Esimene inimeste kliiniline uuring glütsiinamiidi vesinikkloriidi naha depigmentatsiooni efektiivsuse kohta

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Abstraktne:Eelmises uuringus tuvastati teatud madalmolekulaarsed antimelanogeensed peptiidid, millel on ühine järjestus melanotsüüte stimuleeriva hormooniga (MSH) ja mis lõpevad glütsiinamiidi fragmendiga. Glütsiinamiid ise näitas samuti rakupõhistes testides melanogeenset toimet, kuid ei glütsiin ega atsetüülglütsiinamiid. oli aktiivne, mis viitas erilisele struktuurile ja tegevussuhtele. Selle uuringu eesmärk oli uurida glütsiinamiidvesinikkloriidi naha depigmentatsiooni efektiivsust inimestel. Glütsiinamiidvesinikkloriidi esmast nahka ärritavat potentsiaali hinnati plaastritesti abil 30 inimesel. Glütsiinamiidvesinikkloriidi naha depigmentatsiooni efektiivsust hinnati topeltpimedas kliinilises testis 21 inimesel. Testitavat toodet ja kontrollprodukti kanti ettenähtud kohtadele näo paremal või vasakul küljel kaks korda päevas kaheksa nädala jooksul. Nahavärvi parameetreid, st melaniini indeksit, L* väärtust (mis esindab naha heledust), a* väärtust (punetus) ja b* väärtust (kollasust) mõõdeti instrumentidega. Individuaalne topoloogianurk (ITAo, mis tähistab nahavärvi) arvutati L* ja b väärtustest. Naha astepigmentatsioonhindasid visuaalselt kaks testijat. Esmane nahaärrituse test näitas, et kuni 10 protsenti glütsiinamiidvesinikkloriidi sisaldav lahus ei kutsunud esile mingeid ebasoodsaid nahareaktsioone. Tõhususe testis vähendas testtoode pärast kahenädalast kasutamist märkimisväärselt melaniiniindeksit ning suurendas L* väärtust ja ITAo-d. algväärtus testi alguses. Samuti alandas see oluliseltpigmentatsioonpärast 6-nädalast manustamist algväärtuse suhtes. Melaniini indeksi, L* väärtuse, ITAo ja astme erinevusedpigmentatsioonkatse- ja kontrollrühmade vahel muutus statistiliselt oluliseks pärast kuuenädalast või kaheksanädalast manustamist. Tõhususe testi ajal ei täheldatud nahaärrituse märke. Käesolev uuring viitab sellele, et glütsiinamiidvesinikkloriidil on suur potentsiaal kasutada naha hüperpigmentatsiooni kontrolli all hoidmiseks.

Märksõnad:melaniin; glütsiinamiidvesinikkloriid; depigmenteerimine;pigmentatsioon; naha heledamaks muutmine;valgendamine; peptiid

cistanche parandab valgendamist

1. Sissejuhatus

Inimese nahavärvi määrab peamiselt erinevate pigmentainete, nagu melaniini, hemoglobiini ja karotenoidide sisaldus ja jaotus [1]. Geneetilised tegurid määravad eelkõige nahavärvi, kuid seda mõjutavad tugevalt ka omandatud tegurid. Melaniini toodetakse protsessi käigus, mille käigus aminohape nimega L-türosiin metaboliseeritakse melanosoomides, mis on melanotsüütide organellid, ensümaatiliste reaktsioonide käigus. On olemas erinevat tüüpi melaniini, nagu aseumelaniin ja feomelaniin, mis annavad erinevat värvi [2]. Melanosoomid varustavad melaniini ümbritsevatesse keratinotsüütidesse ja selle tulemusena jaotub melaniin kogu nahas ja väljendub erinevate nahavärvide tootmisel [3]. Lisaks oma mõjule naha visuaalsele väljanägemisele on melaniinil oluline roll keha kaitsmisel ultraviolettkiirte (UV) kiirte mürgisuse eest [4]. Seetõttu on melaniini metabolism nahas muutunud oluliseks uurimisteemaks nii füsioloogilisest kui esteetilisest vaatenurgast [5,6].

Ebanormaalne melaniini metabolism võib põhjustada erinevat tüüpi naha pigmendihaigusi, mis jagunevad hüperpigmentatsiooniks ja hüpopigmentatsiooniks [7,8]. Hüperpigmentatsioon tekib siis, kui melaniin koguneb liigselt või ebaühtlaselt põletiku, vananemise, UV-kiirte, füüsiliste kahjustuste ja muude sisemiste/väliste stimuleerivate tegurite tõttu [9,10]. Samal ajal võivad inmelaniini tootmise geneetilised või epigeneetilised defektid põhjustada hüpopigmentatsiooni, nagu albinism või vitiligo [11, 12].

Hüperpigmentatsiooni ennetus- ja ravistrateegiad hõlmavad fotokaitset, farmakoteraapiat, kirurgilist ravi (keemiline koorimine ja laserravi) ja kosmeetilist kamuflaaži [13–15]. Keemilist koorimist ja laserravi tehakse sageli, kuid neil on kõrvaltoimed, nagu dermatiit ja korduvadpigmentatsioon[16,17]. Hüdrokinooni kasutatakse peamiselt farmakoteraapiana, kuid see võib potentsiaalselt põhjustada nahaärritust, allergiat, mutatsioone ja vähki [18]. Kosmeetika valdkonnas,naha heledamaks muutmineArbutiini, niatsiinamiidi ja C-vitamiini derivaate sisaldavad funktsionaalsed kosmeetikatooted domineerivad, kuid tarbijate rahulolu nende ohutuse ja nahka kergendava toimega on madal [19]. See uurimisrühm on otsinudnaha heledamaks muutminemitmesugustest looduslikest allikatest pärit ained ja tuvastasid arvukalt looduslikke ühendeid, nagu p-kumaarhape, resveratrool ja luteoliin 7-sulfaat, mis pärsivad erinevate mehhanismide kaudu raku melaniini sünteesi [20–23].

Peptiide kasutatakse dermatoloogias ja nahahooldustoodetes üha enam aktiivsete koostisosadena [24,25]. Mida väiksem on peptiid, seda odavam on selle valmistamine, seda suurem on selle stabiilsus ja seda kergemini imendub see nahka.

