Neeru histopatoloogia ja füsioloogiliste funktsioonide uuring

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ahmad Fauzi jt

Abstraktne.

The purpose of this study was to analyze abnormal changes in kidney histology and physiology in acute kidney injury animal models with multiple doses of gentamicin. Induction of experimental animals was carried out on 20 rats (Rattus norvegicus) Wistar strain which was divided into 4 groups, group I was a negative control group, groups II, III, and IV are gentamicin-induced groups at doses of 30 mg/kg, 40 mg/kg, and 50 mg/kg, respectively. Kidney histopathology was stained with Hematoxylin Eosin (HE), while analysis of serum BUN and creatinine by spectrophotometric method. Data analysis for kidney histopathology was descriptive while BUN and Creatinine were statistically tested with one-way ANOVA. The results of this study showed there was kidney damage in all gentamicin-induced groups, which is necrosis in the contortions tubule and the Bowman's capsule compared to the negative control group. The group of rats with the higher doses of gentamicin showed a more severe level of histopathological changes, however, BUN and creatinine levels were not significantly different (p>0.05). Selles uuringus jõuti järeldusele, et gentamütsiini induktsioon võib põhjustada neerude histopatoloogilisi muutusi, kuid mitte neerufüsioloogiat.

Märksõnad:loommudel, antibiootikum, BUN, kreatiniin, nefrotoksilisus.

cistanche hindi keelesvõib parandada neerude tööd

1. Sissejuhatus

Äge neerukahjustus on neerupuudulikkusest või neerukahjustusest tingitud haigus, mis tekib kiiresti mõne tunni või mõne päeva jooksul. Sümptomid, mis ilmnevad ägedateneerudvigastusednagu kõhuvalu, polüuuria, oliguuria ja teised(1). Seda haigust diagnoositakse enamasti biomarkerite taseme mõõtmise teel; nagu vere uurea lämmastik (BUN) ja kreatiniin. Kuid need biomarkerite muutused ei kirjelda sageli neerude tegelikku seisundit. Neeru makroskoopiliselt ja mikroskoopiliselt jälgides on ägedad neerukahjustused selgelt näha.Kahjustatudneerudvõib iseloomustada neerukoore turse ja ka raku nekroos(2). BUN-i ja kreatiniini biomarkerite taseme tõus veres ilmneb siis, kui neerud on kahjustatud umbes 30 protsenti - 59 protsenti, millega kaasneb aneemia ja letargia (3). Teadaolevalt on neer võimeline taastuma, kuid rakkude kahjustuse määraga kuni 50 protsenti on selle füsioloogilisi funktsioone raske normaalselt taastada. See on ajendanud paljusid teadlasi uurima erinevaid aineid, mis võivad põhjustada nefrotoksilisust, et vähendada selle haiguse esinemissagedust.

Lisaks on oluline uurida ka ägeda neerukahjustuse mehhanismi loommudelite abil. Ägeda neerukahjustuse loommudelid tekivad nefroni kahjustuse tõttu neerudes. Nefronis, mis koosneb glomerulusest, Bowmani kapslist, torukujulisest kontuurist või Henle kaarest, tekib rakunekroos. Halimi sõnul (2014) kulub ägeda neerukahjustuse loomamudeli loomiseks umbes üks kuu (4). Neerukahjustuse esilekutsumiseks kasutatav materjal on mitmekesine, näiteks ravimid. Üks ravim, mis võib põhjustada neerukahjustusi, on antibiootikumid (2). Neerukahjustuse loomamudelite loomiseks sageli kasutatavad antibiootikumid on gentamütsiini antibiootikumid. Neerukahjustuse stimuleerimiseks kasutatavad antibiootikumide induktsiooniannused on väga erinevad. Laialdaselt on teatatud mitmesugustest nefrotoksilise gentamütsiini uuringutest, näiteks väikestes annustes 10 mg/kg kehamassi kohta kuude jooksul (4), suurtes annustes 60 mg/kg kehamassi kohta 10 päeva jooksul (5, 6), annustes 100. mg/kg kehamassi kohta 8 päeva jooksul (7).

