Mis on ehhinakosiid, Cistanche Deserticola tõhus koostisosa, pankrease adenokartsinoomi rakkude kasvu viis?

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Ehhinakosiid pärsib pankrease adenokartsinoomi rakkude kasvu, kutsudes esile apoptoosi mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasi raja kaudu

WEI WANG, JINBIN LUO, YINGHUI LIANG ja XINFENG LI

Abstraktne.

Traditsioonilisest Hiina meditsiinist saadud looduslike toodete kliiniline kasutamine on pälvinud tähelepanu vähi kemoteraapias.ehhinakosiid(ECH), üks fenüületanoide, mis on eraldatud vartestCistanchesalsal (Hiina taimne ravim) on kesknärvisüsteemile kudesid kaitsev ja apoptoosivastane toime. Siiski jääb suuresti tabamatuks, kasehhinakosiid omab kasvajat supresseerivat toimet. Käesolevas uuringus näidati, etehhinakosiidvõib märkimisväärselt pärssida pankrease adenokartsinoomi rakkude proliferatsiooni, indutseerides reaktiivsete hapnikuühendite tootmist ja häirides mitokondriaalset membraanipotentsiaali ning seeläbi vallandadesapoptoos. Lisaks selgitati, etehhinakosiidpärsib kasvajarakkude kasvu MAPK aktiivsuse moduleerimise kaudu. Kokkuvõttes näitab see uuring ECH uudset funktsiooni vähi arengu ennetamisel ja tähendab, etehhinakosiid võib olla vähktõve potentsiaalne kemoterapeutiline strateegia.

Ehhinakosiid tsistanšis vähendadapankrease adenokartsinoomi rakkude kasv

Sissejuhatus

Vähk on eluohtlik haigus ja üks peamisi suremuse põhjuseid kogu maailmas. Vähirakke iseloomustab inhibeeritudapoptoos, kontrollimatu kasv ja vohamine ning metastaasid (1). Vähi areng, mis on sageli algatatud geneetilistest muutustest, on keeruline protsess, mis hõlmab onkogeensete valkude ja kasvaja supressorite vahelisi koostoimeid, mis moodustavad keeruka signaalivõrgu. Näiteks on leitud, et onkogeen Myc on amplifitseeritud või üleekspresseeritud erinevat tüüpi vähi korral ja Myc-kodeeritud onkoproteiin võib soodustada tuumori teket, juhtides rakutsükli progresseerumist, stimuleerides rakkude kasvu ja indutseerides angiogeneesi (2). Myc-i käivitatud onkogeensed signaalid võivad aga aktiveerida p53 tuumori supressorraja tuumori supressori, ARF-i indutseerimise kaudu, mis leevendab onkogeense E3-ligaasi hiire topeltminuti (MDM)2-vahendatud p53 lagunemist ( 3). See on automaatselt reguleeritav enesekaitsemehhanism, mis hoiab ära rakkude pahaloomulise transformatsiooni. Eelkõige võib p53 Myc aktiivsust represseerida, aktiveerides transkriptsiooniliselt näiteks miR-145, mis on suunatud Myc mRNA-le translatsiooni vaigistamiseks (4, 5), moodustades seega negatiivse tagasiside reguleeriva ahela.

Kõige lihtsam ja tõhusam vähiravi strateegia on vähirakkude hävitamine. Tavaliselt kasutatavad vähivastased ravimid, nagu tsisplatiin (6), aktinomütsiin D (7) ja adriamütsiin (8), pärsivad kasvaja kasvu, soodustades apoptoosi. Hiljuti on üha rohkem tõendeid näidanud, et mitmed looduslikud tooted ja derivaadid taimedest, eriti traditsioonilises hiina meditsiinis (TCM) kasutatavatest ravimtaimedest, omavad kasvajat pärssivat funktsiooni, kutsudes esile vähirakkude apoptoosi ja neil on potentsiaal kliiniliseks kasutamiseks. vähiravis (9). Näiteks TCM-ist eraldatud looduslik antrakinooni emodiin Radix rhizome Rhei võib pärssida mitut tüüpi vähirakkude kasvu (10, 11). Kamptotetsiin, mis on saadud hiina „õnnepuust” Camptotheca acuminate, on väärtuslik looduslik toode, mis pärsib DNA ligeerimist pärast topo I-vahendatud ahela katkemist (12). Teises retrospektiivses populatsioonipõhises kohortuuringus, milles osales kokku 729 kaugelearenenud rinnavähiga patsienti, tehti ettepanek, et TCM-ravi võib aidata kaasa vähiravile. Sellest kohordist 115 patsienti olid TCM-i kasutajad, samas kui 614 patsienti ei kasutanud TCM-i. Mitme muutujaga analüüs näitas, et võrreldes mittekasutajatega oli TCM-i kasutamine seotud märkimisväärselt vähenenud igasuguse suremuse riskiga (13). Kõik eelnimetatud leiud näitasid, et TCM on oluline täiendav ja alternatiivne meditsiin, mida saab kasutada vähiravis.

