Cistanche Tubulosa polüsahhariidide ekstraheerimine ultraheli abil: protsessi optimeerimine, fraktsioonide eraldamine, struktuuri iseloomustus ja väsimusevastased toimed

 

Abstraktne:Selle uuringu eesmärk oli optimeerida Cistanche tubulosa polüsahhariidide (CP) ekstraheerimisprotsessi ning uurida nende struktuuriomadusi ja väsimusevastast toimet. Ühe teguriga katsetest juhindudes ja reageerimispinna metoodikat kasutades optimeeritud optimaalseteks tingimusteks olid 20-minutiline ultrahelitöötlus, lahusti ja materjali suhe 20:1 ja ultraheli võimsus 220 W, saades 8,55% CP. Tselluloosi kolonnkromatograafia andis seejärel ühe neutraalse fraktsiooni (CPN) ja kolm happelist fraktsiooni (CPA-1, CPA-2, CPA-3). Nende hulgas oli CPN suurim taastumine (40,3%), kõrgeim süsivesikute sisaldus (39,5%) ja tugev antioksüdantne aktiivsus, mis on võrreldav CPA-2-ga; seetõttu valiti põhjalikuks iseloomustamiseks CPN. Struktuurianalüüsid näitasid iseloomulikke polüsahhariidide funktsionaalrühmi, glükoosi ja mannoosi ülekaalu ning tõendeid kahe märkimisväärselt erineva molekulmassiga komponendi kohta. In vivo pikendas CPN märkimisväärselt hiirte raskust kandvat ujumisaega, alandas seerumi uurea lämmastiku ja laktaadi sisaldust ning suurendas maksa glükogeeni taset, kinnitades väsimusvastast toimet. Need leiud annavad teadusliku aluse Cistanche tubulosa polüsahhariidide väljatöötamiseks väsimusvastasteks funktsionaalseteks toodeteks ja nendega seotud kaubanduslikeks rakendusteks.

Märksõnad: Cistanche tubulosa polüsahhariidid; vastuse pinna metoodika; ekstraheerimisprotsess; struktuurne iseloomustus; väsimuse vastane; CP uued eelised funktsionaalsetes toitudes ja toitainetes

 

Sissejuhatus

Cistanche tubulosa (Schenk) Wight,hinnatud ravim- ja söödav homoloogne taim, mida tuntakse kui "kõrbe ženšenn", on Hiinas pikka aega kasutatud [1]. Selle peamised bioaktiivsed koostisosad on polüsahhariidid, fenüületanoidglükosiidid ja iridoidid; nende hulgas on polüsahhariididel olulised füsioloogilised funktsioonid, nagu immunomoduleeriv [2], antioksüdant [3], väsimusevastane [4] ja hüpoglükeemiline toime [5], millel on laialdased kasutusvõimalused ravimites, tervisetoodetes ja funktsionaalsetes toiduainetes [6]. Traditsioonilised polüsahhariidide ekstraheerimismeetodid (nt kuuma vette kastmine ja tagasijooksutemperatuur) kannatavad sageli pika kestuse, madala efektiivsuse, suure energiatarbimise ja polüsahhariidi struktuuri ja aktiivsuse võimaliku kahjustamise tõttu [7–9]. Lisaks kuuma vee ekstraheerimisele [10] ja tagasijooksule [11], Teng et al. [12] võrreldi ultraheli-, mikrolaine- ja kombineeritud ultraheli-mikrolaine ekstraheerimist, leides, et sünergiline ultraheli-mikrolaine meetod andis parima saagise (11,00%), mis on 1,28% kõrgem kui kuumavee ekstraheerimine, millele järgnesid ainult mikrolaine- ja ultraheliuuringud.