Tänapäeval kasutatakse gentamütsiini süstimist loomadel endiselt sageli, inimeste puhul on sellest aga hakatud loobuma. Inimestel sageli kasutatav ohutu annus on 5-7 mg/kg BW(8), järgmisel aastal langeb see 3-5 mg/kg kehamassi kohta(9). Gentamütsiini annus, mis on 10 korda ohutust annusest, põhjustab teadaolevalt rottidel toksilisust. See ohutu annuse muutmine võib võimaldada ka toksiliste annuste muutmist, seetõttu on selle uuringu eesmärk analüüsida rottide histoloogilisi ja füsioloogilisi muutusi gentamütsiini süstimisest tingitud ägeda neerukahjustuse loommudelite puhul mitmetasandilistes annustes 30 mg/kg kehakaalu kohta kuni 50 mg/kg. kg kehakaalu.

2. Materjal ja meetodid

2.1. Loomade mudel

20 isast Wistari tüve rotti, mis saadi de Wistar Bandungist, jagati 4 rühma, I rühm oli kontrollrühm platseebosüstiga, II rühm indutseeriti gentamütsiini annusega 30 mg/kg kehamassi kohta, III rühma indutseeriti gentamütsiini annus 40 võrra. mg/kg kehamassi kohta ja IV rühma indutseeriti gentamütsiini annusega 50 mg/kg kehamassi kohta. Loomad surmati 10. päeval. Rottide neerukoes viidi läbi histopatoloogiline uuring pärast eutaniseerimist. Kogu loom on järginud asutuse loomahoolduse ja -kasutamise komisjoni poolt registreerimisnumbriga 954-KEP deklareeritud juhiseid.

2.2. Gentamütsiini süstimine

Igale rotile süstiti iga päev intramuskulaarselt (poolmembraanse ja semitendinosuse vahel) gentamütsiinsulfaati (Genta-100®) 10 päeva jooksul erinevate annustega vastavalt nende rühmale.

2.3. Neeru histoloogiliste preparaatide uurimine

Neeruorganid sisestati histopatoloogia ettevalmistamiseks 10% puhverdatud formaliini. Neer tehti histoloogiliseks preparaadiks kudede ülekandmisega 70-protsendilisse alkoholi kui peatuspunktiks. Seejärel dehüdreeriti kude mitmetasandilise alkoholiga, mille kontsentratsioon oli 70 protsenti 24 tundi, 80 protsenti etanooli 2 tundi, 90 protsenti etanooli, 95 protsenti ja absoluutset etanooli 20 minutit. Seejärel leotati elundeid 20 minutit ksülool I-s ja 30 minutit ksülool II-s, et elundid oleksid puhtad. Seejärel filtreerige kude ja sisestage parafiiniplokki 56-58 C. Neeruelund lõigatakse pöörleva mikrotoomi abil 5 mikroni paksusteks viiludeks. Iga kordus tehti 4 sisselõiget 10 sisselõike intervalliga ja asetati objekti klaasile, millele oli antud 70% alkoholilahust ja seejärel värvitud hematoksüliin-eosiini (HE) värvimisega (10).

2.4. Vere kogumine katseloomadel

Vere kogumine loommudelites infraorbitaalse siinuse kaudu mikrohematokriti abil, seejärel sisestatakse vakutainerisse. Moodustunud seerum sisestati mittekoagulandi mikrotuubi, et analüüsida seerumi BUN-i ja kreatiniinisisaldust.

2.5. BUN-i ja kreatiniini taseme mõõtmine

BUN-i ja kreatiniini taset uuriti spektrofotomeetria (ABX Pentra) abil. Vere uurea lämmastiku (BUN) ja kreatiniini seerumitasemete arvutamiseks hinnati neerude füsioloogiat kolorimeetrilise Jaffe meetodi abil (kreatiniini ja uurea komplektid DiaSys diagnostic systems GmbH Germany).

