Okskarbasepiini poolt indutseeritud hüpotermia pärast mööduvat eesajuisheemiat avaldab terapeutilist neurokaitset 1. ja 4. tüüpi ajutise retseptori potentsiaali vanilloidi tüübi kaudu gerbile 3. osas

4. Materjalid ja meetodid

4.1. Katseloomad

Isaseid liivahiire (koguarv=252) kasutati 6 kuu vanuselt (kehakaal 63–78 g). Gerbiilid aretati Kangwoni riikliku ülikooli katseloomade keskuses (Chuncheon, Korea).

Gerbilid on väga armsad väikesed loomad. Nad elavad kõrbealadel, oskavad hästi koopaid kaevata ning neil on tugev instinkt toidu hoidmiseks ja asukoha määramiseks. Nende väikeste kuttide seas on isastel liivahiirtel eriti hea mälu, mis tekitab inimestes soovi teada nende saladusi.

Esiteks, kui isashiired toitu otsivad, kasutavad nad suuna määramiseks mitmeid signaale, nagu orientiirid ja maastik. Pikaajalise vaatluse ja praktikaga on nad loonud oma "geograafilise infosüsteemi". Seevastu emastel liivahiirtel on nende signaalide jaoks halvem mälu, eriti pidevalt muutuvas keskkonnas.

Teiseks näitavad isased liivahiirtel tugevat mälu looduslike vaenlastega võideldes. Teadlaste sõnul sisenevad liivahiirte ohu korral nad kiiresti urgu ja püüavad põgeneda. Kuid sama ohuga silmitsi seistes mäletavad isashiired looduslike vaenlaste ründeviisi ja väldivad neid, suurendades nende ellujäämisvõimalusi.

Lõpuks peitub isaste liivahiirte mälestus ka nende sotsiaalses käitumises üksteisega. Igal liivahiirtel on oma ainulaadne lõhn. Kui nad kohtuvad teiste liivahiirtega, kasutavad nad oma haistmismeelt, et tuvastada üksteise identiteet ja staatus. See mäluvõime ei võimalda liivahiirtel mitte ainult luua suhteliselt stabiilset sotsiaalset sidet, vaid on ka nende paljunemise oluline tagatis.

Kokkuvõtlikult võib öelda, et isaste liivahiirte ja mälu suhe on lahutamatu. Looduses ellujäämist ja paljunemist otsides toetuvad nad oma tugevale mälule, et pidevalt keskkonnaga kohaneda ja end täiendada. Inimestena peaksime nendelt väikestelt poistelt õppima ja pidevalt oma mälu lihvima, et selle pidevalt muutuva maailmaga paremini kohaneda. On näha, et me peame oma mälu parandama ja Cistanche võib oluliselt parandada mälu, kuna suudab reguleerida ka neurotransmitterite tasakaalu, näiteks tõsta atsetüülkoliini ja kasvufaktorite taset, mis on mälu ja õppimise jaoks väga olulised. Lisaks võib Cistanche parandada verevoolu ja soodustada hapniku kohaletoimetamist, mis tagab aju piisava toitumise ja energia, parandades seeläbi aju elujõudu ja vastupidavust.

Mälu võimsuse suurendamiseks klõpsake nuppu Tea

Selle uuringu jaoks kiitis katseprotokolli heaks (kinnitusnumber KW-200113-1; kinnitamise kuupäev, 18. veebruar 2020) institutsionaalse loomade hooldamise ja kasutamise komitee.

Uurimisprotokoll järgis väljaandes The National Academies Press (8. väljaanne, 2011) avaldatud laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendi „Praegused rahvusvahelised seadused ja poliitika” suuniseid.

4.2. Eksperimentaalsed rühmad, tFI indutseerimine ning HyT ja OXC ravi

Et tõestada OXC kaitsvat toimet isheemilise kahjustuse eest liivahiirtel pärast FI-d, jagati liivahiired kuue rühma: (1) võlts + kandja rühm (n=24); (2) tFI + kandja rühm (n {{5) }}); (3) võlts+HyT rühm (n=24); (4) tFI+HyT rühm (n=60); (5) võlts+OXC (200 mg/kg) rühm (n=24); ja (6) tFI+OXC rühm (n=60).

