Ramipriili mõju neerudele, kopsudele ja südamele ACE2 diabeediga hiirte mudelis
Mar 28, 2022
ABSTRAKTNETaust: raske ägeda respiratoorse sündroomi koroonaviirus 2 (SARS-CoV-2) on praeguse 2019. aasta koroonaviirushaiguse (COVID-19) põhjustaja. Selle nakkuse peamine organ on kops ja viirus kasutab sihtrakkudesse sisenemiseks retseptorina angiotensiini konverteerivat ensüümi 2 (ACE2). Sellega seoses tõstatati vaidlus reniin-angiotensiini süsteemi (RAAS) blokaatorite kasutamise üle, kuna need ravimid võivad suurendada ACE2 ekspressiooni teatud kudedes ja potentsiaalselt suurendada SARS-CoV{11}} infektsiooni riski. See kehtib eriti diabeediga patsientide kohta, kuna diabeet on COVID-i riskitegur{12}}. Meetodid: 12-nädala vanuseid diabeediga hiiri (db/db) raviti ramipriili või vehiikli kontrolliga 8 nädalat. Kontrollidena kaasati mittediabeetilised db/m hiired. ACE2 ekspressiooni ja aktiivsust uuriti kopsudes,neerudja nende loomade südamed. Tulemused:NeerACE2 aktiivsus suurenes db/db hiirtel võrreldes db/m-ga (143,2 protsenti ± 23 protsenti vs 100 protsenti ± 22,3 protsenti, p=0,004), samas kui ramipriilil ei olnud olulist mõju. Kopsudes ei leitud ACE2-s erinevusi, kui võrrelda db/db hiiri db/m-ga ja ramipriilil ei olnud samuti olulist mõju. Südames vähendas diabeet ACE2 aktiivsust (83 protsenti ± 16,8 protsenti, vs 100 protsenti ± 23,1 protsenti p=0.02) ja ramipriil suurendas oluliselt ACE2 väärtust (83 protsenti ± 16,8 protsenti vs 98,2 protsenti ± 15 protsenti, p=0.04). Järeldused: II tüüpi diabeedi hiiremudelis ei avaldanud ramipriilil olulist mõju ACE2 aktiivsusele kummaskineerudvõi kopsudes. Seetõttu on ebatõenäoline, et RAAS-i blokaatorid või vähemalt angiotensiini konverteeriva ensüümi inhibiitorid suurendavad AKE2 suurendamise kaudu SARS-CoV-2-nakkuse riski.
Märksõnad:COVID-19; Diabeet; RAAS blokaad; Kopsu; neeruhaigused; neerud
CISTANCHE PARANDAB NEERU-/NEERUHAIGUST
Sissejuhatus2019. aasta detsembris Hiinas Wuhanis alanud raske ägeda respiratoorse sündroomi koroonaviirus 2 (SARS-CoV-2) põhjustatud pandeemia on viinud ülemaailmse sanitaarkriisini. Kops on koronaviirushaiguse-19 (COVID-19) peamine kahjustatud organ. SARS-CoV-2 kasutab ühe retseptorina sihtrakkudesse sisenemiseks transmembraanset valku angiotensiini konverteerivat ensüümi 2 (ACE2) (Hoffmann et al., 2020), mis on sama omadus kui SARS-CoV (viirus, mis põhjustas 2002. aastal SARSi epideemia) (Li et al., 2003). ACE2 on karboksüpeptidaas, mis muudab angiotensiin-I (Ang-I) ja angiotensiin-II (Ang-II) angiotensiiniks-1-9 (Ang-1-9) ja angiotensiiniks-1-7 (Ang{{23). }}), vastavalt. See ensüüm on osa reniin-angiotensiin-aldosterooni süsteemi (RAAS) alternatiivsest rajast. Selle aktiveerimisel on iseenesest veresooni laiendav toime ja see reguleerib negatiivselt RAAS-i (vasokonstriktor) klassikalist õla (Obukhov et al., 2020; Romero et al., 2015). ACE2 ekspresseerub laialdaselt proksimaalsetes tubulaarsetes rakkudesneerud(Lely et al., 2004). Vähemal määral väljendub see ka kopsudes (2. tüüpi pneumotsüütides) (Hamming et al., 2004; Serfozo et al., 2020) ja südames (kardiomüotsüütides) (Oudit et al., 2009). 