Bakuchioli mitmesuunaline toime näo vananemise rakuliste mehhanismide vastu – eksperimentaalsed tõendid tervikliku ravimeetodi kohta, 2. osa

Antioksüdatiivne jõud

Testitavate ainete AP määramiseks rakendati elektronide spinresonantsi, kusjuures 1 ppm C-vitamiini lahus on määratletud kui 1 AU. Retinoolil oli pikem reaktsiooniaeg (2,59 min) kui bakuchioolil (0,99 min) või C-vitamiinil (0,24 min), mis näitab retinooli madalamat reaktsioonivõimet vabade radikaalidega. Lisaks näitasid wc väärtused, et bakuchioolil (0.028 mg) oli suurem võime reageerida vabade radikaalidega võrreldes retinooliga (0,151 mg). Mõlemad omadused annavad bakuchiooli AP väärtuseks 12 125AU ja retinooli puhul 848 AU (joonis 2b).

Põletikuvastase toime määramine

Bakuchiooli ja retinooli (ii) põletikuvastase toime uurimiseks määrasime põletikueelsete tsütokiinide PGE2 ja MIF taseme.

Tistanche glükosiid võib samuti suurendada SOD aktiivsust südame- ja maksakudedes ning oluliselt vähendada lipofustsiini ja MDA sisaldust igas koes, eemaldades tõhusalt erinevaid reaktiivseid hapnikuradikaale (OH-, H2O₂ jne) ja kaitstes tekitatud DNA kahjustuste eest. OH-radikaalide poolt. Tsistanche fenüületanoidglükosiididel on tugev vabade radikaalide eemaldamisvõime, suurem redutseerimisvõime kui C-vitamiinil, nad parandavad SOD aktiivsust sperma suspensioonis, vähendavad MDA sisaldust ja omavad teatud kaitset sperma membraani funktsioonile. Tsistanche polüsahhariidid võivad suurendada SOD ja GSH-Px aktiivsust D-galaktoosi poolt põhjustatud eksperimentaalselt vananevate hiirte erütrotsüütides ja kopsukudedes, samuti vähendada MDA ja kollageeni sisaldust kopsudes ja plasmas ning suurendada elastiini sisaldust. hea puhastav toime DPPH-le, pikendab hüpoksia aega vananevatel hiirtel, parandab SOD aktiivsust seerumis ja aeglustab eksperimentaalselt vananevatel hiirtel kopsude füsioloogilist degeneratsiooni Raku morfoloogilise degeneratsiooniga on katsed näidanud, et Cistanche'il on hea antioksüdantne võime ja sellel on potentsiaal olla ravim naha vananemishaiguste ennetamiseks ja raviks. Samal ajal on Cistanche ehhinakosiidil märkimisväärne võime eemaldada DPPH vabu radikaale ja eemaldada reaktiivseid hapniku liike, takistada vabade radikaalide poolt indutseeritud kollageeni lagunemist ning samuti on sellel hea parandav toime tümiini vabade radikaalide anioonide kahjustustele.

Klõpsake nuppu Kuidas võtta antioksüdanti Cistanche

【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

PGE2 tasemed

LPS-iga töödeldud HDF-ide prostaglandiini E2 tase oli võrreldes töötlemata kontrolliga oluliselt kõrgem (p=0,0005), mis viitab edukale stressi esilekutsumisele (joonis 2c). Ootuspäraselt indutseeris farmakoloogiliselt hästi tuntud kõrgetasemeline diklofenak LPS-ga töödeldud HDF-ides märkimisväärselt langenud PGE2 taset võrreldes stressis kontrolliga (p{9}},0005). LPS-i ja bakuchiooliga töödeldud rakkudes vähenes PGE2 tase oluliselt võrreldes ainult LPS-iga töödeldud HDF-idega (p=0,0005 kõigi näidatud kontsentratsioonide puhul). Retinooli kasutamine kontsentratsioonides, mis on võrdsed või suuremad kui 2,5 μM, vähendas oluliselt ka pingestatud kontrolli PGE2 taset (2,5 μM: p=0.0024; 5 ja 10 μM: p=0.0005).

MIF-valgu tase

Nagu on kujutatud joonisel 2d, näitasid pingestatud kontroll-HDF-id MIF-valgu tasemete olulist tõusu võrreldes pingevaba kontrolliga (p{1}}.0020), mis näitab tõhusat stressi esilekutsumist. Stressis HDF-ide töötlemine bakuchiooliga vähendas oluliselt MIF-valgu taset (1 μM: p=0.0020; 10 μM: p=0.0039) võrreldes stressis kontrolliga. Retinooli kasutamine alandas oluliselt ka MIF-valgu taset (1 ja 10 μM: p=0.0020).

Rakkude aktiivsuse analüüs

Bakuchiooli ja retinooli mõju uurimiseks (iii) rakuaktiivsusele mõõdeti FGF7 valgu taset ja WST-1 metaboliseerumist.

FGF7 valgu taseme määramine

HDF-ide töötlemine 10 µM bakuchiooliga suurendas märkimisväärselt FGF7 valgu taset võrreldes kontrollrakkudega (p=0.0396), samas kui 10 µM retinoolil ei olnud olulist mõju (joonis 3a).

WST{0}} metabolisatsiooni määramine

Nagu on näidatud joonisel 3b, alandas triton-X oluliselt WST-1 metabolisatsiooni taset HDF-ides võrreldes kontrollrakkudega (p =  0.0000), mis näitab analüüsi õiget rakendamist. 1 ja 10 μM bakuchiooliga töödeldud HDF-idel oli kontrollrühmaga võrreldes oluliselt suurenenud WST-1 metabolisatsioonitase (p=0.0000 mõlema kontsentratsiooni korral). Ravi 1 µM retinooliga põhjustas ka WST-1 metabolisatsioonitasemete olulise suurenemise (p =  0,0066) võrreldes kontrollrakkudega, samas kui 10 µM retinoolil ei olnud olulist mõju.

ECM-i komponentide väljendamine

Bakuchiooli ja retinooli vahendatud mõju hindamiseks (iv) ECM komponentide ekspressioonile määrasime COL7A1, COL1A1 ja FN valgu ekspressiooni.