ehhinakosiid(ECH) on fenüületanoid, mis on eraldatud selle vartestCistanchessalsa, Hiina taimne ravim, mis on oluline toorravim, mida kasutatakse seerumi- ja väsimusvastase ainena (14). On leitud, et mitmetel fenüületanoididel on vabu radikaale püüdvad omadused ja need kaitsevad oksüdatiivse stressi põhjustatud toksiliste vigastuste eest (15). Lisaks rohkem bioloogilisi omadusiehhinakosiidon sellest ajast alates välja selgitatud. Näiteks võib ECH päästa põletikuliste tsütokiinide suurenenud taseme ja parandada kopsude histopatoloogilisi kõrvalekaldeid ägeda kopsukahjustusega hiirtel (16, 17). Samutiehhinakosiid on näidatud, et sellel on kaitsev toime närvikoele ja see parandab Parkinsoni tõve hiiremudelites käitumishäireid (18). Eelkõige on leitud, et ECH soodustab rakkude proliferatsiooni ja inhibeeribapoptooshiire sooleepiteeli MODE-K rakkudes (19). Seni on aga vähem tähelepanu pööratud ECH võimalikule rollile vähi ennetamisel.

Selles uuringus uuriti, kasehhinakosiid ravi mõjutab kasvajarakkude kasvu ja proliferatsiooni ning kasehhinakosiidindutseerib apoptoosi, suurendab reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) tootmist ja vähendab mitokondriaalse membraani potentsiaali (MMP) ning pärsib järelikult kasvajarakkude kasvu. Lisaks oli käesoleva uuringu eesmärk tuvastada ECH-vahendatud rakkude kasvu pärssimise eest vastutavad molekulaarsed mehhanismid.

materjalid ja meetodid

Rakuliin, reaktiiv ja antikehad.

SW1990 pankrease adenokartsinoomi rakke (ATCC, Manassas, VA, USA) kultiveeriti Dulbecco modifitseeritud Eagle söötmes, millele oli lisatud 10 protsenti veise loote seerumit, 50 U/ml penitsilliini ja 0,1 mg/ml streptomütsiini temperatuuril 37 ˚C. 5 protsenti CO2 niisutatud atmosfäär.ehhinakosiidosteti firmalt Jrdun Biotechnology Corp. (Shanghai, Hiina). AKT, P-AKT, ERK, P-ERK, JNK, p-JNK, P38, p-P38 ja GAPDH vastased antikehad osteti ettevõttest Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA); anti-Bax ja anti-Bcl-2 osteti ettevõttelt Santa Cruz Biotechnology Inc. (Santa Cruz, CA, USA); ja anti-Caspase{10}} osteti ettevõttelt Abcam (Shanghai, Hiina).

Rakkude elujõulisuse test.

Kasvajarakkude kasvu kiiruse hindamiseks kasutati vastavalt tootja juhistele rakkude loenduskomplekti {{0}} (CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA). Rakususpensioonid külvati 5,000 rakku süvendi kohta ECH-töötlusega 0, 12, 24, 48 või 72 tundi 96-süvendiga kultuuriplaatidele. Rakkude kasvu pärssimine määrati, lisades igasse süvendisse WST-8 reaktiivi CCK-8 komplektist lõppkontsentratsiooniga 10 protsenti ja proovide neeldumist mõõdeti 450 nm juures, kasutades mikroplaadilugejat (Multiskan MK3; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA).

Hoechst 33342 värvimine.

