Cistanche-põhise Xian Fang Huo Ming joogi mehhanismi uurimine PI3K/Akt/NF-κB signaaliraja reguleerimisel kroonilise prostatiidi/kroonilise vaagnavalu sündroomi ravis võrgufarmakoloogia ja loomkatsete põhjal

 

Abstraktne

Eesmärk:Uurida Cistanche-põhise Xian Fang Huo Ming joogi (XFHY) toimemehhanismi kroonilise prostatiidi/kroonilise vaagnavalu sündroomi (CP/CPPS) ravis võrgufarmakoloogia, molekulaarse dokkimise ja eksperimentaalse valideerimise kaudu loommudelites.

Meetodid:XFHY toimeained ja vastavad sihtmärgid saadi TCMSP ja SwissTargetPrediction andmebaasidest. CP/CPPS-iga seotud sihtmärgid koguti OMIM-ist, GeneCardsist ja DisGeNETist. Peamised terapeutilised sihtmärgid tuvastati PPI võrgu ehitamise ja topoloogilise analüüsi abil. GO ja KEGG rikastamise analüüsiks kasutati DAVID andmebaasi. Molekulaarne dokkimine viidi läbi kasutades AutoDocki ja visualiseerimine, mis genereeriti GraphPad Prism 8 abil. In vivo CP/CPPS rottide eesnäärme vigastust ja põletikulist infiltratsiooni hinnati 3% λ-karrageeniga indutseeritud hematoksüliin-eosiini (HE) värvimise abil. ELISA-t kasutati TNF-, IL-1 ja COX-2 ekspressiooni tuvastamiseks. PI3K, Akt ja NF-κB p65 mRNA ja valgu ekspressiooni hindamiseks eesnäärmekoes kasutati reaalajas PCR-i ja Western blot analüüsi.

Tulemused:HE värvimine ei näidanud võltsrühmas olulist põletikku, samas kui mudelrühmas ilmnes põletikuliste rakkude infiltratsioon. ELISA tulemused näitasid mudelirühmas oluliselt kõrgenenud TNF-, IL-1 ja COX-2 taset (P<0.01), confirming successful modeling. XFHY significantly reduced these markers in a dose-dependent manner. PCR showed that low, medium, and high doses of XFHY downregulated PI3K, Akt, and NF-κB p65 mRNA expression. Western blot confirmed that XFHY inhibited phosphorylation of PI3K, Akt (Ser473 and Thr308), and NF-κB p65.

Järeldus:XFHY võib leevendada CP/CPPS-i, inhibeerides PI3K/Akt/NF-κB rada ja vähendades põletikku. NF-κB aktiveerimine võib olla seotud Akt fosforüülimisega Ser473 ja Thr308 juures.

Märksõnad:Võrgufarmakoloogia; Molekulaarne dokkimine;Cistanche; Xian Fang Huo Mingi jook;Krooniline prostatiit/Krooniline vaagnavalu sündroom; PI3K/Akt/NF-κB

 

 

 

 

 

TCM Cistanche ekstrakti lisand raviksKrooniline prostatiit

Võtke meiega ühendust osta kohe

 

 

1. Sissejuhatus

Prostatiit on uroloogias üks levinumaid haigusi. NIH klassifikatsiooni järgi jaguneb see nelja tüüpi: I tüüp (äge bakteriaalne prostatiit), II tüüp (krooniline bakteriaalne prostatiit), III tüüp (krooniline prostatiit/krooniline vaagnavalu sündroom, CP/CPPS) ja IV tüüp (asümptomaatiline prostatiit). Nende hulgas on kõige levinum III tüüp, mida iseloomustavad vaagna- ja perineaalvalu, alumiste kuseteede sümptomid, psühholoogilised häired ja seksuaalfunktsiooni häired, mis mõjutavad tõsiselt meeste tervist ja elukvaliteeti.

Tcm Cistanche ekstrakti toidulisandi eelised

 

CP/CPPS etioloogia ja patogenees jäävad ebaselgeks ning võivad hõlmata põletikku, immuunfunktsiooni häireid ja neuroendokriinseid häireid. Nende hulgas peetakse põletikku haiguse progresseerumise peamiseks teguriks. Praegused ravimeetodid keskenduvad sümptomite leevendamisele, kasutades blokaatoreid, MSPVA-sid, antidepressante ja anksiolüütikume. Kuid sümptomite keerukuse ja kroonilisuse tõttu ei suuda lääne meditsiin üksi sageli pakkuda rahuldavaid tulemusi.

Hiljutine ekspertide konsensus viitab sellele, et traditsioonilisel hiina meditsiinil (TCM) on unikaalsed eelised CP/CPPS-i ravis, eriti seal, kus lääne meditsiin jääb alla. Kuigi iidsetes TCM-i tekstides CP/CPPS-i selgesõnaliselt ei mainita, klassifitseeritakse see tavaliselt selliste terminite alla nagu "jing zhuo", "lao lin" ja "yin valu", mille patogeensed mehhanismid hõlmavad niiskust, toksiinide stagnatsiooni ja vere staasi. Seetõttu keskendub ravi kuumuse puhastamisele, niiskuse ärajuhtimisele, vereringe soodustamisele ja meridiaanide lõdvestamisele.

