Kvantitatiivne proteoomiline uuring paljastab polütsüstilise maksahaiguse fibrinogeeni raja Ⅲ

4. Arutelu

Polütsüstiline maksahaigus(PLD) on tavaliselt ekstrarenaalne ilming, mis on seotud autosomaalse domineerimisegapolütsüstiline neeruhaigus(ADPKD). PLD-d iseloomustab sapiteede progresseeruv laienemine ja mitmete tsüstide progresseerumine, mis hõivavad vähemalt poole maksa parenhüümi mahust. Mitmed praegused ravistrateegiad põhinevad kirurgilistel ja farmakoloogilistel protseduuridel, et parandada haiguse sümptomeid. Sel põhjusel on PLD ravi seni olnud ebaefektiivne ja ainus ravivõimalus on maksasiirdamine.45]. Selle põhjuseks on peamiselt asjaolu, et tsüstogeneesi peamine sisemine molekulaarne mehhanism jääb teadmata. Peamised lähenemisviisid on keskendunud cAMP signaalirajale ja somatostatiini analoogidele ning mitmetele uutele sihtmärkidele (näitekshistooni deatsetülaas 6,Cdc25A fosfataasi, PPAR- ja maatriksi metalloproteaase) on hinnatud prekliinilistes uuringutes, kuid neid tuleb kliiniliselt testida.8]. Seega kasvab huvi molekulaarsete radade mõistmise ja uute ravistrateegiate väljatöötamise vastu [2,8]. Käesoleva ja uudse SWATH-MS töö eesmärki iseloomustasid polütsüstiliste maksade proteoomilised muutused ning uute arusaamade ja terapeutiliste sihtmärkide pakkumine PLD jaoks.

Klõpsa, et neeruhaiguse raviks herba tsüstitanche teha

Varasemates uuringutes oleme tuvastanud ADPKD (Pkd1cond/cond; Tam-Cre) ortoloogilises mudelis neerutsüstogeneesi arenguakna, mis viitab sellele, et sekundaarsete sündmuste ajastus võib mõjutada tsüstilise neeruhaiguse raskust. Sama strateegiat kasutades uurisime, kas see neerude arengu aken vastas ajaliselt sarnasele maksa arenguaknale. Huvitaval kombel täheldasime, et tsüstilise maksa fenotüüp ei järgi sama ajastust, mis viitab sellele, et neerul ja maksal võivad olla erinevad tsüstogeneesi mehhanismid. Edasised uuringud peaksid keskenduma mõlema elundi haiguslike ühiste ja erinevate mehhanismide tuvastamisele ning tsüstogeneesi tundmatu maksa arenguakna tuvastamisele. Edasiseks analüüsiks kasutasime järgmise põlvkonna kvantitatiivset proteoomilist lähenemist SWATH-MS, et teha tsüstilise maksahaiguse diferentsiaalne proteoomianalüüs kerge ja raskema PLD fenotüübi korral samas neeru arenguaknas. Meie andmed viitavad sellele, et haiguse progresseerumise kaugelearenenud staadiumides suureneb dereguleeritud radade arv, tõenäoliselt haiguse sekundaarsete mõjude tõttu. Samamoodi kinnitavad need tulemused ideed, et tsüsti kasv kulgeb kahes suures etapis: tsüsti initsiatsioon ja tsüsti progresseerumine [46]. Huvitaval kombel tuvastasid nii kerge (p14 rühm) kui ka raske (rühm p12) tsüstilise seisundi proteoomianalüüsid fibrinolüüsi valgukompleksid, mis olid otseselt seotud maksa tsüstilise haigusega. Haiguse kergemates staadiumides tuvastasime ANXA2 kui ühe huvitava valgu, mida valideerida kui PLD potentsiaalset terapeutilist sihtmärki. ANXA2 on kaltsiumi reguleeritud membraani siduv valk, mida toodavad paljud rakutüübid, sealhulgas epiteeli-, dendriit-, trofoblast- ja kasvajarakud, aga ka monotsüüdid ja makrofaagid. Peamine roll on säilitada rakupinna proteolüütilist aktiivsust, kuid täidab ka mitmeid rakusiseseid funktsioone, sealhulgas eksotsütoos, endotsütoos, membraani parandamine [47] ja kleepuvate rakkudevaheliste ühenduste säilitamine [48]. Selle arvukad funktsioonid aitavad kaasa fibrinolüüsile, põletiku reguleerimisele ja immuunsüsteemi aktiveerimisele ning kudede vigastustele ja paranemisele; Selle tulemusena on ANXA2 düsfunktsioon seotud mitme inimese haigusega, näiteks rakuvälise maatriksi ümberkujunemisega ja maksafibroosiga [49, 50], mis on PLD haiguse progresseerumise tavaline tunnus [8]. Huvitav on see, et maksahaiguse raskes staadiumis avastas meie proteoomianalüüs mitmeid fibrinogeenikompleksiga seotud valke. Kudede ja veresoonte vigastuse ajal muudetakse fibrinogeen ensümaatiliselt trombiini toimel fibriiniks ja fibrinolüüsi käigus lagundatakse fibriin põhiensüümi plasmiini (plasminogeeni aktiivne vorm) toimel. Fibrinogeene seostatakse MAPK-ga [51,52] ja integriinidega [53] – kahe teega, mis on osutunud prekliinilistes uuringutes tõhusaks ADPKD potentsiaalse ravina [54,55]. Isegi ühe üleekspresseeritud fibrinogeeni (FIBA) loommudelil on näidatud tsüstiline haigus [56]. Veelgi enam, fibrinogeeniklastrite suurenenud aktiivsus PLD-s pakub uut perspektiivi haiguse ravimiseks võrreldes praeguste eksperimentaalsete ravimitega [57]. Järelikult võib selle klastri vähenemine toetada uut toimemehhanismi ravimitele, milles terapeutilisteks sihtmärkideks on fibrinogeeni perekonna valgud. Suurem näide oleks ERR-i (östrogeeniga seotud retseptori) blokeerimine, harvaesineva tuumaretseptori [58,59], mis moduleerib fibrinogeeni taset hüpofibrinogeneemia seisundites, mis on põhjustatud dieedist põhjustatud rasvumisest, 2. tüüpi suhkurtõvest, maksakahjustusest ja alkoholist. -indutseeritud oksüdatiivne stress [60,61]. Täpsemalt, pöördagonistid, nagu GSK5182 (CAS: 877387-37-6) [60–66] ja DN200434 [67,68], pakuksid sellist kasulikku toimet fibrinogeeni taseme languse kaudu.

