ABSTRAKTNE

Melanogenees on protsess, mille käigus sünteesitakse melaniini, mis vastutab peamiselt inimese naha, silmade ja juuste pigmentatsiooni eest. Kuigi melanogeneesi protsessis osalevad arvukad ensümaatilised katalüüsitud ja keemilised reaktsioonid, mängisid melaniinis olulist rolli sellised ensüümid nagu türosinaas ja türosinaasiga seotud valk -1 (TRP-1) ja TRP-2. süntees. Täpsemalt, türosinaas on võtmeensüüm, mis katalüüsib melaniini sünteesi kiirust piiravat etappi, ja türosinaasi alareguleerimine on melanogeneesi inhibiitorite väljatöötamiseks kõige silmatorkavam lähenemisviis. Seetõttu on viimastel aastatel välja töötatud arvukalt inhibiitoreid, mis on suunatud türosinaasile. Ülevaade keskendub hiljuti avastatud türosinaasi inhibiitoritele, mis on otseselt seotud türosinaasi katalüütilise aktiivsuse ja funktsionaalsuse pärssimisega kõikidest allikatest, sealhulgas laboratoorsed sünteetilised meetodid, looduslikud tooted, virtuaalne sõelumine ja struktuuripõhised molekulaarse dokkimise uuringud.

Asjakohaste uuringute kohaselt on tsistanche tavaline ravimtaim, mida tuntakse kui "imerohi, mis pikendab eluiga". Selle põhikomponent on tsistanosiid, millel on erinevad toimed, nagu antioksüdant, põletikuvastane ja immuunfunktsiooni edendav toime. Tsistanche ja naha valgendamise vaheline mehhanism seisneb cistanche glükosiidide antioksüdantses toimes. Inimese nahas sisalduv melaniini toodetakse türosiini oksüdeerumisel, mida katalüüsib türosinaas ja oksüdatsioonireaktsioon eeldab hapniku osalemist, mistõttu kehas olevad hapnikuvabad radikaalid muutuvad oluliseks melaniini tootmist mõjutavaks teguriks. Tistanche sisaldab tsistanosiidi, mis on antioksüdant ja võib vähendada vabade radikaalide teket organismis, pärssides seega melaniini tootmist.

Klõpsake nuppu Kuidas Cistanche'i kasutada

Lisateabe saamiseks:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

MÄRKSÕNAD

inimese türosinaas; inhibiitorid; Parkinsoni tõbi; struktuuri ja tegevuse suhted; nahka valgendavad ained

Sissejuhatus

Hinnanguliselt investeerib ligikaudu 15 protsenti maailma elanikkonnast nahka valgendavatesse vahenditesse, kusjuures domineerib Aasia1. Ülemaailmsed tööstusanalüütikud (GIA) on ennustanud, et 2020. aastaks küünib nahavalgustite universaalne turg 23 miljardi dollarini, mis on tingitud uutest turgudest Aasias, eriti Indias, Jaapanis ja Hiinas2. SIRONA biokeemia aruande1 kohaselt kulutati Aasia Vaikse ookeani piirkonnas nahahooldustoodetele ja kosmeetikatoodetele ligikaudu 13 miljardit dollarit. Ainuüksi Indias kulutati 2010. aastal hinnanguliselt 432 miljonit dollarit nahka valgendavatele kreemidele ja nahahooldusvahenditele. Hiljutine uuring näitas, et 80 protsenti India meestest kasutab õigluskreeme ja tarbijate arv kasvab igal aastal 18 protsenti1. Nende nahka valgendavate ainete molekulaarne mehhanism seisneb melaniini vähendamises, mis on peamine nahavärvi allikas.