Polüsahhariidide eraldamise ja puhastamise eesmärk on saada valke, nukleiinhappeid, lipiide ja muid lisandeid sisaldavatest töötlemata polüsahhariididest kõrge puhtusastmega, struktuurselt määratletud ja bioaktiivseid monoaineid või spetsiifilisi fraktsioone. Ailadan Maimaitiaili [11] värvitus ja valguvaba Cistanche toorpolüsahhariidid AB-8 makropoorse vaiguga, seejärel eraldas need DEAE-650M tselluloosiga, kasutades deioniseeritud vett ja NaCl gradienti, saades ühe neutraalse ja viis happelist polüsahhariidi; in vitro näitas neutraalne fraktsioon paremat antioksüdantset aktiivsust. Praegu keskenduvad Cistanche polüsahhariidide bioaktiivsuse uuringud peamiselt antioksüdantsele, põletikuvastasele ja vananemisvastasele toimele [13], samas kui väsimusevastaseid uuringuid on suhteliselt vähe.

Uuema loodusliku toote ekstraheerimistehnikana pakub ultraheli abil ekstraheerimine (UAE) lühikest ekstraheerimisaega, kõrget efektiivsust, töö lihtsust ja kuumutamist või seda on vähe, vältides seega kuumustundlike komponentide termilist lagunemist ning parandades saagist ja puhtust; seda on laialdaselt kasutatud taimsete polüsahhariidide jaoks [14]. Kuid AÜE tingimused Cistanche tubulosa polüsahhariidide (CP) ekstraheerimiseks nõuavad tõhususe maksimeerimiseks täiendavat optimeerimist. Response pinna metoodika (RSM), tõhus matemaatilisel modelleerimisel põhinev projekteerimis- ja optimeerimisviis, võimaldab optimaalsete parameetrite kindlaksmääramiseks mitme teguri ja nende vastasmõju igakülgset analüüsi.

Selles uuringus kasutasime Araabia Ühendemiraatide protsessi optimeerimiseks CP jaoks RSM-i, eraldasime ja tuvastasime saadud toorpolüsahhariidid, võrdlesime fraktsioonide in vitro antioksüdantset aktiivsust ja tuginedes tugevaimatele antioksüdantide aktiivsusega hinnatud väsimusevastastele toimetele in vivo. Eesmärk on pakkuda teaduslikku ja tehnilist tuge Cistanche tubulosa ressursside lisandväärtuse kasutamiseks ning kiirendada tervisetööstuse funktsionaalseteks toodeteks tõlkimist.

Cistanche tubulosa polüsahhariidid: eelised

 

 

 

Cistanche'i eeliste loend

 

 

Hankige kõrge polüsahhariidisisaldusega Cistanche tubulosa

 

 

1 Materjalid ja meetodid

1.1 Materjalid ja instrumendid

Cistanche tubulosa was purchased from the Urumqi dried fruit market; polysaccharides were prepared in-house at Xinjiang Agricultural University. Absolute ethanol, acetone, and ether were analytical grade (Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd.). DPPH was from Shanghai Ruji Biotechnology Development Co., Ltd. ABTS and shiitake polysaccharide (purity >98%) olid pärit Solarbiost (Peking).

Põhivarustus: veski XL-02A (Yechang Machinery Co., Ltd.); HH-S digitaalne konstantse temperatuuriga veevann (Jiangsu Jintani meditsiiniseadmete tehas); JBT/C-YCL400T/3P(D) ultraheli farmaatsiaprotsessor (Jining Jinbait Special Engineering Machinery Co., Ltd.); VP50 vaakumfiltreerimisseade (Beijing Labtech); RE-52B rootoraurusti (Shanghai Yarongi biokeemiliste instrumentide tehas); 80-1 tsentrifuug (Jintan Hengfengi instrumentide tehas); UV-2550 spektrofotomeeter (Shimadzu, Shanghai).

Loomad: 50 isast SPF Kunmingi hiirt kehamassiga 20,00 ± 2,00 g, vanuses 3–4 nädalat, ostetud Xinjiangi Meditsiiniülikooli Laboratory Animal Centerist (litsents SYXK-Xin 2024-0001).

