Atractylodis Macrocephalae risoomi türosinaasi inhibiitorite valimine ja iseloomustamine spektri-aktiivsuse suhete ja molekulaarse dokkimise põhjal

Autoriõigus © 2021 Yong-Qin Liu et al. 2is on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitatakse Creative Commonsi omistamislitsentsi alusel, mis lubab piiramatut kasutamist, levitamist ja reprodutseerimist mis tahes kandjatel, eeldusel, et originaalteosele viidatakse õigesti.

Cistancheon kollageeni tootmise soodustamise funktsioon, mis võib suurendada naha elastsust ja läiget ning aidata parandada kahjustatud naharakke.CistancheFenüületanool Glükosiididel on türosinaasi aktiivsust märkimisväärne allareguleeriv toime ning mõju türosinaasile on konkureeriv ja pöörduv inhibeerimine, mis võib anda teadusliku aluse Cistanche valgendavate koostisosade väljatöötamiseks ja kasutamiseks. Seetõttu on tsistansil naha valgendamisel võtmeroll. See võibpärsib melaniini tootmistvärvimuutuse ja tuhmumise vähendamiseks; ja soodustab kollageeni tootmist, et parandada naha elastsust ja sära. Tänu cistanche'i nende mõjude laialdasele tunnustamisele on paljud nahka valgendavad tooted hakanud lisama taimseid koostisosi, nagu Cistanche, et rahuldada tarbijate nõudlust, suurendades seeläbi Cistanche'i kaubanduslikku väärtust.naha valgendaminetooted. Kokkuvõttes on tsistanši roll naha valgendamisel ülioluline. Selle antioksüdantne toime ja kollageeni tootv toime võivad vähendada värvimuutust ja tuhmust,parandada naha elastsust ja läiget, ja seeläbi saavutada valgendav efekt. Samuti näitab Cistanche laialdane kasutamine nahka valgendavates toodetes, et selle rolli kaubanduslikus väärtuses ei saa alahinnata.

Valgendamiseks klõpsake Organic Cistanche

Küsi lisa: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Atractylodis macrocephalus Rhizoma (AMR) on kuulus klassikaline Hiina traditsiooniline meditsiin (CTM), mida on kasutatud paljude haiguste toonikuna tuhandeid aastaid. Vana-Hiinas kasutati seda palee ilu lisatoiduna. Esialgsetes uuringutes avastati naha valgendamise funktsioon ja oluline pärssiv toime türosinaasile (TYR), mis on AMR-i melaniini koostises reaktiivne ensüüm, ning vastavatest uuringutest teatati harva. Selles uuringus kasutati kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat (HPLC) koos osalise vähimruutude regressioonianalüüsiga (PLS), et uurida keemiliste koostisosade sidusust ja 11 AMR-i partii inhibeerivat toimet TYR-i aktiivsusele. PLS-i tulemused näitasid, et kromatograafilised piigid 11 (atraktülenoliid III) ja 15 võivad olla olulised tõhusad koostisosad TYR-i aktiivsuse pärssimisel, nagu on kindlaks tehtud spektri-aktiivsuse suhetega. Lisaks kinnitati atraktülenoliidi III TYR-i inhibeeriv aktiivsus in vitro testiga -arbutiiniga, mis toimis positiivse kontrollravimina.Thein vitro testi ja molekulaarse dokkimise tulemused näitasid, et atraktülenoliid III-l on kõrge TYR-i inhibeeriv toime ja see võib olla seotud TYR-i katalüütilise tasku jääkidega.TheSeetõttu on bioanalüüs, molekulaarne dokkimine ja spektri-aktiivsuse seosed sobivad proovide kvaliteedi seostamiseks farmaatsiaga seotud toimeainetega. Ja meie õppimine paneks teoreetilise aluse AMR-i vesiekstraktide kasutamiseks valgendavas kosmeetikas.