Melaniin vastutab peamiselt inimese naha, silmade ja naha pigmentatsiooni eest, mida toodetakse epidermise melanotsüütidest ligikaudu vahekorras 1:36 basaalkeratinotsüütidega3. Vastuseks ultraviolett-B (UVB) kiirgusele sünteesib melanotsüüt melaniini protsessi, mida nimetatakse melanogeneesiks. Melanosoomides sünteesitud melaniin transporditakse epidermise naaberkeratinotsüütidesse4. Tavalistes füsioloogilistes tingimustes on pigmentatsioonil kasulik mõju inimese naha fotokaitsele kahjulike UV-kahjustuste eest ning see mängib olulist evolutsioonilist rolli kamuflaažis ja loomade matkimises5. Melaniini liigne tootmine põhjustab aga dermatoloogilisi probleeme, nagu tedretähnid, päikesepaistelised laigud ja melasma6–9, samuti vähktõbe10 ja põletikujärgset melanodermat11. Lisaks võib pidev UV-kiirgus põhjustada DNA kahjustusi, geenimutatsioone, vähi arengut ja immuunsüsteemi kahjustusi või fotovananemist12.

Melanogeneesi reguleerimine

Melanogenees on keeruline rada, mis hõlmab ensümaatiliste ja keemiliselt katalüüsitud reaktsioonide kombinatsiooni. Melanotsüüdid toodavad kahte tüüpi melaniini: eumelaniini (pruun-must) ja feomelaniini (punakaskollane), mis moodustuvad tsüsteiini või glutatiooni konjugatsioonil (joonis 1) 13–15.

Melanogeneesi protsess algab L-türosiini oksüdeerimisega dopakinooniks (DQ) võtmeensüümi türosinaasi (TYR) toimel. Saadud kinoon toimib eumelaniini ja feomelaniini sünteesi substraadina16,17. DQ moodustumine on melaniini sünteesi kiirust piirav etapp, kuna ülejäänud reaktsioonijärjestus võib füsioloogilise pH väärtuse 17 juures kulgeda spontaanselt. Pärast DQ moodustumist läbib see molekulisisese tsükliseerimise, mille tulemusena tekib indoliini ja leukodopakroom (tsüklodopa) . Leukodopakroomi ja DQ vaheline redoksvahetus tekitab dopakroomi ja L-3,4-dihüdroksüfenüülalaniini (L-DOPA), mis on samuti TYR substraat ja oksüdeeritakse ensüümi toimel uuesti DQ-ks. Dopakroom laguneb järk-järgult, saades dihüdroksüindooli (DHI) ja dihüdroksüindool-2-karboksüülhappe (DHICA). Viimast protsessi katalüüsib TRP{10}}, mida praegu tuntakse kui dopakroomtautomeraasi (DCT). Lõppkokkuvõttes oksüdeeritakse need dihüdroksüindoolid (DHI ja DHICA) eumelaniiniks. Arvatakse, et TRP-1 katalüüsib DHICA oksüdeerumist eumelaniiniks. Lisaks muudetakse DQ tsüsteiini või glutatiooni juuresolekul 5-S-tsüsteinüüldopaks või glutotionüüldopaks. Järgnev oksüdatsioon annab bensotiasiini vaheühendid ja lõpuks tekib feomelaniin. Kuigi melanogeneesi rajas osalevad kolm ensüümi TYR, TRP-1 ja TRP-2, on türosinaas melanogeneesi jaoks eranditult vajalik.

