Abstraktne: Salvia on oma ravipotentsiaali poolest laialdaselt tunnustatud. Mõne liigi bioloogiline tähtsus jääb siiski teadmata, nimelt Salvia cacaliifolia Benth. Seetõttu on selle uuringu eesmärk paljastada selle eeterliku õli (EO) keemiline koostis ja asjakohased omadused. EO-d iseloomustati GC ja GC-MS abil ning selle seenevastast toimet hinnati vastavalt CLSI juhistele dermatofüütide ja pärmide kohta. Põletikuvastast potentsiaali hinnati lipopolüsahhariididega stimuleeritud makrofaagidel, hinnates lämmastikoksiidi (NO) tootmist ja mõju kahe peamise põletikueelse ensüümi, iNOS ja COX-2 valgu tasemele Western blot analüüsiga. . Haavade paranemisvõime määrati kriimustushaavade paranemise testi abil ja vananemisvastast potentsiaali hinnati vananemismarkeri - galaktosidaasi hindamisega. EO-d iseloomustasid peamiselt -kurkumiin, -bisaboleen, bitsüklogermakreen ja kurserenoon. See on efektiivne dermatofüütide ja C. neoformansi kasvu pärssimisel. EO vähendas oluliselt iNOS-i ja COX-2 valgu taset ning vähendas samaaegselt NO vabanemist. Lisaks näitas see vananemisvastast potentsiaali ja soodustas haavade paranemist. Üldiselt tõstab see uuring esile Salvia cacaliifolia EO asjakohaseid farmakoloogilisi omadusi, mida tuleks täiendavalt uurida, kavandades jätkusuutlike, uuenduslike ja keskkonnasõbralike nahatoodete väljatöötamist.

Tistanche glükosiid võib samuti suurendada SOD aktiivsust südame- ja maksakudedes ning oluliselt vähendada lipofustsiini ja MDA sisaldust igas koes, eemaldades tõhusalt erinevaid reaktiivseid hapnikuradikaale (OH-, H2O₂ jne) ja kaitstes tekitatud DNA kahjustuste eest. OH-radikaalide poolt. Tsistanche fenüületanoidglükosiididel on tugev vabade radikaalide eemaldamisvõime, suurem redutseerimisvõime kui C-vitamiinil, nad parandavad SOD aktiivsust sperma suspensioonis, vähendavad MDA sisaldust ja omavad teatud kaitset sperma membraani funktsioonile. Tsistanche polüsahhariidid võivad suurendada SOD ja GSH-Px aktiivsust D-galaktoosi poolt põhjustatud eksperimentaalselt vananevate hiirte erütrotsüütides ja kopsukudedes, samuti vähendada MDA ja kollageeni sisaldust kopsudes ja plasmas ning suurendada elastiini sisaldust. hea puhastav toime DPPH-le, pikendab hüpoksia aega vananevatel hiirtel, parandab SOD aktiivsust seerumis ja aeglustab eksperimentaalselt vananevatel hiirtel kopsude füsioloogilist degeneratsiooni Raku morfoloogilise degeneratsiooniga on katsed näidanud, et Cistanche'il on hea antioksüdantne võime ja sellel on potentsiaal olla ravim naha vananemishaiguste ennetamiseks ja raviks. Samal ajal on Cistanche ehhinakosiidil märkimisväärne võime eemaldada DPPH vabu radikaale ja see suudab eemaldada reaktiivseid hapniku liike ja takistada vabade radikaalide poolt indutseeritud kollageeni lagunemist, samuti on sellel hea parandav toime tümiini vabade radikaalide anioonide kahjustustele.

Klõpsake valikul Desert Cistanche eelised

【Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Sissejuhatus

Rahvatervise ametivõimud jätavad seennakkused endiselt tähelepanuta, mõjutades üle miljardi inimese ja 1,5 miljonit surmajuhtumit aastas [1]. Immuunpuudulikkusega isikud on rohkem altid seennakkustele [1], Candida ja Cryptococcus on kaks peamist invasiivsete infektsioonide etioloogilist ainet [1, 2]. Dermatofüüdid, teine ​​​​patogeensete seente rühm, mis on väga olulised oma rolli tõttu pindmiste mükoosidega seotud haigestumuses [3], hõlmavad Trichophytoni, Epidermophytoni ja Microsporumi tüvesid. Lisaks võivad nad immuunpuudulikkusega peremeesorganismidel põhjustada invasiivseid haigusi [4].

