Enteropeptidaasi inhibeerimine parandab diabeetilise neeruhaiguse rotimudeli neerufunktsiooni
Mar 13, 2022
SISSEJUHATUS
II tüüpi suhkurtõbi on krooniline ainevahetushäire, mida iseloomustavad hüperglükeemia, insuliiniresistentsus ja suhteline insuliinipuudulikkus. See on ülemaailmne kliiniline probleem, mis põhjustab mikro- ja makrovaskulaarseid diabeedi tüsistusi.1 Diabeet neeruhaigus(DKD) on peamine mikrovaskulaarne diabeedi tüsistus, mis põhjustab kroonilistneeruhaigus(CKD) ja lõppstaadiumisneeruhaigus. Ameerika Ühendriikides on enam kui 40 protsendil II tüüpi diabeediga patsientidest DKD.2 DKD on määratletud mikroalbuminuuriaga, millele järgneb proteinuuria, mis peegeldab glomerulaarkahjustust, mis on põhjustatud hüperglükeemiast põhjustatud hüperfiltratsioonist, hüpertensioonist ja podotsüütide vigastusest.3 Proteinuuria korral on liigne valk proksimaalsete torukujuliste rakkude koormus põhjustabneeru-põletik ja interstitsiaalne fibroos, peamised teedneerupuudulikkusprogresseerumine.4 Reniini-angiotensiini süsteemi (RAS) blokeerimine kas angiotensiini konverteeriva ensüümi inhibiitorite või angiotensiin II retseptori blokaatoritega (ARB) on kliiniliselt kasutusel standardravina DKD-ga patsientidel.5 Hiljuti on naatrium-glükoosi kaastransporter {6}} inhibiitorid on kasutusele võetud kui renoprotektiivsete ravimite uus klass.6,7 Kuid sõltumata nendest ravimite sekkumisest on järk-järgult halvenenud patsiendidneerufunktsioon ja nende parandamiseks on vaja uusi ravimeid, millel on uued toimemehhanismidneeru-patoloogiline seisund.Arvatakse, et toidust saadav liigne valgutarbimine kiirendab haiguse progresseerumistneerupuudulikkusindutseerides glomerulaarset hüperfiltratsiooni, ureemiliste toksiinide kogunemist ja inhibeerides glomerulaarset autofagiat.8 On teatatud, et suurenenud toiduvalkude tarbimine on positiivses korrelatsioonis lõppstaadiumisse progresseerumise suurenenud riskiga.neerupuudulikkuskroonilise neeruhaigusega patsientidel;9 on aga toiduvalgu tarbimise vähendamise terapeutiline tähtsusneerufunktsioonon endiselt vastuoluline,10 ja farmakoloogiliste sekkumiste tõhusus valkude seedimise kaskaadide reguleerimisel on ebaselge.
CISTANCHE PARANDAB neeru-/NEerupuudulikkust
Enteropeptidaas on II tüüpi transmembraanne seriinproteaas, mis ekspresseerub tugevalt enterotsüütide luminaalsel küljel kaksteistsõrmiksoole harja piiril. See muudab inaktiivse trüpsinogeeni aktiivseks trüpsiiniks, lõhustades trüpsinogeeni aktiveerimiskohas, ja seejärel aktiveerib aktiveeritud trüpsiin teisi kõhunäärmest erituvaid seedetrakti sümogeene, sealhulgas kümotrüpsinogeeni, proelastaasi ja prokarboksüpeptidaase.11–13 Need aktiveeritud ensüümid reguleerivad valkude lagunemist (aminohapete lagunemist AAs). Seega mängib enteropeptidaas võtmerolli valkude seedimisel ja AA imendumisel. SCO-792 on uudne suukaudselt saadaval olev enteropeptidaasi inhibiitor, mille inhibeeriv kontsentratsioon on pool maksimaalsest<10 nm="" against="" rat="" and="" human="" enteropeptidase="" in="" vitro.14="" in="" mouse="" models,="" enteropeptidase="" inhibition="" improves="" obesity="" and="" diabetes.15="" how="" ever,="" the="" pharmacological="" effects="" of="" enteropeptidase="" inhibition="" on=""> neerudtüsistused on suures osas teadmata. Arvestades, et enteropeptidaas on valkude seedimise ja absorptsiooniprotsessiga seotud ensüümidest kõige kaugemal ülesvoolu, võib olla kasulik uurida enteropeptidaasi inhibeerimise terapeutilist toimet DKD seisundile.Käesolevas uuringus uurisime enteropeptidaasi inhibiitori SCO-792 mõjuneerud DKD-ga loommudelil Wistari rasvunud (WF) rottidel.16 Esiteks hindasime SCO-792 metaboolset ja renoprotektiivset toimet WF-rottidel. Järgmisena hinnati AA neeldumise muutuste panust SCO-792 efektiivsusesse. Viidi läbi täiendavad katsed, et selgitada välja SCO 792 mõju glomerulaarsele autofagia aktiivsusele ja uurida SCO-792 ja ARB koosmõju.