Türosinaas ja selle võtmeroll melaniini sünteesis

Melanosoomi membraanis paikneb türosinaas (monofenool või o-difenool, hapniku oksidoreduktaas, EC 1.14.18.1, sün. polüfenooloksüdaas), multifunktsionaalne membraaniga seotud tüüpi -3 vaske sisaldav glükoproteiin18. Türosinaasi toodavad ainult melanotsüütide rakud. Pärast selle tootmist ja sellele järgnevat töötlemist endoplasmaatilises retikulumis ja Golgis suunatakse see melanosoomidesse, kus sünteesitakse pigment melaniin. Struktuurilisest vaatepunktist on kaks vase iooni ümbritsetud kolme histidiini jäägiga, mis vastutavad türosinaasi katalüütilise aktiivsuse eest (joonis 2) 19. Aktiivsel saidil on kolm olekut; oksü, met ja desoksü moodustuvad pigmentatsiooni moodustumisel. Täpsemalt, aktiivses kohas interakteeruvad kaks vase iooni dihapnikuga, moodustades kõrge reaktsioonivõimega keemilise vaheühendi, mis osaleb otseselt monofenoolide hüdroksüülimisel difenoolideks (mükofenolaadi aktiivsus) ja o-difenoolide oksüdeerimisel o-kinoonideks (difenoolide aktiivsus). )20,21. Türosinaas katalüüsib ka neuromelaniini tootmisprotsessi, mille käigus dopamiini oksüdeerimisel tekivad dopakinoonid. Dopakinoonide liigne tootmine põhjustab aga neuronite kahjustusi ja rakusurma. See viitab sellele, et türosinaas võib mängida olulist rolli neuromelaniini moodustumisel inimese ajus ja vastutab Parkinsoni tõve ja Huntingtoni tõvega seotud neurodegeneratsiooni eest 22–26. Türosinaasi on seostatud ka köögiviljade ja puuviljade pruunistumisega koristusjärgsel ja käitlemisprotsessil, mis põhjustab kiiret lagunemist27–29. Türosinaasi kasutamist laiendati veelgi putukate sulamisprotsessis30. Seega on melaniini sünteesi reguleerimine türosinaasi ensüümi inhibeerimise kaudu teadlaste peamiseks motivatsiooniks hüperpigmentatsiooni ennetamise kontekstis.

Türosinaasi inhibiitorid

Kuna türosinaas on melanogeneesi kaudu melaniini sünteesimisel ülioluline ensüüm, saab sellest kõige silmapaistvam ja edukam sihtmärk melanogeneesi inhibiitoritele, mis otseselt inhibeerivad türosinaasi katalüütilist aktiivsust. Enamik kaubanduslikult saadaolevaid kosmeetika- või nahka valgendavaid aineid on türosinaasi inhibiitorid. Asjaolu, et inhibiitorid on suunatud türosinaasile, võivad spetsiifiliselt inhibeerida melanogeneesi rakkudes ilma kõrvaltoimeteta, kuna türosinaasi toodavad eranditult ainult melanotsüüdid. Nahka valgendavate ainetena on kasutatud paljusid türosinaasi inhibiitoreid, nagu hüdrokinoon (HQ)31–34, arbutiin, kojiinhape35–37, aselaiinhape38,39, L-askorbiinhape40–42, ellaghape43–45, traneksaamhape46–48, teatud puudustega (joonis 3).

HQ on potentsiaalselt mutageenne imetajate rakkudele ja seotud mitmete kõrvaltoimetega, sealhulgas kontaktdermatiit, ärritus, mööduv erüteem, põletustunne, kipitustunne, leukoderma, kastanilaigud küüntel, hüpokroomne ja okronoos49–52. Arbutiin, hüdrokinooni eelravim, on looduslik toode ja vähendab või pärsib melaniini sünteesi, pärssides türosinaasi. Arbutiini looduslikud vormid on aga keemiliselt ebastabiilsed ja võivad vabastada hüdrokinooni, mis kataboliseerub benseeni metaboliitideks, mis võib olla toksiline luuüdile53. Kojinhappe kasutamine kosmeetikas on selle kantserogeensuse ja säilitamise ajal ebastabiilsuse tõttu piiratud54. L-askorbiinhape on kuumustundlik ja laguneb kergesti 55. Ellaghape on lahustumatu ja seega halvasti biosaadav56 ning traneksaamhappe puhul jääb melanogeenne rada määramata 47. Seega on suur vajadus uute türosinaasi inhibiitorite väljatöötamiseks koos ravimi- nagu omadused.

