Proteaasi aktiveeritud retseptor 1 aitab hiirtel kaasa mikrotsirkulatsiooni ebaõnnestumisele ja torukujulistele kahjustustele neeru isheemia-reperfusiooni vigastuse korral

Yu Guan,¹Daisuke Nakano,²Lei Li,³Haofeng Zheng,³Akira Nishiyama,²Ye Tian,¹Ja Lei Zhang¹

tegeliku ebaõnnestumise leevendamisekscistanche ürt

1. Sissejuhatus

neerei saa vältida isheemia-reperfusiooni (IR) vigastust osalise nefrektoomia janeersiirdamine[1], mille tulemuseks on teadaolevalt metaboolsete jäätmete säilimine ja ägedaneervigastus (AKI) jaAKI-kroonilineneerhaigus (AKI-CKD) [2]. Praeguseks ei ole AKI ja AKI-CKD jaoks kliiniliselt saadaval spetsiifilist ravimiravi [3]. AKI-s esineb mitmeid levinud patoloogilisi muutusi, nagu mikrotsirkulatsiooni ebaõnnestumine[ 4], sealhulgas ummikud ja verejooks ning äge torukujuline nekroos [5]. Seetõttu on uuringud keskendunud nende patoloogiliste muutuste suunamisele potentsiaalsete terapeutiliste kandidaatidena. Varem näitasime, et peritubular kapillaaride säilitamine pärastNeeruIr kahju vähendas kapillaaride ummikuid ja leevendas AKI üleminekut CKD-le [6]. Ägedat torukujulist nekroosi võib olla raske ravida; seega võib tubulite regenereerimine torukujuliste rakkude vohamise kaudu olla oluline lähenemisviis neerufunktsiooni edasise kadumise vältimiseks [7].

Proteaasiga aktiveeritud retseptor-1 (PAR-1) kuulub proteaasi aktiveeritud retseptori (PAR) perekonda ja teadaolevalt stimuleerib trombiin trombotsüütide hüübimist indutseerima. Hiljuti näitasime, et PAR-1 aitas kaasa ägedalt indutseeritud glomerulaarse vigastuse tekkele [8]. Lisaks teatati, et trombiin/PAR-1 mängib rolli epiteelirakkude vohamises ja apoptoosis. Nende omaduste põhjal oletasime, et PAR-1 kiirendas AKI raskust, reguleerides kas peritubular kapillaaride vere hüübimist või torukujulist regeneratsiooni. Selles uuringus uurisime PAR-1 rolli, kasutades hiires PAR-1-selektiivset negatiivset allosteerset modulaatorit Q-94.NeeruIR vigastuse mudel ja trombiini stimuleeritud kultiveeritud inimese torukujulised rakud.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Äge neeru IR hiire mudel.

Kõik loomkatsed viidi läbi vastavalt Capital Medical University institutsionaalse loomahoolduse ja -kasutamise komitee eksperimentaalsetele juhistele. neerIR-hiire mudel loodi nii, nagu varem kirjeldatud [8]. Lühidalt, 8-nädalased C57/BL6 isased hiired tuimastati pentobarbitaalse naatriumi (50 mg/kg; st p.) süstimise teel ja jagati juhuslikult järgmistesse rühmadesse: võlts, I/R+ sõiduk ja I/R (sõiduk: soolalahus 10 mg/kg i.v.) +Q94 (PAR-1 antagonist 10 mg/kg i.v.) rühmades (n = 7–8 igas rühmas). Neeru sooja IR-i vigastuse protokolli puhul läbisid hiired neerufunktsiooni kahjustuse hindamiseks uninefrektoomia; ühe nädala pärast kinnitati neeru pedikle 30 minutiks kahjustusteta vaskulaarsete klambritega. Pärast reperfusiooni 48 tundi ohverdati hiired; nende neerukoe proovid koguti ja fikseeriti 4% paraformaldehüüdi lahuses parafiinplokkide valmistamiseks. Plasma saadi vere karbamiidi lämmastiku (BUN) ja kreatiniini mõõtmiseks.

