2. OSA Kuidas ehhinakosiid kutsub esile venoosse lõdvestuse?

KLIKI SIIA, ET 1. OSA

Lisateabe saamiseks võtke ühendust:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticolal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

Arutelu

Meie teadmiste kohaselt on see esimene uuring, mis hindab selle mõjuECHroti kopsuarteri veresoonte toonusele. Leidsime selleECHindutseeris NE-ga eelnevalt kokku lepitud roti kopsuarteri vasorelaksatsiooni kontsentratsioonist sõltuval viisil ja selliseid toimeid võib täheldada nii intaktses endoteelis kui ka endoteeli denudeeritud rõngastes. Kopsuarteris nõrgendas ECH nii ekstratsellulaarset kaltsiumi sissevoolu kui ka rakusisest kaltsiumi vabanemist ning NO-cGMP rada ja K avanemist.^plusskanalid (suur juhtivus Ca^{2 pluss}-aktiveeritud K^plusskanalid ja sisemine alaldi K^plusskanalid) näis mängivat rolliECH-indutseeritud roti kopsuarteri vasorelaksatsioon. Rottide PASMC-desECHvõib otseselt vähendada rakusisest kaltsiumi kontsentratsiooni. Varasemad uuringud on ka seda väitnudECHvõib NO-cGMP raja kaudu vahendada endoteelist sõltuvat vasodilataatorit roti rindkere aordirõngastes^[7].

ehhinakosiidcistanche purgispõletikuvastane

ECH-indutseeritud vasorelaksatsiooni võib täheldada nii intaktses endoteelis kui ka endoteeli denudeeritud rõngastes. Endoteeli eemaldamine põhjustas aga maksimaalse vastuse olulise vähenemise ja EK suurenemise₅₀puutumata endoteeli rõngaste suhtes. On tehtud ettepanek, et NO-cGMP ja PGI₂-cAMP rajad mängivad võtmerolli endoteelist sõltuva veresoonte lõõgastumise reguleerimisel^[9]. Selle probleemi uurimiseks lisasime 100 μmol/lL-NAME, NO sünteesi inhibiitor endoteelirakkudesse. Tulemused näitasid sedaL-NAME nõrgendas oluliselt vasodilatatsiooniECH, mis viitab sellele, et NO mängib tõenäoliselt rolli vasorelaksatsioonisECH. Samuti leidsime, et IMT, tsüklooksügenaasi (peamine PGI) inhibiitor₂süntetaas) sellist toimet ei avaldanud, mis näitab, et KGT₂ei olnud tõenäoliselt seotud ECH vasorelaksatsiooniga. Seetõttu võib ECH suurendada NO tootmistL-arginiini vaskulaarses endoteelis ja aktiveerivad guanülaattsüklaasi, katalüüsides seega GTP konversiooni cGMP-ks. Pärast katseprotokolli näitasid rõngad NE indutseeritud kõrge kontraktsiooniprotsendi püsivat platood (1 μmol / L), mis näitas, et rõngaid oli eelnevalt töödeldudECH(30 kuni 300 μmol/L) näitas head aktiivsust (joonis 2A ja 2B).

Veresoonte toonust reguleerib rakusisene Ca^{2 pluss [12]}. Leidsime, et ECH (100 ja 300 μmol / l) vähendas märkimisväärselt NE poolt indutseeritud faasilist kontraktsiooni endoteeli denudeeritud kopsuarterite rõngastes Ca-s^{2 pluss}-vaba KH lahusega ja see efekt oli tugevam ECH suurema kontsentratsiooniga (300 μmol / L), mis näitab, et ECH inhibeeriv toime kopsuarterite rõngaste NE-indutseeritud kontraktsioonile oli tingitud IP3 võime häiretest. soodustada rakusisese Ca vabanemist^{2 pluss}. NE toimib -retseptorile, vahendades veresoonte kontraktsiooni, suurendades seega rakusisest