Seene türosinaasi inhibiitorid

Kalkoonid ja flavanooni inhibiitorid

Teises uuringus hinnati Morus australis'est eraldatud kalkoone 2a–2d nende seente türosinaasi inhibeerivat toimet, kasutades substraadina L-türosiini 58. Tulemused näitasid, et kõik neli kalkooni derivaati olid standardühendiga võrreldes väga tugevad türosinaasi inhibiitorid. arbutiin (joonis 5(a), 2a–2d). Eelkõige oli ühend 2a 700-kordne tugev inhibeerimine võrreldes arbutiiniga. Struktuuri ja aktiivsuse suhte (SAR) analüüs näitas, et resortsinooli konstruktsioon nii tsüklis A kui ka ringis B võib olla tugeva türosinaasi inhibeerimise põhjuseks. Lisaks mängib tsükli A 30 positsiooni asendus olulist rolli inhibeeriva toime suurendamisel. Näiteks steeriline mahukas asendaja tsüklis A 2c-l vähendas tugevust võrreldes asendamata 2a-ga, see on tingitud kelaatimise võimest vaseoonide suhtes. Huvitaval kombel näitas ühend 2d tugevamat inhibeerivat toimet kui 2a ja 2c, mis näitab, et 4- hüdroksü-1-penteenrühm positsioonis 2d 30 - vastutab võimendamise eest. Lisaks testiti kalkoonide mõju melaniini sünteesile melaniini tootvates hiire melanoomi B16 rakkudes ning ühendeid 2a, 2b ja 2d inhibeeriti tugevalt tsütotoksilisusega või vähesel määral.

Hiljuti teatasid Radhakrishnan jt asakalkoonide raamatukogust ja uuriti seente türosinaasi pärssivat toimet, kasutades substraadina L-DOPA-d. Uuringus uuritud ühenditest leiti, et kaks ühendit 3a ja 3b, püridüülasahalkoonide analoogid (karbonüülredutseerimine) on tugevamad ensüümi inhibiitorid kui kojhape (IC50¼27,30 lM) (joonis 5(a), 3a–3b). ). Veelgi enam, kineetiline analüüs tuvastas, et nii 3a kui ka 3b olid konkureerivad inhibiitorid Ki väärtustega vastavalt 2,62 ja 8,10 lM. Struktuuri-funktsiooni analüüs näitas, et lämmastikuaatom inhibiitorite püridiini skeletis võib olla türosinaasi aktiivses kohas esinevate vaseoonidega keeruline. Sama uurimisrühm on teatanud teisest kaltooni seeriast, millel on oksiimfunktsioon kui türosinaasi ja melaniini moodustumise inhibiitor melanoomi B16 rakkudes.60 Kaks ühendit (4a: IC50¼4,77 lM ja 4b: IC5057,89 lM) avaldasid tugevat türosinaasi inhibeerivat toimet. aktiivsused (joonis 5(a), 4a–4b) kui kojhape (IC50522,25 lM). Kineetilised uuringud näitasid konkureerivaid inhibiitoreid Ki väärtustega 5,25 ja 8,33 lM. A-melanotsüüte stimuleeriva hormooni (a-MSH) poolt indutseeritud B16 melanoomirakkudes inhibeerisid need kaks ühendit 4a ja 4b melaniini moodustumist ja türosinaasi ilma tsütotoksilisuseta. Seoses SAR-analüüsiga tehti kindlaks, et para-nitro-asendajatega orto-metoksü (tsükkel B) põhjustas tugeva türosinaasi inhibeerimise (4a). Lisaks näitas elektrone loovutav para-dimetüülaminotsükkel (tsükkel B) teist kõige tugevamat inhibeerimist (4b).