2.2. Materjalid.

Q94 osteti Tocris Bioscience'ist (Bristol, Suurbritannia). Muud kemikaalid saadi SigmaAldrichist (St. Louis, MO, USA), kui ei ole märgitud teisiti.

2.3. Kreatiniini ja BUN-i analüüs.

Kaubanduslikud analüüsikomplektid (Creatinine Assay Kit ab65340; Abcam, Cambridge, Suurbritannia) kasutati kreatiniini mõõtmiseks. BUN analüüsikomplektid osteti ABSBiost™ (UREA NITROGEN Kit, CNHAOBIO, Peking, Hiina).

2.4. Histoloogia.

Enne parafiini manustamist fikseeriti neerukude 4% paraformaldehüüdiga. Neeru parafiiniplokid lõigati kaheks μm sektsiooniks ja paigaldati slaididele üleöö temperatuuril 25 ° C. Pärast halvustamist värviti sektsioonid hematoksüliini ja eosiiniga (H&E). Pildid saadi mikroskoobi abil (BX-51/DP-72; Olümpos, Tokyo, Jaapan). Nagu varem kirjeldatud[ 9], diagnoositi neeru-toru kahjustused mitmete histopatoloogiliste muutuste põhjal, nagu torukujuline laienemine, ummikud / verejooks, harjapiiri kadumine, torukujuline valatud moodustumine ja rakkude lüüs koos torukujulise luumeniga. Torukujulised kahjustused hinnati vastavalt kahjustatud tubulite protsendile: 0, kahjustusi ei ole; 1,<25%; 2,="" 25–50%;="" 3,="" 51–75%;="" and="" 4,="">75%. Skoorimine toimus pimestatult.

2.5. Immunofluorestsents ja immunohistochemistry.

Sektsioonid valmistati ette histoloogia (H&E) analüüsi jaoks kirjeldatud viisil ja inkubeeriti seejärel 0,3% vesinikperoksiidiga 30 minutiks endogeensete peroksiidide blokeerimiseks pärast deparaffiniseerimist ksüleeniga. Antigeenide toomiseks inkubeeriti sektsioonid 10 minutiks proteaasiga K (DAKO Cytomation, Glostrup, Taani). Pärast 10% kitseseerumiga blokeerimist inkubeeriti sektsioone primaarsete antikehadega üleöö temperatuuril 4 ° C (Kim 1-vastane antikeha, ab47635, Abcam; antiKi67 antikeha, ab15580, Abcam; ANTI-PAR-1 antikeha, ab32611, Abcam). Pärast primaarse antikehaga inkubeerimist inkubeeriti sektsioonid sekundaarse antikehaga temperatuuril 25 ° C 1 h. DAB substraati (DAKO) kasutati immunohistokeemia (IHC) värvimistulemuste visualiseerimiseks. Fluorestsentssignaalid tuvastati Alexa Fluor 594 märgistusega sekundaarse antikeha abil. Pildid jäädvustati FL fluorestsentsmikroskoobi abil (BX51; Sobiva filtriga Olympus). Positiivsete valdkondade analüüsimiseks kasutati ImageJ tarkvara (NIH, Bethesda, MD, USA).

2.6. Reaalajas PCR.

MRNA ekspressiooni reguleerimise hindamiseks nendes tingimustes eraldati mRNA neerukoest. PCR-süsteem (7300 kiire reaalajas; 18S ja PAR-1 mRNA tasemete tuvastamiseks kasutati rakenduslikke biosüsteeme, Foster Cityt, CA-d, USA) ja Light Cycler Fast Start DNA Master SYBR Green I komplekti (Applied Biosystems). Kruntide järjestused olid järgmised: 18S —5′ -GTAACCCGTTGAACCCCATT-3′, 5′-CCATCCAATCG GTAGTAGCG-3′; PAR-1—5′-GTTGATCGTTTCCACG GTCT-3′, 5′-GCTGCCTCTGTACCAGGACT-3′. Suhtelised mRNA tasemed määrati 2−ΔΔCq meetodil. Väärtus ΔΔCq arvutati kontrollrühma andmete põhjal.

