Eksperimentaalne luu mesenhümaalsete tüvirakkude (BMSC-de) osteoblastideks diferentseerumine, mida juhib Cistanche Deserticola't sisaldav seerum

ZENG Jian chun, FAN Yue guang＊, LIU Jian ren, ZENG Yi rong, YI Chun zhi, YAN Liang. ＊

Guangzhou Traditsioonilise Hiina Meditsiini Ülikooli esimene sidushaigla, Guangzhou 510405, Guangdong, Hiina

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanchesaab ära hoidaosteoporoosjaedendadaluukamber kasvu

ABSTRAKTNE

Eesmärk: Uurida BMSC-de suunalist diferentseerumist, juhindudes DesertlivingustCistanche(Herba Cistanches), mis turgutab neerusid. Meetodid: Primaarsed BMSC-d saadi terve luuüdi kultuuriga ja subkultuuriti neljandasse põlvkonda trüpsiiniga seedimise teel ning seejärel inokuleeriti kahele kuue süvendiga plaadile tihedusega 5 × 106 rakku milliliitri kohta. Kõik plaadid jagati kolm rühma tühja rühmana, deksametasooni (DXM) rühm ja Herba Cistanchesi rühm, igas rühmas kolm süvendit, sööde vahetati 2. päeval. Tühi rühm asendati L-DMEM-iga, mis sisaldas 10% FBS-i. DXM-rühma muudeti söötmega, mis sisaldas 10 mmol ／ L naatriumglütserofosfaati, 0,1 µmol ／ L DXM ja 50 mg ／ L C-vitamiini. HerbaCistanchesrühma muudeti söötmega, mis sisaldas 10% vereseerumit, mis sisaldas Herba Cistanches ja L-DMEM. Üks kuue süvendiga plaatidest värviti kümnendal päeval aluselise fosfataasiga (AKP), teine ​​kahekümnendal päeval värviti alizariin Bordeaux'ga. Tulemused: Kümnendal päeval olid DXM rühm ja Herba Cistanches rühm ALKP positiivsed; alates 12. päevast oli aukude pinnal näha valget kaltsiumisõlme; mis alisariin värvus positiivseks kahekümnendaks päevaks.

Järeldus: Herbat sisaldav söödeCistanchesvõib suunata BMSC-sid diferentseeruma osteoblastideks, mis tõotab soodsat väljavaadet osteoporoosi ja luumurdude häirete raviks.

MÄRKSÕNADCistanchedeserticola; Luuüdi; Mesenhümaalsed tüvirakud; Osteoblastid; Rakkude diferentseerumine

Mesenhümaalsed tüvirakud (MSC) on teatud tüüpi pluripotentsed täiskasvanud tüvirakud, mida leidub peamiselt luuüdis, aga ka embrüonaalsel perioodil mesenhümaalsest päritolust pärinevates luuvälistes kudedes, nagu naha fibroblastid, rasvkoe tüvirakud, skeletilihaste satelliitrakud ja veresooned Endoteelirakud ja nii edasi. Luuüdi MSC-d (BM SC) on luuüdi stroma komponendid. Pärast isoleerimist ja in vitro kultiveerimist, teatud indutseerivates tingimustes, on neil võime diferentseeruda osteoblastideks, kondrotsüütideks, närvirakkudeks, adipotsüütideks, kardiomüotsüütideks jne. Peamised seemnerakkude allikad luukoetehnoloogias on osteoblastid ja BMSC-d. Kuigi osteoblastidel on hea osteogeenne aktiivsus, on neil piiratud allikad, neid on raske eraldada ja saada suurtes kogustes ning neil on ebapiisav potentsiaal ulatuslikuks laienemiseks in vitro, mida on raske täita luukoetehnoloogia kliiniliste rakenduste vajadustega. BMSC-del pole mitte ainult hea osteoblastide diferentseerumispotentsiaal, vaid ka suur kasvupotentsiaal. Luu aktiivsus, tugev proliferatsioonipotentsiaal ja mugav allikas võivad rahuldada autoloogset koetehnoloogiat ja muutuda uurimistöö keskmeks.

Hiina meditsiin usub, et neer kontrollib luid ja toodab luuüdi. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud on näidanud, et neere toniseerivatel ravimitel on ajuripatsi-neerupealiste-sugunäärmete süsteemi erineval määral põnevus ja need on tihedalt seotud luu ainevahetusega. Östrogeenil on osteogeneesi tugevdav toime.

Hiina meditsiin usub, et neer kontrollib luid ja toodab luuüdi. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud on näidanud, et neere toniseerivatel ravimitel on ajuripatsi-neerupealiste-sugunäärmete süsteemi erineval määral põnevus ja need on tihedalt seotud luu ainevahetusega. Östrogeen võib soodustada luude moodustumist ja androgeenid võivad soodustada valkude sünteesi, soodustada luu maatriksi suurenemist ning kaltsiumi ja fosfori ladestumist. mõju.Cistanches(HerbaCistanches) sisaldavad fenetüülalkoholi üldglükosiide, tungaltera glükosiide ja betaiini, millel on androgeenitaoline toime. Selle katse eesmärk on uurida neere toniseeriva traditsioonilise hiina meditsiini mõjuCistanche- sisaldab seerumit BMSC-de osteoblastideks diferentseerumise kohta.