Ca2 pluss tasemed ([Ca2 pluss ]i) G-valguga seotud fosfatidüülinositooli signaaliülekanderaja kaudu[13]. Pärast aktiveerimist käivitab see teise sõnumitooja IP3 ja fosfolipaas C poolt indutseeritud diatsüülglütserooli moodustumise [14]. IP3 võib kiiresti mobiliseerida ja vabastada Ca2 pluss sarkoplasmaatilisest retikulumist, põhjustades [Ca2 pluss] I mööduvat suurenemist, mida võib seostada NE-indutseeritud faasilise kontraktsiooniga kopsuarteri rõngastes Ca2 pluss-vabas keskkonnas. ECH mõju uurimiseks ekstratsellulaarsele kaltsiumi sissevoolule lisati CaCl2 (2,5 mmol/L) Ca2 pluss-vabades tingimustes. ECH (30, 100 ja 300 μmol/L) lisamine vähendas märkimisväärselt maksimaalset kontraktsiooni, kusjuures kõige olulisem mõju ilmnes 300 μmol/L ECH puhul. See viitas sellele, et ECH pärsib rakusisest kaltsiumi vabanemist ja ekstratsellulaarset kaltsiumi sissevoolu PASMC-des. Siiski on vaja täiendavaid uuringuid, et selgitada välja seost ECH ja L-tüüpi kaltsiumikanalite inhibiitorite vahel. Kaltsiumi rolli uurimiseks kasutati Fluo 4-AM-i rakusisese kaltsiumi kontsentratsiooni määramiseks roti PASMC-des. Kuna NE lisamine (1 μmol/L) muutis kiiresti veresoonte rõngaste pinget (joonis 2), laaditi roti PASMC-d esmalt Fluo 4-AM-iga ning seejärel lisati NE ja ECH. Tulemused näitasid, et 1 μmol / L NE võib suurendada rakusisest kaltsiumi kontsentratsiooni, mis oli kooskõlas varasemate uuringutega, ja keskmine fluorestsentsi intensiivsus oli NE pluss ECH100 rühmas madalam kui NE rühmas. Seega jõuti järeldusele, et ECH võib vähendada rakusisest kaltsiumi kontsentratsiooni NE-ga eeltöödeldud roti PASMC-des. Kuna intratsellulaarse kaltsiumi kontsentratsiooni on eelistatav tuvastada reaalajas, tehakse täiendavaid uuringuid, et jälgida rakusisese kaltsiumi kontsentratsiooni muutusi reaalajas konfokaalse mikroskoopia abil.

kanaleid on pakutud ka südame-veresoonkonna haiguste potentsiaalsete terapeutiliste sihtmärkidena, kuna need suudavad reguleerida veresoonte toonust [22, 23]. Leidsime, et BKCa kanalite inhibiitor TEA põhjustas kontsentratsiooni-vastuse kõvera nihkumise ja EC50 olulise suurenemise. Samuti leidsime, et ECH-indutseeritud lõdvestus oli pärast TEA-ga töötlemist (1 mmol / L) oluliselt nõrgem ECH kõrgeima kontsentratsiooni korral rõngastes võrreldes kontrolliga. NO-indutseeritud vasodilatatsioon on osaliselt tingitud cGMP-st sõltuvast proteiinkinaas G-vahendatud BKCa kanalite aktivatsioonist[24]. Seetõttu eeldasime, et ECH indutseeris roti kopsuarteri vasorelaksatsiooni NO-cGMP-PKG-BKCa kanalite kaudu, mis viis intratsellulaarse Ca2 plussi taseme languseni ja PASMC-de lõõgastumiseni. Huvitav tähelepanek oli see, et ECH erinevad kontsentratsioonid vähendasid ekstratsellulaarse kaltsiumi sissevoolu põhjustatud maksimaalset kontraktsiooni ja lühendasid püsivat kontraktsiooni, mis võib olla seotud BKCa kanalite avanemisega.