COL7A1 ja COL1A1 valgu taseme määramine

COL7A1 valgu tase kõrgetasemelise TGF- ja naatriumaskorbaadiga töödeldud rakkudes oli kontrollrakkudega võrreldes oluliselt kõrgem (4 h: p=0,0020, 72 või 96 h: p=0,0010), nagu näidatud. joonisel fig 3c. Rakkude töötlemine bakuchiooli või retinooliga kontsentratsioonis 1 μM (p=0.0020 mõlema uuritava aine puhul) ja 10 μM (bakuchiol: p=0.0195, retinool: p=0 0,0059) suurendas oluliselt COL7A1 valgu taset juba 4 tunni pärast võrreldes kontrolliga. Pärast pikemat inkubatsiooniaega näitasid 10 μM bakuchiooli või retinooliga stimuleeritud HDF-id oluliselt ka COL7A1 valgu taseme tõusu (bakuchiol: p=0.0029, retinool: p=0.0420) võrreldes kontrollrakkudega. .

Kõrgetasemelise TGF- ja naatriumaskorbaadiga töödeldud HDF-id näitasid lisaks COL1A1 valgu taseme olulist tõusu (p=0,0010), nagu on näidatud joonisel 3d. Samamoodi tõusis COL1A1 valgu tase oluliselt pärast 4-tunnist stimulatsiooni bakuchiooliga (1 μM: p=0.0020, 10 μM: p=0.0322) või retinooliga (1 μM: p {{16). }}.0244, 10 μM: p=0.0098) kontrollrakkude suhtes.

FN valgu taseme määramine

Joonis fig 3e illustreerib, et 10 µM bakuchiooli või retinooliga töödeldud HDF-id näitasid FN-valgu tasemete olulist tõusu (bakuchiol: p=0.0090, retinool: p=0.0302) võrreldes kontrollrakkudega.

Uuring I: FN-valgu tasemete ex vivo määramine

Viidi läbi ex vivo uuring, et uurida, kas varasemad andmed väljenduvad ex vivo tulemustes. Nagu on kujutatud joonisel fig 4a, näitasid bakuchiooliga töödeldud kohad statistiliselt olulist FN valgu taseme tõusu töötlemata kontrollpiirkondades (p=0,0340) ja vehiikuliga töödeldud piirkondades (p=0,0088). Retinooliga töödeldud saidid ei näidanud olulisi muutusi FN valgu tasemetes töötlemata või kandjaga töödeldud piirkondades. Kuid kokkusobimatuse reaktsioonid põhjustasid väiksema arvu katsealuste retinoolravi suhtes (ravimata: n=26, vehiik: n=29, bakuchiol: n=30, retinool: n=19 ). Täiendavad väikesed kõrvalekalded testitavate isikute arvus olid põhjustatud valimi moodustamise probleemidest.

Epidermise taastumise ja epiteeli taastamise parandamine

Bakuchiooli ja retinooli mõju uurimiseks (v) epidermise regeneratsioonile ja uuesti epiteliseerumisele kasutati in vitro haavade paranemise mudelit. Joonis 4b illustreerib, et bakuchiooliga töödeldud haavad näitasid regenereeritud epidermise pikkuse olulist pikenemist töötlemata (p=0.0251) ja kontrollhaavade (p=0.0102) puhul. Seevastu retinooliga täiendatud haavadel ei ilmnenud regenereeritud epidermise pikkuses olulist muutust võrreldes mõlema kontrolliga. Joonis fig 4c illustreerib haava paranemise edenemist 43 tundi pärast ravi bakuchiooliga või retinooliga, samuti kontroll- ja töötlemata haavades.

Uuring II: Naha seisundi paranemise in vivo määramine

Pärast 12-nädalast ravi bakuchiooli sisaldava preparaadiga (t1) hindasid katsealused (n=34) oma naha noorusliku välimuse erinevust algväärtuse (t0) keskmise t-ga. 1-t0 väärtus 2,57±2,14. Võrreldes sõidukiga töödeldud koha t1-t0 väärtusega (2,06±1,89), hinnati bakuchiooliga töödeldud ala nooruslikkust oluliselt paranenud (p=0.0275). ). Mõlemat ravi hinnati algtasemest oluliselt paremaks (p=0.0000).

In vivo uuringud: talutavus

Tulemused näitasid, et bakuchiooli sisaldav preparaat oli mõlemas in vivo uuringus hästi talutav. Kogu kasutusaja jooksul täheldati üht kõrvaltoimet nahale, mis dokumenteeriti nii bakuchiooli sisaldava preparaadi kui ka vehiikuli puhul. Pärast ravi retinooli sisaldavate preparaatidega uuringus I teatas 23 protsenti kogu 52-st isikust koosnevast paneelist kokkusobimatuse reaktsioonidest, nagu erüteem, ketendus, kuivus ja sügelus, mis viis uuringust väljalangemiseni.

ARUTELU

Varasemad uuringud on näidanud, et bakuchiol toimib retinooli funktsionaalse analoogina [19–21]. Bakuchiol näib seega olevat paljulubav alternatiiv retinoolile näo vananemisvastases ravis. Kuna rakkude vananemine on mitmefaktoriline, uurisime bakuchiooli mõju võrreldes retinooliga erinevatele võtmeprotsessidele, et analüüsida selle potentsiaali tervikliku ravi lähenemisviisi jaoks.

Nagu on kujutatud (tabelis S1), määrasime bakuchiooli ja retinooli (i) antioksüdatiivse ja (ii) põletikuvastase toime. Lisaks analüüsisime, kuidas need mõjutavad (iii) rakkude aktiveerimist, (iv) ECM-komponentide moodustumist ja (v) naha taastumist. Uurimise käigus tegime kindlaks, et bakuchiolil on retinooliga funktsionaalsed sarnasused ja samal ajal on sellel ainulaadsed kasulikud omadused (joonis 5).

