Cistanche Deserticola põhjustatud notsitseptiivne ja põletikuvastane toime närilistel

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin et al

Abstraktne

Käesolevas uuringus on risoomidCistanchedeserticola(Orobanchaceae, lühendatult CD) ekstraheeriti 50% etanooliga ja eraldati järjestikku etüülatsetaadi, n-butanooli ja veega. Valuvaigisti jaanti-põletikulineCD ekstrakti ja kolme kihi mõju hinnati mitmes loommudelis. CD(Cistanchedeserticola)ekstraktid inhibeerisid tõhusalt 1-protsendilise äädikhappega indutseeritud väänlemisreaktsiooni ja 1-protsendilise formaliini põhjustatud kahefaasilist lakkumisreaktsiooni ning vähendasid ka 1-protsendilise karrageeni, kuid mitte sümosaani põhjustatud turset. Lisaks CD butaani- ja vesikihid(Cistanchedeserticola)ekstrakt mitte ainult ei vähendanud äädikhappe ja formaliini põhjustatud valu, vaid vähendas ka karrageenist põhjustatud turset. CD butaanikihi mõju(Cistanchedeserticola)ekstrakt on parem kui vesikiht. Lisaks CD butaanikihi mõju(Cistanchedeserticola)ekstrakti naloksoon ei kaotanud. Nendest tulemustest selgus, et omab valuvaigistit jaanti-põletikulinebutaani- ja vesikihid on peamiselt aktiivsed komponendid. Lisaks valuvaigisti jaanti-põletikulineCD butaanikihi mõju(Cistanchedeserticola)ekstrakt ei olnud seotud opioidiretseptorite ja immuunsüsteemiga.

Märksõnad:Cistanche deserticola; Valuvaigistav toime; Põletikuvastane toime

1. Sissejuhatus

CistanchedeserticolaMa. (Orobanchaceae, lühendatult CD), Hiinas levinud ürti kasutatakse traditsioonilises meditsiinis laialdaselt mitmesuguste terapeutiliste ravimeetodite jaoks, sealhulgas rahustite, valuvaigistite ja immuunsüsteemi tugevdavate näidustuste jaoks (Lee, 1986). Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud osutasid CD-le(Cistanchedeserticola)ekstraktil oli immuunsüsteemi tugevdav (Chin ja Su, 1993), vabu radikaale püüdev toime (Hsu et al., 1995) ja SOD aktiivsuse suurenemine (Chang et al., 1995). Hiljutises uuringus mängis vabade radikaalide reaktsioon olulist rolli põletikulistes protsessides (Arrigoni-Martelli, 1985). Seetõttu üritati käesolevas uuringus uurida CD oletatavat valuvaigistavat toimet(Cistanchedeserticola)ekstrakt hiirtel äädikhappega indutseeritud vingerdamise testiga (Taber et al., 1969) ja formaliiniga indutseeritud lakkumise testiga (Shibata et al., 1989). Teiseks uurisime ka võimalikkuanti-põletikulineCD tegevused(Cistanchedeserticola)väljavõte klassikalisest põletikulisest protsessist karrageenist põhjustatud tursetestiga (Winter et al., 1962) ja alternatiivse põletikulise protsessi kohta sümosaanist põhjustatud turse testiga (Tarayre et al., 1989). Lõpuks uurisime erinevate lahustitega eraldatud CD ekstrakti aktiivseid kihte. '

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Taimne materjal ja ekstraktid

CD risoomid(Cistanchedeserticola)osteti Taiwani turult ja kinnitas professor MT Hsieh. Vautšeri näidist (nr. CMC-ICPS-000626) säilitati Hiina Meditsiinikolledži Hiina Farmaatsiateaduste Instituudi herbaariumis edaspidiseks kasutamiseks. CD ekstraheerimine ja isoleerimine(Cistanchedeserticola)järgiti nagu eelmisi aruandeid (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)ekstrakti (saagis 34,2 protsenti) ja kolme kihti*/etüülatsetaadi kiht, butanoolkiht ja vesikiht (nende saagised 3,4, 10,2, 30,6 protsenti) (lühendatult vastavalt CDE, CDB ja CDW)*/. ekstraktide valmistamine.