2.6. Statistiline analüüs

Seejärel analüüsiti kirjeldavalt neeru histopatoloogia vaatlusi elektronmikroskoobiga. BUN-i ja kreatiniini andmeid analüüsiti kvantitatiivselt, kasutades programmi Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, v20). Üks võimalus ANOVA test viidi läbi, et jälgida olulisi erinevusi rühmade vahel (<0.05) and="" continued="" with="" the="" tukey="">

3. Tulemused ja arutelu

3.1. Makroskoopilised muutused gentamütsiinist põhjustatud neerudes

Gentamicin-induced rats showed clinical symptoms of lethargy, inactivity, and urine macroscopy showed a slightly reddish color but feces were normal, consumption of food and drink was still normal. Macroscopically, the size of the kidney of the control and treatment rats was no distinction but differences occur outside the renal mucosa color in the control group (figure 1a) and gentamicin induction group (figure 1b).

Joonis 1. Negatiivse kontrollrühma rottide neerud on oakujulised ja punaka värvusega nagu normaalsed neerud (a), samas kui gentamütsiini induktsioonirühma neerud on kahvatumad (b)

3.2. Gentamütsiini induktsiooniga loommudelite neeru histoloogia muutus.

Mikroskoopiline vaatlus 100- ja 400-kordse suurendusega näitas histopatoloogilist muutust gentamütsiini induktsioonirühmas. Arvestades, et kontrollrühmal, mida gentamütsiin ei indutseeritud, ei ilmnenud mikroskoopilisi muutusi (joonis 2). Sfääriline glomerulus koosneb simplex endoteelirakkude kapillaaridest, Bowmani kapslid olid ümara kujuga lihtsustatud lamerakujuliste rakkudega, proksimaalsed kontuuritorukesed risttahukakujulise simplex-rakulise mikrovilliga ja distaalsed kontuuritorukesed ümardatud risttahuka rakuga ilma mikrovillita, ja Henle aasast ümardatud lihtrakuga (11),

Joonis 2. Neeru histopatoloogia negatiivses kontrollrühmas (hematoksüliini-eosiini värvimine, 100x ja 400x suurendus). Glomerulus (nool) on ümmarguse kuju ja tahke struktuuriga normaalne, proksimaalsed tuubulid (nooleots) risttahukakujuliste ümmarguste rakkudega ja villad.

Roti neerude mikroskoopilistel kujutistel gentamütsiini 30 mg/kg kehakaalu kohta süstiga (I rühm) nähti histopatoloogilisi muutusi võrreldes negatiivse kontrollrühmaga (joonis 3). Glomerulaarsed endoteelirakud erodeerivad, Bowmani kapsel tekib nekroos ja Bowmani ruum muutub nõrgemaks. Proksimaalsete torukujuliste rakkude seisund oli nekroos, mida näitab risttahukaliste simplex-epiteelirakkude desquamatsioon koos tsütoplasma ja raku tuumadega, mis kaovad. Proksimaalses tuubulis olevad põletikulised rakud paiknevad tubulaarsete epiteelirakkude ümber, mida iseloomustavad suured mustjaslillad ümarad rakud.

Joonis 3. Neeru neeru histopatoloogia ravirühmas I 30 mg/kg kehamassi esilekutsumisega (hematoksüliin-eosiiniga värvimine, 100- ja 400-kordne suurendus). (nool) Glomerulus näitas endoteelirakkude erosiooni, (nooleots) Bowmani kapslid näitasid nekroosi ja venitust, * Tubule contortus näitas nekroosi ja rohkelt põletikurakke.

II rühmas 40 mg/kg kehamassi kohta süstitud rottide histopatoloogilised kujutised näitavad I kontroll- ja ravirühmaga võrreldes raskemat kahjustust (joonis 4). glomeruliteks olid endoteelirakkude nekroos ja erosioon, Bowmani ruum muutub nõrgemaks ja epiteeliraku tuum Bowmani kapslis oli lüüsis. Kuboidsed simplex-epiteelirakud proksimaalsetes kontortuse tuubulites näevad nekroosi ja epiteelirakkude deskvamatsioon toimub nii tsütoplasmas kui ka tuumas. Kahjustatud nefronite ümber on sageli näha põletikulisi rakke.