1. Sissejuhatus

Türosinaas (TYR), mida nimetatakse ka polüfenooloksüdaasiks, on polüfunktsionaalne glükosüülitud vaske sisaldav ensüüm, mis esineb loomade, taimede ja mikroorganismide organismis laialdaselt [1–3]. Molekulaarse hapniku juuresolekul katalüüsib türosiini esmalt TYR, et oksüdeeruda dopaks ja seejärel oksüdeeritakse edasi dopakinooniks, mis isomeriseerub, moodustades dopa pigmendi. Dopa pigment moodustas lõpuks melaniini CO2 ja TRP-2 osalusel, mis põhjustavad erinevaid nahahaigusi, nagu hüperpigmentatsioon, melasma, tedretäpid ja vanuselaikud [4, 5]. TYR mängib üliolulist rolli, kuna see on melaniini koostise käigus kriitiline ensüüm ja restriktsiooniensüüm [6–8]. Pigmendilaigud ja melanoom suurenesid märkimisväärselt, suurendades TYR-i aktiivsust ja kogust [9]. Tänapäeval on TYR-i inhibiitorid pälvinud laialdast tähelepanu nende latentse kasutamise tõttu hüpopigmenteeritud ainetena [10].

Atractylodis macrocephalus rhizoma (AMR), Atractylodes macrocephalaKoidz. kuiv risoom, on üks Hiina taimseid ravimeid, mis on koostatud Hiina farmakopöas [11–15]. Vana-Hiinas moodustati AMR-ist kuulus klassikaline valgendamise valem, mida nimetati "seitsmevalgeks salviks" ja seda kasutati palee ilu lisatoiduna [16]. Teatati, et AMR sisaldas peamiselt seskviterpenoide ja triterpenoide (sealhulgas atraktülenoliid I, atraktülenoliid II ja atraktüleenoliid III), polüatsetüleene, kumariine ja fenüülpropanoide, flavonoide ja flflavonoidglükosiide, polüsahhariide, steroide, [17,1] konnekvinoide ja muid bensokvinoide. Siiski teatati selle mõjust valgendavale nahale ja toimeainetele harva.TheNende asjakohasuse uurimiseks kasutati spektri-aktiivsuse seose uurimist.

Spektri ja aktiivsuse seose uurimine ei saa mitte ainult mööda hiilida keemiliste koostisosade ja farmakodünaamika vahelisest eraldatusest, vaid ka matemaatilise mudeli abil piisavalt seostada sõrmejälgi farmakodünaamikaga [19, 20].ThSpektri ja aktiivsuse suhe uurib sõrmejälje ja farmakodünaamika vahelist tähtsust, et pakkuda usaldusväärset meetodit Hiina taimsete ravimite materiaalse baasi selgitamiseks [21].Thesõrmejäljed määrati tavaliselt HPLC, UPLC, GC, GC MS ja LC-MS abil [19, 22–24]. "Farmakodünaamika" andmed koguvad mudelid tavaliselt [25].TheAndmetöötlusmeetodid hõlmavad peamiselt põhikomponentide analüüsi (PCA), osalist vähimruutude (PLS) regressioonianalüüsi, ortogonaalset osalist vähimruutude diskrimineerivat analüüsi (OPLS-DA), kanoonilist korrelatsioonianalüüsi (CCA) ja halli relatsioonianalüüsi (GRA) tavaliselt [26–29].

Et selgitada AMR-i komponente, mis aitavad kaasa TYR-i pärssimisele [30, 31], määrati HPLC abil 11 AMR-i partii sõrmejäljed; TYR inhibeerimise aktiivsuse farmakodünaamikat in vitro hinnati biokeemilise ensümaatilise meetodiga. 2e efektiivsed ühendid valiti spektri-aktiivsuse seose mudeli abil, mis määrati kindlaks sõrmejälgede piikide korreleerimisel farmakodünaamiliste andmetega. Lisaks kinnitatakse toimeained in vitro katsete ja molekulaarsete dokkimiskatsetega. 2is uuring võiks anda teoreetilise aluse AMR-i rakendamiseks pigmenteerunud nahahaiguste raviravimina ja selle väljatöötamiseks valgendava kosmeetika lisana.

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Kemikaalid ja materjalid.Metanool (suurem kui 99,5 protsenti või sellega võrdne) osteti ettevõttelt Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. (Shanghai, Hiina). Fosforhape (suurem kui 99 protsenti või sellega võrdne) osteti ettevõttelt Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd. (Chengdu, Hiina). Atsetonitriil osteti firmalt Tiandi Reagent Co., Ltd. (USA). Atractylodes III (suurem või võrdne 98 protsenti), fosfaatpuhver, türosinaas ja L-türosiin osteti ettevõttelt Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. (Peking, Hiina). -Arbutiin (suurem kui 99,7 protsenti või sellega võrdne) osteti Hiina toidu- ja ravimite tuvastamise akadeemiast. Türosinaas ja L-türosiin lahustati enne kasutamist fosfaatpuhvris (pH 6,8). Atraktüloosid III ja -arbutiin lahustati 50% metanoolis (maht/maht).Thepuhas vesi osteti ettevõttelt Hangzhou Wahaha Baili Food Co., Ltd. (Hangzhou, Hiina). Comix C18 kolonn (250 × 4,6 mm, 5 μm) osteti ettevõttelt Guangzhou Philemon Scientific Instrument Co., Ltd. (Guangzhou, Hiina).