Meie andmed näitasid, et bakuchioolil, kuid mitte retinoolil, oli kõrge (i) antioksüdatiivne võime ja võimsus. Need andmed on kooskõlas varasemate uuringutega, mis näitavad, et bakuchiol vähendab oksüdatiivset stressi, hoiab ära mitokondriaalse lipiidide peroksüdatsiooni ja kaitseb mitokondriaalset funktsiooni [22, 24, 38]. Siiski ei ole teatatud, et retinool avaldaks antioksüdatiivset toimet.

Kuna ROS-i indutseerimine põhjustab põletikulist stressi, uurisime bakuchiooli ja retinooli mõju kahe (ii) põletikueelse tsütokiini PGE2 ja MIF ekspressioonile.

Esmalt analüüsisime PGE2, mis on inimese nahas tekkiv peamine prostaglandiin. PGE2 vähendab kollageeni tootmist ja indutseerib maatriksi metalloproteinaas 1 (MMP-1) ekspressiooni fibroblastides in vitro [39]. Need PGE{5}}vahendatud protsessid on naha vananemismehhanismid [39]. Seega võib PGE2 sihtimine olla paljutõotav strateegia vanusega seotud kollageeni ammendumise vastu võitlemiseks [40]. Tavaliselt sünteesitakse väikeses koguses PGE2. Kuid naha vananemise korral on fibroblastidel kõrgenenud PGE2 tase [40, 41]. Siin näitame esimest korda, et bakuchiol ja retinool vähendavad oluliselt PGE2 taset HDF-ides annusest sõltuval viisil. Retinooli indutseeritud toime oli aga vähem väljendunud kui bakuchiooliga. Meie tulemusi toetab eelmine uuring, milles kasutati in vivo põletikumudelit, milles paikselt manustatud bakuchiol vähendas oluliselt PGE2 sisaldust arahhidoonhappest põhjustatud vastuses [42]. Sarnaselt näidati, et retinoidid pärsivad PGE2 ekspressiooni inimese suu epiteelirakkudes [43] ja inimese suu lamerakk-kartsinoomi rakkudes [44].

MIF on veel üks põletikuvastane tsütokiin, mida ekspresseeritakse kõikjal erinevates organites, sealhulgas nahas [45]. See on rakkude proliferatsiooni, angiogeneesi ja diferentseerumise jaoks ülioluline [46]. Fotovananemise kontekstis suurendab nii UVA- kui ka UVB-kiirgus keratinotsüütide ja naha fibroblastide MIF-i sekretsiooni [46, 47]. Urschitz et al. teatasid MIF mRNA 4-kordsest ülesreguleerimisest fotovananenud preaurikulaarses nahas [48]. Meie tulemused näitasid bakuchiooli ja retinooli poolt indutseeritud MIF-valgu tasemete olulist ja sarnast vähenemist HDF-ides, mis näitab põletikuvastaseid omadusi. Tõepoolest, varasemad uuringud on tõestanud, et bakuchiool avaldab põletikuvastast toimet [19, 25–27, 38]. MIF-valgu tasemete reguleerimist bakuchiooli või retinooli poolt ei ole aga veel dokumenteeritud.

Kuigi PGE2 ja MIF suurenevad naha vananemise ajal [46, 49], toimub nende reguleerimine kahe erineva signaaliraja kaudu. Seetõttu esindavad bakuchiooli ja retinooli poolt indutseeritud mõlema teguri vähenemine laialdast põletikuvastast lähenemisviisi vananemisvastases ravis.

Oksüdatiivne ja põletikuline stress seab naha taastumisvõime tõsisesse ohtu. Lisaks väheneb naha taastumine vanusega. Seetõttu uurisime bakuchiooli ja retinooli mõju naha regeneratiivsele võimele, analüüsides (iii) raku aktiivsust.

Arvatakse, et keratinotsüüdid stimuleerivad fibroblaste sünteesima kasvufaktoreid, mis omakorda stimuleerivad keratinotsüütide proliferatsiooni topeltparakriinsel viisil [50]. Kasvufaktor FGF7 on sellise mitogeeni näide [51]. Seda nimetatakse ka keratinotsüütide kasvufaktoriks -1 [51] ja see suurendab keratinotsüütide proliferatsiooni [52] ja nende koostoimet ECM-i komponentidega [53]. Meie uuring näitab, et bakuchiooliga töödeldud HDF-id näitasid oluliselt suurenenud FGF7 valgu taset. Seevastu FGF7 valgu taset vähendas retinoolravi veidi. See uudne leid näitab, et bakuchiol võib toetada naha taastumis- ja paranemisprotsesse, reguleerides otseselt keratinotsüüte ja suurendades kaudselt fibroblastide proliferatsiooni. Bakuchiol toimib seega vananemise ajal toimuva kasvufaktori taseme languse vastu [54].

Teine tegur, mis mõjutab naha regeneratiivset potentsiaali, on vanusega seotud naha fibroblastide arvu [55] ja kasvukiiruse [56] vähenemine. Kuna WST-1 metabolismi suurenemine näitab rakkude paranenud elujõulisust [57], proliferatsiooni [58] ja metaboolset aktiivsust [59], analüüsisime WST-1 metaboliseerumist pärast bakuchiooli või retinooli kasutamist. Meie tulemused viitavad sellele, et bakuchiol ja teatud määral ka retinool võivad neid rakuaktiivsusega seotud omadusi HDF-ides stimuleerida.

Kooskõlas rakuaktiivsuse vähenemisega iseloomustab vananevat nahka kollageeni ja teiste ECM-i komponentide vähenenud tootmine ning suurenenud MMP ekspressioon [60–65]. Need muutused põhjustavad ECM-i kahjustusi, häiritud nahafunktsioone ja seejärel kortsude teket. Hüpoteesisime, et bakuchiooli vahendatud suurenenud fibroblastide aktiivsus ja vähenenud PGE2 ja MIF tasemed võivad soodustada ECM-i komponente. Tõepoolest, Chaudhuri ja kaastöötajad näitasid, et bakuchiol reguleerib COL1A1 geeni- ja valgutasemeid üles [19]. Bakuchiooli ja retinooli mõju uurimiseks HDF-ide ECM-ile analüüsisime (iv) struktuursete ECM-tegurite COL1A1 ja COL7A1 ning ECM-i adhesioonifaktori FN valgu ekspressiooni.

