koos desapüleeritud tootega. Aatsüleeritud toodet töödeldi järjest 1,0 M soolhappega (HCl), et vabastada L-römnoos ja D-glükoos, mis tuvastati HPLC analüüsi abil optilise pöörlemisanduri abil.1–5) Seega selgitati kankanosiidi J1 struktuuri 2-metoksü-2-(3,4-dihüdroksüfenüül)etüül O-a-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-2-O-atsetüül-4-O-trans-caffeoyl-b-D-glükopümpoosiidiks (1).

Kankanoside J2 (2) eraldati negatiivse optilise pöördega valge pulbrina ([a]D 25 - 18,1° MeOH-s). Kõrge resolutsiooniga, positiivse ioonsusega FAB-MS mõõtmisel leiti, et molekulaarne valem 2 on sama, mis 1. 1 H- ja 13C-NMR-andmed 2 (CD3OD, tabelid 1, 2) olid väga sarnased 1-ga, välja arvatud aglükooni moiety etüülsillast tulenevad signaalid {metoksürühm [d 3.24 (3H, s, 7-OCH3)], metüleen [d 3.63 (d 1H, m), 3.83 (1H, dd, J- 3.2, 11.0 Hz), 8-H2] ja hapnikufunktsiooniga metiin [d 4.22 (1H, 1H, dd, J- 3.2, 8.2 Hz, 7-H)]}. Leeliseline hüdrolüüs 2 koos 5% KOH vabanenud trans-caffeichappega koos desaüleeritud tootega ja desacylateeritud toodet töödeldi järjest 1,0 M HCl-ga, et vabastada L-riffnoos ja D-glükoos. Nagu on näidatud joonisel 1, täheldati HMBC eksperimendis samu pikamaa korrelatsioone nagu 1 puhul. Sellest tulenevalt selgus, et kankanoside J2 (2) planaarne struktuur on sama, mis 1-l, ja selgitati 7-isomeer 1-st. 11)

Kankanosides K1 (3) ja K2 (4) Kankanosides K1 (3) ja K2 (4), C36H48O21 struktuurid saadi ka negatiivsete optiliste pöörlemistega valgete pulbritena (3: [a]D 25 - 75,3°; 4: [a]D 25 - 7,4° mõlemad MeOH-s). 1 H- ja 13C-NMR spektrid 3 ja 4 (CD3OD, tabelid 1, 2) näitasid metoksürühmale määratavaid signaale [3: d 3.23 (3H, s, 7- OCH3); 4: d 3.25 (3H, s, 7-OCH3)], metüleen ja metiin, millel on hapnikufunktsioon {3: d [3.62 (1H, dd, J- 3.4,11.0 Hz), 4.02 (1H, dd, J- 8.1, 11,0 Hz), 8-H2], 4,34 (1H, dd, J- 3,4, 8,1 Hz, 7-H); 4: d [3,72 (1H, dd, J- 9,1, 11,0 Hz), 3,84 (1H, dd, J- 3,1, 11,0 Hz), 8-H2], 4,37 (1H, dd, J- 3,1, 9,1 Hz, 7-H)}, orto- ja meta-seotud ABC-tüüpi aromaatsed prootonid [3: d 6,68 (1H, dd, J- 2,0, 8,1 Hz, 6-H), 6,76 (1H, d, J- 8,1 Hz, 5-H), 6,80 (1H, d, J- 2,0 Hz, 2-H); 4: d 6,67 (1H, dd, J- 1,9, 8,2 Hz, 6-H), 6,76 (1H, d, J- 8,2 Hz, 5-H), 6,78 (1H, d, J- 1,9 Hz, 2-H)], kaks b-D-glükkopüranosüülmoiet [3: d 4,31 (1H, d, J- 7,9 Hz, terminal-Glc-1-H), 4,40 (1H, d, J- 7,9 Hz, sise-Glc-1-H); 4: d 4,26 (1H, d, J- 7,7 Hz, terminal-Glc-1-H), 4,44 (1H, 1H, d, J- 7,9 Hz, sisemine-Glc-1-H)], ja a-L-rhamnopyranosyl moiety [3: d 1.08 (3H, d, J 6.4 Hz, Rha-6-H3), 5.19 (1H, d, J- 1.7 Hz, Rha-1-H); 4: d 1.08 (3H, d, J- 6.2 Hz, Rha-6-H3), 5.20 (1H, d, J- 1.6 Hz, Rha-1-H)] koos trans-caffeoyl rühmaga {an trans-olefifin [3: d 6.27, 7.60 (1H kumbki, mõlemad d, mõlemad d, J- 15,8 Hz, 8-, 7-H); 4: d 6.28, 7.60 (kumbki 1H, mõlemad d, J- 15.8 Hz, 8-, 7-H)] ning orto- ja meta-seotud ABC-tüüpi aromaatsed prootonid [3: d 6.78 (1H, d, J- 8.3 Hz, 5-H), 6.96 (1H, dd, J- 1.9, 8.3 Hz, 6-H), 7.05 (1H, d, J- 1.9 Hz, 2-H)]; 4: d 6,78 (1H, d, J- 8,4 Hz, 5-H), 6,96 (1H, dd, J- 1,9, 8,4 Hz, 6-H), 7,05 (1H, d, J- 1,9 Hz, 2-H)}. Prootoni- ja süsinikusignaalid 1 H- ja 13C-NMR spektrites 3 ja 4 olid pealiimatavad echinakosiidi spektritel,1,1,4,12), välja arvatud 7-metoksürühmast tulenevad signaalid. Trans-caffeoyl rühma ja glükosüülmoietide sideained 3. ja 4. aastal selgitati HMBC katsete põhjal, nagu on näidatud joonisel 1. Lõpuks andis leeliseline hüdrolüüs 3 ja 4 5% KOH-ga desacylated tooted koos trans-caffeichappega. Neid aatüleeritud tooteid raviti järjest 1,0 M HCl-iga, et vabastada vastavalt Lrhamnose ja D-glükoos. Sellest tulenevalt määrati kankanosiidide K1 ja K2 struktuur 2-metoksü-2-(3,4-dihüdroksüfenüül)etüül O-a-L-rhamnopy-ranosüül-(1→3)-[b-D-glukopyranosyl-(1→6)]-4-O-trans-caf-feel-b-D-glükopüroosiidi (3 ja 4).11,13)