2.2. Taimsed materjalid.TheKoguti 11 partiid AMR-ravimiproove ja need on näidatud tabelis 1.Theülaltoodud proovid kinnitas professor Ronggui Qin (Guizhou meditsiiniülikooli farmaatsia kool).

2.3. Ekstraheerimine.Iga proovi ürditükid (umbes 10 g) kaaluti täpselt ja asetati ümarapõhjalisse kolbi, lisades vett ja kuumutades ekstraheerimiseks püstjahutiga. AMR-i vesiekstrakti saamiseks kuivatati produktid alandatud rõhul. 2en, AMR-i vesiekstraktid (umbes 3000 mg) kaaluti täpselt ja lahustati 50-protsendilises metanoolis (maht/maht).

2.4. HPLC analüüs.Comix C18 pöördfaasikromatograafia kolonn (250 × 4,6 mm, 5 μm).Theliikuv faas 0,1 protsenti fosforit oli happelise vee (A)-atsetonitriili (B) segu; elueerimissüsteem on kavandatud ja on loetletud tabelis 2.Thejärgmine kiirus fikseeriti 0,6 ml/min. 2e kolonni temperatuur oli 30 kraadi .TheUA lainepikkus oli 210 nm.Thesüstimismaht oli 30 µl.

Avastamismeetodit kontrolliti täpsustesti, korratavuse testi ja stabiilsustestiga.

2.5. Kemomeetriline analüüs.Selles uuringus imporditi HCA, PCA ja OPLS-DA jaoks mõeldud tarkvara SIMCA14.1 11 AMR-i partii sõrmejälgede üldine piikide teave.

2.6. TYR inhibeerimise test in vitro. TheAMR-i ekstraktid lahustati fosfaatpuhvriga (pH 6,8), säilitati 4 kraadi juures ja kasutati seejärel ensüümi testimiseks.

Selles uuringus kasutati TYR-i aktiivsuse inhibeerimise määramiseks substraadina L-türosiini.Thereaktsioonilahused valmistati vastavalt tabelile 3 ja määrati AMR inhibeerimise määr TYR aktiivsusele. Esmalt pandi reaktsioonilahused 10 minutiks 37-kraadisesse veevanni. Teiseks lisati TYR-i lahus kohe T2 ja T4 reaktsioonilahustele. Teiseks reageerisid reaktsioonilahused pärast täielikku segamist 37-kraadise veevanni konstantsel temperatuuril 10 minutit. Lõpuks mõõdeti neeldumisväärtuste reaktsioonilahused kohe 475 nm juures. Inhibeerimise määrad ( protsenti ) saadi võrrandist: inhibeerimismäär ( protsenti ) =[(AT2-AT1) - (AT4 - AT3)]/(AT2-AT1) × 100 protsenti.

2.7. Spektri-aktiivsuse suhete analüüs. TheIga piigi retentsiooniaegade reguleerimiseks kasutati tarkvara "Hiina traditsioonilise meditsiini kromatograafilise sõrmejälgede sarnasuse hindamise süsteem 2012 A Edition" ning piigi pindala (PA) töödeldi võrdsustamise teel.Then, saadi kvantitatiivsed andmed.ThePLS regressioonivõrrand seadistati tarkvaraga SIMCA14.1; piigi pindala võeti sõltumatuks muutujaks (X) ja TYR inhibeerimise määr määrati sõltuvaks muutujaks (Y).

2.8. Atractylodes III inhibeeriv toime TYR-ile ja molekulaarsele dokkimisele.Et tõendada Atractylenolide III inhibeerivat toimet TYR-ile, viidi läbi in vitro ensümaatilise aktiivsuse testid -arbutiiniga, mis toimis positiivse kontrollravimina.