2002. aasta esimesest SARS-CoV pandeemiast saadud ülevaated näitasid, et SARS-CoV infektsioon põhjustas ACE2 ekspressiooni vähenemise kopsudes. Ägeda kopsukahjustuse korral on ACE2 puudulikkust seostatud suurenenud koekahjustusega, mida võib seostada RAAS-i vasokonstriktoriga (ACE/Ang-II/angiotensiin-II 1. tüüpi retseptori telg) üleaktiveerimisega (Kuba et al. , 2006). Seetõttu näib, et RAAS mängib olulist rolli SARS-CoV{15}} infektsiooniga seotud kopsukahjustuse raskusastmes. Lisaks täheldatakse RAAS-i dereguleerimist klassikaliselt diabeedi korral ja muutused ACE2 ekspressioonis on tuvastatudneerudja diabeedihaigete süda (Reich et al., 2008). Metaanalüüsi andmed on näidanud, et SARS-CoV-2-nakkusega patsientidel ei esine diabeeti sagedamini, kuigi diabeediga patsientidel on suurem risk haigestuda SARS-CoV-2-nakkuse rasketesse vormidesse ja tulemused on halvemad. (Fadini et al., 2020). Ligikaudu 40 protsenti 2. tüüpi diabeediga patsientidest on hüpertensiivsed ("Hypertension in diabetes study (HDS): I. Prevalence of hypertension in newly presenting 2. tüüpi diabeeti põdevatel patsientidel ja seos kardiovaskulaarsete ja diabeetiliste tüsistuste riskifaktoritega", 1993) ja on seetõttu. ravitakse RAAS-i blokaatoritega: angiotensiini konverteeriva ensüümi inhibiitorid (ACE) või angiotensiin-II 1. tüüpi retseptori blokaatorid (ARB). Lisaks kasutatakse neid ravimeid laialdaselt ka mittediabeetilise hüpertensiooni ja proteinuuria raviksneeruhaigused(García-Carro jt, 2019).
COVID{0}} pandeemia esimese laine ajal tekkis RAAS-i blokaatorite kasutamise üle vaidlus, kuna mõned eksperimentaalsete mudelite uuringud on näidanud, et nende ravimitega ravi suurendas ACE2 ekspressiooni südamekoes (Ferrario et al., 2005). Ishiyama jt, 2004; Ocaranza jt, 2006) janeeru-veresoonkond (Soler et al., 2009). Nende prekliiniliste tõendite tõttu on oletatud, et ravi RAAS-i blokaatoritega võib suurendada vastuvõtlikkust SARS-CoV-2 infektsioonile, tekitades paradoksi, kuna suurenenud ACE2 taset peetakse tavaliselt kudesid kaitsvaks (Aleksova et al., 2020). Sparks jt, 2020; Wang jt, 2020). Vaatamata eelnimetatud uuringute tulemustele (Ferrario et al., 2005; Ishiyama et al., 2004; Ocaranza et al., 2006; Soler et al., 2009) ei ole piisavalt tõendeid kinnitamaks, et need ravimid soodustavad ACE2 ekspressiooni. teised sarnaseid eksperimentaalseid mudeleid kasutavad autorid ei ole täheldanud RAAS-i blokaatorite poolt indutseeritud ACE2 modulatsiooni (Burchill et al., 2012; Burrell et al., 2005). Lisaks on RAAS-i blokaatorite mõju kopsude ACE2 modulatsioonile vähe hinnatud. Hiljutises aruandes kirjeldasid Wysocki ja kaastöötajad ACE2 modulatsioonineerudja RAAS-i blokaatoritega (telmisataan või kaptopriil) ravitud hiirte kopsud (C57BLKS/J) (Wysocki et al., 2020). Siin uurime ACEi (ramipriili) mõjuneerud, kopsu ja südame ACE2 2. tüüpi diabeedi hiiremudelis.