Seitset ja viit liivahiirt kolmes tFI rühmas kasutati Western blot analüüsiks ja histoloogiliseks uuringuks vastavalt 30 minutit, 12 tundi, 1 päev, 2 päeva ja 4 päeva pärast tFI operatsiooni ning kolmes võltsrühmas seitse ja viis. gerbileid kasutati 30 minutit ja 4 päeva pärast võltsoperatsiooni, et arvukust minimeerida. Selles katses töötati välja tFI, nagu eelnevalt kirjeldatud [34].

Lühidalt öeldes tuimastati gerbiilid 2,5% isofluraaniga (32% hapnikku ja 68% dilämmastikoksiidis). Anesteesia all isoleeriti mõlemad ühised unearterid unearteri mantlist, mis oli suletud aneurüsmiklambritega (Yasargil FE 723K, Tuttlingenculap, Saksamaa) ) viis minutit.

Aju verevarustuse täiuslik peatumine leidis kinnitust arteriaalse verevoolu jälgimisel mõlemas võrkkesta arteris (sisemiste unearterite harud), kasutades Heine Optotechniki (Herrsching, Saksamaa) oftalmoskoopi (HEINE K180®).

Kehatemperatuuri enne operatsiooni ja selle ajal kontrolliti kõikides rühmades normotermia juures (37 ± 0,2 ◦C), kasutades termomeetrilist tekki. Pärast viieminutilist oklusiooni eemaldati klambrid.

Selles uuringus tehti võltsoperatsioon, tehes neile sama tFI operatsiooni ilma ühiste unearterite oklusioonita. Kahes võlts+HyT ja tFI+HyT rühmas kontrolliti HyT (sarnaselt kehatemperatuuri muutusega tFI+ korral). OXC rühm) kogu keha jahutamise teel jääkotiga kuue tunni jooksul.

Kahe võlts + OXC ja tFI + OXC rühma kehatemperatuuri registreeriti kuus tundi pärast kohest intraperitoneaalset 200 mg/kg OXC süstimist (Sigma–Aldrich, St. Louis, MO, USA) pärast tFI operatsiooni.

OXC annus valiti varasema uuringu põhjal, milles teatati, et 200 mg/kg OXC kaitses tõhusalt rakusurma eest ajus pärast [36]. Kehatemperatuuri muutuse registreerimiseks mõõdeti kehatemperatuuri iga kord pärast tFI-d. 6-tunnise perioodi jooksul toatemperatuuril (umbes 22 ◦C).

Gerbilid said pärast tFI-d taastumisaega neli päeva, kuna hipokampuse CA1 piirkonnas asuvad püramiidrakud hakkavad surema neli päeva pärast tFI-d [30, 34, 62].

4.3. SMA test

SMA test viidi läbi, et uurida hüperaktiivsuse muutusi kõigis rühmades. Lühidalt, nagu eelnevalt kirjeldatud [63], tehti SMA test päeval 1 pärast tFI-d, kuna liikumisaktiivsus saavutab kõrgeima punkti päeval 1 pärast isheemilist vigastust pärast tFI-d.

Kõikide rühmade liivahiirtele kohandati keskkonda kaks tundi ja nad paigutati Ugo Basile SRL-lt (Gemonio, Itaalia) saadud avamaa puuri (laius 44 cm; pikkus 44 cm; kõrgus 30), milles kaks paralleelset horisontaalset. Üheks tunniks paigaldati infrapunakiired 4 × 8 põrandast. SMA salvestati, kasutades Photobeam Activity System-Home Cage'i firmalt San Diego Instruments (San Diego, CA, USA).

Liikumine (trajektoor ja kogu läbitud vahemaa) tuvastati fotoelementide tekitatud infrapunakiirte massiivi katkestamise kaudu.

SMA-d jälgiti pidevalt ühe tunni jooksul ja andmed koguti IPC Electronicsi (Cumbria, UK) AMB analüsaatoriga.

Andmete kogumist alustati 15 minutit pärast avamaa puuris harjumist. Lõpuks hinnati saadud tulemusi katseperioodi (üks tund) liikumiskaugusena (meetrites).

4.4. Kognitiivsete funktsioonide testid

4.4.1. RAMT

Ruumimälu võrdlemiseks kõigis rühmades viidi RAMT läbi vastavalt pretsedendiuuringutele [38, 44]. Selle testi jaoks kasutati Stoelting Co (Wood Dale, IL, USA) radiaalset 8-käelabürinti.

Labürindi instrument koosnes keskplatvormist ja kaheksast varrest (iga käe laius 5 cm; kõrgus 9 cm; pikkus 35 cm). Gerbiile treeniti üks kord päevas kolm päeva enne.

