RNA M6 A lugeja YTHDF2 kontrollib NK-rakkude kasvajavastast ja viirusevastast immuunsust, 6. osa

Metastaatilise melanoomi mudel ja MCMV väljakutse

B16F10 rakke (105) süstiti hiirtele iv. 14 päeva pärast süstimist surmati hiired surmajärgseks analüüsiks. Metastaatilisi sõlmesid kopsus analüüsiti makroskoopiliselt ja loendati. B16F10 rakuliini tarnis Hua Yu (City ofHope, Los Angeles, CA). Ythdf2ΔNK ja Ythdf2WT hiired nakatati Smithi tüve MCMV (2,5 × 104 PFU) ip süstiga, mis osteti Ameerika tüübikultuuride kollektsioonist (VR{11}}). Perifeersed vereproovid saadi submandibulaarse punktsiooniga päeval 0, 4 ja 7 pärast nakatumist.

Kopsu metastaasisõlmed viitavad sõlmedele, mille moodustavad teistest kohtadest pärit pahaloomulised kasvajarakud, mis migreeruvad vere või lümfisüsteemi kaudu kopsudesse. Paljude patsientide jaoks on see kopsuvähi tavaline ilming.

Kuigi kopsu metastaaside sõlmed kujutavad endast ohtu patsientide füüsilisele tervisele, puudub selle ja mälu vahel otsene seos. Seetõttu peaksime aktiivselt silmitsi seisma kopsuvähi ja kopsu metastaasisõlmede väljakutsetega ning mitte laskma negatiivsetel emotsioonidel ja ärevusel mõjutada meie füüsilist ja vaimset tervist.

Samal ajal saame mälu säilitada ja parandada mõne positiivse meetodi abil. Näiteks tehke mälutreeningut, nagu matemaatilised arvutused, lugemine, muusika kuulamine, mängimine jne. Lisaks võib heade eluharjumuste järgimine, nagu regulaarne liikumine, piisav uni, tervislik toitumine jne. parandada meie mälu.

Kõige tähtsam on säilitada positiivne suhtumine. Ükskõik, milliste raskustega silmitsi seisate, peate uskuma oma tugevusse ja närvisüsteemi paindlikkusesse ning positiivsete kohanduste ja reageeringute kaudu saate lõpuks raskustest edukalt üle.

Lühidalt öeldes, kuigi metastaatilised sõlmed kopsudes kujutavad endast ohtu füüsilisele tervisele, ei ole need mäluga otseselt seotud. Peaksime sellele positiivselt vastu astuma ning säilitama ja parandama oma mälu, kohandades oma elustiili ja säilitades hea suhtumise. On näha, et peame parandama mälu ja Cistanche deserticola võib oluliselt parandada mälu, sest Cistanche deserticola suudab reguleerida ka neurotransmitterite tasakaalu, näiteks tõsta atsetüülkoliini ja kasvufaktorite taset. Need ained on mälu ja õppimise jaoks väga olulised. Lisaks võib Cistanche deserticola parandada ka verevoolu ja soodustada hapniku kohaletoimetamist, mis tagab aju piisava toitainete ja energia kättesaamise, parandades seeläbi aju elujõudu ja vastupidavust. On näha, et peame parandama mälu ja Cistanche deserticola võib oluliselt parandada mälu, sest Cistanche deserticola suudab reguleerida ka neurotransmitterite tasakaalu, näiteks tõsta atsetüülkoliini ja kasvufaktorite taset. Need ained on mälu ja õppimise jaoks väga olulised. Lisaks võib Cistanche deserticola parandada ka verevoolu ja soodustada hapniku kohaletoimetamist, mis tagab aju piisava toitainete ja energia kättesaamise, parandades seeläbi aju elujõudu ja vastupidavust.