CISTANCHE PARANDAB NEeru-/NEERUNEKTSIOONI
2. Materjalid ja meetodid
2.1.Protseduurid loomadegaKaheksa nädala vanused isased leptiini retseptori puudulikkusega diabeetilised hiired (db/db) ja mittediabeetilised heterosügootsed pesakonnakaaslased (db/ plus ) osteti ettevõttelt Charles River (BKS.Cg-Dock7m plus / plus Lepr"J. Strain Code: 607 ).Hiired majutati maksimaalselt 4-liikmelistes rühmades puuri kohta, võimaldades ad libitum juurdepääsu tavalistele hiirtele Chow ja veele 12-tunnise valguse ja 12-tunnise pimeduse tsükli all. 4 nädala pärast (12-nädalased hiired) rühma db/db (n =7) raviti 8 nädala jooksul joogivees (20 mg/l) lahjendatud ramipriiliga (8 mg/kg/päevas). Vehik db/db (n=7 Kontrollidena kasutati )ja db/m (n=7). Kaalu ja veresuhkru taset jälgiti kord kaks korda nädalas ning vererõhku enne ja pärast ravi (vt täiendavaid meetodeid). Pärast raviperioodi loomad surmati naatriumi all. Seejärel perfuseeriti hiiri 1x külma PBS-ga ja südame punktsiooniga saadi täisveri. Vereproovid koguti tuubidesse koos hüübimisaktivaatori geeliga (41.1378.005, Sarstedt, Saksamaa), et saada s. erum. Pärast seda,neerud,süda ja kops eemaldati, külmutati vedelas lämmastikus ja hoiti kuni kasutamiseni temperatuuril -80 kraadi C. Lisaks osaneerudja süda fikseeriti histoloogilisteks analüüsideks 10% formaliinis ja parafiinis. Katseprotokolli kiitsid heaks Vall d'Hebroni Uurimisinstituudi (47.18 CEEA) loomkatsete eetikakomiteed. Kõik protseduurid viidi läbi vastavalt Generalitat de Catalunya juhistele Euroopa Ülemkogu kaitse- ja kaitsedirektiivide raames. teadusuuringuteks ja muudel teaduslikel eesmärkidel kasutatavate loomade eest hoolitsemine (2010/63/EL).
2.2. ACE2 analüüsAnalüüsiti ACE2 geeni ja valgu ekspressiooni, samuti ACE2 aktiivsustneerud, kopsu- ja südameekstraktid. Seerumis hinnati ainult ACE2 aktiivsust. ACE2 geeni ekspressiooni mõõdeti RT-qPCR abil ja suhteliseks kvantifitseerimiseks kasutati A△Cr meetodit, kasutades majapidamisgeenina hüpoksantiini fosforibosüültransferaasi 1 (HPRT). ACE2 valgu taset hinnati Western blot meetodil ja ACE2 aktiivsus määrati fluorestseeruva ensümaatilise testiga, kasutades ACE2-kustutatud fluorogeenset substraati (Mca-Ala-Pro-Lys (Dnp)-OH: Enzo Life-Sciences), nagu kirjeldatud. varem(Riera et al.2016). Lisaks onneerudja südames tuvastasime ACE2 immunohistokeemia abil. Metoodika on üksikasjalikult kirjeldatud lisameetodites.
2.3. Statistilised analüüsidNormaaljaotust kontrolliti, võrreldes meie andmeid prognoositud normaaljaotusega kvant-kvantil (QQ) graafiku abil ja kinnitati normaalsuse testidega (Shapiro-Wilk ja/või Kolmogorov-Smirnov). Rühmi võrreldi (db/m vs db/db). ja db/db vs db/db pluss Ramipri) Welchi t-testidega, kui normaalsus oli täidetud, või Mann-Whitney testiga, kui andmed järgisid mittenormaalset jaotust. Andmed on väljendatud keskmisena ± standardhälbe (SD). P-väärtused on üksikasjalikud, et hinnata võrdluste usaldusväärsust, ja statistilist olulisust võeti arvesse, kui p on väiksem kui 0,05 või sellega võrdne. Kõik statistilised analüüsid ja graafikud viidi läbi GraphPad Prism versiooniga 8.2.1.
