1. OSA Herba Cistanche vesiekstraktid soodustasid loperamiidist põhjustatud kõhukinnisusega rottide soolemotoorikat, parandades Cajal'i interstitsiaalseid rakke

Shuai Yan, 1,2 Yin-zi Yue, 1 Xiao-peng Wang, 1 Hong-li Dong, 1 Shu-guang Zhen, 1 Ben-sheng Wu, 1 ja Hai-hua Qian3

1 Suzhou haiglaTraditsiooniline hiina meditsiin,Suzhou, Jiangsu 215009, Hiina

2 Nanjingi ülikoolTraditsiooniline Hiina meditsiin, Nanjing, Jiangsu 210023, Hiina

3 Jiangsu provintsihaigla anorektaalkirurgia osakondTraditsiooniline Hiina meditsiin, Nanjing, Jiangsu 210029, Hiina

Correspondence should be addressed to Hai-Hua Qian; haihuaqian@126.com

Saabunud 24. mail 2017; muudetud 5. oktoobril 2017; Vastu võetud 25. oktoobril 2017; Avaldatud 28. detsembril 2017

Akadeemiline toimetaja: Samra Bashir

Autoriõigus © 2017 Shuai Yan et al. See on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitatakse Creative Commonsi omistamislitsentsi alusel, mis lubab piiramatut kasutamist, levitamist ja reprodutseerimist mis tahes kandjatel, eeldusel, et originaalteosele viidatakse õigesti.

Traditsiooniline hiina meditsiinteatati, et sellel on hea toime funktsionaalse kõhukinnisuse ravis. See töö püüdis tõestada Herba Cistanche (AEHC) vesiekstraktide mõju STC-ravile ja määrata võimalikud mehhanismid loperamiidist põhjustatud aeglase transiidi kõhukinnisuse (STC) mudeli abil. AEHC bioaktiivsete komponentide tuvastamiseks ja kinnitamiseks viidi läbi HPLC. Leiti, et AEHC nõrgendas STC vastuseid, mis põhinevad suurenenud väljaheite kogusel, niiskusesisaldusel ja soolestiku liikumiskiirusel, samuti GAS, MTL, SS ja CGRP seerumitasemetel. Samuti tõusid c-komplekti valgu ja mRNA tasemed, Cajali (ICC) interstitsiaalsete rakkude märgistamine. Samal ajal tõusis ainult ligandi ofc-kit SCF valgu tase. Meie andmete analüüs näitas, et AEHC võib ilmselgelt parandada ICC funktsiooni PI3K, SCF ja c-kit hõlmava signaaliraja kaudu ning suurendada käärsoole motoorika indekseid, nagu GAS, MTL, SS ja CGRP. Huvitav on märkida, et AEHC näis olevat tõhus kõhukinnisuse korral, seega on täpsete mehhanismide selgitamiseks vaja täiendavaid katseid.

Lisateabe saamiseks võtke ühendust:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticolal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

1. Sissejuhatus

Kõhukinnisus on tavaline funktsionaalne seedetrakti haigus ja rahvatervise probleem, mida iseloomustab pidevalt raske, harv või mittetäielik roojamine [1]. Kõhukinnisuse levimus varieerub 0,7 protsendist 81 protsendini kogu maailmas, eriti eakatel [2, 3]. Aeglane transiidi kõhukinnisus (STC) on tavaline seedetrakti kaebus 13–37 protsendil kroonilise ravile vastupidava kõhukinnisusega patsientidest [4, 5]. Epidemioloogilised andmed näitavad suuremat esinemissagedustSTCnoorte naiste seas kui meestel [6].STCpõhjustab raskesti ravitavat kõhukinnisust, mis ei reageeri konservatiivsele ravile ja on kalduvus neurodegeneratiivsete häirete tekkeks. See pole nii lihtne kui funktsionaalne haigus, vaid nõuab invasiivset ja agressiivset ravi [7].