 

Cistanche tubulosa polüsahhariidid: eelised

 

 

1.2 Meetodid

1.2.1 Polüsahhariidide ekstraheerimisprotsess

Cistanche viilud pulbristati ja lasti läbi 50-mešši sõela. Pulber pandi ümarapõhjalisse kolbi, segati 8 mahuosa 80% etanooliga, keedeti püstjahutiga 90 kraadi juures 2 tundi ja filtriti. Jääk kuivatati õhu käes. Kuivatatud jäägile lisati destilleeritud vett ja ekstraheeriti ultraheliga; ekstrakt filtriti, filtraat jäeti alles ja jääki ekstraheeriti üks kord uuesti. Kaks filtraati ühendati ja kontsentreeriti ühe neljandikuni esialgsest mahust. Kontsentraadile lisati kolm mahtu absoluutset etanooli, jäeti 12 tunniks 4 kraadi juurde seisma ja vaakumfiltreeriti sademe kogumiseks. Sadet pesti järjestikku absoluutse etanooli, atsetooni ja eetriga, kuivatati ja kaaluti toor-CP saamiseks.

 

Cistanche tubulosa polüsahhariidid: eelised

 

1.2.2 Ühe teguriga katsed

1.2.2.1 Lahusti ja materjali suhte mõju CP saagisele

Valmistati viis portsjonit Cistanche pulbrit (igaüks 4 g). Ekstraheerimisaeg ja ultraheli võimsus fikseeriti 20 minuti ja 175 W juures. Testiti lahusti ja materjali suhet 10:1, 15:1, 20:1, 25:1 ja 30:1 (mL:g) nende mõju suhtes CP saagisele. Iga katse viidi läbi kolmes eksemplaris.

 

1.2.2.2 Ultraheli võimsuse mõju CP saagisele

Viis portsjonit pulbrit (igaüks 4 g) ekstraheeriti punktis 1.2.2.1 määratud optimaalse lahusti ja materjali suhtega, kusjuures ekstraheerimisaeg oli fikseeritud 20 minutiks. Katsetati ultraheli võimsustasemeid 125, 150, 175, 200 ja 225 W. Viidi läbi kolm korda katseid.

 

1.2.2.3 Ultraheli aja mõju CP saagisele

Viis portsjonit pulbrit (igaüks 4 g) ekstraheeriti optimaalse lahusti ja materjali suhtega (alates 1.2.2.1) ja optimaalse ultrahelivõimsusega (alates 1.2.2.2). Testiti ultraheli aegu 10, 15, 20, 25 ja 30 minutit. Iga tingimus viidi läbi kolmes eksemplaris.

 

1.2.3 Vastuse pinna metoodika (RSM)

Ühefaktoriliste tulemuste põhjal kasutati Box-Behnkeni disaini, mille vastuseks oli CP saagis ja tegurid olid ultraheli aeg, lahusti ja materjali suhe ning ultraheli võimsus. RSM-i optimeerimine viidi läbi rakenduses Design-Expert 8 kolmefaktorilise ja kolmetasandilise disainiga (vt tabel 1). Katsed viidi läbi kolmes eksemplaris.

 

Cistanche tubulosa polüsahhariidid: eelised

 

1.2.4 Polüsahhariidide sisalduse määramine

Polüsahhariidide sisaldust mõõdeti väävelhappe-antroni kolorimeetrilise meetodiga [15]. Antron (20 g) lahustati kontsentreeritud väävelhappes ja viidi mahuni 100 ml, et valmistada 0,2 g/ml lahus. Sobiv kogus CP-d lahustati ja lahjendati 100 ml-ni. 1 ml alikvoot segati 5 ml 0,2 g/ml antroon-väävelhappega, segati keerisega, jäeti 5 minutiks toatemperatuurile, kuumutati 90-kraadises veevannis 15 minutit, jahutati ja neeldumist mõõdeti lainepikkusel 585 nm. Standardkõvera koostamiseks kasutati glükoosi: Y=0.0081X + 0.0176 (R²=0.9991). Polüsahhariidisisalduse arvutamiseks asendati kõvera proovi neeldumine.