3. Tulemused
3.1. Ramipriil vähendab db/db hiirtel vererõhkuKäesoleva uuringu lõppeesmärk oli hinnata (1) kuidas diabeetiline kontekst moduleerubneeru-, kopsu- ja südame ACE2 (SARS-CoV-2 retseptor sihtrakkude nakatamiseks) ja (2) kas ACEi-ravi võib muuta ACE2 käitumist diabeedi korral. Sel eesmärgil raviti 12-nädalaseid diabeediga hiiri (db/db) 8 nädala jooksul ramipriiliga (8 mg/kg/päevas), ACEi-ga. Kontrollidena kaasati kandja db/db ja mittediabeetilised hiired (db/m). Nagu oodatud, ilmnes kõigil diabeetilistel hiirtel, nii ramipriili kui ka vehiikliga ravitud, katse lõpus hüperglükeemia ja suurenenud kaal võrreldes todb/m hiirtega (tabel 1). Meie eksperimentaalses keskkonnas kujutasid db/db hiired süstoolse ja diastoolse vererõhu langust võrreldes db/m kontrollhiirtega (vt tabel 1). Ootuspäraselt langetas ramipriili manustamine 8 nädala jooksul märkimisväärselt süstoolset vererõhku võrreldes vehiikli db/db ja/või db/m rühmaga (tabel 1), mis näitab, et ravi ramipriiliga oli efektiivne.
3.2. ACE2 on suurenenud db/db hiirte neerudes, mida ramipriil ei muutnudUurisime ACE2 modulatsiooni aastalneeruddb/m, vehiikulist db/db ja db/db hiirtest, keda raviti ramipriiliga, kasutades kahte lähenemist: (1) ACE2 geeni ekspressioon qPCR abil ja (2) ACE2 aktiivsuse test, kasutades fluorestseeruvat substraati. Vehiiklit sisaldavatel db/db hiirtel oli suurenenud neerude ACE2 geeniekspressioon võrreldes db/m(1.011 ± 0.16 vs 1582 ± 0.18, p<0.0001), this="" effect="">
vastupidine ramipriili manustamisega (1,280 ± 0,18, p=0,01) (joonis 1, A). Neerude ACE2 aktiivsus (100 protsenti ± 14,2 protsenti vs 114 protsenti ± 31,9 protsenti, p=0.2) kaldus samuti suurenema vehiikulis db/db, kuid ramipriil ei muutnud selle aktiivsust (114 protsenti ± 31,9 protsenti vs. 109,3 protsenti ± 18,6 protsenti) (joonis 1D)). Membraaniga rikastatud valguekstraktides ilmnes, et db/db loomadel oli ACE2 aktiivsus suurenenud võrreldes db/m-ga (100 protsenti ± 22,3 protsenti vs 143,2 protsenti ± 23,1 protsenti, p=0,004) ja jällegi, ramipriil ei muutnud ACE2 aktiivsustneerudmembraaniga rikastatud ekstraktid (joonis 2A). Aastalneerudkoelõikudes paiknes ACE2 ekspressioon torukujuliste rakkude pintsli piiril ja värvumine oli märgatavam db/db-s võrreldes db/m-ga (joonis 3). Me ei täheldanud suuri muutusi ACE2 jaotusesneerudramipriiliga ravitud loomadest, võrreldes ravimata db/db-ga (joonis 3).
3.3. Ramipriil ei muutnud kopsu ACE2-d db/db hiirtel. Kopsudes kasutasime sama lähenemisviisi kuineerudACE2 uurimiseks. Me ei leidnud mingeid erinevusi db/m ja kandja db/db vahel ACE2 geeniekspressiooni osas (joonis 1, B), mis on peamiselt seotud ACE2 mRNA ekspressiooni suure varieeruvusega (0,97 ± {{6}). },8 vs 1.{10}}7 ± 0,71, p=0,63). Me ei suutnud leida erinevusi kopsude ja ACE2 aktiivsuse vahel (ega ka valgu koguekstraktides ega membraaniga rikastatud ekstraktides) (joonised 1E ja 2B ning täiendav joonis 1 ja 2, vastavalt). Lisaks ei kutsunud ramipriiliga ravi db/db kopsus esile muutusi ACE2 geeni ekspressioonis ja aktiivsuses (joonised 1B ja E, joonis 2B ning lisajoonised 1 ja 2).