Mitmeid praeguseid keemilisi ravimeid, nagu osmootsed või sekretoorsed lahtistid ja täiteained, kasutatakse üldiselt

kõhukinnisuse raviks [8], kuigi nende kasutamine on piiratud suurte kulutuste ja kõhuõõne kõrvalmõjude (nt valu, krambid ja puhitus) tõttu [9]. Praegu on kõhukinnisuse ravis esmatähtis seedekulgla reguleerimine. Tsisapriid loodi algul maohaiguste ravi soodustava vahendina, kuid hiljem võeti see südame rütmihäirete riski tõttu välja [10].

Tegaserod on selektiivne 5-hüdroksütrüptamiini retseptori antagonist, mis võib stimuleerida soolestiku peristaltikat ja sekretsiooni [11, 12]. Prukalopriid on kõrge selektiivsuse ja spetsiifilisusega uudne dihüdrobensofuraankarboksamiidi derivaat ja 5-HT retseptori agonist, mis võib suurendada mao-, peensoole- ja käärsoole motoorikat ning toimib kiiremini dünaamikas [13–15]. Prostaglandiini E1 derivaadina võib lubiprostoon selektiivselt aktiveerida CIC-kanalit, et soodustada seedetrakti sekretsiooni ja suurendada soolestiku ülekande mõju [16].

Cistancheon toniseeriv toimeneerudja saab ka ravidakõhukinnisus

Kõhukinnisuse motoorika on laialt levinud probleem, kuid selle etioloogia pole veel selge. Sellegipoolest on veenvad tõendid näidanud Cajali (ICC) interstitsiaalsete rakkude panust kõhukinnisuse patogeneesi [17]. ICC leidub seedetrakti närvilõpmete ja silelihasrakkude vahel. ICC-d tunnustatakse üldiselt südamestimulaatori rakkudena seedetrakti aktiivsuse ja neuro-lihase ülekande vahendajatena [18]. Uuringud on näidanud, et aeglase kõhukinnisusega patsientide käärsoole ICC tihedus on märkimisväärselt madalam kui tavalistel patsientidel [19]. Sellest tulenevalt võib ICC arvu vähenemine põhjustada aeglase laine aktiivsuse puudumist, mõjutades seega kontraktiilset vastust ja põhjustades aeglase transiidiga kõhukinnisusega patsientidel transiidi hilinemist. Siinkohal võib ICC leevendamine ravimite abil olla aeglase transiidi kõhukinnisuse ravimisel otsustava tähtsusega.

Erinevad taimsed ravimid ja traditsiooniline hiina ravim Mula on hiljuti tähelepanu äratanud kui uudseid ravimeid kroonilise kõhukinnisuse raviks, mis on tingitud paranenud väljaheite tootmisest [20, 21]. Herba Cistanche on traditsiooniline taimne ravim, mida kasutatakse kroonilise neeruhaiguse, naiste viljatuse, tugeva menorraagia ja impotentsuse raviks [22, 23]. Herba Cistanche takistab aju neuronite apoptoosi, ekspresseerides MES23.5 rakkudes apoptoosiga seotud tegureid ja neurotroofseid tegureid [24]. Herba Cistanche on näidanud ka farmatseutilist potentsiaali Yang-Qi neeru-Yangi puudulikkuse sündroomi ravis. Hiljutine uuring on näidanud, et Herba Cistanche suurendab mitokondriaalset hingamist ja glutatiooni antioksüdantset seisundit H9c2 kardiomüotsüütides [25].

TCM usub, et kõhukinnisusel on tihe seos neerudega. Neer, mis avaneb välissuguelundites ja pärakus, reguleerib urineerimist ja roojamist. Jäätmete vedu põhineb neeru qi edendamisel ja neeru yini toitmisel. Kui neeru yang on puudulik või eluvärava tuli kustub, põhjustab jämesoole külm ummistus jäätmete seiskumist. Kõhukinnisust põhjustab ka kuiv soole liikumine, kuna neeruessentsi puudulikkus ei suuda toota piisavalt vedelikku [26].

HerbaCistancheon tavaline ühendav ürt, mis on maitselt magus ja soolane ning olemuselt soe. Tänu jämesoolele ja neerumeridiaanidele võib see toniseerida neeru yangi ja niisutada soolestikku, et leevendada kõhukinnisust. See üksik ravimtaim ja sellehiina keelfarmatseutilisi preparaate on laialdaselt kasutatud kõhukinnisuse raviks märkimisväärse efektiivsusega [27].