Rakke (60% konfluentsus) töödeldi Hoechst 33342-ga (Beyotime Biotechnology Institute, Haimen, Hiina) lõppkontsentratsiooniga 1 µg/ml, inkubeeriti inkubaatoris temperatuuril 37 ˚C 15 minutit, pesti kaks korda fosfaatpuhverdatud soolalahusega, fikseeriti. 4-protsendilises paraformaldehüüdis 30 minutiks toatemperatuuril ja paigaldati slaididele. Rakutuumade morfoloogilisi muutusi täheldati fluorestsentsmikroskoobi all (Olympus BX51, Melville, NY, USA). Normaalsed tuumad olid ümmargused ja värvitud helesiniseks, samas kui apoptootilised tuumad olid kahanenud ja värvitud helesiniseks.

Fluorestsents-aktiveeritud rakkude sorteerimise (FACS) analüüsid.

Hindamiseksapoptoos, fluorestseiini isotiotsüanaat (FITC) - anneksiin VApoptoosTuvastamiskomplekti (BD Biosciences, Shanghai, Hiina) kasutati vastavalt tootja juhistele. Lühidalt, 5x104 rakku pesti jääkülma PBS-ga, resuspendeeriti 0,1 ml sidumispuhvris (Beyotime Institute of Biotechnology) ja värviti 10 ml FITC-konjugeeritud anneksiin V-ga (10 mg/ml) ja 10 ml. ml propiidiumjodiidi (PI) (50 mg/ml). Pärast 15-minutilist inkubeerimist toatemperatuuril pimedas ja 400 ml sidumispuhvri lisamist analüüsiti rakke voolutsütomeetriga (C6; BD Biosciences, Shanghai, Hiina).

Reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) mõõtmine.

ROS-i tootmise hindamiseks kasutati vastavalt tootja juhistele Reactive Oxygen Species Assay Kit (Vigorous Biotechnology, Peking, Hiina). Lühidalt, rakud (80% konfluentsus) koguti ja pesti PBS-iga enne värvimist dihüdroetiidiumi (DHE) lahusega (Beyotime Biotechnology Institute). Seejärel analüüsiti rakke voolutsütomeetriliste analüüsidega.

Mitokondriaalse membraani potentsiaali (MMP) mõõtmine.

MMP muutuste tuvastamiseks kasutati tetrametüülrodamiini metüülestri (TMRM) analüüsikomplekti (ImmunoChemistry Technologies, Bloomington, MN, USA). Lühidalt, rakud (80% konfluentsus) koguti, pesti PBS-ga ja värviti TMRM-iga 15–20 minutit 37 °C inkubaatoris. Seejärel pesti rakke üks kord PBS-ga ja viidi läbi voolutsütomeetrilised analüüsid.

Immunoblotanalüüsid.

Rakud (80 protsenti konfluentsust) koguti ja lüüsiti RIPA puhvris (Jrdun Biotechnology), mis koosnes 50 mM Tris-HCl-st, pH 7,4; 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1% NP-40, 1% naatriumdeoksükoolhapet ja 0,1% SDS-i ning värskelt lisatud proteasoomi inhibiitoreid. Immunoblotanalüüsiks kasutati võrdses koguses selget rakulüsaati, nagu eelnevalt kirjeldatud (20).

Statistiline analüüs.

Kvantitatiivsed andmed on väljendatud keskmisena ± standardhälve. Statistilisi erinevusi hinnati paaritu Studenti t-testiga, kasutades statistilist SPSS 15.0 tarkvara. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Tulemused

ehhinakosiid pärsib kasvajarakkude kasvu. Kuigi on teatatud, etehhinakosiid avaldab kaitsvat rolli, pärssidesapoptoosja põletikulised signaalid somaatilistes rakkudes, nagu neuronaalsed ja sooleepiteelirakud (16-19), jääb arusaamatuks, kas ECH kontrollib vähirakkude kasvu ja proliferatsiooni. Selle testimiseks viidi läbi rakkude ellujäämise test, töödeldes II astme pankrease adenokartsinoomist pärinevaid SW1990 rakke ECH tiitritud annustega, nagu on näidatud joonisel 1. Nimelt näidati, et ECH aeglustab oluliselt kasvajarakkude proliferatsiooni annuses. -st sõltuval viisil 5-päevase kultuuriperioodi jooksul (joonis 1).