3.4 ACE2 väheneb d/d südames ja ramipriil normaliseerib ACE2 tasetAnalüüsisime ka ACE2 südames Südame kudedes vähenes ACE2 märkimisväärselt db/db vsthe db/m, mis mõjutas mõlemat, mRNA taset (1.01±{6}}.12ws {{8). }}.84±0.16,p=0.05)(joonis 1C)ja ACE2 aktiivsus (100 protsenti ±23.1 protsenti on 83 protsenti ±16.8 protsenti ,p=0.02) (臣g.1F） .Membraaniga rikastatud ekstraktides vähenes ACE2 aktiivsus oluliselt ka db/db võrreldes db/m (joonis 2O. Ramipriiliga ravi taastas märkimisväärselt ACE2 aktiivsuse vaadeldud db/m kontrollhiirtel (83 protsenti ±16,8 protsenti vs 98,2). protsenti ±15 protsenti ,p=0.04) (joonis 1E). Siiski ei suutnud ramipriil muuta ACE2 geeni ekspressiooni südames (joonis IC). Lisaks hindasime ACE2 jaotumist südamekoes, kus ACE2 värvumisel ilmnes hajus jaotus koos suurenenud ACE2 värvumisega mõnes piirkonnas. Märkasime, et värvumise intensiivsus oli db/db võrra väiksem kui db/m. Ramipriil näis värvimise intensiivsuse taastavat (Hig 3).
3.5 Seerumi ACE2 aktiivsus suureneb db/db ja ramipriil ei muutnud sedaLõpuks mõõtsime ramipriiliga töödeldud db/m, db/db ja db/db seerumiproovides ACE2 aktiivsust. Seerumi ACE2 aktiivsus suurenes märkimisväärselt db/db-s võrreldes db/m-ga (99,9 protsenti ± 29,3 protsenti oli 146 protsenti ±57,2 protsenti, p= 0.03) ja ramipriil seda mõju ei leevendanud (146 protsenti). ±57,2 protsenti vs 128 protsenti ±55,7 protsenti ,p= 0.5)(joonis 4).
4. Arutelu
Praegune SARS-CoV-2 põhjustatud pandeemia on tekitanud poleemika seoses RAAS-i blokaatorite kasutamisega COVID-19 patsientidel. Vaatamata ACEi või ARB-de kasutamise tõestatud eelistele kardiovaskulaarsete patsientide puhul (Fegan et al., 2000; Romero et al., 2015), on oletatud, et need ravimid võivad suurendada SARS-CoV retseptori ACE2 ekspressiooni. 7}} ning seega suurendada COVID-i riski ja raskusastet-19 (Aleksova jt, 2020; Sparls et al, 2020; Wang jt, 2020).
Käesoleva uuringu eesmärk oli heita valgust sellele vaidlusele ja selleks analüüsisime ACE2-d neeru-, kopsu-, südame- ja seerumiproovides diabeetilise hiire mudeli (db/db), mida raviti ramipriiliga 8 nädalat. RAAS-i blokaadi mõju määramiseks kasutasime diabeedimudelit, kuna diabeetiline miljöö on COVID-19 patsientide halva prognoosi riskitegur (Fadini et al, 2020; Williamson et al, 2020). Leidsime db/db hiirtel membraaniekstraktides neerude ACE2 geeni ekspressiooni ja aktiivsuse suurenemise (vastavalt joonised 1A ja 2A). Varasemad uuringud on näidanud ka tubulaarset neerude ACE2 suurenemist db/db diabeetilistel hiirtel (Wysocki et al, 2006; Yeet al, 2004, 2006) ja ka teistes diabeetilistes hiirtes (Riera et al, 2016; Wysocki et al, 2006). ). Ramipriil suutis tagasi pöörata ACE2 tõusu geeniekspressiooni tasemel, mis viitab sellele, et selle manustamine kaitses diabeedi kahjuliku mõju eest neerudes. Meie leiud neerude kohta on vastuolus Wysocki ja kaastöötajate (Wysocldi et al.2020) hiljutises aruandes avaldatud tulemustega, kuna nad kirjeldasid RAAS-i blokaadi C57BLKS/J hiirtel, mis soodustab ACE2 ekspressiooni vähenemist koos valgu internaliseerimisega. Meie uuringus, milles kasutati db/db hiirte mudelit, me ei