Hiinas Herba mõjuCistancheKõhukinnisuse juured on registreeritud [28, 29] ja Shen Nongi hiinakeelses Materia Medicas nimetatakse neid "Cistanche liigi kuivatatud mahlateks varteks" [30]; Siiski ei ole seni teaduslikku tõestust Herba Cistanche juurte mõju kohta kõhukinnisusele, kliiniliselt efektiivne annus on 20 g päevasHiina farmakopöaja kliiniline toime ei suurene annusega veelgi.

Kuna Herba Cistanche'i on nii vähe, [31], standardiseerides selle kliinilise annuse raviksSTCeksperimentaalse uuringuga ei hoia ära mitte ainult ebapiisavast annusest tingitud ebaõnnestunud ravi, vaid hoiab ka patsiente eemal majanduslikust kahjust ja isegi ravimite ülekasutamisest tulenevatest äpardustest. Me loodame

tulemused võivad panna teadusliku aluse uutele kõhukinnisusevastastele ravimitele. Seetõttu on käesolevas uuringus oluline uurida vesilahuse Herba Cistanche soolestiku edendamise funktsiooni ja selle toimet ICC-le.

Cistanchesaab ravidakõhukinnisus

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Herba Cistanche vesiekstrakti valmistamine.

Kogu Herba Cistanche osteti ettevõttelt Nanjing Haichang Chinese Medicine Group Co., Ltd. (Nanjing, Hiina), mis koristati, koguti ja töödeldi standardsete etnobotaaniliste tavade järgi Hiina Sinkiangi piirkonna istandustest. Taime identiteedi tegi morfoloogiliselt kindlaks professor Tu Lin Lu Nanjingi Hiina meditsiini ülikoolist, Nanjing, Hiina. Vautšeri näidis (NUCMCHS-2015628) deponeeriti Nanjingi Hiina Meditsiini Ülikooli Terviseteaduste Kolledžis Nanjingis, Hiinas.

500 g kaaluvad Herba Cistanche viilud pulbristati elektrilise segistiga ja ekstraheeriti 5000 ml destilleeritud vees, misjärel vesiekstrakti puhastati tsirkuleeriva ekstraheerimisseadmega 100 °C juures 2 tundi.

membraani poorid (Millipore, Billerica, MA, USA) ja ekstraktidest saadud jääk lahustati 4000 ml vees. Pärast püstjahutiga ekstraheerimist ekstraktid koguti ja aurustati, et saada lõplik proovisaadus. Vesiekstraktid kontsentreeriti kuivaks pelletiks (1 g/ml), kasutades a

edaspidiseks kasutamiseks. Tahked proovid taastati destilleeritud vees, et saada katse jaoks vajalikud annused 10, 20 ja 40 mg/kg kehakaalu kohta.

2.2. Loomad.

Selles uuringus kasutatud katseprotokolli vaatas läbi ja kiitis heaks Suzhou haigla eetiliste protseduuride ja teadusliku hoolitsuse alusel.Traditsiooniline Hiina meditsiin-Institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee, Suzhou, Hiina (SHTCM-IACUC; loa number: PNU- 2016-0003). Kõik ag-ga isasrotid (Sprague Dawley tüvi) osteti Shanghai Laboratory Animal Research Centerist vastavalt riiklike tervishoiuinstituutide juhistele. Loomadel oli vaba juurdepääs standardsele dieedile (AIN-93 M) ja kraaniveele ad libitum ning neid peeti individuaalselt roostevabast terasest suhtelise õhuniiskuse protsendiga ning eksponeeriti iga päev 12 tundi loomulikku valgust ja 12 tundi pimedat.