Meie hiljutised uuringud tuvastasid teatud madala molekulmassiga anti-melanogeensed peptiidid [26, 27]. Nendes uuringutes kasutati aktiivsete peptiidide järjestuste ennustamiseks spetsiaalset algoritmi, kasutades positsiooniskaneerimisega sünteetiliste peptiidide kombinatsiooni raamatukogu [28,29]. Seda meetodit kasutades oli võimalik identifitseerida melanogeenseid peptiide, hinnates 80 tetrapeptiidi kogumi aktiivsust, selle asemel et hinnata kõigi 160 000 võimaliku tetrapeptiidi tüübi aktiivsust [27]. Peptiidide anti-melanogeenset aktiivsust hinnati esialgselt melanotsüüte stimuleeriva hormooniga (MSH) töödeldud B16-F10 melanoomirakkudes. Aktiivse tetrapeptiidi järjestus oli eeldatavasti R-(F/L)-(C/W)-(G/R)-NH2. Üksikutest testitud tetrapeptiididest näitasid RFWG-NH2 ja RLWG-NH2 kõrget melanogeenset toimet. Tetrapeptiid FRWG-NH2, millel on sama järjestus, mis peale -MSH (atsetüül-SYSMEHFRWGKPV-NH2), näitas samuti sarnast aktiivsust. Tri-peptiidiga testitud hulgas olid FWG-NH2, LWG-NH2 ja RWG-NH2 suhteliselt aktiivsed. Dipeptiid WG-NH2 ja G-NH2 (glütsiinamiid) säilitasid oma melanogeense aktiivsuse, samas kui atsetüül-G-NH2 ega G (glütsiin) ei olnud aktiivsed. Arvatakse, et need madalmolekulaarsed melanogeensed peptiidid on suunatud melanokortiin 1 retseptorile (MC1R), kuna nende järjestus on sarnane -MSH omaga. Need madala molekulmassiga melanogeensed peptiidid võivad olla väga kasulikud melanotsüütide MC1R-sõltuvate füsioloogiliste funktsioonide uurimisel [30].

Näidati, et glütsiinamiid pärsib raku melaniini tootmist väga tõhusalt, vähendades cAMP-le reageeriva elemente siduva valgu (CREB) aktivatsiooni ning mikroftalmiaga seotud transkriptsioonifaktori (MITF) ja türosinaasi (TYR) geeniekspressiooni vastuseks -MSH-le [27] .Käesolevas uuringus anname teada glütsiinamiidi (vesinikkloriidsoola kujul), mis on madalamolekulaarsetest melanogeensetest peptiididest väikseim, esimese inimese nahale kandmise testi tulemused.

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Materjalid

Glütsiinamiidvesinikkloriid osteti firmalt Sigma–Aldrich (St. Louis, MO, USA), HangzhouDayangchem Co., Ltd. (Hangzhou, Hiina) ja Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. (Tokyo, Jaapan). Testtoode (Melapep). ), mis sisaldab toimeainena 10 protsenti glütsiinamiidvesinikkloriidi, tarnis Ruby Crown. Co., Ltd. (www.rubycrown.com, Daegu, Korea). Kontrollprodukt sisaldas sama preparaati ilma glütsiinamiidvesinikkloriidita.

2.2. Suure jõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC)

Toodete kromatograafiline analüüs viidi läbi, kasutades Waters Alliance HPLC süsteemi (Waters, Milford, MA, USA), mis koosnes Waters e2695 eraldusmoodulist ja Waters 2996 Photodiode Array Detectorist. Statsionaarne faas oli 5 µm, 4,6 mm × 25{{10}} mm Hector-M C18 kolonn (RS Tech Co., Daejeon, Korea) ja liikuv faas oli 20 mM fosforhape, mis sisaldab 50 mMnaatrium1-oktaansulfonaati (pH 3,0). Liikuva faasi voolukiirus oli 0,6 ml min-1. Tuvastamise lainepikkus oli 210 nm. Toodet lahjendati 10 korda liikuva faasiga ja lasti enne süstimist läbi süstalfiltri (0,2 µm, kat. nr 431219, Corning, Inc. NY, USA). Proovi süstitav maht oli 10 µl.

2.3. Esmane nahaärrituse test

Esmane nahaärrituse test viidi läbi vastavalt isikuhooldustoodete nõukogu (PCPC) juhistele (2014) ja Dermapro Co., Ltd. (www.dermapro.co.KR, Seoul, Korea) standardsetele tööprotseduuridele (www.dermapro.co.KR, Seoul, Korea), et teha kindlaks, kas testitavad tooted ärritasid inimese nahka.Testiprojekti (nr 1-220777-AN-02-DICN19165) kiitis heaks 1. augustil 2019 Dermapro Co., Ltd. bioeetikakomitee ja see viidi läbi vastavalt eetilistele põhimõtetele. Helsingi deklaratsioonis.

Katsealused valiti tervete vabatahtlike hulgast, kes vastavad kaasamise ja välistamise kriteeriumidele. Saime katsealustelt kirjaliku teadliku nõusoleku.

2.3.1. Kaasamise kriteeriumid

(1) Terved, nahahaigusteta taotlejad vanuses 20–60 aastat. (2) Taotlejad, kes allkirjastasid enne testi vabatahtlikult kirjaliku nõusoleku vormi pärast seda, kui neid on teavitatud testi eesmärgist ja sisust. (3) Taotlejad, kes olid valmis testi nõuete täitmiseks koostööd tegema ja teatama viivitamatult ootamatutest mõjudest. (4) Taotlejad, keda saab jälgida kogu katseperioodi jooksul.

2.3.2. Välistamiskriteeriumid

(1) Naised, kes olid rasedad, imetavad või võivad rasestuda. (2) Taotlejad, kellel on anamneesis nahahaigused, sealhulgas atoopiline dermatiit, psoriaas, ekseem ja hooajalised allergiad testile eelneva viimase kuu jooksul. (3) Taotlejad, kellel on ebanormaalnepigmentatsioon, võib segada testimiskoha punktide määramist. (4) Taotlejad, kes võtavad põletikuvastaseid, antihistamiine või immunosupressiivseid ravimeid. (5) Taotlejad, kes kasutasid katsekohas paikseid põletikuvastaseid ravimeid viimase kahe nädala jooksul enne testi. (6) Taotlejad, kellel on nahahaigused, mis võisid segada testi eesmärki. (7) Taotlejad, kellel on anamneesis autoimmuunhaigused või immuunpuudulikkuse häired. (8) Taotlejad, kes said immunoteraapiat viimasel nädalal enne testi või keda plaaniti testimisperioodi jooksul ravida. (9) Taotlejad, kes said ravi krooniliste haiguste, näiteks astma ja diabeedi tõttu. (10) Taotlejad, kes osalesid teistel katsetel või kes osalesid samalaadses testis viimase nelja nädala jooksul enne testi. (11) Taotlejad, kellel tekkis kinnituslindile nahaärritus või allergia.

2.3.3. Osalemise tingimused

(1) Katsealustel ei lastud plaastri kinnitamise ajal katsekohale vett. (2) Kui uuritav oli kohustatud võtma või kasutama ravimeid, tuli sellest teavitada testijat. (3) Eesmärk oli järgida ülevaatuse ajakava. (4) Katsealused pidid teavitama testijat kõikidest ebanormaalsetest nahasümptomidest, mis testiperioodi jooksul ilmnesid.