Dermatofüüdid võivad aktiveerida immuunsüsteemi tänu seente epitoopide, nagu mannaan [5, 6], seondumisele teemaksulaadsete retseptoritega (TLR), aktiveerides seega nende infektsioonidega seotud põletikueelse kaskaadi. Üks selline kaskaad on tuumafaktori kappa B (NF-κB) rada, mis lõpuks viib põletikuliste tsütokiinide tootmise ja peamiste põletikueelsete ensüümide, nagu indutseeritava lämmastikoksiidi süntaasi (iNOS) ja tsüklooksügenaasi valgu taseme tõusuni. -2 (COX-2) [7]. Ensüüm iNOS vastutab lämmastikoksiidi (NO) tootmise eest, mis on tuntud põletikueelne vahendaja, mida toodetakse üle mitme kroonilise põletikuga seotud haiguse korral.

Lisaks on dermatofüüdid seotud nahakahjustuste tekkega [8]. Seetõttu peavad pärast infektsiooni lahenemist kahjustatud koe taastamiseks toimuma haavade paranemisprotsessid. See protsess hõlmab erinevaid faase, mis peavad toimuma õiges järjekorras ja õigel ajal, vastasel juhul muutub haav krooniliseks [9].

Relapside, resistentsuse ja seenevastaste kõrvaltoimete tõttu on praegused seenevastased ravid mitu korda ebaefektiivsed, kuna seeninfektsioonid jäävad rahuldamata kliiniliseks vajaduseks [10]. Hämmastav on see, et üha rohkem teateid näitavad, et mitmed seenetüved on juba välja arendanud resistentsuse praeguste seenevastaste ainete suhtes [11, 12], mis õigustab uute seenevastaste lähenemisviiside väljatöötamist [13]. Lisaks on teatatud, et põletikuvastased ravimid põhjustavad mitmeid kõrvaltoimeid [14]. Seda silmas pidades on ülimalt olulised raviained, mis võivad samaaegselt ravida seeninfektsioone ja vähendada sellega seotud põletikku.

Aromaatsetel taimedel ja nende metaboliitidel on huvitavad organoleptilised omadused, mis aitavad kaasa ka nende kõrgele väärtusele farmaatsia-, agronoomia-, toiduaine-, sanitaar-, kosmeetika- ja parfüümitööstuses [15] ning tõusevad potentsiaalseteks kandidaatideks uute põletikuvastaste/seenevastaste ravimitena.

Paljud Asteraceae, Apiaceae ja Lamiaceae perekondadest pärit aromaatsed taimed on rikkad eeterlike õlide poolest, millel on suur hulk bioloogilisi toimeid, nimelt põletiku- ja seenevastaseid omadusi [16–22]. Perekonda Salvia L., mis on Lamiaceae perekonna üks olulisemaid perekondi, kultiveeritakse toidu vürtside või lõhna- ja maitseainetena kosmeetikas ja parfümeerias [23]. Traditsioonilises meditsiinis kasutatakse mitmeid liike mikroobsete infektsioonide, malaaria ja põletike raviks ning kodude desinfitseerimiseks pärast haigust [23]. Salvia liigid on meelitanud teadlasi oma bioloogiliste omaduste poolest, millel on tugev antibakteriaalne, seenevastane, vähivastane ja põletikuvastane toime, samuti kognitiivse jõudluse parandamine [24–30]. Kuigi seda perekonda on suuresti uuritud, on mõned liigid nende keemilise koostise ja meditsiinilise huvi poolest teadmata, näiteks Salvia cacaliifolia Benth. (syn Salvia atriplicifolia Fernald, Salvia hempsteadiana SFBlake ja Salvia mendax Epling). S. cacaliifolia on püstine rohttaim, 70 cm kõrgune mitmeaastane põõsas, millel on kolmnurksed lehed ja suured sügavsinised, 2-2 cm pikkused huulteõied [31]. See liik kasvab Mehhiko, Guatemala ja Hondurase kõrgmäestikupiirkondades.

