Kurkumiini antioksüdantne toime 2. osa

Palun võtke ühendustoscar.xiao@wecistanche.comrohkem informatsiooni

MDA, GSH, GSSG, GSH/GSSG ja CAT muutujate keskmises mõjus ei olnud kurkumiini, rutiini ning kurkumiini ja rutiini kombinatsiooniga töödeldud rottide rühmades olulist erinevust. Neid tulemusi toetasid madalad F väärtused ja ravi muutustest tingitud väiksem kõikumine (tabel 3).

MDA ja CAT markerite osas oli pehmete kudede ja vere vahel korrelatsioon (joonis 4).

MDA tase langes pärast rutiini ja kurkumiini manustamist oluliselt võrreldes platseeborühmaga (DPP). Kurkumiini ja rutiini (DPCR) kombinatsioonil oli positiivsem mõju MDA tasemele võrreldes lihtsalt rutiiniga (DPR) ja võrreldav toime kui ainult kurkumiiniga (DPC). Kurkumiini ja rutiini (DPCR) kombinatsioon suurendas CAT taset võrreldes ainult kurkumiini (DPC) või rutiiniga (DPR). Kurkumiini manustamisel oli positiivsem mõju kui rutiini manustamisel.

Kui analüüs viidi läbi koetasandil, ilmnes oluline erinevus MDA ja CAT taseme vahel kõigi viie rotirühma puhul (tabel 4).

Igemekoe tasemel esines olulisi erinevusi MDA väärtuste vahel, võrreldes rühma 1 ja kõigi teistega, sarnaselt CAT-ga (tabel 5).

3. Arutelu

Selle uuringu tulemused näitasid, et vere ja igemete kudede MDA tasemed ja CAT aktiivsused olid kõigis rühmades korrelatsioonis.

Loommudelite kasutamine parodondiuuringutes on vajalik samm enne kliiniliste uuringute alustamist uute biomaterjalide ja ravimeetoditega. Rott on parodondihaiguste osas kõige põhjalikumalt uuritud närilinepatogenees, sest see on väike, kergesti hooldatav ja ei ole kallis ning hambaigeme ehitus on üsna sarnane inimestel täheldatuga, millel on madal igemevagu ja ühendusepiteel kinnitub tsemendi külge. Rottide kriitiliste parodondi defektide kirurgiline mudel on valideeritud, mis võimaldab katsetada uusi biomaterjale koos kasvufaktorite või mesenhümaalsete tüvirakkudega [29, 30]. Kõige laialdasemalt kasutatavad tüved on Wistar või Sprague-Dawley, seega kasutati meie uurimistöös 50 isast Wistari albiinorotti.

Lisateabe saamiseks klõpsake siin

Periodontaalne haigus on multifaktoriaalne haigus, mida põhjustab igemealuses naastul paiknev mitmekesine mikroobne floora. Praegune parodondihaiguste ravi keskendub hammaste mikroobikoormuse vähendamisele ja igemete tervise taastamisele kirurgiliste ja mittekirurgiliste parodontaalsete protseduuride abil [31]. Kurkumiinil, kurkumi põhikomponendil, on tõestatud põletikuvastane, antimikroobne ja antioksüdantne toime [32-34]. In vitro uuringud [35, 36], loomkatsed [27, 37] ja kliinilised uuringud [38, 39] on näidanud, et kurkumiini ja parodontiidi arengu vahel on positiivne seos.

Epidemioloogilised uuringud on kinnitanud, et diabeet on parodontiidi oluline riskitegur ning parodontiidi risk on suurem, kui.glükeemilinekontroll on halb; halvasti kontrollitud diabeediga inimestel (kellel on kõige suurem risk muude makro- ja mikrovaskulaarsete tüsistuste tekkeks) on suurenenud periodontiidi ja alveolaarse luukoe kadumise risk[40,41].

Rutiin, tsitrusviljade flavonoidglükosiid, mida leidub puuviljades (apelsin, greip, sidrun, õun ja marjad), on paljude multivitamiinipreparaatide ja taimsete ravimite üks peamisi koostisosi [42]. Tänu oma antioksüdantsetele ja põletikuvastastele omadustele ning tsütoprotektiivsele toimele, mis on seotud vananemis- ja vähivastase toimega, on sellel mõned dokumenteeritud farmakoloogilised toimed[43,44]. Rutiini kasulik mõju glükeemilisele seisundile jamikrovaskulaarneja diabeediga seotud makrovaskulaarsed tüsistused on tingitud selle hüpolipideemilistest omadustest. Glükoosi kontsentratsiooni vähenemist võib seletada rutiini toimega rakumembraanidele ja glükoosi rakkudesse sisenemise hõlbustamisega, vähendades seega glükoosi vabanemist verre [45].