Dokkimise simulatsioonides rakendati programmi AutoDock4.2. Agaricus bisporuse kristallstruktuur (PDB ID: 2Y9X) võeti TYR 3D struktuuriks [32]. Teostasime TYR-i Atractylodes III-ga dokkimise simulatsioone. AutoDock Vinaga dokkimise eesmärgil määrati ruudustiku suurus (x, y, z) =(16, 12, 14) ja ruudustiku keskpunkt (x, y, z) { {10}} (−10,348, −28,279, −45,925). Igas simulatsiooniprotseduuris toimib vaikeparameetritega edenemine AutoGridi ja AutoDocki kaudu. Kõige sobivamate ligandi sidumissuundade kindlakstegemiseks võeti vastu Lamarcki geneetiline algoritm (LGA).

3. Tulemused ja arutelu

3.1. Metoodika Valideerimine.Analüütilise meetodi jaoks kinnitati täpsus, korratavus ja stabiilsus. Täppistestides ei ületanud suhteliste retentsiooniaegade (RRT) ja suhteliste piikide pindalade (RPA) täpsus {{0}}.0RSD-s vastavalt 2 protsenti ja 4 protsenti; sarnasus oli 1. RRT-de ja RPA-de korratavus oli väiksem kui 0,11 protsenti ja 4 protsenti RSD-s ning sarnasus oli suurem või võrdne 0,998. Stabiilsust hinnati ühe proovilahuse testimisega, mida säilitati laborikeskkonna temperatuuril 0, 6, 8, 12 ja 18 tunni pärast. Tavaliste piikide RRT-de ja RPA-de RSD-d olid vastavalt alla 0,1 protsendi ja 4 protsenti; sarnasus oli suurem kui 0,999.Thetulemused näitasid, et sõrmejälgede analüüsiks mõeldud AMR-i eksperimentaalne süsteem on stabiilne ja töökindel.

3.2. HPLC sõrmejälgede tuvastamise ja sarnasuse analüüs.Atractylodes III võrdlusainete sõrmejäljed on näidatud joonisel 1(a). AMR-proov näitas oma piikide vahel soodsat segregatsiooni (joonis 1 (b)). Täiuslikes tingimustes loodi 11 erineva AMR-proovi partii HPLC sõrmejäljed (joonis 1 (c)) ja sarnasused arvutati. Sarnasuste tulemused on näidatud tabelis 4, mis näitas, et 11 proovi kõik sarnasusväärtused olid suuremad kui 0,8, mis näitab, et kõik proovid olid keemilise koostise liikide poolest sarnased. Kuusteist ühist piiki täheldati nende UV-spektri retentsiooniaja võrdlemisel. Piik 11 tuvastati võrdlusainetega kui Atractylodes III. 16 ühise piigi PA-de RSD-d olid vahemikus 1,18–58,68 protsenti (tabel 5). Need tulemused näitasid, et erinevatest tootmispiirkondadest pärit AMR-i keemiliste ainete sisaldus oli erinev.

3.3. Kemomeetriline analüüs

3.3.1. HCA. HCA-d rakendati AMR tuvastamiseks erinevatest tootmispiirkondadest erinevate klastrite ja sõrmejälgede sarnasuse põhjal. Indikaatorina kasutati 11 AMR-i partii ühist piigi pindala ja klasteranalüüsi viis läbi tarkvara SIMCA14.1. Tulemused on näidatud joonisel 2. AMR-i 11 partii proovid jaotati 3 kategooriasse, kui klasside vahemaad jäid vahemikku 20–30, millest S4, S8, S9, S1 ja S3 rühmitati I kategooriasse ja S7 oli rühmitati II kategooriasse, S2, S5, S10, S6 ja S11 aga III kategooriasse.

3.3.2. PCA. Selles uuringus arvutati 11 AMR-i partii PCA; 16 põhikomponendi puhul oli esimese viie põhikomponendi dispersiooni kumulatiivne panus 91,3 protsenti.TheAnalüüsiks kasutataks kahe esimese komponendi skoorimaatriksit, kuna kumulatiivne dispersioon ületas 65,9 protsenti.Theseetõttu konstrueerige teabe puudumisel põhikomponendi kahemõõtmeline tasapind, et abstsisstell on põhikomponent ja ordinaat on teine ​​​​põhikomponent. Seejärel projitseeriti 11 proovi 2D-tasandile, nii et täheldati nende loomulikku kogunemist (joonis 3 (a)). Selgus, et S4, S8, S9, S1 ja S3 klassifikatsioonid olid selged, S7 võib jagada ühte tüüpi ja S2, S5, S10, S6 ja S11 võib jagada teiseks tüübiks.ThePCA tulemus oli kooskõlas HCA tulemusega.