2.3 Eksperimentaalne disain.

Vastavalt varasematele uuringutele [32, 33] kasutati loperamiidi rottidel kõhukinnisuse esilekutsumiseks. Kokku jaotati 60 rotti juhuslikult 5 rühma (rühma kohta): A: normaalne rühm (NG), B: mudelrühm (Lop pluss kandjaga töödeldud rühm), C: kõhukinnisusega rottide rühm, keda raviti madala vesilahusega ekstraktiga. Herba Cistanche (Lop pluss LAEHC-ga töödeldud rühm), D: kõhukinnisusega rottide rühm, keda raviti Herba Cistanche keskmise vesilahusega (Lop pluss MAEHC-ga töödeldud rühm) ja E: kõhukinnisusega rottide rühm, keda raviti Herba kõrge vesisisaldusega ekstraktiga. Cistanche (Lop pluss HAEHC-ga töödeldud rühm). Rühma A töödeldi tavalise soolalahusega (10 ml/kg); B-rühma raviti loperamiidiga

(4 mg/kg); Rühma C töödeldi loperamiidi (4 mg/kg) ja madala vesilahusega Herba Cistanche ekstraktiga (1 g/kg); D rühma töödeldi loperamiidi (4 mg/kg) ja Herba Cistanche keskmise vesilahuse (2 g/kg) ja rühma E loperamiidiga (4 mg/kg) ja Herba Cistanche kõrge vesilahusega (4 g/kg) kg). Kõigile normaalse rühma rottidele süstiti kõhukinnisuse esilekutsumiseks 0,9 protsenti naatriumkloriidi, teistele aga loperamiidi 0,9 protsendilises naatriumkloriidis kaks korda päevas 3 järjestikuse päeva jooksul. Herba Cistanche vesiekstrakt suspendeeriti vees ja seda manustati suukaudselt üks kord päevas 4. päevast 18. päevani rühmas C, rühmas D ja rühmas E, samas kui rühmad A ja B said sondi kaudu ühtlase koguse vett.

2.4. Kromatograafiline seisund.

HPLC profileerimine viidi läbi Shimadzu vedelikkromatograafiasüsteemis (Tokyo, Jaapan), mis koosnes LC-20AT pumbast ja

jälgiti lainepikkusel 330 nm temperatuuril 30 C. Isokraatne liikuv faas koosnes metanoolist 0,1% sipelghappest (80 : 20, maht/maht) ja jooksis voolukiirusel 1,0 ml/min . Kromatograafiline eraldamine oli

osakeste suurus 5 m, Beijing Dikma Science and Technology Co., Ltd., Peking, Hiina).

2.5. Treeningu, toidutarbimise, veetarbimise, keha analüüs

Kummi (20% puusüsi ja 10% kummikummi vesisuspensioon) manustati suukaudselt igale loomale mahus 25 ml/kg. 30 minuti pärast ohverdati loomad humaanselt emakakaela dislokatsiooniga ja tükeldati. Läbiti peensooled pylorusest pimesooleni ning mõõdeti söejahu läbitud vahemaa ja peensoole kogupikkus. Üksiku roti puhul arvutati soolestiku läbimise protsent söejahu läbitud vahemaa protsendina peensoole kogupikkusest. Järgmine võrrand arvutab soolestiku läbimise kiiruse ( protsenti ): söe läbitud vahemaa / vahemaa pylorusest pimesooleni 100 protsenti .

2.6. Vereproovide ja kudede kogumine. Katseperioodi lõpus allutati rottidele 12-tunnine paastumine, kuid neile võimaldati vaba juurdepääs veele. Seejärel anesteseeriti kõik rotid 30 minutit hiljem naatriumpentobarbitaali (50 mg/kg) intraperitoneaalse süstimisega ja asetati reguleeritava temperatuuriga lauale. Vereproovid koguti ja tsentrifuugiti kiirusel 3500 p/min 15 minutit, et saada seerumit. Käärsool lõhestati kohe ja loputati tavalise soolalahusega temperatuuril 4 °C ning seejärel jagati kaheks osaks. Üks fragment fikseeriti 10-protsendilises formaliinis ja töödeldi jagatud parafiinis järgnevaks immunohistokeemiliseks (IHC) analüüsiks, samas kui teine ​​fragment oli kaal ja juuksed. Muutused treeningus, toidu tarbimine, vesi