 

1.2.5 Polüsahhariidide saagise arvutamine

Polüsahhariidi saagis arvutati standardvalemi järgi (saadud polüsahhariidi mass võrreldes tooraine massiga), kasutades mõõdetud polüsahhariidisisaldust.

 

1.2.6 Polüsahhariidide puhastamine

Crude CP extract was prepared under the optimized conditions. Following Wang et al. [16], Sevag reagent (chloroform:n‑butanol = 4:1, v/v) was used for deproteinization with vigorous shaking for 10 min, followed by centrifugation; the supernatant was collected and the process repeated three times. Eight volumes of 95% ethanol were added to the filtrate and left at 4 °C for 24 h. After centrifugation (8000 r/min, 10 min), the precipitate was collected and freeze‑dried to obtain crude CP. A 10 mg/mL solution was prepared by dissolving 100 mg crude CP in 10 mL distilled water, centrifuged at 7000 r/min for 10 min to remove insolubles, and filtered through a 0.45 μm membrane. The solution was loaded onto a DEAE‑52 cellulose column and eluted stepwise with distilled water and 0.1, 0.3, and 0.5 mol/L NaCl. Eluates were monitored by anthrone–sulfuric acid assay; fractions with absorbance >1,0 ühendati, kontsentreeriti, dialüüsiti, külmkuivatati ja kaaluti erinevate polüsahhariidide fraktsioonide saamiseks. Tootlus (Y) arvutati järgmiselt:
Y = (C × V × D) / (m × P)
kus C on puhastatud sihtlahuse polüsahhariidi kontsentratsioon (mg/mL), V on maht (mL), D on lahjendustegur, m on toor-CP mass (g) ja P on toor-CP polüsahhariidisisaldus.

 

1.2.7 Fraktsioonide antioksüdantse toime võrdlus

1.2.7.1 DPPH radikaalide eemaldamine

Järgides Jiangi jt. [17] modifikatsioonidega valmistati värskelt 0,2 mmol/L DPPH töölahus. Fraktsioonilahused kontsentratsiooniga 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 ja 1,0 mg/ml (igaüks 1 ml) segati 2 ml DPPH-ga, segati keerisega ja inkubeeriti pimedas toatemperatuuril 30 minutit. Neeldumist mõõdeti lainepikkusel 517 nm (Ai). Iga testi korrati kolm korda ja C-vitamiin (Vc) sobivates kontsentratsioonides toimis positiivse kontrollina. Puhastuskiirus joonistati kontsentratsiooni sõltuvuses ja arvutati järgmiselt:
DPPH eemaldamine (%)=[1 − (Ai − Aj) / (A0)] × 100
kus Ai on A(2 ml DPPH + 1 ml proovi/Vc), Aj on A(2 ml etanooli + 1 ml proovi/Vc) ja A0 on A(1 ml vett + 2 ml DPPH).

 

1.2.7.2 ABTS-i radikaalide eemaldamine

Järgides Xu et al. [18] modifikatsioonidega segati 1 ml proovi kontsentratsiooniga 0,2–1,0 mg/ml 4 ml ABTS-i lahusega, segati vorteksiga ja inkubeeriti pimedas 6 minutit toatemperatuuril. Neeldumist mõõdeti kolmes korduses lainepikkusel 734 nm. Vc sobivate kontsentratsioonide juures oli positiivne kontroll. Puhastuskiirus joonistati kontsentratsiooni sõltuvuses ja arvutati järgmiselt:
ABTS-i puhastus (%)=[1 − (Ai − Aj) / (A0)] × 100
kus Ai on A(1 ml proovi/Vc + 4 ml ABTS), Aj on A(1 ml proovi/Vc + 4 ml vett) ja A0 on A(1 ml vett + 4 ml ABTS).