2.3.4. Katsealuste katkestamise kriteeriumid katseperioodil

(1) Kui katsealune loobus katsest vabatahtlikult ootamatu õnnetuse, haiguse, raseduse vms tõttu. (2) Kui katsematerjalist on põhjustatud tõsine nahakahjustus. (3) Kui katsealune ei järginud katseprotokolli. (4) Kui testi ei õnnestunud erilistel asjaoludel korrektselt sooritada, nt kui katsealusega ei olnud võimalik kontakti saada.

2.3.5. Plaastri testimine

Katsematerjalid (15{7}} µL) kanti Finn Chambers®-ile (Smart Practice, Hillerød, Taani), kasutades Microman M250 pipetti (Gilson, Villiers le bel, Prantsusmaa). Kambrid kinnitati katsealuste tagaküljele ja kaitsti Micropore teibiga (3M, St. Paul, MN, USA) 24 tundi. Testijad hindasid katsealuste nahareaktsioone kaks korda, esmalt 20 min. pärast plaastri eemaldamist ja seejärel 24 tundi hiljem, kasutades Froschi ja Kligmani [31] kirjeldatud nahareaktsioonide hindamissüsteemi koos väikeste muudatustega järgmiselt: 0, nähtav reaktsioon puudub; 1, kerge täpiline või hajus erüteem; 2, mõõdukalt ühtlane erüteem;3, intensiivne erüteem koos tursega; ja 4, intensiivne erüteem koos tursete ja vesiikulitega. Vastuse skoor (R protsentides) arvutati järgmiselt: R=(Σ (täheldatud reaktsiooni aste × vastuse sagedus)/(neli hinnet kokku × kahekordne vaatlus kokku × katsealuste koguarv)) × 100 ( protsenti). Katsematerjalide esmast nahaärrituse potentsiaali kirjeldati R põhjal järgmiselt: R < 0,87="" protsenti,="" mitteärritav/kergelt="" ärritav;="" 0,87="" protsenti="" r="">< 2,42="" protsenti="" või="" sellega="" võrdne,="" kergelt="" ärritav;="" 2,42="" protsenti="" r="">< 3,44="" protsenti="" või="" sellega="" võrdne,="" mõõdukalt="" ärritav;="" ja="" r="" suurem="" või="" võrdne="" 3,44="" protsenti,="" tugevalt="">

2.4. Naha depigmentatsiooni efektiivsuse test

Testitava toote naha depigmentatsiooni efektiivsuse hindamiseks viidi läbi test. Testprojekti (nr 1-220777-AN-02-DICN19168) kiitis heaks 16. augustil 2019 Dermapro Co., Ltd. bioeetikakomitee ja see viidi läbi Helsingi deklaratsioonil põhinevate eetiliste põhimõtete kohaselt. Katsealused valiti tervete vabatahtlike hulgast, kes vastavad kaasamise ja välistamise kriteeriumidele. Saime patsiendilt (katsealustelt) kirjaliku teadliku nõusoleku.

2.4.1. Kaasamise kriteeriumid

(1) 20–60-aastased mehed või naised, kellel on näo hüperpigmentatsioon, nagu melasma või lentiigo. (2) Terved inimesed, kellel puuduvad ägedad või kroonilised füüsilised haigused, sealhulgas nahahaigused. (3) Need, kes kuulusid Fitzpatricku nahatüübi klassifikatsiooni II, III ja IV tüüpi. (4) Taotlejad, keda teavitati testi eesmärgist, sisust jne ja kes allkirjastasid vabatahtlikult testilepingu. (5) Taotlejad, keda oli testi ajal võimalik jälgida.

2.4.2. Välistamiskriteeriumid

(1) Need, kes olid rasedad, imetavad või võivad rasestuda. (2) Need, kellel on anamneesis fotoallergia või valgustundlikkus. (3) Need, kes kasutasid nahahaiguste raviks üle ühe kuu steroide sisaldavaid väliseid preparaate. (4) Need, kes osalesid sarnastes testides 6 kuu jooksul enne testi. (5) Tundliku ja ärritunud nahaga isikud. (6) Need, kellel on katsekohas nahakahjustused, nagu laigud, akne, erüteem, kapillaaride laienemine jne. (7) Need, kes kasutasid katsepaigas sama või sarnast kosmeetikat või ravimeid kolme kuu jooksul katse algusest. (8) Need, kes tarbisid ravimeid või toiduaineidnaha heledamaks muutminemõjusid. (9) Need, kellel on atoopiline dermatiit või muud nakkuslikud nahahaigused. (10) Need, kes said katsekohas 6 kuu jooksul enne uuringut meditsiinilist ravi (nahakoorimine, Botox, muud nahahooldustooted jne). (11) Need, kes said kolme kuu jooksul enne testi immuniseerimist, antihistamiine, põletikuvastaseid aineid jne. (12) Need, kes said ühe kuu jooksul enne testi süsteemseid steroide, hormoonravi või kiiritusravi. (13) Inimesed, kellel on kroonilised tarbitavad haigused (astma, diabeet, kõrge vererõhk jne). (14) Inimesed, kes töötavad pikka aega päikesevalguse käes. (15) Need, kes võtsid ravimeid, mis põhjustavad valgustundlikkust. (16) Need, kelle testija hindas testis osalemiseks sobimatuks.

2.4.3. Osalemise tingimused

(1) Katsealused ei tohtinud testiperioodi jooksul kasutada kosmeetikat ega ravimeid, mis väidavad, et need on funktsionaalsed. (2) Katsealused pidid vältima kokkupuudet tavapärasest suurema päikesevalguse tasemega igapäevaelus ja pidid välja minnes kasutama päikesekaitsetooteid. (3) Isikud ei tohtinud katsetooteid segamini ajada ja pidid neid kasutama vastavalt ettekirjutustele. (4) Peale testitavate toodete ei tohtinud katsealused katseperioodil kasutatud kosmeetikatooteid vahetada. (5) Katsealused pidid testijale teatama kõigist ebanormaalsetest sümptomitest. (6) Katsealused pidid järgima täpselt juhiseid toodete kasutamise ja piirangute kohta. (7) Katsealused pidid järgima kontrollimise ajakava ja kinnitama testijale toodete kasutamist.

2.4.4. Katsealuste katkestamise kriteeriumid katseperioodil

(1) Kui katsealune loobus katsest vabatahtlikult ootamatu õnnetuse, haiguse, raseduse vms tõttu. (2) Kui katsematerjal põhjustas tõsise kõrvaltoime. (3) Kui katsealune ei vastanud katseprotokollile. (4) Kui testi sooritamist takistasid erilised asjaolud, nt kui katseisikut ei olnud võimalik jälgida. (5) Kui katsealune jõi või suitsetas liiga palju või puutus kokku liigse UV-kiirgusega.

2.4.5. Testtoodete rakendamine

Test- ja kontrolltooted (0,6 ml) leotati 4 × 3 cm2 lausriidest lehtedesse (toote nimi, nahakoe tüüp puuvill), mis osteti ettevõttest Blue and Pink (Gimpo-si, Korea), mis seejärel individuaalselt pakendati katsealustele kasutamiseks.