Teises uuringus teatati 2,3-dihüdro-1H-indeen-1-one kalkoonitaoliste derivaatide uudsest seeriast.61 Kaks neist, 5a ja 5b, tuvastati tugevatoimelistena. türosinaasi difenolaasi aktiivsuse inhibiitorid IC50 väärtustega 12,3 ja 8,2 lM (joonis 5(a)). Mehhanismi edasisel uurimisel leiti, et nii inhibiitorid 5a kui ka 5b on pöörduvad ja konkureerivad.

Wang et al. eraldati Flemingia philippinensisest dihüdrokalkoonid (joonis 5 (a), 6a–6c) ja flavanoonid (joonis 5 (b), 7a–7c) ning uuriti nende inhibeerivat toimet türosinaasi62 suhtes. Tulemused näitasid, et need inhibeerivad türosinaasi mükofenolaadi (IC50¼1,01 kuni 18,4 lM) ja difenoolide (IC50¼5,22 kuni 84,1 lM) toimet. Eelkõige inhibeeris dihüdrokalkoon (6c) tõhusalt türosinaasi nii mükofenolaadi kui ka difenooli aktiivsust IC50 väärtustega vastavalt 1,28 ja 5,22 lM. SAR-i analüüs on väga huvitav, kuna farmakofoor ei ole seotud türosinaasi inhibeerimisega ja sellel puudub a, b-küllastumata ketooni motiiv, mis esineb enamikus inhibiitorites. Flavanoonide puhul olid resortsinoolirühma (7a) sisaldavad ühendid konkureerivad ja inhibeerisid oluliselt türosinaasi mükofenolaati (IC50¼1,79 lM) ja difenoole (IC50¼7,48 lM).

Uute türosinaasi inhibiitorite otsimisel leiti, et Camylotropis hirtella ekstraktid inhibeerivad türosinaasi63. Pärast neljateistkümne ühendi edukat puhastamist ja eraldamist näitasid neli ühendit (joonis 5 (b), 8a–8d) tugevat türosinaasi inhibeerivat toimet. Leiti, et kõige tugevam ühend on neorauflavaan 8c, mille IC50 väärtused olid 30 ja 500 nM türosinaasi monofenolaasi ja difenolaasi aktiivsuse suhtes. Lisaks oli 8c võrreldes kojiinhappega (13,2 lM) 400-korda tugevam türosinaasi mükofenolaadi aktiivsuse vastu. Teine kõige tugevam ühend oli geranüülitud isoflavoon 8a inhibeeritud mükofenolaat ja difenoolid IC50 väärtustega vastavalt 2,9 ja 128,2 lM ning see tuvastati konkureeriva ja pöörduva inhibiitorina. Lisaks vähendasid ühendid 8a ja 8c tõhusalt melaniini sisaldust a-MHS-indutseeritud B16 melanoomirakkudes, mõjutamata rakkude elujõulisust. Struktuurilisest vaatenurgast parandab geranüüli kõrvalahela redutseerimine türosinaasi inhibeerivat aktiivsust.

Resveratrooli analoogid

Resveratrool (3,5, 40 -trihüdroksü-trans-stilbeen, 9), looduses laialt levinud stilbenoid, näiteks viinamarjades, avaldas Kcat (suitsiidisubstraadi) tüüpi pärssimise mehhanismi kaudu seene türosinaasi inhibeerivat toimet64. In vitro analüüs a-MSH-stimuleeritud B16 hiire melanoomirakkudes inhibeeris resveratrool raku melaniini tootmist melanogeneesiga seotud valkude, nagu türosinaas, TRP-1, TRP-2 ja mikroftalmiaga seotud transkriptsiooni pärssimise kaudu. faktori (MITF) ekspressioon65 ilma tsütotoksilisuseta kuni 200 lM.64 Resveratrooli inhibeerivat toimet on kinnitatud in vivo mudelis, kus kasutati UVB-kiirgusega pruunikaid merisigasid. Selles uuringus vähendas resveratrooli töötlemine UVB-kiirgusega kiiritatud merisigade seljanahaga hüperpigmentatsiooni visuaalselt.