hoiti kuni analüüsimiseni temperatuuril 80 C. tarbimist, kehakaalu ja juukseid jälgiti ja registreeriti iga päev kogu katseperioodi vältel. Vaatlesime "muutusi treeningus" järgides konkreetseid samme: isevalmistatud kasti (60 cm kõrge, 50 cm pikk ja 80 cm lai koos tumeda välisseinaga) kasutatakse avatud välikatse jaoks; valge maa oli pimedas ja vaikses ruumis musta joonega jagatud teemantideks (12 cm); 100 W pirn rippus 1 m kõrgusel karbi keskosast; rotid paigutati modelleerimise 4., 6., 12. ja 18. päeval kasti keskele. Horisontaalse liikumise skoorina kasutati ruutude arvu, mille rotid läbisid 5 minuti jooksul, ja vertikaalse liikumise skoorina rottide püstiasendit 5 minuti jooksul. Horisontaalsed ja liikumise hinded pluss vertikaalse liikumise hinded näitavad rottide harjutuste mahtu. Iga rotti mõõdeti üks kord [34, 35].

Cistanchevõib leevendadakõhukinnisus

2.7. Fekaalparameetrite mõõtmine.

Suukaudse manustamise viimasel päeval koguti iga SD-roti värsked väljaheitegraanulid 6 tunniks ümara põhjaga korgiga torudesse ja registreeriti iga rühma kogukaal. Väljaheite niiskusesisalduse määramiseks kuivatasime elektrilise kaaluga väljaheitegraanuleid kuni konstantse massi saavutamiseni ja mõõdeti kuivkaal. Niiskusesisaldus

2.8. GAS-i, MTL-i, SS-i ja CGRP hindamine.

Gastriini (GAS), motiliini (MTL), somatostatiini (SS) ja kaltsitoniini geeniga seotud peptiidi (CGRP) kontsentratsioone seerumis hinnati ELISA abil, kasutades kaubanduslikult saadavaid komplekte.

2.9. Histoloogiline analüüs.

SD-rottidelt kogutud põiki käärsooled fikseeriti 10-protsendilise formaliiniga 12 tundi, sisestati

m paksused viilud, mis värviti hematoksüliini ja eosiiniga (H&E, Sigma-Aldrich, MO, USA). Nende sektsioonide morfoloogilisi tunnuseid täheldati valgusmikroskoopia abil, mille järel mõõdeti Leica Application Suite'i (Leica Microsystems, Šveits) abil villuse pikkus, krüpti paksus ja lihase paksus.

2.10. Immunohistokeemiline analüüs.

Järgisime Zhu jt meetodeid. (2016) [36]; värvimata 5 m lõigud olid

värviti küüliku anti-c-komplektiga (1:100) temperatuuril 4 °C üleöö. Sekundaarse antikeha ja avidiin-biotiin-peroksidaasi kompleksi meetodit kasutati vastavalt tootja juhistele. Mittespetsiifilise seondumise kõrvaldamiseks kasutati immunoglobuliini-negatiivset kontrolli. c-kiti ekspressioonitasemed

2.11. Soole transiidi kiiruse analüüs.

Soolestiku läbimise suhe viidi läbi vastavalt varem teatatud protokollidele [36]; lühidalt, pärast 14-päevast ravi, paastusid kõik SD-rotid 12 tundi, kuid neile võimaldati vaba juurdepääs veele.

Reaalajas polümeraasi ahelreaktsioon. C-komplekti, SCF ja PI3K mRNA geeniekspressioonitasemed käärsooles määrati kogu RNA ekstraheerimise komplekti (TIANGEN Biotech,

Peking, Hiina) vastavalt tootja protokollidele. Reaalajas PCR viidi läbi ABI StepOnePlus Real-Time PCR süsteemiga (ABI). PCR-toodete tuvastamiseks kasutati SYBR Green I Real-Time PCR Master Mixi (QPK201, Toyobo, Jaapan). Reaktsioonid viidi läbi kolmes korduses. Seejärel oli 0,5 g kaaluv värske roti käärsoole kude homoloogne.

l) ekstraheeriti vastavalt tootja juhistele, kasutades TRIzol Reagenti (Invitrogen, USA). cDNA esimese ahela sünteesimiseks kasutati pöördtranskriptsiooni-PCR komplekti (Takara Biotechnology Co., Inc.) vastavalt tootja protokollile. Kõik sihitud parameetrid on näidatud tabelis 1. Tsükliprotokoll oli järgmistes tingimustes: 95 °C 5 minutit (DNA denatureerimine), millele järgnes 40 tsüklit 95 °C juures 15 sekundit, 60 °C 20 sekundit ja 72 °C. 40 s. Amplifikatsioonitsüklite lõpus viidi läbi sulamiskõvera analüüs.