Joonis 4. Neeru histopatoloogia II ravirühmas 40 mg/kg kehamassi esilekutsumine (hematoksüliin-eosiiniga värvimine, 100- ja 400-kordne suurendus). Glomerulus (nool) näitas endoteelirakkude deskvamatsiooni, Bowmani kapsel (nooleots) leiti olevat nekroosiline ja Bowmani ruum venitatud, Tubular Contortus (*) oli nekroos ja sellele järgnesid põletikulised rakud (ring).

Kuna gentamütsiini indutseerivad annused suurendasid, oli neerukahjustus raskem, nagu on näidatud mikroskoopilistel piltidel rottidel, kellele süstiti gentamütsiini 50 mg/kg kehakaalu kohta III rühmas (joonis 5). Kahjustused esinesid nefroni kõigis osades, st glomeruluses, Bowmani kapslis, proksimaalses tuubulis ja distaalses tuubulis. Glomerulites põhjustab endoteelirakkude nekroos suurema tühimiku Bowmani ruumipiirkonnas, Bowmani kapslite puhul täheldati nekroosi simpleksi lamerakuseina struktuuris, proksimaalses kontuuritorukestes ja distaalses kontuuritorukestes nähti nekroosi või ägeda tubulaarse nekroosiga (ATN ), oli simpleksi lamerakuseina struktuur nekroos ja näib olevat histoloogilises struktuuris deskvameerunud. Torukujulistes osades nähti nekroosi läbivates rakkudes palju mononukleaarseid põletikurakke.

Joonis 5. Neeru histopatoloogia rühmas III Gentamütsiini induktsioon 50 mg/kg kehamassi kohta (värvimine hematoksüliin-eosiiniga, 100x ja 400x suurendus). Endoteelirakkude desquamatsioon Glomerulus (nool), Bowmani kapsel (nooleots) näitas nekroosi ja Bowmani ruumid muutuvad eristatavaks. Nekroos tekib torukesel (*).

Gentamütsiini suurte annuste süstimine võib kahjustada nefroni struktuuri, mida iseloomustab glomeruli, Bowmani kapsli ja torukujuliste epiteelirakkude nekroos ja deskvamatsioon, mis mõjutab neerufunktsiooni kahjustusi, glomerulaarfiltratsiooni ning reabsorptsiooni ja sekretsiooni neerutuubulites. Gentamütsiini nefrotoksilisuse peamine aspekt on tubulaarne tsütotoksilisus. Loomravi gentamütsiiniga võib olla seotud nii apoptoosiga (12) kui ka tubulaarsete epiteelirakkude nekroosiga (13). Gentamütsiin põhjustab rakkudes tsütotoksilisust, kuhu see võib koguneda. Neerudes on need tavaliselt proksimaalsed tubulaarsed epiteelirakud (14), samas kui distaalsed torukujulised rakud ja kogumiskanalid on tsütotoksilistest mõjudest oluliselt vähem mõjutatud (15). Seejärel transporditakse ravim lüsosoomi, Goldzi seadmesse ja endoplasmaatilisesse retikulumi (16). Gentamütsiin seondub fosfolipiidmembraaniga, muutes selle funktsiooni ja põhjustades haigusseisundit, mida inimestel (17) ja katseloomadel (18) nimetatakse fosfolipidoosiks. Lüsosomaalne fosfolipidoos on põhjustatud fosfatidüülinositooli signaaliraja häiretest (19), fosfolipiidide ringluse vähenemisest ja nende akumuleerumisest plasmamembraanis.