leidnud, et ramipriil vähendas ACE2 aktiivsust neerudes (joonised 1D ja 2A) ja me ei täheldanud valgu internaliseerumist (joonis 3). Sellegipoolest leidsime, et ravi ramipriiliga kutsus esile ACE2 geeniekspressiooni vähenemise db / db (joonis 1A). Geeni- ja valguekspressioon ei pruugi olla korrelatsioonis valgusünteesi ja lagunemise erinevate ajastuste tõttu, kuid ACE2 geeniekspressiooni (Fg.1A) tulemused viitavad sellele, et RAAS-i blokaad soodustaks ACE2 vähenemist neerudes, nagu soovitasid Wysocki ja kaastöötajad. Wysocldi et al.2020). Erinevalt Wysocki ja kolside uuringust (Wysocldi jt 2020) jäljendasime meie lähenemisviisi diabeediga patsiente, kes saavad diabeetilise nefropaatia progresseerumise edasilükkamiseks tavaliselt RAAS-i blokaatoreid (Garcia-Carro et al., 2019). Inline, hiljutine Batchu et al. on selgelt näidanud kaasuvate diabeedihiirte neerudes ja kopsudes (vananemine, kõrge rasvasisaldusega dieet ja streptozototsiinist põhjustatud diabeet), et ACE2 on ülesreguleeritud. aga RAAS-i blokaad ei suutnud seda muuta (Batchu et al.2020). Seega. vähemalt neerude jaoks. meie tulemused ei toeta ideed, et RAAS-i blokaad soodustaks ACE2 üleekspressiooni. Inimestel kirjeldati kahes sõltumatus uuringus, et diabeetikutel vähenes tubulaarne ACE2 geeni ja valgu ekspressioon
nefropaatia võrreldes tervete inimestega (Mizuiri et al., 2008; Reich jt, 2008), kuigi teine autor ei suutnud leida mingeid erinevusi (Lelyet al. 2004). Seoses RAAS-i blokaadi mõjuga inimestele on tõendeid selle kohta, et see mõjutab ACE2 ekspressiooni neerudes (Lely et al, 2004; Reich et al, 2008).
Samuti analüüsisime ACE2 kopsu- ja südamekudedes, kus ACE2 olemasolu on palju madalam kui neerudes (täiendav joonis S1 ja S2). Seoses kopsudega saavutasime ACE2 geeniekspressioonis suure indiviididevahelise varieeruvuse (joonis 1), mida võib osaliselt seletada asjaoluga, et ACE2 ekspressioon kopsus on väga madal ja piirdub 2. tüüpi pneumotsüütidega (Ziegler et al, 2020). Saime usaldusväärsed tulemused, kui ACE2 hinnati ensüümi aktiivsuse mõõtmisega. Kopsu ACE2 aktiivsus oli kontrollrühma db/m ja diabeetilise db/db vahel sarnane ning ramipriiliga ravitud db/db-s ei täheldatud erinevusi võrreldes kandjaga db/db (Fgs.IE ja 2B). Kuigi ACE2-d kopsudes ei ole loommudelites laialdaselt uuritud, on teatatud, et NOD-hiirtel ja nende mittediabeetilistel pesakonnakaaslastel on sarnane ACE2 aktiivsus kopsudes (Roca-Ho et al.2017). Vastupidiselt näitasid streptozototsiini ja kõrge rasvasisaldusega dieedist põhjustatud diabeetiliste hiirte kopsude ACE2 aktiivsust võrreldes mittediabeetiliste hiirtega (Batchu et al., 2020). Seoses RAAS-i blokaadi mõjuga kopsu ACE2-le on meie tulemused kooskõlas Wysockiet al ja Batchu jt aruannetega. kuna nad ei leidnud erinevusi, sealhulgas ACE2 aktiivsust, kui hiiri raviti ARB-de või ACEi-ga (Batchu jt 2020; Wysocldi jt 2020). 1051 patsiendiga läbi viidud uuring näitas, et kopsude ACE2 geeni ekspressioon oli allareguleeritud pikaajaline ACEi-ravi, samas kui ARB-d seda ei muutnud (Milne et al, 2020), kuigi andmed ACE2 valgu taseme või aktiivsuse kohta ei olnud kättesaadavad.