2.2. Ekstraktide ja ravimi valmistamine

CD(Cistanchedeserticola)ekstrakt ({{0}}.1, 0,3, 1 g/kg) ja kolm kihti CD-d(Cistanchedeserticola)ekstraktid ({{0}}.03, 0,1, 0,3 g/kg) lahustati 0,5% karboksümetüültselluloosis ja manustati suukaudselt 60 minutit enne indutseerija süstimisele. Atsetüülsalitsüülhape (ASA) (100, 300 mg/kg) ja indometatsiin (IN DOL) (10 mg/kg) valmistati suspensioonina 0,5% karboksümetüültselluloosiga ja manustati intraperitoneaalselt enne indutseerija süstimist. Naloksoon (1 mg/kg) lahustati tavalise soolalahusega.

2.3. Loomad

Uuringus kasutati isaseid Sprague-Dawley rotte (200-250 g).anti-põletikulinetegevused. Valuvaigistava toime testimiseks kasutati isaseid ICR-hiiri (20-25 g). Kõiki loomi kasutati katsetes vastavalt laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhtpõhimõtetele. Enne katse alustamist hoiti neid vähemalt 1 nädal 239/1 8C temperatuuri ja 60-protsendilise õhuniiskusega reguleeritud keskkonnas, kus oli vaba juurdepääs standardtoidule graanulites (tarnib ja kujundas Fwusow Industry Co. LTD., Taiwan ) ja kraaniveega, mille puhul säilitati 12-12 h valguse/pimeduse tsükkel (valgusfaas: 08:00-20:00 h). Seejärel manustati ravimeid ja valuvaigistit jaanti-põletikulineanalüüsid viidi läbi topeltpimemeetodil. Pärast käitumise mõõtmist tapeti kõik loomad süsinikdioksiidiga.

2.4. Antinotsitseptiivne uuring

2.4.1. Äädikhappest põhjustatud kõhu väänlemisreaktsioon hiirtel

Hiired jagati juhuslikult mitmeks rühmaks. Igale hiirele manustati intraperitoneaalselt 1% äädikhappe lahust (10 ml/kg kehamassi kohta). Hiired paigutati individuaalsetesse vaatluskastidesse. Äädikhappest põhjustatud kõhu väänlemise sümptomid olid sarnased Taberi et al. (1969). Kontrollloomad said samades katsetes vehiikulilahuseid. Viis minutit pärast äädikhappe süstimist loendati äädikhappest põhjustatud kõhu väänlemise ajal 10 minuti jooksul väänlemisreaktsioonide arv hiire kohta. Lõpuks võimaldas väänlemisreaktsioonide arv väljendada kaitseprotsenti, kasutades järgmist suhet: (kontrollkeskmine-töödeldud keskmine) /100/ kontrollkeskmine.

2.4.2. Formaliinist põhjustatud lakkumisreaktsioon hiirtel

See meetod kujutas endast Shibata jt poolt kirjeldatud meetodit. (1989). Iga hiir asetati enne formaliini süstimist 5 minutiks vaatluskambrisse läbipaistva akrüülplaadi põrandale. Põranda all oli suur peegel kallutatud 458° nurga all, et võimaldada looma käppade selget jälgimist. Loomadele manustati 25 ml 1-protsendilist formaliini paremasse tallaalusesse. Seejärel viidi iga loom tagasi kambrisse ja täheldati intensiivse lakkumise reaktsiooni kahte erinevat perioodi. Esimene periood (varajane faas) registreeriti 0 /5 min pärast formaliini süstimist ja teine ​​periood (hiline faas) registreeriti 10 /35 min pärast süstimist. Süstitud käpa lakkumisele kulunud aega (aegu) mõõdeti valuvastuse indikaatorina.