Selle töö eesmärk on S. cacaliifolia (cacalia salvei) eeterlikku õli keemiliselt iseloomustada ja avaldada selle seene-/põletikuvastane potentsiaal. Lisaks uuriti ka eeterliku õli haavade paranemisvõimet. Selle liigi vastu huvi edasiseks edendamiseks uuriti ka vananemisvastast potentsiaali.

2. Tulemused

2.1. S. cacaliifolia eeterliku õli keemiline koostis

Eeterlikku õli iseloomustas suur süsivesinikseskviterpeenide kogus (70,10 protsenti ± 0,119), millele järgnesid hapnikurikkad seskviterpeenid (11,71 protsenti ± 0). {21}}32), nagu on näidatud tabelis 1. Üksikute ühendite osas oli eeterlik õli rikas -kurkumiini (27,64 protsenti ± 0.195), -bisaboleeni (18,01 protsenti ± 0,033), bitsüklogermakreeni ( 8,54 protsenti ± 0,074) ja kurserenooni (7,68 protsenti ± 0,055).

2.2. Salvia cacaliifolia seenevastane toime 

Hinnati S. cacaliifolia eeterliku õli seenevastast toimet, eriti dermatofüütide ja pärmseente vastu. Nagu on näidatud tabelis 2, oli eeterlik õli efektiivne kõigi testitud dermatofüütide tüvede vastu, kusjuures kõige vastuvõtlikumad olid T. mentagrophytes ja T. rubrum (MIC=0.16 µL/mL). Pärmseente osas oli C. neoformans kõige vastuvõtlikum eeterlikule õlile (MIC=0.64 µL/mL).

2.3. S. cacaliifolia põletikuvastane potentsiaal

S. cacaliifolia eeterliku õli põletikuvastast potentsiaali hinnati lipopolüsahhariidiga (LPS) stimuleeritud makrofaagide abil. Nagu oodatud, põhjustas LPS-i lisamine 24 tunni jooksul lämmastikoksiidi (NO) sekretsiooni kasvu söötmesse ([NO]=42,8 ± 7,4 µM). Erinevate eeterlike õlide kontsentratsioonide lisamine põhjustas tuvastatud nitritite annusest sõltuva vähenemise (IC50=0.49 µL/mL). Nii 1,25 kui ka 0,64 µL/mL vähendasid märkimisväärselt tuvastatud nitritite sisaldust (joonis 1A). Arvestades, et 1,25 µL/ml juures täheldati rakkude elujõulisuse olulist langust (joonis 1B), kasutati kontsentratsiooni 0,64 µL/mL, et paljastada S. cacaliifolia põletikuvastase potentsiaali taga olev mehhanism. eeterlik õli.

Arvestades, et LPS-i seondumine Toll-sarnase retseptoriga 4 (TLR4) viib NF-κB tuuma translokatsioonini, mis omakorda põhjustab indutseeritava lämmastikoksiidi süntaasi (Nos2) ja tsüklooksügenaasi -2 (Cox2) ekspressiooni [ 34], hindasime seejärel, kas eeterliku õli olemasolu võib mõlema valgu taset moduleerida. Nagu on näidatud joonistel 2A–C, põhjustas LPS-i olemasolu üksi iNOS-i ja COX-i -2 valgutasemete olulise tõusu. Eeterliku õli juuresolekul vähenes mõlema valgu tase, eriti iNOS-i tase (joonis 2A, B), mis viitab sellele, et õli kahjustas NF-KB aktivatsiooni ja järelikult Nos2 mRNA ekspressiooni ja selle valgu taset.