ehhinakosiid käivitab apoptoosi. Nagu kaotusapoptooson üks peamisi põhjuslikke mehhanisme, mis on pankrease vähirakkude kontrollimatu proliferatsiooni aluseks (21), viidi käesolevas uuringus läbi rida katseid, et teha kindlaks, kas ECH vallandab apoptoosi. Esiteks, kasvajarakkude tuumade värvimisel Hoechst 33342-ga näidati, et ECH põhjustabapoptoosannusest sõltuval viisil (joonis 2A). Lisaks viidi FACS analüüsid läbi anneksiin V / PI värvimise abil, et veelgi kinnitada ty apoptootilist toimet.ehhinakosiid (joonis 2B). Apoptootiliste rakkude keskmine protsent oli normaalsetes kultiveerimistingimustes 1,1 protsenti, samas kui see protsent suurenes oluliselt 10,6, 21,4 ja 51,3 protsendini vastusena ECH-ravile annusest sõltuval viisil (joonis 2C). Need tulemused koos joonisel fig 1 näidatud rakkude elujõulisuse analüüsiga näitavad sedaehhinakosiidravi pärsib kasvajarakkude proliferatsiooni vallandadesapoptoos.

ehhinakosiid kutsub esile reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) tootmist. Mitmed vähi kemoterapeutilised ravimid, nagu doksorubitsiin ja tsisplatiin, on osutunud tugevateks ROS-i generaatoriteks, millel on füsioloogilistes ja patoloogilistes tingimustes ülioluline roll apoptoosi esilekutsumisel (22). Seega uuriti, kas ECH-ravi võib reguleerida ka ROS-i tootmist. Selle testimiseks kasutati selles uuringus ROS-i tootmise hindamiseks DHE-d, mida saab oksüdeerida DNA-ga interkaleeruva etiidiumi saamiseks. Leiti, et nagu teisedki vähivastased ravimid,ehhinakosiid stimuleerib ka ROS-i tootmist annusest sõltuval viisil, mida näitab kõrgenenud fluorestsentsi intensiivsus ECH-ravi korral (joonis 3).

ehhinakosiidvähendab MMP-d. On näidatud, et mitokondriaalne düsfunktsioon on seotud apoptoosi esilekutsumisega. On näidatud, et mitokondriaalse läbilaskvuse üleminekupooride avanemine kutsub esile transmembraanse potentsiaali depolarisatsiooni ja pro-apoptootiliste tegurite vabanemise (23). Seetõttu testiti, kasehhinakosiid võib põhjustada MMP kadu kasvajarakkudes, tehes TMRM testi, mis on hästi väljakujunenud lähenemisviis, kuna TMRM fluorestsentsi intensiivsus on võrdeline membraani potentsiaaliga. Seda demonstreeritiehhinakosiid ravi vähendab oluliselt MMP-d annusest sõltuval viisil (joonis 4).

ehhinakosiid kontrollib kasvajarakkude kasvu mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasi (MAPK), kuid mitte AKT signaalide kaudu. Molekulaarse aluse edasiseks uurimiseksehhinakosiid-vahendatud kasvajarakkude surma, uuriti mitmete elutähtsate signaaliradade, nagu MAPK ja AKT (24,25), aktiivsust, mis kontrollivad rakkude ellujäämist ja surma. MAPK-d on evolutsiooniliselt konserveerunud, proliinile suunatud Ser/Thr proteiinkinaasid, sealhulgas ekstratsellulaarsed signaaliga reguleeritud kinaasid (ERK), c-Jun NH2-terminaalne kinaas (JNK-d) ja p38 perekonna liikmed, mida aktiveeritakse kolme kaudu. -taseme kinaasi signaaliülekande kaskaadid (26, 27). Selles uuringus hinnati MAPK-de ja AKT-de, samuti nende aktiveeritud fosforüülitud vormide ekspressiooni ning selgus, etehhinakosiid pärsib märkimisväärselt JNK ja ERK1/2 aktiivsust, kuid suurendab p38 aktiivsust (joonis 5). Eelkõige näidati, et ECH-ravi ei mõjuta AKT aktiivsust, mis on samuti kriitilise tähtsusega rakkude proliferatsiooni jaoks (joonis 5). Lisaks näidati, et ECH-ravi suurendab Baxi ja kaspaasi-3 ekspressiooni, vähendades samal ajal Bcl-2 ekspressiooni (joonis 5), mis on kooskõlas joonisega 2. Seega näitavad tulemused, etehhinakosiidkäivitab MAPK raja kaudu kasvajarakkude apoptoosi.

cistancheehhinakosiidapoptoosivastaseks

Arutelu

Meie teadmiste kohaselt on see esimene uuring, mis seda näitabehhinakosiid omab vallandades kasvajat supresseerivat funktsiooniapoptoos(joonis 2), soodustades ROS-i tootmist (joonis fig 3) ja indutseerides mitokondriaalse membraani potentsiaali depolarisatsiooni (joonis fig 4), mis viib kasvajarakkude kasvu pärssimiseni (joonis 1). Lisaks näidati, et ECH-vahendatud kasvajarakkude surma molekulaarne alus toimus MAPK signaaliradade reguleerimise kaudu (joonis 5). Need leiud näitavad ECH uudset funktsiooni tuumorigeneesi ennetamisel ja viitavad seega sellele, et see võib olla vähiravi kandidaataine.