Koormusdiagrammi iga punkt tähistas kromatograafilist piiki, mis näitab iga kromatograafilise piigi panust kromatograafilise tipu terviklikku mõju.põhikomponendid.Themuutujate kaaluväärtus võibpeegeldavad korrelatsiooni keemilise koostise vahelja valim kõige suuremal määral.Thekaugemalkoormusdiagrammi päritolu, seda suurem on muutujakaal.Thetulemus on näidatud joonisel 3(b), mis soovitaset kromatograafilised piigid 9, 11 (atraktülenoliid III),ja 12 avaldasid suuremat mõju esimesele põhikomponendile. Kuid kromatograafilised piigid on 4, 5, 6, 15 ja 16avaldas suuremat mõju teisele põhikomponendile. Seenäitas, et ülaltoodud kromatograafilistel piikidel võib olla asuurem mõju klassifikatsioonile.

3.3.3. OPLS-DA.The11 proovi jagati kahte rühma, millest S1, S3, S4, S8 ja S9 olid esimene rühm ning S2, S5, S6, S7, S10 ja S11 teine ​​rühm.TheKõigi proovide ühine tippteave imporditi OPLS-DA tarkvara SIMCA14.1. R2 X ja R2 Y iseloomustavad mudeli seletuskiirust x ja y maatriksitele eraldi ning Q2 iseloomustab mudeli ennustamisvõimet.Thetulemused näitasid, et R2 X, R2 Y ja Q2 väärtused olid vastavalt 0,939, 0,992 ja 0,583, mis kõik olid suuremad kui {{ 9}}.5, mis näitab, et mudel suutis eristada kahte valimirühma ning sellel oli andmetöötluses parem sobivus ja prognoosimisvõime. Seda saab kasutada AMR eristamiseks erinevatest tootmispiirkondadest (joonis 4(a)).

TheOPLS-DA mudeli projektsiooni (VIP) jaoks oluliste muutujate profiil võib kajastada iga kromatograafilise piigi panust proovi.The16 kromatograafilise piigi VIP väärtused peegeldasid iga AMR-i proovi mõjujõudu. Lähtudes valikupõhimõttest, et VIP väärtus oli suurem kui 1.0 ja veariba oli algpunktist väiksem (joonis 4(b)), valiti välja 4 olulist kromatograafilist piiki, mis olid järjestatud: tipp 1 > tipp 6 > tipp 16 > tipp 5.

Thekoormusdiagrammi analüüsitulemused on näidatud joonisel 4(c), mis näitas, et ülaltoodud 4 olulise kromatograafilise piigi asukohad olid lähtepunktist kaugel. Tehti ettepanek, et 4 kromatograafilist piiki mõjutasid oluliselt AMR-i klassifikatsiooni ja need 4 kromatograafilise piigiga esindatud komponendid võivad olla iga proovi peamised markerkomponendid.

3.4. AMR-i inhibeeriva aktiivsuse hindamine TYR-ile in vitro.TheErinevate tootmispiirkondade AMR-i inhibeeriv toime TYR-i aktiivsusele määrati biokeemilise ensüümi meetodil.Theproovide mõju TYR aktiivsusele on loetletud tabelis 6. Iga 10 mg/ml kontsentratsiooniga proov võis inhibeerida TYR aktiivsust ja farmakoloogiline aktiivsus oli märkimisväärselt erinev, mille hulgas oli S5 inhibeerimise määr kõrgeim, S6 aga madalaim.

3.5. Spektri-efekti suhete analüüs. Selles artiklis kasutati spektri-aktiivsuse seose analüüsimiseks PLS-i.Theosalise regressiooni koefitsient ja VIP väärtus on näidatud joonistel 5(a) ja 5(b), mis näitasid, et kromatograafilised piigid 1, 2, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 15 ja 16 korreleerusid positiivselt TYR aktiivsuse pärssimist, kuid kromatograafilised piigid 3, 4, 8, 12, 13 ja 14 olid nendega negatiivses korrelatsioonis. TYR-i aktiivsuse inhibeerimisega positiivselt korreleeruvate kromatograafiliste piikide hulgas olid kromatograafiliste piikide 11 (Atractylodes III) ja 15 VIP väärtused suuremad kui 1, mis näitas, et need kaks komponenti mõjutavad oluliselt TYR-i aktiivsuse inhibeerimist.