Mälu suurendamiseks klõpsake valikul Tea toidulisandeid

Mõõtke viiruskoormus perifeerses veres, põrnas ja maksas, DNA eraldati, kasutades QIAGEN DNeasy vere- ja koekomplekti qPCR analüüsi jaoks. Kasutati järgmisi praimereid: MCMV-IE1, 59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (edasi) ja MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (tagurpidi).

In vivo hiire ravi IL-ga-15

Hiire in vivo ravimiseks IL-15-ga süstiti Ythdf2ΔNK ja Ythdf2WT hiirtele 5 päeva jooksul 2 µg ip rekombinantset inimese IL-15 (kat. nr 745101; National Cancer Institute). Töödeldud ja kontrollhiired surmati seejärel voolutsütomeetriliseks analüüsiks.

Voolutsütomeetria

Üherakulised suspensioonid valmistati Ythdf2ΔNK ja Ythdf2WT hiirte BM-st, verest, põrnast, maksast ja kopsudest, nagu eelnevalt kirjeldatud (Wang et al., 2018b). Voolutsütomeetria analüüs ja rakkude sortimine viidi läbi vastavalt LSRFortessa X-20 ja FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences) abil.

Andmeid analüüsiti NovoExpressi tarkvara (Agilent Technologies) abil.

Kasutati järgmisi fluorestsentsvärviga märgistatud antikehi firmadelt BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen või Cell Signaling Technology: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5) ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7), CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), gransüüm B (QA16A02), perforiin (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226 (TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), anneksiin V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) ja Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), fosfo-S6 valk ribos ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) ja phospho-Stat5 (Tyr694, #9539).

NK-rakkude proliferatsiooni hindamiseks märgistati rakud 5 uM CTV-ga (Invitrogen) vastavalt tootja protokollile enne nende ülekandmist retsipienthiirtele. Ki67, Tbeti ja Eomesi rakusisene värvimine viidi läbi Foxp3/Transcription Factor Staining Kit (eBioscience) abil fikseerimise ja permeabiliseerimise teel.

Fosforüülitud valkude tuvastamiseks töödeldi puhastatud põrna NK-rakke 1 tund inimese rekombinantse IL-15-ga (50 ng/ml) ja fikseeriti seejärel Phosflow Fix Buffer I-ga, millele järgnes permeabiliseerimine Phosflow Perm Buffer III-ga (BD Biosciences) ja värvimine. antikehad.

Adoptiivne rakkude ülekanne

Et hinnata Ythdf2 puudulikkuse mõju NK-rakkude küpsemisele, kanti Rag2-/-Il2rg-/-hiirtele CD45.1 või Ythdf2ANK CD45.2 hiirte segu vahekorras 1:1 5 × 106 BM rakku. Retsipientide lahustumist hinnati voolutsütomeetriaga 8 nädalat pärast siirdamist.

Lümfopeeniast põhjustatud homöostaatilise proliferatsiooni katsete jaoks viidi võrdne arv puhastatud põrna NK-rakke CD45.1 või Ythdf2ΔNK CD45.2 hiirtelt Rag2−/−Il2rg−/− hiirtele, millele järgnes ülekantud WT ja Ythdf2ΔNK NKleen-NK-rakkude suhtelise protsendi hindamine. Rag2−/−Il2rg−/− retsipientide voolutsütomeetria abil näidatud ajahetkedel.

Metastaatilise melanomamudeli puhul süstiti Rag2−/−Il2rg−/− hiirtele 106 IL-2-laiendatud NK-rakku Ythdf2ΔNK või Ythdf2WThiirtelt. 1 päev hiljem süstiti hiirtele iv B16F10 rakke (105). 14 päeva pärast süstimist surmati hiired surmajärgseks analüüsiks. Mõnes katses märgistati rakud CTV-ga (5 uM, Invitrogen), et jälgida rakkude proliferatsiooni enne ülekandmist.