2.7. Kirurgiline protseduur ja In Vivo multiphoton pildistamise seaded.

Hiiri tuimestati 2% isoflurainiga (Mylan, Osaka, Jaapan). Pärast trahheotoomiat kanti jugulaarveeni fluorestsentsvärvi süstimiseks ja säilitusvedeliku infusiooniks, mis koosnes 1,0μL/min 2% albumiinist fosfaadipuhvriga soolalahuses. Iga hiire vasak neer välisküljel läbi väikese külje sisselõike ja kinnitatud kattekihi külge. Mikroskoobi staadium ja loomad soojendati kõigi eksperimentaalsete protseduuride ajal soojenduspadja abil. Intravital multiphoton mikroskoopia viidi läbi Olympus FV1000MPE multiphoton konfootsaalse fluorestsentspildi süsteemi abil, mis oli varustatud Kameeleon Ultra-II MP laseriga 860nm juures (Coherent, Inc., Santa Clara, CA, USA). Mikroskoobi eesmärk oli 25x veekümbluslääts 1,05 numbrilise avaga. Mikroskoobi pildiseaded (kõigi kolme kanali võimendus ja nihe; sinine, roheline ja punane) fikseeriti kogu katse vältel. Pärast 30-minutilist taastumisperioodi süstiti intravenoosselt rhodamiin B- 70kD dekstraani ja 3-D z-stack pilte tehti 5–50 μm (2μm peale) sügavusel neerupinnast.

2.8. Rakukultuur.

Inimese neeru 2 (HK2) rakud saadi Cell Bank of Academy Sciences'ist (Shanghai, Hiina) ja neid kasvatati nagu varem kirjeldatud [10]. Rakke kasvatati Dulbecco modifitseeritud Eagle'i keskkonnas, mida täiendati 10% loote veiste seerumi ja 1% penitsilliini-streptomütsiiniga niiskes atmosfääris 95% õhus ja 5% CO2-ga 37 °C juures.

2.9. WST-1 analüüsid rakkude vohamise hindamiseks.

HK2 rakud külvati 6-kaevulistesse plaatidesse tihedusega 1×104 rakku/- hästi. Pärast HK2 rakkude stimuleerimist trombiiniga viidi WST-1 analüüsid läbi vastavalt tootja protokollile (kataloogi #C0035; Beyotime, Shanghai, Hiina) rakkude paljunemisvõime määramiseks. Pärast 2 tundi inkubatsiooni 100μL WST-1 reaktiiviga igas süvendis mõõdeti proovide neeldumist mikroplaadilugejaga lainepikkusel 450nm.

2.10. Kaspaas-3 Analüüs.

Kaspaasi-3 aktiivsust mõõdeti kaubanduslikult kättesaadava kaspaasi-3 tegevuskomplekti abil (kataloogi #C1116; Beyotime, Shanghai, Hiina) [11]. Pärast inkubeerimist kaspaasi-3 aktiivsuskomplekti reaktiiviga tuvastati proovide neeldumine mikroplaadilugeri (Spectra- Max M2, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) abil 405nm juures vastavalt tootja juhistele.

2.11. Andmed ja statistiline analüüs.

Mitme rühma võrdlemiseks kasutati ühesuunalist dispersioonianalüüsi, millele järgnes Tukey mitmekordne võrdlustest. Kahe üksiku rühma võrdlemiseks kasutasime õpilase t-testi. p< 0:05="" was="" considered="" to="" indicate="" statistically="" significant="">

Cistanche tubulosahoiab ära neeruhaiguse

3. Tulemused

3.1. PAR-1 ekspressioon IR neerus.

Kõigepealt kinnitasime PAR-1 ekspressiooni ja IR-i mõju selle väljendustasemeleneer. Me täheldasime PAR-1 mRNA ekspressioonitaseme peaaegu 2-kordset tõusu võrreldes võltskirurgia hiirtega 48 tunnil (joonis 1 punkt a). Samuti mõõtsime PAR-1 ekspressiooni immunofluorestsentsiga 48 tunni pärast IR-i. PAR-1 ekspresseeriti torukujulise rakuharja piirimembraanis. PAR-1 FL fluorestsentsi tase oli võrreldes näiliste hiirtega (joonis 1 punkt b ja artikli 1 punkt c) korrigeeritud. Need andmed viitavad sellele, et nii PAR-1 lokaliseerimine torukujulistes rakkudes kui ka selle ekspressiooni tase olid pärast neeru IR-i ülesreguleeritud.