Nimelt pandi iga käe otsaossa DBL Co (Chungbuk, Korea) saadud pelletisööt ja iga liivahiir asetati keskplatvormile. Seejärel otsis liivahiir sööta.

Pärast võlts- või tFI-operatsiooni viidi tegelik test läbi üks kord päevas nelja päeva jooksul alates üks päev pärast operatsiooni.

Analüüsi jaoks hinnati vigade arvu, kusjuures üks viga ilmnes iga kord, kui liivahiir sisenes juba varem külastatud käsivarre. Katse lõppes, kui liivahiir sööda ära tarbis.

4.4.2. PAT

Lühiajalise mälu võrdlemiseks rühmade lõikes viidi PAT läbi vastavalt eelnevalt teatatud meetoditele [64, 65] koos mõningate muudatustega. Lühidalt öeldes testiti liivahiirte San Diego Instrumentsi (SanDiego, CA, USA) Gemini Avoidance System (GEM 392) abil, mis koosneb kahest (tumedast ja heledast) sektsioonist, mis suhtlevad üksteisega vertikaalselt libiseva värava kaudu.

Eksperimentaalsed seansid viidi läbi kahes faasis: treeningseanss ja tõeline katseseanss, mis viidi läbi üks päev enne ja neli päeva pärast tFI või võltsoperatsiooni.

Tõeline test viidi läbi 20 minutit pärast treeningut, mõõdeti pimedas ruumis viibimise ajal latentsusaega (sekundites). Nimelt lasti liivahiirtel treeningutel üks minut kahte sektsiooni vabalt uurida, samal ajal kui värav oli avatud. .

Seejärel, kui liivahiir läks pimedasse kambrisse, suleti uks ja liivahiir sai põrandal olevast terasvõrest viieks sekundiks jala elektrilöögi (0,5 mA).

Tegelikul testiseansil, päeval 4 pärast tFI-d, pandi liivahiir heledasse kambrisse ja registreeriti latentsusaeg valguskambris enne pimedasse kambrisse sisenemist.

4.5. Western blot analüüs TRPV1 ja TRPV4 jaoks

TRPV1 ja TRPV4 ekspressioonitasemete uurimiseks liivahiirte hipokampuse CA1-s viidi läbi Western blot meetod vastavalt eelnevalt kirjeldatud meetoditele [66, 67].

Lühidalt, vastavalt ettenähtud ajakavale (30 min, 12 h, 1 päev, 2 päeva ja 4 päeva pärast võlts- või tFI-operatsiooni) anti liivahiirtele (n=5 igas rühmas) eutanaasia jaoks anesteesia intraperitoneaalse süstiga. 200 mg/kg naatriumpentobarbitaal (JW Pharm.Co., Ltd., Seoul, Korea).

Seejärel koguti nende ajud ja homogeniseeriti 50 mM fosfaatpuhverdatud soolalahusega (PBS, pH 7,4), mis sisaldas 0,1 mM etüleenglükool-bis (aminoetüüleeter)-N, N, N{{ 11}}, N0-tetraäädikhape (EGTA) (pH 8.0), 10 mM etüleendiamiintetraäädikhape (EDTA) (pH 8,0), 0,2% Nonidet P{{17 }}, 15 mM naatriumpürofosfaat, 100 mM -glütserofosfaat, 2 mM naatriumortovanadaat, 50 mM NaF, 150 mM NaCl, 1 mM fenüülmetüülsulfonüülfluoriid (PMSF) ja 1 mM ditiotreitool (DTT).

Järgmisena tsentrifuugiti proove ja supernatandid võeti valgutaseme määramiseks, kasutades Micro BCA analüüsikomplekti firmalt Thermo Fisher Scientific Inc (Waltham, MA, USA) koos veisekogumi albumiiniga ettevõttest Pierce Chemical Co (Rockford, IL, USA).

Alikvoodid, mis sisaldasid 20 µg koguvalgust, keedeti laadimispuhvris, 150 mM Tris-s (pH 6,8), mis sisaldas 6% naatriumdodetsüülsulfaati (SDS), 3 mM DTT-d, 0,3% bromofenoolsinist ja 30% glütserooli.

Proovid eraldati 10% SDS-polüakrüülamiidgeelelektroforeesiga (PAGE). Järgmisena kanti geelid 90 minutiks 350 mA ja 4 °C juures ettevõtte Pall Co (East Hills, NY, USA) nitrotselluloosmembraanidele.