Jook Xian Fang Huo Mingi (XFHY)pärineb"Parandatud traktaat naiste retseptide kohta", mida peetakse klassikaliseks vahendiks abstsesside ja põletike vastu. See puhastab kuumust ja toksiine, kosutab verd ja lahustab sõlmekesed. Siin kasutatud muudetud valemisCistancheasendab teisi traditsioonilisi monarhi ürte, toimides neeru yangi toniseerimiseks, vereringe parandamiseks ja põletike vähendamiseks. Valem sisaldab ka ingelikasaba, punase pojengi juuri, viirukit, mürri, mandariinikoort ja muid sünergistliku toimega ürte, mis eemaldavad soojust, vähendavad turset ja eemaldavad mäda.

Professor Chen Shenghui on aastatepikkuse kliinilise praktika põhjal rakendanud XFHY-d CP/CPPS-i raviks, mida iseloomustab niiske kuumus ja vere staas. Kliinilised tulemused näitavad, et XFHY võib leevendada valu ja kuseteede sümptomeid, suurendades samal ajal põletikuvastase tsütokiini IL-10 sisaldust eesnäärme vedelikus, vähendades seeläbi põletikku.

Selle uuringu eesmärk on täiendavalt uurida XFHY mehhanisme CP / CPPS-i kasutamise vastuvõrgufarmakoloogiajaloomkatsed, mis annab teoreetilise aluse selle kliiniliseks rakendamiseks.

Tcm Cistanche ekstrakti toidulisand

2. Materjalid

2.1 Loomad

Kokku osteti ettevõttelt Jiangxi Qianchong Scientific Instruments Co., Ltd. (litsentsi nr SCXK(Zhe)2024-0001) 70 spetsiifilist patogeenivaba (SPF) isast Sprague-Dawley (SD) rotti (6 nädalat vanad, 200–220 g). Rotte hoiti Jiangxi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli laboriloomade tehnoloogiakeskuses kontrollitud tingimustes (12-tunnine valguse/pimeduse tsükkel, niiskus 60% ± 5%, temperatuur 23 ± 1 kraadi), kus oli vaba juurdepääs toidule ja veele. Pärast ühenädalast aklimatiseerumist alustati katseid. Eetilise heakskiidu andis Jiangxi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli eetikakomitee (kinnitusnumber JZLLSC20241201).

2.2 Ravimid

Cistanche-põhine XFHY koostis (annuse kohta):

Cistanche 9 g

Fritillaaria 6 g

Saposhnikovia 6 g

Mandariinikoor 9 g

Töödeldud Pangoliini kaalud 6 g

Viiruk 6 g

Mürr 6 g

Punase pojengi juur 6 g

Trihhosantide juur 6 g

Lagritsajuur 6 g

Angelica Tail 6 g

Gleditsia okas 6 g

Angelica Dahurica 3 g

Kõik ürdid keedeti ja kontsentreeriti põhilahuseks, mis vastab 0,729 g/ml toorürtidele, seejärel lahjendati 0,3645 g/ml ja 1,458 g/ml madalate ja suurte annuste jaoks ning säilitati 4 kraadi juures.

Kõik maitsetaimed saadi Jiangxi provintsi sertifitseeritud TCM-i tarnijatelt ja nende autentsuse kinnitas Jiangxi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli sidusreproduktiivhaigla apteegi direktor Xiong Haoran.

Kontrollravim:
Tamsulosiinvesinikkloriidi toimeainet prolongeeritult vabastavad kapslid (Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals, 0,2 mg/kapsel, H20050392).

Kohalik ravim:
Mupirotsiini salv (Sino-Ameerika Tianjin Smith Kline, 15g, H10930064).

Tcm Cistanche ekstrakti toidulisand

 

2.3 Reaktiivid ja antikehad

λ-karrageen(MedChemExpress, partii HY-125474)

ELISA komplektidTNF- , IL-1 , COX-2 jaoks (Wuhan Beinlai Biotechnology, partii RA20035, RA20020, RA2008)

Antikehad: PI3K, Akt, p-Akt (Ser473), NF-κB ja p-NF-κB (Cell Signaling Technology, USA)

p-PI3K antikeha(Abmart, Shanghai, partii PC6417S)

p-Akt (Thr308)(Qinke Bio, Jiangsu)

HRP-ga konjugeeritud sekundaarsed antikehad(Three Eagles Bio, Wuhan)

qPCR ja RNA komplektid(ComWin Biotech, Jiangsu)

ECL reaktiivid(Meilunbio®, Dalian)

PVDF membraanid(Millipore, Saksamaa)

2.4 Instrumendid

Tsentrifuugid, PCR-tsüklerid, qPCR-masinad, elektroforeesisüsteemid, Western blot-aparaadid, ELISA-lugejad ja mikroskoopiaseadmed hangiti juhtivatelt teadusseadmete tootjatelt, sealhulgas Leica, Perkin Elmer, Bio-Rad ja teised (vt täielikku loendit originaalmaterjalide jaotises).