Südame ACE2 geeni ekspressioon ja aktiivsus vähenesid db/db mikrofoniga võrreldes märkimisväärselt db/m-ga (vastavalt joonis 1 ja F). Sellisel juhul suurendas ravi ramipriiliga ACE2 aktiivsust (joonis 1F. Need tulemused viitavad et db/db mudelis soodustab diabeetiline profiil südame ACE2 vähenemist, mis taastub RAAS-i blokaadi korral.Db/db diabeetilistel hiirtel näib südame ACE2 vähenemine aja jooksul, nagu seda teevad nooremad loomad (8 nädala vanused). ei näita ACE2 aktiivsuse vähenemist südames (Ye et al, 2004). Südame ACE2 on vähenenud ka streptotsototsiinist indutseeritud diabeetilistel rottidel (Qiao jt, 2015; Shin et al. 2017), kuigi teistel diabeetiliste hiirte mudelitel on südame ACE2 tõus võrreldes nende mittediabeetiliste pesakonnakaaslastega (Patel et al., 2012; Roca-Ho et al., 2017). Sellegipoolest näitavad in vitro katsed, et glükoos võib südame-veresoonkonna silelihasrakkudes ACE2 otseselt alla reguleerida (Lavrentjev ja Malik). , 2009). ACE2 modulatsioon südames ja RAAS-bloki mõju Kade kasutamist on peamiselt uuritud müokardiinfarkti (MI) puhul nii rotimudelitel kui ka inimestel. MI roti mudelis näitasid Ocaranza ja kaastöötajad, et südame ACE2 aktiivsus vähenes MI ja RAAS-i blokaadi korral.
enalapriiliga muutis selle vastupidiseks (Ocaranz et al, 2006), sarnaselt meie uuringus juhtunuga. Kuid teistes sarnastes MI rotimudelites tehtud uuringutes ei jõutud samadele järeldustele (Burrell jt 2005; Ishiyama jt, 2004). Inimestel näib ACE2 südames pärast MI-d olevat suurenenud (Burrell et al., 2005) ning idiopaatilise ja isheemilise kardiomüopaatia korral (Goulter et al, 2004). Meile teadaolevalt ei ole RAAS-i blokaadi mõju südame ACE2 ekspressioonile inimestel uuritud. Lõpuks analüüsisime ACE2 aktiivsust seerumis. ACE2 võib leida nii koerakkude rakumembraanides kui ka lahustuv (sACE2); mis pärineb membraaniga seotud ACE2 eraldamisest ADAM metallopeptidaasi domeeni 17 (ADAM17) poolt (Lambert et al, 2005). ACE2 toimib SARS-CoV-2 retseptorina ainult elundi tasandil, kuid on oletatud, et sACE2 võib peibutisena toimides vähendada viiruse nakatumisvõimet (Balle et al, 2020; Monteil et al, 2020; Wysocl et al, 2021), kuigi madal sACE2 tase veres seda kasulikku mõju vaevalt avaldaks. Sellegipoolest on huvitav teada, kas seerumi ACE2 taset moduleeritakse (või mitte) diabeedi korral või RAAS-i blokaatorid, kuna see võib olla signaal koe ACE2 variatsioonidest. Selles mõttes on oletatud, et ADAM17 võib mängida olulist vastupanuvõimet. konkureerimine ACE2 lõhustamise pärast seriinproteaasi transmembraanse seriinproteaasi 2-ga (TMPRSS2), mis on SARS-CoV-2 internaliseerimise põhiline proteaas (Palau et al. 2020). Leidsime, et seerumi ACE2 suurenes db/db võrreldes db/m-ga ja ramipriil seda toimet ei pöördunud (Fg,.3). Teised uuringud on samuti kirjeldanud vere ACE2 tõusu diabeetiliste hiirte mudelitel (Riera et al. 2016; Roca-Hoet al, 2017;
Wysocki et al., 2013) ja I tüüpi diabeediga patsientidel (Soro-Paavonen jt 2012), kuigi RAAS-i blokaadi mõju ei ole laialdaselt uuritud. Sellega seoses ei ole tõendid inimestel homogeensed. Soro-Paavoneni ja kols. (Soro-Paavonen et al, 2012) tõstis ACEi-ravi ACE2 taset veres nii mees- kui naispatsientidel ja ARB-ravi ainult naistel. Seevastu hiljutises eeltrükis täheldati ARB-ravi korral vere ACE2 mõningast langust, kuid ACEi ei põhjustanud muutusi (Emilsson et al, 2020).