3.6. Atractylodes III inhibeeriv toime TYR-ile ja molekulaarsele dokkimisele.TheAtractylodes III inhibeeriv toime TYR aktiivsusele määrati biokeemilise ensüümi meetodil in vitro, kasutades positiivse kontrollina -arbutiini.Thetulemused näitasid, et Atractylodes III ja -arbutiini inhibeerimise määr TYR aktiivsusele oli vastavalt 63,68 ± 2,36 protsenti ja 94,85 ± 0,35 protsenti, kui proovide kontsentratsioon oli 1 mg/ml.

TYR-iga interakteeruva Atractylodes III sidumismehhanismi uurimiseks kasutati molekulaarset dokkimist (joonised 6 (a)–6 (c)).TheSeene türosinaasi sidumissait koosneb kitsast madalast õõnsusest, kus on kaks vase iooni (Cu2 pluss), millest kumbki on stabiliseeritud kolme histidiinijäägiga (nt His 61) ensüümi aktiivses keskuses. Selles uuringus on Atractylodes III väikese molekuliga ühend, mis asub ensüümi aktiivses keskuses ja interakteerub ümbritsevate jääkidega (His 244, Phe 264, Ala 286, His 263, Val 283, His259, His 85, Asn 260). Märkimisväärselt moodustas Atractylodes III stabiilse vesiniksideme Asn 260-ga sideme pikkusega 1,9 ˚A.

4. Järeldused

Selles uuringus loodi süstemaatiline meetod HPLC sõrmejälgede ühendamiseks kemomeetrilise analüüsiga, et eristada erineva päritoluga AMR-i proove, ja AMR-i valgendav toime tõestati biokeemilise ensüümi meetodiga. Spektri-efekti seosed näitasid, et kromatograafilised piigid 1, 2, 5, 6, 9, 10, 11, 15 ja 16 olid positiivses korrelatsioonis AMR-i inhibeeriva toimega TYR-i aktiivsusele, mille hulgas võivad olla piigid 11 (atraktülenoliid III) ja 15. olulised aktiivsed koostisosad. Samal ajal on atraktülenoliidil III kõrge TYR-i inhibeeriv aktiivsus in vitro katses ja molekulaarse dokkimise tulemus näitas, et selle mehhanism võib olla seotud aminohappejääkide seondumisega TYR-i katalüütilises kapslis.TheSeetõttu tõestasid need tulemused, et bioanalüüs, molekulaarne dokkimine ja spektri-aktiivsuse seosed on sobivad proovide kvaliteedi seostamiseks farmaatsiaga seotud toimeainetega.

Andmete kättesaadavus

Selle uuringu tulemuste toetuseks kasutatud andmed on nõudmisel saadaval vastavalt autorilt.

Avalikustamine

Yong-Qin Liu ja Chang-Yan Xu peetakse esimesteks autoriteks.

Huvide konfliktid

Autorid kinnitavad, et neil ei ole selles uuringus huvide konflikte.

Autorite kaastööd

Tööle aitasid kaasa Yong-Qin Liu ja Chang-Yan Xu.

Tänuavaldused

Seda uuringut rahastas Guizhou provintsi üliõpilaste innovatsiooni- ja ettevõtluskoolitusprogramm (nr 20195200925).

Viited

[1] Y.-L. Wang, G. Hu, Q. Zhang jt, "Salvia miltiorrhiza ja Carthamus tinctoriuse türosinaasi inhibiitorite sõelumine ja iseloomustamine spektri-efekti seose analüüsi ja molekulaarse dokkimisega", Journal of Analytical Methods in Chemistry, vol. 2018, artikli ID 2141389, 10 lk, 2018.

[2] HX Cui, FF Duan, SS Jia, FR Cheng ja K. Yuan, "Torreya grandis fort. ex Lindl seemneõlide antioksüdantsed ja türosinaasi inhibeerivad tegevused", BioMed Research International, vol. 2018, artikli ID 5314320, 10 lk, 2018.

[3] Y. Tian, ​​Z. Zhang, N. Gao, P. Huang ja FY Wu, "Märgisevaba luminestsentsanalüüs türosinaasi aktiivsuse jälgimiseks ja inhibiitorite skriinimiseks reageerivate lantaniidi koordinatsioonipolümeeride nanoosakestega", Spectrochimica Acta A osa: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, vol. 228, 2020.

[4] H. Liu, B. Liu, P. Huang, Y. Wu, FY Wu ja L. Ma, "Türosinaasi kolorimeetriline määramine, mis põhineb kulla nanoosakeste poolt katalüüsitud in situ hõbeda metalliseerimisel", MikroChim Acta, vol. 187, nr. 10, lk. 551, 2020.