2.12. Western blot analüüs.

C-komplekti ja SCF valgusisaldust käärsooleproovide homogenaatides hinnati Western blot meetodil. Lühidalt öeldes määrati homogenaatide koguvalgud, kasutades bitsinhoniinhappe testi (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA). BioRad elektroforeesisüsteemis (BioRad Laboratories, Hercules, CA, USA) kasutati valkude eraldamiseks naatriumdodetsüülsulfaat-polüakrüülamiidgeeli (SDS-PAGE). Seejärel kanti valgud polüvinülideendifluoriidi (PVDF) membraanidele. Pärast 2-tunnist töötlemist blokeeriva puhvriga TBS-is, mis sisaldas 5% rasvavaba piima toatemperatuuril, inkubeeriti PVDF membraane üleöö 1:1000 lahjendatud anti-c-komplektiga (Santa Cruz, CA, USA), 1:500 lahjendatud anti-c-kit. SCF (Sigma, MO,

USA) ja vastavalt 1: 8000 lahjendatud anti-aktiini (Kangchen, Shanghai, Hiina) antikehi. Primaarse antikeha seondumine tuvastati vastava HRP-ga konjugeeritud sekundaarse antikeha abil (Beyotime, Jiangsu, Hiina). Kemoluminestsentsi tuvastamiseks kasutati täiustatud kemoluminestsentsi komplekti (Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL, USA) ja Odyssey Infrared Imaging Systemi (Gene Company Ltd., Hongkong). Laadimiskontrollina kasutati majapidamisprolaktiini. Valgu ekspressiooni kogus on esitatud aktiini taseme suhtes.

2.13. Statistiline analüüs.

Mõõtmisandmed esitati keskmise standardveana (SEM) ja analüüsiti SPSS abil

16.{1}} tarkvara (SPSS, Chicago, IL, USA). Kõigi parameetrite oluliste erinevuste määramiseks kasutati ühesuunalist dispersioonanalüüsi (ANOVA), millele järgnesid Duncani mitme vahemiku testid. Väärtusi peeti statistiliselt olulisteks

CistancheKeetmine on hea ravim ravikskõhukinnisus

3. Tulemused

3.1. Herba Cistanche koostis ja funktsionaalsed komponendid.

Nagu on näidatud joonisel 1, sisaldavad Herba Cistanche juured suures kontsentratsioonis mitmeid lahtistava toimega seotud bioaktiivseid komponente. Üldehhinakosiidi ja verbaskosiidi üldkontsentratsioonid olid vastavalt 0,64 mg/g ja 0,16 mg/g. Kõrgefektiivse vedelikkromatograafia (HPLC) abil tuvastati LP-s sobiva retentsiooniaja juures kaks piiki, mis näitavad kõrget ehhinakosiidi ja verbaskosiidi taset.

3.2. Üldine tähelepanek.

SP-rotid ei surnud kogu katse jooksul, mis näitab loommudeli paremat turvalisust ja töövõimet. Võrreldes A-rühmaga oli mudelirühma rottidel kohev karv, väsimus, kuiv väljaheide ja

halvenes modelleerimisaja pikenemisega.