Kokkuvõttes tuvastasime kvantitatiivse proteoomilise SWATH-MS tehnoloogia abil mitu uudset sihtmärki ja rada, mis on seotud PLD füsiopatoloogiaga. Rõhutasime fibrinogeenide ja fibrinolüüsi (ja teiste seotud tuvastatud valkude) pakutavat uudset terapeutilist võimalust, peamiselt seetõttu, et kõik läbiviidud oluliste erinevustega valideerimised on seotud fibrinogeenikompleksiga. Sellegipoolest on võimalik seda kinnitada tulevastes prekliinilistes uuringutes ja funktsionaalsemates uuringutes, et iseloomustada meie sihtkandidaatide täpset rolli PLD-s. Kokkuvõtteks võib öelda, et see töö on loonud uue mehhanismi ja võimaluse tulevaste PLD füsiopatoloogia uuringute jaoks, mis toob kaasa võimalikud uued haiguse raviviisid.

5. Kokkuvõte

Teatasime uudsest proteoomilisest kvantitatiivsest uuringust, mis põhines SWATH-MS tehnoloogial ja võrdles metsikut tüüpi ja polütsüstiliste maksade proteoome. Tuvastati mitu uudset rada ja sihtmärki, mis laiendasid teadmisi molekulaarsete mehhanismide kohta PLD valdkonnas ja tõstsid esile fibrinogeeni kompleksi kui võimalikku uut terapeutilist sihtmärki.

Täiendavad materjalid: järgmise toetava teabe saab alla laadida aadressilt: https: //www.mdpi.com/article/10.3390/biomedicines10020290/s1, joonis S1: kvalitatiivne DDA massispektromeetria analüüs uuringu erinevates rühmades, joonis S2: TAS (Kogupindala summad) normaliseerimisgraafikud p14 rühm, joonis S3: p12 rühma TAS (kogupindala summad) normaliseerimisgraafikud, joonis S4: SWATH-MS analüüsi järgi oluliste erinevustega valkude järelevalveta klasteranalüüsi soojuskaardi joonis, joonis S5: järelevalveta Kõigi SWATH-MS-i abil tuvastatud valkude soojuskaardi klastrite analüüs, joonis S6: SWATH-MS andmete järelevalveta PCA-d, joonis S7: maksa tsüstogeneesis oluliselt reguleeritud valgu GO rikastamine ja raja analüüs vastavalt Stringile ja Reactome'ile, joonis S8: Täielik valk-valk interaktsiooni kaart vastavalt stringile, joonis S9: valideerimiseks valitud sihtmärkide kvantitatiivsete proteoomiliste SWATH-MS andmete kastdiagrammid, tabel S1: ID Analüüsitud proovid, jaotus igas rühmas ja proovide kogumine püssijooksude hankimiseks, et luua spektraalraamatukogu, tabel S2: RT-qPCR analüüsiks kasutatud praimerite järjestuste loend, tabel