[5] DC Franco, GS de Carvalho, PR Rocha, R. da Silva Teixeira, AD da Silva ja NR Raposo, "Resveratrooli analoogide pärssimine seente türosinaasi aktiivsusele", Molecules (Basel, Šveits), vol. 17, nr. 10, lk 11816–11825, 2012.

[6] HH Kim, JK Kim, J. Kim, S.-H. Jung ja K. Lee, "Characterization of caffeoylquinic acids from episodes thunbergianus and their melanogenesis inhibition activity", ACS Omega, vol. 5, nr. 48, lk 30946–30955, 2020.

[7] F. Pintus, D. Span`o, A. Corona ja R. Medda, "Anti tyrosinase activity of Euphorbia characiasextracts", PeerJ, vol. 3, lk. e1305, 2015.

[8] M. Shi, Y. Zhang, M. Song, Y. Sun, C. Li ja W. Kang, "Psoralea corylifolia L. markerkomponentide sõelumine spektri-efekti seose ja komponentide koputamise abil". välja UPLC-MS(2)," International Journal of Molecular Sciences, vol. 19, nr. 11. 2018.

[9] G.-H. Wang, C.-Y. Chen, T.-H. Tsai et al., "Angelica dahurica juureekstraktide türosinaasi inhibeeriva ja antioksüdantse toime hindamine nelja erineva probiootilise bakteri fermentatsiooni jaoks", Journal of Bioscience and Bioengineering, vol. 123, nr. 6, lk 679–684, 2017.

[10] YS Lin, HJ Chen, JP Huang jt, "Türosinaasi inhibeeriva toime kinetika Viti vinifera lehtede ekstraktidega", BioMed Research International, vol. 2017, artikli ID 5232680, 5 lehekülge, 2017.

[11] S. Yang, J. Zhang, Y. Yan jt, "Võrgu farmakoloogiapõhine strateegia Atractylodes macrocephala Koidz. farmakoloogiliste mehhanismide uurimiseks kroonilise gastriidi raviks", Frontiers in Pharmacology, vol. 10, lk. 1629, 2019.

[12] H.-R. Yang, J. Yuan, L.-H. Liu, W. Zhang, F. Chen ja C.-C. Dai, "Endophytic Pseudomonas fluorescent induced seskviterpenoid akumulatsioon, mida vahendavad giberelliinhape ja jasmoonhape Atractylodes macrocephala Koidz taimedes", Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC), vol. 138, nr. 3, lk 445–457, 2019.

[13] L. Hu, X. Chen, J. Yang ja L. Guo, "Traditsioonilise hiina meditsiini Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu) geograafiline autentimine stabiilse isotoobi ja mitmeelemendiliste analüüside abil", Rapid Communications in Mass Spectrometry, vol. . 33, nr. 22, lk 1703–1710, 2019.

[14] H. Li ja G. Yang, "Atractylodes macrocephala Koidz. (Asteraceae) täielik kloroplasti genoom", Mitokondriaalne DNA osa B, vol. 5, nr. 3, lk 2060-2061, 2020.

[15] S. Gu, L. Li, H. Huang, B. Wang ja T. Zhang, "Atractylodes macrocephala Koidzi eeterlike õlide kasvajavastane, viirusevastane ja põletikuvastane efektiivsus", toodetud erinevate töötlemismeetodite ja molekulidega , vol. 24, nr. 16. 2019.

[16] J. Wang, L. Peng, M. Shi, C. Li, Y. Zhang ja W. Kang, "Spektri efekti seos ja komponentide väljalangemine Angelica dahurica radix'is kõrgjõudlusega vedelkromatograafia abil-Q täidesaatev hübriidne kvadrupool-orbitrap massispektromeeter," Molecules, vol. 22, nr. 7. 2017.

[17] B. Zhu, Q.-L. Zhang, J.-W. Hua, W.-L. Cheng ja L.-P. Qin, "TheAtractylodes macrocephala Koidz. traditsioonilised kasutusviisid, fütokeemia ja farmakoloogia: ülevaade," Journal of Ethnopharmacology, kd. 226, lk 143–167, 2018.

[18] Y.-Y. Feng, H.-Y. Ji, X.-D. Dong ja A.-J. Liu, "Atractylodes macrocephala Koidzi alkoholis lahustuv polüsahhariid indutseerib Eca-109 rakkude apoptoosi," Carbohydrate Polymers, vol. 226, artikli ID 115136, 2019.