3.3. AEHC mõju väljaheite arvule ja niiskusesisaldusele loperamiidist põhjustatud kõhukinnisusega rottidel.

Võrreldes tavaliste väljaheidetega olid B-, C-, D- ja E-rühmade väljaheited kuivad, väikesed ja kõvad ning enne töötlemist ei põlenud.

süstiti ju rottidele loperamiidi (ravimiga ravitud on sümptomeid leevendanud kui keha ja 3(b)).

kaal ei erinenud oluliselt kõigis katserühmades, kuigi E-rühma kehakaal oli veidi väiksem kui teistel rühmadel (joonis 2 (a)). Lisaks sõid kõhukinnisusega SD-rotid oluliselt vähem toitu kui rühm A ( ), samas kui erinevused rühmade B, C, D ja E vahel (joonis 2 (b)) ei olnud olulised. Veetarbimine ei muutunud ka rühma A ja B rühma vahel. Lisaks ei tuvastatud olulist veetarbimise suurenemist

et ravi AEHC-ga ei põhjustanud mingeid muutusi. Kuigi soolestiku transiidi kiirus rühmades C, D ja oli ka oluliselt kõrgemRühmadel C, D ja E olid suhtarvud oluliselt madalamad kui rühmal A.

3.4. AEHC mõju peensoole transiidi kiirusele loperamiidist põhjustatud kõhukinnisusega rottidel.

Nagu on näha jooniselt 4, ei tuvastatud viie rühma vahel peensoole läbimise algtasemes erinevusi. Grupil B on märgatavalt madalam söepulbri tõukejõud võrreldes rühmaga A (𝑃 < 0.01).="" kuigi="" soolestiku="" transiidi="" määr="" rühmas="" c,="" d="" ja="" e="" oli="" samuti="" oluliselt="" kõrgem="" kui="" rühmas="" b="" (𝑃="">< 0,05),="" oli="" rühmade="" c,="" d="" ja="" e="" suhtarv="" oluliselt="" madalam="" kui="" rühmas="">

3.5. Sekkumine AEHC-ga suurendab osaliselt käärsoole motoorika indeksi funktsiooni.

B-rühma rottidelt saadud GAS-i ja MTL-i seerumitasemed langesid oluliselt võrreldes A-rühma omadega (𝑃 < {{0}}.01,="" vastavalt).="" teisest="" küljest="" on="" rühmades="" c,="" d="" ja="" e="" (vastavalt="" 𝑃="">< 0.05)="" herba="" cistanche="" ekstraktide="" manustamisest="" tulenevad="" gas-i="" ja="" mtl-i="" tasemed="" tõhusalt="" kõrgemad="" kui="" rühmas="" b="" ss-väärtused="" b-rühma="" rottidel="" olid="" kõrgemad="" kui="" a-rühmal="" (𝑃="">< 0,01);="" rühmadel="" c,="" d="" ja="" e="" on="" nõrgenenud="" ss="" tase="" (𝑃="">< 0,05)="" (joonis="" 5).="" võrreldes="" kõhukinnisusega="" rottidega="" olid="" cgrp="" tasemed="" a-rühma="" normaalsetel="" rottidel="" (𝑃="">< 0,01)="" ja="" herba="" cistanche'i="" manustatud="" rühmades="" c,="" d="" ja="" e="" konstantsed="" (𝑃=""> 0,05).

3.6. Käärsoole histoloogiline muutus.

Uurimaks, kas AEHC-ravi võib esile kutsuda käärsoolekoe struktuurseid muutusi, mõõdeti pärast H&E värvimist viie rühma rottide põikkäärsooles villuse pikkust, krüptikihi paksust ja lihaste paksust. Võrreldes rottide käärsoole patoloogiat igas rühmas, oli käärsoole limaskest sile ja sisaldab väikeseid artereid ja väikeseid veene submukoosis ning suurt hulka rasvrakke. Lisaks koosnes lihaskiht silelihasrakkudest ja subserosa oli täielik. Villuse keskmine pikkus oli B-rühmas oluliselt lühem kui A-rühmas (𝑃 < {0}}.01).="" siiski="" kasvas="" c-rühma="" villi="" keskmine="" pikkus="" võrreldes="" b-rühmaga="" oluliselt="" enam="" kui="" 30="" protsenti="" (joonised="" 6="" ja="" 7)="" (𝑃="">< 0,05).="" samal="" ajal="" suureneb="" villuse="" keskmine="" pikkus="" rühmades="" d="" ja="" e="" oluliselt="" võrreldes="" rühmaga="" b="" (joonised="" 6="" (a)="" ja="" 6="" (b))="" (𝑃="">< 0,="" 01).="" lisaks="" oli="" lihase="" paksuse="" muutus="" väga="" sarnane="" villuse="" pikkusega.="" b-rühmas="" lihaste="">

oli A-rühmaga võrreldes dramaatiliselt õhem. Kuid rühmade C, D ja E lihaste paksuse tase suurenes 30–35 protsenti võrreldes rühma B omaga (joonised 6 ja 7). Üldiselt näitavad need leiud, et AEHC võib suurendada kõhukinnisusega rottide käärsoole villi pikkust ja lihaste paksust.