CISTANCHE PARANDAB NEERU/NEERU VALU
Eespool nimetatud lahknevuste tõttu seoses ACE2 modulatsiooniga erinevate diabeetiliste loommudelite ja inimeste puhul on raske saada lõplikku vastust küsimusele: "Kas RAAS-i blokaad kutsub esile ACE2 üleekspressiooni?". Üldises ülevaates, võttes arvesse meie andmeid ja teiste autorite tõendeid, jääb mulje, et diabeetiline kontekst muudab enamikul juhtudel ACE2 ekspressiooni nii neerudes kui ka südames (olenevalt mudelist või liigist reguleerib alla või üles ) ja et RAAS-i blokaad: (1) vähendab või ei muuda neerude ACE2-d (nii eksperimentaalsetes mudelites kui ka ebainimlikus), (2) ei muuda kopsude ACE2-d (kuigi siin on vaja rohkem tõendeid), (3) soodustab ACE2 ekspressiooni südamel (enamikus eksperimentaalsetes mudelites) ja (4) on erinev mõju vere ACE2 tasemele (olenevalt kohordist ja RAAS-blokaatori tüübist). Sellest tulenevalt ei pea paika pandud eeldus "RAAS-i blokaad kutsub esile ACE2 üleekspressiooni ja järelikult suurendab SARS-CoV{15}} nakkuse riski" ei kehti südame, neerude ja, mis veelgi olulisem, mitte kopsude puhul. . Kuigi see eeldus on vaieldav, kuna see annab ainult lihtsustatud nägemuse ACE2 ekspressiooni reguleerimisest ega võta arvesse, et ACE2 on enamikus kontekstides kaitsev (Batlle jt, 2012; Oudit jt, 2010; Zhong et al. , 2010). On näidatud, et ACE2 on kasulik H7N9 gripiviiruse (Yang et al, 2015) või LPS-i (Ye ja Liu, 2020) põhjustatud kopsukahjustuse eksperimentaalsetes mudelites. Kopsukahjustusega SARS-i hiiremudelis -CoV-infektsioon vähendas kopsude ACE2 ekspressiooni, kuid ravi losartaaniga leevendas kopsukahjustust ja ACE2 ekspressioon suurenes samal ajal (Kuba et al, 2005), mis viitab sellele, et ACE2 oli viirusinfektsiooni lahendamisel kasulik. Lisaks võib ACE2 ekspressiooni reguleerida ka põletikuline kontekst, nagu tsütokiinitorm, mis juhtub Corvid-19 patsientide alarühmas (Mehta et al, 2020), kuigi on ebaselge, mis suunas (de Lang et al., 2006) Wet al.2020).Igal juhul võivad nii ACE2 üles- kui ka allareguleerimine olla SARS-CoV-2 nakkuse ajal potentsiaalselt kahjulikud, mis viitab sellele, et ACE2 tase peaks olema tasakaaluvahemikus (South et al. 2020).
Kokkuvõtteks demonstreerime siin diabeetiliste hiirte mudelis, et ACE inhibeerimine põhjustab ainult ACE2 ülesreguleerimist diabeetilises südames, kus ACE2 on diabeedi tõttu vähenenud. Seda ei juhtu neerudes ega kopsudes, mis kinnitab ideed, et enamikus kudedes ei suurenda RAAS-i blokaad ACE2 ekspressioonitaset. Isegi südames saadud tulemuste põhjal on vaieldav, kas ravi ARB-ga või ACEi-ga suurendab reaalset COVID-19-nakkuse riski ja halvendab selle prognoosi. RAAS-i blokaadil on selged eelised südame-veresoonkonnale (Fegan et al, 2000; Romero jt, 2015), samas kui on ebatõenäoline, et ACE2 madal tase on COVID{7}} resolutsiooni jaoks kasulik.