[19] W. Li, Y. Zhang, S. Shi jt, "Antioksüdantide ja türosinaasi aktiivsuse spektri-efekti seos Malus pumila järgijatega UPLC-MS/MS ja komponentide väljalülitamise meetodil", Food and Chemical Toxicology, vol. 133, artikli ID 110754, 2019.

[20] B. Xu, J. Gao, S. Zhao, Y. Li, Y. Du ja H. Pan, "Thespektri-efekti seos HPLC sõrmejälje ja viirpuulehtede turgutava vere ja lahustava staasiefekti vahel," Chromatographia, kd 83, nr 3, lk 409–421, 2020.

[21] Y. Feng, Z. Jing, Y. Li et al., "Shuang Huang Liani süstimise anafülaktoidsete komponentide skriinimine, analüüsides spektri-efekti seoseid koos UPLC-TOF-MS-iga", Biomedical Chromatography, vol. 33, nr. 2, artikli ID e4376, 2019.

[22] X. Jiang, L. Tao, C. Li jt, "Hiina taruvaigu rühmitamine, spektri-mõju seos ja antioksüdantsed ühendid erinevatest piirkondadest, kasutades mitme muutujaga analüüse ja off-line anti-DPPH analüüsi", Molecules, vol. . 25, nr. 14. 2020.

[23] Y. Zhao, X.-M. Teie, H. Jiang, G.-X. Zou ja B. Wang, "Spektri efekti seosed kõrgsurvevedelikkromatograafia sõrmejälgede ja Leontopodium leontopodioides (Willd.) Beauv" põletikuvastase toime vahel, Journal of Chromatography B, vol. 1104, lk 11–17, 2019.

[24] X. Zhou, Y. Li, M. Zhang jt, "UPLC sõrmejälgede spektri-efekti seos Si Jun Zi Tangi kopsuvähivastase toimega", Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, vol. 2019, artikli ID 7282681, 9 lk, 2019.

[25] X. Sun, Q. Zhao, Y. Si et al., "Sarcandra glabra proteoglükaanide bioaktiivne struktuurne alus spektri-efekti seostel", Journal of Ethnopharmacology, vol. 259, artikli ID 112941, 2020.

[26] S. Gao, H. Chen ja X. Zhou, "Uuring Ligustrum lucidum'i ksantiini oksüdaasi inhibeeriva toime spektri-efekti seose kohta", Journal of Separation Science, vol. 42, nr. 21, lk 3281–3292, 2019.

[27] J. Tan, J. Liu, H. Wang jt, "Xueshuan Xinmainingi tableti verd aktiveerivate komponentide tuvastamine spektri-efekti seose ja võrgufarmakoloogilise analüüsi põhjal", RSC Advances, vol. 10, ei. 16, lk 9587–9600, 2020.

[28] J. Zhang, T. Chen, K. Li jt, "Rosmariini aktiivsete koostisosade sõelumine UPLC sõrmejälje ja vasorelaksandi aktiivsuse vahelise spektri-efekti suhete põhjal, kasutades kolme kemomeetriat", Journal of Chromatography B, vol. 1134-1135, artikli ID 121854, 2019.

[29] Y. Chen, G. Pan, W. Xu jt, "HPLC sõrmejälgede ja Sabia parviflflora antioksüdantse aktiivsuse vahelise spektri-efekti seose uuring", Journal of Chromatography B, vol. 1140, artikli ID 121970, 2020.

[30] M. Liao, P. Yan, X. Liu jt, "Sektri-efekti seos šikoniinide ja šikonofuraanide kasvajavastase toime jaoks meditsiinilises Zicaos UHPLC-MS/MS ja kemomeetriliste lähenemisviiside abil", Journal of Chromatography B, vol. 1136, artikli ID 121924, 2020.

[31] JH Wu, YT Cao, HY Pan ja LH Wang, "Kasvajavastaste koostisosade tuvastamine kärnkonna mürgis spektri-mõju seose analüüsi ja selle farmakoloogilise mehhanismi uurimise abil", Molecules, vol. 25, nr. 18. 2020.

[32] J. Tang, J. Liu ja F. Wu, "Molecular docking uuringud ja bioloogiline hindamine 1,3,4-tiadiasooli derivaatidele, mis kannavad Schiffffi alusosi türosinaasi inhibiitoritena", Bioorganic Chemistry, vol. 69, lk 29–36, 2016.