 

1.2.8 Polüsahhariidide fraktsioonide struktuurianalüüs

1.2.8.1 Fourier' teisenduse infrapunaspektroskoopia (FTIR)

Järgides Zhang WenChao jt. [19] modifikatsioonidega segati 2 mg eeltöödeldud polüsahhariidi 200 mg kuivatatud KBr-ga, jahvatati ja pressiti graanuliteks. Spektrid koguti vahemikus 400–4000 cm⁻¹ eraldusvõimega 4 cm⁻¹ 32 skaneerimisega.

 

1.2.8.2 Molekulmassi määramine

Pärast Zhang Jiayuani [20] modifikatsioonidega lahustati 5 mg proovi 0,05 mol/L NaCl-s kuni 5 mg/ml, tsentrifuugiti ja filtriti läbi 0,22 μm membraani. Molekulmass määrati HPGPC abil kahe polümeeripõhise veeslahustuva SEC kolonniga (8 mm × 300 mm) järjestikku, detektor: Waters RI; liikuv faas: 0,05 M NaCl; voolukiirus: 0,50 ml/min; kolonni temperatuur: 40 kraadi; süstimine: 30 μL. Kalibreerimiskõverad olid järgmised:
Lg Mp–RT: y=−0,1359x + 9.4523 (R²=0.9974)
Lg Mw–RT: y=−0,1375x + 9.5035 (R²=0.9976)
Lg Mn–RT: y=−0,1368x + 9.4749 (R²=0.9971)
Molekulmassid arvutati vastavalt.

 

1.2.8.3 Monosahhariidide koostis

Järgides Naxin S et al. [21], proove töödeldi ja analüüsiti ioonkromatograafia/HPLC abil. Standardid (5 mg ramnoosi, arabinoosi, galaktoosi, glükoosi, ksüloosi, mannoosi, galakturoonhapet, glükuroonhapet, glükoosamiin-HCl-d, galaktoosamiin-HCl-d; 10 mg fukoosi) lahustati ja viidi 10 ml-ni, seejärel lahjendati mitme kontsentratsioonini. Kromatograafias kasutati Thermo U3000 süsteemi koos Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 kolonniga (4,6 mm × 250 mm, 5 μm); liikuv faas: atsetonitriil:fosfaatpuhver (12 g/l KH2PO4, pH reguleeritud 6,8-ni 2 M NaOH-ga)=17:83 (maht/maht), isokraatne; voolukiirus 0,8 ml/min; sammas 30 kraadi ; tuvastamine 250 nm; süstimine 10 μL.

 

1.2.9 Polüsahhariidide fraktsioonide väsimusevastased katsed

1.2.9.1 Loomade rühmitamine ja manustamine

Eetika heakskiit ei. 2023048. Pärast 3-päevast aklimatiseerumist randomiseeriti 50 hiirt viide rühma (n=10): tühikontroll; positiivne kontroll (shiitake polüsahhariid 300 mg/kg); väikese annuse fraktsioon (150 mg/kg); keskmise annusega fraktsioon (300 mg/kg); suure annuse fraktsioon (600 mg/kg). Fraktsioone ja kontrolle manustati sondiga 15 päeva; hiirtel oli vaba juurdepääs toidule ja veele.

 

1.2.9.2 Ujumiskatse raskusega

Viis tundi pärast viimast sondimist kinnitati iga hiire saba külge pliikaal, mis võrdub 7% kehamassist. Hiired ujusid 60 cm sügavuses paagis 30±2 kraadi juures. Ujumisajaks registreeriti aeg, mis kulub sukeldumisest kuni selle hetkeni, mil pea jäi 10 sekundiks vee alla ilma uuesti katteta.

 

1.2.9.3 Vere uurea lämmastik (BUN)

Pärast ujumist koguti veri orbitaalse siinuse kaudu hepariniseeritud katsutitesse ja tsentrifuugiti 10 minutit kiirusel 3000 p / min. BUN-i mõõdeti rangelt komplekti juhiste järgi.

 

1.2.9.4 Vere laktaat

Seerumit (20 μL) töödeldi vastavalt komplekti juhistele. Neelduvus loeti lainepikkusel 530 nm (teepikkus 1 cm), kusjuures topeltdestilleeritud vesi oli null, ja arvutati laktaadikontsentratsioon.