3.7. AHEC-ravi manustamine c-Kiti ja SCF-i suurenenud valgu ekspressioon.

Selle immunoreaktiivsus tuvastati käärsooles, kuna kõigi rühmade rakud olid c-komplekti suhtes positiivsed. Nagu on näidatud joonisel 8, oli c-kiti ekspressioonitase rühmas B madalam kui rühmas A (𝑃 < 0.05).="" c-komplekti="" ekspressioonitase="" rühmas="" c="" oli="" kõrgem="" kui="" rühmas="" b="" (𝑃="">< 0.{{20}}5),="" samas="" kui="" c-komplekti="" oli="" rohkem="" rühmas="" d="" ja="" rühmas.="" e="" kui="" b-grupis="" (𝑃="">< 0.05).="" pärast="" 2-nädalast="" töötlemist="" erineva="" kontsentratsiooniga="" herba="" cistanche="" vesiekstraktiga="" tuvastati="" western="" blot="" analüüsiga="" c-komplekti="" ja="" scf="" valgu="" ekspressioonitasemed.="" western="" blot="" analüüs="" näitas,="" et="" c-kit="" ja="" scf="" ekspressioonitasemed="" olid="" pärast="" loperamiidiga="" töötlemist="" rottide="" käärsooles="" märkimisväärselt="" madalamad="" (joonis="" 9).="" joonis="" 8(e)="" näitab,="" et="" vähenenud="" c-komplekt="" kõhukinnisusega="" rottidel="" suurenes="" pärast="" rottide="" töötlemist="" 500="" µg/ml="" aehc-ga="" (𝑃="">< 0,05)="" oluliselt="" 31,2="" protsenti.="" lisaks="" tõstis="" töötlemine="" 100="" ja="" 200="" g/ml="" aehc-ga="" c-kit="" valgu="" ekspressioonitaset.="" scf="" valgu="" ekspressioon="" suurenes="" märkimisväärselt="" 20,1,="" 24,7="" ja="" 8,4="" protsenti,="" kui="" raviti="" aehc-ga="" vastavalt="" 100,="" 200="" ja="" 500="" µg/ml="" (joonis="" 9).="" 3.8.="" aehc="" mõju="" c-kit,="" scf="" ja="" pi3k="" mrna="" ekspressioonile.="" et="" uurida,="" kas="" aehc-ravi="" võib="" mõjutada="" lihaskontraktsiooniga="" seotud="" mrna="" reguleerimist,="" täheldati="" spetsiifilisi="" praimereid="" kasutades="" kõhukinnisusega="" rottide="" jämesooles="" c-kit,="" scf="" ja="" pi3k="" ekspressioonitasemeid.="" tulemused="" näitasid,="" et="" c-komplekti="" mrna="" tasemed="" rühmas="" b="" olid="" oluliselt="" madalamad="" kui="" rühmas="" a="" (𝑃="">< 0,05),="" samas="" kui="" mrna="" tasemed="" rühmades="" c,="" d="" ja="" e="" olid="" kõrgemad="" kui="" rühmas="" b="" (𝑃="">< 0,05).="" (joonis="" 10).="" uurisime="" ka="">

komplekti ligandi SCF ekspressioon. SCF-i mRNA ekspressioon B-rühma rottidel oli oluliselt madalam kui A-rühmas, samas kui ravi AEHC-ga rühmas C, D ja E suurendas SCF-i mRNA ekspressiooni (joonis 10). Lisaks uurisime AEHC mõju PI3K geeniekspressioonile. 14. päeval oli PI3K geeniekspressiooni tase rühmades C, D ja E oluliselt kõrgem kui rühmas B (𝑃 <>