3.2. Neerufunktsioon ja histopatoloogilised muutused. Hindasimeneerbun ja kreatiniini taseme tuvastamine plasmas. I/R indutseeris BUN ja kreatiniini taseme tõusu võrreldes hiirtega, kellele tehti võltsoperatsioon. Lisaks vähenes Q94-ga ravitud hiirtel oluliselt IR-indutseeritud BUN-taseme tõus (joonis 2 punkt a). Seerumi kreatiniinisisaldust inhibeeriti Q94-ga ravitud hiirtel võrreldes hiirtega, kellele tehti ainult IR-operatsioon (joonis 2 punkt b). Need andmed viitavad sellele, et Q94 haldamine võib kaitstaneerfunktsioon pärast IR-i vigastust.

Hindasime ka neeru histopatoloogilisi muutusi, teostades H&E värvimist. Neeru IR suurendas oluliselt valude moodustumist, torukujulist laienemist ja harjapiiri kadu ning ummikuid / verejooksu sõidukiga ravitud hiirtel võrreldes võltshiirtega. Q94 ravi pärssis märgatavalt neid IR-i põhjustatud muutusi (jooniste 2 punkt c ja artikli 3 punkt a). H&E värvimistulemuste analüüs rühmade vahel näitas iga rühma ummikute/ verejooksu skoori ja torukujuliste kahjustuste skoori. Q94 rühma hiirtel oli palju madalam skoor (joonised 2(e) ja 3(c)). Me värvisime kim-1 kaneerneerutorukujuliste rakkude vigastuste marker IHC poolt [12]. Kim-1-positiivsed piirkonnad suurenesid neerutorulises piirkonnas IR-solvanguga hiirtel, mida Q94 oluliselt pärssis (jooniste 2 punkt d ja 2 punkt f). Need andmed viitavad sellele, et Q94 võib pärssidaneerIR-vigastusest põhjustatud torukujulised kahjustused.

3.3. Ebanormaalne vereliblede vool In Vivo Imaging'is.

PAR-1 ja selle ligandi trombiin mängivad ummikutes olulist rolli; Q94 suurendas oluliselt ummikuid. Seetõttu teostasime intravitalset pildistamist multifoto mikroskoopia abil. See võimaldab elushiirtel jälgida peritubular kapillaaride vererakkude kaaslast reaalajas (joonis 3 punkt c). Plasmat visualiseeriti 70 kDa dekstraniga, mis oli konjugeeritud rhodamine B-ga (joonis 3(d)). Vererakke, mis ei tekita FL fluorestsentsi vastuseks laserile, kasutati rehodamiini B erutamiseks ja neid kujutati varjudena. Nagu on näidatud joonisel 3(e), katkestas neeru IR regulaarse vererakkude jälgimise ja indutseeris mikrotsirkulatsiooni puudulikkuse. Q94 parandas peritubular kapillaaride vererakkude stipendiaat.

3.4. Torukujuliste rakkude vohamine pärast IR-i vigastust.

On teatatud, et torukujuliste rakkude proliferatiivne regenereerimine mängib olulist rolli torukujulise struktuuri ja neerufunktsiooni taastamisel pärast IR-vigastust. ON teada, et PAR-1 muudab epiteelirakkude vohamist, kui seda aktiveerib trombiin. Seega tuvastasime neerutoruliste rakkude vohamise Ki-67 IHC analüüsis. 48 h pärast IR-i suurenes paljunevate Ki-67-positiivsete torukujuliste rakkude arv. Q94 suurendas veelgi Ki-67-positiivsete torukujuliste rakkude arvu suurenemist pärast IR-i võrreldes ainult IR-ravitud hiirtega (joonised 4(a) ja 4(b)). Lisaks kontrollisime, kas rakkude vohamise võimet mõjutas PAR-1 in vitro eksperimentide pärssimine, kasutades PAR-1 agonisti trombiiniga inkubeeritud HK2 rakke. HK2 rakkude proliferatiivset aktiivsust mõõdeti WST-1 analüüsiga. Nagu on näidatud joonisel 4 alapunktis c, pärssiti HK2 rakkude vohamist pärast trombiiniga töötlemist dramaatiliselt. Kuid see trombiini poolt indutseeritud inhibeerimine peaaegu kaotati Q94-ga. Need andmed näitavad, et PAR-1 reguleeris negatiivselt neerutorukujuliste rakkude vohamist, mille Q94 PAR-1 antagonist peaaegu tühistas.