 

1.2.9.5 Maksa glükogeen

Vahetult pärast vere võtmist eutaniseeriti hiired emakakaela dislokatsiooniga. Maksad lõigati välja, loputati soolalahusega, kuivatati ja 80 mg kude pandi 3 mahuosa leelisega katsutisse (pH 8,0). Proove keedeti 20 minutit, jahutati ja glükogeeni kvantifitseeriti vastavalt komplekti juhistele.

 

1.2.10 Andmete analüüs

Andmeid analüüsiti SPSS 17.1 abil ja esitati kui keskmine ± SD (X±S). Kasutati ühesuunalist ANOVA-d koos dispersiooni homogeensuse testimisega; P < 0,05 loeti statistiliselt oluliseks. Joonised valmistati programmides Origin 2021 ja GraphPad Prism 9.

Kommertsliku tõlke ja rakenduste esiletõstmised

Uute eeliste positsioneerimine: optimeeritud neutraalne Cistanche polüsahhariid (CPN) demonstreeris kahekordset antioksüdantset ja väsimusevastast toimet – pikendas vastupidavust, vähendas BUN-i ja laktaadisisaldust ning suurendas maksa glükogeenisisaldust toetavaid väiteid, nagu "toetab vastupidavust", "aitab vähendada treeningust põhjustatud väsimust" ja "antioksüdantne tugi".

Tootevormingud: segamiseks valmis vastupidavad joogid, geeljoogid, funktsionaalsed kummikommid ja kapslid. Kombineerige CPN elektrolüütide, B-vitamiinide ja madala GI-ga süsivesikutega spordipreparaatide valmistamiseks; või traditsiooniliste Cistanche fenüületanoidglükosiididega sünergiliste "energia + taastamise" SKUde jaoks.

Töötlemisjuhised: AÜE tingimused (20 min, lahusti suhe 20:1, 220 W) on skaleeritavad ja energiasäästlikud; DEAE-52 fraktsioneerimine annab suurema süsivesikute sisalduse ja aktiivsusega plii neutraalse fraktsiooni (CPN), mis võimaldab ühtlast standardimist (nt 39% või rohkem süsivesikuid, HPGPC sõrmejälg bimodaalse Mw-ga).

Vastavus ja põhjendamine: kasutage olemasolevaid in vivo tulemusi struktuuri/funktsiooni väidete põhjendamiseks; laiendada inimeste pilootkatsetega, mis mõõdavad aega kurnatuseni, laktaadi kineetikat ja tajutavat pingutust. Rakendage puhta märgistuse ekstraheerimise ja lahusti avaldused.

Kvaliteedikontroll: võtke vabastamiskriteeriumideks kasutusele FTIR-markeriribad, monosahhariidide suhted (valdav glükoos/mannoos) ja HPGPC molekulmassi profiil. Antioksüdantide testid (DPPH/ABTS) protsessisisese aktiivsuse kontrollina.

 

Autorite seosed ja viited (autoriteetne allikas)

DUAN Jihua1, HAN Haixia2,+, ZHAO Wenyan3, JIA Mingxi2, SUN Jingjing2, ZHOU Jixiang2, SONG Suqin4, ZHU Dongliang3*, BAO Xiaowei2*
(1. Xinjiang Sikai Food R&D Center (Co., Ltd.), Changji, Xinjiang 831100; 2. Toiduteaduse ja farmaatsia kolledž, Xinjiangi Põllumajandusülikool, Urumqi 830052, Hiina; 3. Farmaatsia ja instrumentide testimise instituut, logistikaosakond, Xinjiang Xinjiangi piirkond, Xinjiang205883; 4. Urumqi üldine katsejaam, Xinjiangi põllumajandusteaduste akadeemia, Xinjiang, Urumqi 830052)