KIR-kanalid on kõige lihtsamad kanalid, millel on ainult kaks transmembraanset domeeni. Nad on seotud kaltsiumi sisenemise edasiviiva jõu reguleerimisega kopsuveresoonte endoteelirakkudesse; seetõttu on need seotud veresoonte läbilaskvuse [25] ja nihkepingele reageerimise reguleerimisega[26]. Selles uuringus näitasime, et KIR-i inhibiitor põhjustas kontsentratsiooni-vastuse kõvera nihkumise ülespoole ja EC50 märkimisväärset suurenemist ning et ECH (300 μmol/L) indutseeritud lõõgastus oli kontrolliga võrreldes oluliselt nõrgem. Kõik need tulemused näitasid, et ECH-l oli KIR-kanalite kaudu vasorelaksantne toime kopsuarterile. Arvestades aga K pluss kanalite keerulist rolli veresoonte toonuse reguleerimisel, on selle probleemi selgitamiseks vaja täiendavaid uuringuid. Hiljuti on soovitatud, et K pluss kanalid osalevad veresoonte ümberkujundamises, reguleerides rakkude proliferatsiooni ja apoptoosi [18]. Ülemaailmne hüpoksia, nagu see esineb suurtel kõrgustel, põhjustab kopsu vasokonstriktsiooni või veresoonte remodelleerumist ja suurendab kopsuveresoonte resistentsust[27]. Kahjustatud K pluss kanalid (KATP, KCa, VK ja KIR) veresoonte silelihasrakkudes on samuti seotud K pluss kanalite hüpoksilise inhibeerimise tekkega, mille tulemuseks on membraani depolarisatsioon, pingest sõltuvate Ca2 pluss (Cav) kanalite aktiveerimine, rakuväline Ca2 pluss sissevool ja intratsellulaarne Ca2 pluss vabanemine, mille tulemuseks on [Ca2 pluss] I suurenemine, millele järgneb kopsu vasokonstriktsioon ja PASMC-de proliferatsioon [29]. K pluss kanalite avamine aitab reguleerida kopsu hüpoksilist vasokonstriktsiooni ja veresoonte remodelleerumist. Seega võib ECH avada K pluss kanalid, nõrgendades seeläbi hüpoksilist pulmonaalset vasokonstriktsiooni ja vähendades veresoonte remodelleerumist. hüpertensioonist [22, 28].

Järeldus ECH kutsub esile vasorelaksatsiooni NE-ga eelnevalt kokku lepitud roti kopsuarterites ja sellist efekti võib täheldada nii intaktses endoteelis kui ka endoteeli denudeeritud rõngastes. See on tõenäoliselt seotud NO-cGMP-PKG-BKCa kanalite avanemisega ja intratsellulaarse Ca2 plussi taseme vähenemisega, lõdvestades seeläbi PASMC-sid (joonis 8).

Tänuavaldused

Täname Liang YANGi ja tema laborit (mitokondriaalse bioloogia ja meditsiini keskus, haridusministeeriumi biomeditsiinilise infotehnoloogia võtmelabor, maateaduste ja tehnoloogia kool ning teaduse ja tehnoloogia piiriinstituut, Xi'an Jiaotongi ülikool, Xi'an , Hiina) nende abi eest roti PASMC-de rakusisese kaltsiumi kontsentratsiooni tuvastamisel. Seda projekti toetavad Hiina riiklik põhiuuringute põhiprojekti programm (nr 2012CB518200), Hiina rahvusvahelise teadus- ja tehnoloogiakoostöö programm (nr 2011DFA32720), Hiina riiklik loodusteaduste sihtasutus (nr 31160219), võtmelaborid. Qinghai provintsi arendusprogramm (nr 2013-Z-Y05, nr 2014-ZY-30 ja nr 2014-ZY-07), Qinghai-Utah ühisuuringute võti High Altitude Medicine labor, Hiina Riiklik Loodusteaduste Fond (nr 81160012), Hiina haridusministeeriumi uue sajandi silmapaistvate talentide toetusprogramm (nr NCET{16}}) ja Qinghai loodusteaduste sihtasutus (nr {{ 17}}Z-915Q).

ehhinakosiidsissecistanchevõib ravida neeruhaigusi

Autori panus

Ri-li GE ja Xiang-Yun GAI kavandasid uuringu; Xiang-Yun GAI, Yu-hai WEI, Ta-na WUREN, Ya-ping WANG, Zhan-Qiang LI ja Yi ZHOU viisid läbi uuringud; Wei ZHANG ja Yu-hai WEI panid uued reaktiivid ja analüüsivahendid; Xiang-yun GAI ja Shou LIU analüüsisid andmeid; Xiang-Yun GAI kirjutas paberi ning Lan MA ja Dian-Xiang LU muutsid paberit.

