Uuring neerude toitmiseks ja yangi tugevdamiseks mõeldud Hiina taimse ravimi Cistanche Deserticola keemiliste koostisosade kohta
Mar 09, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com
Sissejuhatus
Cistanche deserticolaOrobanchaceae perekonda kuuluv Cistanche deserticola kuiv lihakas vars on magus, soolane ja soe. Sellel on neere toniseeriv, Yangi tugevdav, soolestikku niisutav ja soolestikku lõõgastav toime. Seda kasutatakse peamiselt impotentsuse, külma ja vöö- ja põlvevalu, viljatuse, soolestiku kuivuse ja kõhukinnisuse raviks. Samuti on teatatud Cistanche deserticola farmakoloogilistest toimetest.
Hiina traditsioonilise hiina meditsiini akadeemia traditsioonilise hiina meditsiini instituut on läbi viinud keemilisi ja farmakoloogilisi uuringuidCistanche deserticola. On tõestatud, et selle etanooliekstrakt mõjutab immuunsüsteemi. Üheksa ühendit eraldati ja identifitseeriti kui D-mannitool – Sitosterool, daukosterool, merevaikhape, triakontanool, 8-epibrutsiinglükosiid, betaiin, kohvhappe glükolipiid ja polüsahhariidühendid. Lisaks mannitoolile ja 8-epibrutsiinglükosiidile saadi Cistanche deserticola'st esmakordselt ka teisi komponente. Kofeiinhappe glükolipiidil, betaiinil, mannitoolil, merevaikhappel ja teistel ühenditel on mitmesugused füsioloogilised toimed. Neil on mõju immuunsüsteemile, seksuaalfunktsioonile, südame-veresoonkonna süsteemile, maksale, vananemisvastasele toimele jne.
Eksperimentaalne osa
Sulamistemperatuuri mõõdeti Boetius PHMK mikroskoobiga ja termomeetrit ei reguleeritud; Massispektromeetria (EI) määrati MMH 70-70 seadmega (UK) ja FD määrati M-80 gaasikromatograafia-massispektromeetriga (Jaapan); Tuumamagnetresonants (vesiniku spekter) määrati JEOL FX 90Q tüüpi instrumendiga (Jaapan); ultraviolettspekter määrati tüüpi UV-3000 seadmega; infrapunaspektrit mõõdeti Hitachi tüüpi 260-50 seadmega, KBr tablettimine ja silikageelid valmistati Qingdao merekeemiatehases, geel LH-20 valmistati Rootsis. Cistanche deserticola kuivatatud lihavarred osteti Pekingi ravimmaterjalide ettevõttelt ja tuvastas Zhang Yanzhen.
1. Ekstraheerimine ja eraldamine
Cistanche deserticola purustatakse, immutatakse 95% etanooliga, lahusti eraldatakse, lahustatakse väikeses koguses vees, ekstraheeritakse eetriga, silikageelkolonnkromatograafiaga, elueeritakse petrooleetri ja eetriga (6:4), et saada valge kristall ( I). Eetriga ekstraheeritud veekiht aurutatakse, kuumutatakse ja lahustatakse etanoolis, jahutatakse flokulentse sademe saamiseks (II). Cistanche deserticola on immutatud 50 protsendilise etanooliga. Ekstraheeriti etüülatsetaadiga, silikageeli kolonnkromatograafiaga, elueerides etüülatsetaadiga, igaüks 20 ml (sama allpool). Kokku koguti 37 proovi ja neid uuriti õhukese kihi kromatograafiaga. Algselt välja voolanud kristalli (III) sisaldav osa ühendati. 24-37 proovi filtreeriti valgest helvest (II) välja ja aurustati kuivaks. Jääk töödeldi kolonnkromatograafiaga silikageelil ja elueeriti butanoon-etüülatsetaat-benseen-vesi (4:3:2:0,2). Koguti 12 proovi, millest 8 ~ 11 proovi eraldati oranžidest kristallidest; etüülatsetaadiga ekstraheeritud veekiht ekstraheeriti n-butanooliga, silikageeli kolonnkromatograafiaga ja elueeriti kloroformi-metanooli-veega (6:4:1). Viies proov lahustas õhukese viilu kristallisatsiooni (IV), teine osa õhukese kihi kromatograafiast kombineeriti sinise fluorestsentsosaga, seejärel kasutas silikageeli kolonnkromatograafiat, elueerides kloroformi-metanooli-vee seguga (7:3:2,5). ), kasutas sama meetodit kombineerituna sinise fluorestsentsosaga, läbis geeli LH-20 kolonni, elueeris metanooli-veega (1:1), kaheksas proov lahustas veidi kollast pulbrit (V), jätkas elueerimist. 37 osani, kombineerituna ülaltoodud vajaliku osaga, silikageeli kolonnkromatograafia, hajutati butanooni-etüülatsetaadi-benseeni-vee seguga (4:3:2:0,2), lõigake ära sinine fluorestseeruv segment ja elueerige valguse saamiseks metanooliga. pruun pulber (VI).