Viited
[1] ZHAO Hongting, XIN Guoxiong, GUO Yuan. Cistanchis sinensis’e, traditsioonilise Hiina meditsiini, millel on sama toidu- ja ravimiallikas, uurimistöö. Hiina ravimtaimed, 2025, 56(09): 3316–3329.
[2] YANG MH, CHEN RH, ZHOU X jt. Polüsahhariidide farmakoloogiliste mõjude ja mehhanismide uurimise edusammud. Starch-Stärke, 2024, 76(9–10): 2300168.
[3] MU S, YANG WJ, HUANG G L. Polüsahhariidide antioksüdantne toime ja mehhanismid. Chem Biol Drug Des, 2021, 97(3): 628–632.
[4] ZHANG SS, LIU B, YAN GY jt. Polüsahhariidi keemilised omadused ja väsimusevastane toime. J Food Biochem, 2022, 46(1): e14015.
[5] FU Y, WANG LW, JIANG GCA jt. Var. Li. Foods, 2022, 11(10): 1464.
[6] CHEN Changmao, GAZANG Zhaxi, WANG Jie jt. Cistanchiakise aktiivsete komponentide ja farmakoloogilise mehhanismi uurimise edenemine. Chinese Herbal Medicine, 2025, 56(12): 4464–4477.
[7] WANG Wenli, ZHANG Jinling, WEI Yaning jt. Loodusliku polüsahhariidi ekstraheerimise, puhastamise ja bioaktiivsuse edenemine. Toiduainetööstuse teadus ja tehnoloogia, 2022, 43(22): 470–480.
[8] GONG P, WANG SY, LIU M jt. Seente polüsahhariidide ekstraheerimismeetodid, keemilised iseloomustused ja bioloogiline aktiivsus: miniülevaade. Carbohydr Res, 2020, 494: 108037.
[9] CHEN X, LIU YB, DENG Y jt. Esmane uuring ekstraheerimismeetodite mõju kohta polüsahhariidide omadustele ja aktiivsusele. Molecules, 2025, 30(1): 148.
[10] JIANG Huabin, LIU Lisha, ZHANG Qing jt. Torukujuliste Cistanche fenüületanoidglükosiidide ja polüsahhariidide samaaegne eraldamine ja puhastamine membraanieraldustehnoloogia abil. Toiduteadus ja -tehnoloogia, 2019, 44(07): 229–234.
[11] MAIMAITIAILI Ailadan. Uuring Herba Cistanche polüsahhariidide ekstraheerimise, eraldamise ja puhastamise ning nende in vitro immunoloogilise aktiivsuse kohta. Urumqi: Xinjiangi meditsiiniülikool, 2021.
[12] TENG Liping, MU Long, LUO Feng jt. Meetod toorpolüsahhariidide ekstraheerimiseks Cistanche tubulosast ja selle mõju difenüülradikaali eemaldamisele. Guizhou Agricultural Sciences, 2011, 39(01): 66–68.
[13] BAI Dongwen. Pedicularis'e lille ja Cistanche ekstraktide mõju hipokampusele ja soolestiku mikrobiotale kõrgmäestiku hüpoksia korral. Urumqi: Xinjiangi põllumajandusülikool, 2023.
[14] JING YS, ZHANG SL, LI MS jt. Polüsahhariidide ekstraheerimine, struktuur ja bioaktiivsus. Foods, 2022, 11(14): 2126.
[15] GUO Xiaolei, ZHU Sichao, ZHAI Xufeng jt. Antroonsulfaadi ja fenoolsulfaadi meetodite võrdlus Ganoderma polüsahhariidide määramiseks. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2010, 28(09): 2000–2002.
[16] WANG Senzheng, SUN Yongfang, ZHOU Ye jt. Wen Curcuma polüsahhariidi ekstraheerimise, struktuuri iseloomustuse ja mõju funktsionaalsele kõhukinnisusele optimeerimine. Loodustoodete uurimis- ja arendustegevus: 1.–17.
[17] JIANG Zhixuan, CAI Zifu, DONG Sisi jt. Viigikaktuse polüsahhariidide keemiline modifitseerimine ning antioksüdantse ja hüpoglükeemilise toime analüüs. Toiduainetööstuse teadus ja tehnoloogia: 1.–20. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025020006.