In vivo inimkaubanduse test

NK-rakkude liikumise tuvastamiseks BM-st perifeersesse verre süstiti C57BL/6 hiirtesse 1 µg iv APC-märgistatud CD45-vastast antikeha. Kaks minutit pärast antikeha süstimist eutaniseeriti hiired kohe ja BM-rakud koguti voolutsütomeetria jaoks pärast rakkude värvimist CD3 ja NK1.1 antikehadega. Parenhümaalsed NK-rakud tuvastati CD45 värvimise puudumisel, samas kui sinusoidsed NK-rakud tuvastati CD45 märgistuse olemasolu järgi. Seetõttu näitab sinusoidide (CD45+) ja parenhüümsete piirkondade (CD45−) NK-rakkude suhe NK-rakkude liikumist BM-i toperifeersest verest püsiseisundis.

Reaalajas RT-qPCR ja immunoblotanalüüs

RNA eraldati RNeasy Mini komplekti (QIAGEN) abil ja seejärel pöördtranskribeeriti cDNA-ks PrimeScript RT reaktiivikomplektiga koos gDNA kustutuskummiga (Takara Bio) vastavalt tootja juhistele. mRNA ekspressioonitasemeid analüüsiti, kasutades SYBRGreen PCR Master Mixi ja QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR süsteemi (mõlemad firmalt Thermo Fisher Scientific). Praimeri järjestused on loetletud tabelis S1.

Immunoblotanalüüs viidi läbi standardsete protseduuride kohaselt, nagu eelnevalt kirjeldatud (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). Kasutati järgmisi antikehi: METTL3 (kat. nr 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (kat. nr.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (kat. nr 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (kat. nr RN123PW; MBL), YTHDF3 (kat. nr.{11}}AP; Proteintech), ALKBH5 (kat. nr ab195377; Abcam), FTO (kat. nr ab124892; Abcam), MDM2 (kat. nr 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (kat. nr PA5-29949; Invitrogen) ja -aktiin (kat. nr {{20) }}Ig; Proteintech).

siRNA knockdowni test

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90%, mõõdetuna voolutsütomeetriaga. Geneknockdowni efektiivsus määrati qPCR ja immunoblotanalüüsiga. 3 päeva pärast transfektsiooni analüüsiti rakkude apoptoosi ja proliferatsiooni voolutsütomeetria abil, nagu ülalpool kirjeldatud.

Lutsiferaasi reporteri test

Ythdf2 promootori piirkond vahemikus –2,000 bp kuni +100 bpof TSS-i amplifitseeriti hiire NK-rakkudest ja klooniti apGL4-Basic lutsiferaasi reportervektorisse (Promega), et genereerida apGL{ {5}}Ythdf2 reporterplasmiid. ATCC-st ostetud HEK293T rakud kotransfekteeriti pGL4-Ythdf2 reporterplasmiididega, samuti STAT5a või STAT5b üleekspressiooniplasmiididega või anempty vektoriga koos pRL-TK Renilla reporterplasmiidiga (Promega), et normaliseerida transfektsiooni efektiivsust. Rakud koguti lüüsimiseks 24 tundi pärast transfektsiooni ja lutsiferaasi aktiivsus kvantifitseeriti fluorimeetriliselt Dual-Luciferase Systemiga (Promega). Praimeri järjestused Ythdf2 promootori ja STAT5a ja STAT5b üleekspressiooniplasmiidide kloonimiseks on loetletud tabelis S1.

ChIP analüüsid

ChIP testid viidi läbi kasutades Pierce Magnetic ChIP komplekti (kat. nr 26157; Thermo Fisher Scientific) vastavalt tootja juhistele. Lühidalt, 5 × ristseotud DNA-valgu komplekside sadestamiseks kasutati eraldi võrdses koguses ananti-anti-fosfo-Stat5 (Tyr694, kat. nr 9351; Cell Signaling Technologies) või vastavat normaalset küüliku IgG-d. 106 puhastatud hiire primaarset NK-rakku, mida töödeldi IL-15-ga (50 ng/ml) 1 tund. Pärast ristsidumise ümberpööramist testiti näidatud antikehaga immunosadestatud DNA-d qPCR abil. Kõikide praimerite järjestused on loetletud tabelis S1.