2.4. S. cacaliifolia Essential Oi haavade paranemisomadused

Arvestades, et mitmed perekonna Salvia taimed on teatatud haavade paranemise ainetena [27, 35, 36], oletati, et S. cacaliifolia võib soodustada haavade paranemist. Selleks kasutasime kriimustustesti ja haava sulgumist hinnati fibroblastides sisalduva eeterliku õli olemasolul ja puudumisel. Me teatame, et eeterlik õli soodustas märkimisväärselt fibroblastide migratsiooni võrreldes kontrollrakkudega (joonis 3A, B) kontsentratsioonil 0,32 µL/mL, mis on fibroblastide suhtes toksiline kontsentratsioon (joonis 3C).

2.5. S. cacaliifolia eeterliku õli vananemisvastane potentsiaal

Kuna on teada, et mõnedel Salvia liikidel on vananemisvastased omadused [37, 38], hindasime S. cacaliifolia eeterliku õli vananemisvastast potentsiaali, kasutades Senescenceassociated -galaktosidaasi ( -gal) testi koos etoposiidiga vananemist indutseeriva ainena. .

Nagu on näidatud joonisel fig 4, põhjustas etoposiidi (12,5 uM) lisamine 24 tunni jooksul, millele järgnes 72-tunnine taastumine ainult söötmes -gal-positiivsete rakkude arvu olulist suurenemist, mis näitab, et etoposiid indutseerib tõhusalt rakkude vananemist. Huvitav on see, et kui taastumisfaasis lisati söötmele S. cacaliifolia eeterlikku õli, vähenes -gal-positiivsete rakkude protsent oluliselt võrreldes ainult söötmega (joonis 4A, B), mis viitab sellele, et S. cacaliifolia võib samuti olla esinevad vananemisvastased toimed.

3. Arutelu

S. cacaliifolia on endiselt suures osas teadmata selle eeterliku õli keemilise koostise ja bioloogiliselt oluliste tegevuste osas. Teadmiste lünga täitmiseks kirjeldatakse selles töös esmakordselt selle liigi põletikuvastaseid, seenevastaseid, vananemisvastaseid ja haavade paranemise omadusi.

Teatasime, et S. cacaliifolia eeterlikku õli iseloomustavad valdavalt seskviterpeenid, eriti -kurkumiin, -bisaboleen, bitsüklogermakreen ja kurserenoon. Sarnaselt olid S. scabra ja S. aurea eeterlikud õlid rikkad seskviterpeenide poolest (vastavalt 92,4 ja 75 protsenti) [39], kusjuures -karüofüleen, epi- -kardinaal ja δ-kadinene olid peamised ühendid S. aureale, S. sabrale aga germakreen D, -karüofüleen, germakreen B ja -kopeen. S. ceratophylla, S. verbenaca, S. stenophylla, S. runcinata ja S. repens on teised näited Salvia eeterlikest õlidest, mis on valdavalt rikkad seskviterpeenide poolest [40–42]. Ükski Salvia eeterlik õli ei sisalda aga S. cacaliifolia eeterliku õlina suures koguses kurkumiini, bisaboleeni ja kurserenooni. Teistel Salvia liikidel on väga erinev keemiline koostis, ülekaalus on monoterpeenid, näiteks S. officinalis, milles on palju cis-tujooni ja kamprit [43,44] või 1,8-tsineool ja kamper [45]. ja S. rosmarinus, mis sisaldab rohkesti 1,8-tsineooli, -pineeni, kamprit [46].