Hiljuti teatati aso-resveratrooli (13a–13e ja 13 g) ja aso-oksüresveratrooli (13f) seeriast (joonis 6) 69. Nendest ühenditest 13a ja 13b oli kõrge türosinaasi inhibeeriv toime 56,25 protsenti ja 72 protsenti. 50 lM, vastavalt 69. Leiti, et 4-hüdroksüfenüülfragment on suuremaks inhibeerimiseks hädavajalik ja 3,5-dihüdroksüfenüül- või 3,5-dimetoksüfenüülderivaadid näitasid paremat türosinaasi inhibeerimist kui 2, 5-dimetoksüfenüülderivaadid. Eelkõige vähendas või vähendas oluliselt hüdroksüül- või metoksürühma lisamine 4-hüdroksüfenüülrühma seente türosinaasi inhibeerimist. Sünteesitud asoühendite hulgas oli aso-resveratrool (13b) kõige tugevam seente türosinaasi inhibeerimine IC50 väärtusega 36,28 lM. Tulemused näitavad, et kõrge Log p-väärtusega aso-resveratrool võib hüperpigmentatsiooni ravis valgendavate ainete ja farmatseutiliste ravimite väljatöötamisel olla parem kui resveratrool.

Kumariini derivaadid

Kumariinid on suur hulk looduslikku ja sünteetilist päritolu bensopürooniühendeid, millel on erinev farmakoloogiline toime70. Hiljutistes uuringutes on tõestatud, et vähesed kumariinid inhibeerivad seente türosinaasi, mis sisaldab tugevama türosinaasi inhibeeriva toimega eskuletiini ja umbelliferooni71,72. Pideva jõupingutuse käigus on Matos jt demonstreerinud mitmeid kumariini-resveratrooli hübriidühendeid, 3-fenüülkumariine koos hüdroksüül- või alkoksü- ja bromoasendajatega karkassi erinevates kohtades73 (joonis 7). Seeriatest identifitseeriti parimaks inhibiitoriks ühend, millel on bromoaatom ja kaks hüdroksüülrühma 3-fenüülkumariini fragmendis (14), mille IC50 väärtus oli 215 lM. See ühend on mittekonkureeriv türosinaasi inhibiitor, mille Ki väärtus on 0,189 mM.

Teises uuringus teatati mitmetest umbelliferooni analoogidest, mis inhibeerivad seene türosinaasi74. Täpsemalt, ühenditel 15a ja 15b, millel oli 3,4-dihüdroksü- ja 3,4,5-dihüdroksüfenüülkarkass, ilmnes seene türosinaasi aktiivsuse suhtes tugevam inhibeeriv toime (joonis 7). Asthana et al. demonstreeris hüdroksükumariinide (16a–16d) 75 seeriat (joonis 7). SAR-uuringud näitasid, et kumariini hüdroksüülasendaja positsioon mängib ensümaatilises inhibeerimises rolli; aromaatse hüdroksüülitud ühendid 6-hüdroksükumariiniga (16c) ja 7-hüdroksükumariiniga (16d), mis leiti olevat ensüümi nõrgad substraadid. Eriti inhibeeris 7-hüdroksükumariin tugevalt dopakroomi kontsentratsiooni vahemikus 0.3 - 0,9 mM. Maksimaalse 7-hüdroksükumariini kontsentratsiooni korral ulatus inhibeerimine 88 protsendini. Autorid leidsid, et nähtus oli tingitud L-türosiini konversiooni spetsiifilisest inhibeerimisest. Teisest küljest ei olnud pürooniga hüdroksüülitud 3-hüdroksükumariini (16a) ja 4-hüdroksükumariiniga (16b) sisaldavad ühendid türosinaasi substraadid. Leiti, et 3-hüdroksükumariin (16a) pärsib türosinaasi, kuid mitte ühend 4-hüdroksükumariiniga (16b), mis näitab, et püroonitsüklit ei saa türosinaas hüdroksüülida.