Arutelu

Cistancheravimseerum indutseerib BMSC-sid. Cistanche'il on keskosa toitev, maksa turgutav, neerude toitev, yangi tugevdav, soolestikku niisutav ja lahtistav toime. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud on näidanud, et neere toniseerivatel ravimitel on ajuripatsi-neerupealiste-sugunäärmete süsteemi erineval määral põnevus ja need on tihedalt seotud luu ainevahetusega. Östrogeen võib soodustada luude moodustumist ja androgeenid võivad soodustada valkude sünteesi, soodustada luu maatriksi suurenemist ning kaltsiumi ja fosfori ladestumist. Roll [1]. Fenüületanoidglükosiidide, ergosterosiidi ja betaiini koguhulk Cistanche'is omab androgeenitaolist toimet. Selles katses leiti, et ravimseerumCistanchevõib indutseerida BMSC-de diferentseerumist osteoblastideks. Kuigi BMSC-de osteoblastideks diferentseerumise esilekutsumiseks on kasutatud üksikut Hiina meditsiini või kombineeritud Hiina meditsiini, ei ole spetsiifilist molekulaarset mehhanismi veel teatatud. Proteoomika uuringud võivad analüüsida selle protsessi seotud proteoomika erinevusi ja luua funktsionaalse proteoomika, pidades silmas neerude luude teooria uut tõlgendust.

Rakkude tihedus mängib olulist rolli BMSC-de diferentseerumisprotsessis osteoblastideks. Luusõlmede moodustumine ei vaja mitte ainult osteoinduktiivseid aineid, vaid sõltub ka inokuleeritud rakkude tihedusest. Rakkude tihedus peab saavutama teatud tiheduse ja rakud võivad sulanduda. Osteoblastide diferentseerumine. Selles katses, kui 4. põlvkonna rakud prolifereeruvad rohkem kui 90 protsendini, lisatakse kultuuri jaoks indutseerija. Kui rakkude tihedus on liiga madal, prolifereeruvad rakud aeglaselt ning neil puudub kalduvus agregeeruda ja kasvada. Samas ebaühtlase rakutihedusega kultuurisüvendis on rakutihedas piirkonnas ebaselged rakupiirid ja udune struktuur ning rakud agregeeruvad tükkideks. AKP värvumine ja alisariinpunane värvumine on positiivsed, kuid madalama rakutihedusega piirkonnas ei ole rakkude tihedust. Rakud agregeerusid tükkideks ning AKP värvimine ja Alizarin Red värvimine olid negatiivsed. Seetõttu mõjutab rakkude siirdamise edukust oluliselt mikrokandjate kasutamine luukoetehnoloogias koos tõhusamate in vitro kultiveerimismeetoditega, nagu kolmemõõtmeline kultuur (RCCS), et saada rohkem rakke.

Kliiniline tähtsusCistancheravimseerum BMSC-de esilekutsumiseks Luukoetehnoloogial on laialdased kliinilised kasutusvõimalused ja sellest on saanud kaasaegse ortopeedia uurimistöö koht. BMSC-d on praegu luukoetehnoloogia jaoks kõige ideaalsemad seemnerakud. Nende mõju uurimise keskseks ülesandeks on see, kuidas neid võimalikult lihtsatel tingimustel osteoblastideks eristada ja seejärel küpseteks luurakkudeks muuta.

Praegu koosnevad BMSC-de suunatud diferentseerumiseks tavaliselt kasutatavad indutseerijad deksametasoonist, C-vitamiinist ja naatriumglütserofosfaadist. In vitro kultuuris on deksametasoonil rakkude proliferatsiooni pärssiv toime [2], nagu selles katses näha, on deksametasoonil kliiniliselt kõrvaltoimed, nagu infektsioon, osteonekroos ja osteoporoos, mis piiravad BMSC-de siirdamist. Pärast manustamist organismi indutseerijana. Tistanche kosutab neere ning tugevdab luid ja lihaseid. Selles katses leiti, et Cistanche soodustab BMSC-de proliferatsiooni ja indutseerib BMSC-de diferentseerumist osteogeenseteks. Pikaajalisel kliinilisel kasutamisel ei ole Cistanche'i kõrvaltoimeid täheldatud ja selle kasutamisel indutseerijana in vivo on laialdased kliinilised kasutusvõimalused.

Lühidalt öeldes on suurem osa praegustest uuringutest BMSC-de kui luukoetehnoloogia seemnerakkude kohta alles katsejärgus. Praeguste uuringute keskmes on see, kuidas saada suhteliselt lühikese aja jooksul piisavalt BMSC-sid ja kasutada lihtsaid meetodeid nende osteogeenseks diferentseerumiseks. Kuigi Cistanche cistanche'i mehhanismi, mille ülesandeks on neerude turgutamine ning luude ja lihaste tugevdamine, BMSC-de osteogeense diferentseerumise esilekutsumisel tuleb veel uurida, tuleb selle kasutamist BMSC-de diferentseerumise indutseerijana hilinenud ühinemise ja mitteliitumise ravis. ja luumurdude osteonekroosil MSC-de siirdamisega on helge tulevik.

Cistanchesaab ära hoidaosteoporoosja edendadaluurakkkasvu