Märksõnad:diabeedivastane ravim, diabeetiline nefropaatia, ravimite väljatöötamine; neeruhaigus; neerupuudulikkus; neeru-
MATERJALID JA MEETODID
MaterjalidKõik reaktiivid osteti ettevõttelt FUJIFILM Wako Pure ChemicalCorporation (Osaka, Jaapan), kui pole märgitud teisiti. SCO-792 sünteesis Takeda Pharmaceutical Co. Ltd (Tokyo, Jaapan). Pioglitasoonvesinikkloriid osteti ettevõttest Tokyo Chemical Industry (Tokyo, Jaapan). Irbesartaan osteti ettevõttelt LKT Laboratories, Inc. (St Paul, Minnesota).
LoomadIsased WF-rotid ja vastavad tüpiseerimata Wistar lean (WL) rotid saadi ettevõttest RABICS Ltd (Kanagawa, Jaapan). Kõik loomad peeti ruumis, kus oli kontrollitud temperatuur (23 C), niiskus (55 protsenti) ja valgustus (tuled põlesid ajavahemikus 7:00 AM–19:{5}}), millele oli vaba juurdepääs. standardsele laboratoorsele toidutoidule (CE-2; CLEA Japan, Inc., Tokyo, Jaapan) ja kraaniveele. Käesolevates uuringutes kasutatud loomahooldusprotseduurid ja loomkatsete protokollid kiitis heaks institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee (Shonan Health Innovation Park), mis on akrediteeritud Ameerika laboratoorsete loomade hooldamise akrediteerimise assotsiatsiooni poolt.
CISTANCHE PARANDAB NEERU/NEERU FUNKTSIOONI
Kahenädalane korduvannustamise uuring WF-rottidelIsased WF-rotid, vanuses 31 nädalat, algkaaluga 693,5 ± 22,5 g ja glükeeritud hemoglobiini tasemega 7,4 ± 0,4 protsenti, randomiseeriti viide rühma (vehiik, 6, 20 ja 60 mg/kg SCO-792 ja 1 mg/kg pioglitasoonvesinikkloriidi; n=7, võttes arvesse esialgset uriini albumiini ja kreatiniini suhet (UACR), glükeeritud hemoglobiini, plasma glükoos, plasmainsuliin ja kehakaal. Kontrollidena kasutati WL rotte (n=5). Rottidele manustati üks kord päevas 15 päeva jooksul suukaudselt kas vehiiklit (0,5% [w/v] metüültselluloos), SCO-792 või pioglitasoonvesinikkloriidi. Esimeseks ravipäevaks määrati päev 0. Kehakaalu ja toidutarbimist jälgiti iga 1 kuni 4 päeva järel ning väljaheited koguti 7. päeval. Vereproovid võeti enne randomiseerimist ja 14. päeval, et hinnata vere muutujaid. Uriiniproovid koguti enne randomiseerimist ning 3., 7. ja 13. päeval, et mõõta uriini muutujaid. 15. päeval,neerudkuded eraldati anesteseeritud rottidelt ja säilitati kuni kasutamiseni temperatuuril -80 °C.