Enamik vähivastaseid ravimeid võib indutseerida kasvajarakkude apoptoosi, vananemist ja/või rakutsükli peatamist, mis põhjustab kasvajarakkude kasvu ja proliferatsiooni pärssimist. Rakutsükli seiskumine on raku reaktsioon kergetele stressisignaalidele, mis võimaldavad rakkudel parandada kahjustatud DNA-d enne replikatiivse DNA sünteesi või mitoosi käivitamist, samas kui apoptoos ja vananemine (püsiv rakutsükli seiskumine) toimuvad vastusena stressisignaalidele, mis kõrvaldavad parandamatud või pahaloomulised rakud. 28,29). Seetõttu on ainult apoptootiline toimeehhinakosiid Selles uuringus hinnati kasvajarakkude kohta, kuna vähirakkude tapmine on vähivastase aine tugevuse hindamise peamine kriteerium. Eelkõige näidati, et ECH indutseerib Baxi ekspressiooni (joonis 5), pro-apoptootiline geen, mida transkriptsiooniliselt aktiveerib kasvaja supressor p53 (30). Seega tasub katsetada, kasehhinakosiid saab aktiveerida p53 signaaliraja. Kui jah, võib ECH olla võimeline esile kutsuma ka p53-sõltuva rakutsükli peatamise, vananemise, apoptoosi või autofagia. Selles uuringus selgitati ECH kasvajat pärssivat funktsiooni SW1990 pankrease adenokartsinoomi rakuliinis. Siiski on vaja täiendavaid uuringuid, et jälgida rohkem kõhunäärmevähi rakuliine. On näidatud, et onkogeense valgu RAS ja kasvaja supressori p53 mutatsioonid on seotud pankreasevähi tekkega (31); Siiski ei sisalda SW1990 rakuliin IARC p53 andmebaasi kohaselt ühtegi p53 mutatsiooni. Seetõttu on oluline uurida, kasehhinakosiid võib mõjutada teiste erinevate p53 mutatsioonidega pankreasevähi rakuliinide kasvu ja proliferatsiooni. Lisaks oleks huvitav kindlaks teha, kas ECH on võimeline soodustama apoptoosi ja pärssida muud tüüpi kasvajate kasvu.

ROS-i tõus ja MMP vähenemine, mille põhjustasidehhinakosiid ravi, on osutunud hädavajalikuksapoptoosinduktsioon (22). Lisaks on leitud, et ROS võib MMP katkemise tõttu indutseerida mitokondriaalsete pooride oksüdatsiooni, mis aitab kaasa apoptoosi vaheühendi tsütokroom c vabanemisele (22). Seega tuleb veel kindlaks teha, kas ECH häirib MMP-d kaudselt ROS-i esilekutsumise kaudu. Lisaks on näidatud, et ROS-i esilekutsutud oksüdatiivne stress on seotud paljude rakukasvu kontrollivate signaalide, sealhulgas p53, NF-κB, HIF-ide ja PI3K moduleerimisega (32). Tuleb veel kindlaks teha, kas ja kui jah, siis kuidas ECH reguleerib neid olulisi signalisatsiooniteid. Eelkõige põhjustab oksüdatiivne stress mitmesuguseid neurodegeneratiivseid haigusi, mis on tingitud suurest hapnikutarbimisest, nõrkadest antioksüdatiivsetest süsteemidest ja kesknärvisüsteemi terminaalsetest diferentseerumisomadustest (33). Kuid mitmed uuringud on seda näidanudehhinakosiidomab närvikoele kaitsvat ja apoptoosivastast toimet. Sellega seoses on mõistlik oletada, et ECH võib vähendada ROS-i tootmist terminaalselt diferentseerunud närvirakkudes. Seetõttu tuleb veel kindlaks teha, kas ROS-i tootmise reguleerimine ECH-ga sõltub rakkude diferentseerumise staatusest. Seega näitavad praegused tulemused koos teiste uuringutega, et ECH, laialdaselt kasutatav TCM, võib olla oluline kemoterapeutiline strateegia mitte ainult neurodegeneratiivsete haiguste, vaid ka pahaloomuliste kartsinoomide raviks.