Test oli topeltpime; ei testijatele ega katsealustele ei öeldud, milline toode on milline. Pärast testtoodete kättesaamist samas pakendis pakkujalt, märgistas testtootejuht pakendid testikoodidega eraldi ruumis, kuhu testijad või katsealused ei pääse. Testijad said testitavad tooted testtootejuhilt pimedana ning katsealused said tooted ka pimedana.

Katsetoodete jaotamiseks katsealuste vahel kasutati plokkide randomiseerimise meetodit. Katsealusele esitati plokkide juhusliku jaotamise tabel (SSPP, SPSP, SPPS, PPSS, PSPS ja PSSP), et määrata katsetoodete S või P järjekord, mida tema ja kolm muud järjestuses katsealust kasutavad.

Katsealused kasutasid katsetooteid pärast näopesu ja enne mis tahes muu kosmeetika kasutamist kaks korda päevas, hommikuti ja õhtuti kaheksa nädala jooksul. Katsealused kinnitasid testi- ja kontrolltooted ettenähtud kohtadele vastavalt näo vasakule ja paremale küljele (või vastupidi) 30 minutiks vastavalt pakkuja soovitusele.

2.4.6. Nahavärvi hindamine

Katsealused külastasid uurimiskeskust iga kahe nädala tagant, et hinnata oma nahka. Pärast näo pesemist puhkasid katsealused 20 minutit. enne naha hindamist laboris, kus suhteline õhuniiskus on 22 ± 2◦ ja 50 ± 5 protsenti.

Melaniini ja erüteemi indeksit mõõdeti seadmega Mexameter® MX18 (Courage plus Khazaka electronic GmbH, Köln, Saksamaa). Meksameetri sond kiirgab kolme kindlat lainepikkust valgust (roheline, λ=568 nm; punane, λ=660 nm; ja infrapuna, λ=880 nm) ning vastuvõtja mõõdab nahalt peegeldunud valgust. . Mõõtmisi korrati kolm korda ja keskmistati.

Nahavärvi väljendatakse Commission Internationale de l'Eclairage Labi värviruumi abil, mis põhineb heledusastmel (L*), rohelise kuni punaseni (a*) ja sinise kuni kollase astmeni (b*) [32]. Nahavärvi parameetrid L*, a* ja b* mõõdeti seadmega Spectrophotometer® CM-2500d (Minolta, Tokyo, Jaapan) [32]. Nahavärvi esindav individuaalne tüpoloogianurk (ITA◦) arvutati võrrandi abil: ITA◦=(kaare tangens [(L*−50)/b*]) (180/3,14159) [33].

Visuaalset hindamist viisid läbi kaks testijat. Nad hindasid iseseisvalt naha pigmentatsiooni astet skaalal {{0}} kuni 9 (0, hele; 9, tume; sammud, 0,5). Kui kahe testija vaheline klassisisese korrelatsioonikoefitsiendi väärtus oli suurem kui 0, 8, võeti andmed vastu ja kasutati keskmisi väärtusi. Naha fotod tehti VISIA® (Canfield Scientific, Inc., Fairfield, New Jersey, USA) kasutamise ajal. Nahaohutuse hindamiseks uurisid testijad nahaärritust ja katsealused viisid igal hindamise ajahetkel läbi nahaärrituse enesehinnangu.

2.4.7. Naha kõrvaltoimete hindamine

Kaheksanädalase katseperioodi jooksul külastasid katsealused instituuti iga kahe nädala tagant. Igal visiidil hindasid testijad subjektiivseid sümptomeid, küsides, kas katsealustel oli viimase kahe nädala jooksul esinenud nahale kahjulikke reaktsioone, nagu sügelus, kipitus, kõdistamine, põletustunne, kipitustunne, jäikus ja pinguldamine. Katsealustel paluti viivitamatult teatada, kui visiidiintervallide vahel tekkisid kõrvaltoimed. Objektiivsete sümptomite hindamiseks uurisid testijad ka kõiki kõrvaltoimeid nahale, nagu aserüteem, turse, suurus ja papulid.

2.5. Statistiline analüüs

Andmeid analüüsiti SPSS tarkvarapaketi abil (IBM, Chicago, IL, USA). Andmed on väljendatud kui keskmine ± standardhälve (SD). Andmete normaaljaotust kontrolliti Shapiro-Wilksi testiga ja normaalsus aktsepteeriti, kui Kurtoos ja Skewness on ± Test- ja kontrollrühmade eelhomogeensuse piires enne testi, kasutades paaritud testi. Ajast sõltuvaid muutusi võrreldes algväärtusega ning erinevusi test- ja kontrollrühmade vahel igal ajahetkel analüüsiti parameetriliste väärtuste korduvate mõõtmiste ANOVA abil ja mitteparameetriliste väärtuste post-hoc Wilcoxoni märgistatud järjestustesti abil. Muutuse määr (protsent) baasväärtusest arvutati järgmiselt; muutuse määr=[väärtus pärast ravi – algväärtus enne ravi) / algväärtus enne ravi] × 100 ( protsenti ).

3. Tulemused

3.1. Testtooted

Selles uuringus kasutati testitavat toodet, mis sisaldas 10 protsenti glütsinamiidvesinikkloriidi, ja kontrollsaadust sama koostisega ilma glütsiinamiidvesinikkloriidita. Lisaks põhikoostisosale sisaldasid tooted glütseriini, 1,2-heksaandiooli ja vett. Tabelis 1 on näidatud testitava produkti ja kontrollsaaduse koostis.

Test- ja kontrollproduktide tüüpilised HPLC-kromatogrammid on näidatud joonisel 1. Testsaadus, kuid mitte kontrollprodukt sisaldas glütsiinamiidvesinikkloriidi. Glütsiinamiidvesinikkloriidi piik HPLC kromatogrammil on näidatud noolega. Lisaks on joonisel 1 näidatud keemiline struktuur.

HPLC-s lisati naatrium 1-oktaansulfonaat liikuvasse faasi ioonisid siduva ainena, et parandada glütsiinamiidi protoneeritud vormi säilimist, mis muul viisil elueeriti pöördfaasilise oktadetsüül ränidioksiidi kolonnist väga kiiresti. UV-kiirgust neelava amiidsideme olemasolu glütsiinamiidvesinikkloriidis võimaldas tuvastamist lainepikkusel 210 nm.

3.2. Esmane nahaärrituse test

selles testis osales testi algfaasis 31 naissoost katsealust, kes vastasid kaasamise ja välistamise kriteeriumidele; aga üks katsealune langes välja (DSA-19046-10; vabatahtlik loobumine), seega täitis kogu testi kokku 30 katsealust. Uuritavate keskmine vanus oli 40,43 ± 7,13 aastat, vanim osaleja oli 50-aastane ja noorim 21-aastane.