Glomerulaarfiltratsiooni kiiruse mõõtmineIsased WF-rotid, vanuses 30 nädalat, randomiseeriti kahte rühma (n=7) nende esialgse glomerulaarfiltratsiooni kiiruse (GFR), UACR, glükeeritud hemoglobiini ja kehakaalu alusel ning seejärel manustati neile suukaudselt. vehiiklit (0,5 protsenti metüültselluloosi) või 60 mg/kg SCO-792 4 päeva jooksul. Kontrollidena kasutati WL rotte (n=5). GFR-i mõõdeti fluorestseiini isotiotsüanaadi (FITC)-inuliini (F3272; Sigma-Aldrich, St Louis, Missouri) abil. Soolalahuses lahustatud FITC-inuliin süstiti roti sabaveeni annuses 36 mg/kg ja veri koguti 20, 40, 60 ja 80 minutit pärast süstimist, et mõõta FITC-inuliini kontsentratsiooni. GFR arvutati FITC-inuliini kliirensi põhjal.17
AA lisamise hindamine WF rottidel24 nädala vanused isased WF-rotid randomiseeriti nelja rühma (n=5) nende esialgse UACR, glükeeritud hemoglobiini, plasma glükoosi ja kehakaalu alusel. Rotid said pärast 18 L-AA (asparagiinhape, treoniin, seriin, glutamiinhape) lisamist kas pulbrilise CE-2 dieeti või dieeti, mis sisaldas AA-de sisalduse suurenemist 51,8 protsenti (sama suhtega CE-2). hape, glütsiin, alaniin, valiin, isoleutsiin, leutsiin, türosiin, fenüülalaniin, lüsiin, histidiin, arginiin, proliin, tsüsteiin, metioniin ja trüptofaan). Rottidele manustati üks kord päevas 11 päeva jooksul suukaudselt kas vehiikulit (0,5 protsenti metüültselluloosi) või 60 mg/kg SCO- 792. Plasma AA taseme muutuste hindamiseks koguti vereproovid enne ja 3, 8 ja 13 tundi pärast SCO-792 manustamist 9. päeval. Uriiniproovid koguti 11. päeval, et mõõta UACR-i.
Glomerulaarsete autofagia markerite mõõtmineIsased WF-rotid, 29 nädala vanused, randomiseeriti kahte rühma nende UACR-i, glükeeritud hemoglobiini taseme, plasma glükoositaseme ja kehakaalu (n=7) alusel ning seejärel manustati neile suukaudset vehiiklit (0). 5 protsenti metüültselluloosi) või 60 mg/kg SCO-792. 3 tunni pärast,neerudAnesteseeritud rottidelt eraldati kuded ja seejärel glomerulid sõelumismeetodil.18 Sihtvalkude, sealhulgas LC3A/B, p62, p-S6, S6, Wilmsi kasvaja 1 (WT1) ja -aktiini tasemed glomerulid tuvastati Western blot analüüsiga.