kroonilise neeruhaiguse leevendamisekscistanche

3.5. Neerutorukujuline raku apoptoos.

Lisaks uurisime neerurakkude apoptoosi kaspaasi-3 abil, mis on kõige olulisem timuka kaspaas ja mida aktiveerivad nii sisemised kui ka välised rajad apoptoosi ajal [13]. Kasutades trombiini inkubeeritud kultiveeritud HK2 rakke, leidsime, et trombiin suurendas kaspaasi-3 aktiivsust. Lisaks pärssis Q94 haldamine kaspaasi-3 aktiivsust (joonis 4 punkt d). Need andmed viitavad sellele, et HK2 rakkude trombiini poolt indutseeritud apoptoosi inhibeeris Q94 PAR-1 antagonist.

4. Arutelu

NeerIR-vigastust iseloomustab ummikud / verejooks, äge torukujuline nekroos, täispuhutavus ja valatud moodustumise sadenemine [5]. Siin näitasime, et PAR-1 pärssimine leevendas nii verekaaslastega seotud muutusi kui ka tubulointerstitsiaalseid muutusi. On hästi teada, et PAR-1 ja selle ligand, trombiin, mängivad olulist rolli trombotsüütide hüübimisel ja selle süsteemi häired, näiteks trombmoduliini [14, 15] abil, võivad takistada AKI-d. Näitasime, et PAR-1 inhibeerimine pärssis ummikuid ja parandas neeru IR-vigastusega hiirte peritubular kapillaaride verevoolu, mis viitab sellele, et PAR-1 süsteem halvendas mikrotsirkulatsiooni. Lisaks reguleeriti PAR-1 ekspressioonitaset tubulites pärast neeru IR-vigastust, mis näitab, et PAR-1-sõltuv süsteem tubulites liialdab ka neeru IR-i vigastusega. On hästi kindlaks tehtud, et torukujuliste rakkude regenereerimine on oluline protsess torukujulise struktuuri ülesehitamisel ja neerufunktsiooni taastamisel pärast IR-vigastust [16, 17]. Sõltuvalt vigastuse astmest ei ole see remondivõimsus piiramatu [18]. Seetõttu on hädasti vaja ravivõimalusi torukujuliste rakkude kahjustuste leevendamiseks või nende leviku kiirendamiseks. Meie in vitro uuring näitas, et PAR- 1 / trombiin reguleeris negatiivselt torukujuliste rakkude vohamist, mis omakorda kiirenes pärast PAR-1 inhibeerimist. Lisaks näidati, et hiirte IR-vigastus suurendab torukujulist vohamist 48 tunnil, kusjuures pärast PAR-1 inhibeerimist suureneb see veelgi. Leidsime, et PAR-1 suurenes proksimaalsete tubulite harjapiiri membraanis. Kuna on teatatud, et glomerulaarse filtreerimisbarjääri funktsioon väheneb neeru IR-vigastuse ajal[19], võib glomeruli filtreeritud trombiin aktiveerida suurenenud PAR-1, häirides seeläbi torukujulist regenereerimist.

Meie tulemused näitavad, et PAR-1 / trombiinisüsteem pärssis torukujuliste rakkude vohamist ja suurenenud apoptoosi. Kuid teine uuring näitas PAR-1 vastandlikku toimet valgu C aktiveerimisel [20, 21]. See PAR-1 ilmne vastuoluline roll võib sõltuda selle aktiveerimise meetodist. Meie uuringus oli selle omistatud rolli võimalik selgitus see, et PAR-1 aktiveeriti filtreeritud trombiiniga. Valgu C suurus on üle 60 kDa, mis on sarnane albumiini [22, 23] omaga ja palju suurem kui trombiinil (36 kDa). Lisaks sellele on selle plasmakontsentratsioon (<100 nm)="" is="" less="" than="" 10%="" of="" thrombin="" (="">1 μM), mis näitab, et valk C läbib vähem filtreerimist ja tekitab trombiiniga võrreldes nõrgema signaali.

