Kurkumiini derivaadi J147 inhibeeriv toime melanogeneesile ja melanosoomi transpordile, hõlbustades ERK-vahendatud MITF-i lagunemist, 1. osa

Tunnustatud on kurkumiini ja keemiliselt modifitseeritud kurkumiini (CMC) terapeutilist kasutamist melanogeneesi ja türosinaasi aktiivsuse pärssimiseks. J147 on kurkumiini modifitseeritud versioon, millel on suurepärane biosaadavus ja stabiilsus. Siiski puuduvad aruanded J147 mõju kohta pigmentatsioonile in vitro ja in vivo. Oma uuringutes uurisime J147-ravi hüpopigmentaarset mõju melanotsüütidele ja uurisime selle aluseks olevat mehhanismi. Käesolevad uuringud näitasid, et J147 pärssis nii basaalset kui ka -MSH-indutseeritud melanogeneesi, samuti vähendas melanotsüütide dendriidi pikenemist ja melanosoomi transporti. J147 mängis neid rolle peamiselt ekstratsellulaarse signaaliga reguleeritud proteiinkinaasi (ERK) raja aktiveerimise kaudu. Pärast aktiveerimist põhjustas see MITF-i lagunemise ja vähendas veelgi türosinaasi, TRP-1, TRP-2, Myosin Va, Rab27a ja Cdc42 ekspressiooni, pärssides lõpuks melaniini sünteesi ja melanosoomi transporti. Lisaks demonstreeriti J147 hüpopigmentaarset toimet in vivo sebrakala mudelil ja UVB-indutseeritud hüperpigmentatsiooni mudelil pruunidel merisigadel. Meie leiud näitasid ka, et J147 ei näidanud in vitro ega in vivo tsütotoksilisust. Kokkuvõttes kinnitasid need andmed, et J147 võib osutuda üsna kasulikuks ohutuma loodusliku nahavalgendajana.

Cistancheon ka funktsioonsoodustades kollageeni tootmist, mis võib suurendada naha elastsust ja läiget ning aidata parandada kahjustatud naharakke. CistancheFenüületanooli glükosiididomavad olulist allareguleerivat mõjutürosinaasaktiivsus ning mõju türosinaasile on konkureeriv ja pöörduv inhibeerimine, mis võib anda teadusliku aluse selle arendamiseks ja kasutamiseks.valgendavad koostisosadCistanche'is. Seetõttu on tsistansil naha valgendamisel võtmeroll. See võibpärsib melaniini tootmistvärvimuutuse ja tuhmumise vähendamiseks; ja soodustada kollageeni tootmistparandada naha elastsustja sära. Tistanche'i nende mõjude laialdase tunnustamise tõttu on paljudnaha valgendaminetooted on hakanud infundeerima taimseid koostisosi, nagu Cistanche, et rahuldada tarbijate nõudlust, suurendades seeläbi Cistanche'i kaubanduslikku väärtust nahka valgendavates toodetes. Kokkuvõttes on tsistanši roll naha valgendamisel ülioluline. Selle antioksüdantne toime ja kollageeni tootv toime võivad vähendada värvimuutust ja tuhmust, parandada naha elastsust ja läiget ning saavutada seeläbi valgendava efekti. Samuti näitab Cistanche laialdane kasutamine nahka valgendavates toodetes, et selle rolli kaubanduslikus väärtuses ei saa alahinnata.

Märksõnad: J147, hüpopigmendiefektid, melanosoomi transport, ERK rada, MITF-i lagunemine

Valgendamiseks klõpsake valikul Cistanche Tubulosa

Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

SISSEJUHATUS

Naha pigmentatsioon sõltub nii melaniini sünteesist kui ka jaotumisest epidermise kihis. Melaniini toodetakse peamiselt melanotsüütide tuuma ümber ja seda hoitakse melanosoomides (Tian et al., 2021). Pärast küpsemist migreerusid melanosoomid mööda mikrotuubuleid ja aktiini filamente rakkude dendriidiotsadesse ja lõpuks naaberkeratinotsüütidesse, et lõpetada jaotusprotsess (Beaumont et al., 2011; Ohbayashi ja Fukuda, 2012). Normaalses füsioloogilises seisundis kaitseb melaniin inimese nahka ultraviolettkiirguse (UV) kahjustuste, toksiliste kemikaalide ja muude keskkonnategurite eest (Slominski et al., 2004; Yousaf et al., 2020). Kuid liigne tootmine ja akumuleerumine kutsuvad esile hüperpigmentatsiooni ja on seotud nahahaigustega, nagu põletikujärgne melanoderma, melasma ja päikesekiirgus, mis põhjustab märkimisväärset psühhosotsiaalset koormust (Pillaiyar et al., 2017). Seetõttu on vaja välja töötada tõhusad ja ohutud nahka valgendavad ained.