COL1A1 on nahas kõige rikkalikum struktuurvalk [66]. Kuid vananenud fibroblastidel on kollageeni sünteesivõime vähenenud [67]. COL7A1 moodustab dermo-epidermaalsetes ühendustes ankurdusfibrillid ja suurendab naha mehaanilist stabiilsust [68]. Fotovananemise ajal väheneb COL7A1 tase, mis põhjustab dermise ja epidermise vahelise sideme nõrgenemise [69–71].

Meie andmed näitavad, et bakuchiol ja retinool suurendavad COL1A1 taset, kinnitades varasemaid tähelepanekuid. Eelmine uuring näitas, et bakuchiol suurendab oluliselt COL1 mRNA ekspressioonitaset ja vähendab oluliselt MMP-1 mRNA taset [72]. Näidati, et COL1A1 geeni ekspressioon suurenes in vivo pärast 4-nädalast ravi 0,1 protsenti retinooliga [73]. 0,4-protsendilise retinooli paikne manustamine suurendas in vivo märkimisväärselt ka COL1A1 valgu ekspressiooni ECM-is vananenud inimese nahas [74]. Kuid meie andmed selgitavad, et HDF-ides suureneb COL1A1 ja COL7A1 valgu ekspressioon juba 4 tundi pärast bakuchiooli ja retinooliga stimuleerimist. Lisaks näitame, et COL7A1 valgu ekspressioon püsib vähemalt 72 tundi.

Teine uuritud tegur oli üldlevinud ECM-i adhesioonivalk FN, mida leiti kahes isovormis, nimelt plasmas ja rakulises FN-is. Sellel on oluline roll arenguprotsessides, rakkude adhesioonis, migratsioonis ja diferentseerumises [75, 76]. Rakuline FN genereeritakse ja monteeritakse fibrillvõrkudeks, mõjutades ECM-i homöostaasi ja ECM-rakkude interaktsioone [77]. Krooniline UV-kiirgus viib FN geeni ekspressiooni allareguleerimiseni inimese naha biopsiates [78]. Meie andmed näitasid rakulise FN-valgu ekspressiooni olulist ülesreguleerimist HDF-ides pärast bakuchiooli ja retinooliga stimuleerimist. Eelmine in vivo uuring näitab, et paikne ravi 0,4-protsendilise retinooliga suurendab oluliselt FN-valgu taset vananenud inimese naha ECM-is [74]. Siiski ei ole veel teatatud, et bakuchiooli kasutamine võib HDF-ides esile kutsuda suurenenud FN-valgu ekspressiooni. Et analüüsida, kas need in vitro andmed muutuvad in vivo tulemusteks, määrasime ex vivo uuringus bakuchiooli ja retinooli mõju FN valgu tasemele. Pärast 4-nädalast manustamist näitasid bakuchiooliga töödeldud alad FN-valgu väärtuste olulist tõusu võrreldes kandjaga. Retinooli kasutamine suurendas ka FN-valgu taset; see mõju ei olnud aga märkimisväärne. Selle põhjuseks võivad olla retinooli poolt vahendatud kokkusobimatuse reaktsioonid, mis vähendasid testitavate isikute arvu.

ECM-i peamise komponendina mängib FN haavade paranemisel otsustavat rolli, olles oluline kudede moodustumisel ja sidekoe parandamisel. FN toimib haavade paranemise kõigis faasides ja seega interakteerub erinevate rakutüüpidega, et luua ECM [79]. FGF7 on veel üks oluline haavade paranemise tegur. Inimese ägedate haavade korral reguleeritakse FGF7 geeni ekspressiooni kiiresti üles. FGF7 paikneb enamasti haavaga külgnevates dermaalsetes fibroblastides ja granulatsioonikoe fibroblastides [52]. Haavade paranemisprotsess aeglustub vananemisega [80]. Selle põhjuseks on kahjustatud rakkude proliferatsioon ja fibroblastide ja keratinotsüütide migratsioon, vähenenud reaktsioon kasvufaktoritele ja ECM-i komponentide sünteesi vähenemine [80]. Need tähelepanekud on korrelatsioonis naha vananemise ajal toimuvate üldiste muutustega [81]. Pärast esteetilisi protseduure, nagu Fraxeli laserravi, käivitab mikrohaavad mikroskoopilised haavaparanemisprotsessid, mille tulemuseks on paranenud naha struktuur ja noorendamine [82]. Seetõttu võib vananemisvastaste ühendite võime stimuleerida regeneratiivseid protsesse viidata nende naha noorendamise potentsiaalile. Arvestades FN ja FGF7 osalemist haavade paranemises ja nende tegurite bakuchiooli poolt indutseeritud ülesreguleerimist in vitro, määrasime järgmiseks bakuchiooli ja retinooli mõju (v) epiteeli regeneratsioonile. Seetõttu rakendati in vitro haavade paranemise mudelit [34]. Bakuchiooliga töödeldud haavade regenereeritud epidermise pikkus suurenes oluliselt, samas kui retinoolil ei olnud mingit mõju. Need andmed peegeldavad võrreldes retinooliga bakuchiooli tugevamat in vitro mõju haava paranemisega seotud parameetritele FGF7, FN ja raku metaboolsele aktiivsusele.

Et teha kindlaks, kas bakuchiol lisaks oma positiivsetele toimetele parandab ka tajutavat naha välimust, viidi läbi teine ​​isehindamispõhine in vivo uuring. Uuringus osalejad hindasid oma näonaha nooruslikkust. Võrreldes algtaseme isesorteerimisega t0, parandas 12-nädalane ravi nii kandja kui ka bakuchiooli sisaldava preparaadiga märgatavalt naha väljanägemist. Sõiduk valiti nii, et see oleks võimalikult vähe toitev. Siiski ei saa välistada enesehinnangu teatavat paranemist, eriti mõõtmisel t0 pärast 3-päevast nahahooldustoodete mittekasutamist. Sellegipoolest suurenes pärast bakuchiooli sisaldava preparaadi kasutamist naha noorusliku välimuse subjektiivne hinnang märkimisväärselt, võrreldes vastava kandja t1-t0 väärtustega.

