Cistanche fenüületanoidglükosiidide mõju uurimine mittealkohoolsetele rasvmaksahaigustele võrgufarmakoloogia ja rakukatsete põhjal

Abstraktne

Eesmärk: uurida Cistanche fenüületanoidglükosiidide parandavat toimet mittealkohoolsele rasvmaksahaigusele (NAFLD).

meetodid: Cistanche fenüületanoidglükosiidide potentsiaalsete mehhanismide ennustamiseks NAFLD vastu kasutati võrgufarmakoloogiat. In vitro NAFLD mudel loodi, indutseerides HepG2 rakke vabade rasvhapetega (FFA). Rakkude elujõulisust hinnati testiga CCK-8; Lipiidide kogunemise jälgimiseks kasutati Oil Red O värvimist; triglütseriidide (TG) ja üldkolesterooli (TC) tasemeid mõõdeti analüüsikomplektide abil; JC-1 värvimist kasutati mitokondriaalse membraani potentsiaali hindamiseks; intratsellulaarset ROS-i taset hinnati DCFH-DA fluorestsentssondiga; apoptoos tuvastati, kasutades värvimist Hoechst 33342; ning TNF-, PI3K, Akt ja Bax valkude ekspressiooni mõõdeti Western blot meetodil.

Tulemused: Tuvastati kümme aktiivset ühendit ja 77 potentsiaalset sihtmärki, mis on seotud NAFLD-vastase toimega, põhisihtmärkidega, sealhulgas TNF, NFKB1 ja TLR4. Ühendid näitasid head seondumisafiinsust sihtmärkidega, eriti TNF-iga. Võrreldes mudelrühmaga vähendasid Cistanche fenüületanoidglükosiidid oluliselt FFA-indutseeritud lipiidide akumulatsiooni HepG2 rakkudes (P < 0,01), vähendasid intratsellulaarset TG, TC ja ROS taset (P < 0,01), taastasid mitokondriaalse membraani potentsiaali, leevendasid mitokondriaalset kahjustust, vähendasid P5 ja apoptoosi kahjustusi. allareguleeritud TNF-, PI3K ja Akt valgu ekspressioon (P < 0,05, P < 0,01).

Järeldus: Cistanche fenüületanoidglükosiidid avaldavad NAFLD-vastast toimet, parandades FFA-indutseeritud lipiidide akumulatsiooni, mitokondriaalset düsfunktsiooni, oksüdatiivset stressi ja apoptoosi HepG2 rakkudes. Need efektid võivad olla seotud TNF/PI3K/Akt signaalirajaga.

Märksõnad: Cistanche fenüületanoidglükosiidid; mittealkohoolne rasvmaksahaigus (NAFLD); lipiidide metabolism; oksüdatiivne stress;apoptoos; TNF/PI3K/Akt signaalirada; võrgufarmakoloogia; raku eksperiment

Cistanche Benefits in depression

Cistanche fenüületanoidglükosiidid

catalog cistanche

Müüa suure sisaldusega Cistanche ekstrakti

Võtke meiega ühendust osta kohe

1. Sissejuhatus

Mittealkohoolne rasvmaksahaigus (NAFLD) on krooniline maksahaigus, mida iseloomustab maksa steatoos ilma liigse alkoholitarbimiseta. Levimus Hiinas on jõudnud 32,9 protsendini. Selle patogenees hõlmab mitmeid mehhanisme, sealhulgas insuliiniresistentsust, oksüdatiivset stressi ja soolestiku mikrobiota tasakaalustamatust. Kliinilisteks sümptomiteks on väsimus, ebamugavustunne maksa piirkonnas ja kõhuvalu ning rasketel juhtudel võib see areneda mittealkohoolseks steatohepatiidiks (NASH).

Praegu on NAFLD-i peamine ravi elustiili sekkumine. Kuigi FDA kiitis 2024. aastal heaks esimese NAFLD-i ravimi Resmetirom (Rezdiffra), on sellel võimalikud kahjulikud mõjud, nagu maksakahjustus ja kardiovaskulaarsed riskid. Seetõttu on tungiv vajadus leida NAFLD jaoks ohutud ja tõhusad ravimeetodid.

Echinacoside in cistanche 7

Traditsiooniline hiina meditsiin (TCM), millel on mitu komponenti, mitu sihtmärki ja mitut rada, sobib hästi NAFLD keerulise patogeneesiga ja pakub selle ravis ainulaadseid eeliseid.

Cistanche deserticolajaCistanche tubulosaon ravimtaimed perekonnast Orobanchaceae, mis on loetletudShennong Bencao Jing. Nende soomusrikkaid lihakaid varsi kasutatakse traditsiooniliselt maksa ja neerude toniseerimiseks, essentsi ja vere täiendamiseks ning soolte niisutamiseks. Peamistel aktiivsetel komponentidel - fenüületanoidglükosiididel - on põletikuvastased, lipiidide taset alandavad ja hepatoprotektiivsed omadused. Siiski puuduvad süstemaatilised uuringud nende mõju kohta NAFLD-le.

Selle uuringu eesmärk on analüüsida Cistanche fenüületanoidglükosiidide farmakoloogilist alust ja võimalikke mehhanisme NAFLD ravimisel võrgufarmakoloogia abil ning uurida nende mehhanisme rakuliste eksperimentide kaudu, pakkudes teoreetilise aluse uute ravimite väljatöötamiseks.

Echinacoside in cistanche 11

2. Materjalid

2.1 Võrgufarmakoloogia tööriistad

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformaatika: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB esialgne eelarveprojekt: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

Acteoside in Cistanche 2

2.2 rakuliin

Inimese maksavähirakud HepG2, ostetud ettevõttelt Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.

2.3 Reaktiivid ja ravimid

Tsistanche fenüületanoidglükosiidid (partii nr. 201610, puhtus 80% või suurem, sisaldab 44,5% ehhinakosiidi ja 16,1% verbaskosiidi), ostetud ettevõttelt Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Põhilahus, mis on valmistatud kontsentratsioonis 6,40 mg/mL, filtreeritud 0 kraadi juures – 2 kraadi.

Täiendavad reaktiivid hõlmavad järgmist:

Veise loote seerum (FBS), DMEM sööde, penitsilliin-streptomütsiin, Oil Red O värvimiskomplekt, BCA komplekt, ROS-i tuvastamise komplekt, Hoechst 33342, BSA-V, naatriumoleaat, naatriumpalmitaat, TG ja TC testikomplektid, CCK-8 analüüs, mitokondriaalse potentsiaali membraan, JC-1 PI3K p85, Akt, Bax, -aktiin ja sekundaarsed HRP-ga konjugeeritud antikehad.