Mittespetsiifilise värvimise blokeerimiseks inkubeeriti membraane 5% rasvatustatud piimas 60 minutit toatemperatuuril. Seejärel anti neile immuunreaktsioon iga primaarse antikehaga: küüliku anti-TRPV1 (lahjendatud 1:1000) (Abcam, Cambridge, UK), küüliku anti-TRPV4 (lahjendatud 1:1000) (Abcam) ja küüliku anti-- - aktiin (lahjendatud 1:2000) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) temperatuuril 4 °C 7 tundi.

Seejärel reageeriti neil mädarõika peroksüdaasi (HRP) konjugeeritud eesli küülikuvastase IgG-ga (lahjendatud 1:4500) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA) toatemperatuuril 1 tund.

Lõpuks kasutati visualiseerimise parandamiseks alumiiniumipõhist kemoluminestsentsi komplekti firmalt Thermo Fisher Scientific Inc (Waltham, MA, USA).

Nagu eelnevalt kirjeldatud [68], analüüsiti TRPV1 ja TRPV4 immunoblotte Scion Cropi (Frederick, MD, USA) tarkvara Scion Image abil. Ribad skaneeriti ja viidi läbi densitomeetriline analüüs. Valgu tase normaliseeriti võrreldes vastava aktiini tasemega.

4.6. Histoloogiliste sektsioonide ettevalmistamine

Immunohistokeemiliste ja histopatoloogiliste uuringute jaoks hukati liivahiired (iga rühma jaoks n=7) vastavalt ettenähtud ajakavale (30 minutit, 12 tundi, 1 päev, 2 päeva ja 4 päeva pärast tFI või võltsoperatsiooni).

Nagu eelnevalt kirjeldatud [34], tuimastati liivahiirte naatriumpentobarbitaal (200 mg/kg) (JW Pharmaceutical, Seoul, Korea) sügavalt. Anesteesia all loputati liivahiirt transkardiaalselt 0,1 M fosfaatpuhvri soolalahusega (pH 7,4) ja fikseeriti 4% paraformaldehüüdiga (0,1 M fosfaatpuhvris, pH 7,4).

Seejärel saadi nende ajud ja fikseeriti kuue tunni jooksul sama fiksaatoriga. Seejärel lõigati ajukude (koronaalsete tasapindade paksus 25 µm) akrüostaadis (Leica, Wetzlar, Saksamaa).

4.7. Histokeemiline värvimine CV abil

Iga rühma hipokampuse morfoloogiliste ja neuronaalsete kahjustuste uurimiseks viidi läbi kresüülvioletne (CV) värvimine, nagu me eelnevalt kirjeldasime [69]. Lühidalt: kresüülvioletset atsetaat (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) lahustati 1.0% (mass/maht) destilleeritud vees ja jää-äädikhappes (0,28). %) lisati sellele lahusele. Sektsioonid värviti ja paigaldati Kanada palsamiga (Kanto, Tokyo, Jaapan).

4.8. FJ B värvimine

FJ B värvimine viidi läbi, et uurida neuronite degeneratsiooni (surm või kadu). Vastavalt avaldatud protseduurile [34] leotati ettevalmistatud ajulõigud 1% naatriumhüdroksiidis, viidi kohe üle 0.06% kaaliumpermanganaadile ja reageeriti kohe 0,0004% Fluoro-Jade B-ga (Histochem). , Jefferson, AR, USA).

Sektsioone pesti korraks ja pandi slaidi soojendajale (umbes 50 ◦C), et reageerida FJ B-ga. OXC terapeutilise toime hindamiseks tFI vastu loendati FJ B+ rakkude arv CA1 piirkonnas vastavalt aastal avaldatud meetodile. 70].

Lühidalt, FJ B + rakkude digitaalsed kujutised jäädvustati viiest sektsioonist liivahiirte kohta, kasutades epifluorestsentsmikroskoobi (Carl Zeiss) (Oberkochen, Saksamaa) lainepikkusel 450–490 nm. Rakud loendati 250 µm2, mis sisaldas SP-d, CA1 piirkonna keskel, kasutades kujutise analüüsisüsteemi (Optimas 6.5) (CyberMetrics, Scottsdale, AZ, USA).

