Cistanche Deserticola mõju ägedale kopsukahjustusele sepsisega rottidel

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

[Abstraktne]Eesmärk: uurida selle mõjuCistanche deserticolaägedalkopsuvigastus(ALI) sepsisega rottidel. Meetodid: Sepsise mudel tehti umbsoole ligeerimise ja punktsiooniga. Viidi läbi histopatoloogilised uuringud ja mõõdeti ALI bioloogilisi markereid. Tulemused: Valgusmikroskoobi all soolalahuse rühmas esines ödeemkopsude vaheruum, suur hulk erütrotsüüte ja neutrofiile ning plasmavalku alveolaarõõnsustes. Thekopsumärg/kuivmass, neutrofiilide määr ja valgusisaldus kopsualveolaarse loputusvedeliku kopsuveresoonte läbilaskvus ja kopsualveolaarne läbilaskvus ning MDA, SOD ja MPO suurenesid vastavalt. Grupis koosCistanche deserticolaravi korral olid need ALI indeksid oluliselt madalamad kui soolalahusega rühmas.

Järeldus: Cistanche deserticolaSellel on suurepärane mõju ALI-le sepsisega rottidel. Terapeutiline mehhanism seisneb tõenäoliselt neutrofiilide ja oksüdatiivsete vabade radikaalide pärssimises.

【Võtmesõnad】Sepsis; Äge kopsukahjustus; Cistanche deserticola

Sepsis on kliiniline hädaolukord ja kriitiline haigus ning tõhusate ravi ravimite otsimine on kliinilistes ja alusuuringutes alati olnud suur probleem. Traditsiooniline hiina meditsiini sepsise patogenees on õigluse puudumine ja kurjuse üleküllus. Keha kurja õitsengu ründav teraapia on üks tõhusaid ravimeetmeid.Cistancheon traditsiooniline toonik Hiina meditsiin. Farmakoloogilised uuringud on kinnitanud, et sellel on kaitsefunktsioonid, nagu näiteks raku DNA sünteesi kiiruse suurendamine ja hapnikuvabade radikaalide vastupanu. Autor jälgib eksperimentaalselt selle mõjuCistanche kopsuprobleemide kahjustuse kohtasepsise korral, et pakkuda tõhusat uurimistööd sepsise raviks.

Cistanche Echinacoside ravib kopsuhaigusi

1 Materjal ja meetodid

1. 1 LoomTervis 40 isast 5D rotti kaaluga 200–250 g, saadud Huazhongi teadus- ja tehnoloogiaülikooli katseloomade keskusest, kvaliteedikontrolli number: TJLA-2008-1670, jaotati juhuslikult 3 rühma: 8 normaalse soolalahuse rühm, Ig/ Seal oli 12 rotti ml baklažaanipasta rühmas ja 12 rotti 5 g/mlCistancheGrupp. Katseloomadele anti vastavaid ravimeid rutiinse sondiga 15 päeva jooksul kaks korda päevas (Cistanchedeserticola ekstrakti andis selle haigla traditsioonilise hiina meditsiini ettevalmistuskabinet) ja katseloomadel kasutati annust 200 mg/kg vastavalt kirjanduses toodud meetodile U] 12 minutit pärast umbsoole ligeerimist ja perforatsiooni. Näidiste kogu.

1.2 Roti kopsude histoloogiline uuring.Võtke väike kogus looma vasakust labastkopsuigast rühmast kinnitage see 10-protsendilise formaldehüüdiga, sisestage sektsioon parafiiniga ja HE värvid, jälgige tavalise optilise mikroskoobiga ja võtke selle põhjalkopsuprobleem teha 1 mm3 25 jaoks. See fikseeriti glutaaraldehüüdi protsendi lahuses, seejärel fikseeriti 1 protsendilises tetroksiidi lahuses, dehüdreeriti etanooli ja atsetooniga, sisestati Epon 81-sse, valmistati üliõhukesed sektsioonid, värviti uraani pliiga ja vaadeldi ülekandeelektroniga mikroskoop.

1.3 Roti kopsuprobleemi märja/kuivmassi suhte, rakkude arvu suhte määramine alveolaarses loputusvedelikus ja valgusisalduse kaalusuhe.Teisele rottide rühmale tehti pärast torakotoomiat alveoolide loputus ning loputusvedelikule tehti mikroskoobi all rakkude arv ja rakkude klassifikatsioon. Valgusisalduse määramiseks ja arvutamiseks kasutatakse Coomassie briljantsinise meetoditkopsuläbilaskvusindeks (alveolaarse loputusvedeliku valk/plasma valk, LPI).