Viimasel ajal on TCM-i kasutamine vähiravis pälvinud üha rohkem tähelepanu. TCM-is kasutatavate ravimtaimedest valmistatud looduslike saaduste potentsiaali on teadlaskond tunnustanud isegi läänemaailmas (9). Nende looduslike toodete toimemehhanismide selgitamiseks on vaja teha jõupingutusi, mis võib lõpuks viia tõhusate ja ohutute vähiravi ravimite väljatöötamiseni.

Kokkuvõtteks näitas käesolev uuring kasvaja inhibeerivat funktsiooniehhinakosiid ja täpsustab ka selle molekulaarset alustehhinakosiid-vahendatud kasvaja supressioon, mis viitab selle võimalikule kliinilisele kasutamiseleehhinakosiid vähiravis.

ehhinakosiidin cistanche

Tänuavaldused

Seda uuringut rahastas ja toetas FMU teadusuuringute võtmeprogramm (grant nr 09ZD014). Autorid soovivad tänada Biomedworldi (Shanghai, Hiina) abi eest käsikirja redigeerimisel.

Alatesehhinakosiidpärsib pankrease adenokartsinoomi rakkude kasvu, indutseeridesapoptoosWEI WANGi, JINBIN LUO, YING HUI LIANGi ja XINFENG LI poolt mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasi raja kaudu

---MOLEKULAARMEDITSIINI ARUANDED 13: 2613-2618, 2016. aasta DOI: 10.3892/mmr.2016.4867

Viited

1. Hanahan D ja Weinberg RA: vähi tunnused: järgmine põlvkond. Lahter 144: 646-674, 2011.

2. Alderton GK: Transkriptsioon: MYC transkriptsioonilised mõjud. Nat Rev Cancer 14: 513, 2014.

3. Zindy F, Eischen CM, Randle DH, Kamijo T, Cleveland JL, Sherr CJ ja Roussel MF: Myc signaalimine ARF kasvaja supressori kaudu reguleerib p53-sõltuvustapoptoosja jäädvustamist. Genes Dev 12: 2424-2433, 1998.

4. Sachdeva M, Zhu S, Wu F, Wu H, Walia V, Kumar S, Elble R, Watabe K ja Mo YY: p53 represseerib c-Myc kasvaja supressori miR-145 indutseerimise kaudu. Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212, 2009.

5. Liao JM, Cao B, Zhou X ja Lu H: uued ülevaated p53 funktsioonidest selle siht-mikroRNA-de kaudu. J Mol Cell Biol 6: 206-213, 2014.

6. Zamble DB ja Lippard SJ: Tsisplatiin ja DNA parandamine vähi keemiaravis. Trends Biochem Sci 20: 435-439, 1995.

7. Kleeff J, Kornmann M, Sawhney H ja Korc M: aktinomütsiin D indutseeribapoptoosja pärsib pankrease vähirakkude kasvu. Int J Cancer 86 399-407, 2000.

8. Tacar O, Sriamornsak P ja Dass CR: doksorubitsiin: värskendus vähivastase molekulaarse toime, toksilisuse ja uute ravimite manustamissüsteemide kohta. J Pharm Pharmacol 65: 157-170, 2013.

9. Efferth T, Li PC, Konkimalla VS ja Kaina B: traditsioonilisest hiina meditsiinist ratsionaalse vähiravini. Trends Mol Med 13: 353-361, 2007.

10. Yim H, Lee YH, Lee CH ja Lee SK: Emodin, Rheum palmatum risoomidest eraldatud antrakinooni derivaat, inhibeerib selektiivselt kaseiinkinaasi II aktiivsust konkureeriva inhibiitorina. Planta Med 65: 9-13, 1999.

11. Zhang L, Chang CJ, Bacus SS ja Hung MC: HER-2/neu-üleekspresseerivate rinnavähirakkude transformatsiooni ja diferentseerumise pärssimine emodiini poolt. Cancer Res 55: 3890-3896, 1995.