4.9. Immunohistokeemia

NeuN, TRPV1 ja TRPV4 immunoreaktiivsuse muutuste uurimiseks CA1 piirkonnas viidi läbi üldine immunohistokeemia. Lühidalt, vastavalt avaldatud meetodile [34] inkubeeriti ettevalmistatud ajulõike primaarsete antikehadega - hiire anti-NeuN (lahjendatud, 1:1100) (Chemicon, Temecula, CA, USA), hiire anti-TRPV1 (lahjendatud, 1:500) (Abcam, Cambridge, UK) ja küüliku anti-TRPV4 (lahjendatud, 1:500) (Abcam, Cambridge, UK).

Seejärel inkubeeriti neid inkubeeritud sektsioone vastavates sekundaarsetes antikehades (lahjendatud, 1:250) (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA, USA) ja töötati välja Vectastain ABC (lahjendatud, 1:250) (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA) abil. , USA). Lõpuks oli neil immunoreageeritud lõikudel värv pärast visualiseerimist 3,3'-diaminobensidiiniga.

NeuN+ rakkude arv loendati järgmiselt. NeuN+ rakkude digitaalsed kujutised jäädvustati viiest sektsioonist liivahiirte kohta, kasutades valgusmikroskoobi (AxioM1) (Carl Zeiss, Saksamaa).

Rakud loendati samamoodi nagu FJ B+ rakkude arv. TRPV1+ ja TRPV4+struktuuride tiheduse hindamiseks kasutati CA1 piirkonna vastavaid alasid viies sektsioonis looma kohta. TRPV1+ ja TRPV4+struktuuride pildid jäädvustati valgusmikroskoobiga AxioM1 (Carl Zeiss) (Saksamaa).

TRPV{{0}} ja TRPV4+struktuuride tihedusi hinnati suhtelise optilise tihedusena (ROD). Selleks muudeti pildid keskmisele halli tasemele. ROD esitati protsendina, kasutades Adobe Photoshopi (versioon 8.0) ja NIH Image J tarkvara (National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA).

4.10. Statistiline analüüs

Esitasime andmed keskmisena ± keskmise standardviga (SEM). Kõik statistilised analüüsid viidi läbi GraphPad Prismi (versioon 5.0) (GraphPadSoftware, La Jolla, CA, USA) abil. Keskmiste erinevusi katserühmade vahel analüüsiti statistiliselt kahesuunalise dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil post hocBonferroni mitmekordse võrdlustestiga, et selgitada tFI-ga seotud erinevusi kõigi rühmade vahel. Statistilist olulisust arvestati p < 0. 05.

Autori kaastööd: Kontseptualiseerimine: M.-HW ja T.-KL; Methodology, J.-CL ja DWK; Tarkvara, H.-IK ja MCS; Valideerimine, JHA, IJK ja JHP; Uurimine, J.-CL, H.-IK ja M.CS; Andmete kureerimine, JHC, IJK ja JHP; Kirjutamine-originaalkavandi ettevalmistamine, H.-IK ja J.-CL; Kirjutamine-retsensioon ja toimetamine, M.-HW; Järelevalve, S.-SL; projektihaldus, M.-HW; Rahastamise omandamine, S.-SL ja T.-KL Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooni läbi lugenud ja sellega nõustunud.

Rahastamine: seda tööd toetas Brain Korea 21 (BK21) väljapaistvate teadusuuringute ülikoolide edendamine (FOUR, 4220200913807), mida rahastab Korea riiklik uurimisfond (NRF) ja Korea riikliku uurimisfondi (NRF) kaudu põhiteaduste uurimisprogramm. rahastab haridusministeerium (NRF-2020R1I1A1A01070897).

Institutsioonilise läbivaatamisnõukogu avaldus: liivahiired aretati Kangwoni riikliku ülikooli katseloomade keskuses (Chuncheon, Korea). Selle uuringu jaoks kiitis katseprotokolli heaks (kinnitusnumber, KW-200113-1; kinnitamise kuupäev, 18. veebruar 2020) institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee.

Uurimisprotokoll järgis väljaandes The National Academies Press (8. väljaanne, 2011) avaldatud laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendi "Praegused rahvusvahelised seadused ja poliitika" suuniseid.

Teavitatud nõusoleku avaldus: Ei kohaldata.

Andmete kättesaadavuse avaldus: selles uuringus esitatud andmed on saadaval vastava autori nõudmisel.

Tänuavaldused: Autorid hindavad Hyun Sook Kimi ja Seung Uk Lee nende tehnilise abi eest selles uuringus.