Cistanche võib parandada immuunsust

Selles uuringus uurisime oksüdatiivse stressi ning kurkumiini ja rutiini mõju eraldi ja segus eksperimentaalselt esile kutsutud parodontiidi etiopatoloogiale diabeetilistel rottidel.

Et saavutada eksperimentaalne parodontiidi seisund kiiremini, kui parodontiit tavaliselt esineb, asetati kahepoolsete teise alalõualuu roti purihammaste ümber roostevabast terasest ligatuur läbimõõduga 0,1 mm[46]. Ligatuuri paigutamine roti purihammaste ümber soodustab põletikulise väljakutse esinemistneutrofiilid, T- jaB-lümfotsüüdid, haavandid ja epiteeli kinnituskoha apikaalne migratsioon[47].

Kasvab huvi antioksüdantide ja periodontaalse haiguse vahelise seose vastu. Seetõttu kasutatakse selles uuringus kurkumiini ja rutiini ühe antioksüdandina ja nende mõlema seguna. Kurkumiini periodontia kasutamist on hinnatud kliinilistes uuringutes [38, 39], loomkatsetes [37] ja in vitro uuringutes [35].

Oksüdatiivse stressi määramiseks hindasime algtasemest 70. päevani selliseid parameetreid nagu MDA, GSH, GSSC, GSH/GSSC ja CAT. Leidsime, et nende muutujate puhul on ravimata rühma ja kolme ravirühma vahel oluline erinevus, kuid rühmade DPC (töödeldud kurkumiiniga) ja DPR (töödeldud rutiiniga), DPC (töödeldud) vahel ei olnud olulist erinevust. kurkumiiniga) ja DPCR (töödeldud kurkumiini ja rutiiniga) ja DPR (töödeldud rutiiniga) ja DPCR (töödeldud kurkumiini ja rutiiniga).

Seerumi MDA suurenemine näitas, et piisav oksüdatiivne stress võib põhjustada vabade radikaalide poolt vahendatud lipiidkomponendi peroksüdatsiooni rakumembraanis; seega on MDA hea näitaja oksüdatiivse stressi hindamiseks degeneratiivsete haiguste, näiteks suhkurtõve korral[48]. Keskmine GSH, GHH/GSSC ja CAT vähenes rühmades 2, 3, 4 ja 5 võrreldes kontrollrühmaga oluliselt. Tomofuji jt.[49] teatasid, et GSH tase vähenes ja alveolaarne luukadu ja polümorfsete tuumaleukotsüütide infiltratsioon suurenes igemete kudedes, ja de AraujoJunior et al. [50] teatasid, et parodontiidi koes MDA tase tõusis ja GSH tase langes.

Loomkatsed ja piiratud kliinilised uuringud on näidanud positiivseid ja paljutõotavaid tulemusi, kuid enne kurkumiini laialdast kliinilist kasutamist parodontiidihaigetel on veel piiranguid ja ettevaatusabinõusid. Kurkumiin lahustub vees halvasti ja tuleb lahustada etanoolis või dimetüülsulfoksiidis, selle süsteemne biosaadavus on pärast suukaudset manustamist madal ning see imendub halvasti ja metaboliseerub seedetraktis kiiresti [51,52].

Kurkumiini ja rutiini koostiste ja manustamissüsteemide parandamiseks on vaja täiendavaid uuringuid. Kurkumiini puhul on paljulubavaid tulemusi, et kiirendada imendumisprotsessi, aeglustada ainevahetust [25] ja suurendada selle biosaadavust nanoosakeste [53], liposoomide [54], mitsellide [55] ja fosfolipiidide komplekside[56] abil. ].

4. Materjalid ja meetodid

4.1. Kasutatud kemikaalid/ravimid

Streptozototsiin (STZ), glükoos, kurkumiin (C), rutiin (R), 2-tiobarbituurhape, o-ftaalaldehüüd, vesinikperoksiid ja kaltsiumfosfaatpuhver osteti ettevõttelt Sigma Aldrich Chemicals GmbH (München, Saksamaa).STZ ja glükoos lahustati destilleeritud vees. C ja R lahustati mineraalõlis 10 umol/l.