Arvestades, et mõned Salvia liigid on teatatud nahainfektsioone ravivate ainetena [36,47], püüdsime seejärel hinnata, kas S. cacaliifolia õlil võib olla potentsiaali seeninfektsiooni tõrjeks. Eeterlik õli avaldas inhibeerivat toimet kõigi dermatofüütide tüvede ja Cryptococcus neoformansi vastu, mis viitab sellele, et seda võib kasutada seeninfektsioonide, eriti dermatofütoosi ja krüptokokooside raviks. Teistest liikidest (nt S. officinalis) pärinev eeterlik õli inhibeerib dermatofüüte, mille MIC on vahemikus 0,63 kuni 2,5 µL/mL [43,45], näidates seega nõrgemat toimet kui S. cacaliifolia. Kahel S. multicaulis'e eeterlikul õlil oli asjakohane dermatofüütiline toime, eriti nerolidoolirikas kemotüüp [48]. S. cacaliifolia peamiste ühendite aktiivsuse kohta ei ole uuringuid läbi viidud. Mõned uuringud on aga hinnanud nende ühendite poolest rikaste eeterlike õlide seenevastast toimet. Tõepoolest, uuring teatas mitmete Helichrysum microphyllum subsp. eeterlike õlide toimest. Türreenia näitas, et kõrgeima kurkumiinisisaldusega inimestel oli parim seenevastane toime [49]. Teised uuringud näitasid bisaboleeni [50, 51], bitsüklogermakreeni [51, 52] ja kurserenooni [53] rikaste eeterlike õlide mõõdukat seenevastast toimet. Arvestades eelnevalt teatatud eeterlike õlide nõrka seenevastast toimet, oletame, et S. cacaliifolia aktiivsus võib olla tingitud sünergilisest toimest kõigi segus olevate ühendite vahel. S. cacaliifolia eeterliku õli ja eraldatud ühendite seenevastase toime aluseks olevad toimemehhanismid on siiani teadmata. Arvestades nende lipofiilset olemust, oletame siiski, et nad võivad indutseerida seente kasvu pärssimist, integreerudes membraanistruktuuridesse, mis suurendaks läbilaskvust ning soodustaks rakusiseste komponentide lekkimist ja ensüümide inaktiveerimist [15,54].

Arvestades, et seeninfektsioonid põhjustavad immuunsüsteemi aktiveerumist [55], tõsteti käesolevas uuringus esile ka S. cacaliifolia põletikuvastane potentsiaal, kuna makrofaagide eeltöötlemisel eeterliku õliga saavutati NO vabanemise vähenemine. enne LPS-i stimuleerimist. Avaldamaks S. cacaliifolia põletikuvastase potentsiaali aluseks olevaid mehhanisme, eeterliku õli mõju iNOS-i ja COX-i -2, kahe TLR4/NF-κB signaaliülekandega seotud põletikueelse valgu valgu tasemele. rada, hinnati. Täheldati mõlema valgu taseme langust, mis viitab sellele, et NO vabanemise vähenemine võib olla tingitud NF-κB raja pärssimisest. Tõepoolest, üks peamisi molekulaarseid mehhanisme, mis aitavad kaasa kroonilise põletiku püsimisele, on NF-κB signaaliülekandekaskaadi aktiveerimine, mis on kujunenud põletiku ja kaasasündinud immuunhomöostaasi peamiseks regulaatoriks. Transkriptsioonifaktori NF-kB aktiveerimine põhjustab COX-2, iNOS-i indutseerimist ning ka põletikuliste tsütokiinide tuumori nekroosifaktori (TNF)-, IL-1, IL-6 ebanormaalset ekspressiooni. , mis võib kahjustada terveid naaberrakke ja pika aja jooksul põhjustada kroonilisi haigusi. Tuleb läbi viia täiendavaid uuringuid, et paremini mõista S. cacaliifolia eeterliku õli põletikuvastase potentsiaali täielikku mehhanismi, näiteks p65 tuuma translokatsiooni. Muude Salvia liikide puhul näidati, et S. officinalis'e eeterlik õli 0,64 µL/ml suutis vähendada NO tootmist 30–40 protsenti [45], samas kui S. cacaliifolia eeterlik õli sama annus vähendab NO tootmist 70 protsenti. Vastupidiselt pärsib S. ceratohyali eeterlik õli oluliselt NO tootmist (IC50=90 µg/mL) [40]. Salvia liikide võimest moduleerida NF-KB rada on juba teatatud. Tõepoolest, S. officinalis suutis vähendada NF-kB ekspressiooni [44]. S. ceratophylla inhibeerib tugevalt NF-κB IC50 väärtusega 38 µg/ml [40]. Näidati, et Helichrysum italicum eeterlik õli, mis on rikas kurkumiinist, S. cacaliifolia õli peamisest ühendist, suutis vähendada NO tootmist, mis sõltus selle ühendi sisaldusest, mida kinnitas eeterliku õli fraktsioneerimine. Kurkumiinirikas fraktsioon kutsus esile suurima inhibeerimise [56]. Sarnaseid toimeid kirjeldati H. italicum'i -kurkumiini kemotüübi puhul [57]. Näidati, et märkimisväärses koguses bisaboleeni [58] ja bitsüklogermakreeni [59] sisaldavad eeterlikud õlid avaldasid paljulubavat põletikuvastast toimet. Kurzerenooniga seoses ei ole läbi viidud uuringuid selle põletikuvastase potentsiaali hindamiseks. Siiski teatati, et kahel kurserenoonirikkal eeterlikul õlil on asjakohased antioksüdantsed omadused [60, 61], mis võivad samuti kaasa aidata S. cacaliifolia põletikuvastasele toimele, võimaldades NO puhastamist. Seda silmas pidades on võimalik, et kurkumiin, eeterliku õli peamine ühend, võib olla S. cacaliifolia põletikuvastase toime eest vastutav põhitegija, kuid ülejäänud peamiste ühendite panust ei saa kõrvale jätta.