1.4 Muutused kopsuveresoonkonna läbilaskvuses (PVP) rottidelZhou jt poolt kasutusele võetud meetodi kohaselt. (2), pärast manustamist tehti iga rühma loomadele umbsoole ligeerimine ja perforatsioon ning rindkere avamiseks ja kopsude eemaldamiseks kasutati 50 mg/kg lantaani reieveeni. Eemaldage ümbritsevad probleemid, leotagekopsudformamiidi lahuses (formamiidi kogus on 20mg/100g kehamassi kohta), inkubeeriti 45-50T inkubaatoris 72h, oodake, kuni kõik probleemses olevad pigmendid leostuvad, eemaldage probleemid, tsentrifuugige ja võtke supernatant. Kasutage ultraviolettkiirguse spektrofotomeetrit kolorimeetria tegemiseks lainepikkusel 620 nm ja PVP muutuse määramiseks arvutage etanoolisisaldus standardkõvera järgi.

1.5 Malondialdehüüdi (MDA) määramine roti kopsuprobleemisMDA aktiivsuse määramiseks kasutati tiobarbituurhappe (TBA) meetodit. Lisage 4 ml 1,67 mol/l väävelhapet. 0.541 protsenti fosfoonhapet 50 ml uuritavale proovile, segage hästi, tsentrifuugige kiirusel 3000 p/min 10 minutit ja töödelge sade veel kord ülaltoodud viisil, seejärel lisage 1 ml topeltdestilleeritud vett, 1 ml TBA lahust, 95% veevaba vannis 60 minutit, ekstraheerimine 5 ml n-butanooliga, standardina tetraetoksüpropaan, lõppkontsentratsioon lnmol/l, fluorestsentsspektrofotomeeter lainepikkusel 532 nm neeldumise mõõtmiseks.

1.6 Superoksiidi dismutaasi (SOD) määramine roti kopsuprobleemidesKirjanduses [4] esitatud meetodi kohaselt määrati SOD aktiivsus Huangpuyini oksüdaasi meetodil (komplekt ostetud Nanjing Jianchengi bioloogilise tehnika instituudist).

1.7 Müeloperoksidaasi (MPO) määramine rottidelkopsuprobleem.Kopsuprobleemide korral peske jääkverd nii palju kui võimalik isotoonilises soolalahuses ja asetage see fosfaatpuhvrisse, mis sisaldab {{0}},5 protsenti tsetüültrimetüülbromiidi (PH6,0). Valmistage 5 protsenti homogenaadist, ja toimige vastavalt komplekti juhistele.

1.8 Statistilised meetodidKasutage SPSS-i statistikatarkvara ja mõõtke andmeid (x±s) kujul, kasutades t-testi ja X2 testi.

Cistanche

2 tulemust

2.1 Märja/kuiva massi suhte võrdluskopsuProbleemid, rakkude arvu suhe ja valgusisaldus alveolaarses loputusvedelikus igas rühmas on näidatud tabelis 1.kopsusoolalahuse rühmas oli märgade ja kuivade massi suhe oluliselt kõrgem kui aastalCistancherühm (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancherühmas olid oluliselt madalamad kui soolalahuse rühmas (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Tabel 1. Kopsuprobleemide märja/kuivmassi suhte ning rakkude arvu suhte ja valgusisalduse võrdlus iga rühma rottide alveolaarses loputusvedelikus (X ± S)

Võrreldes tavalise soolalahuse rühmaga, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2. Iga rühma rottide kopsuprobleemide morfoloogiliste muutuste võrdlus. Üldine tähelepanek:kopsudsoolalahuse rühmas olid märgatavalt suurenenud ja tumepunased, erineva raskusastmega ülekoormus ja tursed pinnal ning suur hulk kopsuinfarkte serval; kopsudCistancherühm olid helepunased, pealispinnaga Kerge ummikud ja tursed, ilmset kopsuinfarkti ei esinenud. Valgusmikroskoobi vaatlus näitas, et soolalahuse rühmas esines alveoolide ja kopsude interstitsiaalne ummistus ja tursed, suur hulk difuusseid neutrofiilide infiltratsioone alveolaarõõnes, mõningane abstsessi moodustumine ning erineva raskusastmega atelektaas, nekroos ja kompenseeriv emfüseem. , Trombide jms läbipaistva membraani moodustumine. Eespool nimetatud kahjustused Cistanche rühmas vähenesid oluliselt. Soolalahuse rühmas alveolaarsed epiteelirakud paisusid, lamellkehad tühjenesid silmnähtavalt, tekkisid suured vakuoolid, kapillaaride endoteelirakud paisusid, endoteelirakud said pidevalt vigastada, rakkudevaheline ruum laienes, kapillaarid ja alveolaarsed alusmembraanid olid lahti ja laienenud. Ebakorrapärane paksenemine, ebaühtlane paksus. Cistanche rühmas ei olnud alveolaarsed epiteelirakud paistes, lamellkehade tühjenemine vähenes, moodustunud vakuoolide arv oli väike, ühendus kapillaaride endoteelirakkude vahel oli normilähedane ning basaalmembraan oli veidi lahti ja ebakorrapäraselt paksenenud. Võrreldes Ig / niL cistanche rühmaga, oli 5 g / ml cistanche rühmas kopsuprobleemide morfoloogilisi muutusi väiksem ja kopsukahjustuse aste oli kergem.