Toodete nahaohutuse hindamiseks viidi läbi oklusiivne plaastri test. Nagu on näidatud tabelis 2, ei näidanud katsealused, keda raviti testiga, kontrolltootega ja võrdlustootega, kahel erineval vaatlusajal naha kõrvaltoimeid. Seetõttu oli ravivastuse skoor kõigil juhtudel null, mis näitas, et nende toodete esmane nahaärrituse potentsiaal on väga madal ja neid võib klassifitseerida kui "mitteärritav/kergelt ärritav".

3.3. Naha depigmentatsiooni efektiivsuse test

Test algas 23 naissoost katsealusega, kuigi kaks neist eemaldati hiljem (nr 16, vabatahtlik tagasivõtmine; nr 18, protokolli mittejärgimine), seega oli lõplik osalejate arv 21. Teave katsealuste kohta koguti küsimustikupõhises küsitluses. Uuritavate keskmine vanus oli 48,43 ± 4,14 aastat; vanim osaleja oli 55-aastane; ja noorim oli 41-aastane. Tabelis 3 on näidatud uuritavate nahaomadused.

Testitava toote depigmentatsioonitõhususe hindamiseks viidi läbi topeltpime test. Ei testija ega katsealune ei suutnud eristada uuritavat toodet kontrolltootest ning kliiniline uuring viidi läbi ettenähtud meetodil. Katsealused kandsid testitavat toodet ja kontrolltoodet näo vasakule või paremale poolele kaks korda päevas kaheksa nädala jooksul ning külastasid instituuti iga kahe nädala järel naha hindamiseks.

Nahavärvi parameetrite instrumentaalseks hindamiseks kasutati kahte tüüpi seadmeid. Esiteks mõõdeti heksameetriga melaniini ja erüteemi indeksit. Nagu on näidatud tabelis 4 ja joonisel 2a, täheldati melaniiniindeksi olulist vähenemist kahe, nelja, kuue ja kaheksa nädala jooksul nii test- kui ka kontrollrühmas võrreldes algväärtustega enne testi algust. Kui testitavat toodet kasutati kaks, neli, kuus ja kaheksa nädalat, oli melaniini indeksi oluline langus võrreldes algväärtusega. Melaniiniindeksi vähenemise määr oli kahe nädala pärast 1,48%, nelja nädala pärast 2,87%, kuue nädala pärast 3,92% ja kaheksa nädala pärast 5,88%. Olulised erinevused leiti test- ja kontrollrühmade vahel kuue ja kaheksa nädala jooksul pärast testi algust. Teisest küljest ei olnud erüteemiindeksis muutusi ei testrühmas ega kontrollrühmas võrreldes algväärtustega, mis mõõdeti enne testi algust. testi algus (tabel 5 ja joonis 2b).

Samuti kasutasime spektrofotomeetrit L*, a* ja b* väärtuste mõõtmiseks, mis esindasid vastavalt naha heledust, punetust ja kollasust. Nagu on näidatud tabelis 6 ja joonisel fig 2c, täheldati kahe, nelja, kuue ja kaheksa nädala möödudes olulist naha heleduse suurenemist (L* väärtus) nii katse- kui ka kontrollrühmas võrreldes algväärtustega enne testi algust. Võrreldes algväärtustega suurendas testtoode L* väärtust kahe nädala pärast 0,88 protsenti, nelja nädala pärast 0,85 protsenti, kuue nädala pärast 1,16 protsenti ja kaheksa nädala pärast 1,40 protsenti . Olulised erinevused leiti katsetoote ja kontrolltoote vahel kuus ja kaheksa nädalat pärast testi algust. Teisest küljest, kuigi nii testrühmas kui ka kontrollrühmas esines mõningaid muutusi * ja b* väärtustes võrreldes enne testi alustamist, ei olnud need muutused järjepidevad (tabelid 7 ja 8, joonis 2d, e). * väärtus langes ajutiselt teisel nädalal kontrollrühmas ning teisel ja kaheksandal nädalal testrühmas. Testrühma* väärtus oli kaheksandal nädalal madalam kui kontrollrühmal. B* väärtus langes kaheksandal nädalal ainult kontrollrühmas ning kontroll- ja testrühmade vahel ei täheldatud erinevust b* väärtuses.

Nahavärvi väljendamiseks kasutati L* ja b* väärtuste põhjal arvutatud ITA◦. Mida kõrgem on ITA◦, seda heledam on nahavärv. Nagu on näidatud tabelis 9 ja joonisel 2f, täheldati nii testrühmas kui ka kontrollrühmas kahe nädala, nelja nädala, kuue nädala ja kaheksa nädala möödudes olulisi muutusi nahavärvis võrreldes algväärtustega enne testi algust. Võrreldes algväärtustega, suurendas testtoode ITA◦ kahe nädala pärast 3,28%, nelja nädala pärast 4,43%, kuue nädala pärast 6,48% ja kaheksa nädala pärast 8,07%. Kaheksa nädalat pärast testi algust leiti testitava toote ja kontrolltoodete vahel ka oluline erinevus ITA◦-s.

Nagu on näidatud tabelis 10 ja joonisel fig 3a, ei muutunud nahapiirkond, kuhu kontrolltoode kanti.pigmentatsioonkaheksa nädala jooksul, kuid pigmentatsiooni määr nahapiirkonnas, kuhu testitavat toodet kasutati, vähenes kuue ja kaheksa nädala pärast oluliselt. Kui katsetoodet kasutati kuue ja kaheksa nädala jooksul, vähenes pigmentatsiooniaste vastavalt 1,42% ja 3,45% võrreldes algväärtusega enne testi algust. Kaheksandal nädalal pärast testi algust oli ka oluline erinevus kraadidespigmentatsioontesttoote ja kontrolltoote vahel. Joonisel 3b on kujutatud kahe tüüpilise inimsubjekti kujutised.

Testijate poolt kaheksa nädala jooksul tuvastatud katsealused ei teatanud test- ja kontrolltoodetele mingeid kõrvaltoimeid.

4. Arutelu

See uuring on esimene, mis teatas inimese näonahale kantud glütsiinamiidvesinikkloriidi ohutusest ja depigmentatsioonitõhususest. Esmases nahaärrituse testis ei põhjustanud 10 protsenti glütsiinamiidvesinikkloriidi sisaldav testtoode 30 inimesel mingeid kõrvaltoimeid. Topeltpimedas efektiivsuse testis kasutati testitavat toodet ja kontrollprodukti vastavalt näo vasakul ja paremal küljel 21 isikul, kes olid juhuslikult jagatud erinevatesse rühmadesse. Kaheksanädalase katseperioodi jooksul muutusid nahapiirkonnad, kuhu testitavat toodet kasutati, heledamaks kui kontrolltoote pealekandmise kohad. Mõlema astme visuaalne hindaminepigmentatsioonning melaniiniindeksi, naha pinguloleku ja nahavärvi instrumentaalne hindamine toetas glütsiinamiidvesinikkloriidi sisaldava testitava toote depigmentatsiooni efektiivsust.