Viimastel aastatel on melaniini rakubioloogia muutunud laiemaks uurimisvaldkonnaks ning välja on selgitatud mitu olulist melanogeneesi ja melanosoomi transporti kaasaaitavat valku, mis on aidanud tuvastada melaniini sünteesi inhibiitoreid. Türosinaas on eranditult vajalik melanogeneesiks ja türosinaasi katalüütilise toime pärssimine on kõige levinum meetod melaniini tootmise vähendamiseks (D'Mello et al., 2016). Mitmed tuntud türosinaasi inhibiitorid, sealhulgas arbutiin ja kojiinhape, on juba kosmeetiliste lisanditena välja töötatud (Ding et al., 2020). KIF5b ja Rab27A-Melanophilin-Myosin Va kompleks aitavad kaasa melanosoomi väljapoole transportimisele (Ohbayashi ja Fukuda, 2012; Noguchi et al., 2014). Cdc42 reguleerib dendriidi pikenemist, mis on melanosoomi ülekande jaoks hädavajalik (Luo, 2000). Nende ülaltoodud valkude inhibeerimine võib märkimisväärselt pärssida melanosoomi transporti, mis on oluline mehhanism nahka valgendavate ainete väljatöötamiseks. Mikroftalmiaga seotud transkriptsioonifaktor (MITF) on melanogeneesi peamine transkriptsioonifaktor. Lisaks reguleerib MITF ka melanosoomi transporti, indutseerides Rab27a ja Cdc42 ekspressiooni (Noguchi et al., 2016). Pigmentatsioonis osalevad mitmed signaalirajad, reguleerides MITF-i ekspressioonitaset. cAMP proteiinkinaasi A (PKA) aktiveerimine stimuleerib pigmentatsiooni cAMP vastuselementi siduva valgu (CREB) sõltuva MITF-i ekspressiooni ülesreguleerimise kaudu (Rodríguez ja Setaluri, 2014). Seevastu ekstratsellulaarse signaaliga reguleeritud proteiinkinaasi (ERK) aktiveerimine pärsib melanogeneesi, kiirendades MITF-i lagunemist (Lv et al., 2020a). On välja töötatud arvukalt melanogeenseid aineid, mis on suunatud türosinaasi aktiivsusele, melanosoomi ülekandele või melanogeensusega seotud signaaliradadele. Kuid vähesed inhibiitorid läbisid in vivo uuringud ja andsid häid tulemusi (Pillaiyar et al., 2017).

Kurkumiin on diarüülheptanoidne ühend, mis on eraldatud Curcuma longa (Zingiberaceae) risoomist ja mida kasutatakse toiduainetes kollase maitseaine või pigmendina (Zheng J. et al., 2018). Uuringud on näidanud selle erinevaid füsioloogilisi funktsioone, sealhulgas põletikuvastast, antioksüdatiivset, amüloidivastast ja kasvajavastast toimet (Liu et al., 2016; Zheng Y. et al., 2018). Peale nende inhibeerib kurkumiin türosinaasi aktiivsust ja pärsib melanogeneesi melanotsüütides (Lee et al., 2010; Tu et al., 2012). Kuid kurkumiini halb biosaadavus piirab selle kasutamist (Karthikeyan et al., 2020). Selle probleemi lahendamiseks töötatakse välja J147 kurkumiini derivaadi tugeva ühendina, millel on suurem stabiilsus ja biosaadavus (Li et al., 2020). J147-l on neuroprotektiivne toime ja see on praegu Alzheimeri tõve I faasi kliinilistes uuringutes. Siiski pole ikka veel ühtegi aruannet J147 mõju kohta pigmentatsioonile in vitro ja in vivo.