Autori kaastööd:Kontseptualiseerimine, MAG-G. ja AC; metoodika, AC, MV-G., LN-G., AM-V., MdPC-V. ja SBB; formaalne analüüs, AC; ressursid: MAG-G. ja SBB; andmete kureerimine, AC; kirjutamine – algse mustandi ettevalmistamine, AC; kirjutamine – läbivaatamine ja toimetamine, MAG-G., SBB ja LN-G.; visualiseerimine, MAG-G. ja AC; järelevalve, MAG-G.; projektihaldus, MAG-G.; rahastamise omandamine, MAG-G. Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooni läbi lugenud ja sellega nõustunud.

Rahastamine: Seda uuringut rahastas Instituto de Salud Carlos III FISi/FEDERi fondide PI15/01467 ja PI18/00378 raames (MAG-G.-le) ning Xunta de Galicia auhinnaga IN607B 2016/020 (MAG-G.-le). Palgatoetust pakkusid 2016. aasta Xunta de Galicia eeldoktori stipendium AC-le ja Xunta de Galicia 2017. aasta predoktoriõppe stipendium MV-G-le.

Viited

1. Cnossen, WR; Drenth, JPH Polütsüstiline maksahaigus: ülevaade patogeneesist, kliinilistest ilmingutest ja ravist. Orphanet J. Rare Dis. 2014, 9, 1–13. [CrossRef] [PubMed]

2. Santos-Laso, A.; Izquierdo-Sánchez, L.; Lee-Law, PY; Perugorria, MJ; Marzioni, M.; Marin, JJG; Bujanda, L.; Banales, JM Uued edusammud polütsüstiliste maksahaiguste alal. Semin. Maksa Dis. 2017, 37, 45–55. [CrossRef] [PubMed]

3. Suwabe, T.; Shukoor, S.; Chamberlain, AM; Killian, JM; kuningas, BF; Edwards, M.; Senum, SR; Madsen, CD; Chebib, FT; Hogan, MC; et al. Autosomaalse domineeriva polütsüstilise neeruhaiguse epidemioloogia Olmstedi maakonnas. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2020, 15, 69–79. [CrossRef] [PubMed]

4. Cordido, A.; Besada-Cerecedo, L.; García-González, MA Autosomaalse domineeriva polütsüstilise neeruhaiguse geneetiline ja rakuline alus – aabits arstidele. Esiosa. Pediatr. 2017, 5, 279. [CrossRef] [PubMed]

5. Bergmann, C.; Guay-Woodford, LM; Harris, PC; Horie, S.; Peters, DJM; Torres, VE Polütsüstiline neeruhaigus. Nat. Rev. Dis. Prim. 2018, 4, 1–24. [CrossRef]

6. Cordido, A.; Vizoso-Gonzalez, M.; Garcia-Gonzalez, MA Autosomaalse retsessiivse polütsüstilise neeruhaiguse molekulaarne patofüsioloogia. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 6523. [CrossRef]

7. Van Aerts, RMM; van de Laarschot, LFM; Banales, JM; Drenth, JPH Polütsüstilise maksahaiguse kliiniline ravi. J. Hepatol. 2018, 68, 827–837. [CrossRef]

8. Perugorria, MJ; Masyuk, TV; Marin, JJ; Marzioni, M.; Bujanda, L.; Larusso, NF; Banales, JM Polütsüstilised maksahaigused: täpsemad ülevaated molekulaarsetest mehhanismidest. Nat. Rev Gastroenterol. Hepatol. 2014, 11, 750–761. [CrossRef]

9. Banales, JM; Masyuk, TV; Gradilone, SA; Masyuk, AI; Medina, JF; LaRusso, NF cAMP efektorid Epac ja proteiinkinaas a (PKA) osalevad autosomaalse retsessiivse polütsüstilise neeruhaiguse (ARPKD) loommudeli maksa tsüstogeneesis. Hepatology 2009, 49, 160–174. [CrossRef]

Wecistanche'i tugiteenus - Hiina suurim tsistanšeksportija:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Lisateabe saamiseks ostke:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

SAAN 25% EHHINAKOOSIIDI JA 9% AKTEOSIIDIGA LOODUSLIK ORGAANILINE KISTANŠEKSTRAKT NERENFEKTSIOONIDE PUHUL