Tsistanosiid A vahendab p38/MAPK rada, et pärssida osteoklastide aktiivsust Ⅱ
May 16, 2024
2 Tulemused Tulemused
2.1 Tsistanhesiid A inhibeerib RANKL-i poolt indutseeritud osteoklastide diferentseerumist.
TRAP-värvimise tulemused näitasid, et võrreldes kontrollrühmaga oli osteoklastide arv oluliselt suurem, kuiCistancheside Aoli 5, 10, 20, 40, 80 ja 160 μmol/L. vähenenud jaTsistanhesiidil A oli osteoklastogeneesi tugevaim inhibeeriv toimekontsentratsioonil 160 μmol/L (joonis 1A, B). CCK-8 tsütotoksilisuse katse tulemused näitasid, et tsistanchesiid A-l ei olnud toksilist toimet luuüdi makrofaagidele kontsentratsioonidel alla 160 μmol/L (joonis 1C).
2,2 Cistancheol
A pärsib aktiini rõngaste moodustumist osteoklastide pinnal jaosteoklastide luu resorptsiooni funktsioon. Vt joonis 2. Falloidiini ja DAPI fluorestsentsvärvimise tulemused näitasid, et võrreldes positiivse kontrollrühmaga vähenes osteoklastide aktiinitsüklite pindala tsistanchesiid A väikese ja suure annuse rühmades oluliselt ning osteoklastide aktiinitsüklite pindala kõrgetes annustes. Tsistanhesiidi A annustamisrühm vähenes oluliselt. Rõnga pindala oli väiksem kuiTsistanhesiid Madala annusega rühm(Joonis 2A, C). Luu lihvimisketaste toluidiinsinisega värvimise tulemused näitasid, et võrreldes positiivse kontrollrühmaga vähenes Cistancheol A väikese ja suure annuse rühmades luulünkade pindala luulihvimisketastel oluliselt ning luulünkade pindala. suurte annustega Cistancheol A rühmas vähenes oluliselt. Piirkond oli väiksem kui aTsistanhesiid Madala annusega rühm(Joonis 2B, D).
Joonis 1 ｜ Tsistanosiid A (Cis A) inhibeerib tuumafaktori kappa-B ligandi (RANKL) retseptori aktivaatori poolt indutseeritud osteoklastide diferentseerumist.
Joonis 2 ｜ Tsistanosiid A (CisA) inhibeerib F-aktiini ringi moodustumist osteoklastides ja luu resorptsiooni funktsiooni
2.3 Tsistanheesiid A vähendab peamiste osteoklastide geenide ekspressiooni.
Kasutades kontrollstandardina GAPDH geeni keskmist ekspressioonitaset, näitasid tulemused, et võrreldes positiivse kontrollrühmaga võib tsistanhesiidi A väikese annusega rühm oluliselt alandada osteoklastide regulatoorse diferentseerumisega seotud geene TRAP, Nfatc { ekspressioonitasemed. {2}}, DC-STAMP ja luu resorptsiooniga seotud geenid c-Fos ja ctsk (joonis 3).
2.4 Tsistanhesiid A inhibeerib JNK/MAPK raja allavoolu valkude ekspressiooni. Western blot tulemused näitavad, et võrreldes positiivse kontrollrühmaga võib tsistanchesiid A kontsentratsioonides 40, 80 ja 160 μmol/L oluliselt pärssida Nfatc1 ja c-Fos valkude ekspressiooni. kogus ja see toime oli annusest sõltuv (joonis 4).
2.5 Tistanche A inhibeerib p-JNK valgu ekspressiooni. Western blot'i tulemused näitavad, et ajagradiendis 0, 5, 10, 20, 30 ja 60 min näitab p-JNK valgu ekspressioon esimese kõrge ja seejärel madal ning Võrreldes positiivse kontrollrühmaga võib tsistanchesiid A kontsentratsioonis 160 μmol/L oluliselt inhibeerida p-JNK valgu ekspressiooni 10-, 20-, 30- ja 60-minutilise sekkumise järel (P < 0,01, P < 0.{19}}), vaata joonist 5.
Joonis fig 5 ｜ Tsistanosiid A (Cis A) inhibeerib p-JNK valgu ekspressiooni