Arvestades, et dermatofüütide infektsioon võib põhjustada nahakahjustuste teket [8], hindasime, kas S. cacaliifolia võib soodustada haavade paranemist. Meie tulemused näitasid, et see eeterlik õli soodustab fibroblastide migratsiooni, mis viitab sellele, et see võib mängida rolli haavade paranemise protsessis. Kurkumiinirikas H. italicum'i eeterlik õli soodustas diabeetiliste rottide haavade paranemist [62], mistõttu oletame, et S. cacaliifolia haavade paranemisvõime võib olla tingitud selle ühendi suurest kogusest.

Arvestades, et mitmed Salvia liigid võivad toimida vananemisvastaste ainetena [37], püüdsime välja selgitada, kas S. cacaliifolia võib ka vananemist taastada. Tõepoolest, täheldati vananemisest põhjustatud pH-sõltuva galaktosidaasi aktiivsuse vähenemist. Selle aktiivsuse võib seostada peamiselt bisaboleeni olemasoluga, kuna selle ühendi rikkal eeterlikul õlil oli tugev vananemisvastane toime ka fibroblastidele [63].

4. Järeldused

See töö toob esile Salvia liigi keemilise koostise, mis jääb suuresti teadmata, ja näitab, et sellel taimel on mitu bioloogiliselt olulist tegevust. S. cacaliifolia eeterlik õli on erilise keemilise koostisega, sisaldades valdavalt kurkumiini, bisaboleeni, bitsüklogermakreeni ja kurserenooni. Lisaks on see esimene aruanne, mis näitab S. cacaliifolia eeterliku õli seenevastaseid, põletikuvastaseid, vananemisvastaseid ja ravivaid omadusi, mis viitab selle võimalikule kasutamisele koostisosana kosmeetikatoodete väljatöötamisel nahapõletike ennetamiseks. nagu dermatofütoosi ja sellega seotud põletike raviks.

5. Materjalid ja meetodid

5.1. Taimne materjal

Salvia cacaliifolia seemikud on kasvatatud seemnest "Planta Medica" kasvuhoones Cagliari ülikooli taimebioloogia ja farmaatsiabotaanika laboris (UNICA). Mehhiko päritolu Cacalia salvei seemned on ostetud Itaalia spetsialiseeritud kauplusest. 5 nädala pärast siirdati seemikud "Planta Medica" kasvuhoonesse liigi ökofüsioloogilisteks vajadusteks. Pärast 2-aastast kasvu taimed koristati (õitsemisperiood) ja kuivatati laboris kaks päeva. Vautšeri näidis (6/23.9/V1) deponeeriti Herbarium Karalitanumis (CAG), Cagliari ülikoolis, Viale S. Ignazio, 13 Cagliari, Itaalia.

【Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】