Hiljuti skriiniti mitmeid fosfoonhappe diamiide ​​nende türosinaasi inhibeeriva toime suhtes76. Tulemused näitasid, et C-5-ga seotud asendaja ja kahe stereogeense tsentri (C-5 ja fosfori aatom) stereokeemia olid türosinaasi inhibeerimise jaoks olulised (17a–17d). Asendamata fenüüliga diastereomeerid ei näidanud türosinaasi (17a ja 17a0) suhtes mingit inhibeerivat toimet. Seevastu asendatud fenüüliga ühendid avaldasid türosinaasi aktiivsusele erinevat mõju, näiteks ühend 17b koos p-klorofenüüliga (80,65% türosinaasi inhibeerimine) inhibeeris türosinaasi mõõdukalt, kuid selle diastereomeer 17b0 16 0,5% türosinaasi inhibeerimine) oli inaktiivne. Teisel juhul näitasid 17c (58,54% türosinaasi inhibeerimine) ja 17c0, mis sisaldasid p-metüülfenüüli (61,80% türosinaasi inhibeerimine), head türosinaasi inhibeerimist. Leiti, et ühend 17d, mis koosneb 2-püridinüüli (97,40% türosinaasi inhibeerimise) fragmendist, on ülaltoodud uuringus kõige tugevam türosinaasi inhibiitor.

B-fenüül-a,b-küllastumata karbonüülrühmaga inhibiitorid

Hiljuti teatati, et bensülideenhüdantoiin 18a, bensülideenpürrolidiindioon 18b ja bensülideentiasolidiin-2, 4-dioon 18c (joonis 8(a))) derivaadid uurivad potentsiaalsete türosinaasi inhibiitoritena ja kasutavad ühendit in vivo osutusid tõhusateks nahka valgendavateks aineteks77–80. Neil oli tugev inhibeeriv toime kui kojhape ja arbutiin. Ühend 18a kujundati L-türosiini ja L-DOPA türosinaasi substraatide keemilist struktuuri jäljendades. SAR-uuringud näitasid, et hüdantoiini 18a 1-asendis olev amiid NH võib moodustada vesiniksidemeid türosinaasi aktiivse saidi aminohapetega. Lisaks jäljendab 18a imidorühm substraatide karboksüülhapperühma. Selle tausta põhjal on Kim et al. sünteesis ja hindas hiljuti rea 5-(hüdroksüül- või alkoksüasendatud bensülideen)tiohüdantoiini analooge, millel on b-fenüül-a,b-küllastumata karbonüülkarkassid.81 Nende hulgas oli kolmel ühendil, 19a–19c, kõrge inhibeeriv toime. kui kojhape või resveratrool (joonis 8(a)). Eelkõige leiti, et 2,4-dihüdroksübensülideen-2-tiohüdantoiin 19c (IC50¼1,07 lM) on selle uuringu parim inhibiitor. Lisaks inhibeeris 19c raku türosinaasi aktiivsust B16 rakkudes ilma olulise tsütotoksilisuseta.

Jätkuvalt sünteesiti (E)-2-bensoüül-3-(asendatud fenüül)akrüülnitriilid (BPA analoogid) lineaarse b-fenüül-a,b-küllastumata karbonüülkarkassiga ja hinnati potentsiaalsete türosinaasi inhibiitoritena82. Nende hulgas inhibeerisid kolm ühendit 20a–20c tõhusalt seene türosinaasi aktiivsust (joonis 8 (a)). Eriti pärssis ühend 20c märkimisväärselt melaniini biosünteesi ja inhibeeris rakusisest türosinaasi aktiivsust B16 rakkudes, mõjutamata rakkude elujõulisust. SAR-analüüs näitas, et kõigil aktiivsetel ühenditel on fenüültsüklis 4-hüdroksürühm ning Br asendus 3-asendis või positsioonis 3 ja 5- on seotud tugeva türosinaasiga. inhibeeriv toime.