Meie in vivo uuringutes oli bakuchiol hea nahaga sobivus. See on kooskõlas varasema uuringuga, mis näitas, et bakuchioli sisaldav niisutaja oli tundliku nahaga isikutel hästi talutav [18]. Seevastu uuringus läbi viidud retinooli kasutamine põhjustas mitmel vabatahtlikul nahaärritusi. On hästi dokumenteeritud, et retinool võib esile kutsuda mitmesuguseid nahaprobleeme, sealhulgas erüteemi, sügelust, ketendust või papuleid [6, 14]. Lisaks seostatakse retinoide fotosensibiliseerimisega ja lagunevad kokkupuutel õhu või valgusega bioloogiliselt inaktiivseteks aineteks [11]. Seega sõltub retinooli efektiivsus vananemisvastases ravis tugevalt selle manustamisviisist. Bakuchiol seevastu on fotostabiilne ja seda saab kasutada iga päev. Bakuchiooli fotostabiliseeriv toime retinoolile, nagu on näidanud Chaudhuri et al. [83], annab paljutõotava põhjenduse mõlema ühendi kombineerimiseks.

Meie tulemused laiendavad teaduslikke teadmisi bakuchiooli kohta ja parandavad meie arusaamist retinooli mõjust nahale. Joonis 5 võtab kokku Bakuchioli kavandatud tegevused. Lisaks annavad meie andmed tõendeid bakuchiooli mitmesuunalise efektiivsuse kohta mitmete naha vananemise rakuliste tunnuste vastu, ületades taimse päritoluga funktsionaalsete retinoidi analoogide mõju.

KOKKUVÕTE

Ravi bakuchiooliga pakub täiustatud, terviklikku ja mitmesuunalist lähenemist naha vananemise ravile, kuna see toimib (i) antioksüdatiivselt, (ii) põletikuvastaselt, mõjutab (iii) rakkude aktiivsust, suurendab kriitiliste (iv) ECM komponentide ekspressiooni ja parandab v) epidermise regenereerimine ja uuesti epiteliseerimine.

TUNNUSTUS

Autorid tänavad dr Silke Gallinat toetuse eest käsikirja ettevalmistamisel.

HUVIDE KONFLIKT

Anika Bluemke, Annika P. Ring, Jeannine Immeyer, Anke Hoff, Tanya Eisenberg, Wolfram Gerwat, Franziska Meyer, SabrinaBreitkreutz, LinaM. Klinger, FrankRippke ja Dorothea Schweiger on Beiersdorf AG töötajad. Grit Sandig ja Marietta Seifert on ettevõtte Gematria Test Lab GmbH töötajad. Doerte Segger on SGS Institute Fresenius GmbH töötaja. Ükski autoritest ei märgi huvide konflikti.

VIITED

1. Zouboulis CC, Makrantonaki E, Nikolakis G. Kui nahk on huvide keskpunktis: vananemisprobleem. Clin Dermatol. 2019;37(4):296–305.

2. Silva SAME, Michniak-Kohn B, Leonardi GR. Ülevaade oksüdatsioonist naha vananemise kliinilises praktikas. Rinnahoidja Dermatol. 2017;92:367–74.

3. Kligman LH, Duo CH, Kligman AM. Paikselt manustatav retinoehape soodustab ultraviolettkiirguse poolt kahjustatud naha sidekoe paranemist. Ühendage Tissue Res. 1984;12:139–50.

4. Shin JW, Kwon SH, Choi JY, Na JI, Huh CH, Choi HR jt. Naha vananemise molekulaarsed mehhanismid ja vananemisvastased lähenemisviisid. Int J Mol Sci. 2019;20:E2126.

5. Kim HJ, Bogdan NJ, D'Agostaro LJ, Gold LI, Bryce GF. Paiksete retinoehapete mõju kollageeni mRNA tasemele UVB-indutseeritud nahakahjustuste parandamisel karvututel hiirtel ja TGF-beeta võimalik roll vahendajana. J Invest Dermatol. 1992;98:359–63.

6. Kang S, Duell EA, Fisher GJ, Datta SC, Wang ZQ, Reddy AP jt. Retinooli manustamine inimese nahale in vivo kutsub esile epidermise hüperplaasia ja retinoehappele iseloomulikud rakulised retinoidid siduvad valgud, kuid ilma mõõdetava retinoehappe taseme või ärrituseta. J Invest Dermatol. 1995;105:549–56.

7. Bailly J, Crettaz M, Schifflers MH, Marty JP. In vitro metabolism inimese naha ja retinooli, võrkkesta ja retinoehappe fibroblastide poolt. Exp Dermatol. 1998;7:27–34.

8. Varani J, Warner RL, Gharaee-Kermani M, Phan SH, Kang S, Chung JH jt. A-vitamiin pärsib rakkude kasvu vähenemist ja kollageeni lagundava maatriksi metalloproteinaaside aktiivsuse suurenemist ning stimuleerib kollageeni akumuleerumist looduslikult vananenud inimese nahas. J Invest Dermatol. 2000;114:480–6.

9. Kang S. Paiksete retinoidide toimemehhanism. Cutis. 2005;75:10–3; arutelu 13.

10. Bellemère G, Stamatas GN, Bruère V, Bertin C, Issachar N, Oddos T. Retinooli vananemisvastane toime: molekulaarsest kliiniliseni. Skin Pharmacol Physiol. 2009;22:200–9.

11. Mukherjee S, Date A, Patravale V, Korting HC, Roeder A, Weindl G. Retinoidid naha vananemise ravis: ülevaade kliinilisest efektiivsusest ja ohutusest. Clin Interv Aging. 2006;1:327–48.