Ex vivo tsütotoksilisuse test

NK-rakkude ex vivo tsütotoksilisust hinnati standardsete 51Crrlease testidega. Hiire lümfoomi rakuliinide RMA-S (MHC klass Ideficient) ja RMA (MHC klass I piisav) rakke, Andre´Veillette'i (McGilli ülikool, Montreal, Kanada) kingitus, kasutati täherakke. Hiiri töödeldi polüinosiin:polütsütidüülhappe [polü(I:C) ip süstimisega; 200 µg/hiirte kohta] 18 tundi. Polü(I:C)-aktiveeritud NK-rakud eraldati põrnast EasySepMouse NK Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies) abil. Puhastatud NK-rakke kasvatati koos sihtrakkudega vahekorras 5:1, 2,5:1 ja 1,25:1 IL-2 (50 U/ml) juuresolekul.

m6A-järg

Puhastatud põrna NK-rakke paljundati IL-2 (1,000 U/ml, kat. nr. Bulk Ro 23-6019; National Cancer Institute) in vitro 7 päeva jooksul. Kogu RNA eraldati TRIzol reagendiga (Thermo FisherScientific) 50 miljonist IL-2-paisutatud NK-rakust. Polüadenüülitud RNA-d rikastati täiendavalt kogu RNA-st, kasutades Dynabeads mRNA puhastuskomplekti (Invitrogen). mRNA proovid fragmenteeriti RNA fragmenteerimisreaktiividega (Invitrogen) 100-nt-pikkusteks fragmentideks.

Fragmenteeritud mRNA-d (5 µgmRNA) kasutati m6A immunosadestamiseks, kasutades m6Aantikeha (202003; Synaptic), järgides Magna MeRIP m6A komplekti (Merck Millipore) standardprotokolli. RNA-d rikastati RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) abil raamatukogu genereerimiseks KAPA RNA HyperPrep Kitiga (Roche). Sekveneerimine viidi läbi City of Hope genoomika rajatises Illumina HiSeq 2500 masinas ühe lugemise 50-bp režiimiga. Järjestuse lugemised kaardistati hiiregenoomiga, kasutades tarkvara HISAT2 v101 (Kim et al., 2015).

Immunosadestamise ja sisendraamatukogude kaardistatud lugemised pakuti R-paketi exomePeak abil (Meng et al., 2014). m6Apeaks visualiseeriti tarkvaraga Integrative Genomics Viewer (http://www.igv.org). M6A-siduvat motiivi analüüsisid MEME (https://meme-suite.org) ja HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Nimetatud piigid märgiti geeniarhitektuuriga lõikumise teel, kasutades Rpackage ChIPseekerit (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (muutus kordades)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 miljonit IL-2-paisutatud NK-rakku koguti ja pesti kaks korda külma PBS-ga ning rakusade lüüsiti 2 mahuosa lüüsipuhvriga (10 mM Hepes, pH 7,6, 150). mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM ditiotreitooli, 1:100 proteaasi inhibiitori kokteili [Thermo Fisher Scientific] ja 400 U/ml SUPERaasi-in RNaasi inhibiitorit [Thermo Fisher Scientific]).

Lüsaati inkubeeriti jääl 5 minutit ja tsentrifuugiti 15 minutit, et lüsaat puhastada. Sisendina salvestati kümnendik rakulüsaadi mahust. Ülejäänud rakulüsaati inkubeeriti 5 µg anti-YTHDF2-ga (kat. nr RN123PW; MBL), mis oli ühendatud Protein A magnethelmestega (kat. nr 10001D; Invitrogen) 4 kraadi juures 2 h kergelt pöörates. Seejärel pesti helmeid viis korda 1 ml jääkülma pesupuhvriga (50 mM HEPES, pH 7,6, 200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM ditiotreitooli ja 200 U/ml RNaasi inhibiitor).