Trombootilised episoodid on lõppstaadiumis neerupuudulikkusega patsientide riskifaktor [24]. Uuring näitas, et PAR-1 puudus kaitses diabeetilise CKD eest [25]. Oma uuringus täheldasime PAR-1 inhibeerimise mõju neerufunktsioonile varases faasis pärast IR-i. Edasistes uuringutes kavatseme välja töötada krooniliseneerIR-indutseeritud haiguse mudel, [2] et hinnata võimalikku seost PAR-1 ja CKD vahel.

Kokkuvõttes näitasime, et PAR-1 süvendas mikrotsirkulatsiooni ebaõnnestumist ja reguleeris negatiivselt torukujuliste rakkude vohamist. Seevastu PAR-1 inhibeerimine aitas kaasa mikrotsirkulatsiooni parandamisele ja torukujuliste rakkude vohamisele ning pärast IR-i, mis oli silmapaistev neeru taastumise mehhanism, ning seda tuleks pidada uueks strateegiaks AKI ravis.

Cistanche tubulosa takistab neeruhaigust, klõpsake siin, et saada proov

1 Uroloogia osakond, Pekingi sõprushaigla, Capital Medical University, Peking, Hiina

2 Farmakoloogia osakond, Kagawa Ülikool, Kagawa, Jaapan

3Division of Kidney Transplantation, Department of Surgery, Kolmas liitunud Haigla Sun Yat-sen University,

Guangzhou, Hiina

Kirjavahetus peaks olema adresseeritud Ye Tianile; kidney@ccmu.edu.cn ja Lei Zhang; leizhangkidney@gmail.com saadud 1. jaanuaril 2021; Muudetud 25. jaanuaril 2021; Vastu võetud 8. veebruaril 2021; Avaldatud 23. veebruar 2021

Akadeemiline toimetaja: Junyan Liu

Autoriõigus © 2021 Yu Guan jt. See on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitatakseCreative Commonsi omistamislitsents, mis võimaldab piiramatut kasutamist, levitamist ja paljunemist mis tahes andmekandjal, tingimusel et originaalteos on nõuetekohaselt viidatud.

Isheemia-reperfusiooni (IR-) indutseeritud neerukahjustust on neerusiirdamise ja roboti abil osalise nefrektoomia ajal raske vältida. Neeru IR-vigastust iseloomustavad torukujulised kahjustused, mikrotsirkulatsiooni ebaõnnestumine ja põletik, mis koordinaalselt suurendab neerukahjustusi; nende seisundite puhul ei ole siiski spetsiifilist ravi. Proteaasiga aktiveeritud retseptor-1 (PAR-1) ja selle ligand, trombiin, on seotud hüübimisega ja on näidatud, et need on seotud epiteelirakkude vigastusega. Siin oletasime, et PAR-1 liialdatud neeru IR-indutseeritud torukujuliste rakkude kahjustused ja mikrotsirkulatsiooni ebaõnnestumine ning et PAR-1 farmakoloogiline pärssimine Q94-ks võib neid vigastusi ära hoida. Neeru soe IR suurendas PAR-1 ekspressiooni neerutuubulites. Q94 nõrgestas neeru IR-indutseeritud muutusi ja histopatoloogilisi kahjustusi. Mikrotsirkulatsiooni riket analüüsiti histopatoloogia ummikutega ja intravital multiphoton mikroskoopiaga uuritud vererakkude vool suruti Q94 raviga maha. Q94 suurendas oluliselt ka torukujuliste rakkude vohamist hoolimata madalamast neerukahjustusest. Trombiin pärssis rakkude vohamist ja indutseeris apoptoosi tubulites; neid mõjusid hoiti ära Q94 raviga. Kokkuvõttes seostati PAR-1 neeru IR-vigastusega. PAR-1 leevendatud vigastuse pärssimine võib-olla neeru mikrotsirkulatsiooni ja torukujuliste rakkude ellujäämise/vohamise parandamise teel.