Toote inimnaha depigmentatsiooni efektiivsust saab hinnata kunstliku parkimise ja loodusliku hüperpigmentatsiooni mudelite abil [34–36]. Käesolevas uuringus kasutatakse looduslikkupigmentatsioonNahavärvi parameetrite muutusi test- ja kontrollrühmades testi kaheksa nädala jooksul jälgiti kahenädalaste intervallidega. Kontrollprodukt, mis ei sisaldanud glütsiinamiidvesinikkloriidi, põhjustas ka olulisi muutusi melaniini indeksis, L* väärtuses ja ITA-s kahe nädala jooksul pärast testi algust. Selle täpne põhjus on praegu ebaselge ja muutustele võisid kaasa aidata mitmed tegurid. Kontrolltootes sisalduvad koostisosad, nagu glütseriin ja 1,2-heksaandiool, võivad muuta naha pinna seisundit, parandades puhtust, läiget ja heledust. Sellegipoolest ei olnud ülalnimetatud parameetrite täiendavad muutused kahe nädala pärast kontrollrühmas olulised. Lisaks astepigmentatsioon(visuaalselt hinnates) ei vähendanud kontrolltoode oluliselt, võrreldes enne testi algust. Seetõttu leitakse, et kontrolltootel on väga nõrknaha heledamaks muutminemõju, kui see on olemas.

Testtoote puhul kippus lisaks melaniini indeksi, L* väärtuse ja ITAo olulisele muutusele kahe nädala jooksul pärast testi algust muutus järk-järgult suurenema.pigmentatsioonjõudis algväärtusest oluliselt madalamale tasemele.See viitab sellele, et katsetoote kasutamine võib parandada nahavärvi võrreldes toote puudumisega.

Alates testi alguse kuuendast nädalast oli melaniiniindeksi ja L* väärtuses testrühma ja kontrollrühma vahel oluline erinevus ning kaheksa nädala pärast oli erinevus ka ITAo-s japigmentatsioon. Need tulemused kinnitavad järeldust, et test- ja kontrolltoodete efektiivsuse erinevus oli tingitud glütsiinamiidvesinikkloriidi olemasolust või puudumisest; seetõttu oli testitava toote naha depigmentatsiooni efektiivsus tingitud selle põhikomponendist, glütsiinamiidvesinikkloriidist.

Selles uuringus kanti näole mittekootud kangalehtedesse immutatud glütsiinamiidvesinikkloriidi lahust ja saadi positiivseid tulemusi selle naha depigmentatsiooni efektiivsuse kohta. See pealekandmismeetod osutus tõhusaks, kuid tasub uurida, kas koostist ja pealekandmisviisi muuta. parandaks toote efektiivsust. Lisaks paiksele nahale manustamisele tuleb uurida suukaudseid manustamis- ja süstimismeetodeid, et määrata kindlaks nende kliiniline efektiivsus tulevastes uuringutes.

Test- ja kontrollrühmade vaheliste erinevuste statistiline analüüs viidi läbi korduvate mõõtmiste ANOVA abil koos paarisvõrdlustega. Lisaks on rühmadevahelised erinevused melaniini indeksi, L* väärtuse, ITAo japigmentatsioonkraadid olid pärast 8-nädalast ravi statistiliselt olulised. Käesolevas uuringus oli 10 protsenti glütsiinamiidvesinikkloriidi sisaldava testitava toote melaniiniindeksi vähenemise määr 5,88 protsenti (alustase 184,03 ± 22,70; kaheksas nädal 173,30 ± 20,79). Watanabe et al. teatatudnaha valgendaminepaikse oksüdeeritud glutatiooni mõju topeltpimedas ja platseebokontrolliga kliinilises uuringus kolmekümnel tervel naisel [36]. 2 protsenti oksüdeeritud glutatiooni sisaldava testtoote paikne ravi 10 nädala jooksul vähendas melaniiniindeksit 10,7 protsenti (algtase 272,77 ± 26,17; 10. nädal 243,47 ± 26,31) [36]. Kuigi katsetingimused, nagu melaniiniindeks algväärtus, testitav annus ja testi kestus, on üksteisest erinevad, viitab nende kahe uuringu kaudne võrdlus sellele, et glütsiinamiidvesinikkloriidi võib kasutada hüpopigmenteeritud ainena. Täiendavad uuringud on vaja optimeerida selle annust, koostist ja pealekandmismeetodit, et saavutada parem tulemus naha depigmentatsioonis.

Püsiseisundi nahavärv peegeldab melanotsüütidest tarnitud melaniini koguse suhtelist suhet naha keratiini koorumise tõttu kaotatud melaniini kogusesse. Seetõttu on melaniini sünteesi pärssimine või melaniini kadumise suurendamine kaks võimalikku hüperpigmentatsiooniteraapia strateegiat. Glütsiinamiidvesinikkloriid on eelmise strateegia jaoks kasulik aine, kuna see võib inhibeerida melaniini sünteesi, vähendades TYR-i ja teiste melanotsüütides melaniini sünteesis osalevate ensüümide taset [27]. Kui jah, võib glütsiinamiidvesinikkloriidi kombineerimine nahka koorivate ainete, näiteks glükoolhappega [37,38] kaasa tuua depigmentatsioonitõhususe edasise suurenemise tänu erinevate toimemehhanismidega ainete sünergiale.

Paljud olemasolevad depigmentatsiooniained vähendavad melaniini sünteesi, inhibeerides rakusisese signaali ülekandeprotsessi, mis vastutab TYR geeni ekspressiooni eest, või pärssides otseselt TYR aktiivsust [39, 40]. Kuid glütsiinamiidvesinikkloriid võib takistada hormooni seondumist selle retseptoritega ja blokeerida rakusiseste signaaliülekande protsesside käivitamist, inhibeerides seeläbi TYR-i ekspressiooni [27]. Seega võib glütsiinamiidvesinikkloriid toimida erineva mehhanismi kaudu kui paljud olemasolevad depigmenteerivad ained ja selle kasutamisel koos teiste depigmenteerivate ainetega on oodata sünergistlikku toimet.

Proopiomelanokortiinist pärinevad peptiidhormoonid, nagu -MSH, -MSH ja adrenokortikotrofikormoon (ACTH), reguleerivad nahkapigmentatsioon, põletik ja fibroos [8, 30, 41]. Nende agonistide seondumisel MC1R-ga ning adenülaattsüklaasi (AC) ja proteiinkinaasi A (PKA) järjestikustel aktiveerimistel fosforüleeritakse CREB transkriptsioonifaktor, mis omakorda indutseerib MITF-i ekspressiooni [42]. MITF-i ekspressiooni indutseerivad ka teised signaalirajad, mis hõlmavad Wnt/Frizzled/glükogensüntaasi kinaasi 3/-kateniini kaskaadi ja tüvirakkude faktori/c-Kit/mitogeeniga aktiveeritud valgu kinaasikaskaadi [43,44]. MITF ei juhi mitte ainult melanogeensete ensüümide geeniekspressiooni, vaid ka melanosoomide biogeneesi [2,45].