Cistancheehhinakosiidsuudab vastu pannaapoptoos

Viited

1 Hultgren HN, toimetaja. Kõrgmäestiku meditsiin. Stanford: Hultgreni väljaanded; 1997. aastal.

2 Humbert M, Sitbon O, Simonneau G. Pulmonaalse arteriaalse hüpertensiooni ravi. N Ingl J Med 2004; 351: 1425-36.

3 Ge RL. Elu Qinghai-Tiibeti platoodel. Peking: Peking

University Medical Press; 2007. Hiina keel.

4 Xin Y, Hu F, Dong Q, Peng M. Ehhinakosiidi ja akteosiidi määramine Tiibeti ürdis Lagotis brevituba Maxim. Chin J Pharm Anal 2012; 32: 1183–5.

5 Zhao Q, Gao J, Li W, Cai D. Ehhinakosiidi neurotroofsed ja neurorescue-efektid Parkinsoni tõve alaägedas MPTP hiiremudelis. Brain Res 2010; 1346: 224–36.

6 Yang XL, LF, Yang YN, Shen JY, Zou R, Zhu PP jt. Ehhinakosiidi efektiivsus ja ohutus roti osteopeenia mudelis. Evid Based Complement Alternat Med 2013; 2013: 1.–10.

7 He WJ, Fang TH, Ma X, Zhang K, Ma ZZ, Tu PF. Ehhinakosiid kutsub NO-cGMP raja kaudu esile endoteelist sõltuva lõõgastuse roti aordirõngastes. Planta Med 2009; 75: 1400–4.

8 Warshaw DM, Mulvany MJ, Halpern W. Arterite resistentsuse veresoonte mehaanilised ja morfoloogilised omadused noortel ja vanadel spontaanselt hüpertensiivsetel rottidel. Circ Res 1979; 45: 250–9.

9 Shen M, Zhao L, Wu RX, Yue SQ, Pei JM. Resveratrooli vasorelaksantne toime rottide kõhuaordile ja selle aluseks olevad mehhanismid. Vascul Pharmacol 2012; 58: 64–70.

10 Gai XY, Tang F, MA J, Zeng KW, Wang SL, Wang YP jt. Ehhinakosiidi proliferatsioonivastane toime roti kopsuarteri silelihasrakkudele hüpoksia korral. J Pharmacol Sci 2014; 126: 155–63.

11 Mandal SK, Pendurthi UR, Rao LVM. Koefaktorite kaubitsemine fibroblastides: proteaasi aktiveeritud retseptori vahendatud raku signaaliülekande osalus. Veri 2007; 110: 161–70.

12 Toque HA, Teixeira CE, Priviero FB, Morganti RP, Antunes E, De Nucci G. Vardenafiil, kuid mitte sildenafiil ega tadalafiil, omab kaltsiumikanalit blokeerivat toimet küüliku isoleeritud kopsuarteris ja inimese pestud trombotsüütides. Br J Pharmacol 2008; 154: 787-96.

13 Fonseca-Magalhães PA, Sousa DF, de Siqueira RJ, Jorge RJ, Meneses GC, Alves RS jt. Sertraliini pärssiv toime rottide isoleeritud perfusiooniga neerudes ja roti arterite isoleeritud rõngaspreparaatides. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 1186–94.