CISTANCHE PARANDAB NEeru-/NEERUNEKTSIOONI
SCO-792 neljanädalane kombineeritud ravi irbesartaaniga WF-rottidelIsased WF-rotid, 32 nädala vanused, algkaaluga 675,7 ± 31,2 g ja glükeeritud hemoglobiiniga 7.0 protsenti ± 0,3 protsenti, randomiseeriti kuue rühma (vehiikul, {{ 9}}.02 protsenti SCO-792, 0.{{20}}5 protsenti SCO-792, 15 mg/kg irbesartaani, { {29}}.02 protsenti SCO-792 pluss 15 mg/kg irbesartaani ja 0,05 protsenti SCO-792 pluss 15 mg/kg irbesartaani; n=7) nende UACR, glükeeritud hemoglobiin, plasma glükoos ja kehakaal. WL-rotte kasutati tavaliste kontrollidena (n=5). Rottidel oli vaba juurdepääs igat ühendit sisaldavale CE-2 pulbrilisele dieedile (mass/mass: 0,02 ja 0,05 protsenti SCO-792) või ainult CE-2 pulbritoidule. Üks kord päevas manustati suukaudselt kas vehiiklit (0,5 protsenti metüültselluloosi) või irbesartaani (15 mg/kg). Veremuutujate määramiseks koguti vereproovid 28. päeval. Uriiniproovid koguti enne randomiseerimist ning 7. ja 30. päeval uriini muutujate määramiseks.Neerkoed isoleeriti tuimastatud rottidelt 33. päeval ja neid säilitati kuni kasutamiseni temperatuuril -80 °C.
Statistilised analüüsidStatistilist olulisust analüüsiti esmalt Bartletti dispersioonide homogeensuse testiga, millele järgnes Williamsi test (P > {0}}.05) ja Shirley-Williamsi test (P Väiksem või võrdne sellega). 0.{{10}}5) annusest sõltuvate uuringute puhul Dunnetti test (P > 0.05) ja Terase test (P Väiksem või võrdne 0.05) mitme võrdluse ja kontrolli korral või Tukey testiga (P > 0,05) kõigi paaride võrdluste korral. Alternatiivina analüüsiti statistilist olulisust, kasutades dispersioonide homogeensuse F-testi, millele järgnes Studenti t-test (P > 0,2) või Aspin-Welchi test (P Väiksem või võrdne 0,2). Williamsi ja Shirley-Williami testid viidi läbi, kasutades ühepoolset olulisuse taset 2,5 protsenti (0,025). Muud testid viidi läbi, kasutades kahepoolseid olulisuse tasemeid 1 protsenti (0,01) ja 5 protsenti (0,05). Et hinnata, kas kombinatsioonravil SCO-792 ja irbesartaaniga on märkimisväärsed aditiivsed või sünergilised toimed, viidi läbi kahesuunaline ANOVA, mis andis SCO-792 ja irbesartaani peamised toimed ja koostoime. Kõik andmed on esitatud kui keskmine ± SD. Meetodid väljaheite valgusisalduse kvantifitseerimiseks, vere ja uriini muutujate mõõtmiseks, geeniekspressiooni analüüsimiseks, glomeruli isoleerimiseks, Western blot analüüsiks ja mõõtmiseksneeru-kollageeni sisaldust on kirjeldatud lisas S1.
TULEMUSED
SCO{0}} parandas WF-rottide metaboolseid muutujaidEnteropeptidaasi inhibeerimise DKD-vastase potentsiaali hindamiseks manustati WF-rottidele suukaudselt SCO-792 üks kord päevas 2 nädala jooksul. WF-rotid loodi Wistar Kyoto rottide ja Zuckeri rasvrottide ristamise teel ning sobivad ideaalselt kasutamiseks DKD mudelina oma tüüpiliste metaboolsete fenotüüpide tõttu (hüperglükeemia, insuliiniresistentsus koos raske rasvumisega, progresseeruv proteinuuria alates 12 nädala vanusest16). Väljaheite valgu tase, mis on enteropeptidaasi inhibeerimise järel soolestikus vähenenud valkude seedimise farmakodünaamiline marker, suurenes SCO-792--ravi saanud rottidel annusest sõltuvalt (joonis 1A). Uuringu ajal täheldati toidutarbimise vähenemist ja kumulatiivne toidutarbimine vähenes oluliselt SCO-792 võrra (joonis 1B). Järjekindlalt oli SCO{11}}ravi saanud rottide kehakaal väiksem (joonis 1C). Diabeetilised muutujad, nagu plasma glükoosi, glükeeritud hemoglobiini, plasma insuliini ja plasma glükagooni tase langesid pärast 2-nädalast korduvat SCO-792 manustamist (joonis 1D–G). Plasma lipiidide taset langetas ka SCO-792 (joonis 1H, I).