Fosfolipidoos on otseselt seotud gentamütsiini toksilisusega (20). Sarnased muutused tuvastati aga ka teistes gentamütsiiniga kokku puutunud rakutüüpides, kuid ilma märkimisväärse kahjustuseta ja rakusurmata. Kui gentamütsiini kontsentratsioon endosoomides saavutab teatud taseme, katkeb membraan ja selle sisu, sealhulgas gentamütsiin, vabaneb tsütoplasmasse (21). Tsütoplasmas toimib gentamütsiin mitokondritele nii otseselt kui ka kaudselt (22) ja aktiveerib sisemise apoptootilise raja, katkestab hingamisahela, vähendab ATP sünteesi ja põhjustab oksüdatiivset stressi, luues superoksiidi anioone ja hüdroksüülradikaale (23), mis põhjustab rakusurma. Kui katepsiin esineb suurtes kogustes, põhjustab see massilist proteolüüsi, mis põhjustab nekroosi, eriti ATP puudumise korral. Endoplasmaatilises retikulumis inhibeerib gentamütsiin valgusünteesi, häirides translatsiooni täpsust ja translatsioonijärgsete valkude modifitseerimist (24). Selle tulemuseks on endoplasmaatiline retikulum stress ja apoptootiline aktiveerimine kaspaas 12 ja kalpaiini poolt (25).

Selle uuringu tulemused on sarnased Lintongi (2012) läbiviidud uurimistöö tulemustega. Gentamütsiini manustamine laborirottidele annuses 10-20 mg/kg kehamassi kohta on põhjustanud iseloomulikke ja märkimisväärseid muutusi proksimaalsete tubulaarsete epiteelirakkude lüsosoomides (6). Need muutused on tubulaarsed düsfunktsioonid; harja piiri eraldumine ja lüsosomaalsete ensüümide vabanemine; vähendada valgu, kaltsiumi, magneesiumi, kaaliumi ja glükoosi reabsorptsiooni; phos pholipiduria ja kipsi eritumine. Gentamütsiini manustamine annustes üle 40 mg/kg kehakaalu kohta kutsub kiiresti esile neerukoore nekroosi, millega kaasneb neerufunktsiooni häire.

3.3. Gentamütsiini rühmas BUN-i ja kreatiniini osas olulisi muutusi pole

One-way ANOVA results showed no significant difference between treatments (p>0.05). Seetõttu Tukey testi ei jätkatud. Keskmine BUN ja kreatiniini tase vereseerumis on näha tabelis 1.1.

Johnsoni (2014) andmetel on BUN-i tase rottidel vahemikus 10-21 mg/dL(26). Arvestades, et äge neerukahjustus põhjustab BUN-i taseme 10 korda normaalsest tasemest (27). Tavaolukorras on BUN maksas toimuva valgu metabolismi tulemus. See aine suunatakse läbi veresoonte ja väljutatakse neerudes urineerimissüsteemi kaudu, nii et BUN-i taset veresoones leitakse väikeses koguses. Saadud iga rühma keskmisest väärtusest selgub, et rühmade sees ei ole olulist erinevust, kuid gentamütsiini annuste suurenemisel on tendents suureneda.

One-way ANOVA test results on creatinine samples showed no difference between treatments (p>{{0}}.05). Kontrollrühma ja I ravirühma keskmine väärtus jäi endiselt valge roti kreatiniini taseme normaalsesse vahemikku, mis on 0.2 - 0.8(26). Praegused standardsed testid neerufunktsiooni seisundi määramiseks olid seerumi kreatiniini ja uriini tootmise mõõtmine. Seerumi kreatiniinisisalduse esialgne mõõtmine ei pruugi siiski kajastada vigastuse ulatust, kuna kreatiniini kogunemine jääb alati vigastusjuhtumitest maha (28). Seerumi kreatiniinisisalduse tõus võib viidata neerukahjustusele, kuid sellel on piiratud võime varajases staadiumis kahjustusi kindlaks teha (29). Nguyeni ja Devarajani (2008) sõnul hakkab kreatiniini tase tõusma pärast seda, kui neerukahjustus jõuab 50 protsendini (30), seega võib järeldada, et täheldatud neerukahjustus on endiselt alla 50 protsendi.

4. Järeldus

Selle uuringu tulemuste põhjal võib järeldada, et gentamütsiini süstimisest 10 päeva jooksul tingitud neerude histopatoloogilised muutused esinesid kõigis gentamütsiini rühmades, kuid BUN ja kreatiniini seerumis seda kõrvalekallet ei ilmnenud. Selle uuringu viivituse biomarkeri tõttu soovitasime ägeda neerukahjustuse jälgimiseks lisada veel ühe muutuja.