2.3 Iga rühma rottide LPI ja PVP võrdlus on toodud tabelis 2. LPI ja PVP soolalahuse rühmas olid oluliselt kõrgemad kui Cistanche rühmas (PV0.05 või 0,01). ). Cistanche'i rühma LPI ja PVP olid madalamad, millel oli märkimisväärne annuse ja toime suhe.

2.4 MDA.SOD.MPO aktiivsuse võrdluskopsuiga rühma rottide probleemid on näidatud tabelis 3. MDA sisaldus vereskopsusoolalahuse rühma probleem oli oluliselt kõrgem kuiCistancherühmas, samas kui SOD aktiivsus ja MPO aktiivsus Cistanche'i rühma kopsuprobleemide korral suurenesid oluliselt (F<0.05 or="">

3 Arutelu

Mitme organi puudulikkus on sepsise hilises staadiumis pöördumatu seisundi ja kõrge suremuse algpõhjus (5). Elundite funktsiooni kaitsmine on sepsise kõrge kliinilise suremuse vähendamisel väga oluline. Kops on mitme organi puudulikkuse esimene organ. 1/3 sepsisega patsientidest sureb ägeda kopsukahjustuse (ALI) ja ägeda respiratoorse distressi sündroomi (ARDS) tõttu. ALI peamine patofüsioloogiline mehhanism on suure hulga neutrofiilide kogunemine kopsuprobleemidesse ning see aktiveerib ja kleepub veresoonte endoteelirakkudele. Samal ajal suureneb üksikuid elektrone ülekandva redutseeritud koensüüm II oksüdaasi kontsentratsioon, põhjustades hingamispurskeid, tekitades suures koguses hapnikuvabu radikaale ning põhjustades tugeva oksüdatsiooni kaudu rakumembraanide ja membraanistruktuuride kahjustusi ja talitlust. Takistused⑹. Lipiidperoksiid peegeldab hapniku vabade radikaalide muutumist probleemis ja on otseselt seotud kopsukahjustuse astmega (7). Organismi ensümaatilises ja mitteensümaatilises radikaalivastases oksüdatsioonisüsteemis säilitab SOD aktiivsus hea korrelatsiooni probleemse kahjustuse astmega ⑺. Võrreldes füsioloogilise soolalahuse rühmaga näitasid Cistanche rühma MDA ja SOD aktiivsused statistiliselt olulisi erinevusi. Cistanche'i funktsioonid on immuunfunktsiooni tugevdamine, vananemisvastane toime ja raku DNA sünteesi kiiruse suurendamine. Katsetulemused näitasid, et Cistanche rühma kopsukoefitsient, PLT, alveolaarse loputusvedeliku neutrofiilide suhe ja kopsuveresoonte läbilaskvus vähenesid oluliselt, kopsuprobleemi MDA aktiivsus vähenes, SOD suurenes oluliselt ja MPO aktiivsus vähenes. Samal ajal näitas morfoloogiline vaatlus, et kopsuprobleemide kahjustuse aste oli oluliselt vähenenud, neutrofiilide infiltratsioon vähenes ja 5 g/ml Cistanche rühmas oli kopsuvigastusi vähem kui Ig/ml Cistanche rühmas ning see oli hea. annuse ja toime suhe. See viitab sellele, et Cistanche'il on ALI-le märkimisväärne kaitsev toime. Mehhanism võib olla: (1) inhibeerida põletikuliste rakkude migratsioonikopsud, vähendada neutrofiilide ja teiste aktiveeritud rakkude poolt toodetud hapniku vabu radikaale nii, et biokile oleks kaitstud; (2) soodustab nukleiinhapete ja valkude sünteesi ning kaitseb kopsukahjustuste eest. (3) Suurendage fagotsüütide immuunfunktsiooni ja vähendagekopsuendotoksiini põhjustatud probleemsed kahjustused. Katsetulemused annavad eksperimentaalse aluse ägeda kopsukahjustuse raviks kliinilise sepsise korral organismi tugevdamise ja defitsiidi tugevdamise kaudu.

viited

[1] Jin Huiming. Sepsise mudel pärast pimesoole ligeerimist ja perforatsiooni [J]. Hiina patofüsioloogia ajakiri "990, 6 (2): 126–127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA jt. Trombotsüüte aktiveeriva faktori roll pankreatiidiga seotud ägedas kopsukahjustuses rottidel [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Kaasaegse meditsiini eksperimentaalsed meetodid [M]. Peking: Rahvameditsiini kirjastus, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Kaasaegne kliiniline biokeemiline laboriteadus [M]. Peking: People's Military Medical Press, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Šokiuuringud [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, Hall JB. Samsel RW. Endotoksiin inimese haigustes, osa 2 Endotoksiinivastaste ravimite bioloogiline toime ja kliiniline hinnang[J]