SCO{0}} parandas WF-rottide neerumuutujaidLisaks diabeetiliste muutujate paranemisele vähendas SCO{0}} kiiresti UACR-i ja see toime püsis ka korduva annustamise ajal (joonis 2A). Seevastu jäi UACR muutumatuks rottidel, kellele manustati pioglitasooni, peroksisoomi proliferaatoriga aktiveeritud retseptori agonisti, hoolimata plasma glükoositaseme tugevast langusest.
samaväärne SCO-792 omaga (joonised 1D, 2A). Uuringu lõpusneeru-Rottidel, kellele manustati SCO-792, vähenesid fibroosimarkeri Col1a120 ja põletikumarkeri Ccl221 mRNA tasemed (joonis 2B). Kuseteedeneerudvigastusmolekul-1 (KIM-1), mis on selle biomarkerneerudtorukujuline vigastus,22 vähenes ka SCO{1}}ravi saanud rottidel (joonis 2C). GFR-i mõõtmine FITC-inuliiniga näitas WF-rottidel glomerulaarset hüperfiltratsiooni seisundit võrreldes WL-rottidega. Kuid pärast 4-päevast SCO-792 manustamist normaliseeriti WF-rottide glomerulaarne ülekoormus täielikult (joonis 2D).
AA toidulisand muutis WF-rottidel UACR vähenemise SCO{0}} võrraTäheldatud valgutaseme tõus väljaheites pärast SCO-792-ravi kinnitas, et enteropeptidaasi inhibeerimine takistas valkude seedimist (joonis 1A). Seega vähendas SCO-792 AA-de teket valkudest soolestiku luumenis. Et uurida AA omastamise rolli SCO-792 renoprotektiivses toimes, paigutati rotid, kellele manustati vehiikulit või SCO-792, vaba juurdepääsuga tavalisele toidule või AA-ga täiendatud toidule. Ootuspäraselt alandas SCO- 792 normaalsetel toiduga toidetud rottidel plasma AA üldtaset (joonis 3A, C). Kuid AA lisamine dieedile tühistas enteropeptidaasi poolt indutseeritud muutuse (joonis 3B, C). Kui normaalsete toiduga toidetud rottide puhul langetas SCO-792 eriti hargnenud ahelaga aminohapete (BCAA) (nt valiini, leutsiini ja isoleutsiini) taset plasmas, siis AA lisamine need muutused tühistas (joonis 3D–F). ). Kooskõlas täheldatud muutustega plasma AA tasemetes nõrgenes SCO-792-indutseeritud UACR vähenemine suures osas AA-ga toidulisandiga toiduga toidetud rottidel (joonis 3G).
SCO-792 aktiveeris autofagia signaaliülekande WF-rottide glomerulitesAminohapped toimivad rakusisese valgu homöostaasi peamise regulaatorina, moduleerides seega tasakaalu anaboolsete (valgusüntees) ja kataboolsete (autofagia) protsesside vahel.23 See saavutatakse AA-d tuvastavate valkude kaudu, nagu imetaja rapamütsiini (mTOR) sihtmärk ja mittederepresseeritava kinaasi üldine kontroll 2. Uurimaks, kas SCO-792 mõjutab autofagia rada glomerulites, uuriti LC3A/BI ja LC3A/B-II valkude ekspressiooni WF-rottide glomerulites.