Eelmises uuringus tuvastatud madala molekulmassiga melanogeensete peptiidide hulka kuuluvad FRWG-NH2,RWG-NH2, WG-NH2 ja G-NH2 (glütsinamiid), millel on ühised järjestused -MSH-ga (atsetüül-SYSMEHFRWGKPV-NH2) [27]. . Eeldati, et need madala molekulmassiga anti-melanogeensed peptiidid võivad konkureerivalt häirida -MSH seondumist retseptoriga, blokeerides seeläbi rakusiseste signaaliülekande protsesside initsiatsiooni (joonis 4). Kui madalmolekulaarsed antimelanogeensed peptiidid toimivad MC1R antagonistidena, võivad nad pärssida MC1R aktivatsiooni teiste agonistide, nagu -MSH ja ACTH poolt, ning mõjutada muid füsioloogilisi ilminguid, mis on seotud põletiku ja fibroosiga, samutipigmentatsioon [30].

Kuigi toimemehhanismi kohta on vaja otsesemaid tõendeid, näitab käesolev uuring, et glütsiinamiidi vesinikkloriidsoola vorm, melanogeensete peptiidide väikseim oluline osa, avaldas naha depigmentatsioonitõhusust, põhjustamata seejuures ebainimlikel inimestel nahaärritust. Teiste melanogeensete tetrapeptiidide, tripeptiidide ja ülalmainitud dipeptiidide depigmentatsioonitõhususe uurimiseks on vaja täiendavaid uuringuid.

Kokkuvõtteks võib öelda, et käesolev uuring viitab sellele, et glütsiinamiidvesinikkloriidil on suur potentsiaal kasutada naha hüperpigmentatsiooni kontrolli all hoidmiseks.

Viited

1. Costin, GE; Kuulmine, VJ Inimese naha pigmentatsioon: Melanotsüüdid moduleerivad nahavärvi vastusena stressile.FASEB J. 2007, 21, 976–994. [CrossRef] [PubMed]

2. Schiaffino, MV Signaling radad melanosoomi biogeneesis ja patoloogias. Int. J. Biochem. Cell Biol. 2010, 42, 1094–1104. [CrossRef] [PubMed]

3. Cardinali, G.; Ceccarelli, S.; Kovacs, D.; Aspite, N.; Lotti, LV; Torrisi, MR; Picardo, M. Keratinotsüütide kasvufaktor soodustab melanosoomi ülekandmist keratinotsüütidesse. J. Uurimine. Derm. 2005, 125, 1190–1199. [CrossRef] [PubMed]

4. Epstein, JH Fotokartsinogenees, nahavähk ja vananemine. J. Am. Acad. Derm. 1983, 9, 487–502. [CrossRef]

5. Slominski, A.; Kim, TK; Brozyna, AA; Janjetovic, Z.; Brooks, DL; Schwab, LP; Skobowiat, C.; Jozwicki, W.; Seagroves, TN Melanogeneesi roll melanoomi käitumise reguleerimisel: melanogenees stimuleerib HIF-1alfa ekspressiooni ja HIF-sõltuvaid kaasnevaid radu. Arch. Biochem. Biophys. 2014 563, 79–93. [CrossRef]

6. Slominski, RM; Zmijewski, MA; Slominski, AT Melaniini pigmendi roll melanoomi korral. Exp. Derm.2015, 24, 258–259. [CrossRef]

7. Fistarol, SK; Lin, PH Pigmentatsioonihäired. J. Dtsch. Dermatol. Ges. 2010, 8, 187–201. [CrossRef]

8. Slominski, A.; Tobin, DJ; Shibahara, S.; Wortsman, J. Melaniini pigmentatsioon imetajate nahas ja selle hormonaalne regulatsioon. Physiol. Rev. 2004, 84, 1155–1228. [CrossRef]

9. Rose, PT Pigmendihäired. Med. Clin. N. Am. 2009, 93, 1225–1239. [CrossRef]

10. Callender, VD; St Surin-Lord, S.; Davis, EK; Maclin, M. Põletikujärgne hüperpigmentatsioon: etioloogilised ja terapeutilised kaalutlused. Olen. J. Clin. Derm. 2011, 12, 87–99. [CrossRef]

11. Ganju, P.; Nagpal, S.; Mohammed, MH; Nishal Kumar, P.; Pandey, R.; Natarajan, VT; Mande, SS; Gokhale, RS Mikroobikoosluse profiilide koostamine näitab düsbioosi vitiliigopatsientide kahjustuse nahas. Sci. Rep.2016, 6, 18761. [CrossRef] [PubMed]

12. Spritz, RA; Andersen, GH Vitiligo geneetika. Derm. Clin. 2017, 35, 245–255. [CrossRef] [PubMed]

13. Pavlic, V.; Brkic, Z.; Marin, S.; Cicmil, S.; Gojkov-Vukelic, M.; Aoki, A. Gingival melanin depigmentation byEr: YAG laser: A kirjanduse ülevaade. J. Cosmet. Laser Ther. 2018, 20, 85–90. [CrossRef] [PubMed]

14. Saxena, S.; Andersen, RM; Maibach, HI Kliinilistes uuringutes ilmnenud lõksud näitavad vajadust hästi talutavate ja tõhusamate depigmenteerivate ainete järele. J. Dermatol. Ravida. 2015, 26, 440–450. [CrossRef] [PubMed]

15. Levy, LL; Emer, JJ Kosmeetilise kamuflaaži emotsionaalne kasu näonahahaiguste ravis: Isiklik kogemus ja ülevaade. Clin. Kosmeetika. Uurige. Derm. 2012, 5, 173–182.

16. Chu, CH; Chou, CY; Cheng, YP Kohene pigmentatsioon pärast laserravi. JAMA Derm. 2015, 151 1021–1022. [CrossRef]

17. Borelli, C.; Ursin, F.; Steger, F. Keemilise koorimise tõus 19. sajandi Euroopa dermatoloogias: ainete, koostiste ja ravimeetodite tekkimine. J. Eur. Acad. Derm. Venereol. 2020. [CrossRef]

18. Jow, T.; Hantash, BM Hüdrokinoonist põhjustatud depigmentatsioon: juhtumiaruanne ja kirjanduse ülevaade. Dermatiit 2014, 25, e1–e5. [CrossRef]

19. Desmedt, B.; Courselle, P.; De Beer, JO; Rogiers, V.; Grosber, M.; Deconinck, E.; De Paepe, K. Nahavalgendusainete ülevaade koos ülevaatega Euroopa ebaseaduslikust kosmeetikaturust. J. Eur. Acad. Derm. Venereol.2016, 30, 943–950. [CrossRef]