Immunosadestatud proovid lõigati proteinaas K-ga pesupuhvris, millele oli lisatud 1% SDS ja 2 mg/ml proteinaas K (ThermoFisher Scientific), mida inkubeeriti loksutades kiirusel 1200 p/min 55 kraadi juures 1 tund. Kogu RNA ekstraheeriti nii sisend- kui ka immunosadestatud RNA-st, lisades 5 vol TRIzol reagenti, millele järgnes Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

cDNA raamatukogu genereeriti KAPA RNA HyperPrep Kitiga (Roche) ja sekveneeriti Illumina HiSeq 2500 platvormil. Immunosadestamise ja sisendraamatukogudega kutsumise tipptulemused genereeriti R-paketiga RIPSeeker (Li et al., 2013). HOMERit kasutati andmete jaotuse motiivide leidmiseks piigipiirkondades. Nimetatud piigid märgiti geeni ja transkripti arhitektuuriga lõikumise teel, kasutades ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

mRNA stabiilsuse test

Ythdf2ΔNK ja Ythdf2WT hiirte puhastatud põrna NK-rakke kasvatati IL-15-ga (50 ng/ml). 3 päeva pärast kultiveerimist töödeldi rakke näidatud aja jooksul aktinomütsiin D-ga (5 ug/ml, kat. nr A9415; Sigma). Töötlemata rakke kasutati 0 tunni pärast. Rakud koguti näidatud ajal ja kogu RNA ekstraheeriti rakkudest qPCR jaoks. MRNA poolväärtusaeg arvutati Weng jt (2018) poolt eelnevalt kirjeldatud meetodil. Praimeri järjestused on loetletud tabelis S1.

Interneti-andmebaasi analüüs

Ythdf2 koespetsiifilise ekspressiooni analüüsimiseks kasutasime veebiressurssi BioGPS (//biogps.org). RNA-seqdata komplektid pärinesid GEO-st registreerimisnumbrite all. GSE106138, GSE113214 ja GSE25672. RNA-seq analüüside normaliseeritud andmed eksporditi ja geeniekspressiooni z-skoor visualiseeriti funktsiooniga Heatmap.2 gplots Rlibrarys.

Statistika

Sidumata Studenti t-testid (kahe sabaga) viidi läbi tarkvara GraphPad Prism abil. Ühesuunaline või kahesuunaline ANOVA viidi läbi, kui võrreldi kolme või enamat sõltumatut rühma. P väärtused kohandati mitmekordseks võrdluseks, kasutades Holm-Sˇ´ıdaki protseduuri. P < 0.05 peeti oluliseks. *, P < {{10}}.05; **, P < 0,01; ja ***, P < 0,001.

Veebipõhine lisamaterjal

Joonisel S1 on näidatud YTHDF2 valgu tasemed immuunrakkudes, sealhulgas NK-rakud vastuseks IL-15 stimulatsioonile, MCMV infektsioonile ja kasvaja progresseerumisele; hiirte genereerimine Ythdf2 NK-raku-spetsiifilise deletsiooniga. Joonisel S2 on näidatud viiruse tiitrid MCMV-ga nakatunud hiirte põrnas ja maksas ning Ly49H+ ja/või Ly49D+ NK-rakkude protsent ja absoluutarv MCMV-ga nakatunud hiirtel. Joonisel S3 on näidatud Ythdf2WT ja Ythdf2ANK hiirte NK-rakkude aktiveerivate ja inhibeerivate retseptorite proliferatsioon, ellujäämine, küpsemine ja ekspressioon. Joonis S4 näitab YTHDF2 ekspressiooni reguleerimist IL-15-STAT5 signaalide kaudu ja IL-15 retseptorite komponentide ekspressiooni, PI3K-AKT rada ja MEK-ERK rada Ythdf2WT ja Ythdf2ΔNK NK-rakkudes hiired. Joon. S5 näitab transkriptsiooniga hõlmatud RNA-seq, m6A-seq ja RIP-seq analüüsid NK-rakkudes. Tabelis S1 on loetletud uuringus kasutatud praimerid.