MATERJALID JA MEETODID

Reaktiivid

J147 (J302241), -MSH (M118985) ja seene türosinaas (T128536) saadi firmast Aladdin (Shanghai, Hiina). Saime antikehad Myosin Va (sc-365986), KIF5b (sc-133184), GP100 (sc-393094), Cdc42 (sc-8401), Rab27a (sc{{) 13}}), p-JNK (sc-6254), JNK (sc-7345), p-p38 MAPK (sc-166182) ja p38 MAPK (sc-398546) Santa Cruzist (CA, USA). MITF (97800), p-MEK (2338), MEK (4694), p-ERK (4370) ja ERK (4695) vastased antikehad saadi ettevõttest Cell Signaling Technology (MA, USA). Türosinaasi (ab180753), TRP-1 (ab235447), TRP-2 (ab221144), tsütokeratiini (ab7753) ja S100 (ab133519) vastased antikehad saadi ettevõttelt Abcam (Cambridge, UK). p38 inhibiitor SB203580 (S1863), ERK inhibiitor PD98059 (S1805), BCA valgu analüüsi komplekt (P0012), rakulüüsi puhver (P0013) ja -aktiin (AF5001) saadi firmast Beyotime (Shanghai, Hiina). RT-qPCR komplektid (RR036A) osteti ettevõttelt Takara Biomedical Technology (Peking, Hiina).

Rakukultuur

MTT analüüs

Rakkude elujõulisust uuriti MTT testiga (Yun et al., 2020). Lühidalt öeldes külvati rakud 96-süvendiga plaatidele ja töödeldi J147-ga (1–8 μM) 48 tundi. Seejärel pesti rakke PBS-ga ja asendati MTT lahusega (20 μL). Pärast täiendavat 4-tunnist inkubeerimist eemaldati supernatandi lahus ja igasse süvendisse lisati DMSO (200 μL). Lõpuks määrati optiline neeldumine 570 nm juures.

Melaniini sisalduse mõõtmine

Rakud tihedusega 2 × 105 rakku/ml külvati 6-süvendiga kultiveerimisplaatidele. Pärast 24-tunnist inkubeerimist kultiveeriti rakke erinevate J147 annustega (1, 2, 4 μM) ja -MSH (60 nM) stimulatsiooniga või ilma. Pärast 48-tunnist töötlemist rakud koguti ja kogu melaniin rakusademes lahustati 100 μL NaOH töölahuses (1 mol/L, 10 protsenti DMSO) temperatuuril 80 °C 1 tund ja neeldumist mõõdeti 405. nm (Lv et al., 2015; Lv et al., 2019).

Türosinaasi aktiivsuse test

Raku türosinaasi aktiivsust uuriti nii, nagu eelnevalt kirjeldatud (Liao et al., 2017; Lv et al., 2020a). Lühidalt öeldes lüüsiti rakud rakkude lüüsipuhvriga pärast kolmekordset pesemist ja seejärel saadi türosinaasi aktiivsuse testi supernatant lüsaatide tsentrifuugimisega. 100 µl PBS (0,1 M, pH 6,5), mis sisaldab 10 ug valke, segatuna 100 µl 0,1 protsendilise L-DOPA-ga. Plaati inkubeeriti 37 kraadi juures 1 tund ja seejärel jälgiti optilist neeldumist lainepikkusel 475 nm.

J147 otsest mõju türosinaasi aktiivsusele testiti eelnevalt kirjeldatud rakuvaba süsteemiga (Lv et al., 2020a). Lühidalt öeldes viidi seene türosinaasi aktiivsuse määramise reaktsioon läbi 96-süvendiga plaadil ja reaktsioonisegu sisaldas seene türosinaasi (10 ühikut), L-türosiini (0,03 protsenti, 50 µL) ja 100 µl PBS-i. (0,1 M, pH 6,5), lisades erinevate kontsentratsioonidega J147. Pärast 10-minutilist inkubeerimist 37 kraadi juures mõõdeti mikroplaadi spektrofotomeetriga neeldumine lainepikkusel 475 nm.