mõõdetuna Western blot analüüsiga. LC3A/B on autofagosoomi marker, samas kui LC3A/BI muundatakse autofagia ajal C-terminaalse lipidatsiooni teel LC3A/B-II-ks. Seetõttu kasutatakse LC3A/B-II ja LC3A/BI valgu ekspressioonisuhet autofagia indikaatorina.24 Siin näitas Western blot analüüs, et SCO-792 suurendas oluliselt LC3A/B-II ja LC3A/BI suhet. LC3A/BI WF-rottide glomerulites (joonis 4A, B). Seevastu p62, alternatiivse autofagiamarkeri, mis toimetab autofagilisi substraate autofagosoomidesse ja mida autofagia lagundab,25 valgu taset vähendas SCO-792 (joonis 4A, C). Lisaks vähendas SCO-792 oluliselt S6 valgu fosforüülimise taset; see näitas mTOR signaali inaktiveerimist (joonis 4A, D). Seevastu WT1, podotsüütide markeri ja -aktiini, Western blot analüüsi laadimiskontrolli, ekspressioonitasemed rühmade vahel ei muutunud (joonis 4A, E, F).
SCO{0}} kombinatsioon irbesartaaniga vähendas täiendavalt UACR-i WF-rottidelKuna RAS-i inhibiitoreid kasutatakse laialdaselt DKD-ga patsientide standardravina, on uute DKD-vastaste ravimite puhul vajalik RAS-i inhibiitorite täiendav toime. SCO-792 ja ARB koosmõju hindamiseks SCO-792 (0.02 protsenti ja 0.05 protsenti dieedis) ja irbesartaani (15 mg/kg üks kord päevas suukaudne annus) üksi või kombinatsioonis manustati WF-rottidele 4 nädala jooksul. Huvitav oli hinnata enteropeptidaasi püsiva inhibeerimise efektiivsust haiguse muutujatele; seetõttu viidi selles uuringus läbi SCO{12}} toidulisandite manustamine. Iga rühma arvutatud SCO-792 annused (mg/kg/päevas) olid 6,81 0.02% SCO-792 rühmas, 13,10 0,05% SCO puhul -792 rühmas, 6,59 0,02% SCO-792 pluss irbesartaani rühmas ja 11,44 0,05% SCO-792 pluss irbesartaani rühmas. Kui ainult SCO-792 ja irbesartaan üksi vähendasid UACR-i, siis SCO-792 ja irbesartaani kombinatsioon vähendas UACR-i veelgi. Pärast SCO- 792 manustamist kombinatsioonis irbesartaaniga täheldati olulist aditiivset toimet UACR vähenemisele (joonis 5A, B). Seevastuirbesartaan ei mõjutanud SCO-792-ga saavutatud diabeedi- ega rasvumisevastast toimet (joonis 5C–F). Eelkõige vähendas SCO{5}} oluliseltneeru-kollageenisisaldus (joonis 5G).
ARUTELUKäesolevas uuringus hindasime uudse enteropeptidaasi inhibiitori SCO-792 mõju haigusseisundile DKD prekliinilises rotimudelis. SCO-792 suukaudne manustamine WF-rottidele leevendas albuminuuriat kohe pärast 3-päevast ravi ja see toime püsis kogu ravimi manustamisperioodi vältel. Pealegi oli see toime tõenäoliselt glükoosikontrollist sõltumatu. Lisaks väheneb fibroosi, põletiku ja torukujuliste vigastuste markerite arvneerudtäheldati SCO{0}}ravi saanud rottidel. SCO-792 doseerimine põhjustas täiendavaneerudkaitsvad toimed, sealhulgas glomerulaarse hüperfiltratsiooni leevendamine ja autofagia aktiveerimine glomerulites. SCO{0}}indutseeritud UACR vähenemist vähendas suures osas AA lisamine dieedile. Lõpuks, SCO-792 ja irbesartaani kombineerimine vähendas tõhusalt UACR-i Aminohapped on tuntud hüperfiltratsiooni indutseerijad.26 Inimestel suurendab üks valgurikas eine või AA infusioon ajutiselt GFR-i.27,28 Hüperfiltratsiooniseisund, mida põhjustab valgurikasEeldatakse, et dieet kiirendab progresseeruvat langustneerufunktsioonCKD-ga patsientidel.29 Käesolevas uuringus ilmnes WF-rottidel kõrgenenud GFR, mis viitab glomerulaarsele hüperfiltratsioonile, mis tõenäoliselt suurendab UACR-i. Kui ravi SCO-792-ga vähendas WF-rottidel plasma AA taset ja UACR-i, siis pärast AA lisamist dieedile see mõju tühistati. Lisaks normaliseeris ravi SCO-792 WF-rottidel GFR-i. Kokkuvõttes võib SCO-792-indutseeritud tsirkuleerivate AA-de vähenemine mängida rolli glomerulaarse hüperfiltratsiooni leevendamisel ja UACR-i vähendamisel WF-rottidel. Lisaks parandas SCO-792 fibroosi, põletiku ja tubulaarsete vigastuste markereidneerud.Liigne valk glomerulaarfiltraadis võib indutseeridaneeru-põletik ja interstitsiaalne fibroos proksimaalsetes tubulaarrakkudes. 