95-protsendiline etanooliekstrakt, petrooleetri ja diklorometaani eemaldamine, metanoolis lahustamine, madalrõhu silikageelkolonnkromatograafia, elueerimine metanool-kloroformiga (9:1), kumbki 20 ml, 18.-28. osa lahustasid välja mõned värvitud kristallid (VII) ; pärast etanooliga ekstraheerimist ekstraheeriti Cistanche deserticola jääk veega, seejärel kontsentreeriti jääk, jahutati, lahustati välja suur hulk valgeid kristalle (VIII), eemaldati kristalliseerunud vesilahus ja seejärel töödeldi 4-kordse koguse etanooliga, et saada. rohkem sademeid (IX).
2. Identifitseerimine
Ühend I: valged nõelkristallid saadi ümberkristallimisel atsetooniga, mp 136-137 °C. Äädikanhüdriidiga kontsentreeritud väävelhappe reaktiiv näitas positiivset reaktsiooni (roheline). EIMS m/z: 414 (M pluss). Õhukesekihikromatograafia Rf väärtus ja infrapunaspekter olid kooskõlas - Sitosterooli standardiga, seega kinnitatakse seda kui - Sitosterool.
Ühend II rekristalliseeriti kuumutamise ja püstjahutiga etanooliga kaks korda, et saada valge helbeline sade, mp 290-291 °C. Äädikanhüdriidiga kontsentreeritud väävelhappe reaktiiv näitas positiivset reaktsiooni (roheline), - Naftooli reaktiiv näitas positiivset reaktsiooni. EIMS m/z: 396 (aluspiik), 382, 255, 213, 81, 57, 43. Õhekihikromatograafia oli kooskõlas teadaoleva daukosterooli produktiga ja segu sulamistemperatuur ei langenud. See kinnitati daukosteroolina.
Ühend III metanool kristalliseerus ümber piklikeks kristallideks, mpl87 ~ 189 kraadi, pH 2. EIMS m/z: 119 (M pluss 1), 118 (M pluss), 101, 100, 74, 73, 55 (aluspiik), 45, 28, 27. IR (KBr) cm-1: 3100 ~ 2500 (laius, OH), 1690 (C=O), 1420, 1310, 1200, 920, 800. RF väärtus õhukese kihi kromatograafia puhul on sama, mis merevaikhappe standardil. Lisaks on see kooskõlas merevaikhappe standardse massispektri ja standardse infrapunaspektriga ning segu sulamistemperatuur ei vähene. See on kinnitatud merevaikhappena
Ühend IV rekristalliseeritakse etanooliga valge läikiva tahke ainena, mp83-84 kraadi. EIMS m/z: 420 (M pluss -H2O), 57 (baaspiik). Õhekihikromatograafia Rf väärtus on sama, mis tuntud triacontanoolil ja segu sulamistemperatuur ei lange. Ülaltoodud andmed on kooskõlas kirjanduses kirjeldatud triacontanooliga.