14 Berridge MJ. Inositooltrifosfaadi ja kaltsiumi signalisatsioonimehhanismid. Biochim Biophys Acta 2009; 1793: 933–40.

15 Hu F, Koon CM, Chan JY, Lau KM, Kwan YW, Fung KP. Kaltsiumikanali ja kaaliumikanali kaasamine Dansheni ja Gegeni keetmisse kutsus esile vasodilatatsiooni sigade koronaarses LAD-arteris. Fütomeditsiin 2012; 19: 1051–8.

16 Matsumoto T, Kobayashi T, Ishida K, Hirasawa Y, Morita H, Honda T jt. Cassia siamea uudse antiplasmodiaalse alkaloidi Cassiarin A vasodilateeriv toime roti isoleeritud mesenteriaalarteris. Biol Pharm Bull 2010; 33: 844–8.

17 Dubuis E, Potier M, Wang R, Vandier C. Süsinikmonooksiidi pidev sissehingamine nõrgendab hüpoksilise pulmonaalse hüpertensiooni arengut arvatavasti BKCa kanalite aktiveerimise kaudu. Cardiovasc Res 2005; 65: 751–61.

18 Moudgil R, Michelakis ED, Archer SL. K pluss kanalite roll kopsuveresoonkonna toonuse, hapnikutundlikkuse, rakkude proliferatsiooni ja apoptoosi määramisel: mõju hüpoksilisele pulmonaalsele vasokonstriktsioonile ja pulmonaalsele arteriaalsele hüpertensioonile. Mikrotsirkulatsioon 2006; 13: 615–32.

19 Eichhorn B, Dobrev D. Vaskulaarsed suure juhtivusega kaltsiumi aktiveeritud kaaliumikanalid: funktsionaalne roll ja terapeutiline potentsiaal. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 2007; 376: 145–55.

20 Ko EA, Han J, Jung ID, Park WS. K pluss kanalite füsioloogilised rollid veresoonte silelihasrakkudes. J Smooth Muscle Res 2008; 44: 65–81.

21 Ledoux J, Werner ME, Brayden JE, Nelson MT. Kaltsiumiga aktiveeritud kaaliumikanalid ja veresoonte toonuse reguleerimine. Füsioloogia 2006; 21: 69–78.

22 Bonnet S, Archer SL. Kaaliumikanalite mitmekesisus kopsuarterites ja kopsuveenides: mõju kopsuveresoonkonna reguleerimisele tervisele ja pulmonaalse hüpertensiooni ajal. Pharmacol Ther 2007; 115: 56–69.

23 Feletou M. Kaltsiumiga aktiveeritud kaaliumikanalid ja endoteeli düsfunktsioon: ravivõimalused? Br J Pharmacol 2009; 156: 545–62.

24 Archer SL, Huang J, Hampl V, Nelson DP, Shultz PJ, Weir EK. Lämmastikoksiid ja cGMP põhjustavad vasorelaksatsiooni, aktiveerides cGMP-sõltuva proteiinkinaasi poolt süsivesikute-biotoksiinide suhtes tundliku K-kanali. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91: 7583–7.

25 Shimoda LA, Walesi LE, Pearse DB. K pluss kanalite sissepoole rektifikatsiooni inhibeerimine cGMP poolt kopsuveresoonte endoteelirakkudes. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2002; 283: L297–304.

26 Chatterjee S, Al-Mehdi AB, Levitan I, Stevens T, Fisher AB. Shear596 stress suurendab KATP kanali ekspressiooni rottide ja veiste kopsuveresoonte endoteelirakkudes. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2003; 285: C959–67.

27 Bartsch P, Maggiorini M, Ritter M, Noti C, Vock P, Oelz O. Kõrgmäestiku kopsuturse ennetamine nifedipiiniga. N Engl J Med 1991; 325: 1284–9.

28 Park WS, Han J, teenige YE. Sisemise alaldi K pluss kanalite füsioloogiline roll veresoonte silelihasrakkudes. Pflugers Arch 2008; 457: 137–47.

29 Wang YX, Zheng YM. ROS-sõltuvad signaalimehhanismid hüpoksilise Ca2 pluss reaktsioonide jaoks kopsuarteri müotsüütides. Antioxid Redox Signal 2010; 12: 611–23.