4.2.Katseloomad

Viiskümmend isast Wistari albiinorotti (8 nädala vanused ja keskmise kaaluga ± SD 220 ± 20 g), mis osteti Cluj-Napoca, Rumeenia "Iuliu Hatieganu" meditsiini- ja farmaatsiaülikooli loomaosakonnast viidi üle BIOCOMi uurimiskeskusesse. füsioloogia osakond, Cluj Napoca, Rumeenia. Loomi peeti kontrollitud keskkonnas temperatuuril 21 ± 2 kraadi, 70 protsenti ± 4 protsenti niiskust ja vähem kui 12- h pimedas/12- h valgusperioodis, 5 puuri kohta. Neid toideti standardse graanulilabori dieediga ja neile anti ad libitum vett. Katse algas pärast 1-nädalast aklimatiseerumisperioodi ja protokolli kiitis heaks meditsiini- ja farmaatsiaülikooli "lulu Hatieganu" loomade heaolu eetikakomitee nr. 172/13. juuni 2019 vastavalt Teaduslikel eesmärkidel loomade hooldamise ja kasutamise juhised, Laboratory Animal Research National Advisory Committee, 2004. 4.3. Suhkurtõve esilekutsumine

Esimesel päeval pärast im (intramuskulaarset) anesteesiat ketamiini ksülasiini kokteili (100 mg/kg kehamassi kohta (BW), ketamiini ja 10-mg/kg-1 kehamassi ksülasiini) süstimisega indutseeriti diabeet rotid rühmades 2-5. Neid manustati intravenoosse (intravenoosse) süstina sabaveeni STZ 30 mg kg -1 kehamassi, millele järgnes 6 tunni pärast glükoosi 30% ,2 ml looma kohta. Täiskasvanud rottidel põhjustab hüperglükeemiat streptozototsiin (STZ); toimemehhanism on pankrease rakkude selektiivne oksüdatiivse stressi hävitamine. Järelikult alandab see tsirkuleerivat insuliini, tõstab vere glükoosisisaldust ja põhjustab olulisi sümptomeid [57].

1. rühma loomad said ainult sama koguse kui ainult kontrollvehiik. 72 tunni pärast mõõdeti glükomeetriga sabaveenist kogutud veres glükeemiat. Rotid koos a<300 mg/dl="" glycemia="" level="" were="" readministered="" stz="" and="" glucose="" as="" stated="">

4.4.Parodontiidi esilekutsumine

Parodontiidi kiirendamiseks asetati interproksimaalsesse piirkonda apikaalselt hambakattu koguvad seadmed, nagu ortodontilised ligatuurid, mis suruti igemevagusse teise purihamba ümber, et hõlbustada naastude moodustumist, samuti häirida igemete epiteeli, suurendades osteoklastogeneesi ja luukoe moodustumist. kaotus[58,59] Ligatuuri asetamine võimaldas bakteritel ligatuuri ümber koguneda, põhjustades kiiret periodontiidi. Uuring viidi läbi hambasondi liigutamisega hamba kõikidel pindadel ja sondeerimisega 6 kohas – 3 bukaalsel ja 3 suu poolel. (hamba mesiaalne, tsentraalne ja distaalne). Tasku sügavus saavutas haripunkti 15 päeva pärast ja ligatuur kaotas kontakti periodontaalse tasku põhjaga, mis läks apikaalses suunas, vähendades seetõttu selle efektiivsust. Järelikult tuleb katse ajal ligatuuri apikaalselt lükata. Sügavaima tasku keskmine tasku sügavus oli 3,1 mm. Kui parodontiit kinnitati, eemaldati ligatuurid naastu või hambakivi lõhkumata.

Seda meetodit peeti sobivaks ägeda haiguse mudeliks[60]. Ainult ligatuuriga paigaldamine on parodontiidi esilekutsumiseks kõige levinum meetod (72,2 protsenti)[60]. 4.5. Rühmade jaotamine ja eksperimentaalne kavandamine

Wistari albiinorotid jagati juhuslikult 5 rühma: (1) (CONTROL) - kontrollrühm, (2) (DPP) - eksperimentaalselt esile kutsutud suhkurtõbi ja periodontiit, (3) (DPC) - eksperimentaalselt indutseeritud suhkurtõbi ja kurkumiiniga ravitud parodontiit. (C), (4) (DPR) - katseliselt indutseeritud suhkurtõbi ja rutiiniga ravitud periodontiit (R) ja (5) (DPCR) - eksperimentaalselt põhjustatud suhkurtõbi ja parodontiit, mida raviti Cand R-ga.