2.5. Põletikuvastane uuring rottidel

Theanti-põletikulineaktiivsus määrati rottidel tagakäpa mahu keskmise suurenemise mõõtmisega pärast põletikuliste ainete nagu karrageeni (Winter et al., 1962) või sümosaani (Tarayre et al., 1989) subplantaarset süstimist. Loomadele süstiti 0,1 ml 1% karrageeni või 2% sümosaani paremasse tagajalgasse plantaarse aponeuroosi alla. Põletik kvantifitseeriti milliliitrites, kasutades pletüsmomeetrit (7150 Ugo Basile), mis registreeris mahunihkest tingitud väikesed erinevused veetasemes. Enne ravi määrati iga looma tagakäppade keskmine maht (Vo) kolme mõõtmisega, mis ei erinenud rohkem kui 4 protsendist (seadme täpsus). Seejärel määrati 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min pärast põletikutekitajate süstimist iga looma tagakäppade keskmine maht (Vt) kolme mõõtmisega, mis ei erinenud enam kui 4 protsenti.

Turse protsendid igal rekordil arvutati, võrreldes iga looma tagakäppade keskmist mahtu (Vt) pärast põletikutekitajate süstimist iga looma tagakäppade keskmise mahuga (Vo) enne ravi (Palanichamy). ja Nagarajan, 1990). Iga rühma jaoks saadi inhibeerimise protsendid, kasutades järgmist suhet: [(Vt-Vo)kontroll /(Vt-Vo)töödeldud]-100/(Vt-Vo)kontroll.

2.6. Statistiline analüüs

Kõik andmed, mis on saadud valuvaigisti jaanti-põletikulineaktiivsust väljendati keskmiste ja standardvigadena ning analüüsiti edasi, kasutades ANOVA ühesuunalist dispersioonanalüüsi, millele järgnes Scheffi testi. Kui tõenäosus (P) oli väiksem kui 0,05, peeti erinevust oluliseks.

3. Tulemused ja arutelu

Loomad, keda raviti suukaudsete CD annustega(Cistanchedeserticola)ekstrakt (0.1-1 g/kg) põhjustas annusest sõltuva ja olulise äädikhappest põhjustatud väänlemisreaktsiooni (tabel 1) ning formaliinist põhjustatud lakkumisreaktsiooni kahefaasilise faasi hiirtel ( 1(A)). CD põhjustatud pärssimine(Cistanchedeserticola)äädikhappega indutseeritud väänlemisreaktsiooni ja formaliiniga indutseeritud lakkumisreaktsiooni puhul 1 g/kg oli vastavalt ligikaudu 54 ja 45 protsenti. Positiivne kontroll-atsetüülsalitsüülhape 0.1-0,3 g/kg vähendas samuti äädikhappest põhjustatud väänlemisreaktsiooni, inhibeerides 45-64 protsenti (tabel 1). Kuid teine ​​positiivne kontroll-indometatsiin annuses 10 mg/kg inhibeeris hiirtel formaliinist põhjustatud lakkumisvastuse hilist, kuid mitte varajast faasi maksimaalse inhibeerimisega 32 protsenti (joonis 1 (A)). Lisaks on kolme CD kihi hulgas ainult butanool- ja vesikihid(Cistanchedeserticola)ekstrakt väärtusega 0.1-0,3 g/kg andis samuti märkimisväärse antinotsitseptsiooni ja need butanoolse kihi valuvaigistavad toimed olid paremad kui vesilahusel (tabel 1 ja joonis 1(B)). . Teiseks hindasimeanti-põletikulineCD aktiivsus(Cistanchedeserticola)ekstrakt ja kolm kihti klassikalise (karrageenist põhjustatud) ja alternatiivse (sümosaanist põhjustatud) turse tekke vastu. Leidsime selle CD(Cistanchedeserticola)ekstrakt kontsentratsioonis 0.1-1g/kg pärssis samuti oluliselt karrageenist põhjustatud turse teket annusest sõltuval viisil ja indometatsiin annuses 10 mg/kg pärssis samuti tõhusalt karrageenist põhjustatud turse teket rottidel (joonis 1). 2). Kuid CD ei inhibeerinud sümosaanist põhjustatud turse teket(Cistanchedeserticola)ekstrakti väärtusega 0.1-1 g/kg rottidel (andmeid ei ole näidatud). Lisaks on kolme CD kihi hulgas ainult butanoolkiht(Cistanchedeserticola)ekstrakt väärtusega 0.1-0,3 g/kg inhibeeris samuti oluliselt karrageenist põhjustatud turse teket rottidel (joonis 2). Fütokeemiliste aruannete kohaselt akteosiid ja merevaikhape, mis kuuluvad CD butanoolkihi koostisainete hulka(Cistanchedeserticola)ekstrakt (Hsu et al., 1994, 1995), omasidanti-põletikulinetoime kemikaalidest põhjustatud tursete tekkele (Murai et al., 1995; Kabachnyi et al., 1987). Meie praeguste andmete ja muude varasemate aruannete põhjal pakkusime välja CD risoomid(Cistanchedeserticola)omas valuvaigistit jaanti-põletikulineaktiivsus närilistel ja aktiivsed komponendid väljuvad peamiselt CD butanoolkihist(Cistanchedeserticola)väljavõte. Kas akteosiid ja merevaikhape on CD toimeained(Cistanchedeserticola), isoleerime ja hindame nende valuvaigistit jaanti-põletikulinetegevust tulevikus.