acteosideincistanchesellel on mälule palju mõju

Varem metanooliekstrakt C varredest.tubulosaja mitmed fenüületanoidi koostisosad, nagu echinacoside,acteosidejaisoatsetosiidleiti, et neil on hepatoprotektiivne toime D-galaktosamiinile (D-GalN)/lipopopolüsahhariidist põhjustatud maksakahjustusele hiirtel ja inhibeerivale toimele D-GalNi indutseeritud tsütotoksilisusele primaarkultuurilistes hiire hepatotsüütides.1) Uurisime täiendavalt kankanosiidide K1 (3) ja K2 (4) inhibeerivat toimet ning isokampneosiidi I (5) inhibeerivat toimet D-GalNi indutseeritud tsütotoksilisusele primaarkultuurilistes kultuursetes hepatotsüütides. Kuigi nende tegevus oli nõrgem kui echinacoside 'il (IC50 10,2 mM),acteoside(4,6 mM) ja isoatseosiid (5,3 mM), C. tubulosa varre fenüületanoidide põhikomponendid, 1) 3–5 näitas mõõdukat aktiivsust.14)

Eksperimentaalne

Spektraalsete ja füüsiliste andmete saamiseks kasutati järgmisi vahendeid: spetsiifilised pöörded, Horiba SEPA-300 digitaalne polarimeeter (l- 5 cm); UV-spektrid, Shimadzu UV-1600 spektromeeter; IR spektrid, Shimadzu FTIR-8100 spektromeeter; 1 H- ja 13C-NMR spektrid, JEOL JNM-ECA600 (600, 150 MHz) ja JEOL JNM-ECS400 (400, 100 MHz) spektromeetrid, mille sisestandardiks on tetrametüülsilane; FAB-MS ja kõrgresolutsiooniga FAB-MS, JEOL JMS-SX 102A massispektromeeter; HPLC detektor, Shimadzu RID-10A murdumisnäitaja, Shimadzu SPD-10A UV-VIS ja Shodex OR-2 optilise pöörlemise detektorid. HPLC column, Cosmosil 5C18-MS-II, and pNAP (Nacalai Tesque Inc., 250 4.6 mm i.d.) and (250 20 mm i.d.) columns were used for analytical and preparative purposes, respectively.

acteosideincistancheavaldab neerudele head mõju

Kromatograafias kasutati järgmisi katsetingimusi: normaalse faasi ränidioksiidigeeli kolonni kromatograafia (CC), ränidioksiidgeel 60N (Kanto Chemical Co., Ltd., 63–210 võrgusilma, sfääriline, neutraalne); pöördfaasiline ränidioksiidgeel CC, Diaion HP-20 (Nippon Rensui) ja Chromatorex ODS DM1020T (Fuji Silesia Chemical, Ltd., 100–200 võrgusilma); normaalse faasiga TLC, eelnevalt kaetud TLC plaadid ränidioksiidi geeliga 60F254 (Merck, 0,25 mm); pöördfaasiline TLC, eelnevalt kaetud TLC plaadid ränidioksiidi geeliga RP-18 F254S (Merck, 0,25 mm); pöördfaasiline HPTLC, eelnevalt kaetud TLC plaadid ränidioksiidigeeliga RP-18 WF254S (Merck, 0,25 mm), tuvastamine saavutati pihustamisega 1% Ce(SO4)2–10% vesi H2SO4-ga, millele järgnes kuumutamine.