Masson-Fontana ammoniaagihõbeda värvimine

Melaniini pigmendi tuvastamiseks fikseeriti nahatükid ja melanotsüüdid formaliinis ja värviti standardprotokolli järgi (Gu et al., 2018; Lv et al., 2020b). Lühidalt, slaidid pesti 3 korda deioniseeritud veega ja seejärel inkubeeriti ammoniaagi hõbeda lahuses toatemperatuuril 12 tundi. Pärast korralikku loputamist deioniseeritud vees inkubeeriti slaide 5 minutit hüpolahuses. Seejärel loputati objektiklaasid uuesti ja värviti veel 5 minutit neutraalse punase peitsiga. Lõpuks, pärast põhjalikku loputamist, vaadeldi slaide Nikon-Eclipse-Ti mikroskoobi all.

Immunofluorestsents melanosoomi ülekande jaoks

B16F10 ja HaCaT rakkude kultiveerimissüsteem loodi konfokaalsel tassil, nagu eelnevalt kirjeldatud (Lee et al., 2015; Lv et al., 2020c). Pärast J147 töötlemist immunovärviti rakud anti-GP100 ja anti-tsütokeratiiniga vastavalt standardprotokollile. Pildid tehti Nikon-Eclipse-Ti mikroskoobist.

S{0}} immunohistokeemia

S{0}} immunohistokeemia viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud (Lee et al., 2013; Lv et al., 2020b). Lühikirjeldus oli järgmine: slaidid blokeeriti 5% BSA-ga temperatuuril 25 °C 1 tund ja inkubeeriti seejärel anti-S-100 primaarse antikehaga temperatuuril 4 °C üleöö. Järgmisel päeval pesti slaide 3 korda TBST lahusega ja inkubeeriti sekundaarse antikehaga. Seejärel töödeldi slaide lõikude väljatöötamiseks aminoetüülkarbasooliga ja vaadeldi mikroskoobi all.

Pöördtranskriptsioon – PCR

Raku kogu RNA ekstraheeriti TRIzol reagendiga ja kvantifitseeriti spektrofotomeetriliselt. Seejärel kasutati üheahelalise sünteesimiseks SuperScript II pöördtranskriptaasicDNA järgides tootmisjuhiseid.Oligonukleotiidpraimerid osteti GenScriptilt(Nanjing, Hiina). JärjekorradMITFgeenipraimerid on 5′- AGAGCAGGGCAGAGAGTGAGTG -3′, 5′-AACTTGATTCCAGGCTGATGATGTC -3′. JärjekorradGAPDHgeenpraimerid on 5′- AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3′, 5′- TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA -3′. PCR tooted olideraldati elektroforeesiga 1% agaroosgeelidel ja tuvastatiultraviolettvalguses (Lee jt, 2013).

Lääne Blotting

Valgud (40 ug) eraldati SDS-PAGE geelidega ja kanti elektroforeetilise ülekandesüsteemi (Bio-Rad) abil nitrotselluloosfiltri (NC) membraanidele. NC-membraanid blokeeriti 3-protsendilise BSA-ga TBST lahuses toatemperatuuril 1,5 tundi. Seejärel inkubeeriti membraane primaarsete antikehadega öö läbi temperatuuril 4 kraadi. Järgmisel päeval pesti blotte 3 korda TBST lahusega ja inkubeeriti seejärel peroksidaasiga konjugeeritud sekundaarsete antikehadega 25 kraadi juures 1 tund ja visualiseeriti täiustatud kemoluminestsentsi abil (Lv et al., 2020d).

Melaniini sisalduse määramine sebrakala mudelis

Lühidalt, sünkroniseeritud embrüod koguti ja järjestati pipetiga (kolm kuni neli embrüot süvendi kohta 200 μL embrüosöötmega 96-süvendiga plaatidel). Seejärel lahustati J147 ja PTU 0,1 protsendilises DMSO-s ja lisati embrüosöötmele 35–60 tunni jooksul (25-tunnine kokkupuude). J147 mõju sebrakala melanogeneesile täheldati stereomikroskoobi all (Zheng J. et al., 2018).