Joonis 1. CD mõju(Cistanchedeserticola)ekstrakt ({0}},1, 0,3 ja 1 g/kg), etüülatsetaat, butanool- ja vesikihid(Cistanchedeserticola)ekstrakt (CDE, CDB ja CDW) ({{0}}.03, 0,1 ja 0,3 g/kg) ja indometatsiin (INDOL, 10 mg/kg) formaliinist põhjustatud lakkumisvastuse varases (0/5 min) ja hilises faasis (10/35 min) hiirtel. Iga väärtus on esitatud kui keskmine9/SE (N /7). *PB/0,05, *** PB/0,001, võrreldes VEH rühmaga.

Joonis 2. CD mõju(Cistanchedeserticola)ekstrakt ({0}},1, 0,3 ja 1 g/kg), etüülatsetaat, butanool- ja vesikihid(Cistanchedeserticola)ekstrakt (CDE, CDB ja CDW) ({0}}.03, {{10},1 ja 0,3 g/kg) ja indometatsiin (INDOL, 10) mg/kg) karrageenist põhjustatud käpa tursele rottidel. Iga väärtus on esitatud kui keskmine9/SE (N /6). *PB/0,05, ** PB/0,01, võrreldes VEH rühmaga

Lisaks Shibata et al. (1989) viitavad sellele, et formaliinist põhjustatud lakkumisreaktsiooni varajane faas oli seotud bradükiniini ja substantsiga P ning hiline faas oli seotud bradükiniini, autokriinse ja prostaglandiiniga. Meie praegused andmed näitasid, et naloksoon ei kaotanud sedaanti-põletikulineCD butanoolikihi aktiivsus(Cistanchedeserticola)ekstrakti nii formaliinist põhjustatud lakkumisreaktsiooni (joonis 3) kui ka analgeetilise toime kohta äädikhappest põhjustatud väänlemisreaktsiooni mõlema faasi kohta (tabel 1). Seetõttu valuvaigisti jaanti-põletikulineCD ekstrakti butanoolikihi mõju ei pruugi olla seotud opioidiretseptoritega. Lisaks CD(Cistanchedeserticola)ekstrakt ja selle butanoolne kiht inhibeerisid ainult karrageenist põhjustatud turse teket rottidel. Karrageenist põhjustatud turse polümorfonukleaarsete leukotsüütide infiltratsiooni ja aktiveeritud kiniinisüsteemi kaudu, eriti bradükiniin, erineb sümosaanist põhjustatud tursest monotsüütide sissevoolu ja aktiveeritud immuunsüsteemi kaudu (Damas et al., 1990; Dawson et al., 1991). Merevaikhape, CD ekstrakti butanoolkihi koostisosa, inhibeeris polümorfonukleaarsete leukotsüütide funktsiooni (Rotstein et al., 1985). Nendest tulemustest selgus, et valuvaigisti jaanti-põletikulineCD butanoolikihi mõju(Cistanchedeserticola)ekstrakt võib olla seotud kiniinisüsteemiga, kuid mitte opioidiretseptorite ja immuunsüsteemiga, kuigi CD(Cistanchedeserticola)omas immuunsüsteemi tugevdavat toimet (Chin ja Su, 1993). Üksikasjalikumaks valuvaigisti mehhanismi jaanti-põletikulineaktiivsust, uurime täiendavalt CD ekstrakti aktiivsete kihtide või koostisosadega.