Taimne materjal

Seda üksust kirjeldati eelmises aruandes.1)

Kaevandamine ja isoleerimine

Värsked varred C.tubulosa(2,98 kg) lõigati fifinely ja ekstraheeriti kolm korda metanooliga reflfluksi all 3 h. Lahusti aurustumine vähendatud rõhu all andis metanooliekstrakti (249,1 g, 8,36%). Metanoolekstraktile tehti Diaion HP- 20 CC (5,0 kg, H2O→MeOH), et anda H2O- ja MeOH-eluloonud fraktsioonid (vastavalt 167,84 g, 5,63% ja 81,21 g, 2,73%). MeOH-eluaegne fraktsioon (61,00 g) allutati normaalse faasi ränidioksiidi geelile CC [1,8 kg, CHCl3– MeOH–H2O (15 : 3 : 0,4→10 : 3 : 0,5→6 : 4 : 1, v/v/v)→MeOH], et anda seitse fraktsiooni [Fr. 1 (1,12 g), 2 (9,56 g), 3 (0,89 g), 4 (10,69 g), 5 (8,84 g), 6 (12,52 g) ja 7 (4,60 g)], nagu eespool kirjeldatud.1) Fraktsioon 4 (10,69 g) eraldati pöördfaasilise ränidioksiidigeeliga CC [500 g, 60 g, MeOH–H2O (30: 70, v/v)→MeOH→atsetoon] anda neli fraktsiooni [Fr. 4-1 (878,2 mg), 4–2 (7,06 g), 4–3 (1,57 g) ja 4–4 (792,8 mg)]. Fraktsioon 4-3 (1,57 g) puhastati HPLC poolt [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1% vesi acOH (20 : 80, v/v)] anda 11 fraktsiooni {Fr. 4-3-1 (30,4 mg), 4-3-2 (55,2 mg), 4-3- 3 [ kampneosiid I (6, 22,1 mg, 0,0010%)], 4-3-4 [ aktiosiid (224,6 mg, 0,010%)], 4-3-5 (27,4 mg), 4-3-6 (43,6 mg), 4-3-7 [ isoatseosiidi (825,0 mg, 0,037%)], 4-3-8 [ syringalide A 3 -O-a-L-rhamnopyranoside (37,6 mg, 0,0017%)], 4-3-9 (39,8 mg), 4-3-10 [ 2 -atsetüülakteosiidi (85,4 mg, 0,0038%)], ja 4-3-11 (64,6 mg)}, nagu varem kirjeldatud.1) Fraktsiooni 4-3-5 (27,4 mg) puhastas veelgi HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1% vesi acOH (18 : 82, v/v)] isocampneoside I (5, 8,5 mg, 0,0004%) poolt. Fraktsiooni 4-3-6 (43,6 mg) puhastas veelgi HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1% vesi acOH (18: 82, v/v)] et anda 5 (3,7 mg, 0,0002%) koos kankanosiididega H1 1) (17,0 mg, 0,0008%) ja H2 1) (3,3 mg, 0,0001%). Fraktsiooni 4-3-9 (39,8 mg) puhastas veelgi HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1% vesi acOH (18: 82, v/v)] et anda kankanosiidid J1 (1, 3,7 mg, 0,0002%) ja J2 (2, 3,5 mg, 0,0002%) koos kankanosiidiga I1) (15,4 mg, 0,0007%) ja isoatseosiidi1) (3,1 mg, 0,0001%). Fraktsioon 5 (8,84 g) eraldati pöördfaasilise ränidioksiidigeeliga CC [400 g, MeOH–H2O (20 : 80→30 : 70, v/v)→MeOH→meoh→atsetooniga], et anda seitse fraktsiooni [Fr. 5-1 (870,2 mg), 5-2 (478,9 mg), 5-3 (3,72 g), 5-4 (979,9 mg), 5-5 (1,19 g), 5-6 (1,27 g) ja 5-7 (130,1 mg)]. Fraktsiooni 5-3- 4 (72,3 mg) puhastas veelgi HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1% vesi acOH (10 : 90, v/v)] et anda kankanosides K1 (3, 5,1 mg, 0,0002%) ja K2 (4, 10,6 mg, 0,0005%) koos kampingosiidiga II1) (7, 10,6 mg, 0,0005%).

acteosideincistanchesaab ravidaneerhaigus paranebNeerufunktsioon

Kankanosiidide leeliseline ja happeline hüdrolüüs J1 (1), J2 (2), K1 (3) ja K2 (4)