Andmete kättesaadavus

RNA-seq, m6A-seq ja RIP-seq andmed deponeeriti riiklikus biotehnoloogia teabekeskuses GEO registreerimisnumbri all. GSE174027. Ülejäänud andmed, mis toetavad selle uuringu järeldusi, on nõudmisel saadaval vastavatelt autoritelt.

Tänuavaldused

Seda tööd toetasid riiklikud terviseinstituudid (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 ja CA210087), leukeemia ja lümfoomiühing (1364-19), California regeneratiivse meditsiini instituut ({{DISC2COVID) 9}}) ja Breast Cancer Alliance 2021 Exceptional Project Award. Seda tööd toetas osaliselt ka USDAauhind (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Autorite panused: S. Ma, J. Yu ja MA Caligiuri kavandasid ja kujundasid projekti. S. Ma, J. Yan, J. Zhang ja J. Yu viis läbi katseid ja/või andmeanalüüse. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun ja J. Chen aitasid kaasa reaktiivide ja materiaalse toe loomisele. S. Ma, J. Yu, J. Chen ja MA Caligiuri kirjutasid, retsenseerisid ja/või muutsid paberit. Kõik autorid arutasid tulemusi ja kommenteerisid käsikirja.

Avalikustamine: J. Chen teatas Genovel BiotechCorp. väljaspool esitatud tööd ja on ettevõtte Genovel Biotech Corp. teaduslik asutaja ja rassi onkoloogia teaduslik nõustaja. Teistest avalikustamistest ei teatatud.

Viited

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill ja LL Lanier. 2002. Tsütomegaloviiruse otsene äratundmine NK-rakkude retseptorite aktiveerimise ja inhibeerimise kaudu. Teadus. 296:1323–1326.

2. Ayala, YM, T. Misteli ja FE Baralle. 2008. TDP-43 reguleerib retinoblastoomi valgu fosforüülimist tsükliin-sõltuva kinaasi 6 ekspressiooni represseerimise kaudu. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 105:3785–3789.

3. Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han jt. 2017. Promootoriga seotud METTL3 säilitab müeloidse leukeemia m6A-sõltuva translatsioonikontrolli abil. Loodus. 552:126–131.

4. Becknell, B. ja MA Caligiuri. 2005. Interleukiin-2, interleukiin-15 ja nende roll inimese loomulikes tapjarakkudes. Adv. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim ja RA de Bruin. 2013. Rakutsükli transkriptsiooni kontroll G1 ja S faaside ajal. Nat. Rev Mol. Cell Biol. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath ja LL Lanier. Immunoloogilise genoomi projekti konsortsium. 2012. Looduslike tapjarakkude identiteedi ja aktiveerimise molekulaarne määratlus. Nat. Immunol. 13:1000–1009.

7. Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D. Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein ja MA Caligiuri. 1994. Interleukiin (IL) 15 on uudne tsütokiin, mis aktiveerib inimese loomulikke tapjarakke IL-2 retseptori komponentide kaudu. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8. Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann ja MA Caligiuri. 1997. Interleukiini-15 potentsiaalne roll inimese loomulike tapjarakkude ellujäämise reguleerimisel.J. Clin. Investeeri. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth ja L. Martinet. 2014. Loodusliku tapjarakkude aktiveerimise molekulaarsed mehhanismid vastuseks raku stressile. Cell DeathDiffer. 21:5–14.

10. Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H. Wang, L. Yi jt. 2016. EGFR-CAR NK rakkude ja onkolüütilise herpes simplex viiruse 1 kombineeritud ravi rinnavähi aju metastaaside korral.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com