HPLC ehhinakosiidi määramine Cistanche Cistanche'is

Ehhinakosiidi HPLC määramine Cistanche Cistanche'is

Lisateabe saamiseks:ali.ma@wecistanche.com

Eesmärk:HPLC määras koguseehhinakosiidsisseCistanchejahvatatud nii vedelas lämmastikus kui ka looduslikult õhu käes kuivatatud olekus, võrreldes sellegametsik cistanchejakunstlikult kasvatatud Cistanche.

Meetodid:kasutati lc{{0}}HPLC süsteemi (Shimadzu, Jaapan). Kolonniks oli YMC inertsil ods-sp (4,6 mm × 150 mm, 5 μm; YMC Co Ltd, Jaapan); Liikuv faas: atsetonitriil-metanool -1 protsenti sipelghapet (10:15:75); tuvastuslainepikkus 334 nm; Voolukiirus 0,7 mg · ml-1. Kolonni temperatuur 30 kraadi C.

Tulemused:erinevatel töötlemistingimustel oli ehhinakosiidisisaldusele väga selge mõju, üldiselt oli ehhinakosiidi tase Cistanche jahvatatud vedelas lämmastikus suurem kui looduslikes õhukuivatatud tingimustes; Metsiku toimeaine sisaldusCistancheoli palju kõrgem tehiskultuuri omast.

Klõpsake Cistanche ekstrakti pulbriliste toodete jaoks

Cistanche on ohustatud liik, parasiittaim, mis asustab Clostridium, Salix rubrum'i juuri. Hiinas levitatakse Cistanchet peamiselt Sise-Mongoolias, Ningxias, Gansus ja Xinjiangis, millel on suurepärane maine "kõrbe ženšenni" poolest, millel on suur raviväärtus. Selle peamised meditsiinilised koostisosad on fenüületanoolglükosiidid, mida võib sõltuvalt asendajatest jagada ehhinakosiidideks, lehtede kohosiidideks, Cistanche'iks ja teisteks. Nende hulgas on ehhinakosiidil paranenud seksuaalfunktsioon, antioksüdant ja vabu radikaale püüdev toime, kuid sellel on ka teatav apoptootiline toime. Alates 1980. aastatest on looduslike saaduste eraldamisel laialdaselt kasutatud HPLC-tehnoloogiat, mis pakub lihtsat ja kiiret meetodit fenüületanoolglükosiidide eraldamiseks. Loodusliku ja kunstlikult kasvatatava Cistanche peamise aktiivse koostisosa Cistanche sisalduse analüüsimiseks erinevatel kasvuperioodidel valiti HPLC meetod, mis annab teadusliku aluse Cistanche ratsionaalseks arendamiseks ja kasutamiseks ning selle kvaliteedi tõhusaks hindamiseks.

Instrumendid ja reaktiivid

Shimadzu, Jaapan, lc{0}}HPLC aparaat, lc-20tandem topeltkolbpump, cto-20kolonn-ahi, spda-20UV-Vis kahe lainepikkusega detektor; Ultrahelipuhasti Kunshan kq-100; atsetonitriil (kromatograafiliselt puhas, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); metanool (kromatograafiliselt puhas, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); Sipelghape (kromatograafiliselt puhas, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); destilleeritud vesi

Kontroll: ehhineosiid, sisaldus 98,43 protsenti või suurem (Shanghai Yuanye Bio Technology Co., Ltd.).

Viis Cistanche proovi: kunstlikult istutatud üheks aastaks järgmise Cistanche jaoks, kunstlikult istutatud Cistanche jaoks, kunstlikult kuivatatud Cistanche, metsik Cistanche ja istutatud kunstlikult rohkem kui kolm aastat koos Cistanche'iga.

2 meetodit ja tulemusi

2.1 kromatograafiliste tingimuste määramine

Mõõdetud ehhineosiidi piigi eraldamiseks LC-kromatogrammil teistest ainetest, samuti pumba rõhu ja ajakava kontrollimiseks sobivas vahemikus, viidi läbi kromatograafiliste tingimuste eksperimentaalne muutmine ja pärast optimeerimiskatsete käigus liikuva faasiga jõuti järeldusele, et mida kõrgem on temperatuur, seda lühem on peetumisaeg ja madalam kontsentratsioon, seda lühem on pumba rõhk ja madalam retentsiooniaeg, kuid piigi kõrgus muutus madalamaks, mis oli ebasoodne mõõtmine. Lõpuks määrati liikuvaks faasiks atsetonitriil-metanool-1 protsent sipelghapet (10:15:75), tuvastamise lainepikkus 334 nm, voolukiirus 0,7 ml/min ja kolonni temperatuur. 30 kraadi C, vastavalt toatemperatuuri objektiivsetele tingimustele ja pumba maksimaalsele laagrirõhule, mille tulemuseks oli külluslik teave teravate piikide kujuga ja koostisosade hea eraldatus.