Hiljuti jätkas sama uurimisrühm 3-(asendatud fenüül)akrüülnitriilide SAR-i uurimist. Vastavalt sellele näitas rida (E)-2-tsüano-3-(asendatud fenüül)akrüülamiidi derivaate, millel oli lineaarne b-fenüül-a,b-küllastumata karbonüülkarkass, seene türosinaasi83 vastu pärssivat toimet. Ühendite hulgas avaldasid 21a ja 21b seene türosinaasi inhibeerivat toimet (joonis 8(a)). Eriti näitas ühend 21a suurepärast inhibeerivat toimet. B16 rakkudes pärssis 21a oluliselt türosinaasi aktiivsust annusest sõltuval viisil, mõjutamata tsütotoksilist toimet. Struktuurilisest vaatenurgast mängib "lineaarne" b-fenüül-a,b-küllastumata karbonüülkarkass olulist rolli melanogeense toime näitamisel türosinaasi ensüümi otsese inhibeerimise kaudu.

0

On olnud pikka aega teada, et kaneelmaldehüüd suutis pärssida L-DOPA oksüdatsiooni seente türosinaasi poolt84. Hiljuti Cui et al. teatas reast kaneelmaldehüüdi derivaatide a-asendatud derivaate85. SAR-uuringud näitasid, et a-bromotsinaaldehüüdi 22a, a-klorokaneelmaldehüüdi 22b ja a-metüülkaneelmaldehüüdi 22c ühendid vähendasid nii mükofenolaadi kui ka difenolaasi aktiivsust türosinaasi suhtes (joonis 8(a)). IC50 väärtused 22a–22c olid 0.075, {{20}},140 ja 0,440 mM mükofenolaadil ja 0,049, 0,110 ja 0,450 mM difenoolidel vastavalt. Lisaks tehti ettepanek, et a-asendatud kaneelmaldehüüdi derivaat oli kaneelmaldehüüdiga võrreldes tugevam.

Hiljuti on türosinaasi inhibiitorite 86 valdkonnas tähelepanu juhtinud tio/barbituraadid, kuna neil on atraktiivne b-fenüül-a, b-küllastumata karbonüülkarkass, mis vastutab türosinaasi inhibeeriva funktsiooni eest. Kirjanduses on vähestel 5-bensülideen(tio)barbituraatidel, millel on fenüültsükli 4-asendis hüdroksüülasendaja, suurepärane inhibeeriv toime, näiteks 23a ja 23b inhibeeriti IC50 väärtustega 13,98 ja 14,49 lM, vastavalt87 (joonis 8(b)). Sellest tööst inspireerituna uurisid Chen jt hiljuti tio/barbituraatide SAR-i, rõhutades türosinaasi inhibeeriva aktiivsuse mõju hüdroksüülasendajate positsiooni ja arvu. Sellest lähtuvalt teatati mitmetest hüdroksü- või metoksüasendatud 5-bensülideen(tio)barbituraatidest, mis inhibeerivad seene türosinaasi88 difenoolide aktiivsust. Tulemused näitavad, et ühenditel (23c–23 g) oli tugev türosinaasi inhibeeriv toime võrreldes kojhappega (IC50=18,25 lM). Täpsemalt, 3,4-dihüdroksüasendajat 23e sisaldav ühend tuvastati parimaks inhibiitoriks IC50 väärtusega 1,52 lM. SAR-i uuringud näitasid, et barbituraadid olid tugevamad kui tiobarbituraadid ja 3,{30}}dihüdroksüülrühmad fenüültsüklis parandasid tugevust. Lisaks leiti, et need inhibiitorid on pöörduvat tüüpi.

Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501