Huvide konflikt: autorid on teatanud, et rahalist huvide konflikti ei ole.

Lühendid

CA1: alamväli Cornu Ammonis 1; KNS, kesknärvisüsteem; CV, kresüülvioletne; DG, dentate gyrus;FJ B, Fluoro-Jade B; HyT, hüpotermia; NeuN, neuronaalsed tuumad; OXC, okskarbasepiin; PAT, passiivse vältimise test; ROD, suhteline optiline tihedus; SMA, spontaanne motoorne aktiivsus; SO, stratum oriens;SP, kihtpüramidaalne; SR, stratum radiatum; tFI, mööduv eesajuisheemia; TRPV1, transientretseptori potentsiaalne vanilloidne tüüp 1.

Viited

1. Busto, R.; Dietrich, WD; Globus, MY; Valdes, I.; Scheinberg, P.; Ginsberg, MD Väikesed erinevused intraisheemilises ajutemperatuuris määravad kriitiliselt isheemilise neuronaalse kahjustuse ulatuse. J. Cereb. Verevoolu metab. 1987, 7, 729–738. [CrossRef][PubMed]

2. Maher, J.; Hachinski, V. Hüpotermia kui ajuisheemia potentsiaalne ravi. Tserebrovasc. Brain Metab. Rev. 1993, 5,277–300.

3. Õde, S.; Corbett, D. Neuroprotektsioon pärast mitmepäevast kerget, ravimitest põhjustatud hüpotermiat. J. Cereb. Verevoolu metab. 1996, 16 474–480. [CrossRef]

4. Fisher, M.; Feuerstein, G.; Howells, DW; Hurn, PD; Kent, TA; Savitz, SI; Lo, EH; Group, S. Insulditeraapia akadeemilise tööstuse ümarlaua prekliiniliste soovituste ajakohastamine. Stroke 2009, 40, 2244–2250. [CrossRef]

5. Liu, L.; Yenari, MA Terapeutiline hüpotermia: neuroprotektiivsed mehhanismid. Esiosa. Biosci. 2007, 12, 816–825. [CrossRef]

6. Lyden, PD; Krieger, D.; Yenari, M.; Dietrich, WD Terapeutiline hüpotermia ägeda insuldi korral. Int. J. Stroke 2006, 1, 9–19. [CrossRef][PubMed]

7. Klassman, L. Terapeutiline hüpotermia ägeda insuldi korral. J. Neurosci. Õed. 2011, 43, 94–103. [CrossRef]

8. Groysman, LI; Emanuel, BA; Kim-Tenser, MA; Sung, GY; Mack, WJ Terapeutiline hüpotermia ägeda isheemilise insuldi korral.Neurokirurgia. Fookus 2011, 30, E17. [CrossRef] [PubMed]

9. Schwab, S.; Georgiadis, D.; Berrouschot, J.; Schellinger, PD; Graffagnino, C.; Mayer, SA Mõõduka hüpotermia teostatavus ja ohutus pärast massiivset poolkerainfarkti. Insult 2001, 32, 2033–2035. [CrossRef]

10. Katz, LM; Young, AS; Frank, JE; Wang, Y.; Park, K. Reguleeritud hüpotermia vähendab aju oksüdatiivset stressi pärast hüpoksilist isheemiat. Brain Res. 2004, 1017, 85–91. [CrossRef]

11. Liu, K.; Khan, H.; Geng, X.; Zhang, J.; Ding, Y. Farmakoloogiline hüpotermia: tulevase insuldiravi potentsiaal? Neurol. Res.2016, 38, 478–490. [CrossRef]

12. Ma, J.; Wang, Y.; Wang, Z.; Li, H.; Wang, Z.; Chen, G. Ravimitest põhjustatud terapeutilise hüpotermia neuroprotektiivne toime kesknärvisüsteemi haiguste korral. Curr. Narkootikumide sihtmärgid 2017, 18, 1392–1398. [CrossRef]

13. Calabresi, P.; Cupini, LM; Centonze, D.; Pisani, F.; Bernardi, G. Epilepsiavastased ravimid kui võimalik neuroprotektiivne strateegia ajuisheemia. Ann. Neurol. 2003, 53, 693–702. [CrossRef]

14. Tanaka, T.; Litofsky, NS Epilepsiavastased ravimid laste traumaatilise ajukahjustuse korral. Ekspert Rev Neurother. 2016, 16, 1229–1234.[CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com