Ühend VI: pärast atsetooniga lahustamist viidi läbi silikageelkolonnkromatograafia ja elueeriti 60% metanooliga, et saada helekollased õhukesed amorfsed kristallid, mis lahustuvad kergesti vees ja lahustuvad metanoolis, etanoolis ja atsetoonis. Naftooli reaktiiv näitas positiivset reaktsiooni . IR (KBr) cm-1: 3700 ~ 3000 (OH), 2900 (CH2, CH3), 1690 (C=O), 1600520 (C=C), 1440, 1350 , 1280, 1260 (COC), 1156, 1110, 1050 (CO), 807. UV λ nm (log e): 218 (sh, 4,30), 249 (3,91), 291 (4,08), 330 (4,1). H-NMR (CD3COD3) 8 ppm: 1,18 (3H, D, J=6, CH3 ramnoosil), 2,75 (2h, t, J=7,2, 2H positsioonil C), 4,75 ( 1H, D, J=8, C1-H glükoosil), 5,17 (1H, D, J=1,8, C1-H ramnoosil), 4,20 ~ 3,30 (12H, m, 2H positsioonil C, 6H glükoosil, 4H ramnoosil), 6,27 (1 H, D, J=16, 1 H positsioonil C), 7,52 (1 H, a, J {76} } Asend C (1 H), 6,60 (1 H, a, J=8, C5"'-H), 6,90 (1 H, DD, J=8 / 2, C6"' - H), 7,10 (1 H, D, J=2, C2"'-H), 6,70 (1 H, D, J 2-, C{101}}H), 6,65 (1 H, D, J {{ 105}}, C{106}}H), 6,52 (1H, DD, J=8/2, C{112}}H), H-NMR (DMOS) 8 ppm: 7,43 (1H. s, OH), 8,07 (1H, s, OH), 850 (2H, s, 2 * OH), kadus pärast süvenevat veevahetust. [a] 22D: - 68,37 kraadi (C {{126} },67MeOH). FDMS m/z: 647 (M pluss pluss Na), 625 (M pluss pluss 1), 624 (M pluss), 479 (M pluss 1-ramnosüül), 478 (M pluss -ramnosüül) ), mis vastab molekulaarsele valemile C29H36O15. Pärast ühendi VI happelist hüdrolüüsi kuvatakse paberkromaadil kaks pruuni laiku ograafia. Rf väärtus on täielikult kooskõlas ramnoosi ja glükoosiga ning sulamistemperatuur ei lange teadaoleva akteosiidiga segamisel. Ülaltoodud andmed on kooskõlas kirjanduses kirjeldatud 3,4-dihüdroksürühmaga – fenetoksü-o- - L-ramnosüül (1 → 3) - 4-o-kofeiinhappe rühm-D- glükopüranosiid on põhimõtteliselt kantserogeenne.
Ühend VII on atsetooni metanooli ümberkristallimisel saadud valge kristall, mille temperatuur on üle 299 kraadi (lagunemine), vees väga hästi lahustuv, kergesti vedeldav ning etanoolis ja metanoolis lahustuv. Alkaloidreaktiiv näitab positiivset reaktsiooni. Elementanalüüsi katseväärtused ( protsenti ): C47,29, H9,16, N10,54; teoreetilised väärtused ( protsenti ): C47,54,H9,52,N11,11. See vastab molekulaarsele valemile C5H11NO2.1/2H2O. IR (KBr) cm{19}}: 3360 (seotud NH, OH), 2940, 1620 (C=O), 1470, 1390, 1330, 1240, 1125, 980, 930, 890. H- NMR (D2O) 8 ppm: 3,28 (9H,s, 3*CH3), 3,88 (2H,s,CH2), 4,68 (D2O). EIMS m/z: 117 (M pluss ), 100, 85, 73, 59, 58 (aluspiik), 44, 42. Õhekihikromatograafia on täielikult kooskõlas betaiini standardi Rf väärtusega ja sulamistemperatuuriga. segu ei lange maha. Tuumamagnetresonantsi spekter, infrapunaspekter ja massispekter on kooskõlas betaiini standardspektriga, mistõttu betaiini tunnustatakse.
Ühend IX: lahustati vees, ekstraheeriti n-butanool-kloroformiga (1:4) ja lisandid eemaldati. Veekihti töödeldi 4-kordse koguse etanooliga, sade lahustati vees, värvitus vesinikperoksiidiga ja väikemolekulaarsed ühendid eemaldati dialüüsiga. Membraani töödeldi 5-kordse koguse etanooliga, et saada helekollane sade. Fehlingi reaktsioon oli negatiivne enne sademe hüdrolüüsi ja pärast hüdrolüüsi tekkis pruunikaspunane sade. Pärast happelist hüdrolüüsi allutati hüdrolüsaadile paberkromatograafia. Võrreldes standardsuhkruga tuvastati ainult glükoos, seega kinnitati, et tuvastati polüsahhariide, mis koosnevad peamiselt glükoosist.