2.2 veergude määramine

YMC-Inertsil ODS-SP (4,6 mm × 150 mm, 5 μm; YMC Co Ltd, Jaapan).

2.3 katselahuse valmistamine

2.3.1 standardlahuste valmistamine

Sobiv kogus ehhineosiidi standardit kaaluti täpselt ja lisati liikuva faasi atsetonitriil-metanool -1 protsenti sipelghapet (10:15:75), et saada 0.0 6 mg · ML - 1, 0.05 mg · ML {{1{{20}}}}, 0,04 mg · ML - 1 , 0,03 mg · ML - 1, 0,02 mg · ML - 1, 0,01 mg · ML - 1 ja 0,005 mg · ML - 1 ehhinakosiidi standardlahused.

2.3.2 katselahuse valmistamine

Sobivad kogused kunstlikult istutatud värsket Cistanche'i (alla ühe aasta), kunstlikult värsket Cistanche'i ja looduslikku värsket Cistanche'i jahvatati vedela lämmastiku all uhmris pulbriks; Samuti lõigati sobiv kogus ülaltoodud 3 Cistanche'i plokkideks, kuivatati õhu käes loomulikult varjuventilatsiooni all ning pärast kuivatamist pulbristati ja jahvatati pulbriks. Kunstlik kuiv tsistanš ja metsik üle kolme aasta kuiv Cistanche jahvatati otse pulbrisse. Võeti 0,5 g eespool valmistatud Cistanche'i pulbrit ja asetati tsentrifuugitorusse, lisati 25 ml liikuvat faasi, kaaluti ja leotati 30 minutit, töödeldi ultraheliga 40 minutit, jahutati ja seejärel kaaluti uuesti, et täita puuduv kaal liikuva faasiga, loksutati ja tsentrifuugiti ning supernatant võeti 0,45 µM mikropoorse filtri membraanfiltreerimiseks.

2,4 regressioonikõverate graafikut ehhinakosiidi standardproovi jaoks

Valmistatud ehhineosiidi standardproovid süstiti eraldi LC-aparaati ja abstsissina kasutati kontrollproovi kontsentratsiooni (mg · L{0}}) ning vastavad piigi alad ordineeriti graafiku graafikule. standardkõver, mille tulemuseks on regressioonivõrrand: y=66 867 100x-46 360.83, R2=0.98637, mis näitas ehhineosiidi 0,1 ~ 1,2 ug juures heas lineaarses seoses.

3 Arutelud

Ehhinakosiid on Cistanche üks peamisi aktiivseid komponente, mis võib hästi esindada Cistanche farmakoloogilise toime keemilist alust, muutes ravimaterjali kvaliteedi ja selle farmakoloogilise toime vastavuse ning parandades Cistanche kvaliteedihindamise asjakohasust.

Erinevatel töötlemistingimustel oli ehhinakosiidisisaldusele selge mõju – üldiselt oli ehhinakosiidi tase Cistanche jahvatatud vedelas lämmastikus suurem kui looduslikes õhukuivatatud tingimustes. Tavaline õhu käes kuivatamine vähendas ehhineosiidi kogust, mis oleks võinud õhu käes kuivatamisel kuluda või muundada. Et vältida toimeaine sisalduse vähenemist ja tagada Cistanche efektiivsus, tuleb valida sobiv ravi.

Järjekindlalt uskus enamik, et Cistanche kunstlik viljeluskeskkond ja kasvuharjumused on loodusest eristamatud ja kvaliteedis ei olnud erinevusi, kippusid rõhku panema ainult saagikusele ega analüüsinud kvaliteeti. Käesolev uuring näitas, et kunstlikult kasvatatud Cistanche ehhinakosiidi kogus oli väiksem kui loodusliku Cistanche ehhinakosiidi kogus. Kõrgeim oli {{0}},3360 protsenti looduslikust tsistansist ja madalaim oli 0.007 0 protsenti tehislikust tsistansist. Seetõttu tuleb seda veel kasvatustehnoloogias uurida, et toimeainete sisaldust parandada.

Cistanche'i kvaliteet sõltub selle toimeaine ehhinakosiidi kogusest, millel on omakorda tugev seos hooaja, aja ja koristusmeetodiga, seega tuleks Cistanche'i koristamisel võtta arvesse toimeaine akumulatsiooni seisundit ja kasvu ja arengu etapp. Võtke arvesse nii kvaliteeti kui ka saagikust.

Selles artiklis mainitud meetod on ehhineosiidi määramiseks lihtne, täpne, reprodutseeritav ja täpne. Kasulik Cistanche määramiseks.