12. Ortonne JP.Pigmendihäirete retinoidravi. Dermatol Ther. 2006;19:280–8.

13. Griffiths CE, Kang S, Ellis CN jt. Paikselt manustatava tretinoiini (retinoehappe) kaks kontsentratsiooni põhjustavad fotovananemise samalaadset paranemist, kuid erineval määral ärritust. Topeltpime, sõidukiga kontrollitud 0,1 protsendi ja 0,025 protsendi tretinoiinikreemide võrdlus. Arch Dermatol. 1995;131(9):1037–44.

14. Fluhr JW, Vienne MP, Lauze C, Dupuy P, Gehring W, Gloor M. Retinooli, retinaldehüüdi ja retinoehappe taluvusprofiil maksimeeritud ja pikaajalistes kliinilistes tingimustes. Dermatoloogia. 1999;199 (lisa 1):57–60.

15. Rolewski SL. Kliiniline ülevaade: paiksed retinoidid. Dermatol Nurs. 2003; 15 (447–450): 459–65.

16. Uikey SK, Yadav AS, Sharma AK jt. Psoralea corylifolia L. botaanika, keemia, farmakoloogiline ja terapeutiline rakendus – ülevaade. Praktikant J Phytomed. 2010;2:100–7.

17. Shrestha S, Jadav HR, Bedarkar P, Patgiri BJ, Harisha CR, Chaudhari SY jt. Psoralea corylifolia Linn farmakognostiline hindamine. Seeme. J Ayurveda Integr Med. 2018;9:209–12.

18. Draelos ZD, Gunt H, Zeichner J, Levy S. Looduspõhise bakuchioli vananemisvastase niisutaja kliiniline hinnang tundlikule nahale. J Narkootikumid Dermatol. 2020;19:1181–3.

19. Chaudhuri RK, Bojanowski K. Bakuchiol: retinoolitaoline funktsionaalne ühend, mis ilmnes geeniekspressiooni profiilide põhjal ja millel on kliiniliselt tõestatud vananemisvastane toime. Int J Cosmet Sci. 2014;36:221–30.

20. Dhaliwal S, Rybak I, Ellis SR, Notay M, Trivedi M, Burney W jt. Prospektiivne, randomiseeritud, topeltpime paikse bakuchiooli ja retinooli hindamine näo fotovananemiseks. BrJ Dermatol. 2019;180(2):289–96.

21. Sadgrove NJ, Olong JE, Simmonds MSJ. Inspireeritud vananemisvastasest A-vitamiinist: taimse päritoluga funktsionaalsete retinoidide analoogide otsimine. Naha tervis Dis. 2021;1:e36.

22. Haraguchi H, Inoue J, Tamura Y, Mizutani K. Mitokondriaalse lipiidide peroksüdatsiooni pärssimine bakuchiooliga, Psoralea corylifolia meroterpeeniga. Planta Med. 2000;66:569–71.

23. Haraguchi H, Inoue J, Tamura Y, Mizutani K. Psoralea corylifolia (Leguminosae) antioksüdatiivsed komponendid. Phytother Res. 2002;16:539–44.

24. Adhikari S, Joshi R, Patro BS, Ghanty TK, Chintalwar GJ, Sharma A jt. Bakuchiooli antioksüdantne aktiivsus: eksperimentaalsed tõendid ja teoreetilised ravimeetodid terpenoidahela võimaliku kaasamise kohta. Chem Res Toxicol. 2003;16:1062–9.

25. Backhouse CN, Delporte CL, Negrete RE jt. Psoralea glandulosa L.-st eraldatud aktiivsed koostisained, millel on põletikuvastane ja palavikuvastane toime. J Etnopharmacol. 2001;78:27–31.

26. Pae HO, Cho H, Oh GS, Kim NY, Song EK, Kim YC jt. Psoralea corylifolia bakuchiol pärsib indutseeritava lämmastikoksiidi süntaasi geeni ekspressiooni tuuma transkriptsioonifaktori-kappaB inaktiveerimise kaudu RAW 264.7 makrofaagides. Int Immunopharmacol. 2001;1:1849–55.

27. Matsuda H, Kiyohara S, Sugimoto S, Ando S, Nakamura S, Yoshikawa M. Hiina looduslike ravimite bioaktiivsed koostisosad. XXXIII. Psoralea corylifolia seemnetest pärinevad inhibiitorid lämmastikoksiidi tootmisel lipopolüsahhariidiga aktiveeritud makrofaagides. Biol Pharm Bull. 2009;32:147–9.

28. Katsura H, Tsukiyama RI, Suzuki A, Kobayashi M. Bakuchioli in vitro antimikroobne toime suukaudsete mikroorganismide vastu. Antimikroobsed ained, keemiaravi. 2001;45:3009–13.

29. Chen Z, Jin K, Gao L, Lou G, Jin Y, Yu Y jt. Resveratrooli analoogi bakuchiooli kasvajavastane toime inimese kopsu adenokartsinoomi A549 rakuliinile. Eur J Pharmacol. 2010;643:170–9.

30. Kim JE, Kim JH, Lee Y, Yang H, Heo YS, Bode AM jt. Bakuchiol pärsib nahavähirakkude proliferatsiooni, suunates otseselt Hck, blk ja p38 MAP kinaasi. Oncotarget. 2016;7:14616–27.

31. Spierings NMK. Kosmeetikakommentaar: kas bakuchiol on uus "nahahoolduskangelane". J Cosmet Dermatol. 2020;19:3208–9.

32. Jung K, RichterJ, Kabrodt K, Lucke IM, Schellenberg I, Herrling T. Antioksüdatiivne jõud AP – uus kvantitatiivne ajast sõltuv (2D) parameeter erinevate taimede antioksüdantse võimekuse ja reaktsioonivõime määramiseks. Spectrochim. Acta A Mol. Biomol. Spectrosc. 2006;63:846–850.

33. Roggenkamp D, Falkner S, Stäb F, Petersen M, Schmelz M, Neufang G. Atoopilised keratinotsüüdid kutsuvad esile suurenenud neuriitide väljakasvu sigade seljajuure ganglioni neuronite ja inimese naharakkude kokultuurmudelis. J Invest Dermatol. 2012;132:1892–1900.