Data AVaIlAbility

Autorid kinnitavad, et selle uuringu tulemusi toetavad andmed on artiklis kättesaadavad.

Conflicts of Minanterest

Kõik autorid on teatanud, et neil ei ole konkureerivaid huve.

AutHors' ConTrminaButminaons

Yu Guan ja Daisuke Nakano kirjutasid käsikirja ja tegid loomkatseid. Lei Li tegi in vitro eksperimente. Haofeng Zheng tegi statistilise analüüsi. Akira Nishiyama muutis käsikirja. Lei Zhang ja Ye Tian kavandasid selle uuringu.

AcKnowledgmenTs

Seda uuringut toetasid Hiina Riiklik Loodusteaduste Sihtasutus (nr 82000712) ja Hiina järeldoktorantuuri teadusfond (nr 2020M670385).

Viited

[1] M. N. Simmons, M. J. Schreiber ja I. S. Gill, "Kirurgiline neeru isheemia: kaasaegne ülevaade", The Journal of Urology., kd 180, nr 1, lk 19–30, 2008.

[2] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang, L. Li, Y. Tian ja A. Nishiyama, "Neerufibroosi hiiremudel, et ületada operaatorite isheemia/ reperfusioonikahjustuse tehniline varieeruvus", Teaduslikud Aruanded, kd 9, nr 1, lk 10435, 2019. 7 BioMed Research International

[3] M. Joannidis ja P. G. H. Metnitz, "Ägeda neerupuudulikkuse epidemioloogia ja looduslugu intensiivravi osakonnas", Kriitilise hoolduse kliinikud, kd 21, nr 2, lk 239–249, 2005.

[4] D. Nakano, K. Doi, H. Kitamura jt, "Torukujuliste voolukiiruse vähendamine oliguria mehhanismina endotoksemia varases faasis, mis ilmnes intravitaalse pildistamise teel", Ameerika Nefroloogia Seltsi ajakiri, kd 26, nr 12, lk 3035–3044, 2015.

[5] D. Nakano ja A. Nishiyama, "Neerupatofüsioloogia multifoto pildistamine", Farmakoloogiateaduste Ajakiri, kd 132, nr 1, nr 1, lk 1–5, 2016.

[6] Y. Zhang, D. Nakano, Y. Guan jt, "Naatrium-glükoosikotransporter 2 inhibiitor attenuates neeru kapillaaride vigastust ja fibroosi vaskulaarse endoteeli kasvufaktorist sõltuva rajaga pärast neerukahjustust hiirtel", Kidney International, 94. kd, nr 3, lk 524–535, 2018.

[7] S. Nishioka, D. Nakano, K. Kitada jt: "Tsükliinist sõltuv kinaasi inhibiitor p21 on oluline neeru isheemiliste eeltingimuste kasulikuks mõjuks hiirte neeru isheemia/reperfusiooni vigastusele", Kidney International, kd 85, nr 4, lk 871–879, 2014.

[8] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang jt, "Proteaasiga aktiveeritud retseptor-1 antagonist kaitseb podotsüütide vigastuste eest nefropaatia hiiremudelis", Journal of Pharmacology Sciences, kd 135, nr 2, lk 81–88, 2017.

[9] M. Jiang, Q. Wei, G. Dong, M. Komatsu, Y. Su ja Z. Dong, "Autofaagia proksimaalsetes tubulites kaitseb ägeda neerukahjustuse eest", Kidney International, kd 82, nr 12, lk 1271–1283, 2012.

[10] X. Hu, M. Su, J. Lin jt: "Korin on neeru isheemia/ reperfusioonikahjustuse korral allareguleeritud ja on seotud hilinenud transplantaadi funktsiooniga pärast neerusiirdamist"9429323, Haiguste markerid, vol.

[11] P. Wang, H. Wang, Q. Huang jt, "Eksosoomid M1-polariseeritud makrofaagidest suurendavad paklitakseli kasvajavastast aktiivsust makrofaagide vahendatud põletiku aktiveerimisega", Theranostics., kd 9, nr 6, lk 1714–1727, 2019.