[18] XU Qing, YANG Jiang, LI Anding. Erinevat päritolu kannatusviljade peamiste funktsionaalsete komponentide ja antioksüdantse toime võrdlus. Kaasaegne toiduteadus ja -tehnoloogia, 2023, 39(08): 94–102.
[19] ZHANG CW, ZOU YF, ZOU Y jt. Paeoniae Radix alba polüsahhariidi ekstraheerimine ultraheli abil: ekstraheerimise optimeerimine, struktuuri iseloomustus ja antioksüdantide mehhanism in vitro. Int J Biol Macromol, 2024, 268: 131816.
[20] Zhang Jiayuan. Nõgese polüsahhariidide eraldamine ja puhastamine, struktuuri tuvastamine ja hüpoglükeemiline toime. Xi'an: Shaanxi teaduse ja tehnoloogia ülikool, 2021.
[21] SUN NX, ZHAO YN, YIN M Y. Maitake polüsahhariidide ekstraheerimine, puhastamine, struktuur ja bioaktiivsus: ülevaade. J Food Meas Charact, 2023, 17(6): 6200–6213.
[22] WAN Yue, QI Jiying, ZENG Hong, et al. Optimization of ultrasound-assisted extraction of shiitake polysaccharides by response surface methodology. Biotechnology Bulletin, 2015, 31(01): 79–85.
[23] LI Li, ZHANG Sai, HE Qiang jt. Reageerimispinna metoodika rakendamine katse kavandamisel ja optimeerimisel. Laboratory Research and Exploration, 2015, 34(08): 41–45.
[24] MA Qvhuan, SHI Xiaofeng, SHEN Wei jt. Seedermänni okaste polüsahhariidide ekstraheerimise optimeerimine vastuse pinnaanalüüsi abil. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 33(03): 1106–1110.
[25] ZHAO Jinsong, PENG Jingjing, ZHANG Liang jt. Võrdlev uuring baijiu kõrvalmaitsete parandamise kohta erinevate aktiivsöe abil. China Brewing, 2025, 44(09): 179–186.
[26] WU Huiqiong, WU Hailian, XIAO Nan jt. Nanokristallilise tselluloosi/maisitärklise komposiitosakestega sünergistlikult stabiliseeritud Mosla chinensise lenduvate õlide korjamisemulsioonid. Toiduainetööstuse teadus ja tehnoloogia: 1.–27. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025060255.
[27] WU Shuang. Fukoidaani mõju valgupõhiste Pickeringi emulsioonide stabiilsusele. Dalian: Daliani polütehniline ülikool, 2022.
[28] LIN Ying, ZHENG Meixia, CHEN Changmei jt. Ultraheli abil kahefaasiline jasmiini musta tee polüsahhariidide ekstraheerimine ja antioksüdantne toime. Chemistry and Bioengineering, 2025, 42(09): 35–42.
[29] WANG Yihan, XIE Qingyun, TENG Jianwen jt. Isoleerimise ja puhastamise mõju Tremella polüsahhariidi struktuurile ja in vitro lipiidide taset langetavale toimele. Toiduainetööstuse tehnoloogia, 2025, 46(05): 81–90.
[30] BAN Shidong, ZONG Chunyang, WANG Xiaodan jt. Polygonatum'i Lactobacillus plantarum'i fermentatsiooni optimeerimine, et suurendada polüsahhariidide saagist ja in vitro prebiootilist aktiivsust. Toiduainetööstuse teadus ja tehnoloogia: 1.–18. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025030047.
[31] MO Yunfeng, CHEN Zixuan, PENG Junying jt. Kuivatamisprotsesside mõju kõrvitsapulbri omadustele ja antioksüdantse võimekusele. Toiduainetööstuse teadus ja tehnoloogia: 1.–19. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025040072.