Pärast diabeedi ja periodontiidi paigaldamist said rühmade 3-5 rotid ravi C, R või kombineeritud raviga: rühmas 3 manustati C, 75 mg/kg kehamassi kohta roti kohta, rühmas 4 manustati R75 mg/ kg kehamassi roti kohta ja 5. rühmas võrdses vahekorras Cand R kombinatsioon, vastavalt 75 mg/kg kehamassi kohta. Rühm 2 sai ainult sama koguse sõidukit. Ravi viidi läbi suukaudse sondiga iga päev 10 nädala jooksul. Annuse valik põhines teistes sarnastes uuringutes kasutatud andmetel, milles käsitleti kurkumiini (15-90 mg/kg)[61-64] ja rutiini (25-100 mg/kg)[65 ] oksüdatiivse stressi parameetrite vähendamise kohta. 4.6. Vere- ja koeproovide kogumine ja analüüsid

Katse lõpus võeti pärast ketamiini ksülasiini kokteili (100 mg/kg kehamassi kohta ketamiini ja 10 mg/kg ksülasiini) intraperitoneaalset süstimist kõigi loomade retroorbitaalsest venoossest siinusest 5 ml verd ja mõõdeti oksüdatiivseid markereid. Koeproovid koguti ligeeritud hammaste ja homoloogsete kontrollhammaste igeme limaskestalt. Proove kasutati biokeemiliste oksüdatiivsete markerite mõõtmiseks.

Kudede fragmendid homogeniseeriti polütroni homogenisaatoriga (Brinkman Kinematica, Lucerne, Šveits) 3 minutit jääl fosfaatpuhverdatud soolalahuses (PBS) (pH 7,4) ja lisati vahekorras 1:4 (mass/maht). Suspensiooni tsentrifuugiti 300 x g ja 4 kraadi juures 5 minutit, et valmistada tsütosoolne fraktsioon. Homogenaatide valgusisaldust mõõdeti Bradfordi meetodil [66]. 4.7.Oksüdatiivse stressi biomarkerite määramine

MDA määrati fluoromeetrilise meetodiga 2-tiobarbituurhappega (TBA), mida on kirjeldanud Conti jt.[67].

Redutseeritud glutatiooni (GSH) ja oksüdeeritud glutatiooni (GSSG) taset mõõdeti fluoromeetriliselt, kasutades o-ftaalaldehüüdi [68]. Tulemused väljendati moolides/ml.

MDA hindamiseks igemeproovides määrati homogenaatide valgusisaldus Bradfordi meetodil [69], kasutades standardina veise seerumi albumiini. Igemekoe homogenaate kuumutati keevas veevannis 1 tund 75-mMK2HPO4,pH3, mis sisaldas 10-mM TBA-d. Pärast jahutamist ekstraheeriti lahust 3 ml n-butanooliga 0,6 ml TBA-s. MDA määrati spektrofluoromeetriliselt orgaanilises faasis, kasutades sünkroontehnikat ergastuse lainepikkusel 534 nm ja emissiooniga 548 nm. MDA teatati kui nmol/mg valku.

Katalaasi (CAT) aktiivsust homogenaatides ja rakulüsaatides mõõdeti reaktsioonisegus, mis sisaldas {{0}}mM vesinikperoksiidi 50-mM kaltsiumfosfaatpuhvris, pH 7,4. Ensüümi kogus, mis põhjustas selles süsteemis neeldumise vähenemise 0,43 25 kraadi minutis 240 nm juures, määratleti ühe katalaasi aktiivsuse ühikuna. Aktiivsus väljendati ühikuna valgu mg kohta.[70]4.8.Statistiline analüüs

Andmeid analüüsiti statistiliselt, kasutades ANOVA-d koos Scheffe testiga, et võrrelda kontroll- ja katserühmade olulisuse tasemeid. Kõik statistilised analüüsid viidi läbi tarkvara SPSS24 abil, Armonk, NY, USA. Väärtused p Väiksem või võrdne 0,05 peeti oluliseks.

5. Kokkuvõtted

Võib järeldada, et kurkumiini ja rutiini suukaudne manustamine, üksikult või kombineeritult, võib vähendada oksüdatiivset stressi nii igemete kudedes kui ka veres ning suurendada antioksüdantset seisundit hüperglükeemilise parodontiidi rottidel. Oksüdatiivset stressi modelleerides võivad need kaks antioksüdanti avaldada põletikku pärssivat toimet. Tulevased uuringud on vajalikud, et hinnata antioksüdantset toimet kohalikule põletikule võrreldes süsteemse põletikuga.

See artikkel on välja võetud dokumentidest Molecules 2021, 26, 1332