[12] L. Yang, C. R. Brooks, S. Xiao jt, "KIM-1-vahendatud fagotsütoos vähendab ägedat neerukahjustust," The Journal of Clinical Investigation, kd 125, nr 4, lk 1620–1636, 2015.

[13] L. Xu, X. Li, F. Zhang, L. Wu, Z. Dong ja D. Zhang, "EGFR juhib AKI progresseerumist CKD-sse HIPK2 üleekspressiooni kaudu", Theranostics., kd 9, nr 9, lk 2712–2726, 2019.

[14] T. Hifumi, D. Nakano, J. Chiba jt, "Kombineeritud ravi gaasi gangreeni antitoksiini ja rekombinantse inimese lahustuva trombomoduliiniga _Clostridium perfringens_ sepsise jaoks rotimudelis", Toxicon, kd 141, lk 112–117, 2018.

[15] N. Hayase, K. Doi, T. Hiruma jt, "Rekombinantne trombmoduliin hoiab ära neeru isheemia-reperfusiooni vigastusest põhjustatud ägeda kopsukahjustuse," teaduslikud aruanded, kd 10, nr 1, lk 289, 2020.

[16] E. Lazzeri, M. L. Angelotti, A. Paired et al., "Endotsükliga seotud torukujuliste rakkude hüpertroofia ja eellasrakkude hüpertroofia taastavad neerufunktsiooni pärast ägedat neerukahjustust", Nature Communications, kd 9, nr 1, lk 1344, 2018.

[17] K. Takaori, J. Nakamura, S. Yamamoto jt, "Proksimaalse toruvigastuse raskusaste ja sagedus määrab neeruprognoosi," Ameerika Nefroloogia Seltsi ajakiri: JASN, kd 27, nr 8, lk 2393–2406, 2016.

[18] B. D. Humphreys, M. T. Valerius, A. Kobayashi jt, "Sisemised epiteelirakud parandavad neeru pärast vigastust", Raku tüvirakk, kd 2, nr 3, lk 284–291, 2008.

[19] R. Wakasaki, K. Matsushita, K. Golgotiu jt, "Glomerular filtrerate valgud ägeda kardioreenaalse sündroomi korral", JCI Insight, kd 4, nr 4, 2019.

[20] M. Riewald, R. J. Petrovan, A. Donner, B. M. Mueller ja W. Ruf, "Endoteelirakkude proteaasiga aktiveeritud retseptori 1 aktiveerimine C-valgu rajal", Teadus, kd 296, nr 5574, lk 1880–1882, 2002.

[21] M. J. Ludeman, H. Kataoka, Y. Srinivasan, N. L. Esmon, C. T. Esmon ja S. R. Coughlin, "PAR1 lõhenemine ja signalisatsioon vastuseks aktiveeritud valgule C ja trombiinile∗", The Journal of Biological Chemistry, kd 280, nr 13, lk 13122–13128,

2005.

[22] J. H. Griffin, B. V. Zlokovic ja L. O. Mosnier, "Aktiveeritud valk C: kallutatud tõlkimiseks", Veri, kd 125, nr 19, lk 2898–2907, 2015.

[23] R. Essalmani, D. Susan-Resiga, J. Guillemot jt, "C-valgu trombiini aktiveerimine nõuab eelnevat töötlemist maksaproteiini konverlaadimisega", The Journal of Biological Chemistry, kd 292, nr 25, lk 10564–10573, 2017.

[24] S. Van Laecke ja W. Van Biesen, "Raske hüpertensioon neeru trombootilise mikroangiopaatiaga: mis juhtus tavalise kahtlusalusega?", Kidney International, kd 91, nr 6, lk 1271–1274, 2017.

[25] M. Waasdorp, J. Duitman, S. Florquin ja C. A. Spek, "Proteaasiga aktiveeritud retseptor-1 puudus kaitseb streptozototsiini poolt indutseeritud diabeetilise nefropaatia eest hiirtel", Teaduslikud aruanded, kd 6, nr 1, lk 33030, 2016.