Fenotüübipõhine hindamine ja UVB-indutseeritud hüperpigmentatsiooni merisea mudel

8 pruuni merisiga (6 nädalat, ligikaudu 250–300 g) osteti Laboratory Animal Science'i instituudist (Peking, Hiina). Neid merisigu peeti üksi püsiva temperatuuri ja niiskusega ruumis 12-tunnise valguse/pimeduse tsükli all. Hüperpigmentatsioonimudeli loomiseks eksponeeriti iga looma selja eraldi alasid (1 cm diameetriline ring) 500 mJ/cm2 UVB-ga (Sigma SH-4, Shanghai, Hiina) üks kord päevas 1 nädala jooksul. Seejärel anti vehiiklit (PEG400/EtOH=7:3) ja J147 (1 protsent) hüperpigmenteeritud aladele (20 μL lahust ringi kohta) kaks korda päevas 3 nädala jooksul. Pigmentatsiooni astet hinnati, arvutades ΔL väärtuse vastavalt spektrofotomeetriga mõõdetud L väärtusele (YS3010, 3nh, Shenzhen, Hiina) järgmiselt: ΔL=L (iga mõõdetud päeval)-L (0. päeval) (Lee et al., 2013; Lv et al., 2020b). Kõik selle uuringu loomadega seotud protseduurid kiitis heaks Changzhou ülikooli loomade hooldamise ja kasutamise komitee.

Statistiline analüüs

TULEMUSED

J147 vähenenud melanogenees ja dendriitide arv B16F10 rakkudes

J147 struktuur on näidatud joonisel 1A. Esiteks viidi läbi rakkude elujõulisuse katse, et uurida, kas J147 oli B16F10 rakkudele tsütotoksiline. Nagu on näidatud joonisel 1B, ei täheldatud J147 tsütotoksilisi toimeid annustamisvahemikus 1–8 μM 48 tunni pärast. Seejärel uurisime J147 mõju melaniini sünteesile. Nagu on näidatud joonisel 1C, inhibeeris J147 basaalmelaniini sünteesi. -MSH soodustab oluliselt melanogeneesi melanotsüütides. -MSH poolt indutseeritud melanogeneesi suurenemine pöördus pärast J147-ravi. Järjekindlalt näitas Masson-Fontana ammoniaagihõbeda värvimine, et J147 vähendas märkimisväärselt melaniini sisaldust B16F10 rakkudes koos -MSH-ga või ilma (joonis 1D). Lisaks vähenes ka dendriitide arv ja pikkus ning melaniini kontsentratsioon dendriitides võrreldes töötlemata rakkudega (joonis 1D). Tulemused näitasid, et J147 vähendas melanogeneesi ja dendriidi moodustumist ilma tsütotoksiliste mõjudeta.

J147 inhibeeris raku türosinaasi aktiivsust ja türosinaasi ekspressiooni, TRP-1, TRP-2

Melanogeneesis osales valkude türosinaaside perekond (türosinaas, TRP-1 ja TRP-2). Nende hulgas on türosinaasid peamised ensüümid, mis reguleerivad melaniini biosünteesi rada (D'Mello et al., 2016). Et teha kindlaks, kas J147 mõjutab türosinaasi aktiivsust, kasutasime esmalt L-DOPA oksüdatsioonimeetodit, et määrata J147 mõju raku türosinaasi aktiivsusele. Näidati, et J147 (1–4 μM) avaldab B16F10 rakkudes annusest sõltuval viisil sügavat pärssivat toimet raku türosinaasi aktiivsusele (joonis 2A). Järgmisena viidi läbi seente türosinaasi aktiivsuse test, et määrata J147 otsene mõju türosinaasi aktiivsusele. Nagu on näidatud joonisel 2B, ei täheldatud inhibeerivat toimet, mis näitab, et J147 ei mõjutanud seene türosinaasi ensümaatilist aktiivsust (joonis 2B). Nagu me teame, kontrollib melanogeneesi nende türosinaaside aktiivsus ja kogused. Et uurida, kas J147 melanogeensed toimed on korrelatsioonis türosinaasi ekspressiooniga, viidi läbi Western blot analüüs. Nagu on näidatud joonisel 2C, vähenesid türosinaasi ekspressiooni tasemed pärast J147-ga töötlemist märkimisväärselt -MSH-ga või ilma ning samu tulemusi täheldati ka TRP-1 ja TRP-2 ekspressioonis. Need tähelepanekud näitasid, et J147 inhibeeris raku türosinaasi aktiivsust ja melanogeneesi, vähendades türosinaasi, TRP-1 ja TRP-2 ekspressioonitaset.