Lahuseid 1–4 (igaüks 1,0 mg) 5% vesivesi kaaliumhüdroksiidis (KOH, 0,5 ml) segati 40 °C juures 1 kuu jooksul. Iga lahendus neutraliseeriti Dowex HCR W2-ga (H-vorm) ja vaik eemaldati filtreerimise teel. Lahusti aurustamine vähendatud rõhu all olevatest filtraatidest andis vastavad desaüleeritud tooted, mis allutati HPLC analüüsile [veerg: Cosmosil pNAP, 250-4,6 mm i.d.; mobiilne faas: CH3CN–1% vesi acOH (15: 85, v/v); avastamine: UV (254 nm); kaaskiirus: 1,0 ml/min] trans-caffeichappe (tR 9,9 min 1–4) andmiseks. Seejärel lahustati igaüks 1,0 m HCl (1,0 ml) ja kuumutati 80 °C juures 3 tundi. Pärast jahutamist neutraliseeriti reaktsioonisegu Amberlite IRA-400 -ga (OH- vorm) ja vaigud eemaldati filtreerimise teel. Pärast lahusti eemaldamist vähendatud rõhu all eraldati jääk Sep-Pak C18 kassetti veeruga (H2O→MeOH). H2O-eluted fraktsioon tehti HPLC analüüsile järgmistel tingimustel: HPLC veerg, Kaseisorb LC NH2-60-5, 4,6 mm i.d.- 250 mm (Tokyo Kasei Co., Ltd., Tokyo, Jaapan); tuvastamine, optiline pöörlemine [Shodex OR-2 (Showa Denko Co., Ltd., Tokyo, Jaapan); mobiilne faas, CH3CN–H2O (85: 15, v/v); kaaskiirus 0,8 ml/min]. L-riffnoosi (i) ja D-glükoosi (ii) identifitseerimine 1–4-st H2O-elustatud fraktsioonides viidi läbi nende säilitusaja ja optilise pöörlemise võrdlemisel autentsete proovide [i, tR 9,9 min (negatiivne)] ja [ii, tR 17,9 min (positiivne)].

Tunnustused

T. M., K. N. ja O. M. toetasid eraülikoolide kõrgtehnoloogilise uurimiskeskuse projekt: jaapani haridus-, kultuuri-, spordi-, teadus- ja tehnoloogiaministeeriumi (MEXT) fonditoetuse sobitamine, 2007-2011 ja seda toetas ka MEXT teadusuuringute toetus. M. Y. ja H. M. toetasid 21. COE programm, akadeemiline piiriprojekt ja MEXT teaduslike uuringute toetus.

Viited ja märkmed

1) XXXV osa: Morikawa T., Pan Y., Ninomiya K., Imura K., Matsuda H., Yoshikawa M., Yuan D., Muraoka O., Bioorg. Med. Chem., 18, 1882—1890 (2010).

2) Morikawa T., Xie H., Wang T., Matsuda H., Yoshikawa M., Chem. Biodiv., 6, 411—420 (2009).

3) Muraoka O., Morikawa T., Zhang Y., Ninomiya K., Nakamura S., Matsuda H., Yoshikawa M., Tetrahedron, 65, 4142—4148 (2009).

4) Yoshikawa M., Matsuda H., Morikawa T., Xie H., Nakamura S., Muraoka O., Bioorg. Med. Chem., 14, 7468—7475 (2006).

5) Xie H., Morikawa T., Matsuda H., Nakamura S., Muraoka O., Yoshikawa M., Chem. Pharm. Bull., 54, 669—675 (2006).

6) Si C.-L., Liu Z., Kim J.-K., Bae Y.-S., Holzforschung, 62, 197—200 (2008).

7) 1 H- ja 13C-NMR spektrid 1–4 määrati moonutusteta suurendamise abil polarisatsiooni ülekande (DEPT), kahekordse kvantfiltri korrelatsioonispektroskoopia (DQF COSY), heteronukleaarse mitmekordse kvantse koherentsuse (HMQC) ja heteronukleaarsete mitme sideme korrelatsiooni (HMBC) katsete abil.

8) Imakura Y., Kobayashi S., Mima A., Phytochemistry, 24, 139—146 (1985).

9) Wu J., Huang J., Xiao Q., Zhang S., Xiao Z., Li Q., Long L., Huang L., Magn. Res. Chem., 42, 659—662 (2004).

10) Kitagawa S., Tsukamoto H., Hisada S., Nishibe S., Chem. Pharm. Bull., 32, 1209—1213 (1984).

11) Stereokeemia 7-positsiooni 1—4 ei ole kindlaks määratud.

12) Kobayashi H., Oguchi H., Takizawa N., Miyase T., Ueno A., Usmanghani K., Ahmad M., Chem. Pharm. Bull., 35, 3309—3314 (1987).