5. Tunnustus

Tänuväärne tunnustus kuulub Teadus-, Tehnoloogia- ja Kõrgharidusministeeriumile 2017. aasta PUPT programmi kaudu rahastamise toetamise ja selle uurimistöö läbiviimisel tehtud koostöö eest.

Viited

1. Alfonso AA, Mongan AE, Memah MF. Gambaran kadar kreatinin seerum pada pasien penyakit ginjal kronik stadium 5 non dialisis. Jurnal e-Biomedik. 2016;4(1).

2. Chasani S. Antibiootik Nefrotoksik: Penggunaan pada Gangguan Fungsi Ginjal. J Laporan Penelitian. 2008.

3. K KZ. Krooniline neeruhaigus. Los Angeles: Henry Fordi tervisesüsteem; 2011. aastal.

4. Halim H, Achadiyani A, Tjahjodjati T. Nigella sativa infusioon antioksüdantse ainena gentamütsiini poolt põhjustatud neerukahjustuste vastu hiirtel. Althea meditsiiniajakiri. 2014;1(2):90-3.

5. Padmini parlamendiliige, Kumar JV. Gentamütsiini poolt indutseeritud nefrotoksilisuse histopatoloogiline uuring eksperimentaalsetel albiinorottidel. IOSR J Dent Med Sci. 2012;1(1):14-7.

6. Lintong PM, Kairupan CF, Sondakh PL. Gambaran Mikroskopik Ginjal Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Setelah Diinduksi Dengan Gentamisin. Jurnal Biomeedik. 2012;4(3).

7. ATAMAN N, Mert H, Yildirim S, Mert NJAÜVFD. Fukoidaani mõju mõnede biokeemiliste parameetrite muutustele gentamütsiini poolt indutseeritud nefrotoksilisuses rottidel. 2018;65(1):9-14.

8. Freeman CD, Nicolau D, Belliveau P, Nightingale C. Aminoglükosiidide üks kord päevas annustamine: ülevaade ja soovitused kliiniliseks praktikaks. Antimikroobse kemoteraapia ajakiri. 1997;39(6):677-86.

9. Gentamütsiin [Internet]. Andmelehtede väljaanded. 2005.

10. Wulandari S. Ekstraksi Tumor Necrosis Fakcor (TNF-) ja Gambaran Histopatologi Ginjal Pada Tikus (Rattus Norvegicus) Neerufibroos Pasca Induksi Streptokinaas. Malang: Brawijaya ülikool; 2012. aasta.

11. Handani AR, Salim MN, Harris A, Budiman H. PENGARUH PEMBERIAN KACANG PANJANG (Vigna unguiculatTERHADAP STRUKTUR MIKROSKOPIS GINJAL MENCIT (Mus musculus) YANG DIINDUKSI ALOKSAN. Jurnal Medika Veterinaria;. 21015;9).

12. Li J, Li Qx, Xie Xf, Ao Y, Tie Cr, Song Rj. Dihüdropüridiini kaltsiumi antagonisti nifedipiini, nitrendipiini ja amlodipiini erinevad rollid gentamütsiini poolt indutseeritud neerutuubulite toksilisusel rottidel. Euroopa farmakoloogia ajakiri. 2009;620(1-3):97-104.

13. Edwards JR, Diamantakos EA, Peuler JD, Lamar PC, Prozialeck WC. Uudne meetod proksimaalse tuubuli epiteeli raku nekroosi hindamiseks intaktses roti neerus, kasutades etiidiumhomodimeeri. J BMC füsioloogia. 2007;7(1):1.

14. Verpooten GA, Giuliano RA, Verbist L, Eestermans G, De Broe ME. Üks kord ööpäevas annustamine vähendab gentamütsiini ja netilmitsiini akumuleerumist neerude kaudu. J Kliinilise farmakoloogia teraapiad. 1989;45(1):22-7.