20. Kim, M.; Park, J.; Laul, K.; Kim, HG; Koh, JS; Boo, YC Taimeekstraktide sõelumine inimese türosinaasi inhibeeriva toime suhtes. Int. J. Cosmet. Sci. 2012, 34, 202–208. [CrossRef]

21. Park, J.; Boo, YC Resveratrooli eraldamine Viti vinifera caulis'est ja selle tugev humantürosinaasi inhibeerimine. Evid. Põhinev komplement. Altern. Med. 2013, 2013, 645257. [CrossRef] [PubMed]

22. Kwak, JY; Seok, JK; Suh, HJ; Choi, YH; Hong, SS; Kim, DS; Boo, YC Phyllospadix iwatensis makinost eraldatud luteoliin7-sulfaadi melanogeenne toime. Br. J. Derm. 2016, 175, 501–511. [CrossRef] [PubMed]

23. Lee, SW; Kim, JH; Song, H.; Seok, JK; Hong, SS; Boo, YC Luteoliin 7-Sulfaat nõrgendab melaniini sünteesi, inhibeerides CREB- ja MITF-vahendatud türosinaasi ekspressiooni. Antioksüdandid 2019, 8, 87. [CrossRef] [PubMed]

24. Malerich, S.; Berson, D. Järgmise põlvkonna kosmeetikatooted: uusimad peptiidid, kasvufaktorid, tsütokiinid ja tüvirakud. Derm. Clin. 2014, 32, 13–21. [CrossRef]

25. Zhang, L.; Falla, TJ Cosmeceuticals ja peptiidid. Clin. Derm. 2009, 27, 485–494. [CrossRef]

26. Seok, JK; Lee, SW; Choi, J.; Kim, YM; Boo, YC Uute antimelanogeensete heksapeptiidide tuvastamine sünteetilise peptiidi kombinatoorse raamatukogu positsioonilise skaneerimise kaudu. Exp. Derm. 2017, 26, 742–744. [CrossRef]

27. Kim, JH; Seok, JK; Kim, YM; Boo, YC Väikeste peptiidide ja glütsiinamiidi tuvastamine, mis inhibeerivad melaniini sünteesi, kasutades positsiooniliselt skaneerivat sünteetiliste peptiidide kombinatoorset raamatukogu. Br. J. Derm. 2019, 181 128–137. [CrossRef]

28. Pinilla, C.; Appel, JR; Blanc, P.; Houghten, RA Kõrge afiinsusega peptiidligandide kiire identifitseerimine sünteetiliste peptiidide kombinatoorsete raamatukogude positsioonilise skaneerimise abil. Biotechniques 1992, 13, 901–905.

30. Rano, TA; Timkey, T.; Peterson, EP; Rotonda, J.; Nicholson, DW; Becker, JW; Chapman, KT; Thornberry, NAA kombinatoorne lähenemine proteaasi spetsiifilisuse määramiseks: rakendamine interleukiini-1beeta konverteerivale ensüümile (ICE). Chem. Biol. 1997, 4, 149–155. [CrossRef]

30. Slominski, AT; Slominski, RM; Zmijewski, MA 1. tüüpi melanokortiini retseptori sihtimine väikeste peptiididega.Br. J. Derm. 2019, 181, 17–18. [CrossRef]

31. Frosch, PJ; Kligman, AM Seebikambri test. Uus meetod seepide ärrituse hindamiseks. J. Am. Acad. Derm. 1979, 1, 35–41. [CrossRef]

32. Pierard, GE EEMCO juhend nahavärvi hindamiseks. J. Eur. Acad. Derm. Venereol. 1998, 10, 1–11.[CrossRef]

33. Wilkes, M.; Wright, CY; du Plessis, JL; Reeder, A. Fitzpatrick nahatüüp, individuaalne tüpoloogianurk ja melaniiniindeks Aafrika populatsioonis: sammud universaalsete naha valgustundlikkuse hindamiste suunas. JAMA Derm. 2015, 151, 902–903. [CrossRef] [PubMed]

34. Boo, YC p-kumaarhape kosmeetikatoodete toimeainena: ülevaade, mis keskendub selle melanogeensetele toimetele. Antioksüdandid 2019, 8, 275. [CrossRef] [PubMed]

35. Boo, YC Resveratrooli ja selle analoogide tõhusus inimese naha heledamaks muutmisel: alates in vitro uuringutest kuni kosmeetiliste rakendusteni. Antioksüdandid 2019, 8, 332. [CrossRef] [PubMed]

36. Watanabe, F.; Hashizume, E.; Chan, GP; Kamimura, A. Paikselt kasutatava oksüdeeritud glutatiooni naha valgendav ja naha seisundit parandav toime: Topeltpime ja platseebokontrollitud kliiniline uuring tervetel naistel. Clin. Kosmeetika. Uurige. Derm. 2014, 7, 267–274. [CrossRef]

37. de Villiers, MM; Narsai, K.; van der Watt, JG A-hüdroksühappeid sisaldavate kombineeritud kreemide füüsikalis-keemiline stabiilsus. Int. J. Pharm. Compd. 2000, 4, 72–75.

38. Sharad, J. Glükoolhappe koorimine – praegune ülevaade. Clin. Kosmeetika. Uurige. Derm. 2013, 6, 281–288. [CrossRef]

39. Pillaiyar, T.; Manickam, M.; Namasivayam, V. Naha valgendavad ained: türosinaasi inhibiitorite meditsiiniline keemia perspektiiv. J. Enzym. Inhib. Med. Chem. 2017, 32, 403–425. [CrossRef]

40. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Hassan Khan, MT; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AAA põhjalik ülevaade türosinaasi inhibiitoritest. J. Enzym. Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 279–309. [CrossRef]

41. Steinhoff, M.; Stander, S.; Seeliger, S.; Ansel, JC; Schmelz, M.; Luger, T. Nahaneurogeense põletiku kaasaegsed aspektid. Arch. Derm. 2003, 139, 1479–1488. [CrossRef] [PubMed]

42. Busca, R.; Ballotti, R. Tsükliline AMP on naha pigmentatsiooni reguleerimise võtmesõnum. Pigment Cell Res.2000, 13, 60–69. [CrossRef] [PubMed]

43. Tachibana, M. MITF: Pigmendirakkude jaoks voolav voog. Pigment Cell Res. 2000, 13, 230–240. [CrossRef][PubMed]44. Ebanks, JP; Wickett, RR; Boissy, RE Naha pigmentatsiooni reguleerivad mehhanismid: jume värvuse tõus ja langus. Int. J. Mol. Sci. 2009, 10, 4066–4087. [CrossRef]

45. Simon, JD; Peles, D.; Wakamatsu, K.; Ito, S. Praegused väljakutsed melanogeneesi mõistmisel: sildkeemia, bioloogiline kontroll, morfoloogia ja funktsioon. Pigment Cell Melanoma Res. 2009, 22, 563–579. [CrossRef]