4 Albuminuuria leevendamine võib seega kaitsta glomerulaar- janeeru-SCO{0}}ravitud rottide torukujulised rakud haiguse progresseerumisestneeru-kahjustus.
CISTANCHE PARANDAB NEERU/NEERU VALU
LC3AB-II ja LC3AB-I suhte ja p62 valgu taseme muutused näitasid SCO-792-indutseeritud autofagia aktivatsiooni glomerulaarfraktsioonis.neerudkudedes WF-rottidel. Huvitaval kombel alandas SCO{0}} WF-rottidel järsult plasma BCAA taset. BCAA-d, eriti leutsiin, on mTOR-i signaaliülekandega autofagia raja võtmeregulaatorid ja pärsivad autofagosoomide moodustumist.23,30 Tegelikult pärssis SCO{{ tugevalt S6 valgu, mis on mTOR-i allavoolu signaalimolekul, fosforüülimist. 4}}, mis näitab, et enteropeptidaasi inhibeerimise tõttu vähenenud plasma BCAA tase võib mTOR raja inaktiveerimise kaudu olla seotud glomerulaarse autofagia aktiveerimisega. Autofagia on üldiselt reaktsioon toitainete puudusele, kuid see on seotud ka mitmesuguste füsioloogiliste protsesside ja haiguste arenguga, sealhulgasneeruhaigused.31 Glomerulites on autofagia vajalik podotsüütide kaitsmiseks endoplasmaatilise retikulumi stressi eest ja podotsüütide funktsiooni säilitamiseks ning seega on podotsüütides kõrge autofagia aktiivsuse baastase.32 Podotsüüdispetsiifilise autofagia kahjustus põhjustab proteinuuria, mis näitab autofagia keskset rolli glomerulaarfiltratsiooni masinavärgis.32,33 Seega võib glomerulaarse autofagia aktiveerimine olla üks AA-ga seotud mehhanisme, mille abil SCO-792 parandas albuminuuriat WF-rottidel.
On teatatud, et krooniline hüperglükeemia osaleb DKD tekkepõhjuses, indutseerides polüooliraja aktivatsiooni, arenenud glükoosi lõppproduktide teket, oksüdatiivset stressi ja põletikku.34 Käesolevas uuringus ei suutnud pioglitasoon, mis parandas hüperglükeemiat, UACR-i vähendada. WF rottidel. See viitab sellele, et hüperglükeemia paranemine ei ole selles mudelis SCO{1}} kiires UACR-i vähendamises peamine tegur. RAS on selle progresseerumise jaoks ülioluline teeneerupuudulikkus, ja selle ARB-dega pärssimise kasulik mõju DKD-ga patsientidele on hästi tõestatud.5 Kombineeritud uuring näitas, et aeg UACR-i languse alguseni on SCO-792 ja irbesartaani puhul erinev ning need ühendid toimisid aditiivselt. UACR parandamiseks WF-rottidel. Need tulemused näitavad, et SCO-792 albuminuuriavastase toime aluseks olev mehhanism on RAS-ist sõltumatu. WF-rotid on normotensiivsed ja SCO{6}} ei mõjutanud WF-rottide vererõhku; seega ei pruugi SCO-792 täheldatud mõju vererõhu kontrollist sõltuda (joonis S1). Seetõttu võib SCO-792 kasutada täiendava ravina RAS-i inhibiitoritele mis tahes tulevases kliinilises keskkonnas. Lisaks on oletatud, et enteropeptidaasi püsiv inhibeerimine on haiguste muutujate ravimisel tõhusam, kuna SCO-792 dieediga kombineeritud manustamine näitas väiksema ööpäevase annuse korral tugevamat terapeutilist efektiivsust kui üks kord päevas suukaudne manustamine.