15. Fujiwara K, Shin M, Matsunaga H, Saita T, Larsson LI. Gentamütsiini valgusmikroskoopiline immunotsütokeemia ja selle kasutamine ravimi omastamise uurimiseks neerudes. J Antimikroobsed ained Kemoteraapia. 2009;53(8):3302-7.

16. Silverblatt F. Tsefalosporiinide ja aminoglükosiidide nefrotoksilisuse patogenees: ülevaade praegustest kontseptsioonidest. J Nakkushaiguste ülevaated. 1982;4(lisand_2):S360-S5.

17. De Broe ME, Paulus GJ, Verpooten GA, Roels F, Buyssens N, Wedeen R jt. Gentamütsiini, tobramütsiini ja amikatsiini varajane mõju inimese neerudele. J Neer rahvusvaheline. 1984;25(4):643-52.

18. Nonclercq D, Wrona S, Toubeau G, Zanen J, Heuson-Stiennon JA, Schaudies RP jt. Torukujuline vigastus ja regeneratsioon roti neerudes pärast ägedat kokkupuudet gentamütsiiniga: ajaline uuring. J Neerupuudulikkus. 1992;14(4):507-21.

19. Ramsammy LS, Josepovitz C, Kaloyanides GJ. Gentamütsiin inhibeerib fosfatidüülinositooli kaskaadi agonististimulatsiooni küüliku proksimaalsete tubulaarrakkude primaarsetes kultuurides ja roti neerukoores. J Journal of Pharmacology Experimental Therapeutics. 1988;247(3):989-96.

20. Kaloyanides G. Ravimite ja fosfolipiidide koostoimed: roll aminoglükosiidide nefrotoksilisuses. J Neerupuudulikkus. 1992;14(3):351-7.

21. Regec AL, Trump BF, Trifilis AL. Gentamütsiini mõju kultiveeritud inimese proksimaalsete tubulaarsete rakkude lüsosomaalsele süsteemile: endotsütootiline aktiivsus, lüsosomaalne pH ja membraani haprus. J Biokeemiline farmakoloogia. 1989;38(15):2527-34.

22. Morales AI, Detaille D, Prieto M, Puente A, Briones E, Arévalo M jt. Metformiin hoiab ära eksperimentaalse gentamütsiini poolt indutseeritud nefropaatia mitokondritest sõltuva raja kaudu. J Neer rahvusvaheline. 2010;77(10):861-9.

23. Cuzzocrea S, Mazzon E, Dugo L, Serraino I, Di Paola R, Britti D jt. Superoksiidi roll gentamütsiini poolt vahendatud nefropaatias rottidel. European Journal of Pharmacology. 2002;450(1):67- 76.

24. Horibe T, Matsui H, Tanaka M, Nagai H, Yamaguchi Y, Kato K jt. Gentamütsiin seondub kalretikuliini lektiini saidiga ja pärsib selle chaperone aktiivsust. J Biochemical Biophysical Research Communications. 2004;323(1):281-7.

25. Peyrou M, Hanna PE, Cribb AE. Tsisplatiin, gentamütsiin ja p-aminofenool indutseerivad roti neerudes endoplasmaatilise retikulumi stressi markereid. J Toksikoloogiateadused. 2007;99(1):346-53.

26. Johnson D. Normal Lab väärtused 2014. a.

27. Fauzi A, Salasia SIO, Titisari N. Neutrofiilide želatinaasiga seotud lipokaliin (NGAL) kui potentsiaalne biomarker ägeda neerupuudulikkuse varajaseks avastamiseks. J Võrdlev kliiniline patoloogia. 2016;25(2):387-92.

28. Lameire N, peremees EJCoicc. Mõtisklused ägeda neerupuudulikkuse määratluse, klassifikatsiooni ja diagnostilise hindamise kohta. 2004;10(6):468-75.

29. Devarajan P. Ägeda neerukahjustuse biomarkerid. Äge neerukahjustus. 156: Kirjastus Karger; 2007. lk. 203-12.

30. Nguyen MT, Devarajan PJPn. Biomarkerid ägeda neerukahjustuse varaseks avastamiseks. 2008;23(12):2151.