Cistanchetubulosasellel on palju efekte, lisateabe saamiseks klõpsake siin

Viited

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Põletiku vabade radikaalide eemaldamise farmakoloogia. International Journal of Tissue Reactions 7, 513/519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, SN, Cheng, HC, 1995. Uuring tugeva mõju kohtaCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck ja Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. China Journal of Chinese Materials and Medicine 26, 143/146.
Chin, HL, Su, YC, 1993. Uuring ravimi farmakoloogiliste mõjude kohtaCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Karrageeni ja sümosaani poolt indutseeritud kiniinid ja peritoneaalsed eksudaadid rottidel. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, AD, Edwards, JC, Lees, P., 1991. Karrageeni, dekstraani ja sümosaani rakuliste, eksudatiivsete ja histoloogiliste reaktsioonide võrdlev uuring hiirtel. International Journal of Tissue Reactions 13, 171/185.

Hsu, WH, Chu, SH, Chao, CH, Hsu, Y., Yuan, KW, Yen, CH, Chi, CY, Chan, C., 1994. Uuring keemiliste koostisosade kohtaCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 25, 509/513.
Hsu, WH, Chu, SH, Sheng, LC, Yuan, KW, Mao, CN, 1995. Uuring ravimi keemiliste koostisosade ja farmakoloogiliste mõjude kohtaCistanchedeserticolaMa. ja Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. Hiina traditsioonilised ravimtaimed 26, 143/146.
Kabachnyi, VI, Chernykh, VP, Drogovoz, SM, Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, EE, 1987. Otsianti-põletikulinepreparaadid merevaikhappe heterüülamiidide derivaatide hulgast. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, SL, 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. National Research Institute of Chinese Medicine Publications, Taipei, lk. 20.
Lu, MC, 1998. Uuringud sedatiivse toime kohtaCistanchedeserticola. Journal of Ethnopharmacology 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Phenylethanoids in the herb of Plantago Lanceolata ja inhibeeriv toime arahhidoonhappest põhjustatud hiirekõrva tursele. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. Cassia alata leat ekstrakti ja kemp Eerol 3-0-Sophoroside valuvaigistav toime. Journal of Ethnopharmacology 29, 73/78.
Rotstein, OD, Pruett, TL, Fiegel, VD, Nelson, RD, Simmons, RL, 1985. Merevaikhape, Bacteroides'i liikide metaboolne kõrvalsaadus, inhibeerib polümorfonukleaarsete leukotsüütide funktsiooni. Infektsioon ja immuunsus 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. Modifitseeritud formaliini test: iseloomulik kahefaasiline valu vastus. Valu 38, 347/ 352.
Taber, RI, Greenhouse, DD, Rendell, JK, Irwin, S., 1969. Opioidide agonistide ja antagonistide interaktsioonid äädikhappest põhjustatud kõhu venitamisel hiirtel. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 169, 29/38.
Tarayre, JP, Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Consul, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
Farmakoloogilised uuringud sümosaani põletiku kohta rottidel ja hiirtel. 1: Zymosan-indutseeritud käpa turse rottidel ja hiirtel. Farmakoloogilised uuringud 21, 375/384.
Winter, CA, Risley, EA, Nuss, GW, 1962. Karrageenanist põhjustatud turse roti tagakäpas testiksanti-põletikulineravimid. Proceedings Society of Experimental Biology and Medicine 111, 544/547.