Nagu eespool mainitud, langes WF-rottidel SCO{0}} AA-de hulgas eriti plasma BCAA taset. Seosed metaboolsete haiguste ja BCAA vahel on laialdaselt korrelatsioonis insuliiniresistentsusega.35 Lisaks põhjustab valkude allaneelamine inimestel lihaste insuliiniresistentsust.36 Seetõttu võib SCO-792 manustamisest põhjustatud plasma BCAA vähenemine parandada insuliiniresistentsust ja leevendada. diabeetiline fenotüüp WF rottidel. See on kooskõlas varasemate diabeediga hiirtega tehtud uuringutulemustega, mis näitavad, et SCO-792 suurendas hüperinsulineemilise-euglükeemilise klambri uuringus insuliinitundlikkust (peamiselt lihastes).15 Veelgi enam, AA taseme langus SCO{{7} poolt. } võib osaleda plasma glükagooni vähenemises glükagooni ja AA-de vastastikuse tagasiside tsükli kaudu.37 Huvitaval kombel täheldati diabeediga seotud muutujate tugevat paranemist isegi annuse korral, millel oli 2-nädalal korduv mõju kehakaalule vaid vähesel määral. SCO doseerimisuuring-792. See näitab, et AA-st sõltuvad mehhanismid, sealhulgas insuliiniresistentsuse paranemine ja plasma glükagooni taseme langus, on tõenäoliselt seotud SCO-792 diabeedivastase toimega lisaks kehakaalu langusest sõltuvale toimele.
Käesoleva uuringu peamiseks piiranguks on see, et SCO-792 mõju DKD hilisele faasile ei hinnatud. WF-rottidel esines albuminuuria koos kõrgenenud GFR-iga – haigusseisund, mis esindab DKD suhteliselt varast faasi. Selle piirangu lahendamiseks on pikaajalise hindamiseks vaja muid kroonilise neeruhaiguse mudeleid, mis näitavad GFR-i järkjärgulist langust.neeru-tulemus pärast SCO{0}}-ravi. Viimasel ajal on soolestik –neerudtelg on muutunud üheks huvipakkuvaks teemaks ning soolestiku mikrobiota ja selle metaboliitide seosneeruhaigusedArvestades enteropeptidaasi füsioloogilist rolli, võib selle inhibeerimine moduleerida soolestiku mikrobiota koostist. Seetõttu on vaja ka täiendavaid analüüse, mis keskenduvad SCO{1}}indutseeritud muutustele mikrobiotas.
Kokkuvõtteks võib öelda, et see on esimene uuring, mis näitab, et enteropeptidaasi inhibiitor SCO{0}} parandab tõhusaltneerudmuutujad DKD rotimudelites. Valkude lagunemise pärssimine soolestikus, millele järgneb vähenenud AA imendumine, on tõenäoliselt SCO-792 renoprotektiivse toime peamine viis, mis leevendab glomerulaarset hüperfiltratsiooni ja aktiveerib autofagia glomerulites. Kokkuvõttes näitavad tulemused, et SCO{1}} võib olla uudne ravivõimalus DKD-ga patsientidele.