J147 inhibeeris melanosoomi transporti, reguleerides müosiin Va, Rab27a ja Cdc42 ekspressiooni

Inimese naha pigmentatsiooni määrab nii melaniini süntees kui ka melaniini jaotus. Imetajate melanotsüütides toodetakse melaniini peamiselt rakukehas jarändab mööda aktiini filamenteja mikrotuubulid dendriitideks ja lõpuksnaaberkeratinotsüütidesse, et lõpetadalevitamineprotsess (Ohbayashi ja Fukuda, 2012). Nagu on näidatudJoonis 1D, J147 vähendas märkimisväärselt dendriidi moodustumist.Lisaks oli ka melaniini kontsentratsioon dendriitidesvähenes, kuna melaniini pigment agregeerus perinukleaarsessepiirkondades. Järgmisena kultiveerisime koos B16F10 ja HaCaT rakkeuurige, kas J147 mõjutabmelanosoomi ülekannekeratinotsüüdid konfokaalse mikroskoopia abil. Jaotusmelaniini nähti kaaskultuuri HaCaT rakkudesmudel (Joonis 3A). Seevastu samas kui kaaskultuuri mudel olitöödeldud J147-ga 48 tundi, melanosoomi granulaarsed signaalid sisseHaCaT rakud olid märkimisväärseltvähendatud (Joonis 3A).

J147 poolt melanosoomi ülekande pärssimise mehhanismi täiendavaks selgitamiseks uurisime mitmeid melanosoomi transpordiga seotud olulisi tegureid. KIF5b vahendab melanosoomi transporti väljapoole mööda mikrotuubuleid ja Rab27a melanofiliin-müosiini kompleks aitab kaasa melanosoomi transpordile mööda aktiini filamente melanotsüütides (Reiner et al., 2020). Lisaks stimuleerib Cdc42 dendriitide moodustumist melanotsüütides, mis mängib samuti olulist rolli melanosoomi transpordis. Nagu on näidatud joonisel 3B, vähenes Cdc42, Myosin Va ja Rab27a, kuid mitte KIF5b ekspressioon pärast J147-ravi oluliselt -MSH-ga või ilma. Meie leiud näitasid, et J147 inhibeeris melanosoomi transporti, vähendades Myosin Va, Rab27a ja Cdc42 ekspressiooni.

J147 kiirendatud MITF-i lagunemine

MITF on üks peamisi melanogeneesi regulaatoreid ja kontrollib türosinaasi, TRP-1, TRP-2, Cdc42 ja Rab27a geenide transkriptsiooni (Noguchi et al., 2016; Kim et al., 2019). ). Esmalt uurisime J147 mõju MITF-i ärakirjadele. Nagu on näidatud joonisel fig 4A, suurendas -MSH märkimisväärselt MITF-i transkriptsiooni, kuid pärast J147-ravi muutusi ei täheldatud, mis näitab, et J147 ei vähenda MITF-i ekspressiooni. Järgmisena uurisime, kas J147 mõjutab MITF-i tõlget. Nagu on näidatud joonisel fig 4B, tõusis pärast MSH-ga töötlemist MITF-i valgu tase, saavutas haripunkti 4 tunni pärast ja hakkas langema 8 tunni pärast (joonis 4B). Erinevalt ei langenud MITF-i valgu tase 4 tundi pärast J147-ravi, kuid 8 tunni pärast langes MITF-i valgu tase kiiresti tuvastamatule tasemele, mis näitab, et J147 ei mõjuta MITF-i translatsiooni, kuid kiirendab märkimisväärselt MITF-i valgu lagunemist.

J147 pärssis melanogeneesi MEK / ERK signaaliraja kaudu

Mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaaside (MAPK) signaaliülekande rada, sealhulgas rakuväline signaaliga reguleeritud proteiinkinaas (ERK), p38 ja c-jun N-terminaalne kinaas (JNK), mängivad pigmentatsioonis üliolulist rolli (Lee et al., 2013). On teada, et ERK fosforüülimine hõlbustab MITF-i lagunemist ja hajutab lõpuks melanogeenseid stiimuleid, mis kujutab endast peamist negatiivse tagasiside mehhanismi (Kwon et al., 2017). Kuid p38 ja JNK raja funktsioon on endiselt vastuoluline. Seetõttu uurisime J147 mõju MAPK signaaliradadele. Nagu on näidatud joonisel fig 5A, aktiveeris J147 MEK / ERK ja p38, samas kui JNK signaaliraja fosforüülimisel mingit mõju ei leitud.

Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501