34. Brandner JM, Houdek P, Quitschau T jt. Ex-vivo mudel haavade paranemise sidemete ja ravimite hindamiseks. EWMA J. 2006;6:11–15.

35. Bernauer, U., Bodin, L., Celleno, L. et al. Tarbijaohutuse teaduskomitee SCCS ARVAMUS A-vitamiini (retinool, retinüülatsetaat, retinüülpalmitaat) KOHTA. HAL-01493552 (2016).

36. Kiistala U. Imev blisterseade elujõulise epidermise eraldamiseks pärisnahast. J Invest Dermatol. 1968;50:129–37.

37. Südel KM, Venzke K, Knußmann-Hartig E, Moll I, Stäb F, Wenck H jt. Maatriksi metalloproteinaasi-1 aktiivsuse range kontroll inimese nahas. Photochem Photobiol. 2003;78:840–5.

38. Xin Z, Wu X, Ji T, Xu B, Han Y, Sun M jt. Bakuchiol: äsja avastatud sõdalane elundikahjustuste vastu. Pharmacol Res. 2019;141:208–13.

39. Shim JH. Prostaglandiin E2 indutseerib naha vananemist E-Prostanoid 1 kaudu normaalsetes inimese dermaalsetes fibroblastides. Int J Mol Sci. 2019;20:E5555.

40. Li Y, Lei D, Swindell WR, Xia W, Weng S, Fu J jt. Naha fibroblastidest pärineva prostaglandiini E2 vanusega seotud suurenemine aitab kaasa kollageeni taseme langusele eakate inimeste nahas. J Invest Dermatol. 2015;135:2181–8.

41. Liu X, Wu H, Byrne M, Jeffrey J, Krane S, Jaenisch RA. Sihitud mutatsioon teadaolevas kollagenaasi lõhustamiskohas hiire I tüüpi kollageenis kahjustab kudede remodelleerumist. J Cell Biol. 1995;130:227–37.

42. Ferrándiz ML, Gil B, Sanz MJ, Ubeda A, Erazo S, González E jt. Bakuchiooli mõju leukotsüütide funktsioonidele ja mõnele põletikulisele reaktsioonile hiirtel. J Pharm Pharmacol. 1996;48:975–80.

43. Mestre JR, Subbaramaiah K, Sacks PG, Schantz SP, Tanabe T, Inoue H jt. Retinoidid pärsivad epidermise kasvufaktori poolt indutseeritud tsüklooksügenaasi-2 transkriptsiooni inimese suuõõne lamerakk-kartsinoomi rakkudes. Cancer Res. 1997;57:2890–5.

44. Mestre JR, Subbaramaiah K, Sacks PG, Schantz SP, Tanabe T, Inoue H jt. Retinoidid pärsivad forboolestri poolt vahendatud tsüklooksügenaasi -2 induktsiooni. Cancer Res. 1997;57:1081–5.

45. Calandra T, Roger T. Makrofaagide migratsiooni inhibeeriv tegur: kaasasündinud immuunsuse regulaator. Nat Rev Immunol. 2003; 3:791–800.

46. ​​Shimizu T. Makrofaagide migratsiooni inhibeeriva faktori (MIF) roll nahas. J Dermatol Sci. 2005;37:65–73.

47. Watanabe H, Shimizu T, Nishihira J, Abe R, Nakayama T, Taniguchi M jt. Ultraviolett A-indutseeritud maatriksi metalloproteinaasi -1 tootmist vahendab makrofaagide migratsiooni inhibeeriv faktor (MIF) inimese naha fibroblastides. J Biol Chem. 2004;279:1676–83.

48. Urschitz J, Iobst S, Urban Z jt. Päikesekahjustusega inimese naha geeniekspressiooni seeriaanalüüs. J Invest Dermatol. 2002;119:3–13.

49. Fuller B. PGE-2 ja teiste põletikuliste vahendajate roll naha vananemisel ja nende pärssimine paiksete looduslike põletikuvastaste ravimitega. Kosmeetika. 2019;6(1):6.

50. Werner S, Krieg T, Smola H. Keratinotsüütide-fibroblastide interaktsioonid haavade paranemisel. J Invest Dermatol. 2007;127:998–1008.

51. Rubin JS, Osada H, Finch PW, Taylor WG, Rudikoff S, Aaronson SA. Äsja tuvastatud epiteelirakkudele spetsiifilise kasvufaktori puhastamine ja iseloomustamine. Proc Natl Acad Sci US A. 1989; 86:802–6.

52. Marchese C, Rubin J, Ron D jt. Inimese keratinotsüütide kasvufaktori aktiivsus inimese keratinotsüütide proliferatsioonil ja diferentseerumisel: diferentseerumisvastus eristab KGF-i EGF-i perekonnast. J Cell Physiol. 1990;144:326–32.

53. Putnins EE, Firth JD, Lohachitranont A, Uitto VJ, Larjava H. Keratinotsüütide kasvufaktor (KGF) soodustab keratinotsüütide rakkude kinnitumist ja migratsiooni kollageenil ja fibronektiinil. Cell Adhes Commun. 1999;7:211–21.

54. de Araújo R, Lôbo M, Trindade K, Silva DF, Pereira N. Fibroblasti kasvufaktorid: naha vananemise kontrollimehhanism. Skin Pharmacol Physiol. 2019;32(5):275–82.

55. Gunin AG, Kornilova NK, Petrov VV, Vasiljeva OV. Vanusega seotud muutused fibroblastide arvus ja proliferatsioonis inimese nahas. Adv Gerontol. 2011;24:43–7.

56. Lago JC, Puzzi MB. Vananemise mõju inimese primaarsetele naha fibroblastidele. PLoS One. 2019;14:e0219165.

57. Yin LM, Wei Y, Wang Y, Xu YD, Yang YQ. WST-1 reaktiivi pikaajalised ja standardsed inkubatsioonid peegeldavad sama inhibeerivat suundumust rakkude elujõulisuses roti hingamisteede silelihasrakkudes. Int J Med Sci. 2013;10:68–72.

58. Carlson MA. Tehniline märkus: rakkude hulga analüüs fibroblastidega asustatud kollageenimaatriksis tetrasooliumreagendiga. Eur Cell Mater. 2006;12:44–8.