12. Pommier Y: Topoisomeraas I inhibiitorid: kamptotetsiinid ja muud. Nat Rev Cancer 6: 789-802, 2006.

13. Lee YW, Chen TL, Shih YR, Tsai CL, Chang CC, Liang HH, Tseng SH, Chien SC ja Wang CC: Traditsioonilise hiina meditsiini täiendav ravi parandab kaugelearenenud rinnavähiga patsientide ellujäämist: populatsioonipõhine uuring. Vähk 120: 1338-1344, 2014.

14. Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Namba T ja Kadota S: akteosiid pärsibapoptoosD-galaktosamiini ja lipopolüsahhariidide põhjustatud maksakahjustuse korral. Life Sci 65: 421-430, 1999.

15. Gao JJ, Igarashi K ja Nukina M: Fenüülpropanoidglükosiidide radikaalne eemaldamine Caryopteris incanas. Biosci Biotechnol Biochem 63: 983-988, 1999.

16. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L ja Zhao J: kaitseehhinakosiidoleiinhappe põhjustatud ägeda kopsukahjustuse vastu rottidel. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.

17. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T ja Wen T:ehhinakosiidleevendab D-galaktosamiini ja lipopolüsahhariidide põhjustatud ägedat maksakahjustust hiirtel, inhibeeridesapoptoosja põletik. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

18. Zhao Q, Gao J, Li W ja Cai D: neurotroofsed ja neuropäästmismõjudehhinakosiidParkinsoni tõve subakuutses MPTP hiiremudelis. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

19. Jia Y, Guan Q, Guo Y ja Du C:ehhinakosiidstimuleerib rakkude proliferatsiooni ja takistab raku apoptoosi sooleepiteeli MODE-K rakkudes, reguleerides transformeeriva kasvufaktori 1 ekspressiooni. J Pharmacol Sci 118: 99–108, 2012.

20. Liao P, Wang W, Shen M, Pan W, Zhang K, Wang R, Chen T, Chen Y, Chen H ja Wang P: EBP2 ja c-Myc vaheline positiivne tagasiside ahel reguleerib rDNA transkriptsiooni, rakkude proliferatsiooni, ja tuumorigenees. Cell Death Dis 5: e1032, 2014.

21. Westphal S ja Kalthoff H: Apoptoos: sihtmärgid kõhunäärmevähi korral. Mol Cancer 2: 6, 2003.

22. Simon HU, Haj-Yehia A ja Levi-Schaffer F: Reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) rollapoptoosinduktsioon.Apoptoos5: 415-418, 2000.

23. Ly JD, Grubb DR ja Lawen A: mitokondriaalse membraani potentsiaal (delta psi(m)) apoptoosis; uuendus.Apoptoos8: 115-128, 2003.

24. Munshi A ja Ramesh R: Mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasid ja nende roll kiirgusreaktsioonis. Genes Cancer 4: 401-408, 2013.

25. Abraham AG ja O'Neill E: PI3K/Akt-vahendatud p53 regulatsioon vähi korral. Biochem Soc Trans 42: 798-803, 2014.

26. Tournier C: JNK signaalimise kaks nägu vähis. Genes Cancer 4: 397-400, 2013.

27. Koul HK, Pal M ja Koul S: p38 MAP kinaasi signaaliülekande roll tahkete kasvajate korral. Genes Cancer 4: 342-359, 2013.

28. Brady CA ja Attardi LD: p53 lühidalt. J Cell Sci 123: 2527-2532, 2010.

29. Carvajal LA ja Manfredi JJ: Kasvaja supressori p53 tee-elu või surmaotsuste teine ​​kahvel. EMBO Rep 14: 414-421, 2013.

30. Miyashita T ja Reed JC: kasvaja supressor p53 on inimese Baxi geeni otsene transkriptsiooniline aktivaator. Lahter 80: 293-299, 1995.

31. Morton JP, Timpson P, Karim SA, Ridgway RA, Athineos D, Doyle B, Jamieson NB, Oien KA, Lowy AM, Brunton VG jt: Mutant p53 juhib metastaase ja ületab kõhunäärmevähi kasvu peatamise/vananemise. Proc Natl Acad Sci USA 107: 246-251, 2010.

32. Schieber M ja Chandel NS: ROS-i funktsioon redokssignalisatsioonis ja oksüdatiivses stressis. Curr Biol 24: R453-R462, 2014.

33. Li J, OW, Li W, Jiang ZG ja Ghanbari HA: oksüdatiivne stress ja neurodegeneratiivsed häired. Int J Mol Sci 14: 24438-24475, 2013.