59. Stapelfeldt K, Ehrke E, Steinmeier J, Rastedt W, Dringen R. Menadione-mediated WST1 reduktsioonianalüüs kultiveeritud närvirakkude metaboolse aktiivsuse määramiseks. Anal Biochem. 2017;538:42–52.

60. Shuster S, Black MM, McVitie E. Vanuse ja soo mõju naha paksusele, naha kollageenile ja tihedusele. Br J Dermatol. 1975;93:639–43.

61. Branchet MC, Boisnic S, Frances C, Lesty C, Robert L. Dermaalsete kollageenikiudude morfomeetriline analüüs normaalses inimese nahas vanuse funktsioonina. Arch Gerontol Geriatr. 1991;13:1–14.

62. Schwartz E, Cruickshank FA, Christensen CC, Perlish JS, Lebwohl M. Kollageeni muutused krooniliselt päikese poolt kahjustatud inimese nahas. Photochem Photobiol. 1993;58:841–4.

63. Castelo-Branco C, Duran M, González-Merlo J. Vanuse ja hormoonasendusraviga seotud naha kollageeni muutused. Maturitas. 1992;15:113–9.

64. Kligman LH, Schwartz E, Sapadin AN, Kligman AM. Kollageeni kadu fotovananenud inimese nahas on histokeemia ülehinnatud. Photodermatol Photoimmunol Photomed. 2000;16:224–8.

65. El-Domyati M, Attia S, Saleh F jt. Sisemine vananemine vs. fotovananemine: naha võrdlev histopatoloogiline, immunohistokeemiline ja ultrastruktuurne uuring. Exp Dermatol. 2002;11:398–405.

66. Uitto J, Pulkkinen L, Chu ML. Kollageen. In: Fitzpatrick TB, Eisen AZ, Wolff K, Freedberg IM, Austen KF, toimetajad. Dermatoloogia üldmeditsiinis. New York: McGraw-Hill; 2003. lk. 165–79.

67. Varani J, Dame MK, Rittie L, Fligiel SEG, Kang S, Fisher GJ jt. Kollageeni tootmise vähenemine kronoloogiliselt vananenud nahas: vanusest sõltuvate muutuste roll fibroblastide funktsioonis ja defektne mehaaniline stimulatsioon. Olen J Pathol. 2006;168:1861–8.

68. Burgeson RE. VII tüüpi kollageen, ankurdusfibrillid ja bullosa epidermolüüs. J Invest Dermatol. 1993;101:252–5.

69. Craven NM, Watson RE, Jones CJ, Shuttleworth CA, Kielty CM, Griffiths CE. Fotokahjustatud inimese naha kliinilised tunnused on seotud kollageeni VII vähenemisega. Br J Dermatol. 1997;137:344–50.

70. Contet-Audonneau JL, Jeanmaire C, Pauly G. Inimese kortsude struktuuride histoloogiline uuring: päikese käes olevate kortsudeta või kortsudeta näopiirkondade ja kaitsmata piirkondade võrdlus. Br J Dermatol. 1999;140:1038–47.

71. El-Domyati M, Medhat W, Abdel-Wahab HM, Moftah NH, Nasif GA, Hosam W. Otsaesise kortsud: histoloogiline ja immunohistokeemiline hinnang. J Cosmet Dermatol. 2014;13:188–94.

72. Yu Q, Zou HM, Wang S, Xu YM, Li JM, Zhang N. Bakuchiooli reguleeriv toime ESF-1 rakkude vananemisvastasele geenile. Zhong Yao Cai. 2014;37:632–5.

73. Kong R, Cui Y, Fisher GJ, Wang X, Chen Y, Schneider LM jt. Võrdlev uuring retinooli ja retinoehappe mõju kohta inimese naha histoloogilistele, molekulaarsetele ja kliinilistele omadustele. J Cosmet Dermatol. 2016;15:49–57.

74. Shao Y, He T, Fisher GJ, Voorhees JJ, Quan T. Retinooli vananemisvastaste omaduste molekulaarne alus looduslikult vananenud inimese nahas in vivo. Int J Cosmet Sci. 2017;39:56–65.

75. Schwarzbauer JE, DeSimone DW. Fibronektiinid, nende fibrillogenees ja in vivo funktsioonid. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2011;3:a005041.

76. Sawicka KM, Seeliger M, Musaev T, Macri LK, Clark RA. Fibronektiini koostoime ja kasvufaktorite tugevdamine: tähtsus haavade paranemisel. Adv haavahooldus (New Rochelle). 2015;4:469–78.

77. WS-ile, Midwood KS. Plasma ja rakuline fibronektiin: erinevad ja sõltumatud funktsioonid kudede parandamise ajal. Fibrogeneesi kudede parandamine. 2011; 4:21.

78. Knott A, Drenckhan A, Reuschlein K jt. Vähenenud fibroblastide kontraktiilne aktiivsus ja vähenenud fibronektiini ekspressioon on seotud naha fotovananemisega. J Dermatol Sci. 2010;58:75–7.

79. Lenselink EA. Fibronektiini roll normaalses haavade paranemises. Int Wound J. 2015;12:313–6.

80. Sgonc R, Gruber J. Nahahaavade paranemise vanusega seotud aspektid: miniülevaade. Gerontoloogia. 2013;59:159–64.

81. Farage MA, Miller KW, Elsner P, Maibach HI. Vananeva naha omadused. Adv haavahooldus (New Rochelle). 2013;2:5–10.

82. Degitz K. Nichtablative fraktionierte Lasertherapie: Aknenarben und weitere Indikationen [mitteablatiivsed fraktsionaalsed laserid: aknearmid ja muud näidustused]. Hautarzt. 2015;66:753–6.

83. Chaudhuri RK, Ou B. Bakuchiol retinooli ja polüküllastumata lipiidide stabiliseerimiseks. Kosmeetikatööstus. 2015;130:64–75.

TOETAV TEAVE

Täiendavat toetavat teavet leiate artikli veebiversioonist väljaandja veebisaidil.

【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】